WO1992005433A1 - Continuous positive charge capillary columns used in capillary electrophoresis - Google Patents

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WO1992005433A1
WO1992005433A1 PCT/FR1991/000734 FR9100734W WO9205433A1 WO 1992005433 A1 WO1992005433 A1 WO 1992005433A1 FR 9100734 W FR9100734 W FR 9100734W WO 9205433 A1 WO9205433 A1 WO 9205433A1
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capillary column
positive charge
polymeric
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quaternary ammonium
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PCT/FR1991/000734
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Robert Kerr
Louis Jung
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Robert Kerr
Louis Jung
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    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416—Systems
    • G01N27/447—Systems using electrophoresis
    • G01N27/44704—Details; Accessories
    • G01N27/44752—Controlling the zeta potential, e.g. by wall coatings

Definitions

  • the subject of the present invention is the preparation and / or the use of capillary columns having a permanent positive charge used in capillary electrophoresis making it possible to separate negatively charged, positively charged compounds or neutral compounds for analytical purposes or for the preparation of compounds pure.
  • This permanent positive charge is fixed inside the capillary column by a covalent bond.
  • This covalent bond results from the combination between the wall of the capillary column and a polymeric or non-polymeric compound of bifunctional structure, one of the functions having a permanent positive charge of quaternary ammonium nature, the other function being a very reactive group. reacting with the hydroxyls of the column or with the inner wall of the chemically modified capillary column.
  • the acrylate-based columns lead to ionic bonds with the cations and strong adsorption.
  • the capillary columns of this invention are of two types; type 1 has a siloxane - Si-O-Si- covalent bond, type 2 has a silicon-carbon covalent bond --Si-
  • the active group at the surface is a quaternary tetraalkyl ammonium salt.
  • the advantages of type 1 and type 2 columns are: relatively easy column handling; the surface created inside the column has great resistance to caustic solutions as well as to mineral acids. No adsorption of any chemical is observed. The electroosmosis flow rate is very high depending on the conditions, and the analysis time is very short.
  • the object of the invention is to have several types of capillary columns usable in capillary electrophoresis whose structure is identical for all: these capillary columns having a permanent positive charge fixed to the interior surface of the capillary column on a chain organic linked by a covalent bond.
  • the capillary column is made of glass or quartz or fused silica or a polymer derivative or similar materials; it is used in capillary electrophoresis.
  • This capillary column has a permanent positive charge, in the form of quaternary ammonium, fixed to the interior surface by a covalent bond, resulting from the combination between the wall of the capillary column and a polymeric or non-polymeric compound of bifunctional structure, l one of the functions having a permanent positive charge of quaternary ammonium nature, the other function being intended to form the covalent bond with the wall of the capillary column, the covalent bond can be in the form of siloxane -Si-O-Si- resulting from the combination d '' a group consisting of a silicon atom and one, two or three halogen substituents, such as chlorine or bromine, or a group consisting of a silicon atom and one, two or three alkoxy or acyloxy substituents reacting with the hydroxyl groups
  • the covalent bond can also be in the form of a silicon-carbon bond -Si- - resulting from the combination at the level of the wall of the capillary column of a vinyl group and of silicon hydride -SiH groups previously formed by the transformation of silanol -SiOH into silicon halides -SiX, X being a halide of the chlorine or bromine type followed by a reduction in silicon hydride -SiH.
  • the capillary column having a permanent positive charge may be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more alkoxysilanes, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation in the form of a covalent bond.
  • the capillary column having a permanent positive charge may also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more vinyl groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation in the form of a covalent bond.
  • the capillary column can also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more alkoxysilanes, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation under form of covalent bond, the amines being transformed into quaternary ammonium by the action of alkyl halides either before fixation on the inner wall of the capillary column or in situ after fixation.
  • a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more alkoxysilanes
  • the permanent positive charge may also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more vinyl groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond, the amines being transformed into quaternary ammonium by action of alkyl halides either before attachment to the inner wall of the capillary column or in situ after attachment.
  • a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more vinyl groups
  • the permanent positive charge may also be due to the combination of a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more alkoxysilane groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation in the form of covalent bond, the nitrile groups being transformed into quaternary ammonium by reduction of the nitrile into primary amine, itself transformed into quaternary ammonium by reaction of alkyl halides either before the fixation on the interior wall of the capillary column or in situ after fixation.
  • a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more alkoxysilane groups
  • the capillary column exhibiting this permanent positive charge may also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more halosilane groups, for which the halogen atom may be chlorine or bromine reacting with the interior wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond, the nitrile groups being transformed into quaternary ammonium by reduction of the nitrile into primary amine, itself transformed into quaternary ammonium by reaction of halides alkyl either before attachment to the inner wall of the capillary column or in situ after attachment.
  • the halogen atom may be chlorine or bromine reacting with the interior wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond
  • the nitrile groups being transformed into quaternary ammonium by reduction of the nitrile into primary amine, itself transformed into quaternary ammonium by reaction of halides alkyl
  • the permanent positive charge may also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more epoxy groups and one or more alkoxysilane groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation in the form of covalent bond, the epoxy groups being transformed into quaternary ammonium by reaction at first with a primary amine or a secondary amine leading to an amino alcohol transformed into quaternary ammonium by reaction of alkyl halides either before fixing on the wall inside of the capillary column is in situ after fixation.
  • the bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, n-octadecyldimethyl- [3- (tri-methoxysilyl) -propyl] ammonium chloride, n-tetradecyldimethyl chloride (3 -trimethoxy silylpropyl) ammonium, N- (trimethoxysilyloctyl) trimethyl- ammonium chloride, N- (3 -trimethoxypropyl-N-methyl-N, N-diallylammonium chloride, N-trimethoxysilylpropyl-N, N, N-trimethylammonium chloride, N-trimethoxysilylpropyl-tri-n-butyl-ammonium chloride, the preferred compound being N- (trimethoxysilyloctyl) t ⁇ imethylammonium.
  • the bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more vinyl groups is selected from the following compounds, hexallyl-ethylenediammonium iodide, octallyl-diethylene-triammonium iodide, decallyl-triethylene iodide - tetrammonium, dodecallyl-tetraethylenepentammonium iodide, tetradecallyl-pentaethylenehexammonium iodide, the preferred compound being tetradecaallyl-pentaethylenehexammonium hexabromide
  • the bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, 4-Aminobutyldimethylmethoxysilane, 4-Aminobutyltriethoxysilane, (aminoethylaminoethyl) phenethyltrimethoxysilane, N-2-aminoethyl) -3-aminopropyl N- (2-aminoethyl-3-aminopropyl) -trimethoxysilane, N- (2-aminoethyl-3-aminopropyl) -tris- (2-ethylhexoxy) silane,
  • the bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more vinyls is selected from the following compounds, N-allyl-ethylenediamine, N, N-diallyl-ethylenediamine, N, N, N-triallyl-ethylenediamine, N , N, N, N tetrallylethylenediamine, N-allyldiethylenetriamine, N, N-diallyldiethylenetriamine, N, N, N-triallyldiethylenetriamine, N, N, N, N-tetrallyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N-pental lyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N , N-hexallyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N, N-hexallyl-pentaethylenehexamine, the preferred compound being N, N, N, N, N, N-hexallylpentaethylenehexamine.
  • the bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, 3- (cyanoethoxy) -3, 3-dimethyl- 1-propenyltrimethoxysilane, 2-cyanoethyltriethoxysilane, 2-cyanoethyltrimethoxysilane, (cyanomethylphenyl) trimethoxysilane, 3-cyanopropyldimethylmethoxylsilane,
  • the bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more halosilanes is selected from the following compounds, (3-cyanobutyl) trichlorosilane, 2-cyanoethylmethyldichlorosilane, 2-cyanoethyltrichlorosilane, 3-cyanopropyldimethylchlorosilane,
  • the bifunctional substance comprising one or more epoxy groups and one or more alkoxysilane groups is selected from the following compounds, (3-glycidoxypropyl) bis (trimethylsiloxy) methylsilane, 3-glycidoxypropyldimethylethoxysilane, (3-glycidoxypropyl) methyldiethoxysilane, 3-glycidoxyisylane, 3-glycidoxypropylene -glycidoxypropyl) trimethoxysilane, the preferred compound being 3-glycidoxypropyldimethylethoxysilane.
  • Method B involving a bifunctional substance comprising an amines-alkoxysilanes group.
  • Additional treatment with an aqueous 0.1M camphosulfonic acid solution can be carried out in order to obtain a counterion. Thanks to this preparation of the column, several hundred electrophoretic analyzes were carried out.
  • Additional treatment with an aqueous 0.1 M camphosulfonic acid solution can be carried out in order to obtain a counterion. Thanks to this preparation, several hundred electrophoretic analyzes can be carried out.
  • Figure 4 Mount the cassette containing the capillary column of untreated fused silica on the capillary electrophoresis device. Connect the device to ensure rinsing of the column with 0.1M hydrochloric acid. Rinsing is ensured for 15 minutes. Rinse again with distilled water for 10 minutes and then with 0.1M sodium hydroxide for 10 minutes. Then rinse for 10 minutes with distilled water. Pass a 25% (v / v) aqueous solution of 3-cyanopropyldimethylmethoxysilane through the column. Rinse again with distilled water.
  • Additional treatment with an aqueous 0.1M camphosulfonic acid solution can be carried out in order to obtain a counterion. Thanks to this preparation, several hundred electrophoretic analyzes can be carried out.
  • FIG. 6 A separation of the various acid substances of multiple charges produced with one of the columns treated is presented in FIG. 6.
  • the separated substances are shown in Figure 6. It should be noted that all of these compounds cannot in any case be separated simultaneously with an otherwise treated or untreated column. Above all, the set of acids with multiple charges such as sulfo-5-salicylic acid, trimesic acid, phthalic acid, isophthalic acid, 5-hydroxy isophthalic acid, and amino acid. 5 isophthalic cannot be separated from the other acids, which have only one group loaded during the same test, when using another type of column.
  • Figure 1 Method A involving a bifunctional substance comprising a quaternary ammonium-alkoxysilane group
  • Figure 2 Method B involving a bifunctional substance comprising an amines-alkoxysilane group

Abstract

The inner walls of capillary tubes being fine and of small diameter are provided with a continuous positively charged coating which is used in capillary electrophoresis and is prepared by chemical reaction between the capillary tube inner surface and a bifunctional substance. The first chemical grouping of a bifunctional substance is capable of forming a covalent bond with the capillary tube inner wall surface; the second grouping contains one or more stable, continuous positive charges, possibly in the form of quaternary ammonium. The stable, continuous, positive charge in the capillary tube inner surface coating has a twofold effect: it reverses the direction of the electroosmosis flow while at that same time increasing its value relative to non-treated capillary tubes or to negatively charged or uncharged coatings. The presence of this coating serves to separate several chemical substances at the same time which would not be possible otherwise. It also substantially reduces the adsorption of substances on the capillary tube inner walls using a mecanism different to other types of coatings which improves separation characteristics.

Description

Colonnes capillaires présentant une charge positive permanente utilisées en electrophorèse capillaire.  Capillary columns with a permanent positive charge used in capillary electrophoresis.
La présente invention a pour objet la préparation et/ou l'emploi de colonnes capillaires présentant une charge positive permanente utilisées en electrophorèse capillaire permettant de séparer des composés chargés négativement, chargés positivement ou des composés neutres dans un but analytique ou pour la préparation de composés purs. Cette charge positive permanente est fixée à l'intérieur de la colonne capillaire par une liaison covalente. Cette liaison covalente résulte de la combinaison entre la paroi de la colonne capillaire et un composé polymérique ou non-polymérique de structure bifonctionnelle, l'une des fonction présentant une charge positive permanente de nature ammonium quaternaire, l'autre fonction étant un groupement très réactif réagissant avec les hydroxyles de la colonne ou avec la paroi intérieure de la colonne capillaire modifiée chimiquement. The subject of the present invention is the preparation and / or the use of capillary columns having a permanent positive charge used in capillary electrophoresis making it possible to separate negatively charged, positively charged compounds or neutral compounds for analytical purposes or for the preparation of compounds pure. This permanent positive charge is fixed inside the capillary column by a covalent bond. This covalent bond results from the combination between the wall of the capillary column and a polymeric or non-polymeric compound of bifunctional structure, one of the functions having a permanent positive charge of quaternary ammonium nature, the other function being a very reactive group. reacting with the hydroxyls of the column or with the inner wall of the chemically modified capillary column.
Actuellement les colonnes capillaires utilisées dans l'électrophorèse capillaire sont de plusieur types. Les colonnes en Silice fondue non traités présentant des groupements actifs au niveau de surface du type silanols (-SiOH), silyl éthers (-Si-O-Si-). Les désavantages sont nombreux. Des nombreuses classes chimiques ne peuvent pas être séparées convenablement. L'analyse peut être réalisée seulement si le composé à analyser est neutre ou possède une charge négative faible. Les cations principalement les aminés sont adsorbés à la surface et ne peuvent être analysés, uniquement dans des conditions spéciales. Le débit d'élεctroosmose est trop élevé pour la réalisation de focalisation isoélectrique. Le débit d'électroosmose est trop faible et ne permet pas l'analyse des anions possédant des charges multiples. Beaucoup d'interactions entre les parois de la colonne et les électrolytes sont observées. Currently, the capillary columns used in capillary electrophoresis are of several types. Untreated fused silica columns having active groups at the surface level of the silanol (-SiOH), silyl ethers (-Si-O-Si-) type. There are many disadvantages. Many chemical classes cannot be properly separated. The analysis can only be carried out if the compound to be analyzed is neutral or has a low negative charge. The cations, mainly the amines, are adsorbed on the surface and cannot be analyzed, only under special conditions. The flow elεctroosmose is too high for the realization of isoelectric focusing. The electroosmosis flow is too low and does not allow the analysis of anions with multiple charges. Many interactions between the column walls and the electrolytes are observed.
Les colonnes traitées du type acrylamides présentent les desavantages suivants : la détérioration de la couche acrylamide est possible en dehors de la gamme de pH de 2 à 7,5. Les acrylamides sont instables en présence d'une tension très élevée. La forte inhibition de débit électroosmose entraine un temps d'analyse très long de l'ordre de 30 à 90 minutes.  Columns treated with the acrylamide type have the following disadvantages: deterioration of the acrylamide layer is possible outside the pH range of 2 to 7.5. Acrylamides are unstable in the presence of very high tension. The strong inhibition of electroosmosis flow results in a very long analysis time of the order of 30 to 90 minutes.
Les colonnes à base d'acrylates conduisent à des liaisons ioniques avec les cations et une forte adsorption.  The acrylate-based columns lead to ionic bonds with the cations and strong adsorption.
Les colonnes à base de poly(éthylènenéimine) conduisent également à de fortes adsoprtions.  Columns based on poly (ethyleneeneimine) also lead to high adsorption.
Les colonnes capillaires de cette invention sont de deux types ; le type 1 présente une liaison covalente siloxane - Si-O-Si-, le type 2 présente une liaison covalente silicium-carbone -Si-
Figure imgf000004_0001
The capillary columns of this invention are of two types; type 1 has a siloxane - Si-O-Si- covalent bond, type 2 has a silicon-carbon covalent bond --Si-
Figure imgf000004_0001
Le groupement actif au niveau de la surface est un sel de tétraalkyl ammonium quaternaire. Les avantages des colonnes de type 1 et de type 2 sont : un traitement des colonnes relativement facile à réaliser ; la surface créée à l'intérieur de la colonne possède une grande résistance aux solutions caustiques aussi bien qu'aux acides minéraux. Aucune adsorption de n'importe quelle substance chimique n'est observée. Le débit de l'électroosmose très élevé suivant les conditions, et le temps d'analyse est très court.  The active group at the surface is a quaternary tetraalkyl ammonium salt. The advantages of type 1 and type 2 columns are: relatively easy column handling; the surface created inside the column has great resistance to caustic solutions as well as to mineral acids. No adsorption of any chemical is observed. The electroosmosis flow rate is very high depending on the conditions, and the analysis time is very short.
Toute substance chimique et quelque soit la nature de la charge peut être analysée : les anions à charges multiples, à charge fractionelle peuvent être analysés. Les avantages des colonnes du type 2 sont identiques aux précédentes.  Any chemical substance and whatever the nature of the charge can be analyzed: anions with multiple charges, with fractional charge can be analyzed. The advantages of type 2 columns are identical to the previous ones.
De ce fait le but de l'invention est de disposer de plusieurs types de colonnes capillaires utilisables en electrophorèse capillaire dont la structure est identique pour toutes : ces colonnes capillaires présentant une charge positive permanente fixée à la surface intérieure de la colonne capillaire sur une chaine organique liée par une liaison covalente.  Therefore the object of the invention is to have several types of capillary columns usable in capillary electrophoresis whose structure is identical for all: these capillary columns having a permanent positive charge fixed to the interior surface of the capillary column on a chain organic linked by a covalent bond.
La colonne capillaire est en verre ou en quartz ou en silice fondue ou en dérivé polymérique ou en matériaux similaires ; elle est utilisée en electrophorèse capillaire. Cette colonne capillaire présente une charge positive permanente, sous forme d'ammonium quaternaire, fixée à la surface intérieure par une liaison covalente, résultant de la combinaison entre la paroi de la colonne capillaire et un composé polymérique ou non-polymérique de structure bifonctionnelle, l'une des fonctions présentant une charge positive permanente de nature ammonium quaternaire, l'autre fonction étant destinée à former la liaison covalente avec la paroi de la colonne capillaire, la liaison covalente peut être sous forme de siloxane -Si-O-Si- résultant de la combinaison d'un groupement constituée d'un atome de silicium et d'un, de deux ou de trois substituants halogènes, tel le chlore ou le brome, soit d'un groupement constitué d'un atome de silicium et d'un, de deux ou de trois substituants alkoxy ou acyloxy réagissant avec les groupements hydroxyles de la surface intérieure du capillaire. La liaison covalente peut aussi être sous forme de liaison silicium-carbone -Si-
Figure imgf000005_0001
- résultant de la combinaison au niveau de la paroi de la colonne capillaire d'un groupement vinylique et de groupements d'hydrure de silicium -SiH préalablement formés par la transformation de silanol -SiOH en halogénures de silicium -SiX, X étant un halogénure du type chlore ou brome suivies d'une réduction en hydrure de silicium -SiH. The capillary column is made of glass or quartz or fused silica or a polymer derivative or similar materials; it is used in capillary electrophoresis. This capillary column has a permanent positive charge, in the form of quaternary ammonium, fixed to the interior surface by a covalent bond, resulting from the combination between the wall of the capillary column and a polymeric or non-polymeric compound of bifunctional structure, l one of the functions having a permanent positive charge of quaternary ammonium nature, the other function being intended to form the covalent bond with the wall of the capillary column, the covalent bond can be in the form of siloxane -Si-O-Si- resulting from the combination d '' a group consisting of a silicon atom and one, two or three halogen substituents, such as chlorine or bromine, or a group consisting of a silicon atom and one, two or three alkoxy or acyloxy substituents reacting with the hydroxyl groups of the interior surface of the capillary. The covalent bond can also be in the form of a silicon-carbon bond -Si-
Figure imgf000005_0001
- resulting from the combination at the level of the wall of the capillary column of a vinyl group and of silicon hydride -SiH groups previously formed by the transformation of silanol -SiOH into silicon halides -SiX, X being a halide of the chlorine or bromine type followed by a reduction in silicon hydride -SiH.
La colonne capillaire présentant une charge positive permanente peut être due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs sels d'ammonium quaternaire et un ou plusieurs alkoxysilanes, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente.  The capillary column having a permanent positive charge may be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more alkoxysilanes, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation in the form of a covalent bond.
La colonne capillaire présentant une charge positive permanente peut aussi être due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs sels d'ammonium quaternaire et un ou plusieurs groupes vinyliques, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente.  The capillary column having a permanent positive charge may also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more vinyl groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation in the form of a covalent bond.
La colonne capillaire peut aussi être due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs aminés primaires, secondaires ou tertiaires et un ou plusieurs alkoxysilanes, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les aminés étant transformées en ammonium quaternaire par action d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation.  The capillary column can also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more alkoxysilanes, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation under form of covalent bond, the amines being transformed into quaternary ammonium by the action of alkyl halides either before fixation on the inner wall of the capillary column or in situ after fixation.
La charge positive permanente peut aussi être due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs aminés primaires, secondaires ou tertiaires et un ou plusieurs groupes vinyliques, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les aminés étant transformées en ammonium quaternaire par action d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation. The permanent positive charge may also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more vinyl groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond, the amines being transformed into quaternary ammonium by action of alkyl halides either before attachment to the inner wall of the capillary column or in situ after attachment.
La charge positive permanente peut également être due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs groupes nitriles et un ou plusieurs groupes alkoxysilanes, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les groupes nitriles étant transformés en ammonium quaternaire par réduction du nitrile en aminé primaire, elle-même transformée en ammonium quaternaire par réaction d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation.  The permanent positive charge may also be due to the combination of a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more alkoxysilane groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation in the form of covalent bond, the nitrile groups being transformed into quaternary ammonium by reduction of the nitrile into primary amine, itself transformed into quaternary ammonium by reaction of alkyl halides either before the fixation on the interior wall of the capillary column or in situ after fixation.
La colonne capillaire présentant cette charge positive permanente peut encore être due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs groupes nitriles et un ou plusieurs groupes halosilanes, pour lequel l'atome d'halogène peut être le chlore ou le brome réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les groupes nitriles étant transformés en ammonium quaternaire par réduction du nitrile en aminé primaire, elle-même transformée en ammonium quaternaire par réaction d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation. The capillary column exhibiting this permanent positive charge may also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more halosilane groups, for which the halogen atom may be chlorine or bromine reacting with the interior wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond, the nitrile groups being transformed into quaternary ammonium by reduction of the nitrile into primary amine, itself transformed into quaternary ammonium by reaction of halides alkyl either before attachment to the inner wall of the capillary column or in situ after attachment.
La charge positive permanente peut encore être due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs groupes époxy et un ou plusieurs groupes alkoxysilanes, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les groupes époxy étant transformés en ammonium quaternaire par réaction dans un premier temps avec une aminé primaire ou une aminé secondaire conduisant à un amino-alcool transformé en ammonium quaternaire par réaction d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation.  The permanent positive charge may also be due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more epoxy groups and one or more alkoxysilane groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to fixation in the form of covalent bond, the epoxy groups being transformed into quaternary ammonium by reaction at first with a primary amine or a secondary amine leading to an amino alcohol transformed into quaternary ammonium by reaction of alkyl halides either before fixing on the wall inside of the capillary column is in situ after fixation.
La substance bifonctionnelle comprenant un ou plusieurs sels d'ammonium quaternaire et un ou plusieurs alkoxysilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, chlorure de n-octadecyldiméthyl-[3-(tri-méthoxysilyl)- propyl]ammonium, chlorure de n-tétradecyldimethyl(3-triméthoxy silylpropyl)ammonium, chlorure de N-(triméthoxysilyloctyl)triméthyl- ammonium , chlorure de N-(3 -triméthoxypropyl-N-méthyl-N , N-diallylammonium, chlorure de N-triméthoxysilylpropyl-N,N, N-triméthylammonium, chlorure de N-triméthoxysilylpropyl-tri-n-butyl- ammonium, le composé préférentiel étant le chlorure de N-(triméthoxysilyloctyl)tτiméthylammonium. The bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, n-octadecyldimethyl- [3- (tri-methoxysilyl) -propyl] ammonium chloride, n-tetradecyldimethyl chloride (3 -trimethoxy silylpropyl) ammonium, N- (trimethoxysilyloctyl) trimethyl- ammonium chloride, N- (3 -trimethoxypropyl-N-methyl-N, N-diallylammonium chloride, N-trimethoxysilylpropyl-N, N, N-trimethylammonium chloride, N-trimethoxysilylpropyl-tri-n-butyl-ammonium chloride, the preferred compound being N- (trimethoxysilyloctyl) tτimethylammonium.
La substance bifonctionnelle comprenant un ou plusieurs sels d'ammonium quaternaire et un ou plusieurs groupes vinyliques est sélectionnée parmi les composés suivants, l'iodure de hexallyl-éthylènediammonium, l'iodure de octallyl-diethylene-triammonium, l'iodure de decallyl-triéthylène- tétrammonium, l'iodure de dodécallyl-tétraéthylènepentammonium, l'iodure de tétradécallyl-pentaéthylènehexammonium, le composé préférentiel étant le hexabromure de tétradecaallyl-pentaéthylènehexammonium  The bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more vinyl groups is selected from the following compounds, hexallyl-ethylenediammonium iodide, octallyl-diethylene-triammonium iodide, decallyl-triethylene iodide - tetrammonium, dodecallyl-tetraethylenepentammonium iodide, tetradecallyl-pentaethylenehexammonium iodide, the preferred compound being tetradecaallyl-pentaethylenehexammonium hexabromide
La substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieures aminés primaires, secondaires ou tertiaires et un ou plusieurs alkoxysilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, 4-Aminobutyldiméthylméthoxysilane,4-Aminobutyltriéthoxysilane, (aminoéthylaminoéthyl) phenethyltriméthoxysilane, N-2-aminoéthyl)-3-aminopropylmé thyldiméthoxysilane,N-(2-aminoethyl-3-aminopropyl)-triméthoxysilane, N-(2-aminoethyl-3-aminopropyl)-tris-(2-éthylhexoxy) silane,  The bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, 4-Aminobutyldimethylmethoxysilane, 4-Aminobutyltriethoxysilane, (aminoethylaminoethyl) phenethyltrimethoxysilane, N-2-aminoethyl) -3-aminopropyl N- (2-aminoethyl-3-aminopropyl) -trimethoxysilane, N- (2-aminoethyl-3-aminopropyl) -tris- (2-ethylhexoxy) silane,
N-(2-aminohexyl-3-aminopropyl) triméthoxysilane, 4-aminophényltrimétho xysilane, 3-(1-aminopropoxy)-3,3-diméthyl-1-propényltriméthoxysilane,3- aminopropyl-tris (methoxyethoxyethoxy) silane, 3-aminopropyl-diméthyleth oxysilane,3-aminopropylméthyldiéthoxysilane, 3-aminopropyltriéthoxysilane,3-aminopropyltriméthoxysilane,3-aminopropyltris (tτiméthylsilyloxy) silane, J-aminoundecyltriméthoxysilane,3-[2-N-benzylaminoethylamino propyl]trimethoxysilane,Bis-(2-hydroxyethyl)-3-aminopropyltriethoxysila ne, Bis[3-(triéthoxysilyl)propyl]amine, Bis[3-(triméthoxysilyl) propyl] éthylenediamine, (cyclohexylaminométhyl) méthyldiéthoxysilane, N- (2-aminohexyl-3-aminopropyl) trimethoxysilane, 4-aminophenyltrimetho xysilane, 3- (1-aminopropoxy) -3,3-dimethyl-1-propenyltrimethoxysilane, 3- aminopropyl-tris (methoxyethoxyethoxy) silane, 3-aminopropyl- dimethyleth oxysilane, 3-aminopropylmethyldiethoxysilane, 3-aminopropyltriethoxysilane, 3-aminopropyltrimethoxysilane, 3-aminopropyltris (tτimethylsilyloxy) silane, J-aminoundecyltrimethoxethyl-3-aminoxylamino-propylaminyl-3-aminoxylamino-3-amino-3-amino-3-amino-3-amino-3-amino-3-amino-3-amino-3] ne, Bis [3- (triethoxysilyl) propyl] amine, Bis [3- (trimethoxysilyl) propyl] ethylenediamine, (cyclohexylaminomethyl) methyldiethoxysilane,
(cyclohexylaminométhyl) diméthyléthoxysilane, (N,N-diéthyl-3-amino- propyl) trimethoxysilane, dimethylméthoxysilylpropyldiéthylènetriamine, diméthylméthoxysilylpropylpentaéthylènehexamine, N-méthylamino- propyltriméthoxysilane, méthyl [2-(3-triméthoxysilylpropylarnino) éthylamino]-3-propionate,N-phénylaminopropyltriméthoxysilane, 3-(N-styryl méthyl-2-aminoéthylamino) propyltriméthoxysilane, N-([3-(triéthoxysilyI) propyl]-2,4-dintrophénylamine, N-[3-(triéthoxysilyl) propyl]-4,5-dihydroimi dazole, triméthoxysilylpropyldiéthylènetriamine, N-(3-triméthoxysilyl propyl) pyrrole, le composé préférentiel étant le diméthylméthoxysilylpro- pylpentaéthylènehéxamine.  (cyclohexylaminomethyl) dimethylethoxysilane, (N, N-diethyl-3-amino-propyl) trimethoxysilane, dimethylmethoxysilylpropyldiethylenetriamine, dimethylmethoxysilylpropylpentaethylenehexamine, N-methylamino-propyltrimethinyl-ethylamino-3-ethoxylamino-propyltrimethoxysilane 3- (N-styryl methyl-2-aminoethylamino) propyltrimethoxysilane, N - ([3- (triethoxysilyI) propyl] -2,4-dintrophenylamine, N- [3- (triethoxysilyl) propyl] -4,5-dihydroimi dazole, trimethoxysilylpropyldiethylenetriamine, N- (3-trimethoxysilyl propyl) pyrrole, the preferred compound being dimethylmethoxysilylpropylpentaethyleneethylene hexamine.
La substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieures aminés primaires, secondaires ou tertiaires et un ou plusieurs vinyliques est sélectionnée parmi les composés suivants, N-allyl-éthylènediamine, N,N-diallyl-éthylènediamine,N,N,N-triallyl-éthylènediamine,N,N,N,N tétrallyléthylènediamine, N-allyldiéthylènetriamine,N,N-diallyldiéthylènetriamine,N,N,N-triallyldiéthylènetriamine, N,N,N,N-tétrallyldiéthylènetriamine, N,N,N,N,N-pental lyldiéthylènetriamine, N,N,N,N,N,N-hexallyldiéthylènetriamine, N,N,N,N,N,N- hexallyl-pentaéthylènehexamine, le composé préférentiel étant le N,N,N,N,N,N-hexallylpentaéthylènehexamine. The bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more vinyls is selected from the following compounds, N-allyl-ethylenediamine, N, N-diallyl-ethylenediamine, N, N, N-triallyl-ethylenediamine, N , N, N, N tetrallylethylenediamine, N-allyldiethylenetriamine, N, N-diallyldiethylenetriamine, N, N, N-triallyldiethylenetriamine, N, N, N, N-tetrallyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N-pental lyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N , N-hexallyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N, N-hexallyl-pentaethylenehexamine, the preferred compound being N, N, N, N, N, N-hexallylpentaethylenehexamine.
La substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieurs groupes nitriles et un ou plusieurs alkoxysilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, 3-(cyanoéthoxy)-3 ,3-dimethyl- 1-propényltriméthoxysilane, 2-cyanoéthyltriéthoxysilane, 2-cyanoéthyltriméthoxysilane, (cyanométhyl- phènethyl) triméthoxysilane, 3-cyanopropyldiméthylméthoxylsilane,  The bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, 3- (cyanoethoxy) -3, 3-dimethyl- 1-propenyltrimethoxysilane, 2-cyanoethyltriethoxysilane, 2-cyanoethyltrimethoxysilane, (cyanomethylphenyl) trimethoxysilane, 3-cyanopropyldimethylmethoxylsilane,
3-cyanopropyltriéthoxysilane le composé préférentiel étant le bromure de 3-cyanopropyltriethoxysilane, the preferred compound being bromide
3-cyanopropyldiméthylméthoxysilane 3-cyanopropyldimethylmethoxysilane
La substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieurs groupes nitriles et un ou plusieurs halosilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, (3-cyanobutyl) trichlorosilane, 2-cyanoéthylméthyldichlorosilane, 2-cyanoéthyltrichlorosilane, 3-cyanopropyldimethylchlorosilane,  The bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more halosilanes is selected from the following compounds, (3-cyanobutyl) trichlorosilane, 2-cyanoethylmethyldichlorosilane, 2-cyanoethyltrichlorosilane, 3-cyanopropyldimethylchlorosilane,
3-cyanopropylmethyldichlorosilane, 3-cyanopropyltrichlorosilane, le composé préférentiel étant le 3-cyanopropyldiméthylchlorosilane dérivés. La substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieurs groupes époxy et un ou plusieurs groupes alkoxysilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, (3-glycidoxypropyl) bis (triméthylsiloxy) méthylsilane, 3-glycidoxypropyldiméthyléthoxysilane, (3-glycidoxypropyl) méthyldiéthoxysilane, 3-glycidoxypropylméthyldiisopropenoxysilane, (3-glycidoxypropyl) triméthoxysilane, le composé préférentiel étant le 3-glycidoxypropyldiméthyléthoxysilane. 3-cyanopropylmethyldichlorosilane, 3-cyanopropyltrichlorosilane, the preferred compound being 3-cyanopropyldimethylchlorosilane derivatives. The bifunctional substance comprising one or more epoxy groups and one or more alkoxysilane groups is selected from the following compounds, (3-glycidoxypropyl) bis (trimethylsiloxy) methylsilane, 3-glycidoxypropyldimethylethoxysilane, (3-glycidoxypropyl) methyldiethoxysilane, 3-glycidoxyisylane, 3-glycidoxypropylene -glycidoxypropyl) trimethoxysilane, the preferred compound being 3-glycidoxypropyldimethylethoxysilane.
Préparation de la Colonne Capillaire  Preparation of the Hair Column
L'ensemble de ces traitements concerne la face intérieure des colonnes capillaires.  All of these treatments relate to the inner face of the capillary columns.
Méthode A mettant en jeu une substance bifonctionnelle comprenant un groupement ammonium quaternaire-alkoxysilanes. figure 1  Method A involving a bifunctional substance comprising a quaternary ammonium-alkoxysilane group. figure 1
Monter la cassette qui contient la colonne capillaire de silice fondue non-traitée sur l'appareil d'électrophorèse capillaire. Brancher l'appareil afin d'assurer le rinçage de la colonne par de l'acide chlorhydrique 0.1M. Le rinçage est assuré pendant 15 minutes. Rincer à nouveau par de l'eau distillée durant 10 minutes puis par de la soude 0,1M pendant 10 minutes. Rincer ensuite pendant 10 minutes par de l'eau distillée. Faire passer à travers la colonne une solution aqueuse à 25% (v/v) de chlorure de N-(triméthoxysilyloctyl) triméthylammonium. Rincer à nouveau par de l'eau distillée.  Mount the cassette containing the capillary column of untreated fused silica on the capillary electrophoresis device. Connect the device to ensure rinsing of the column with 0.1M hydrochloric acid. Rinsing is ensured for 15 minutes. Rinse again with distilled water for 10 minutes and then with 0.1M sodium hydroxide for 10 minutes. Then rinse for 10 minutes with distilled water. Pass a 25% (v / v) aqueous solution of N- (trimethoxysilyloctyl) trimethylammonium chloride through the column. Rinse again with distilled water.
Un traitement supplémentaire par une solution aqueuse d'acide camphosulfonique 0,1M peut être réalisé afin d'obtenir un contre-ion. Méthode B mettant en jeu une substance bifonctionnelle comprenant un groupement amines-alkoxysilanes.figure 2 Additional treatment with an aqueous 0.1M camphosulfonic acid solution can be carried out in order to obtain a counterion. Method B involving a bifunctional substance comprising an amines-alkoxysilanes group. Figure 2
Monter la cassette qui contient la colonne capillaire de silice fondue non-traitée sur l'appareil d'électrophorèse capillaire. Brancher l'appareil afin d'assurer le rinçage de la colonne par de l'acide chlorhydrique 0,1M. Le rinçage est assuré pendant 15 minutes. Rincer à nouveau par de l'eau distillée durant 10 minutes puis par de la soude 0,1M pendant 10 minutes. Rincer ensuite pendant 10 minutes par de l'eau distillée. Faire passer à travers la colonne une solution aqueuse à 25% (v/v) de diméthylméthoxysilylpropylpentaéthylènehéxamine. Rincer à nouveau par de l'eau distillée. Faire passer à travers la colonne une solution méthanoiique à 25% (v/v) d'iodure de méthyle durant une période de l'ordre de 10 minutes. Ensuite laver la colonne au moyen du méthanol pendant 5 minutes environ. Rincer à nouveau par de l'eau distillée.  Mount the cassette containing the capillary column of untreated fused silica on the capillary electrophoresis device. Connect the device to ensure rinsing of the column with 0.1M hydrochloric acid. Rinsing is ensured for 15 minutes. Rinse again with distilled water for 10 minutes and then with 0.1M sodium hydroxide for 10 minutes. Then rinse for 10 minutes with distilled water. Pass a 25% (v / v) aqueous solution of dimethylmethoxysilylpropylpentaethylene hexamine through the column. Rinse again with distilled water. Pass a 25% (v / v) methane solution of methyl iodide through the column for a period of about 10 minutes. Then wash the column with methanol for about 5 minutes. Rinse again with distilled water.
Un traitement supplémentaire par une solution aqueuse d'acide camphosulfonique à 0,1M peut être réalisé afin d'obtenir un contre-ion. Grâce à cette préparation de la colonne, plusieurs centaines d'analyses électrophorétiques ont été réalisées. Additional treatment with an aqueous 0.1M camphosulfonic acid solution can be carried out in order to obtain a counterion. Thanks to this preparation of the column, several hundred electrophoretic analyzes were carried out.
Méthode C mettant en jeu une substance bifonctionnelle comprenant un groupement époxy-alkoxysilanes figure 3 Method C involving a bifunctional substance comprising an epoxy-alkoxysilane group Figure 3
Monter la cassette qui contient la colonne capillaire de silice fondue non-traitée sur l'appareil d'électrophorèse capillaire. Brancher l'appareil afin d'assurer le rinçage de la colonne par l'acide chlorhydrique 0,1M. Le rinçage est assuré pendant 15 minutes. Rincer à nouveau par de l'eau distillée durant 10 minutes puis par de la soude 0,1M pendant 10 minutes. Rincer ensuite pendant 10 minutes par de l'eau distillée. Faire passer à travers la colonne une solu.tion aqueuse à 25% (v/v) de 3-glycidoxypropyldiméthyléthoxysilane. Rincer à nouveau par de l'eau distillée. Faire passer à travers la colonne une solution de tetrahydrofurane à 25% (v/v) de diéthylènetriamine durant environ de 30 minutes. Rincer à nouveau par de l'eau distillée suivie par un rinçage par du méthanol. Faire passer à travers la colonne une solution méthanoiique à 25% (v/v) de l'iodure de méthyle durant environ 10 minutes. Laver ensuite la colonne au moyen du méthanol pendant 5 minutes environ. Rincer à nouveau par de l'eau distillée pendant 10 minutes.  Mount the cassette containing the capillary column of untreated fused silica on the capillary electrophoresis device. Connect the device to ensure rinsing of the column with 0.1M hydrochloric acid. Rinsing is ensured for 15 minutes. Rinse again with distilled water for 10 minutes and then with 0.1M sodium hydroxide for 10 minutes. Then rinse for 10 minutes with distilled water. Pass a 25% (v / v) aqueous solution of 3-glycidoxypropyldimethylethoxysilane through the column. Rinse again with distilled water. Pass a 25% (v / v) diethylenetriamine solution of tetrahydrofuran through the column for approximately 30 minutes. Rinse again with distilled water followed by rinsing with methanol. Pass a 25% (v / v) methane solution of methyl iodide through the column for about 10 minutes. Then wash the column with methanol for about 5 minutes. Rinse again with distilled water for 10 minutes.
Un traitement supplémentaire par une solution aqueuse d'acide camphosulfonique à 0,1 M peut être réalisé afin d'obtenir un contre-ion. Grâce à cette préparation, plu sieurs centaines d'analyses électrophorétiques peuvent être réalisées. Additional treatment with an aqueous 0.1 M camphosulfonic acid solution can be carried out in order to obtain a counterion. Thanks to this preparation, several hundred electrophoretic analyzes can be carried out.
Méthode D mettant en jeu une substance bifonctionnelle comprenant un groupement nitriles-alkoxysilanes figure 4 Monter la cassette qui contient la colonne capillaire de silice fondue non-traitée sur l'appareil d'électrophorèse capillaire. Brancher l'appareil afin d'assurer le rinçage de la colonne par l'acide chlorhydrique 0,1M. Le rinçage est assuré pendant 15 minutes. Rincer à nouveau par de l'eau distillée durant 10 minutes puis par de la soude 0,1M pendant 10 minutes. Rincer ensuite pendant 10 minutes par de l'eau distillée. Faire passer à travers la colonne une solution aqueuse à 25% (v/v) de 3-cyanopropyldiméthylméthoxysilane. Rincer à nouveau par de l'eau distillée. Faire passer à travers la colonne une solution de tétrahydrofurane anhydre à 1% (P/v) d'hydrure de lithium aluminium de durant environ 60 minutes. Ringer ensuite par une solution de tétrahydrofurane anhydre pendant 5 minutes environ. Rincer à nouveau par de l'eau distillée pendant 5 minutes suivie par un rinçage par du méthanol pendant 10 minutes. Faire passer à travers la colonne une solution méthanoiique à 25% (v/v) de l'iodure de méthyle durant environ 10 minutes. Laver ensuite la colonne au moyen du méthanol pendant 5 minutes environ. Rincer à nouveau par de l'eau distillée. Method D involving a bifunctional substance comprising a nitrile-alkoxysilane group Figure 4 Mount the cassette containing the capillary column of untreated fused silica on the capillary electrophoresis device. Connect the device to ensure rinsing of the column with 0.1M hydrochloric acid. Rinsing is ensured for 15 minutes. Rinse again with distilled water for 10 minutes and then with 0.1M sodium hydroxide for 10 minutes. Then rinse for 10 minutes with distilled water. Pass a 25% (v / v) aqueous solution of 3-cyanopropyldimethylmethoxysilane through the column. Rinse again with distilled water. Pass through the column a solution of anhydrous tetrahydrofuran 1% (W / v) of lithium aluminum hydride for about 60 minutes. Then rinse with an anhydrous tetrahydrofuran solution for approximately 5 minutes. Rinse again with distilled water for 5 minutes followed by rinsing with methanol for 10 minutes. Pass a 25% (v / v) methane solution of methyl iodide through the column for about 10 minutes. Then wash the column with methanol for about 5 minutes. Rinse again with distilled water.
Un traitement supplémentaire par une solution aqueuse d'acide camphosulfonique à 0,1M peut être réalisé afin d'obtenir un contre-ion. Grâce à cette préparation, plusieurs centaines d'analyses électrophorétiques peuvent être réalisées. Additional treatment with an aqueous 0.1M camphosulfonic acid solution can be carried out in order to obtain a counterion. Thanks to this preparation, several hundred electrophoretic analyzes can be carried out.
Méthode E mettant en jeu une substance bifonctionnelle comprenant un groupement ammonium quaternaire vinylique figure 5  Method E involving a bifunctional substance comprising a vinyl quaternary ammonium group FIG. 5
Monter la cassette qui contient la colonne capillaire de silice fondue non-traitée sur l'appareil d'électrophorèse capillaire. Brancher l'appareil afin d'assurer le rinçage de la colonne par l'acide chlorhydrique 0,1M. Le rinçage est assuré pendant 15 minutes. Rincer à nouveau par de l'eau distillée durant 10 minutes puis par de la soude 0,1M pendant 10 minutes. Rincer ensuite pendant 10 minutes par de l'eau distillée. Ringer à nouveau par une solution de tétrahydrofurane anhydre pendant 5 minutes environ. Faire passer à travers la colonne la chlorure de thionyle pendant 2 à 3 heures. Rinβer ensuite par une solution de tétrahydrofurane anhydre pendant 5 minutes environ. Faire passer à travers la colonne une solution de tétrahydrofurane anhydre à 1% (P/v) du hydrure de lithium aluminium durant environ 60 minutes. Ringer ensuite par une solution de tétrahydrofurane anhydre pendant 5 minutes environ. Faire passer une solution de isopropanol anhydre à 0,1 g% d'acide chloroplatinique et 10% de N-allyle-éthylènediamine pendant 1 heure. Ringer à nouveau par de l'isopropanol suivies par du méthanol pendant 10 minutes pour chacune. Faire passer à travers la colonne une solution méthanoiique à 25% (v/v) de l'iodure de méthvle de l'ordre de 10 minutes. Laver ensuite la colonne au moyen du méthanol pendant 5 minutes environ. Rincer à nouveau par de l'eau distillée. Mount the cassette containing the capillary column of untreated fused silica on the capillary electrophoresis device. Connect the device to ensure rinsing of the column with 0.1M hydrochloric acid. Rinsing is ensured for 15 minutes. Rinse again with distilled water for 10 minutes and then with 0.1M sodium hydroxide for 10 minutes. Then rinse for 10 minutes with distilled water. Ringer again with an anhydrous tetrahydrofuran solution for approximately 5 minutes. Pass the thionyl chloride through the column for 2 to 3 hours. Then rinse with an anhydrous tetrahydrofuran solution for approximately 5 minutes. Pass a 1% (w / v) anhydrous tetrahydrofuran solution of lithium aluminum hydride through the column for approximately 60 minutes. Then rinse with an anhydrous tetrahydrofuran solution for approximately 5 minutes. Pass a solution of anhydrous isopropanol containing 0.1 g% of chloroplatinic acid and 10% of N-allyl-ethylenediamine for 1 hour. Ringer again with isopropanol followed by methanol for 10 minutes for each. Pass a 25% methane solution (v / v) of methyl iodide in the order of 10 minutes through the column. Then wash the column with methanol for about 5 minutes. Rinse again with distilled water.
RESULTATS  RESULTS
Grâce à ce type de préparation, plusieurs centaines d'analyses électrophorétiques ont été réalisées avec la même colonne.  Thanks to this type of preparation, several hundred electrophoretic analyzes were carried out with the same column.
Grâce a ce type de colonne nous avons pu séparer des substances chimiques de faible poids moléculaire et de structure chimique voisine.  Thanks to this type of column we were able to separate chemicals of low molecular weight and neighboring chemical structure.
Des substances présentes dans un sérum humain et dans les urines humaines ont pu être séparées sans interférences de la part des constituants normaux de sérum ou des urines.  Substances in human serum and human urine could be separated without interference from normal serum constituents or urine.
Une séparation des divers substances acides de charges multiples réalisées avec l'un des colonnes traitées est présentée dans la figure 6 . Les substances séparées sont indiquées sur la figure 6 . Il faut remarquer que toutes ces composés ne peuvent pas être séparés simultanément dans aucun cas avec une colonne traitée autrement ou non-traitée. Surtout, l'ensemble des acide de charges multiples tel que l'acide sulfo-5-salicylique, l'acide trimesique, l'acide phthalique, l'acide isophthalique, l'acide hydroxy-5 isophthalique, et l'acide amino-5 isophthalique ne peuvent pas être séparés des autres acides, qui ne possèdent qu'un groupement chargé au cours du même essai, lors de l'emploi d'autre type de colonne .  A separation of the various acid substances of multiple charges produced with one of the columns treated is presented in FIG. 6. The separated substances are shown in Figure 6. It should be noted that all of these compounds cannot in any case be separated simultaneously with an otherwise treated or untreated column. Above all, the set of acids with multiple charges such as sulfo-5-salicylic acid, trimesic acid, phthalic acid, isophthalic acid, 5-hydroxy isophthalic acid, and amino acid. 5 isophthalic cannot be separated from the other acids, which have only one group loaded during the same test, when using another type of column.
Les conditions employés pour cette séparation sont marquées dans la figure 6.  The conditions used for this separation are marked in Figure 6.
D'autres acides ont été séparés du mélange acide oxalique, acide maléique, acide succinique, acide fumarique, acide citrique, acide D-tartarique. figure 7 Le exemple décrits ci-devant montrent les étendus de cette invention ; de nombreuses colonnes capillaires chargés positivement d'une manière permanente ont été réalisées et permettent cette excellente séparation indiquée ci-devant. Other acids have been separated from the mixture of oxalic acid, maleic acid, succinic acid, fumaric acid, citric acid, D-tartaric acid. Figure 7 The example described above shows the scope of this invention; numerous capillary columns positively charged in a permanent manner have been produced and allow this excellent separation indicated above.
Figure imgf000012_0001
Figure imgf000012_0001
Revêtement final  Final coating
Figure 1 : Méthode A mettant en jeu une substance bifonctionnelle comprenant un groupement ammonium quaternaire-alkoxysilane Figure 1: Method A involving a bifunctional substance comprising a quaternary ammonium-alkoxysilane group
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Figure imgf000013_0001
Revêtement final  Final coating
Figure 2 : Méthode B mettant en jeu une substance bifonctionelle comprenant un groupement amines-alkoxysilane
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Figure 2: Method B involving a bifunctional substance comprising an amines-alkoxysilane group
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Revêtement final  Final coating
Figure 3: Méthode C mettant en jeu une substance bifonctionelle comprenant un groupement époxy-alkoxysilane n Figure 3: Method C involving a bifunctional substance comprising an epoxy-alkoxysilane group not
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Revêtement final  Final coating
Figure 4 : Méthode D mettant enjeu une substance bifonctionelle comprenant un groupement Figure 4: Method D involving a bifunctional substance comprising a group
nitrile-alkoxysilane
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nitrile-alkoxysilane
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Revêtement Final  Final coating
Figure 5 : Méthode E mettant en jeu une substance bifonctionelle comprenant un groupement amine-vinylique Identification des Pics Figure 5: Method E involving a bifunctional substance comprising an amine-vinyl group Peak Identification
1. l 'acide sulfo-5 salicylique 2. l 'acide salicylique  1. 5-sulfo salicylic acid 2. salicylic acid
3. l 'acide trimesique  3. trimesic acid
4. l 'acide toluene-4 sulfonique 5. l 'acide nitro-5 isophthalique 4. toluene-4 sulfonic acid 5. 5-nitro-isophthalic acid
Dimensions de la Colonne 6. l 'acide phthalique Dimensions of Column 6. phthalic acid
7. l 'acide nitro-2 benzoique 7. 2-nitro benzoic acid
75 μm ID x 365 μm OD x 67 cm 8. l 'acide isophthalique 75 μm ID x 365 μm OD x 67 cm 8. isophthalic acid
9. l 'acide nitro-3 benzoique 9. 3-nitro benzoic acid
Tampon 10. l 'acide hydroxy-5 isophthaylique Buffer 10. 5-hydroxy isophthaylic acid
11. l 'acide amino-5 isophthaylique 11. 5-isophthaylic acid
95 mM de l'acide acétique 12. l 'acide amino-4 salicylique95 mM acetic acid 12. 4-amino salicylic acid
50 mM de la sel sodique de acide acétique 13. l 'acide benzoique 50 mM sodium salt of acetic acid 13. benzoic acid
dans l'eau 14. l 'acide anthracene-9 carboxylique  in water 14. anthracene-9 carboxylic acid
15. l 'acide nitro-4 phenylacetique 15. 4-nitro phenylacetic acid
Autres Conditions 16. l 'acide naphthalene-2 acetique Other Conditions 16. naphthalene-2 acetic acid
17. l 'acide hydroxy-4 benzoique 17. 4-hydroxy benzoic acid
200 nm détection UV 18. l 'acide sulfanilique 200 nm UV detection 18. sulfanilic acid
Detector vers l'anode 19. l 'acide diméthoxy-3,4 benzolique 20KV 28 μa 20. l 'acide dihydroxy-2,3 benzolique Injection par pression 2 seconds 21. l 'acide amino-4 benzoique  Detector to the anode 19. 3,4-dimethoxy-benzolic acid 20KV 28 μa 20. 2,3-dihydroxy-benzolic acid Injection by pressure 2 seconds 21. 4-amino benzoic acid
Concentration des Pics  Peak Concentration
22.2 to 22.4 μg/ml  22.2 to 22.4 μg / ml
de chaque composé  of each compound
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Figure imgf000017_0001
Figure 6 : Electrophoregramme de diverses substances Figure 6: Electrophoregram of various substances
acidiques Identification des Pics acidic Peak Identification
1. l'acide oxalique  1. oxalic acid
2. l'acide maleique  2. maleic acid
3. l'acide succinique  3. succinic acid
4. l'acide fumarique  4. fumaric acid
5. l'acide citrique  5. citric acid
6. l'acide tartarique-D  6. tartaric acid-D
Concentration des Pics Peak Concentration
222 to 244 μg/ml 222 to 244 μg / ml
de chaque composé  of each compound
Dimensions de la Colonne Column dimensions
75 μm ID x 365 μm OD x 67 cm75 μm ID x 365 μm OD x 67 cm
Tampon Buffer
10 mM de l'acide trifluoroacétique 20 mM Sodium Trifiuoroacetate dans l'eau  10 mM trifluoroacetic acid 20 mM Sodium Trifiuoroacetate in water
Autres Conditions  Other Conditions
200 nm détection UV  200 nm UV detection
Detector vers l'anode  Detector to the anode
20KV 42 μa  20KV 42 μa
Injection par pression 2 seconds  Pressure injection 2 seconds
Figure imgf000018_0001
Figure imgf000018_0001
Figure 7 : Electrophoregramme de diverses substances acidiques Figure 7: Electrophoregram of various acidic substances

Claims

REVENDICATIONS
1 . Colonne capillaire en verre ou en quartz ou en silice fondue ou en dérivé polymérique ou en matériaux similaires, utilisée en electrophorèse capillaire, présentant une charge positive permanente, sous forme d'ammonium quaternaire, fixée à la surface intérieure par une liaison covalente, résultant de la combinaison entre la paroi de la colonne capillaire et un composé polymérique ou non-polymérique de structure bifonctionnelle, l'une des fonctions présentant une charge positive permanente de nature ammonium quaternaire, l'autre fonction étant destinée à former la liaison covalente avec la paroi de la colonne capillaire, en ce que la liaison covalente peut être sous forme de siloxane1. Capillary column in glass or quartz or in fused silica or in polymeric derivative or in similar materials, used in capillary electrophoresis, having a permanent positive charge, in the form of quaternary ammonium, fixed to the interior surface by a covalent bond, resulting from the combination between the wall of the capillary column and a polymeric or non-polymeric compound of bifunctional structure, one of the functions having a permanent positive charge of quaternary ammonium nature, the other function being intended to form the covalent bond with the wall of the capillary column, in that the covalent bond can be in the form of siloxane
-Si-O-Si- résultant de la combinaison d'un groupement constituée d'un atome de silicium et d'un, de deux ou de trois substituants halogènes, tel le chlore ou le brome, soit d'un groupement constitué d'un atome de silicium et d'un, de deux ou de trois substituants alkoxy ou acyloxy réagissant avec les groupements hydroxyles de la surface intérieure du capillaire, en ce que la liaison covalente peut être obtenu soit sous forme de liaison silicium-carbone -Si- résultant de la combinaison au niveau
Figure imgf000019_0001
-Si-O-Si- resulting from the combination of a group consisting of a silicon atom and one, two or three halogen substituents, such as chlorine or bromine, or a group consisting of a silicon atom and one, two or three alkoxy or acyloxy substituents reacting with the hydroxyl groups of the internal surface of the capillary, in that the covalent bond can be obtained either in the form of silicon-carbon bond -Si- resulting from the combination at the level
Figure imgf000019_0001
de la paroi de la colonne capillaire d'un groupement vinylique et de groupements d'hydrure de silicium -SiH préalablement formés par la transformation de silanol -SiOH en halogénures de silicium -SiX, X étant un halogénure du type chlore ou brome suivies d'une réduction en hydrure de silicium -SiH.  of the wall of the capillary column of a vinyl group and of silicon hydride groups -SiH previously formed by the transformation of silanol -SiOH into silicon halides -SiX, X being a halide of the chlorine or bromine type followed by reduction in silicon hydride -SiH.
2. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon la revendication 1 due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non polymérique comprenant un ou plusieurs sels d'ammonium quaternaire et un ou plusieurs alkoxysilanes. réagissant avec la paroi intérieure de la jolonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente.  2. Hair column having a permanent positive charge according to claim 1 due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more alkoxysilanes. reacting with the inner wall of the capillary rod and leading to fixation in the form of a covalent bond.
3. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon la revendication 1 due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs sels d'ammonium quaternaire et un ou plusieurs groupes vinyliques, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente. 3. capillary column having a permanent positive charge according to claim 1 due to the combination between a substance bifunctional polymeric or non-polymeric comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more vinyl groups, reacting with the internal wall of the capillary column and leading to a fixing in the form of covalent bond.
4. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon la revendication 1 due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs aminés primaires, secondaires ou tertiaires et un ou plusieurs alkoxysilanes, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les aminés étant transformées en ammonium quaternaire par action d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation. 4. capillary column having a permanent positive charge according to claim 1 due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more alkoxysilanes, reacting with the inner wall of the column capillary and leading to fixation in the form of a covalent bond, the amines being transformed into quaternary ammonium by the action of alkyl halides either before fixation on the inner wall of the capillary column or in situ after fixation.
5. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon la revendication 1 due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs aminés primaires, secondaires ou tertiaires et un ou plusieurs groupes vinyliques, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les aminés étant transformées en ammonium quaternaire par action d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation.  5. capillary column having a permanent positive charge according to claim 1 due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more vinyl groups, reacting with the inner wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond, the amines being transformed into quaternary ammonium by the action of alkyl halides either before the fixation on the inner wall of the capillary column or in situ after fixation.
6. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon la revendication 1 due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs groupes nitriles et un ou plusieurs groupes alkoxysilanes, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les groupes nitriles étant transformés en ammonium quaternaire par réduction du nitrile en aminé primaire, elle-même transformée en ammonium quaternaire par réaction d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation.  6. capillary column having a permanent positive charge according to claim 1 due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more alkoxysilane groups, reacting with the inner wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond, the nitrile groups being transformed into quaternary ammonium by reduction of the nitrile into primary amine, itself transformed into quaternary ammonium by reaction of alkyl halides either before the fixation on the inner wall of the capillary column either in situ after fixation.
7 . Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon la revendication 1 due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs groupes nitriles et un ou plusieurs groupes halosilanes, pour lequel l'atome d'halogène peut être le chlore ou le brome réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les groupes nitriles étant transformés en ammonium quaternaire par réduction du nitrile en aminé primaire, elle-même transformée en ammonium quaternaire par réaction d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation. 7. Hair column with a permanent positive charge according to claim 1 due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more halosilane groups, for which the halogen atom may be chlorine or bromine reacting with the interior wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond, the nitrile groups being transformed into quaternary ammonium by reduction of the nitrile into primary amine, itself transformed into quaternary ammonium by reaction alkyl halides either before attachment to the inner wall of the capillary column or in situ after attachment.
8. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon la revendication 1 due à la combinaison entre une substance bifonctionnelle polymérique ou non-polymérique comprenant un ou plusieurs groupes époxy et un ou plusieurs groupes alkoxysilanes, réagissant avec la paroi intérieure de la colonne capillaire et conduisant à une fixation sous forme de liaison covalente, les groupes époxy étant transformés en ammonium quaternaire par réaction dans un premier temps avec une aminé primaire ou une aminé secondaire conduisant à un amino-alcool transformé en ammonium quaternaire par réaction d'halogénures d'alkyle soit avant la fixation sur la paroi intérieure de la colonne capillaire soit in situ après fixation.  8. capillary column having a permanent positive charge according to claim 1 due to the combination between a polymeric or non-polymeric bifunctional substance comprising one or more epoxy groups and one or more alkoxysilane groups, reacting with the inner wall of the capillary column and leading to a fixation in the form of a covalent bond, the epoxy groups being transformed into quaternary ammonium by reaction initially with a primary amine or a secondary amine leading to an amino alcohol transformed into quaternary ammonium by reaction of alkyl halides either before fixing to the inner wall of the capillary column is in situ after fixing.
9. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon l'une quelconque des revendications 1 à 2 caratérisées en ce que la substance bifonctionnelle comprenant un ou plusieurs sels d'ammonium quaternaire et un ou plusieurs alkoxysilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, chlorure de n-octadecyldiméthyl-[3-(triméthoxy- silyl)propyl] ammonium, chlorure de n-tétradecyldimethyl(3-triméthoxy silylpropyl) ammonium, chlorure de N-(triméthoxysilyloctyl)  9. capillary column having a permanent positive charge according to any one of claims 1 to 2 characterized in that the bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, n chloride -octadecyldimethyl- [3- (trimethoxysilyl) propyl] ammonium, n-tetradecyldimethyl chloride (3-trimethoxy silylpropyl) ammonium, N- chloride (trimethoxysilyloctyl)
triméthylammonium, chlorure de N-(3-triméthoxypropyl-N-méthyl-N, N-diallylammonium, chlorure de N-triméthoxysilylpropyl-N,N,  trimethylammonium, N- (3-trimethoxypropyl-N-methyl-N, N-diallylammonium chloride, N-trimethoxysilylpropyl-N, N chloride,
N-triméthylammonium, chlorure de N-triméthoxysilylpropyl-tri-n- butylammonium, le composé préférentiel étant le chlorure de N-(triméthoxysilyloctyl) triméthylammonium.  N-trimethylammonium, N-trimethoxysilylpropyl-tri-n-butylammonium chloride, the preferred compound being N- (trimethoxysilyloctyl) trimethylammonium chloride.
10 . Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon l'une quelconque des revendications 1 et 3 caratérisées en ce que la substance bifonctionnelle comprenant un ou plusieurs sels d'ammonium quaternaire et un ou plusieurs groupes vinyliques est sélectionnée parmi les composés suivants, l'iodure de hexallyl-éthylènediammonium, l'iodure de octallyl-diethylene- triammonium, l'iodure de decallyl-triéthylènetétrammoniu m, l'iodure de dodécallyl- tétraéthylènepentammoniumj'iodure de tétradécallyl- pentaéthylène- hexammonium, le composé préférentiel étant le hexabromure de tétradecaallyl-pentaéthylènehexammonium 10. Capillary column having a permanent positive charge according to either of Claims 1 and 3, characterized in that the bifunctional substance comprising one or more quaternary ammonium salts and one or more vinyl groups is selected from the following compounds, iodide of hexallyl-ethylenediammonium, octallyl-diethylene-triammonium iodide, decallyl-triethylenetetrammonium iodide, dodecallyl- tetraethylenepentammonium iodide, tetradecallyl- pentaethylene-hexammonium iodide, the preferred compound being tetraethylenetammonium
11. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon l'une quelconque des revendications 1 et 4 caratérisées en ce que la substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieures aminés primaires, secondaires ou tertiaires et un ou plusieurs alkoxysilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, 4-Aminobutyldiméthylméthoxysilane,4-Aminobutyltriéthoxysilane,(aminoéthyl- aminoéthyl)phenethyltriméthoxysilane, N-2-aminoéthyl)-3-aminopropyl méthyldiméthoxysilane, N-(2-aminoethyl-3-aminopropyl)-triméthoxy- silane, N-(2-aminoethyl-3-aminopropyl)-tris-(2-éthylhexoxy)silane, N-(2-aminohexyl-3-aminopropyl) triméthoxysilane, 4-aminophényltrimet hoxysilane,3-(1-aminopropoxy)-3,3-diméthyl- 1-propényltriméthoxy- silane,3-aminopropyl-tris(methoxyethoxyethoxy)silane, 3-aminopropyl- dimethylethoxysilane,3-aminopropylméthyldiéthoxysilane, 3-aminopro- pyltriéthoxysilane, 3-aminopropyltriméthoxysilane, 3-aminopro- pyltris(triméthylsilyloxy)silane, J-aminoundecyltriméthoxysilane, 3-[2-N-benzylaminoethylaminopropyl]trimethoxysilane, Bis-(2-hydroxye thyl)-3-aminopropyltriethoxysilane, Bis[3-(triéthoxysilyl)propyl] aminé, Bis[3-(triméthoxysilyl)propyl]ethylenediamine, (cyclohexylaminométhyl) méthyldiéthoxysilane, (cyclohexylaminométhyl) diméthyléthoxysilane, (N,N-diéthyl-3-aminopropyl) trimethoxysilane, dimethylméthoxysilylprop yldiéthylènetriamine, diméthylméthoxysilylpropylpentaéthylènehexa- mine, N-méthylaminopropyltriméthoxysilane, methyl[2- (3-triméthoxy- silylpropylamino)éthylamino]-3-propionate, N-phénylaminopropyl- triméthoxysilane, 3-(N-styrylméthyl-2-aminoéthylamino) propyltri- méthoxysilane, N-([3-(triéthoxysilyl)propyl]-2,4-dintrophénylamine, N-[3-(triéthoxysilyl)propyl]-4,5-dihydroimidazole,triméthoxysilyl- propyldiéthylènetriamine, N-(3-triméthoxysilylpropyl) pyrrole, le composé préférentiel étant le diméthylméthoxysilylpropylpentaéthylènehéxamine 11. capillary column having a permanent positive charge according to any one of claims 1 and 4 characterized in that the bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, 4- Aminobutyldimethylmethoxysilane, 4-Aminobutyltriethoxysilane, (aminoethyl- aminoethyl) phenethyltrimethoxysilane, N-2-aminoethyl) -3-aminopropyl methyldimethoxysilane, N- (2-aminoethyl-3-aminopropyl) -trimethoxy- silane, N- (2-aminoethyl-3-aminopropyl) -tris- (2-ethylhexoxy ) silane, N- (2-aminohexyl-3-aminopropyl) trimethoxysilane, 4-aminophenyltrimet hoxysilane, 3- (1-aminopropoxy) -3,3-dimethyl- 1-propenyltrimethoxy- silane, 3-aminopropyl-tris (methoxyethoxyethoxy) silane , 3-aminopropyl- dimethylethoxysilane, 3-aminopropylmethyldiethoxysilane, 3-aminopro-pyltriethoxysilane, 3-aminopropyltrimethoxysilane, 3-aminopro-pyltris (trimethylsilyloxy) silane, J-aminoundecylane-benzyl-3-ethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-2-amino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethylamino-trimethyl-2] -hydroxye thyl) -3-aminopropyltriethoxysilane, Bis [3- (triethoxysilyl) propyl] amino, Bis [3- (trimethoxysilyl) propyl] ethylenediamine, (cyclohexylaminomethyl) methyldiethoxysilane, (cyclohexylaminomethyl) dimethylethoxysilane aminopropyl) trimethoxysilane, dimethylmethoxysilylprop yldiethylenetri amine, dimethylmethoxysilylpropylpentaethylenehexamine, N-methylaminopropyltrimethoxysilane, methyl [2- (3-trimethoxy-silylpropylamino) ethylamino] -3-propionate, N-phenylaminopropyl-trimethoxysilane, 3- (N-styrylmethyl-2-aminoamilane) - ([3- (triethoxysilyl) propyl] -2,4-dintrophenylamine, N- [3- (triethoxysilyl) propyl] -4,5-dihydroimidazole, trimethoxysilyl- propyldiethylenetriamine, N- (3-trimethoxysilylpropyl) pyrrole, the preferred compound being dimethylmethoxysilylpropylpentaethylenehexamine
12. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon l'une quelconque des revendications 1 et 5 caratérisées en ce que la substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieures aminés primaires, secondaires ou tertiaires et un ou plusieurs vinyliques est sélectionnée parmi les composés suivants, N-allyl-éthylènediamine , N,N-diallyl-éthylènediamine,N,N,N-triallyl-éthylènediamine,N,N,  12. capillary column having a permanent positive charge according to any one of claims 1 and 5 characterized in that the bifunctional substance comprising one or more primary, secondary or tertiary amines and one or more vinyls is selected from the following compounds, N- allyl-ethylenediamine, N, N-diallyl-ethylenediamine, N, N, N-triallyl-ethylenediamine, N, N,
N,N-tétrallyléthylènediamine,N-allyldiéthylènetriamine,  N, N-tetrallylethylenediamine, N-allyldiethylenetriamine,
N,N-diallyldiéthylènetriamine,N,N,N-triallyldiéthylènetriamine, N,N,N, N-tétrallyldiéthylènetriamine, N,N,N,N,N-pentallyldiéthylènetriamine, N,N,N,N,N,N-hexallyldiéthylènetriamine,N,N,N,N,N,N-hexallyl-pentaéthylènehexamine, le composé préférentiel étant le N,N,N,N,N,N-hexallylpentaéthylènehexamine.  N, N-diallyldiethylenetriamine, N, N, N-triallyldiethylenetriamine, N, N, N, N-tetrallyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N-pentallyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N, N-hexallyldiethylenetriamine, N, N, N, N, N, N-hexallyl-pentaethylenehexamine, the preferred compound being N, N, N, N, N, N-hexallylpentaethylenehexamine.
13. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon l'une quelconque des revendications 1 et 6 caratérisées en ce que la substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieurs groupes nitriles et un ou plusieurs alkoxysilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, 3-(cyanoéthoxy)-3,3-dimethyl-1 -propényltriméthoxysilane,  13. capillary column having a permanent positive charge according to any one of claims 1 and 6 characterized in that the bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more alkoxysilanes is selected from the following compounds, 3- (cyanoethoxy) - 3,3-dimethyl-1 -propenyltrimethoxysilane,
2-cyanoéthyltriéthoxysilane, 2-cyanoéthyltriméthoxysilane, (cyano- méthylphènethyl) triméthoxysilane, 3-cyanopropyldiméthylméthoxy- silane, 3-cyanopropyltriéthoxysilane le composé préférentiel étant le 2-cyanoethyltriethoxysilane, 2-cyanoethyltrimethoxysilane, (cyano- methylphenethyl) trimethoxysilane, 3-cyanopropyldimethylmethoxy-silane, 3-cyanopropyltriethoxysilane the preferred compound being
3-cyanopropyldiméthylméthoxysilane  3-cyanopropyldimethylmethoxysilane
14. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon l'une quelconque des revendications 1 et 7 caratérisées en ce que la substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieurs groupes nitriles et un ou plusieurs halosilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, (3-cyanobutyl)trichlorosilane, 2-cyanoéthylméthyldichlorosilane, 2-cyanoéthyltrichlorosilane, 3-cyanopropyldimethylchlorosilane, 3-cyanopropylmethyldichlorosilane, 3-cyanopropyltrichlorosilane, le composé préférentiel étant le 3-cyanopropyldiméthylchlorosilane and related substances.  14. capillary column having a permanent positive charge according to any one of claims 1 and 7 characterized in that the bifunctional substance comprising one or more nitrile groups and one or more halosilanes is selected from the following compounds, (3-cyanobutyl) trichlorosilane , 2-cyanoethylmethyldichlorosilane, 2-cyanoethyltrichlorosilane, 3-cyanopropyldimethylchlorosilane, 3-cyanopropylmethyldichlorosilane, 3-cyanopropyltrichlorosilane, the preferred compound being 3-cyanopropyldimethylchlorosilane and related substances.
15. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon l'une quelconque des revendications 1 et 8 caratérisées en ce que la substance bifonctionnelle comprenant une ou plusieurs groupes époxy et un ou plusieurs groupes alkoxysilanes est sélectionnée parmi les composés suivants, (3-glycidoxypropyl)bis(triméthylsiloxy)  15. Capillary column having a permanent positive charge according to any one of claims 1 and 8 characterized in that the bifunctional substance comprising one or more epoxy groups and one or more alkoxysilane groups is selected from the following compounds, (3-glycidoxypropyl) bis (trimethylsiloxy)
méthylsilane, 3-glycidoxypropyldiméthyléthoxysilane, (3-glycidoxypropyl) méthyldiéthoxysilane, 3-glycidoxypropylméthyldiisopropenoxysilane, (3-glycidoxypropyl) triméthoxysilane, le composé préférentiel étant le 3-glycidoxypropyldiméthylethoxysilane.  methylsilane, 3-glycidoxypropyldimethylethoxysilane, (3-glycidoxypropyl) methyldiethoxysilane, 3-glycidoxypropylmethyldiisopropenoxysilane, (3-glycidoxypropyl) trimethoxysilane, the preferred compound being 3-glycidoxypropyldimethylethoxysane.
16. Colonne capillaire présentant une charge positive permanente selon l'une quelconque des revendications 1 à 15, en ce que la préparation du revêtement intérieur de la colonne capillaire est réalisée selon les étapes suivantes : lavages successifs par l'acide chlorhydrique, par de l'eau, par de la soude, par de l'eau , puis traitement par la substance bifonctionnelle qui par exemple et d'une manière non limitative peut être le chlorure de N-(triméthoxysilyloctyl) triméthylammonium ; puis lavage à l'eau suivie éventuellement par un traitement par de l'acide camphosulfonique.  16. capillary column having a permanent positive charge according to any one of claims 1 to 15, in that the preparation of the internal coating of the capillary column is carried out according to the following steps: successive washes with hydrochloric acid, with l water, with sodium hydroxide, with water, then treatment with the bifunctional substance which for example and in a nonlimiting manner can be N- (trimethoxysilyloctyl) trimethylammonium chloride; then washing with water, optionally followed by treatment with camphosulfonic acid.
17. Colonnes capillaires selon l'une quelconque des revendications 1 à 16 caractérisées en ce qu'elles permettent de séparer des composés chargés négativement, chargés positivement ou des composés neutres dans un but analytique ou pour la préparation de composés purs.  17. Hair columns according to any one of claims 1 to 16, characterized in that they make it possible to separate negatively charged, positively charged compounds or neutral compounds for analytical purposes or for the preparation of pure compounds.
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Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0639768A2 (en) * 1993-08-16 1995-02-22 Hewlett-Packard Company Capillary electrophoresis using zwitterion- coated capillary tubes
WO1995009360A1 (en) * 1993-09-29 1995-04-06 Beckman Instruments, Inc. Coated capillary columns and electrophoretic separation methods for their use
WO1995011451A1 (en) * 1993-10-18 1995-04-27 Beckman Instruments, Inc. Methods for controlling electroosmotic flow in coated capillary electrophoresis columns
CN1038362C (en) * 1992-09-29 1998-05-13 中国科学院大连化学物理研究所 Sym-triazines dye affinity capillary electrophoresis column and its preparation
WO1999045377A1 (en) * 1998-03-04 1999-09-10 Arizona Board Of Regents Chemical surface for control of electroosmosis by an applied external voltage field
ES2151354A1 (en) * 1997-07-28 2000-12-16 Sugelabor S A Fabrication of electrophoresis capillary columns with polymer linings consists of application of hydrophilic neutral and positive charge polymers virtually excluding electro osmotic flow
ES2156476A1 (en) * 1998-02-16 2001-06-16 Consejo Superior Investigacion Fused silica capillary columns based development work consists of utilization of high thermal conductivity and coating with polymer, to increase performance
EP1231466A2 (en) * 1999-09-01 2002-08-14 Mirador DNA Design Inc. Disposable thermoformed electrophoresis cassette
KR100447945B1 (en) * 2002-03-08 2004-09-08 학교법인 한양학원 Method for coating fused silica capillary for biopolymer analysis
EP1473344A1 (en) * 2003-04-28 2004-11-03 Shin-Etsu Chemical Co., Ltd. Formation of functional coating and functional coated article

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2580812A1 (en) * 1985-04-22 1986-10-24 Univ Caen Method for attenuating or suppressing the phenomenon of electroosmosis in an electrophoresis cell and electrophoresis cell thus obtained
EP0324539A2 (en) * 1988-01-12 1989-07-19 Northeastern University Improved capillary gel electrophoresis columns
US4865706A (en) * 1986-10-21 1989-09-12 Northeastern University High performance microcapillary gel electrophoresis
WO1989012225A1 (en) * 1988-06-02 1989-12-14 Hewlett-Packard Company Halogenated surface with reduced protein interaction

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2580812A1 (en) * 1985-04-22 1986-10-24 Univ Caen Method for attenuating or suppressing the phenomenon of electroosmosis in an electrophoresis cell and electrophoresis cell thus obtained
US4865706A (en) * 1986-10-21 1989-09-12 Northeastern University High performance microcapillary gel electrophoresis
EP0324539A2 (en) * 1988-01-12 1989-07-19 Northeastern University Improved capillary gel electrophoresis columns
WO1989012225A1 (en) * 1988-06-02 1989-12-14 Hewlett-Packard Company Halogenated surface with reduced protein interaction

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1038362C (en) * 1992-09-29 1998-05-13 中国科学院大连化学物理研究所 Sym-triazines dye affinity capillary electrophoresis column and its preparation
EP0639768A2 (en) * 1993-08-16 1995-02-22 Hewlett-Packard Company Capillary electrophoresis using zwitterion- coated capillary tubes
EP0639768A3 (en) * 1993-08-16 1995-10-25 Hewlett Packard Co Capillary electrophoresis using zwitterion- coated capillary tubes.
WO1995009360A1 (en) * 1993-09-29 1995-04-06 Beckman Instruments, Inc. Coated capillary columns and electrophoretic separation methods for their use
WO1995011451A1 (en) * 1993-10-18 1995-04-27 Beckman Instruments, Inc. Methods for controlling electroosmotic flow in coated capillary electrophoresis columns
ES2151354A1 (en) * 1997-07-28 2000-12-16 Sugelabor S A Fabrication of electrophoresis capillary columns with polymer linings consists of application of hydrophilic neutral and positive charge polymers virtually excluding electro osmotic flow
ES2156476A1 (en) * 1998-02-16 2001-06-16 Consejo Superior Investigacion Fused silica capillary columns based development work consists of utilization of high thermal conductivity and coating with polymer, to increase performance
WO1999045377A1 (en) * 1998-03-04 1999-09-10 Arizona Board Of Regents Chemical surface for control of electroosmosis by an applied external voltage field
US6488831B1 (en) 1998-03-04 2002-12-03 Arizona Board Of Regents Arizona State University Chemical surface for control of electroosmosis by an applied external voltage field
EP1231466A2 (en) * 1999-09-01 2002-08-14 Mirador DNA Design Inc. Disposable thermoformed electrophoresis cassette
EP1231466A3 (en) * 1999-09-01 2004-01-21 Mirador DNA Design Inc. Disposable thermoformed electrophoresis cassette
KR100447945B1 (en) * 2002-03-08 2004-09-08 학교법인 한양학원 Method for coating fused silica capillary for biopolymer analysis
EP1473344A1 (en) * 2003-04-28 2004-11-03 Shin-Etsu Chemical Co., Ltd. Formation of functional coating and functional coated article

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