EP1802977A2 - Test device for the in vitro diagnosis of multi-analyse tests and the use thereof - Google Patents
Test device for the in vitro diagnosis of multi-analyse tests and the use thereofInfo
- Publication number
- EP1802977A2 EP1802977A2 EP05782938A EP05782938A EP1802977A2 EP 1802977 A2 EP1802977 A2 EP 1802977A2 EP 05782938 A EP05782938 A EP 05782938A EP 05782938 A EP05782938 A EP 05782938A EP 1802977 A2 EP1802977 A2 EP 1802977A2
- Authority
- EP
- European Patent Office
- Prior art keywords
- test device
- vitro
- markers
- diagnostic
- specific marker
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title claims abstract description 106
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 46
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims description 74
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 46
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 claims abstract description 27
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 70
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 64
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 35
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 35
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 35
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 34
- 239000004816 latex Substances 0.000 claims description 33
- 229920000126 latex Polymers 0.000 claims description 33
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 25
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 19
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 19
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 16
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 16
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 claims description 16
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 16
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 14
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 11
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 claims description 11
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 11
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 11
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 11
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 11
- 241000701085 Human alphaherpesvirus 3 Species 0.000 claims description 10
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 claims description 9
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 claims description 8
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 8
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 claims description 8
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 claims description 8
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 201000005404 rubella Diseases 0.000 claims description 8
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 8
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 claims description 7
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 claims description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 7
- 208000016604 Lyme disease Diseases 0.000 claims description 7
- 108010048233 Procalcitonin Proteins 0.000 claims description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 7
- 239000003086 colorant Substances 0.000 claims description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 7
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 claims description 7
- CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N procalcitonin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CSSC1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N 0.000 claims description 7
- 241000589968 Borrelia Species 0.000 claims description 6
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims description 6
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 claims description 6
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 claims description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 6
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 claims description 5
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 claims description 5
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 5
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 claims description 5
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 claims description 4
- 241000282465 Canis Species 0.000 claims description 4
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 claims description 4
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 claims description 4
- 241000702617 Human parvovirus B19 Species 0.000 claims description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 4
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 claims description 4
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims description 4
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 claims description 4
- 208000000474 Poliomyelitis Diseases 0.000 claims description 4
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 claims description 4
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 claims description 4
- BMQYVXCPAOLZOK-UHFFFAOYSA-N Trihydroxypropylpterisin Natural products OCC(O)C(O)C1=CN=C2NC(N)=NC(=O)C2=N1 BMQYVXCPAOLZOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 108700022763 carbohydrate-deficient transferrin Proteins 0.000 claims description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 4
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 4
- BMQYVXCPAOLZOK-XINAWCOVSA-N neopterin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)C1=CN=C2NC(N)=NC(=O)C2=N1 BMQYVXCPAOLZOK-XINAWCOVSA-N 0.000 claims description 4
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims description 4
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 claims description 4
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 claims description 4
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 claims description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 3
- 239000013566 allergen Substances 0.000 claims description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 claims description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 claims description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims description 3
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 claims description 3
- 241000223602 Alternaria alternata Species 0.000 claims description 2
- 244000036975 Ambrosia artemisiifolia Species 0.000 claims description 2
- 235000003129 Ambrosia artemisiifolia var elatior Nutrition 0.000 claims description 2
- 241001225321 Aspergillus fumigatus Species 0.000 claims description 2
- 235000018185 Betula X alpestris Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000018212 Betula X uliginosa Nutrition 0.000 claims description 2
- 108010055425 Bordetella pertussis filamentous hemagglutinin adhesin Proteins 0.000 claims description 2
- 241001148604 Borreliella afzelii Species 0.000 claims description 2
- 241001148605 Borreliella garinii Species 0.000 claims description 2
- 206010006417 Bronchial carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 claims description 2
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 claims description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 claims description 2
- 241001647372 Chlamydia pneumoniae Species 0.000 claims description 2
- 241001647378 Chlamydia psittaci Species 0.000 claims description 2
- 241000606153 Chlamydia trachomatis Species 0.000 claims description 2
- 241000606678 Coxiella burnetii Species 0.000 claims description 2
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 claims description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 claims description 2
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 claims description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 2
- 241000238713 Dermatophagoides farinae Species 0.000 claims description 2
- 241000238740 Dermatophagoides pteronyssinus Species 0.000 claims description 2
- 101710173228 Glutathione hydrolase proenzyme Proteins 0.000 claims description 2
- 241000589989 Helicobacter Species 0.000 claims description 2
- 101000972485 Homo sapiens Lupus La protein Proteins 0.000 claims description 2
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims description 2
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 claims description 2
- 102100022742 Lupus La protein Human genes 0.000 claims description 2
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 claims description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 2
- 208000005647 Mumps Diseases 0.000 claims description 2
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 claims description 2
- 235000003805 Musa ABB Group Nutrition 0.000 claims description 2
- 240000008790 Musa x paradisiaca Species 0.000 claims description 2
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 claims description 2
- 102000036675 Myoglobin Human genes 0.000 claims description 2
- 108010062374 Myoglobin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000019040 Nuclear Antigens Human genes 0.000 claims description 2
- 108010051791 Nuclear Antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 claims description 2
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 claims description 2
- 235000015266 Plantago major Nutrition 0.000 claims description 2
- 102000004389 Ribonucleoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010081734 Ribonucleoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 241000710799 Rubella virus Species 0.000 claims description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 2
- 102000004598 Small Nuclear Ribonucleoproteins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010003165 Small Nuclear Ribonucleoproteins Proteins 0.000 claims description 2
- 244000152045 Themeda triandra Species 0.000 claims description 2
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 claims description 2
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 claims description 2
- 241000223997 Toxoplasma gondii Species 0.000 claims description 2
- 201000005485 Toxoplasmosis Diseases 0.000 claims description 2
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 claims description 2
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 claims description 2
- 208000035472 Zoonoses Diseases 0.000 claims description 2
- 235000003484 annual ragweed Nutrition 0.000 claims description 2
- 108010036226 antigen CYFRA21.1 Proteins 0.000 claims description 2
- 229940091771 aspergillus fumigatus Drugs 0.000 claims description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 208000003362 bronchogenic carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 235000006263 bur ragweed Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 claims description 2
- 229940038705 chlamydia trachomatis Drugs 0.000 claims description 2
- 235000003488 common ragweed Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 claims description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 claims description 2
- WGXUDTHMEITUBO-YFKPBYRVSA-N glutaurine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O WGXUDTHMEITUBO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 2
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 claims description 2
- 208000037798 influenza B Diseases 0.000 claims description 2
- 208000010805 mumps infectious disease Diseases 0.000 claims description 2
- AEMBWNDIEFEPTH-UHFFFAOYSA-N n-tert-butyl-n-ethylnitrous amide Chemical compound CCN(N=O)C(C)(C)C AEMBWNDIEFEPTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 206010057887 neonatal lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 2
- 239000013573 pollen allergen Substances 0.000 claims description 2
- 235000009736 ragweed Nutrition 0.000 claims description 2
- -1 scFv Proteins 0.000 claims description 2
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 claims description 2
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 claims description 2
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 2
- 206010048282 zoonosis Diseases 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims 2
- 241000589969 Borreliella burgdorferi Species 0.000 claims 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N Thyrolar Chemical compound IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C(I)=C1 AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims 1
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 claims 1
- 241000607734 Yersinia <bacteria> Species 0.000 claims 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 claims 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 claims 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 claims 1
- 230000003208 anti-thyroid effect Effects 0.000 claims 1
- 229940043671 antithyroid preparations Drugs 0.000 claims 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims 1
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 claims 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 claims 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 claims 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 claims 1
- 229940035722 triiodothyronine Drugs 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 27
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 23
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 12
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 11
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 9
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 8
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 8
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 4
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 4
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 3
- 208000028399 Critical Illness Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 2
- 108010061103 cyclic citrullinated peptide Proteins 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 206010006223 Breast discharge Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010052057 Neuroborreliosis Diseases 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000607447 Yersinia enterocolitica Species 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003949 imides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 238000012205 qualitative assay Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229940098232 yersinia enterocolitica Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
- G01N33/54333—Modification of conditions of immunological binding reaction, e.g. use of more than one type of particle, use of chemical agents to improve binding, choice of incubation time or application of magnetic field during binding reaction
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/01—DNA viruses
- G01N2333/03—Herpetoviridae, e.g. pseudorabies virus
- G01N2333/05—Epstein-Barr virus
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2469/00—Immunoassays for the detection of microorganisms
- G01N2469/20—Detection of antibodies in sample from host which are directed against antigens from microorganisms
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T156/00—Adhesive bonding and miscellaneous chemical manufacture
- Y10T156/10—Methods of surface bonding and/or assembly therefor
Abstract
The invention relates generally to the diagnosis of diseases and in particular to novel methods and devices for the improved use of markers that are associated with the diseases to be diagnosed. The invention is especially suitable for use in the areas of diagnosis, diagnostic tests and rapid tests.
Description
Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik von Multianalyt-Tests und deren Verwen¬ dung Test device for the in vitro diagnosis of multianalyte tests and their use
Die vorliegende Erfindung betrifft allgemein die Diagnose von Erkrankungen und insbeson¬ dere neue Verfahren und Vorrichtungen zur verbesserten Verwendung von Markern, die mit zu diagnostizierenden Erkrankungen assoziiert sind. Die vorliegende Erfindung kann insbe¬ sondere in den Bereichen der Diagnostik, diagnostischen Tests und Schnelltests Anwendung linden.The present invention relates generally to the diagnosis of diseases, and more particularly to novel methods and devices for the improved use of markers associated with diseases to be diagnosed. In particular, the present invention can be used in the fields of diagnostics, diagnostic tests and rapid tests.
Beschreibungdescription
Ein Kliniker benötigt genaue und einfache Verfahren zur Diagnosestellung bei erkrankten oder potentiell erkrankten Patienten. Solche Verfahren ermöglichen es dem entsprechenden Personal, eine mehr oder weniger aggressive und insbesondere geeignetere medizinische Be¬ handlung, insbesondere für kritisch erkrankte Patienten, anzuwenden und zu überwachen.A clinician needs accurate and simple procedures for diagnosing ill or potentially ill patients. Such methods make it possible for the corresponding personnel to apply and monitor a more or less aggressive and in particular more suitable medical treatment, in particular for critically ill patients.
Obwohl frühe Tests relativ einfach waren, z. B. das Messen der Temperatur eines Patienten mit einem Thermometer, haben kürzliche Fortschritte in der Forschung und Technologie den Fortschritt und die Zahl von erhältlichen diagnostischen Tests erheblich erweitert. Im Augen¬ blick können Labortechniker z.B. sowohl die Mengen und Typen von in einem Patienten vor¬ handenen weißen Blutzellen unter der Verwendung von Mikroskopie, um eine Blutprobe zu betrachten, oder automatisierten Systemen feststellen. Die Zahl weißer Blutzellen und die Differenzierung von weißen Blutzellen pro Einheit Volumen ist bei der Erkennung einer mi- krobiellen Infektion in einem Patienten geeignet. Proben von Körperflüssigkeit, z. B., Spu¬ tum, Urin, Blut und Wundproben, können auf geeigneten Platten, z.B., Agarplatten, kultiviert werden, so daß Bakterien, falls in der Probe vorhanden, nachgewiesen und identifiziert wer¬ den können. Zusätzlich können bestimmte virale Infektionen (wie zum Beispiel Hepatitis C (HCV)) unter der Verwendung von Tests, wie zum Beispiel dem "Versant HCV RNA Quali¬ tative Assay" (Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY, USA) identifiziert werden. Diese Tests und Verfahren helfen dem Kliniker oder Arzt bei der korrekten Diagnose von Erkrankungen, die eine geeignetere Behandlung sicherstellen kann.
Viele herkömmliche diagnostische Tests und Verfahren sind jedoch unspezifisch, langsam oder ungenau. Zum Beispiel werden Tests, die lediglich C-reaktives Protein messen, oft als Indikator für Pneumonie und andere Erkrankungen verwendet. Solche unspezifischen Tests sind jedoch in kritischen Situationen, wo die unmittelbare Behandlung erforderlich ist, nicht brauchbar (Clyne et al. (1999) J. Emerg. Med. 17 (6): 1019-1025). Zusätzlich können Tests, die die Erythrocyten-Sedimentationsrate messen, Veränderungen im Proteingehalt von Blut und Blutzellen anzeigen, jedoch kann die Ursache, z.B., Infektion, Arthritis, usw., nicht ohne weiteres Testen bestimmt werden. Daher sind solche unspezifischen Tests und Verfahren nicht in der Lage, den Kliniker bei einer eindeutigen Bestimmung im Hinblick auf die Anwe¬ senheit von zum Beispiel einer Infektion zu unterstützen.Although early tests were relatively simple, e.g. For example, measuring a patient's temperature with a thermometer, recent advances in research and technology have greatly expanded the progress and number of diagnostic tests available. At a glance, laboratory technicians may detect, for example, both the amounts and types of white blood cells present in a patient using microscopy to view a blood sample or automated systems. The number of white blood cells and the differentiation of white blood cells per unit volume is useful in detecting a microbial infection in a patient. Samples of body fluid, e.g. B., sputum, urine, blood and wound samples, can be cultured on suitable plates, eg, agar plates, so that bacteria, if present in the sample, can be detected and identified. In addition, certain viral infections (such as hepatitis C (HCV)) can be identified using assays such as the Versant HCV RNA Qualitative Assay (Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY, USA). These tests and procedures help the clinician or clinician to correctly diagnose illnesses that can ensure more appropriate treatment. However, many conventional diagnostic tests and procedures are nonspecific, slow or inaccurate. For example, assays that measure only C-reactive protein are often used as an indicator of pneumonia and other diseases. However, such nonspecific assays are not useful in critical situations where immediate treatment is required (Clyne et al. (1999) J. Emerg. Med. 17 (6): 1019-1025). Additionally, assays that measure erythrocyte sedimentation rate may indicate changes in the protein content of blood and blood cells, but the cause, eg, infection, arthritis, etc., can not be determined without further testing. Therefore, such nonspecific tests and procedures are not able to assist the clinician in making a clear determination as to the presence of, for example, an infection.
Besonders bei schwer erkrankten Patienten kann eine nicht spezifische, verzögerte oder un¬ genaue Diagnose zu verzögerter und/oder ungeeigneter Behandlung führen, die zu weiteren Komplikationen oder sogar dem Tod führen kann. Die ungeeignete Antibiotikaverabreichung, kann zum Beispiel zu der Entwicklung von Antibiotika-resistenten Stämmen von Bakterien führen. Weiterhin wurde von einer verzögerten Diagnose gefunden, daß diese die Gesamtko¬ sten für die Behandlung von (infizierten) Patienten erhöht (Barenfanger et al. (2000) J. Clin. Microbiol. 38 (8): 2824-2828).Especially in critically ill patients, a non-specific, delayed or inaccurate diagnosis can lead to delayed and / or inappropriate treatment, which can lead to further complications or even death. For example, inappropriate antibiotic administration may lead to the development of antibiotic-resistant strains of bacteria. Furthermore, a delayed diagnosis has been found to increase the overall costs for the treatment of (infected) patients (Barenfanger et al., (2000) J. Clin. Microbiol., 38 (8): 2824-2828).
In der frühen Phase der Erkrankung würde ein Patient am meisten von der schnellen und ge¬ nauen Diagnose profitieren. Solch eine verbesserte Diagnostikwürde eine geeignete Behand¬ lung ermöglichen, um das Pathogen zu beseitigen, die Symptome zu verringern, und/oder weitere Komplikationen zu vermeiden/verringern. Daher sollten Tests, die dazu geeignet sind, eine Vielzahl von Markern oder Signalen zu messen, die der Immunantwort entsprechen, für eine bestimmte Diagnose oder Indikation oder z.B. für ein bestimmtes infektiöses Pathogen spezifisch sein und eine frühe Diagnose ermöglichen.In the early phase of the disease, a patient would benefit most from the fast and accurate diagnosis. Such improved diagnostics would allow appropriate treatment to eliminate the pathogen, reduce symptoms, and / or avoid / reduce further complications. Therefore, assays suitable for measuring a variety of markers or signals corresponding to the immune response should be used for a particular diagnosis or indication, or e.g. be specific for a particular infectious pathogen and allow early diagnosis.
EP 0 725 081 beschreibt die Verwendung von humanen Mx Protein MxA monoklonalen An¬ tikörpern in der Diagnose von viralen Infektionen. Es wurde jedoch gefunden, daß eine Dia¬ gnose basierend auf einem einzelnen infektiösen Indikator nicht ausreichend ist und daß zwei oder mehr Indikatoren erforderlich sind, um eine genaue Diagnose von, z. B, einer Infektion, zu ermöglichen
WO 02/103059 beschreibt ein Verfahren zur Bestimmung des Typs eines infektiösen Patho- gens in einem Patienten, von dem vermutet wird, daß er an einem infektiösen Pathogen leidet. Das Verfahren schließt zuerst ein Messen der Mengen einer Vielzahl von Markern in einer Körperflüssigkeitsprobe des Patienten ein. Die Marker von Interesse werden durch den Pati¬ enten als Teil der angeborenen Immunantwort des Patienten auf das Vorhandensein des infek¬ tiösen Pathogens produziert und zeigen den Typ des infektiösen Pathogens in dem Patienten an. Als nächstes wird ein Markerprofil identifiziert, basierend auf gemessenen Mengen der Vielzahl von Markern. Zuletzt, wenn das Markerprofil eine Infektion anzeigt, dann wird der Typ von infektiösen Pathogen innerhalb des Patienten durch das Markerprofil bestimmt. In bevorzugten Ausführungsformen ist jeder individuelle Marker entweder eine mRNA oder ein Protein. Verfahren zur Identifizierung geeigneter Marker und Kits werden ebenfalls zur Ver¬ fügung gestellt.EP 0 725 081 describes the use of human Mx protein MxA monoclonal antibodies in the diagnosis of viral infections. However, it has been found that a diagnosis based on a single infectious indicator is not sufficient and that two or more indicators are required to provide an accurate diagnosis of, e.g. B, an infection WO 02/103059 describes a method for determining the type of infectious pathogen in a patient suspected of having an infectious pathogen. The method first involves measuring the amounts of a plurality of markers in a body fluid sample of the patient. The markers of interest are produced by the patient as part of the patient's innate immune response to the presence of the infectious pathogen and indicate the type of infectious pathogen in the patient. Next, a marker profile is identified based on measured quantities of the plurality of markers. Finally, if the marker profile indicates infection, then the type of infectious pathogen within the patient is determined by the marker profile. In preferred embodiments, each individual marker is either an mRNA or a protein. Methods for identifying suitable markers and kits are also provided.
WO 02/090964 beschreibt ein Verfahren zur Messung der Performance von Protein- Microarrays. Es wird ein Multiplex Micro-ELISA System zur Verfügung gestellt. WO 99/21012 beschreibt gefärbte Latexpartikel für Immunassays.WO 02/090964 describes a method for measuring the performance of protein microarrays. A multiplex micro-ELISA system is provided. WO 99/21012 describes colored latex particles for immunoassays.
US 2003-008410 beschreibt Immunoassay- Verfahren und -Vorrichtungen, die Durchfluß- Zytometrie verwenden, beschichtete Latex-Mikrosphären und Fluorochrom-markierte Anti¬ körper, um gleichzeitig die Anwesenheit und Menge von mehreren Antigenen oder Antikör¬ pern in einer Probe zu analysieren. Die Verwendung von Partikeln (Beads) als feste Träger für Antigen-Antikörperreaktionen, um Antigene oder Antikörper in Serum und anderen Körper¬ flüssigkeiten nachzuweisen, wird als besonders attraktiv beschrieben, wenn dies mit Durch- flußzytometrie verbunden wird. Es ist vorgesehen, Beads in verschiedenen Größen, Farben oder Formen zu verwenden, wobei jedes Bead mit einem unterschiedlichen Protein oder An¬ tikörper versehen ist.US 2003-008410 describes immunoassay methods and devices that use flow cytometry, coated latex microspheres, and fluorochrome-labeled antibodies to simultaneously analyze the presence and amount of multiple antigens or antibodies in a sample. The use of particles (beads) as solid supports for antigen-antibody reactions to detect antigens or antibodies in serum and other body fluids is described as being particularly attractive when combined with flow cytometry. It is intended to use beads of various sizes, colors or shapes, each bead being provided with a different protein or antibody.
Multianalyt-Technolgien bieten die Möglichkeit, mehrere Analyten als Panel in einem ge¬ meinsamen Testansatz zu bestimmen. Daher sucht die klinische Diagnostik herkömmlich ent¬ sprechend einer bestimmten spezifischen Fragestellung nach relevanten Markern, die zusam¬ mengestellt und als sogenannte "Multiplex-Technologie" bezeichnet in den Verkehr gebracht werden.
Zu den Multianalyt-Technologien gehören die Chiptechnologie, die bead-basierte Multiplex -Multi-analyte technologies offer the possibility of determining several analytes as a panel in a common test batch. Therefore, clinical diagnostics are traditionally seeking a relevant specific question for relevant markers, which are put together and marketed as so-called "multiplex technology". Multi-analyte technologies include chip technology, bead-based multiplexing
Technik, und auch die Lineblots können dazu gezählt werden. Bisher sind nur Panels (Samm¬ lungen bestimmter nachzuweisender Marker) auf dem Markt, die Analyten "einer Art" nach¬ weisen, d.h. Antikörper gegen verschiedene Infektionserreger oder Untereinheiten einzelner Erreger, Autoantikörper oder Antikörper gegen Allergene oder Antigene wie Cytokine, Hor¬ mone und/oder bestimmter Tumormarker.Technology, and also the line blots can be counted. So far, only panels (collections of specific markers to be detected) on the market which detect analytes of "one type", i. Antibodies to various infectious agents or subunits of individual pathogens, autoantibodies or antibodies to allergens or antigens such as cytokines, hormones and / or specific tumor markers.
Bisher bekannte Panel sind unter anderem Line-Blots der Firma Euroimmun (Deutschland); Euroline® Autoimmundiagnostik-Teststreifen mit bis zu 14 Antigenen; Euroline® Allergie¬ diagnostik-Teststreifen mit verschiedenen Profilen und Testsätze Euroline® Infektionsserolo¬ gie, wie z.B. das sogenannte TORCH-Profil. Weiterhin existieren Biochips der Firma Euro¬ immun; wie etwa der "Biochip - Mosaiken Infektionsserologie": EBV und Bead-basierte Multiplex-Systeme.Previously known panels include line blots from Euroimmun (Germany); Euroline® autoimmune diagnostic test strips with up to 14 antigens; Euroline® Allergy Diagnostic Test Strips with Different Profiles and Test Sets Euroline® Infection Serology, such as the so-called TORCH profile. Furthermore, biochips of the company Euro immune exist; such as the "Biochip - Mosaics Infectious Serology": EBV and Bead-based Multiplex Systems.
Bisherige Lehren, so wie die aus der von EP 0 725 081, US 2003-008410 oder WO 02/103059 beschreiben keine diagnostischen Verfahren oder Tests, die auf einer Vielzahl von Signalen oder Markern beruhen, die geeignet zusammengestellt sind und sich schnell und effektiv auswerten lassen, um so eine schnelle, kosteneffektive und genaue Diagnose zu er¬ möglichen. Die bisherigen Panel sind nicht mit ergänzenden Parametern kombiniert, die z.B. zu den sogenannten "unspezifischen" Markern zählen, deren Bestimmung jedoch die Aussa¬ gekraft eines Testergebnisses- auch hinsichtlich der Plausibilität - unerwartet erhöhen können.Previous teachings, such as those of EP 0 725 081, US 2003-008410 or WO 02/103059, do not disclose any diagnostic methods or tests based on a variety of signals or markers that are properly assembled and evaluated quickly and effectively so as to allow a quick, cost effective and accurate diagnosis. The previous panels are not combined with supplementary parameters, e.g. belong to the so-called "unspecific" markers, whose determination, however, can unexpectedly increase the accuracy of a test result, also with regard to plausibility.
Die Kombination von Parametern aus verschiedenen Bereichen der Laboratoriumsmedizin in einem Testansatz ist bisher nicht bekannt (z. B. Bereiche Serologie/Immunologie und klini¬ sche Chemie). Die Entwicklung von solchen Tests stellt daher einen wichtigen Fortschritt im Bereich der diagnostischen Tests und der Medizin dar. Die vorliegende Erfindung erfüllt die¬ se und weitere Bedürfnisse des Stands der Technik.The combination of parameters from various areas of laboratory medicine in a test batch is not yet known (eg, areas of serology / immunology and clinical chemistry). The development of such tests therefore represents an important advance in the field of diagnostic tests and medicine. The present invention fulfills these and other needs of the prior art.
Es ist somit eine erste Aufgabe der Erfindung, den oben beschriebenen Bedarf im Stand der Technik durch das zur Verfügung stellen einer verbesserten Testvorrichtung für die schnellere und genauere Diagnostik von Multianalyt-Tests zu erfüllen. Die Vorrichtung sollte weiter so beschaffen sein, daß sie für ein automatisiertes genaues Verfahren geeignet ist, das einfach durchzuführen ist.
Gemäß eines ersten Aspekts wird diese Aufgabe durch eine Testvorrichtung für die in vitroIt is thus a first object of the invention to meet the above-described need in the art by providing an improved test device for the faster and more accurate diagnostics of multi-analyte tests. The device should be further designed to be suitable for an automated, accurate procedure that is easy to perform. According to a first aspect, this object is achieved by a test device for in vitro
Diagnostik von Analyten von Interesse in einer Probe gelöst, die eine Trägermatrix umfaßt, auf die ein Testpanel von mindestens einem spezifischen Markern aufgebracht ist, der für eine herkömmliche Diagnose ausgewählt aus der Gruppe von spezifischen Markern für Entzün¬ dungserkrankungen, Impfstatus, Schwangerschaft, Infektionserkrankungen, Allergien, viralen Erkrankungen, Blutbank-Untersuchung, Liquor-Diagnostik, Autoimmunerkrankungen, Karzi¬ nomen, akutem Herzinfarkt, Diabetes, Alkoholismus und Schildrüsenfunktion und Kombina¬ tionen davon untersucht wird, und auf die weiterhin mindestens ein diagnostisch unspezifi¬ scher Marker aufgebracht ist, ausgewählt aus der Gruppe von Entzündungsmarkern, akuten Infektionsmarkern, chronischen Infektionsmarkern und Kombinationen davon.Diagnostics of analytes of interest in a sample comprising a carrier matrix to which is applied a test panel of at least one specific marker selected for a conventional diagnosis from the group of specific markers for inflammatory diseases, vaccination status, pregnancy, infectious diseases, Allergies, viral diseases, blood bank examination, CSF diagnostics, autoimmune diseases, carcinomas, acute myocardial infarction, diabetes, alcoholism and thyroid function and combinations thereof is examined, and to which further at least one diagnostic unspecific marker is applied from the group of inflammatory markers, acute infection markers, chronic infection markers and combinations thereof.
Die erfindungsgemäße Kombination von Parametern aus verschiedenen Bereichen der La¬ bormedizin und/oder -diagnostik in einem einzigen Testansatz ist bisher nicht bekannt. Ein Beispiel für solche Bereiche sind Serologie/Immunologie und klinische Chemie. Der erfin¬ dungsgemäße Test enthält ergänzende Parameter, die die Aussagekraft des Tests entscheidend verbessern.The combination according to the invention of parameters from various areas of storage medicine and / or diagnostics in a single test batch is hitherto unknown. An example of such areas are serology / immunology and clinical chemistry. The test according to the invention contains supplementary parameters which decisively improve the validity of the test.
Mit der erfindungsgemäßen Multianalyt- Technologie kann durch die erfindungsgemäße Kombination erstmals die gesamte Bandbreite immunologischer Tests aus z.B. den Bereichen Infektionsserologie, Tumordiagnostik, Allergologie, Autoimmunerkrankungen und klinische Chemie nach dem gleichen Prinzip besonders an einem Automaten effektiv abgearbeitet wer¬ den. Diese universell einsetzbare und einheitliche Methodik erlaubt es, die für jeden Patienten individuell notwendigen Umfang an Untersuchungen in einem Testansatz äußerst kostengün¬ stig und schnell durchzuführen. Die resultierende klare Diagnosestellung ermöglicht das früh¬ zeitige Einleiten therapeutischer Maßnahmen oder gar prophylaktische Interventionen. Da¬ durch können schwerwiegende, fortgeschrittene oder chronifizierte Erkrankungen vermindert werden.With the multi-analyte technology according to the invention, the combination according to the invention makes it possible for the first time to obtain the entire range of immunological tests from e.g. In the areas of infection serology, tumor diagnostics, allergology, autoimmune diseases and clinical chemistry the same principle, especially on a machine, is effectively carried out. This universally applicable and uniform methodology makes it possible to carry out the individually required amount of examinations in a test batch extremely inexpensively and quickly for each patient. The resulting clear diagnosis allows the early initiation of therapeutic measures or even prophylactic interventions. As a result, serious, advanced or chronic diseases can be reduced.
Bevorzugt ist eine Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Erfindung, wobei der Marker ausgewählt ist aus IgG, IgA, IgM oder IgE oder Kombinationen davon, wobei diese Marker gegen bestimmte Antigene gerichtet sind oder der Marker ein bestimm¬ tes nachzuweisendes Antigen selber ist. Weiterhin können Marker Nukleinsäuren sein, insbe¬ sondere Nukleinsäureabschnitte, z. B. RNA- oder DNA- Abschnitte von Zellen oder Viren, wie zum Beispiel im Falle von CMV. Weiter bevorzugt umfaßt das Testpanel (auch Marker-
kombination) Antikörper oder Antigene, die kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert vor¬ liegen. Techniken zur Immobilisierung der erfindungsgemäßen Marker auf Oberflächen hän¬ gen von der Art der verwendeten Oberfläche und dem Marker ab und sind dem Fachmann sehr gut bekannt.Preferred is a test device for in vitro diagnostics of the present invention, wherein the marker is selected from IgG, IgA, IgM or IgE or combinations thereof, wherein these markers are directed against certain antigens or the marker is a bestimm¬ tes antigen to be detected itself. Furthermore, markers can be nucleic acids, in particular nucleic acid segments, eg. B. RNA or DNA sections of cells or viruses, such as in the case of CMV. More preferably, the test panel (also marker combination) antibodies or antigens which are immobilized covalently or non-covalently. Techniques for immobilizing the markers according to the invention on surfaces depend on the type of surface used and the marker and are very well known to the person skilled in the art.
Weiter bevorzugt ist eine Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Erfin¬ dung, wobei die Matrix in Form eines Teststreifens, einer Membran, eines Biochips, Latex- partikeln und/oder anderen Partikeln vorliegt. Besonders bevorzugt ist eine erfindungsgemäße Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik, wobei die Membran aus Nylon ist oder die Matrix in Form von Latexpartikeln vorliegt. Die Matrix kann auch aus einem geeigneten herkömmli¬ chen porösen natürlichen oder synthetischen (Polymer-)Material bestehen.Further preferred is a test device for in vitro diagnostics of the present invention, wherein the matrix is in the form of a test strip, a membrane, a biochip, latex particles and / or other particles. Particularly preferred is a test device according to the invention for in vitro diagnostics, wherein the membrane is made of nylon or the matrix is in the form of latex particles. The matrix can also consist of a suitable conventional porous natural or synthetic (polymer) material.
In einer besonderen Ausführungsform stützt sich die erfϊndungsgemäße Multianalyt- Techno¬ logie auf ein Prinzip, das aus der Durchflußzytometrie gut bekannt ist. Ein großer Vorteil die¬ ser Technologie ist darin zu sehen, daß entsprechende Geräte meist bereits bei den Anwen¬ dern vorhanden sind. Darüber hinaus wird die diagnostische Leistungsfähigkeit der immuno¬ logischen Teste durch die erhöhte Sensitivität der Fluoreszenz-Signalgebung im Vergleich zur ELISA-F arbreaktion erhöht. Im Gegensatz zur ELISA-Technik, bei der die Kavitätswände der Mikrotiterplatte zur adsorptiven Kopplung der Analyte bzw. Antikörper verwendet werden, setzt die erfindungsgemäße Multianalyt Technologie Latexpartikel mit einem Durchmesser von z.B. 4,0 μm als Festphase ein. Die prinzipiell ununterscheidbaren Partikel können mit distinkten Intensitäten eines roten Fluorophors gefärbt (siehe Abbildung 1) werden, wodurch ein Sortiment von z.B. zehn unterschiedlich gefärbten Latexpartikel-Sets entsteht.In a particular embodiment, the multi-analyte technology according to the invention is based on a principle which is well known from flow cytometry. A great advantage of this technology is the fact that corresponding devices are usually already present in the users. In addition, the diagnostic performance of the immunological tests is increased by the increased sensitivity of fluorescence signaling in comparison to the ELISA detection reaction. In contrast to the ELISA technique, in which the cavity walls of the microtiter plate are used for adsorptive coupling of the analytes or antibodies, the multianalyte technology according to the invention uses latex particles with a diameter of e.g. 4.0 μm as solid phase. The principally indistinguishable particles may be stained with distinct intensities of a red fluorophore (see Figure 1), thereby producing an assortment of e.g. Ten differently colored latex particle sets are created.
Jedes Set wird mit unterschiedlichen Antigenen kovalent beschichtet. Um nun mehrere Unter¬ suchungen gleichzeitig in einem Testansatz durchführen zu können, werden die antigenbe- schichteten Partikel-Sets zu einem Cocktail gemischt. Diese Mischung stellt einen erfin¬ dungsgemäßen Multianalyt-Plex dar (siehe Abbildung 2). Während der Inkubation des erfin¬ dungsgemäßen Multianalyt- Plexes mit einem Patientenserum, binden vorhandene Antikörper an die - ihrer Spezifität entsprechenden - Latexpartikel. Im folgenden Inkubationsschritt rea¬ gieren die mit einem Fluoreszenzfarbstoff markierten Konjugate mit den gebundenen Anti¬ körpern (siehe Abbildung 3). Die Menge gebundener Konjugatmoleküle ist proportional zur Antikörperkonzentration. Der erfindungsgemäße Multianalyt- Plex trägt nun je Latexpartikel- Set eine variable Menge der Konjugat-Fluoreszenz auf seiner Oberfläche und wird von einem
für Partikel-Messungen spezialisierten Durchflußzytometer, einem sogenannten Partikel- Fluoreszenz-Durchfluß-Meßgerät, analysiert. Diese Meßgeräte analysieren individuelle La¬ texpartikel nach ihrer Fluoreszenz und können gleichzeitig drei verschiedene Fluoreszenzfar¬ ben (Orange, Rot, Dunkelrot) unterscheiden. Mit Hilfe einer Software klassifiziert das Gerät die Fluoreszenz jedes Partikels zu den passenden Partikel-Sets und ordnet die entsprechenden Analytbestimmungen zu. Die mittlere Koηjugat-Fluoreszenz je Partikel-Set ist ein Maß für die Konzentration des entsprechenden Analyten in der Serumprobe.Each set is covalently coated with different antigens. In order to be able to carry out a number of tests simultaneously in one test batch, the antigen-coated particle sets are mixed to give a cocktail. This mixture is a multi-analyte Plex according to the invention (see FIG. 2). During the incubation of the multianalyx plexes according to the invention with a patient serum, existing antibodies bind to the latex particles corresponding to their specificity. In the following incubation step, the conjugates labeled with a fluorescent dye react with the bound anti-bodies (see FIG. 3). The amount of bound conjugate molecules is proportional to the antibody concentration. The multianalyte plex according to the invention now carries a variable amount of the conjugate fluorescence on each surface of each latex particle set and is obtained by a for particle measurements specialized flow cytometer, a so-called particle fluorescence flowmeter, analyzed. These gauges analyze individual tex particles for their fluorescence and can simultaneously differentiate between three different fluorescence colors (orange, red, dark red). Using software, the device classifies the fluorescence of each particle into the appropriate particle sets and assigns the appropriate analyte determinations. The mean co-conjugate fluorescence per particle set is a measure of the concentration of the corresponding analyte in the serum sample.
Bevorzugt ist somit eine Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Erfin¬ dung, wobei die Trägermatrix aus unterschiedlich markierten Trägermaterialien zusammenge¬ setzt ist. Weiter bevorzugt ist, daß die Trägermaterialien mit einem Farbstoff in unterschiedli¬ chen Intensitäten eingefärbt sind.Thus, a test device for in vitro diagnostics of the present invention is preferred, the carrier matrix being composed of differently labeled carrier materials. It is further preferred that the support materials are colored with a dye in unterschiedli¬ chen intensities.
Ein besonderer Aspekt betrifft eine Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik der vorliegen¬ den Erfindung, bei der jedes Trägermaterial mit mindestens einem Antikörper oder Antigen, kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert, versehen ist. Sinnvollerweise umfaßt die erfϊn- dungsgemäße Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik eine definierte Mischung von geeig¬ net markierten Trägermaterialien. Hier macht die Verwendung von Latexpartikeln in Flüssig¬ keiten eine völlig flexible Gestaltung der Teste zu Multiplex-Testpanels möglich: Je nach Fragestellungen für den jeweiligen Patienten können beschichtete Partikel-Sets zu individuel¬ len erfindungsgemäßen Multianalyt- Test-Cocktails zusammengestellt werden. Die diagnosti¬ sche Leistungsfähigkeit der Multianalyt- Tests wird auch durch die höhere Sensitivität der Fluoreszenz-Signalgebung (Faktor 5) im Vergleich zur ELISA-Farbreaktion verbessert.A particular aspect relates to a test device for in vitro diagnostics of the present invention, in which each carrier material is provided with at least one antibody or antigen, immobilized covalently or noncovalently. It makes sense for the in vitro diagnostic test device according to the invention to comprise a defined mixture of suitably labeled carrier materials. Here, the use of latex particles in liquids makes a completely flexible design of the tests for multiplex test panels possible: Depending on the questions for the particular patient, coated particle sets can be combined to form individual multianalyte test cocktails according to the invention. The diagnostic performance of the multianalyte tests is also improved by the higher sensitivity of fluorescence signaling (factor 5) compared to the ELISA color reaction.
Ein wesentlicher Vorteil der Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Er¬ findung wird dadurch erreicht, daß verschiedene herkömmliche Testpanel/Marker durch be¬ stimmte zusätzlichen Parameter ergänzt werden, die a) traditionell bei den entsprechenden diagnostischen Fragestellungen in separaten Untersuchungsgängen mitbestimmt werden und/oder b) die als Indikations-unspezifische Marker gelten. Nicht limitierende Beispiele da¬ für sind z.B. der Gesamtanstieg von IgE als unspezifischer Marker bei der Diagnostik be¬ stimmter Allergien unter der Verwendung spezifischer Allergiemarker (z.B. IgE gegen Kat- zenepithelien), oder Procalcitonin als generellem Entzündungsmarker im Falle der Diagnostik bestimmter Infekte. Diese zusätzliche parallele (gleichzeitige) Messung gemäß den erfin¬ dungsgemäßen Untersuchungen erhärtet die Aussagekraft von Ergebnissen spezieller Tests.
Diese erfindungsgemäße Kombination führt gleich zu mehreren Vorteilen, so unter anderem zu einerAn essential advantage of the test device for in vitro diagnostics of the present invention is achieved in that various conventional test panels / markers are supplemented by certain additional parameters which are a) traditionally co-determined in the corresponding diagnostic questions in separate examination procedures and / or b) which are considered as indication unspecific markers. Non-limiting examples of this are, for example, the overall increase of IgE as a non-specific marker in the diagnosis of certain allergies using specific allergy markers (eg IgE against cat epithelia), or procalcitonin as a general inflammatory marker in the case of the diagnosis of certain infections. This additional parallel (simultaneous) measurement according to the investigations according to the invention confirms the informative value of results of special tests. This combination according to the invention leads to several advantages, including but not limited to one
- Erhöhung der Aussagekraft und Plausibilität von Testergebnissen; z. B. der Erhärtung der Aussagekraft bzgl. des Infektionsstadiums;- increasing the validity and plausibility of test results; z. B. the hardening of the significance of. Infection stage;
- durch den Einsatz dieser Testkombinationen läßt sich in Fällen akuter klinischer Sympto¬ matik die Diagnosestellung beschleunigen; undBy using these test combinations, the diagnosis can be accelerated in cases of acute clinical symptomatology; and
- eine Kosteneinsparung durch Kombination von Parametern, die sonst -z. T. in verschiede¬ nen Abteilungen - mit unterschiedlichen Testsystemen durchgeführt werden.- A cost saving through combination of parameters, otherwise -z. T. in various departments - be carried out with different test systems.
Erfindungsgemäß können mit einer Testvorrichtung unter anderem folgende herkömmliche spezifische Marker-Testkombinationen verwendet werden, die dann geeignet ergänzt werden können.According to the invention, among other things, the following conventional specific marker test combinations can be used with a test device, which can then be suitably supplemented.
Marker für den Impfstatus können ausgewählt sein aus IgG gegen Tetanus toxoid, Diphteria toxoid, Bordetella pertussis toxoid und Bordetella pertussis FHA. Marker für ToRCH können ausgewählt sein aus IgG oder IgM gegen Toxoplasmose, Rubella, Cytomegalovirus, HSVl, HSV2, VZV und Parvovirus B 19. Marker für die respiratorisch virale Diagnose können aus¬ gewählt sein aus IgG oder IgA gegen Adenovirus, Influenza A, Influenza B, Parainfluenza 1- 3, RSV und Enteroviren. Marker für die respiratorisch virale Diagnose können ausgewählt sein aus IgG oder IgM gegen Chlamydia, Coxiella burnetii Phase II, Leginella pneumophila und Mycoplasma.Markers for vaccination status may be selected from IgG against tetanus toxoid, Diphteria toxoid, Bordetella pertussis toxoid and Bordetella pertussis FHA. Markers for ToRCH may be selected from IgG or IgM against Toxoplasmosis, Rubella, Cytomegalovirus, HSV1, HSV2, VZV and Parvovirus B19. Markers for respiratory viral diagnosis may be selected from IgG or IgA against Adenovirus, Influenza A, Influenza B , Parainfluenza 1-3, RSV and Enteroviruses. Markers for respiratory viral diagnosis may be selected from IgG or IgM against Chlamydia, Coxiella burnetii phase II, Leginella pneumophila and Mycoplasma.
Marker für Kinderkrankheiten können ausgewählt sein aus IgG oder IgM gegen Bordetella pertussis, Masern, Mumps, Rubella und Varizella-Zoster Virus (VZV).Markers for childhood diseases may be selected from IgG or IgM against Bordetella pertussis, measles, mumps, rubella and varicella-zoster virus (VZV).
Marker für Zoonosen können ausgewählt sein aus IgG oder IgM gegen Borrelia p41 intern, OSP-C Borrelia burgdorferii, OSP-C Borrelia afzelii, OSP-C Borrelia garinii, plOO, p41 und FSME.Markers for zoonoses may be selected from IgG or IgM against Borrelia p41 intern, OSP-C Borrelia burgdorferii, OSP-C Borrelia afzelii, OSP-C Borrelia garinii, plOO, p41 and FSME.
Marker für Polio können ausgewählt sein aus IgG gegen Polio 1, Polio2 und Polio3.Polio markers can be selected from IgG against Polio 1, Polio2 and Polio3.
Marker für EBV können ausgewählt sein aus IgG oder IgM gegen VCA pl8, p23, EBNA und early antigen.
Marker für Chlamydia können ausgewählt sein aus IgG oder IgM gegen Chlamydia tracho¬ matis, Chlamydia pneumoniae und Chlamydia psittaci.Markers for EBV may be selected from IgG or IgM against VCA pl8, p23, EBNA and early antigen. Markers for Chlamydia may be selected from IgG or IgM against Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae and Chlamydia psittaci.
Marker für den Gastrointestinaltrakt können ausgewählt sein aus IgG oder IgA gegen Helico¬ bacter pylorii, Campylobacter jejunii und Yersinia enter ocolitica.Markers for the gastrointestinal tract may be selected from IgG or IgA against Helicobacter pylorii, Campylobacter jejunii and Yersinia enter ocolitica.
Marker für Pilzinfektionen können ausgewählt sein aus IgG oder IgM gegen Aspergillus fu- migatus und Candida albicans.Markers for fungal infections may be selected from IgG or IgM against Aspergillus fumigatus and Candida albicans.
Marker für die Rheumadiagnose können ausgewählt sein aus Rheumafaktoren, HLA- Markern, sowie Autoimmunantikörpern. Marker für Autoimmunerkrankungen (Sjögren- Syndrom (SS-A), neonataler Lupus erythematodes (LE), Sjögren-Syndrom (SS-B)) können ausgewählt sein aus Aantikörpern gegen extrahierbare nukleare Antigene, , snRNP (Ribonu- cleoprotein, systemischer LE), ss-DNA, dsDNA und c-ANCA (cytoplasmic-anti-neutrophil cytoplasm antibody). Marker für Tierallergene können ausgewählt sein aus IgE gegen Katze- nepithelien (el), Hundeepithelien (e2), Milbe D. pteronyssinus (dl), Milbe D. farinae (d2) und der Hefe Alternaria tenuis (m6). Marker für Pollenallergene können ausgewählt sein aus IgE gegen echte Ambrosie (wl), Spitzwegerich (w9), Hundezahngras (g2), Wiesenrispengras (g8), Eiche (t7), Ulme (t8) und Birke (t3).Rheumatoid diagnostic markers may be selected from rheumatoid factors, HLA markers, as well as autoimmune antibodies. Markers for autoimmune diseases (Sjögren syndrome (SS-A), neonatal lupus erythematosus (LE), Sjögren syndrome (SS-B)) can be selected from aantibodies to extractable nuclear antigens, snRNP (ribonucleoprotein, systemic LE), ss-DNA, dsDNA and c-ANCA (cytoplasmic-anti-neutrophil cytoplasm antibody). Markers for animal allergens may be selected from IgE to cat nepithelia (el), canine epithelia (e2), mite D. pteronyssinus (dl), mite D. farinae (d2) and the yeast Alternaria tenuis (m6). Pollen allergen markers may be selected from IgE against true ragweed (wl), plantain (w9), canine grass (g2), meadow bluegrass (g8), oak (t7), elm (t8) and birch (t3).
Marker für das Mammakarzinom können ausgewählt sein aus CAl 5-3, CAl 5 549 und MCA. Marker für das Bronchialkarzinom können ausgewählt sein aus NSE und CYFRA 21-1.Mammary carcinoma markers can be selected from CAI 5-3, CAI 549 and MCA. Markers for bronchial carcinoma may be selected from NSE and CYFRA 21-1.
Marker für den akuten Herzinfarkt können ausgewählt sein aus Myoglobin, Troponin T und Creatinkinase.Markers for acute myocardial infarction may be selected from myoglobin, troponin T and creatine kinase.
Marker für die Schilddrüsenfunktion können ausgewählt sein aus TSH, Thyroxin (T4), Tri¬ jodthyronin, freies Hormon fT3, freies Hormon fT4 und Antikörpern gegen Thyreoidale Pe- roxidase, Thyreoglobulin und TSH.Thyroid function markers may be selected from TSH, thyroxine (T4), triethyronine, free hormone fT3, free hormone fT4 and antibodies to thyroid peptidase, thyroglobulin and TSH.
Marker für die Schwangerschaftsdiagnostik können ausgewählt sein aus hcG, AFP, Antikör¬ pern gegen Rubella, CMV, Toxoplasma gondii, HSV, Parvovirus B19 und Varizella-Zoster- Virus
Marker für die Liquordiagnostik können ausgewählt sein aus IgG oder IgM gegen Masern, Rubella, VZV, HSV FSME, EBV, Enteroviren und Borrelien.Markers for pregnancy diagnostics can be selected from hcG, AFP, antibodies against rubella, CMV, Toxoplasma gondii, HSV, parvovirus B19 and varicella-zoster virus Markers for CSF diagnostics may be selected from IgG or IgM against Measles, Rubella, VZV, HSV TBE, EBV, Enteroviruses and Borrelia.
Marker für Alkoholismus können ausgewählt sein aus CDT (Carbohydrat-defizientes Trans- ferrin), Gamma-GT, pankreatische Elastase.Markers for alcoholism may be selected from CDT (carbohydrate-deficient transferrin), gamma-GT, pancreatic elastase.
Wie oben erwähnt, werden diese Marker durch bestimmte zusätzlichen Parameter ergänzt, die a) traditionell bei den entsprechenden diagnostischen Fragestellungen in separaten Untersu¬ chungsgängen mitbestimmt werden und/oder b) die als Indikations-unspezifische Marker gel¬ ten. Diese Marker werden im Kontext der vorliegenden Erfindung als „unspezifϊsche Marker" verstanden. Nicht limitierende Beispiele dafür sind z.B. der Gesamtanstieg von IgE als unspe¬ zifischer Marker bei der Diagnostik bestimmter Allergien unter der Verwendung spezifischer Allergiemarker (z.B. IgE gegen Katzenepithelien), oder Procalcitonin als generellem Entzün¬ dungsmarker im Falle der Diagnostik bestimmter Infekte.As mentioned above, these markers are supplemented by certain additional parameters which a) are traditionally co-determined in the corresponding diagnostic questions in separate investigations and / or b) which are used as indication-unspecific markers. These markers are used in the context of Non-limiting examples of this are, for example, the overall increase of IgE as unspecific markers in the diagnosis of certain allergies using specific allergy markers (eg IgE against cat epithelia), or procalcitonin as a general inflammatory marker in the case Diagnosis of certain infections.
Bevorzugt ist daher eine Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik gemäß der Erfindung, wobei dieser diagnostisch „unspezifische Marker" ausgewählt ist aus der Albuminkonzentra¬ tion, der Gesamt-Immunglobulinkonzentration, zum Beispiel Gesamt-IgE-Konzentration im Falle von Allergien, Neopterin, C-reaktivem Protein (CRP), cyclisches citrulliniertes Peptid und Procalcitonin und Kombinationen davon.Preference is therefore given to a test apparatus for in vitro diagnostics according to the invention, wherein this diagnostically "unspecific marker" is selected from the albumin concentration, the total immunoglobulin concentration, for example total IgE concentration in the case of allergies, neopterin, C- reactive protein (CRP), cyclic citrullinated peptide and procalcitonin, and combinations thereof.
Besonders bevorzugt ist die Ergänzung des Panels für die Liquordiagnostik, wobei obligato¬ risch zu bestimmende Parameter Albumin und Gesamt-Immunglobulinkonzentration sind, mit Neopterin zur Unterscheidung akuter oder chronischer Infektionen von abgelaufenen, ausge¬ heilten Infektionen (Beispiel Neuroborreliose).Particularly preferred is the addition of the panel for CSF diagnostics, where obligatory parameters to be determined are albumin and total immunoglobulin concentration, with neopterin for distinguishing acute or chronic infections from expired, cured infections (for example neuroborreliosis).
Die Neopterinspiegel steigen in frühen Infektionsstadien, noch vor der Serokonversion, bei Infektionen durch Viren, Protozoen und intrazellulären Bakterien an. Dies ermöglicht die Dif¬ ferentialdiagnose akuter viraler und bakterieller Infektionen und so eine Verminderung des Infektionsrisikos bei z.B. Bluttransfusionen.Neopterin levels increase in early stages of infection, even before seroconversion, in infections caused by viruses, protozoa and intracellular bacteria. This makes possible the differential diagnosis of acute viral and bacterial infections and thus a reduction of the risk of infection at e.g. Blood transfusions.
Besonders bevorzugt ist weiter die Ergänzung des Panels zur Differentialdiagnose akuter In¬ fektionen sowie eines "Blutbank-Panels" zum Ausschluß akuter Infektionen mit "unspezifi-
schen" Infektions- bzw. Entzündungsparametern, wie z.B. C- reaktivem Protein (CRP), einemThe addition of the panel for the differential diagnosis of acute infections and a "blood bank panel" for the exclusion of acute infections with "non-specific "infection or inflammation parameters, such as C-reactive protein (CRP), a
Routine- Entzündungsparameter; dieser dient neben Blutsenkung und Eiweißelektrophorese der Abschätzung des Ausmaßes der Immunreaktion.Routine inflammatory parameters; In addition to blood sedimentation and protein electrophoresis, this serves to estimate the extent of the immune reaction.
Besonders bevorzugt ist noch weiter die Ergänzung des Panels mit Markern für Rheumafakto¬ ren, wie etwa HLA- Markern, mit dem cyclischen citrullinierten Peptid.Even more preferred is the addition of the panel with markers for Rheumafakto¬ ren, such as HLA markers, with the cyclic citrullinated peptide.
Weiterhin bevorzugt ist die Ergänzung der Panel mit Procalcitonin, einem relativ neuen Pro¬ gnoseparameter. Dieser ist selektiv für bakterielle Infektionen und ist wesentlich sensitiver als bisherige Routine- Entzündungs- Parameter. Ein Verdacht auf eine bakterielle Infektion wird somit erhärtet. (Unterscheidung zwischen bakteriellen und viral bedingten Infektionen, Diffe¬ renzierung von bakteriell- infektiös bedingtem Fieber gegenüber anderen Ursachen). Procalci¬ tonin ist auch indikativ für systemische Pilzinfektionen, was eine Abgrenzung von lokalen Pilzinfektionen und eine Verwendung als Prognosemarker bei schweren Pilzinfektionen er¬ möglicht.Further preferred is the supplementation of the panel with procalcitonin, a relatively new prognosis parameter. This is selective for bacterial infections and is much more sensitive than previous routine inflammatory parameters. A suspicion of a bacterial infection is thus confirmed. (Differentiation between bacterial and viral infections, differentiation of bacterially infectious fever from other causes). Procalcitonin is also indicative of systemic fungal infections, which allows delineation of local fungal infections and use as prognostic marker in severe fungal infections.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer erfindungsgemäßen Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik. Dieses umfasst zuerst das Aufbringen eines Testpanels von mindestens einem spezifischen Marker, der für eine her¬ kömmliche Diagnose ausgewählt aus der Gruppe von spezifischen Markern für Entzündungs¬ erkrankungen, Impfstatus, Schwangerschaft, Infektionserkrankungen, Allergien, viralen Er¬ krankungen, Blutbank-Untersuchung, Liquor-Diagnostik, Autoimmunerkrankungen, Karzi¬ nomen, akutem Herzinfarkt, Diabetes, Alkoholismus und Schildrüsenfunktion und Kombina¬ tionen davon untersucht wird auf eine Trägermatrix, dann das Aufbringen von mindestens einem diagnostisch unspezifischen Marker, ausgewählt aus der Gruppe von Entzündungsmar¬ kern, akuten Infektionsmarkern, chronischen Infektionsmarkern und Kombinationen davon auf dieselbe oder eine getrennte Trägermatrix, und, gegebenenfalls, Kombinieren der Testma- trices aus dem ersten und zweiten Schritt. Die Marker können entweder auf getrennten Testmatrices vorliegen oder auf diskreten Stellen einer gemeinsamen Matrix vorliegen.Another aspect of the present invention relates to a method for producing a test device according to the invention for in vitro diagnostics. This comprises firstly applying a test panel of at least one specific marker selected for a conventional diagnosis from the group of specific markers for inflammatory diseases, vaccination status, pregnancy, infectious diseases, allergies, viral diseases, blood bank examination, cerebrospinal fluid Diagnostics, autoimmune diseases, carcinomas, acute myocardial infarction, diabetes, alcoholism and thyroid function and combinations thereof is investigated on a carrier matrix, then the application of at least one diagnostically nonspecific marker selected from the group of inflammatory markers, acute infection markers, chronic infection markers and combinations thereof on the same or a separate carrier matrix, and, optionally, combining the test matrices from the first and second steps. The markers can either be present on separate test matrices or be present in discrete locations of a common matrix.
Bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik, wobei der Marker für die herkömmliche Diagnose ausgewählt ist aus IgG, IgA, IgM oder IgE oder Kombinationen davon, wobei diese Marker gegen bestimmte Antige¬ ne gerichtet sind oder der Marker ist ein bestimmtes nachzuweisendes Antigen selber. Wei-
terhin können Marker Nukleinsäuren sein, insbesondere Nukleinsäureabschnitte, z.B RNA- oder DNA-Abschnitte von Zellen oder Viren, wie zum Beispiel im Falle von CMV. Weiter bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik, wobei das Testpanel/Markerkombination Antikörper oder Antigene um¬ faßt, die kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert werden. Dem Fachmann sind geeignete Immobilisierungstechniken bekannt (siehe dazu auch oben).Preference is given to a method according to the invention for producing a test device for in vitro diagnostics, wherein the marker for the conventional diagnosis is selected from IgG, IgA, IgM or IgE or combinations thereof, whereby these markers are directed against certain antigens or is the marker a particular antigen to be detected itself. WEI Furthermore, markers can be nucleic acids, in particular nucleic acid segments, for example RNA or DNA segments of cells or viruses, for example in the case of CMV. Further preferred is a method according to the invention for producing a test apparatus for in vitro diagnostics, wherein the test panel / marker combination comprises antibodies or antigens which are immobilized covalently or noncovalently. The person skilled in the art suitable immobilization techniques are known (see also above).
Weiter bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Erfindung, wobei die Matrix in Form eines Test¬ streifens, einer Membran, eines Biochips, Latexpartikeln und/oder anderen Partikeln vorliegt. Besonders bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren zur Herstellung einer Testvorrich¬ tung für die in vitro Diagnostik, wobei die Membran aus Nylon ist oder die Matrix in Form von Latexpartikeln vorliegt. Die Matrix kann auch aus einem geeigneten herkömmlichen po¬ rösen natürlichen oder synthetischen (Polymer-)Material bestehen. Erfindungsgemäße Mem¬ branen können jedoch auch aus anderen Materialien sein (z.B. Nitrocellulose).Further preferred is an inventive method for producing a test device for in vitro diagnostics of the present invention, wherein the matrix in the form of a test strip, a membrane, a biochip, latex particles and / or other particles is present. Particularly preferred is an inventive method for producing a Testvorrich¬ device for in vitro diagnostics, wherein the membrane is made of nylon or the matrix is present in the form of latex particles. The matrix can also consist of a suitable conventional porous natural or synthetic (polymer) material. However, membranes of the invention may also be of other materials (e.g., nitrocellulose).
Weiter bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Erfindung, wobei die Trägermatrix aus unter¬ schiedlich markierten Trägermaterialien zusammengesetzt wird. Neben Farbstoffen können auch andere nachweisbare und im Bereich der Immundiagnostik bekannte Label (oder Mar¬ kierungen) verwendet werden. Noch weiter bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik gemäß der Erfindung, wobei die Trägermaterialien mit einem Farbstoff in unterschiedlichen Intensitäten eingefärbt sind. Dies ermöglicht z.B. die Erzeugung eines unterscheidbaren ("barcodierten") Latexpartikel- Sets durch Färbung der Partikel mit einem Farbstoff in unterschiedlichen Intensitäten. Es können zudem verschiedene, z.B. drei, Fluoreszenzfarben (Orange, Rot, Dunkelrot) verwen¬ det werden. Mit Hilfe einer Software klassifiziert ein entsprechendes Gerät (siehe oben) die Fluoreszenz jedes Partikels zu den passenden Partikel-Sets und ordnet die entsprechenden Analytbestimmungen zu.Further preferred is an inventive method for producing a test device for in vitro diagnostics of the present invention, wherein the carrier matrix is composed of unter¬ differently marked carrier materials. In addition to dyes, other detectable and well-known in the field of immunodiagnosis label (or markings) can be used. Even more preferred is an inventive method for producing a test device for in vitro diagnostics according to the invention, wherein the carrier materials are dyed with a dye in different intensities. This allows e.g. the production of a distinguishable ("bar coded") latex particle set by staining the particles with a dye at different intensities. In addition, different, e.g. three fluorescent colors (orange, red, dark red) verwen¬ det. With the aid of software, a corresponding device (see above) classifies the fluorescence of each particle into the appropriate particle sets and assigns the corresponding analyte determinations.
Ein besonderer Aspekt betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Erfindung, wobei jedes Trägermaterial mit mindestens ei¬ nem Antikörper oder Antigen, kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert, versehen wird. Sinnvollerweise umfaßt das erfindungsgemäße Verfahren eine definierte Mischung von ge-
eignet markierten Trägermaterialien. Die Verwendung von Latexpartikeln in Flüssigkeiten macht eine völlig flexible Gestaltung der Teste zu Multiplex-Testpanels möglich: Je nach Fragestellungen für den jeweiligen Patienten können beschichtete Partikel-Sets zu individuel¬ len erfindungsgemäßen Multianalyt- Test-Cocktails zusammengestellt werden.A particular aspect relates to a method for producing a test device for in vitro diagnostics of the present invention, wherein each carrier material with at least ei¬ nem antibody or antigen, covalently or non-covalently immobilized provided. It makes sense for the method according to the invention to comprise a defined mixture of suitable labeled carrier materials. The use of latex particles in liquids makes a completely flexible design of the tests for multiplex test panels possible: Depending on the questions for the respective patient, coated particle sets can be combined to form individual multianalyte test cocktails according to the invention.
Ein noch weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft dann ein Verfahren für die in vitro Diagnostik von Analyten von Interesse in einer Probe, umfassend ein zur Verfügung stellen einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik gemäß der vorliegenden Erfindung, ein in Kontakt bringen einer zu untersuchenden Probe mit den Markern auf der Testvorrich¬ tung, und ein Nachweisen einer Reaktion der Probe mit den Markern auf der Testvorrichtung auf geeignete Weise.Yet another aspect of the present invention then relates to a method for the in vitro diagnostics of analytes of interest in a sample, comprising providing an in vitro diagnostic test device according to the present invention, contacting a sample to be examined the markers on the test device, and detecting a reaction of the sample with the markers on the test device in a suitable manner.
Bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren zur in vitro Diagnostik, wobei der Marker ausgewählt ist aus IgG, IgA, IgM oder IgE oder Kombinationen davon, wobei diese Marker gegen bestimmte Antigene gerichtet sind oder der Marker ist ein bestimmtes nachzuweisen¬ des Antigen selber. Weiterhin können Marker Nukleinsäuren sein, insbesondere Nukleinsäu- reabschnitte, z.B RNA- oder DNA-Abschnitte von Zellen oder Viren, wie zum Beispiel im Falle von CMV. Marker für die herkömmliche Diagnose können alle spezifischen Antikörper oder Antigene sein, wie z.B. Tumormarker, die als spezifische Analyte nachgewiesen werden. Weiter bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren zur in vitro Diagnostik, wobei das Testpanel Antikörper oder Antigene umfaßt, die kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert werden. Dem Fachmann sind geeignete Immobilisierungstechniken bekannt (siehe dazu auch oben).Preference is given to a method according to the invention for in vitro diagnostics, wherein the marker is selected from IgG, IgA, IgM or IgE or combinations thereof, wherein these markers are directed against specific antigens or the marker is a specific antigen to be detected itself. Furthermore, markers can be nucleic acids, in particular nucleic acid sections, for example RNA or DNA sections of cells or viruses, for example in the case of CMV. Markers for conventional diagnosis can all be specific antibodies or antigens, e.g. Tumor markers detected as specific analytes. Further preferred is an inventive method for in vitro diagnostics, wherein the test panel comprises antibodies or antigens which are immobilized covalently or non-covalently. The person skilled in the art suitable immobilization techniques are known (see also above).
Weiter bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren für die in vitro Diagnostik, wobei als Marker Markerkombinationen, wie oben angegeben, nachgewiesen werden. Die für das erfin¬ dungsgemäße Verfahren für die in vitro Diagnostik verwendete Probe ist bevorzugt ausge¬ wählt aus Liquor, Urin, Sperma, Abstrichen, Biopsien, Sputum, Brustwarzen- Austrittsflüssigkeit, Schweiß, Serum und Blut und Teilen davon und Gemischen davon.Further preferred is a method according to the invention for in vitro diagnostics, wherein marker combinations as indicated above are detected as markers. The sample used for the method according to the invention for in vitro diagnosis is preferably selected from cerebrospinal fluid, urine, semen, smears, biopsies, sputum, nipple discharge fluid, perspiration, serum and blood and parts thereof and mixtures thereof.
Besonders bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren für die in vitro Diagnostik, wobei das Nachweisen einer Reaktion der Probe mit den Markern die Bildung einer visuell sichtba¬ ren Farbreaktion umfaßt. Dem Fachmann sind entsprechende Farbreaktionen gut bekannt. Weiter bevorzugt ist ein erfindungsgemäßes Verfahren für die in vitro Diagnostik, wobei das
Nachweisen einer Reaktion der Probe mit den Markern einen ELISA umfaßt. Erfindungsge¬ mäß kann das Nachweisen einer Reaktion der Probe mit den Markern einen Sandwichassay oder kompetetiven Assay umfassen. Der entsprechende Aufbau solcher Tests ist dem Fach¬ mann bekannt (siehe dazu auch Abbildung 3).Particularly preferred is a method according to the invention for in vitro diagnostics, wherein the detection of a reaction of the sample with the markers comprises the formation of a visually observable color reaction. The person skilled in the corresponding color reactions are well known. Further preferred is an inventive method for in vitro diagnostics, wherein the Detecting a reaction of the sample with the markers comprises an ELISA. According to the invention, detecting a reaction of the sample with the markers may comprise a sandwich assay or a competitive assay. The corresponding structure of such tests is known to the expert (see also FIG. 3).
Weiter bevorzugt ist ein Verfahren für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Erfindung, wobei die Trägermatrix aus unterschiedlich markierten Trägermaterialien zusammengesetzt ist. Neben Farbstoffen können auch andere nachweisbare und im Bereich der Immundiagno¬ stik bekannte Gruppen verwendet werden. Noch weiter bevorzugt ist ein Verfahren zur in vitro Diagnostik gemäß der Erfindung, wobei die Trägermaterialien mit einem Farbstoff in unterschiedlichen Intensitäten eingefärbt sind. Dies ermöglicht z.B. die Erzeugung eines un¬ terscheidbaren ("barcodierten") Latexpartikel-Sets durch Färbung der Partikel mit einem Farbstoff in unterschiedlichen Intensitäten. Es können zudem verschiedene, z.B. drei, Fluo¬ reszenzfarben (Orange, Rot, Dunkelrot) verwendet werden. Mit Hilfe einer Software klassifi¬ ziert ein entsprechendes Gerät (siehe oben) die Fluoreszenz jedes Partikels zu den passenden Partikel-Sets und ordnet die entsprechenden Analytbestimmungen zu.Further preferred is a method for in vitro diagnostics of the present invention, wherein the carrier matrix is composed of differently labeled carrier materials. In addition to dyes, it is also possible to use other detectable groups known in the field of immunodiagnostics. Even more preferred is a method for in vitro diagnostics according to the invention, wherein the carrier materials are colored with a dye in different intensities. This allows e.g. the production of an indistinguishable ("bar coded") latex particle set by staining the particles with a dye in different intensities. In addition, different, e.g. three fluorescent colors (orange, red, dark red) can be used. With the aid of a software, a corresponding device (see above) classifies the fluorescence of each particle to the appropriate particle sets and assigns the corresponding analyte determinations.
Ein besonderer Aspekt betrifft ein Verfahren für die in vitro Diagnostik der vorliegenden Er¬ findung, wobei jedes Trägermaterial mit mindestens einem Antikörper oder Antigen, kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert, versehen wird. Sinnvollerweise umfaßt das erfindungsge¬ mäße Verfahren eine definierte Mischung von geeignet markierten Trägermaterialien.A particular aspect relates to a method for in vitro diagnostics of the present invention, wherein each carrier material is provided with at least one antibody or antigen, covalently or non-covalently immobilized. It makes sense for the process according to the invention to comprise a defined mixture of suitably marked support materials.
Die Verwendung von Latexpartikeln in Flüssigkeiten macht vorteilhaft eine völlig flexible Gestaltung der Teste zu Multiplex-Testpanels möglich: Je nach Fragestellungen für den je¬ weiligen Patienten können beschichtete Partikel-Sets zu individuellen erfindungsgemäßen Multianalyt Test-Cocktails zusammengestellt werden.The use of latex particles in liquids advantageously makes possible a completely flexible design of the tests for multiplex test panels: Depending on the questions for the respective patient, coated particle sets can be combined to form individual multianalyte test cocktails according to the invention.
In einer besonderen Ausführungsform stützt sich die erfindungsgemäße Multianalyt- Techno¬ logie auf ein Prinzip, das aus der Durchflußzytometrie bekannt ist. Ein großer Vorteil dieser Technologie ist darin zu sehen, daß entsprechende Geräte meist bereits bei den Anwendern vorhanden sind. Darüber hinaus wird die diagnostische Leistungsfähigkeit der immunologi¬ schen Teste durch die erhöhte Sensitivität der Fluoreszenz-Signalgebung im Vergleich zur ELISA-Farbreaktion erhöht.
Bevorzugt ist somit ein Verfahren für die in vitro Diagnostik der Erfindung, umfassend denIn a particular embodiment, the multi-analyte technology according to the invention is based on a principle which is known from flow cytometry. A big advantage of this technology is the fact that the corresponding devices are usually already available to the users. In addition, the diagnostic performance of immunological tests is increased by the increased sensitivity of fluorescence signaling in comparison to the ELISA color reaction. Thus, a method for the in vitro diagnosis of the invention, comprising the
Nachweis der markierten Trägermaterialien mittels Partikel-Fluoreszenz- Durchflußzytometrie. Im Gegensatz zur ELISA- Technik, bei der die Kavitätswände der Mi- krotiteφlatte zur adsorptiven Kopplung der Analyte bzw. Antikörper verwendet werden, setzt die erfindungsgemäße Multianalyt Technologie Latexpartikel mit einem Durchmesser von 4,0 um als Festphase ein. Die prinzipiell ununterscheidbaren Partikel werden mit distinkten Inten¬ sitäten eines roten Fluorophors gefärbt (siehe Abbildung 1), wodurch ein Sortiment von zehn unterschiedlich gefärbten Latexpartikel-Sets entsteht.Detection of the labeled support materials by means of particle fluorescence flow cytometry. In contrast to the ELISA technique, in which the cavity walls of the microtiter plate are used for adsorptive coupling of the analytes or antibodies, the multianalyte technology according to the invention uses latex particles with a diameter of 4.0 μm as the solid phase. The principally indistinguishable particles are colored with distinct intensities of a red fluorophore (see Figure 1), resulting in an assortment of ten differently colored latex particle sets.
Jedes Set wird mit unterschiedlichen Antigenen, Antikörpern oderNukleinsäuren kovalent oder adsorptiv beschichtet. Um nun mehrere Untersuchungen gleichzeitig in einem Testansatz durchfuhren zu können, werden die beschichteten Partikel-Sets zu einem Cocktail gemischt. Diese Mischung stellt einen erfindungsgemäßen Multianalyt-Plex dar (siehe Abbildung 2). Während der Inkubation des erfindungsgemäßen Multianalyt- Plexes mit einem Patientense- rumoder anderem Patientenmaterial, binden vorhandene Analyten an die - ihrer Spezifität entsprechenden - Latexpartikel. Im folgenden Inkubationsschritt reagieren die mit einem Fluoreszenzfarbstoff markierten Konjugate mit den gebundenen Analyten (siehe Abbildung 3). Die Menge gebundener Konjugatmoleküle ist proportional zur Analytkonzentration. Der erfindungsgemäße Multianalyt Plex trägt nun je Latexpartikel-Set eine variable Menge der Konjugat-Fluoreszenz auf seiner Oberfläche und wird von einem für Partikel-Messungen spe¬ zialisierten Durchflußzytometer, einem sogenannten Partikel-Fluoreszenz-Durchfluß- Meßgerät, analysiert. Diese Meßgeräte analysieren individuelle Latexpartikel nach ihrer Fluo¬ reszenz und können gleichzeitig drei verschiedene Fluoreszenzfarben (Orange, Rot, Dunkel¬ rot) unterscheiden. Mit Hilfe einer Software klassifiziert das Gerät die Fluoreszenz jedes Par¬ tikels zu den passenden Partikel-Sets und ordnet die entsprechenden Analytbestimmungen zu. Die mittlere Konjugat-Fluoreszenz je Partikel-Set ist ein Maß für die Konzentration des ent¬ sprechenden Analyten in der Serumprobe.Each set is covalently or adsorptively coated with different antigens, antibodies or nucleic acids. In order to carry out several tests simultaneously in one test run, the coated particle sets are mixed into a cocktail. This mixture is a multianalyzed plex according to the invention (see FIG. 2). During the incubation of the multianalyzed plexes according to the invention with a patient serum or other patient material, existing analytes bind to the latex particles corresponding to their specificity. In the following incubation step, the conjugates labeled with a fluorescent dye react with the bound analytes (see Figure 3). The amount of bound conjugate molecules is proportional to the analyte concentration. The multianalyte plex according to the invention now carries a variable amount of the conjugate fluorescence on its surface per latex particle set and is analyzed by a flow cytometer specialized for particle measurements, a so-called particle fluorescence flowmeter. These measuring instruments analyze individual latex particles according to their fluorescence and can simultaneously distinguish between three different fluorescent colors (orange, red, dark red). With the aid of software, the device classifies the fluorescence of each particle into the appropriate particle sets and assigns the corresponding analyte determinations. The mean conjugate fluorescence per particle set is a measure of the concentration of the corresponding analyte in the serum sample.
Vorteile der erfindungsgemäßen Multianalyt Technologie liegen unter anderem darin, daß für den Gesamtbereich der Immunologie, z. B. für die Infektionsserologie und für den Nachweis von Autoimmunerkrankungen, Allergien, Tumormarkern und Hormonen, die erfindungsge¬ mäße Multianalyt Technologie wichtige medizinisch-diagnostische Aussagen liefern kann. Dazu werden die Seren verschiedener Patientenkollektive untersucht. Durch das Multiplexing entstehen neue Muster der Seroreaktivität, die die prädiktive Aussage von diagnostischen Da-
ten deutlich verbessern. In einigen Fällen wird die diagnostische Aussagekraft auch als Quo¬ tient zweier oder mehrerer Seroreaktivitäten ausgedrückt, hier hat der kann Multianalyt- Testlauf eine deutlich verbesserte Präzision. Die Verwendung von Latexpartikeln in Flüssig¬ keiten macht eine völlig flexible Gestaltung der Teste zu Multiplex-Testpanels möglich: Je nach Fragestellungen für den jeweiligen Patienten können beschichtete Partikel-Sets zu indi¬ viduellen erfindungsgemäßen Multianalyt Test-Cocktails zusammengestellt werden.Advantages of the multi-analyte technology according to the invention include, inter alia, that for the entire field of immunology, for. As for the infectious serology and for the detection of autoimmune diseases, allergies, tumor markers and hormones, the erfindungsge¬ Permitted multianalyte technology can provide important medical-diagnostic statements. For this, the sera of different patient groups are examined. Multiplexing gives rise to new patterns of seroreactivity, which are the predictive expression of diagnostic data. improve significantly. In some cases, the diagnostic validity is also expressed as the ratio of two or more sero activities, here the multi-analyte test run can have a significantly improved precision. The use of latex particles in liquids makes a completely flexible design of the tests for multiplex test panels possible: Depending on the questions for the respective patient, coated particle sets can be combined to form individual multianalyte test cocktails according to the invention.
In dieser Beschreibung und in den folgenden Ansprüchen wird die folgende Terminologie in Übereinstimmung mit den unten angegebenen Definitionen verwendet.In this description and in the following claims, the following terminology will be used in accordance with the definitions given below.
Ein "Marker" oder „Analyt" im Sinne der vorliegenden Erfindung sind Analyte, die spezi¬ fisch für bestimmte physiologische oder pathologische Zustände sind, z. B. Antikörper. Mar¬ ker können ausgewählt sein aus IgG, IgA, IgM oder IgE oder Kombinationen davon, die ge¬ gen bestimmte Antigene gerichtet sind oder können bestimmte nachzuweisende Antigene selber sein. Weiterhin können Marker Nukleinsäuren sein, insbesondere Nukleinsäureab- schnitte, z. B. RNA- oder DNA- Abschnitte von Zellen oder Viren, wie zum Beispiel CMV.For the purposes of the present invention, a "marker" or "analyte" are analytes which are specific for certain physiological or pathological states, for example antibodies, and markers can be selected from IgG, IgA, IgM or IgE or combinations Of these, specific antigens to be detected may be themselves or markers may be nucleic acids, in particular nucleic acid segments, for example RNA or DNA segments of cells or viruses, such as, for example, CMV.
Ein " unspezifischer Marker" im Sinne der vorliegenden Erfindung ist ein Marker, der a) tra¬ ditionell bei den entsprechenden diagnostischen Fragestellungen in separaten Untersuchungs¬ gängen mitbestimmt wird und/oder b) der als Indikations-unspezifischer Marker gilt. Nicht limitierende Beispiele dafür sind z.B. der Gesamtanstieg von IgE als unspezifischer Marker bei der Diagnostik bestimmter Allergien unter der Verwendung spezifischer Allergiemarker (z.B. IgE gegen Katzenepithelien), oder Procalcitonin als generellem Entzündungsmarker im Falle der Diagnostik bestimmter Infekte. Andere unspezifische Marker sind ausgewählt aus der Gruppe von Markern für Entzündungserkrankungen, Impfstatus, Schwangerschaft, Infek¬ tionserkrankungen, Allergien, viralen Erkrankungen, Blutbank-Untersuchung, Liquor- Diagnostik, Autoimmunerkrankungen, Karzinomen, akutem Herzinfarkt, Diabetes, Alkoho¬ lismus, Schildrüsenfunktion, Entzündungsmarkern, akute Infektionsmarker, chronische Infek- tionsmarker und Kombinationen davon.A "nonspecific marker" in the sense of the present invention is a marker which is a) traditionally co-determined in the corresponding diagnostic questions in separate examination courses and / or b) which is regarded as an indication-nonspecific marker. Non-limiting examples of this are e.g. the overall increase in IgE as a nonspecific marker in the diagnosis of certain allergies using specific allergy markers (e.g., IgE to cat epithelia), or procalcitonin as a general marker of inflammation in the case of diagnosis of certain infections. Other nonspecific markers are selected from the group of markers for inflammatory diseases, vaccination status, pregnancy, infectious diseases, allergies, viral diseases, blood bank examination, CSF diagnostics, autoimmune diseases, carcinomas, acute myocardial infarction, diabetes, alcoholism, thyroid function, inflammation markers , acute infection markers, chronic infection markers and combinations thereof.
Ein " spezifischer Marker" im Sinne der vorliegenden Erfindung ist ein Marker, der her¬ kömmlich als spezifischer Analyt einer spezifischen diagnostischen Indikation (Fragestel¬ lung) verwendet wird. Beispiel sind oben genannt und betreffen z.B. spezifische Tumoranti-
gene oder Immunglobuline, wie z.B. IgG gegen Tetanus toxoid, IgM gegen Borrelia p41 in¬ tern, IgM gegen VCA pl8 und viele andere.A "specific marker" in the context of the present invention is a marker which is conventionally used as the specific analyte of a specific diagnostic indication (question). Examples are mentioned above and relate, for example, to specific tumor anti- genes or immunoglobulins, such as IgG for tetanus toxoid, IgM for Borrelia p41 in¬ tern, IgM against VCA pl8 and many others.
"Patient" wie hier verwendet, betrifft einen Organismus, bevorzugt einen Säuger, weiter be¬ vorzugt einen Menschen. Die vorliegende Erfindung - neben anderen Aspekten - erlaubt eine Bestimmung des Typs an infektiösem Pathogen, das in einem Patienten vorhanden ist und/oder des physiologischen oder pathologischen Zustandes eines Patienten im Hinblick auf eine gezielte diagnostische oder therapeutische Fragestellung (z.B. Erkrankung)."Patient" as used herein refers to an organism, preferably a mammal, more preferably a human. The present invention, among other aspects, permits determination of the type of infectious pathogen present in a patient and / or the physiological or pathological condition of a patient with regard to a targeted diagnostic or therapeutic issue (e.g., disease).
Wie hier verwendet, werden die Ausdrücke "Patientenprobe", "eine von einem Patienten er¬ haltene Probe" und "eine von einem Individuum erhaltene Probe " austauschbar verwendet und schließen jede Probe ein, die von einem Patienten oder anderen Individuum erhalten wur¬ de. Daher kann die Probe eine feste Gewebeprobe sein, z.B. eine Biopsieprobe, eine flüssige Probe, z.B. eine Blutprobe, oder jede andere Patientenprobe, die herkömmlich medizinisch verwendet wird. In einigen Ausführungsformen der Erfindung ist die Probe eine Probe von "Körperflüssigkeit", eine Probe von Lymphflüssigkeit, Zellysaten, Milch, Plasma, Speichel, Samen, Serum, Spinalflüssigkeit, Tränen, Gesamtblut, Fraktionen von Gesamtblut, Wundpro¬ ben, die externen Teile der Haut und die Sekrete der respiratorischen, intestinalen und geni- tourinären Trakte. Bevorzugt ist die Probe Blut, Sputum, Urin oder Fraktionen von Gesamt¬ blut.As used herein, the terms "patient sample", "a sample obtained from a patient" and "a sample obtained from an individual" are used interchangeably and include any sample obtained from a patient or other individual. Therefore, the sample may be a solid tissue sample, e.g. a biopsy sample, a liquid sample, e.g. a blood sample, or any other patient sample that is conventionally used medicinally. In some embodiments of the invention, the sample is a sample of "body fluid", a sample of lymphatic fluid, cell lysates, milk, plasma, saliva, semen, serum, spinal fluid, tears, whole blood, whole blood fractions, wound samples, the external parts of the Skin and secretions of the respiratory, intestinal and genital tracts. The sample is preferably blood, sputum, urine or fractions of whole blood.
Der Ausdruck "Bindungsbedingungen" ist dazu gedacht, diejenigen Bedingungen der Zeit, Temperatur und pH und die nötigen Mengen und Konzentrationen an Reaktanten und Rea¬ genzien zu bedeuten, die ausreichend sind, um eine Bindung zwischen Bindungspaaren, z.B. einem Antikörper an ein Protein, das das entsprechende Epitop aufweist, zu ermöglichen. Wie im Stand der Technik gut bekannt ist, hängen die für eine Bindung erforderlichen Zeit-, Tem¬ peratur- und pH-Bedingungen von der Größe jedes Mitglieds des Bindungspaars, der Affinität zwischen dem Bindungspaar, und der Anwesenheit anderer Materialien in dem Reaktionsge¬ misch ab. Die aktuellen Bedingungen, die für jeden Bindungsschritt erforderlich sind, sind im Stand der Technik gut bekannt oder können ohne unzumutbaren Aufwand leicht bestimmt werden.The term "binding conditions" is intended to mean those conditions of time, temperature and pH and the requisite amounts and concentrations of reactants and reagents sufficient to allow binding between binding pairs, e.g. to allow an antibody to a protein having the corresponding epitope. As is well known in the art, the time, temperature and pH conditions required for a bond depend on the size of each member of the binding pair, the affinity between the binding pair, and the presence of other materials in the reaction mixture from. The actual conditions required for each binding step are well known in the art or can be readily determined without undue burden.
Typische Bindungsbedingungen für die meisten Biomoleküle, z.B. Antikörper an ein Protein, das das entsprechende Epitop aufweist, schließen die Verwendung von auf einen pH von un-
gefahr 7 bis ungefähr 8,5 gepufferten Lösungen ein und werden bei Temperaturen von unge¬ fähr 22°C bis ungefähr 60°C und bevorzugt von ungefähr 30°C bis ungefähr 550C für eine Zeitdauer von ungefähr 1 Sekunde bis ungefähr 1 Tag, bevorzugt von ungefähr 10 Minuten to ungefähr 16 Stunden, und am meisten bevorzugt von ungefähr 15 Minuten bis ungefähr 3 Stunden ausgeführt. "Bindungsbedingungen" erfordern auch einen effektiven Puffer. Jeder Puffer der kompatibel, d.h., chemisch inert, im Hinblick auf die Biomoleküle und anderen Komponenten ist, und immer noch eine Bindung zwischen dem Bindungspaar erlaubt und unspezifische Bindungen wesentlich verhindert, kann verwendet werden.Typical binding conditions for most biomolecules, eg antibodies to a protein having the corresponding epitope, preclude the use of to a pH of 7 to about 8.5 buffered solutions and are heated at temperatures of about 22 ° C to about 60 ° C and preferably from about 30 ° C to about 55 0 C for a period of about 1 second to about 1 day, preferably from about 10 minutes to about 16 hours, and most preferably from about 15 minutes to about 3 hours. "Binding conditions" also require an effective buffer. Any buffer that is compatible, ie, chemically inert, with respect to the biomolecules and other components, and still allows binding between the binding pair and substantially prevents non-specific binding can be used.
Der Ausdruck "Protein" bedeutet ein Polymer, worin die Monomere Aminosäuren sind, die miteinander über Amidbindungen verbunden sind. Das Protein kann mindestens ungefähr 5 Aminosäuren, weiter gewöhnlich aus mindestens ungefähr 10 Aminosäuren, und am meisten gewöhnlich aus mindestens ungefähr 50 Aminosäuren zusammengesetzt sein.The term "protein" means a polymer wherein the monomers are amino acids linked together via amide bonds. The protein may be at least about 5 amino acids, more usually at least about 10 amino acids, and most usually at least about 50 amino acids.
Der Ausdruck "gekoppelt", wie hier verwendet, betrifft die Anbringung durch kovalente Bin¬ dungen oder durch nicht-kovalente Interaktionen (z. B., hydrophobe Interaktionen, Wasser¬ stoffbrücken, usw.). Kovalente Bindungen können zum Beispiel, Ester-, Ether-, Phosphoester- , Amid-, Peptid-, Imid-, Kohlenstoff-Schwefel Bindungen, Kohlenstoff-Phosphor Bindungen und ähnliches sein. Verfahren zur Kopplung von Proteinen an Substrate und Matrices sind im Stand der Technik gut bekannt und schließen zum Beispiel ein Blotting der Proteins auf das Substrat ein.The term "coupled" as used herein refers to attachment by covalent bonds or by non-covalent interactions (eg, hydrophobic interactions, hydrogen bridges, etc.). Covalent bonds can be, for example, ester, ether, phosphoester, amide, peptide, imide, carbon-sulfur bonds, carbon-phosphorus bonds and the like. Methods of coupling proteins to substrates and matrices are well known in the art and include, for example, blotting the protein onto the substrate.
Der Ausdruck "Substrat" oder "Matrix" betrifft jede feste oder semi-feste Oberfläche, an die ein gewünschter Bindungspartner verankert werden soll. Geeignete Substratmaterialien kön¬ nen jedes Material sein, welches ein Biomolekül, z.B. ein Protein, immobilisieren kann und schließen ein, z.B., Glas (z.B. für Objektträger), Nitrocellulose (z.B. in Membranen), Plastik einschließlich Polyvinylchlorid (z.B. in Sheets oder Mikrotiterwells), Polystyrollatex (z.B. in Beads oder Mikrotiterplatten), Polyvinylidinfluorid (z.B. in Mikrotiterplatten) und Polystyrol (z.B. in Beads), Metall, Polymergele und ähnliches.The term "substrate" or "matrix" refers to any solid or semi-solid surface to which a desired binding partner is to be anchored. Suitable substrate materials may be any material containing a biomolecule, e.g. a protein that can immobilize and include, eg, glass (eg for slides), nitrocellulose (eg in membranes), plastic including polyvinyl chloride (eg in sheets or microtiter wells), polystyrene latex (eg in beads or microtiter plates), polyvinylidine fluoride (eg in microtiter plates ) and polystyrene (eg in beads), metal, polymer gels and the like.
Der Ausdruck "Markierung", wie hier verwendet, betrifft jedes Atom oder Gruppe die dazu verwendet werden kann, ein nachweisbares (bevorzugt quantifizierbares) Signal zu erzeugen, und an ein Biomolekül, z.B. ein Protein, angebracht werden kann
Der Ausdruck "Testpanel" wie hier verwendet, betrifft eine Zusammenstellung einer Gruppe von zu untersuchenden Parametern, die im Hinblick auf bestimmte gezielte diagnostische Fragestellungen gruppiert und untersucht werden. Solche Fragestellungen betreffen insbeson¬ dere Entzündungserkrankungen, Impfstatus, Schwangerschaft, Infektionserkrankungen, Al¬ lergien, virale Erkrankungen, Blutbank-Untersuchungen, Liquor-Diagnostik, Autoimmuner- krankungen, Karzinome, akuten Herzinfarkt, Diabetes, Alkoholismus, Schildrüsenfunktion, Entzündungsmarker, akute Infektionsmarker, chronische Infektionsmarker und Kombinatio¬ nen davon. Ein Testpanel kann physisch auf einer Matrix oder auf mehreren Matrices im er¬ findungsgemäßen Test vorhanden sein (d.h. z.B. auf verschiedenen Latexbeads).The term "label" as used herein refers to any atom or group that can be used to generate a detectable (preferably quantifiable) signal and attached to a biomolecule, such as a protein The term "test panel" as used herein refers to a collection of a group of parameters to be examined that are grouped and examined for specific diagnostic purposes. Such questions relate in particular to inflammatory diseases, vaccination status, pregnancy, infectious diseases, allergies, viral diseases, blood bank examinations, CSF diagnostics, autoimmune diseases, carcinomas, acute myocardial infarction, diabetes, alcoholism, thyroid function, inflammatory markers, acute infection markers, chronic Infection marker and combinations thereof. A test panel may physically be present on a matrix or on several matrices in the test according to the invention (ie on different latex beads, for example).
Die Erfindung soll nun im folgenden anhand von Beispielen unter Bezugnahme auf die beige¬ fugten Zeichnungen näher erläutert werden, ohne darauf beschränkt zu sein. In den Abbildun¬ gen zeigtThe invention will now be explained in more detail below by means of examples with reference to the accompanying drawings, without being limited thereto. In the figures shows
Abbildung 1 : die Erzeugung eines bevorzugten unterscheidbaren ("barcodierten") Latexparti¬ kel-Sets durch Färbung der Partikel mit einem Farbstoff in unterschiedlichen Intensitäten,FIG. 1: the production of a preferred distinguishable ("bar-coded") latex particle set by staining the particles with a dye in different intensities,
Abbildung 2: die Herstellung eines bevorzugten erfindungsgemäßen Multianalyt Plexes durch Mischen der mit Antigen beschichteten Latexpartikel-Sets, undFigure 2: the preparation of a preferred multi-analyte plexes according to the invention by mixing the antigen-coated latex particle sets, and
Abbildung 3: die Darstellung des Ablaufs eines bevorzugten erfindungsgemäßen Multianalyt Testsystems. An jedes Latexpartikel binden im ersten Reaktionsschritt die im Serum vorhan¬ denen spezifischen Antikörper (z. B. grün-blau). Im zweiten Schritt binden die mit einem Fluoreszenzfarbstoff markierten Konjugatantikörper (z. B. rot-orange).Figure 3: the representation of the sequence of a preferred Multianalyt test system according to the invention. In the first reaction step, the specific antibodies present in the serum (for example green-blue) bind to each latex particle. In the second step, the conjugate antibodies labeled with a fluorescent dye bind (eg red-orange).
Beispielexample
In diesem Beispiel stützt sich die erfindungsgemäße Multianalyt- Technologie auf ein Prinzip, das aus der Durchflußzytometrie bekannt ist. Es werden zunächst Latexpartikel mit einem Durchmesser von 4,0 um als Festphase eingesetzt. Diese prinzipiell nicht unterscheidbaren Partikel werden dann mit verschiedenen/distinkten Intensitäten eines roten Fluorophors ge¬ färbt (siehe Abbildung 1), wodurch ein Sortiment von zehn unterschiedlich gefärbten Latex¬ partikel-Sets entsteht.
Jedes Set wird dann mit unterschiedlichen Antigenen kovalent beschichtet. Für mehrere Un¬ tersuchungen gleichzeitig, werden die Antigen-beschichteten Partikel-Sets dann definiert zu einem Cocktail gemischt.In this example, the multi-analyte technology of the invention relies on a principle known from flow cytometry. First, latex particles with a diameter of 4.0 μm are used as the solid phase. These particles, which are not distinguishable in principle, are then dyed with different / distinct intensities of a red fluorophore (see FIG. 1), resulting in an assortment of ten differently colored latex particle sets. Each set is then covalently coated with different antigens. For several investigations simultaneously, the antigen-coated particle sets are then mixed in a defined manner into a cocktail.
Diese Mischung stellt einen erfindungsgemäßen Multianalyt-Plex (oder auch Panel) dar (siehe Abbildung 2). Es erfolgt die Inkubation des erfindungsgemäßen Multianalyt- Plexes mit ei¬ nem Patientenserum, wobei vorhandene Antikörper an die - ihrer Spezifität entsprechenden - Latexpartikel binden. Im folgenden Inkubationsschritt reagieren die mit einem Fluoreszenz¬ farbstoff markierten Konjugate mit den gebundenen Antikörpern (siehe Abbildung 3). Die Menge gebundener Konjugatmoleküle ist dabei proportional zur Antikörperkonzentration.This mixture represents a multianalyte plex (or panel) according to the invention (see FIG. 2). The incubation of the multianalytical plexes according to the invention with a patient's serum is carried out, whereby existing antibodies bind to the latex particles corresponding to their specificity. In the following incubation step, the conjugates labeled with a fluorescent dye react with the bound antibodies (see FIG. 3). The amount of bound conjugate molecules is proportional to the antibody concentration.
Der erfindungsgemäße Multianalyt- Plex trägt nun je Latexpartikel-Set eine variable Menge der Koηjugat-Fluoreszenz auf seiner Oberfläche und wird von einem für Partikel-Messungen spezialisierten Durchflußzytometer, einem sogenannten Partikel-Fluoreszenz-Durchfluß- Meßgerät, analysiert. Diese Meßgeräte analysieren individuelle Latexpartikel nach ihrer Fluo¬ reszenz und können gleichzeitig drei verschiedene Fluoreszenzfarben (Orange, Rot, Dunkel¬ rot) unterscheiden. Mit Hilfe einer Software klassifiziert das Gerät die Fluoreszenz jedes Par¬ tikels zu den passenden Partikel-Sets und ordnet die entsprechenden Analytbestimmungen zu. Die mittlere Konjugat-Fluoreszenz je Partikel-Set ist ein Maß für die Konzentration des ent¬ sprechenden Analyten in der Serumprobe.The multi-analyte Plex according to the invention now carries a variable amount of the co-conjugate fluorescence on its surface per latex particle set and is analyzed by a flow cytometer specialized for particle measurements, a so-called particle fluorescence flowmeter. These measuring instruments analyze individual latex particles according to their fluorescence and can simultaneously distinguish between three different fluorescent colors (orange, red, dark red). With the aid of software, the device classifies the fluorescence of each particle into the appropriate particle sets and assigns the corresponding analyte determinations. The mean conjugate fluorescence per particle set is a measure of the concentration of the corresponding analyte in the serum sample.
Diese Technologie wird entsprechend im Gesamtbereich der Immunologie, z. B. für die In¬ fektionsserologie und für den Nachweis von Autoimmunerkrankungen, Allergien, Tumor¬ markern und Hormonen verwendet. Dazu werden die Seren verschiedener Patientenkollektive untersucht. Durch das Multiplexing entstehen neue Muster der Seroreaktivität, die die prädik- tive Aussage von diagnostischen Daten deutlich verbessern. In einigen Fällen wird die dia¬ gnostische Aussagekraft auch als Quotient zweier oder mehrerer Seroreaktivitäten ausge¬ drückt, hier hat der Multianalyt-Testlauf eine deutlich verbesserte Präzision gegenüber her¬ kömmlichen Verfahren, insbesondere kann die Rate an Falsch-Positiven dadurch deutlich gesenkt werden, daß diese erkannt und eliminiert werden.
This technology is correspondingly used in the entire field of immunology, e.g. B. for the In¬ fektionsserologie and for the detection of autoimmune diseases, allergies, tumor markers and hormones used. For this, the sera of different patient groups are examined. Multiplexing creates new patterns of seroreactivity, which significantly improve the predictive value of diagnostic data. In some cases, the diagnostic power is also expressed as the quotient of two or more sero activities; in this case, the multianalyte test run has markedly improved precision over conventional methods, in particular the rate of false positives can be significantly reduced by these are recognized and eliminated.
Claims
1. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik von Analyten von Interesse in einer Probe, umfassend a) eine Trägermatrix, auf die geeignet aufgebracht ist, b) ein Testpanel von mindestens einem diagnostisch spezifischen Marker, der für eine herkömmliche Diagnose ausgewählt aus der Gruppe von Entzündungserkrankungen, Impfstatus, Schwangerschaft, Infektionserkrankungen, Allergien, viralen Erkrankungen, Blutbank-Untersuchung, Liquor-Diagnostik, Autoimmunerkrankungen, Karzinomen, akutem Herzinfarkt, Diabetes, Alkoholismus und Schildrüsenfunktion und Kombinatio¬ nen davon untersucht wird, und c) mindestens ein diagnostisch unspezifischer Marker.A test device for the in vitro diagnosis of analytes of interest in a sample, comprising a) a carrier matrix suitably applied to it, b) a test panel of at least one diagnostically specific marker selected for a conventional diagnosis from the group of inflammatory diseases , Vaccination status, pregnancy, infectious diseases, allergies, viral diseases, blood bank examination, cerebrospinal fluid diagnostics, autoimmune diseases, carcinomas, acute myocardial infarction, diabetes, alcoholism and thyroid function and combinations thereof, and c) at least one diagnostically unspecific marker.
2. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach Anspruch 1, wobei der Marker ausge¬ wählt ist aus spezifischen IgG, IgA, IgM oder IgE, Antikörpern, Teilen von Antikör¬ pern, rekombinanten Antigen-bindenden Peptiden, wie zum Beispiel scFv, Nukleinsäu¬ ren oder deren Fragmente oder Kombinationen davon.2. Test device for in vitro diagnosis according to claim 1, wherein the marker ausge¬ is selected from specific IgG, IgA, IgM or IgE, antibodies, parts of Antikör¬ pern, recombinant antigen-binding peptides, such as scFv, Nukleinsäu¬ ren or fragments thereof or combinations thereof.
3. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach Anspruch 1 oder 2, wobei das Testpa¬ nel Antikörper oder Antigene umfaßt, die kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert vorliegen.3. Test device for in vitro diagnosis according to claim 1 or 2, wherein the Testpa¬ nel comprises antibodies or antigens which are present covalently or non-covalently immobilized.
4. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei die Matrix in Form eines Teststreifens, einer Membran, eines Biochips, Latexpartikeln und/oder von anderen Partikeln vorliegt.The in vitro diagnostic test device of any one of claims 1 to 3, wherein the matrix is in the form of a test strip, a membrane, a biochip, latex particles and / or other particles.
5. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach Anspruch 4, wobei die Membran aus Nylon oder Nitrocellulose ist.The in vitro diagnostic test device of claim 4, wherein the membrane is nylon or nitrocellulose.
6. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei die Matrix aus einem porösen Material besteht. The in vitro diagnostic test device of any one of claims 1 to 4, wherein the matrix is made of a porous material.
7. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei die Trägermatrix aus unterschiedlich markierten Trägermaterialien zusammengesetzt ist.The in vitro diagnostic test device of any one of claims 1 to 6, wherein the support matrix is composed of differently labeled support materials.
8. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach Anspruch 7, wobei die Trägermateriali¬ en mit einem Farbstoff in unterschiedlichen Intensitäten eingefärbt sind.8. Test device for in vitro diagnostics according to claim 7, wherein the Trägermateriali¬ en are dyed with a dye in different intensities.
9. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach Anspruch 7 oder 8, wobei jedes Trä¬ germaterial mit mindestens einem Antikörper oder Antigen, kovalent oder nicht- kovalent immobilisiert, versehen ist.9. Test device for in vitro diagnostics according to claim 7 or 8, wherein each Trä¬ germaterial with at least one antibody or antigen, covalently or non-covalently immobilized provided.
10. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 6, umfas¬ send eine definierte Mischung von markierten Trägermaterialien.10. Test device for in vitro diagnostics according to one of claims 1 to 6, comprising a defined mixture of labeled support materials.
11. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobeiThe in vitro diagnostic test device of any one of claims 1 to 10, wherein
- der diagnostisch spezifische Marker für den Impfstatus ausgewählt ist aus IgG gegen Tetanus toxoid, Diphteria toxoid, Bordetella pertussis toxoid und Bordetella pertussis FHA,- the diagnostically specific marker for vaccination status is selected from IgG against tetanus toxoid, diphtheria toxoid, Bordetella pertussis toxoid and Bordetella pertussis FHA,
- der diagnostisch spezifische Marker für ToRCH ausgewählt ist aus IgG oder IgM ge¬ gen Toxoplasmose, Rubella, Cytomegalovirus, HSVl, HSV2, VZV und Parvo virus B19,the diagnostic specific marker for ToRCH is selected from IgG or IgM against toxoplasmosis, rubella, cytomegalovirus, HSV1, HSV2, VZV and Parvo virus B19,
- der diagnostisch spezifische Marker für die respiratorisch virale Diagnose ausgewählt ist aus IgG oder IgA gegen Adenovirus, Influenza A, Influenza B, Parainfluenza 1-3, RSV und Enteroviren,the diagnostic specific marker for respiratory viral diagnosis is selected from IgG or IgA against adenovirus, influenza A, influenza B, parainfluenza 1-3, RSV and enteroviruses,
- der diagnostisch spezifische Marker für die respiratorisch virale Diagnose ausgewählt ist aus IgG oder IgM gegen Chlamydia, Coxiella burnetii Phase II, Leginella pneu¬ mophila und Mycoplasma,the diagnostic specific marker for respiratory viral diagnosis is selected from IgG or IgM against Chlamydia, Coxiella burnetii phase II, Leginella pneu¬ mophila and Mycoplasma,
- der diagnostisch spezifische Marker für Kinderkrankheiten ausgewählt ist aus IgG oder IgM gegen Bordetella pertussis, Masern, Mumps, Rubella und Varizella-Zoster Virus (VZV),- the diagnostic specific marker for childhood diseases is selected from IgG or IgM against Bordetella pertussis, measles, mumps, rubella and varicella-zoster virus (VZV),
- der diagnostisch spezifische Marker für Zoonosen ausgewählt ist aus IgG oder IgM gegen Borrelia ρ41 intern, OSP-C Borrelia burgdorferi^ OSP-C Borrelia afzelii, OSP-C Borrelia garinii, plOO, p41 und FSME,the diagnostic specific marker for zoonoses is selected from IgG or IgM against Borrelia ρ41 intern, OSP-C Borrelia burgdorferi OSP-C Borrelia afzelii, OSP-C Borrelia garinii, plOO, p41 and TBE,
- der diagnostisch spezifische Marker für Polio ausgewählt ist aus IgG gegen Polio 1, Polio2 und Polio3, - der diagnostisch spezifische Marker für EBV ausgewählt ist aus IgG oder IgM gegen- the diagnostic specific marker for polio is selected from IgG against Polio 1, Polio2 and Polio3, - the diagnostic specific marker for EBV is selected from IgG or IgM against
VCA p 18, p23, EBNA und early antigen,VCA p 18, p23, EBNA and early antigen,
- der diagnostisch spezifische Marker für Chlamydia ausgewählt ist aus IgG oder IgM gegen Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae und Chlamydia psittaci, und- the diagnostic specific marker for Chlamydia is selected from IgG or IgM against Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae and Chlamydia psittaci, and
- der diagnostisch spezifische Marker für den Gastrointestinaltrakt ausgewählt ist aus IgG oder IgA gegen Helicobacter pylorii, Campylobacter jejunii und Yersinia enteroco- litica.- the diagnostic specific marker for the gastrointestinal tract is selected from IgG or IgA against Helicobacter pylorii, Campylobacter jejunii and Yersinia enterocltica.
12. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei der diagnostisch spezifische Marker für Pilzinfektionen ausgewählt ist aus IgG oder IgM gegen Aspergillus fumigatus und Candida albicans.The in vitro diagnostic test device of any one of claims 1 to 10, wherein the diagnostically specific marker for fungal infections is selected from IgG or IgM against Aspergillus fumigatus and Candida albicans.
13. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei der diagnostisch spezifische Marker für die Rheumadiagnose ausgewählt ist aus Rheu¬ mafaktoren, HLA- Markern, sowie Autoimmunantikörpern,13. The test device for in vitro diagnosis according to claim 1, wherein the diagnostically specific marker for the diagnosis of rheumatism is selected from rheumatoid factors, HLA markers, as well as autoimmune antibodies,
- der diagnostisch spezifische Marker für Autoimmunerkrankungen, Sjögren-Syndrom (SS-A), neonatalem Lupus erythematodes (LE), Sjögren-Syndrom (SS-B) ausgewählt ist aus Antikörpern gegen extrahierbare nukleare Antigene, snRNP (Ribonucleoprotein, systemischer LE), ss-DNA, dsDNA und c-ANCA (cytoplasmic-anti-neutrophil cyto- plasm antibody),- the diagnostically specific marker for autoimmune diseases, Sjögren's syndrome (SS-A), neonatal lupus erythematosus (LE), Sjögren's syndrome (SS-B) is selected from antibodies against extractable nuclear antigens, snRNP (ribonucleoprotein, systemic LE), ss DNA, dsDNA and c-ANCA (cytoplasmic-anti-neutrophil cytoplasm antibody),
- der diagnostisch spezifische Marker für Tierallergene ausgewählt ist aus IgE gegen Katzenepithelien (el), Hundeepithelien (e2), Milbe D. pteronyssinus (dl), Milbe D. fa- rinae (d2) und Hefe Alternaria tenuis (m6), und- the diagnostically specific marker for animal allergens is selected from IgE for epithelia of the epithelium (el), canine epithelia (e2), mite D. pteronyssinus (dl), mite D. farinae (d2) and yeast Alternaria tenuis (m6), and
- der diagnostisch spezifische Marker für Pollenallergen ausgewählt ist aus IgE gegen echte Ambrosie (wl), Spitzwegerich (w9), Hundezahngras (g2), Wiesenrispengras (g8), Eiche (t7), Ulme (t8) und Birke (t3).- the diagnostic specific marker for pollen allergens is selected from IgE against true ragweed (wl), plantain (w9), canine grass (g2), meadow bluegrass (g8), oak (t7), elm (t8) and birch (t3).
14. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei der diagnostisch spezifische Marker für das Mammakarzinom ausgewählt ist aus CA 15-3, CA 15 549 und MCA, undThe in vitro diagnostic test device of any one of claims 1 to 10, wherein the diagnostically specific marker for breast cancer is selected from CA 15-3, CA 15 549 and MCA, and
- der diagnostisch spezifische Marker für das Bronchialkarzinom ausgewählt ist aus NSE und CYFRA 21-1. - the diagnostic specific marker for bronchial carcinoma is selected from NSE and CYFRA 21-1.
15. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei der diagnostisch spezifische Marker für den akuten Herzinfarkt ausgewählt ist aus Myoglobin, Troponin T und Creatinkinase.The in vitro diagnostic test device of any one of claims 1 to 10, wherein the diagnostically specific marker for acute myocardial infarction is selected from myoglobin, troponin T and creatine kinase.
16. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei der diagnostisch spezifische Marker für die Schilddrüsenfunktion ausgewählt ist aus TSH, Thyroxin (T4), Trijodthyronin, freies Hormon fT3, freies Hormon fT4 und Anti¬ körpern gegen Thyreoidale Peroxidase, Thyreoglobulin und TSH.16. An in vitro diagnostic test device according to any one of claims 1 to 10, wherein the diagnostically specific marker for thyroid function is selected from TSH, thyroxine (T4), triiodothyronine, free hormone fT3, free hormone fT4 and anti-thyroid peroxidase antibodies , Thyroglobulin and TSH.
17. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei der diagnostisch spezifische Marker für die Schwangerschaftsdiagnostik ausgewählt ist aus IgG, IgM oder IgA gegen hcG, AFP, Rubella, CMV, Toxoplasma gondii, HSV, Parvovirus B19 und Varizella-Zoster- Virus.The in vitro diagnostic test device of any of claims 1 to 10, wherein the diagnostically specific marker for gestational diagnosis is selected from IgG, IgM or IgA against hcG, AFP, Rubella, CMV, Toxoplasma gondii, HSV, Parvovirus B19 and Varicella Zoster virus.
18. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei der diagnostisch spezifische Marker für die Liquordiagnostik ausgewählt ist aus IgG oder IgM gegen Masern, Rubella, VZV, HSV, Enteroviren, EBV, FSME und Borrelien.The in vitro diagnostic test device of any one of claims 1 to 10, wherein the diagnostically specific marker for CSF diagnostics is selected from IgG or IgM against Measles, Rubella, VZV, HSV, Enteroviruses, EBV, TBE and Borrelia.
19. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei der diagnostisch spezifische Marker für Alkoholismus ausgewählt ist aus CDT (Carbo- hydrat-defizientes Transferrin), Gamma-GT, pankreatische Elastase alpha- Amylase19. The in vitro diagnostic test device according to any one of claims 1 to 10, wherein the diagnostically specific marker for alcoholism is selected from CDT (carbohydrate-deficient transferrin), gamma-GT, pancreatic elastase alpha-amylase
20. Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 20, wobei der diagnostisch unspezifische Marker ausgewählt ist aus ausgewählt aus der Gruppe von Entzündungsmarkern, akuten Infektionsmarkern, chronischen Infektionsmarkem und Kombinationen davon, insbesondere der Albuminkonzentration, Gesamtimmunglo- bulinkonzentration, Neopterin, C-reaktivem Protein (CRP) Procalcitonin und cycli- schem citrulliertem Peptid und Kombinationen davon.20. The in vitro diagnostic test device of claim 1, wherein the diagnostically nonspecific marker is selected from the group of inflammatory markers, acute infection markers, chronic infection markers and combinations thereof, in particular the albumin concentration, total immunoglobulin concentration, neopterin, C-reactive protein (CRP) procalcitonin and cyclic citrated peptide and combinations thereof.
21. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik, umfassend a) Aufbringen eines Testpanel von mindestens zwei diagnostisch spezifischen Markern, die für eine herkömmliche Diagnose ausgewählt aus der Gruppe von Entzündungser¬ krankungen, Impfstatus, Schwangerschaft, Infektionserkrankungen, Allergien, viralen Erkrankungen, Blutbank-Untersuchung, Liquor-Diagnostik, Autoimmunerkrankungen, Karzinomen, akutem Herzinfarkt, Diabetes, Alkoholismus und Schildrüsenfünktion und21. A method for producing a test device for in vitro diagnosis, comprising a) applying a test panel of at least two diagnostically specific markers for a conventional diagnosis selected from the group of Entzündungser¬ diseases, vaccination status, pregnancy, infectious diseases, allergies, viral diseases , Blood bank examination, cerebrospinal fluid diagnostics, autoimmune diseases, Carcinomas, acute myocardial infarction, diabetes, alcoholism and thyroid function and
Kombinationen davon untersucht werden auf eine Trägermatrix, b) Aufbringen von mindestens einem diagnostisch unspezifischen Marker, auf die selbe oder eine getrennte Trägermatrix, und c) gegebenenfalls, Kombinieren der Testmatrices aus Schritt a) und b).Combinations thereof are assayed on a carrier matrix, b) applying at least one diagnostically nonspecific marker, to the same or a separate carrier matrix, and c) optionally, combining the test matrices from step a) and b).
22. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach An¬ spruch 21, wobei der Marker ausgewählt ist aus IgG, IgA, IgM oder IgE, Antikörpern, Teilen von Antikörpern, rekombinanten Antigen-bindenden Peptiden, wir zum Beispiel scFv, Nukleinsäuren oder deren Fragmente oder Kombinationen davon.22. A method for producing a test device for in vitro diagnosis according to claim 21 An¬, wherein the marker is selected from IgG, IgA, IgM or IgE, antibodies, parts of antibodies, recombinant antigen-binding peptides, we, for example, scFv, nucleic acids or fragments thereof or combinations thereof.
23. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach An¬ spruch 21 oder 22, wobei das Testpanel Antikörper oder Antigene umfaßt, die kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert werden.23. A method for producing a test device for in vitro diagnosis according to An¬ claim 21 or 22, wherein the test panel comprises antibodies or antigens which are immobilized covalently or non-covalently.
24. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 21 bis 23, wobei die Trägermatrix in Form eines Teststreifens, einer Membran, eines Biochips, Latexpartikeln und/oder von anderen Partikeln vorliegt.24. A method for producing an in vitro diagnostic test device according to any one of claims 21 to 23, wherein the carrier matrix in the form of a test strip, a membrane, a biochip, latex particles and / or other particles is present.
25. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach An¬ spruch 24, wobei die Membran aus Nylon, Nitrocellulose oder anderen geeigneten Ma¬ terialien besteht.25. A method for producing a test device for in vitro diagnosis according to An¬ claim 24, wherein the membrane consists of nylon, nitrocellulose or other suitable Ma¬ materials.
26. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 21 bis 25, wobei die Trägermatrix aus einem porösen Material besteht.26. A method for producing an in vitro diagnostic test device according to any one of claims 21 to 25, wherein the carrier matrix consists of a porous material.
27. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 21 bis 26, wobei die Trägermatrix aus unterschiedlich markierten Trä¬ germaterialien zusammengesetzt wird.27. A method for producing a test device for in vitro diagnostics according to any one of claims 21 to 26, wherein the carrier matrix is composed of differently labeled Trä¬ germaterialien.
28. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach An¬ spruch 27, wobei die Trägermaterialien mit einem Farbstoff in unterschiedlichen Inten¬ sitäten eingefärbt sind oder mit einem radioaktiven, magnetischen und/oder lumineszen- ten Marker unterschiedlich markiert sind. 28. A method for producing a test device for in vitro diagnostics according to claim 27, wherein the carrier materials are dyed with a dye in different intensities or are differently marked with a radioactive, magnetic and / or luminescent marker.
29. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach An¬ spruch 27 oder 28, wobei jedes Trägermaterial mit mindestens einem Antikörper oder Antigen, kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert, versehen ist.29. A method for producing a test device for in vitro diagnostics according to An¬ claim 27 or 28, wherein each carrier material with at least one antibody or antigen, covalently or non-covalently immobilized provided.
30. Verfahren zur Herstellung einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 21 bis 29, wobei die markierten Trägermaterialien als eine definierte Mi¬ schung kombiniert werden.30. A method for producing a test device for in vitro diagnostics according to any one of claims 21 to 29, wherein the labeled carrier materials are combined as a defined mixture Mi¬.
31. Verfahren für die in vitro Diagnostik von Analyten von Interesse in einer Probe, umfas¬ send a) zur Verfügung stellen einer Testvorrichtung für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 1 bis 21, b) in Kontakt bringen einer Probe mit den Markern auf der Testvorrichtung, und c) Nachweisen einer Reaktion der Probe mit den Markern auf der Testvorrichtung auf geeignete Weise.31. A method for the in vitro diagnosis of analytes of interest in a sample, comprising a) providing a test device for in vitro diagnosis according to one of claims 1 to 21, b) contacting a sample with the markers the test device, and c) detecting a reaction of the sample with the markers on the test device in an appropriate manner.
32. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach Anspruch 31, wobei der Marker ausgewählt ist aus IgG, IgA, IgM oder IgE, Antikörpern, Teilen von Antikörpern, rekombinanten Antigen-bindenden Peptiden, wie zum Beispiel scFv, Nukleinsäuren oder deren Frag¬ mente oder Kombinationen davon.32. The method for in vitro diagnostics according to claim 31, wherein the marker is selected from IgG, IgA, IgM or IgE, antibodies, parts of antibodies, recombinant antigen-binding peptides, such as scFv, nucleic acids or their Frag¬ ments or Combinations of it.
33. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach Anspruch 31 oder 32, wobei das Testpanel Antikörper oder Antigene umfaßt, die kovalent oder nicht-kovalent immobilisiert vor¬ liegen.33. The method for in vitro diagnosis according to claim 31 or 32, wherein the test panel comprises antibodies or antigens which are covalently or non-covalently immobilized.
34. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 31 bis 33, wobei als Marker Markerkombinationen nach einem der Ansprüche 11 bis 20 nachgewiesen wer¬ den.34. Method for in vitro diagnostics according to one of claims 31 to 33, wherein markers according to one of claims 11 to 20 proven as the marker.
35. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 31 bis 34, wobei die Probe ausgewählt ist aus Liquor, Urin, Sperma, Abstrichen, Biopsien, Sputum, Brust¬ warzen-Austrittsflüssigkeit, Schweiß, Serum und Blut und Teilen davon und Gemischen davon. 35. The method for in vitro diagnostic according to any one of claims 31 to 34, wherein the sample is selected from cerebrospinal fluid, urine, semen, smears, biopsies, sputum, thoracic wart effusion fluid, sweat, serum and blood and parts thereof and mixtures from that.
36. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 31 bis 35, wobei das Nachweisen einer Reaktion der Probe mit den Markern die Bildung einer visuell sicht¬ baren Farbreaktion umfaßt.36. The method for in vitro diagnostic according to any one of claims 31 to 35, wherein detecting a reaction of the sample with the markers comprises the formation of a visually visible color reaction.
37. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 31 bis 36, wobei das Nachweisen einer Reaktion der Probe mit den Markem einen ELISA umfaßt.37. The method of in vitro diagnostic according to claim 31, wherein detecting a reaction of the sample with the markers comprises an ELISA.
38. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 31 bis 37, wobei das Nachweisen einer Reaktion der Probe mit den Markern einen Sandwichassay oder kom- petetiven Assay umfaßt.38. The method of in vitro diagnostic according to claim 31, wherein detecting a reaction of the sample with the markers comprises a sandwich assay or a competitive assay.
39. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 31 bis 38, wobei eine Trägermatrix, die aus unterschiedlich markierten Trägermaterialien zusammengesetzt ist, nachgewiesen wird.39. The method for in vitro diagnostic according to any one of claims 31 to 38, wherein a carrier matrix, which is composed of differently labeled carrier materials, is detected.
40. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach Anspruch 39, wobei die Trägermaterialien mit einem Farbstoff in unterschiedlichen Intensitäten und/oder verschiedenen Fluores¬ zenzfarben eingefärbt sind.40. Method for in vitro diagnostics according to claim 39, wherein the carrier materials are dyed with a dye in different intensities and / or different fluorescence colors.
41. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 31 bis 38, wobei jedes Trägermaterial mit mindestens einem Antikörper oder Antigen, kovalent oder nicht- kovalent immobilisiert, versehen ist.41. The method for in vitro diagnostic according to any one of claims 31 to 38, wherein each carrier material with at least one antibody or antigen, covalently or non-covalently immobilized provided.
42. Verfahren für die in vitro Diagnostik nach einem der Ansprüche 31 bis 38, umfassend den Nachweis der markierten Trägermaterialien mittels Partikel-Fluoreszenz- Durchflußzytometrie. 42. Method for in vitro diagnostics according to one of claims 31 to 38, comprising the detection of the labeled support materials by means of particle fluorescence Durchflußzytometrie.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE102004041659A DE102004041659A1 (en) | 2004-08-27 | 2004-08-27 | Test device for the in vitro diagnosis of multi-analyte tests and their use |
| PCT/EP2005/009245 WO2006024466A2 (en) | 2004-08-27 | 2005-08-26 | Test device for the in vitro diagnosis of multi-analyte tests and the use thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EP1802977A2 true EP1802977A2 (en) | 2007-07-04 |
Family
ID=34935358
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EP05008483A Withdrawn EP1630557A1 (en) | 2004-08-27 | 2005-04-19 | Diagnostic multiplexed bead assay for identification of antibodies against Epstein Barr Virus (EBV). |
| EP05017002A Not-in-force EP1630558B1 (en) | 2004-08-27 | 2005-08-04 | Diagnostic multiplexed bead assay for identification of antibodies against acute respiratory infections and atypical pneumonia |
| EP05782938A Withdrawn EP1802977A2 (en) | 2004-08-27 | 2005-08-26 | Test device for the in vitro diagnosis of multi-analyse tests and the use thereof |
Family Applications Before (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EP05008483A Withdrawn EP1630557A1 (en) | 2004-08-27 | 2005-04-19 | Diagnostic multiplexed bead assay for identification of antibodies against Epstein Barr Virus (EBV). |
| EP05017002A Not-in-force EP1630558B1 (en) | 2004-08-27 | 2005-08-04 | Diagnostic multiplexed bead assay for identification of antibodies against acute respiratory infections and atypical pneumonia |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20080118911A1 (en) |
| EP (3) | EP1630557A1 (en) |
| AT (1) | ATE373238T1 (en) |
| CA (1) | CA2579020A1 (en) |
| DE (2) | DE102004041659A1 (en) |
| ES (1) | ES2293444T3 (en) |
| WO (1) | WO2006024466A2 (en) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102006012885A1 (en) * | 2006-03-18 | 2007-09-20 | Institut Virion/Serion Gmbh | Diagnostic test system for the simultaneous, quantitative detection of HIV1 and HIV2 antibodies and / or HIV antigens in human sample material |
| EP2020603A1 (en) * | 2007-08-03 | 2009-02-04 | BRAHMS Aktiengesellschaft | Method for risk stratification in stable coronary artery disease |
| EP2293078B1 (en) | 2007-08-03 | 2011-11-09 | B.R.A.H.M.S GmbH | Method for diagnosis of a bacterial infection |
| GB0722729D0 (en) * | 2007-11-20 | 2007-12-27 | Bristol Myers Squibb Co | Diagnostic markers of wound infection |
| US9528988B2 (en) * | 2009-04-07 | 2016-12-27 | National Institute Of Transplantation Foundation | Methods and kits for screening transplant recipients and candidates |
| US20140178884A1 (en) * | 2011-05-23 | 2014-06-26 | Board Of Regents Of The Nevada System Of Higher Education, On Behalf Of The Univ. Of Nevada, Reno | Method of diagnosing and treating an aspergillus species-associated condition |
| WO2014091490A2 (en) * | 2012-12-16 | 2014-06-19 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Diagnosis of autoimmune diseases using a specific antibody profile |
| JP2017503169A (en) | 2013-12-31 | 2017-01-26 | イエダ・リサーチ・アンド・デベロツプメント・カンパニー・リミテツド | Diagnosis of systemic lupus erythematosus using oligonucleotide antigens |
| RU2545792C2 (en) * | 2014-03-25 | 2015-04-10 | Сейфаддин Гашим Оглы Марданлы | Method of simultaneous detection of antibodies of class g to antigens of agents of torch-infections using immunochip |
| US11047855B2 (en) | 2015-03-01 | 2021-06-29 | Immunarray Ltd. | Diagnosis of systemic lupus erythematosus using protein, peptide and oligonucleotide antigens |
| WO2017044691A1 (en) * | 2015-09-09 | 2017-03-16 | Advantage Allergy Services, Llc | Systems and methods for testing and treatment of allergies |
| CN106168623B (en) * | 2016-05-12 | 2018-04-24 | 广州瑞辉生物科技股份有限公司 | Respiratory Tract Adenovirus IgA antibody test strip and its detection method |
| CN106645715B (en) * | 2016-11-18 | 2018-11-23 | 安徽医科大学 | It is a kind of for the protein-chip of 1 protein antibodies joint-detection of Epstein-Barr virus capsid antigen and nuclear antigen and its preparation and application |
| CN108490177B (en) * | 2018-02-08 | 2020-12-29 | 深圳市新产业生物医学工程股份有限公司 | Nasopharyngeal carcinoma antibody detection reagent, preparation method thereof and nasopharyngeal carcinoma detection kit |
| RU2726797C1 (en) * | 2019-12-23 | 2020-07-15 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт гриппа имени А.А. Смородинцева" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Diagnostic technique for agents of acute respiratory viral infections |
| WO2021147453A1 (en) * | 2020-01-20 | 2021-07-29 | 北京九强生物技术股份有限公司 | Quantitative kit for myxovirus resistance protein 1 |
| CN111579778B (en) * | 2020-05-07 | 2023-02-03 | 广州市妇女儿童医疗中心（广州市妇幼保健院、广州市儿童医院、广州市妇婴医院、广州市妇幼保健计划生育服务中心） | Application of IgE in bronchoalveolar lavage fluid as disease course diagnostic marker of acute-stage adenovirus pneumonia |
| CN111965231B (en) * | 2020-07-31 | 2022-08-02 | 华中科技大学 | Semiconductor sensor for virus detection and preparation method and application thereof |
| CN112505319A (en) * | 2020-10-26 | 2021-03-16 | 绍兴梅奥心磁医疗科技有限公司 | Immune quantitative detection device, detection method and application of to-be-detected marker |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3322373C2 (en) | 1983-05-19 | 1986-12-04 | Ioannis Dr. 3000 Hannover Tripatzis | Test means and methods for the detection of antigens and / or antibodies |
| DE3639279C3 (en) | 1986-10-24 | 1996-06-20 | Behringwerke Ag | Method for the quantitative determination of antibodies or antigens according to the ELISA method by photometric evaluation |
| US20030008410A1 (en) * | 1995-03-13 | 2003-01-09 | Hechinger Mark K. | Immunoassay apparatus, kit and methods |
| WO2004059293A2 (en) * | 2002-12-24 | 2004-07-15 | Biosite Incorporated | Markers for differential diagnosis and methods of use thereof |
-
2004
- 2004-08-27 DE DE102004041659A patent/DE102004041659A1/en not_active Ceased
-
2005
- 2005-04-19 EP EP05008483A patent/EP1630557A1/en not_active Withdrawn
- 2005-08-04 DE DE502005001469T patent/DE502005001469D1/en active Active
- 2005-08-04 ES ES05017002T patent/ES2293444T3/en active Active
- 2005-08-04 EP EP05017002A patent/EP1630558B1/en not_active Not-in-force
- 2005-08-04 AT AT05017002T patent/ATE373238T1/en not_active IP Right Cessation
- 2005-08-26 WO PCT/EP2005/009245 patent/WO2006024466A2/en active Application Filing
- 2005-08-26 CA CA002579020A patent/CA2579020A1/en not_active Abandoned
- 2005-08-26 US US11/661,216 patent/US20080118911A1/en not_active Abandoned
- 2005-08-26 EP EP05782938A patent/EP1802977A2/en not_active Withdrawn
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| "Biomarker", Retrieved from the Internet <URL:http://de.wikipedia.org/wiki/Biomarker> [retrieved on 20130322] * |
| "Southern blot", Retrieved from the Internet <URL:http://de.wikipedia.org/w/index.php/?oldid=64415825> * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2006024466A3 (en) | 2006-06-15 |
| CA2579020A1 (en) | 2006-03-09 |
| DE102004041659A1 (en) | 2006-03-02 |
| ATE373238T1 (en) | 2007-09-15 |
| EP1630557A1 (en) | 2006-03-01 |
| EP1630558A1 (en) | 2006-03-01 |
| ES2293444T3 (en) | 2008-03-16 |
| EP1630558B1 (en) | 2007-09-12 |
| WO2006024466A2 (en) | 2006-03-09 |
| US20080118911A1 (en) | 2008-05-22 |
| DE502005001469D1 (en) | 2007-10-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1802977A2 (en) | Test device for the in vitro diagnosis of multi-analyse tests and the use thereof | |
| JP5189201B2 (en) | Virtual separation of bound and free labels in ligand assays to perform immunoassays of biological fluids containing whole blood | |
| US7704730B2 (en) | Multiplexed assay methods | |
| DE60031548T2 (en) | METHOD FOR SIMULTANEOUS DETECTION OF BOTH COMPONENTS OF A BINDING SAVING | |
| US20060240569A1 (en) | Semi-quantitative immunochromatographic device | |
| US8470608B2 (en) | Combined visual/fluorescence analyte detection test | |
| US20080241958A1 (en) | Method for Determining HCG Levels in Fluid Samples | |
| CN101002096A (en) | Lateral flow device for the detection of large pathogens | |
| JPH08511340A (en) | Immunoassay for cell determination | |
| DE60116889T2 (en) | TEST FOR THE DIRECT DETECTION OF AN INFLAMMATORY INDICATOR OF A BODY FLUID TEST | |
| EP1536232A2 (en) | Analytical sandwich assay for the determination of NT-proBNP | |
| CN104246502B (en) | The device of the analysis thing in fluid sample can be included in for measuring at least one | |
| EP0280559A2 (en) | Agglutination immunoassay and kit for determination of a multivalent immune species using a buffered salt wash solution | |
| CN110346557B (en) | Detection kit | |
| EP3775896B1 (en) | Lateral flow immunoassay strip device | |
| CN107907676A (en) | Alzheimer related neural silk-fibroin detection kit and preparation method thereof | |
| US11061024B2 (en) | Analyte detection and methods therefor | |
| WO2024001798A1 (en) | Nucleic acid aptamer-based extracellular vesicle fluorescence polarization detection method and application thereof | |
| WO2002059617A2 (en) | Standard diluent for multiplex assays | |
| US20230221319A1 (en) | A Method, A System, An Article, A Kit And Use Thereof For Biomolecule, Bioorganelle, Bioparticle, Cell And Microorganism Detection | |
| US20210318311A1 (en) | Simultaneous detection of humoral and inflammatory biomarkers | |
| US20220258155A1 (en) | Lateral flow assay with sample adequacy line | |
| AU2002232578B2 (en) | Standard diluent for multiplex assays | |
| WO2012006394A2 (en) | Hmga2 as a biomarker for diagnosis and prognosis of ovarian cancer | |
| Young | Development of a salivary blood contamination nano-bio-chip test targeting transferrin-a putative biomarker of periodontitis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUAI | Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase |
Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012 |
|
| 17P | Request for examination filed |
Effective date: 20070327 |
|
| AK | Designated contracting states |
Kind code of ref document: A2 Designated state(s): AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IS IT LI LT LU LV MC NL PL PT RO SE SI SK TR |
|
| DAX | Request for extension of the european patent (deleted) | ||
| 17Q | First examination report despatched |
Effective date: 20071112 |
|
| R17C | First examination report despatched (corrected) |
Effective date: 20080219 |
|
| STAA | Information on the status of an ep patent application or granted ep patent |
Free format text: STATUS: THE APPLICATION IS DEEMED TO BE WITHDRAWN |
|
| 18D | Application deemed to be withdrawn |
Effective date: 20130817 |