DE69635241T2

DE69635241T2 - Grossflächige transplantate aus submucosalem gewebe und verfahren für ihre herstellung

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Publication number: DE69635241T2
Application number: DE69635241T
Authority: DE
Original assignee: METHODIST HEALTH GROUP Inc; Methodist Health Group Inc Indianapolis; Purdue Research Foundation
Current assignee: METHODIST HEALTH GROUP Inc; Methodist Health Group Inc Indianapolis; Purdue Research Foundation
Priority date: 1995-04-07
Filing date: 1996-04-05
Publication date: 2006-09-28
Anticipated expiration: 2016-04-06
Also published as: US5885619A; WO1996031226A1; US5955110A; EP0821590B1; AU690455B2; JPH10506125A; US5711969A; DE69635241D1; JP3061643B2; CA2211727A1; EP0821590A1; DK0821590T3; AU5536096A; EP0821590A4; ATE305792T1; CA2211727C; AR001564A1

Description

Technisches Gebiet der Erfindung
Diese Erfindung betrifft Gewebetransplantatkonstrukte, die zur Förderung des Neuwachstums und der Heilung von beschädigten oder erkrankten Gewebestrukturen brauchbar sind. Spezifischer ist die Erfindung auf submukosale Gewebetransplantatkonstrukte aus mehreren Streifen Submukosagewebe eines warmblütigen Wirbeltiers und auf Verfahren zu deren Herstellung gerichtet.
Technischer Hintergrund und Zusammenfassung der Erfindung
Es ist bekannt, daß Zusammensetzungen mit Tunica submucosa, die sowohl von der Tunica muscularis als auch von wenigstens dem lumenalen Teil der Tunica mucosa des Darms eines warmblütigen Wirbeltiers abgeschält wurde, als Gewebetransplantat verwendbar sind. Siehe z. B. US 4,902,508 und US 5,281,422 . Die in diesen Patenten beschriebenen Zusammensetzungen sind durch hervorragende mechanische Eigenschaften gekennzeichnet, darunter hohe Nachgiebigkeit, hoher Berstdruck und wirksamer Porositätsindex, weshalb solche Zusammensetzungen vorteilhaft als Gefäßtransplantatkonstrukte und bei Anwendungen zum Bindegewebsersatz verwendet werden können. Beim Gebrauch in solchen Anwendungen scheint das submukosale Transplantatkonstrukt als Matrix für das Neuwachsen der vom Transplantat ersetzten Gewebe zu dienen. Bemerkenswerterweise hat sich auch in über 600 artenverschiedenen Implantationen von Transplantatzusammensetzungen aus Submukosa nie eine Abstoßungsreaktion des Gewebetransplantats gezeigt.
Matrizes aus Submukosa zur erfindungsgemäßen Verwendung sind biologisch abbaubare Matrizes auf Kollagenbasis, die hochgradig konservierte Kollagene, Glykoproteine, Proteoglykane und Glykosaminoglykane in natürlicher Konfiguration und Konzentration enthalten. Submukosagewebe eines warmblütigen Wirbeltiers ist eine extrazelluläre Kollagenmatrix zur erfindungsgemäßen Verwendung. Submukosagewebe kann aus verschiedenen Quellen gewonnen werden, beispielsweise aus Darmgewebe von Tieren, die zur Fleischerzeugung gezüchtet werden, darunter Schweine, Rinder und Schafe oder andere warmblütige Wirbeltiere. Submukosagewebe von Wirbeltieren ist ein reichliches Nebenprodukt der gewerblichen Fleischerzeugung und daher ein kostengünstiges Gewebetransplantatmaterial.
Eine Beschränkung der in den oben genannten Patenten beschriebenen Submukosatransplantatkonstrukten besteht darin, daß die Größe der Transplantats durch die Größe des Stammaterials, aus dem das Submukosagewebe hergestellt wird, begrenzt ist. Beispielsweise ist die Größe eines aus Darmgewebe hergestellten Submukosatransplantats durch Länge und Umfang der als Quelle dienenden Darmgewebeteile begrenzt. Verschiedene Verwendungen von Transplantatkonstrukten aus Submukosagewebe, darunter Reparatur von Brüchen, Hauttransplantate, Hirnhautabdeckungen, Reparatur der Gastroschisis (angeborener Bauchwanddefekt) und Ersatz von Organgewebe, erfordern oft größere Blätter von Transplantatmaterial als direkt aus natürlichen Quellen hergestellt werden können.
Große Blätter Submukosagewebe können aus kleineren Teilen von Submukosagewebe durch herkömmliche Techniken wie Weben, Stricken oder die Verwendung von Klebstoffen hergestellt werden. Die gewerbliche Realisierung solcher Techniken ist jedoch oft unpraktisch und teuer. Zudem kann die Verwendung von Klebstoffen oder die chemische Vorbehandlung zur Steigerung der Adhäsion die biotropen Eigenschaften des Submuko satransplantats verschlechtern. Daher besteht ein Bedürfnis nach einem kostengünstigen, leicht herstellbaren großflächigen Submukosagewebetransplantat, das seine biotropen Eigenschaften behält.
Nach einer erfindungsgemäßen Ausführungsform werden großflächige Submukosagewebetransplantate aus mehreren Stücken von Matrizes aus Wirbeltiersubmukosa gebildet. Einheitliche Blätter von Submukosagewebe (d. h. Transplantate aus einem Stück) werden erfindungsgemäß durch Miteinanderverschmelzen von mehreren Streifen Submukosagewebe unter Bildung eines Gewebeblatts mit einer Oberfläche größer als jeder der Submukosagewebe-Teilstreifen hergestellt. Dieser Prozeß umfaßt die Schritte Überlappen zumindest eines Teils eines Streifens Submukosagewebe mit zumindest einem Teil eines anderen Streifens Submukosagewebe und Anwendung von Druck auf zumindest die überlappenden Teile unter Bedingungen, welche die Entwässerung des Submukosagewebes zulassen. Unter diesen Bedingungen werden die überlappenden Teile "verschmolzen" und bilden ein einheitliches großes Gewebeblatt. Das erfindungsgemäß gebildete großflächige Transplantat besteht im Wesentlichen aus Submukosagewebe, frei von möglicherweise verschlechternden Klebstoffen und chemischer Vorbehandlung, und weisen eine größere Fläche und höhere mechanische Festigkeit als die bei der Bildung des Transplantats verwendeten Einzelstreifen auf.
Aus Gewebe warmblütiger Wirbeltiere hergestellte Einzelstreifen Submukosagewebe haben richtungsspezifische mechanische Eigenschaften (d. h. die physikalischen Eigenschaften sind längs verschiedener Achsen unterschiedlich). Diese Richtungseigenschaften werden hauptsächlich durch die Ausrichtung des Kollagens im Gewebe bestimmt. Im Darmsubmukosagewebe sind die Kollagenfasern die lastaufnehmenden Bestandteile und diese sind hauptsächlich parallel zur Achse des Darmlumens ausgerichtet. Diese Längsausrichtung des Kollagens im Darmsubmuko sagewebe trägt zur Richtungsabhängigkeit der physikalischen Eigenschaften der Submukosagewebekonstrukte bei.
Nach einer erfindungsgemäßen Ausführungsform wird ein einheitliches pseudoisotropes Mehrschicht-Transplantat aus vielen Streifen Submukosagewebe hergestellt. Der hier verwendete Ausdruck "pseudoisotrop" beschreibt ein Transplantat mit annähernd gleichen physikalischen Eigenschaften in jeder Achsenrichtung des Materials. Die erfindungsgemäßen pseudoisotropen Mehrschicht-Transplantate werden aus einzelnen Streifen Submukosagewebe oder aus Blättern von Submukosagewebe, die Streifen von Submukosagewebe enthalten, hergestellt. Das Herstellungsverfahren für die pseudoisotropen Transplantate umfaßt das Überlappen eines Teils eines ersten Streifens (oder Blatts) mit einem zweiten Streifen (oder Blatt), wobei der zweite Streifen (oder das Blatt) in einer zum ersten Streifen (oder Blatt) parallelen Ebene ausgerichtet, aber so gedreht ist, daß die Längsachse des ersten Streifens (oder Blatts) mit der Achse des zweiten Streifens (oder Blatts) einen Winkel bildet. Weitere Streifen (oder Blätter) können in gleicher Weise zugefügt werden, um eine Mehrschichtstruktur mit der gewünschten Anzahl laminierter Schichten zu schaffen. Die einzelnen Streifen (oder Blätter) Submukosa werden dann durch Anwendung von Druck auf wenigstens die überlappenden Teile Submukosagewebe aneinander fixiert und bilden ein einheitliches pseudoisotropes Mehrschichtkonstrukt.
Kurze Beschreibung der Zeichnungen
1 ist eine schematische Darstellung eines aus mehreren Streifen Submukosagewebe gebildeten Homolaminat-Transplantats;
2 ist eine schematische Darstellung eines aus vier Streifen Submukosagewebe gebildeten pseudoisotropen Heterolaminat-Transplantats;
3 ist eine schematische Darstellung eines aus drei Blättern Submukosagewebe gebildeten pseudoisotropen Heterolaminat-Transplantats, wobei jedes Blatt aus mehreren Streifen Submukosagewebe gebildet ist; und
4 ist eine schematische Darstellung einer erfindungsgemäß zur Ausbildung von Perforationen in Submukosagewebetransplantaten geeigneten Vorrichtung.
Eingehende Beschreibung bevorzugter Ausführungsformen
Erfindungsgemäß wird ein Verfahren zur Bildung von Gewebetransplantatkonstrukten mit großflächigen Blättern aus Submukosagewebe bereitgestellt. Ferner gibt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Herstellung von pseudoisotropen Mehrschichtblättern aus Submukosagewebe an. Das Verfahren umfaßt den Schritt des Verschmelzens mehrerer Streifen Submukosagewebe unter Bildung einheitlicher Blätter Submukosagewebe.
Für die Verwendung zur Bildung der vorliegenden Transplantatkonstrukte geeignetes Submukosagewebe umfaßt natürlich verknüpfte extrazelluläre Matrixproteine, Glykoproteine und andere Faktoren. Eine Quelle für Submukosagewebe ist Darmgewebe warmblütiger Wirbeltiere. Eine bevorzugte Quelle für Submukosagewebe zur Verwendung in dieser Erfindung ist Dünndarmgewebe.
Geeignetes Darmsubmukosagewebe umfaßt typischerweise die sowohl von der Tunica muscularis als auch zumindest vom lumenalen Teil der Tunica mucosa abgeschälte Tunica submucosa. In einer erfindungsgemäßen Ausführungsform umfaßt das Darmsubmukosagewebe die Tunica submucosa und Basisteile der Tunica mucosa einschließlich der Lamina muscularis mucosa und des Stratum compactum. Diese Schichten variieren bekanntermaßen je nach der Wirbeltierart in Dicke und Ausprägung.
Die Herstellung des Submukosagewebes zur erfindungsgemäßen Verwendung ist in US 4,902,508 beschrieben. Ein Wirbeltierdarmsegment, bevorzugt von Schweine-, Schaf- oder Rinderarten, jedoch ohne andere Arten auszuschließen, wird der Abtragung durch eine Längswischbewegung zur Entfernung der äußeren, das glatte Muskelgewebe umfassenden Schichten und der innersten Schicht, d. h. des lumenalen Teils der Tunica mucosa, unterworfen. Das Submukosagewebe wird dann mit Salzlösung gespült und ggf. sterilisiert.
Die erfindungsgemäßen Mehrschicht-Submukosagewebe-Transplantatkonstrukte können mit herkömmlichen Sterilisationstechniken sterilisiert werden, darunter Glutaraldehydgerbung, Formaldehydgerbung bei saurem pH, Behandlung mit Propylen- oder Ethylenoxid, Gasplasmasterilisation, Gammastrahlung, Elektronenstrahl, Peressigsäuresterilisation. Bevorzugt sind Sterilisationstechniken, welche die mechanische Festigkeit, die Struktur und die biotropen Eigenschaften des Submukosagewebes nicht nachteilig beeinflussen. Beispielsweise kann starke Gammastrahlung bei den Blättern aus Submukosagewebe einen Verlust an Festigkeit verursachen. Zu bevorzugten Sterilisationstechniken gehört Einwirken von Peressigsäure auf das Transplantat, 1–4 Mrad Gammabestrahlung (mehr bevorzugt 1–2,5 Mrad Gammabestrahlung), Behandlung mit Ethylenoxid oder Gasplasmasterilisation; Peressigsäuresterilisation ist das meist bevorzugte Sterilisationsverfahren. Typischerweise wird das Submukosagewebe zwei oder mehreren Sterilisationsprozessen unterworfen. Nach der Sterilisation des Submukosagewebes, beispielsweise durch chemische Behandlung, kann es in einen Umschlag aus Kunststoff oder Folie eingeschlagen und erneut mit Elektronen- oder Gammastrahlen sterilisiert werden.
Das Submukosagewebe kann in hydratisiertem oder entwässertem Zustand gelagert werden. Gefrier- oder luftgetrocknetes Submukosagewebe kann wieder befeuchtet und ohne wesentlichen Verlust seiner biotropen und mechanischen Eigenschaften erfindungsgemäß verwendet werden.
Bei einer erfindungsgemäßen Ausführungsform werden großflächige nachgiebige Blätter aus Submukosagewebe aus vielen Streifen Submukosagewebe gebildet. Die Abmessungen der einzelnen Submukosagewebestreifen sind nicht kritisch und der hier verwendete Ausdruck "Submukosagewebestreifen" soll Submukosagewebe von einer oder mehreren Wirbeltierquellen oder -organen in einer großen Vielfalt von Größen und Formen umfassen. In einer Ausführungsform werden die Streifen aus einem abgeschälten Teil Darmgewebe gebildet, das gegebenenfalls, aber bevorzugt, geschnitten und flach ausgelegt wird, um längliche Streifen Submukosagewebe mit zwei allgemein parallelen Seiten und gegenüberliegenden Enden zu bilden. Der hier verwendete Ausdruck "Submukosagewebeblatt" soll Gewebekonstrukte mit mehreren Submukosagewebestreifen umfassen, wobei die Streifen so überlappend übereinandergelegt sind, daß sie ein Konstrukt mit größerer Oberfläche als die jedes der einzelnen für die Bildung dieses Konstrukt verwendeten Streifen bilden. Der Ausdruck "Submukosagewebeschichten" bezieht sich auf die einzelnen Schichten eines Mehrschicht-Submukosagewebekonstrukts.
Einheitliche großflächige Submukosagewebeblätter werden erfindungsgemäß durch Überlappen einzelner Submukosagewebestreifen und Anwenden von Druck auf die überlappenden Teile gebildet, wobei die Gewebe miteinander verschmolzen werden. In einer Ausführungsform wird der Druck auf die überlappenden Teile unter Bedingungen angelegt, welche eine Entwässerung des Submukosagewebes zulassen. Die großflächigen Submukosagewebeblätter können entweder als homolaminares oder als heterola minares Blatt gebildet werden. Der hier verwendete Ausdruck "heterolaminar" bezieht sich auf ein Mehrschichtgewebe mit einer an verschiedenen Punkten des einheitlichen Transplantatkonstrukts unterschiedlichen Anzahl von Submukosaschichten, die übereinandergelegt (und verschmolzen) sind. Der hier verwendete Ausdruck "homolaminar" bezieht sich auf ein Mehrschicht-Gewebetransplantatkonstrukt mit einer einheitlichen Anzahl von Submukosaschichten an allen Stellen des einheitlichen Transplantats.
In einer Ausführungsform umfaßt das Verfahren zur Bildung großer Submukosagewebeblätter die Schritte Überlappen zumindest eines Teils eines Submukosagewebestreifens mit zumindest einem Teil eines zweiten Submukosagewebestreifens und Anwendung von Druck zumindest auf den überlappenden Teil unter Bedingungen, die eine Entwässerung des Submukosagewebes zulassen. Das Ausmaß der Überlappung zwischen benachbarten Submukosagewebestreifen kann je nach der beabsichtigten Verwendung und den gewünschten Eigenschaften des großflächigen Transplantats verändert werden, vorausgesetzt, daß zumindest ein Teil eines jeden Submukosagewebestreifens mit einem Teil eines anderen Submukosagewebestreifens überlappt. Der angewendete Druck verschmilzt die Submukosagewebestreifen an den überlappenden Teilen miteinander und erzeugt ein nachgiebiges einheitliches heterolaminares Submukosagewebeblatt.
In einer anderen Ausführungsform kann ein einheitliches homolaminares Submukosagewebeblatt aus Submukosagewebestreifen hergestellt werden. Das Verfahren zur Bildung des homolaminaren Gewebetransplantatkonstrukts umfaßt die Schritte Bildung einer ersten Submukosagewebeschicht, in der Submukosagewebestreifen auf einer ersten Oberfläche nebeneinander angeordnet sind. Die Submukosagewebestreifen der ersten Schicht sind aneinander angrenzend angeordnet, so daß die Ränder der einzelnen Streifen sich berühren ohne sich wesentlich zu überlap pen. Auf die erste Submukosagewebeschicht wird dann eine zweite Submukosagewebeschicht aufgelegt. Die Submukosagewebestreifen der zweiten Schicht sind ähnlich wie die Submukosagewebestreifen der ersten Schicht aneinander angrenzend angeordnet (d. h. aneinander angrenzend angeordnet, so daß die Ränder der einzelnen Streifen sich berühren ohne sich wesentlich zu überlappen). In einer Ausführungsform sind die Submukosagewebestreifen der zweiten Schicht in derselben Richtung ausgerichtet wie die Submukosagewebestreifen der ersten Schicht, aber gegen die Submukosagewebestreifen der ersten Schicht versetzt, so daß die sich berührenden Ränder der einzelnen Submukosagewebestreifen der ersten Schicht von den Submukosagewebestreifen der zweiten Schicht überbrückt werden (siehe 1). Die Überlappungsteile der Submukosagewebestreifen werden dann zwischen zwei Oberflächen unter Bedingungen, die eine wenigstens teilweise Entwässerung des komprimierten Submukosagewebes zulassen, zusammengedrückt, wobei wenigstens eine der Oberflächen wasserdurchlässig ist.
Vorteilhaft bestehen die erfindungsgemäß gebildeten sowohl hetero- als auch homolaminaren großflächigen Blätter im Wesentlichen aus Submukosagewebe, haben erhöhte mechanische Festigkeit und eine größere Oberfläche als jeder der zur Bildung der Submukosablätter verwendeten Einzelstreifen.
Submukosagewebe besitzt typischerweise eine innere (lumenale) und eine äußere (ablumenale) Oberfläche. Die lumenale Oberfläche ist die dem Lumen des Quellorgans zugewandte Oberfläche und ist typischerweise in vivo einer inneren Mukosaschicht benachbart, während die ablumenale Oberfläche die vom Lumen des Quellorgans abgewandte Oberfläche der Submukosa und typischerweise in vivo in Kontakt mit glattem Muskelgewebe ist. Mehrere Submukosagewebestreifen können so überlappt werden, daß die ablumenale Oberfläche die lumenale Oberfläche, daß die lumenale Oberfläche die lumenale Oberfläche oder daß die ablumenale Oberfläche die ablumenale Oberfläche eines angrenzenden Submukosagewebestreifens kontaktiert. Alle diese Überlappungskombinationen von Submukosagewebestreifen von demselben oder von verschiedenen Wirbeltieren oder Quellorganen erzeugen erfindungsgemäß bei Kompression zumindest der überlappenden Teile unter Bedingungen, welche eine Entwässerung des Gewebes zulassen, ein großflächiges Submukosagewebeblatt
Die erfindungsgemäßen Submukosagewebestreifen können konditioniert werden, wie in US 5,275,826 beschrieben, um die viskoelastischen Eigenschaften des Submukosagewebes zu verändern. Nach einer Ausführungsform wird das von der Tunica muscularis und vom lumenalen Teil der Tunica mucosa abgeschälte Submukosagewebe so konditioniert, daß es eine Dehnung von nicht mehr als 20% aufweist. Das Submukosagewebe wird durch Recken, chemische Behandlung, enzymatische Behandlung oder indem man es anderen Umwelteinflüssen aussetzt konditioniert. In einer Ausführungsform werden Darmsubmukosagewebestreifen durch Recken in Längs- oder Querrichtung so konditioniert, daß sie eine Dehnung von nicht mehr als 20% haben. Die konditionierten Submukosastreifen können erfindungsgemäß zur Bildung von großflächigen Blättern oder Mehrschichtstrukturen verwendet werden. Alternativ kann das Submukosamaterial nach der Bildung von großflächigen Blättern oder Mehrschichtkonstrukten konditioniert werden, um ein Submukosagewebematerial mit einer Dehnung von nicht mehr als 20% zu erzeugen.
Während der Bildung der großflächigen Submukosagewebeblätter wird auf die überlappenden Teile durch Zusammendrücken des Submukosagewebes zwischen zwei Oberflächen Druck ausgeübt. Die beiden Oberflächen können aus einer Vielzahl von Materialien und in jeglicher Form ausgebildet sein, je nach der gewünschten Form und Spezifikation des einheitlichen Transplantatkonstrukts. Typischerweise sind die beiden Oberflächen als flache Platten ausgebildet; sie können aber auch andere Formen umfassen wie Siebe, sich gegenüberstehende Zylinder oder Walzen und komplementäre nicht-ebene Flächen. Jede dieser Oberflächen kann ggf. geheizt oder perforiert sein. In bevorzugten Ausführungsformen ist wenigstens eine der Oberflächen wasserdurchlässig. Der hier verwendete Ausdruck wasserdurchlässige Oberfläche schließt mikro- oder makroporöse wasseraufnehmende Oberflächen ein. Makroporöse Materialien umfassen perforierte Platten oder Netze aus Kunststoff, Metall, Keramik oder Holz.
Nach einer Ausführungsform wird das Submukosagewebe zusammengedrückt, indem man die überlappenden Submukosagewebestreifen auf eine erste Oberfläche legt und eine zweite Oberfläche auf die freiliegende Submukosafläche auflegt. Dann wird eine Kraft angelegt, welche die beiden Oberflächen gegeneinander drückt, wobei das Submukosamaterial zwischen beiden Oberflächen zusammengedrückt wird. Die Druckkraft kann nach jedem dem Fachmann bekannten Verfahren erzeugt werden, einschließlich des Durchführens der Vorrichtung durch ein Paar Quetschwalzen (wobei der Abstand der Oberflächen der Walzen kleiner als der ursprüngliche Abstand zwischen beiden Platten ist), dem Anbringen eines Gewichts auf der oberen Platte und der Verwendung einer hydraulischen Presse oder von atmosphärischem Druck auf die beiden Oberflächen.
In einer bevorzugten Ausführungsform werden die Submukosagewebestreifen Bedingungen unterworfen, welche eine Entwässerung des Submukosagewebes gleichzeitig mit der Kompression zulassen. Der Ausdruck "Bedingungen, welche eine Entwässerung des Submukosagewebes zulassen" soll jede mechanische oder Umweltbedingung umfassen, welche zumindest an den Überlappungspunkten das Entfernen des Wassers aus dem Submukosagewebe fördert oder einleitet. Um die Entwässerung des komprimierten Submukosagewebes zu fördern, kann zumindest eine der beiden das Gewebe zusammendrückenden Oberflächen wasserdurchlässig sein. Die Entwässerung des Gewebes kann ggf. durch Anwenden von saugfähigem Material, durch Heizen des Gewebes oder durch Blasen von Luft über das Äußere der beiden komprimierenden Oberflächen weiter gesteigert werden.
Die mehreren Submukosagewebestreifen werden typischerweise 12–48 h bei Raumtemperatur komprimiert, obwohl auch Wärme angewendet werden kann. Beispielsweise kann auf das Äußere der komprimierenden Oberflächen eine Heizdecke aufgelegt werden, wodurch die Temperatur des komprimierten Gewebes auf etwa 40 bis etwa 50 °C gesteigert wird. Die Kompressionszeit der überlappenden Teile wird gewöhnlich durch das Ausmaß der Entwässerung des Gewebes bestimmt. Anwendung von Wärme erhöht die Entwässerungsgeschwindigkeit und vermindert so die Zeitdauer, während der die überlappenden Gewebeteile komprimiert werden müssen. Typischerweise wird das Gewebe so lange komprimiert, daß ein steifes, aber flexibles Material entsteht. Ausreichende Entwässerung des Gewebes wird auch durch Anwachsen der Impedanz eines durch das Gewebes fließenden elektrischen Stroms angezeigt. Wenn die Impedanz um 100–200 Ohm angestiegen ist, wurde das Gewebe hinreichend entwässert und der Druck kann aufgehoben werden.
Das komprimierte Submukosagewebe kann von den beiden Oberflächen als einheitliches nachgiebiges großflächiges Gewebekonstrukt abgenommen werden. Das Konstrukt kann weiterbehandelt (d. h. geschnitten, gefaltet, genäht usw.) werden, um an unterschiedliche medizinischen Anwendungen, welche das erfindungsgemäße Submukosamaterial benötigen, angepaßt zu sein.
Ggf. kann während der Kompression an das Submukosagewebe ein Vakuum angelegt werden. Das angelegte Vakuum verstärkt die Entwässerung das Gewebes und kann die Kompression des Gewebes unterstützen. Alternativ kann das Anlegen des Vakuum die alleinige Kompressionskraft zum Zusammendrücken der überlap penden Teile der Mehrzahl von Submukosagewebestreifen liefern. Beispielsweise wird das überlappende Submukosagewebe zwischen zwei Oberflächen ausgelegt, von denen bevorzugt eine wasserdurchlässig ist. Die Vorrichtung wird mit saugfähigem Material abgedeckt, um Wasser aufzusaugen, und mit einer Entlüftungsfolie (breather blanket), um einen Luftabfluß zu ermöglichen. Die Vorrichtung wird dann in eine Vakuumkammer gestellt und en Vakuum, allgemein zwischen 14 bis 70 Zoll Hg (7–35 psi,48–241 kPa) angelegt. Bevorzugt hat das angelegte Vakuum etwa 51 Zoll Hg (25 psi, 172 kPa). Ggf. kann oben auf die Kammer eine Heizdecke aufgelegt werden, um das Submukosagewebe während der Kompression zu erwärmen. Für diese Ausführungsform geeignete Kammern sind dem Fachmann bekannt und umfassen jede Vorrichtung, die mit einem Vakuumanschluß versehen ist. Die resultierende Abnahme des atmosphärischen Drucks wirkt mit den beiden Oberflächen bei der Kompression und gleichzeitigen Entwässerung des Submukosagewebes zusammen.
Ggf. können großflächige Gewebetransplantate in verschiedenen Formen für die Gewebetransplantationsanwendungen gebildet werden. Beispielsweise können für die Anwendung zur Organrekonstruktion die großflächigen Blätter in Form von Halbkugeln oder Taschen ausgebildet werden. Ein solches geformtes Konstrukt ist vorteilhaft beim Ersatz von großen Bereichen der Harnblase oder des Magens. Diese geformten Submukosagewebekonstrukte können mit herkömmlichen Techniken wie Schneiden und Nähen des Gewebes zur gewünschten Form gebracht werden.
Alternativ können Submukosagewebestreifen mittels eines einfachen Herstellungsverfahrens zu einem großen Submukosagewebeblatt mit nicht-ebener Form geformt werden. Das Verfahren umfaßt die Schritte Einlegen mehrerer Submukosagewebestreifen zwischen zwei komplementäre nicht-ebene Oberflächen und Zusammendrücken der überlappenden Submukosagewebestreifen zwischen den beiden Oberflächen. Die komplementär geformten Oberflächen sind so geformt, daß die beiden Oberflächen zusammengepreßt werden können, so daß die Oberflächen sich dicht aneinanderlegen, ohne zwischen sich eine wesentliche Luftblase zu lassen. Bevorzugt ist wenigstens eine der beiden komplementären Oberflächen wasserdurchlässig.
Ein Verfahren zur Bildung eines geformten Submukosakonstrukts umfaßt das Auflegen mehrerer Submukosagewebestreifen auf eine nicht-eben geformte poröse Oberfläche, so daß das Submukosagewebe sich an den Umriß der porösen Oberfläche anschmiegt. Bevorzugt wird das Submukosagewebe ohne Recken des Materials auf die poröse aufgelegt, jedoch kann das Submukosagewebe gereckt werden, um das Bedecken der geformten porösen Oberfläche zu erleichtern. Jeder Submukosagewebestreifen wird so auf der porösen Oberfläche positioniert, daß er zumindest einen Teil eines benachbarten Submukosagewebestreifens überlappt. Die überlappenden Submukosagewebeteile werden mit einer zur ersten porösen Oberfläche komplementär geformten zweiten Oberfläche bedeckt und es wird Druck angelegt, um das Submukosagewebe zwischen den beiden Oberflächen unter Bedingungen, welche eine Entwässerung des Submukosagewebes zulassen, zusammenzudrücken.
Alternativ können die erfindungsgemäßen großflächigen Blätter durch einen Formpreßvorgang in nicht-ebene Gestalt geformt werden, wobei das Submukosagewebe von einem porösen Stempel unter entwässernden Bedingungen in nicht-eben Form gepreßt wird, so daß das geformte Gewebetransplantat seine Form beibehält. Bevorzugt wird in einem solchen Verfahren ein großflächiges Mehrschichtblatt verwendet.
Mehrschichtige Submukosagewebekonstrukte werden erfindungsgemäß durch Überlappen eines Teils eines Submukosagewebestreifens mit einem Teil eines anderen Submukosagewebestrei fens gebildet. Auf ähnliche Weise können erfindungsgemäß großflächige Mehrschicht-Gewebetransplantatkonstrukte durch Überlappen eines Submukosagewebeblatts (gebildet wie oben beschrieben) mit zumindest einem Teil eines zweiten Submukosagewebeblatts gebildet werden. Größe und physikalische Eigenschaften des Mehrschicht-Gewebetransplantatkonstrukts können durch die Anzahl der überlappenden Submukosagewebestreifen und den prozentualen Anteil des überlappenden Teils jedes Streifens gesteuert werden.
Erfindungsgemäß werden die Mehrschicht-Gewebetransplantatkonstrukte durch Überlappen eines Teils eines Submukosagewebestreifens mit einem Teil eines anderen Submukosagewebestreifens zur Bildung eines ersten Blatts gebildet. Auf die überlappenden Teile des ersten Blatts werden weiter Submukosagewebestreifen zur Bildung eines zweiten Blatts aufgelegt, wobei die Ränder der Streifen des zweiten Blatts ggf. einen spitzen Winkel mit den Streifenrändern des ersten Blatts bilden können und wobei das so gebildete zweite Blatt koplanar mit dem ersten Blatt ist. Die Submukosagewebestreifen des zweiten Blatts können so positioniert werden, daß zumindest ein Teil eines Submukosagewebestreifens des zweiten Blatts mit zumindest einem Teil eines anderen Submukosagewebestreifens des zweiten Blatts überlappt. Um weitere Submukosagewebeschichten bereitzustellen, können weitere Submukosagewebestreifen auf die überlappenden Teile des ersten und zweiten Blatts aufgelegt werden. Die mehreren Submukosagewebeschichten werden dann unter entwässernden Bedingungen komprimiert und bilden ein mehrschichtiges heterolaminares Submukosagewebekonstrukt mit einer Fläche größer jeder der für die Bildung des Mehrschichtkonstrukts verwendeten einzelnen Submukosagewebestreifen.
In einer erfindungsgemäßen Ausführungsform wird Submukosagewebe in Streifen geschnitten, wobei jeder Streifen all gemein parallele Seiten hat, und zur Bildung erfindungsgemäßer heterolaminarer Mehrschichtblätter verwendet. Bei dieser Ausführungsform werden die Submukosagewebestreifen der zweiten Schicht auf die überlappenden Teile der ersten Schicht aufgelegt, so daß die Ränder der Submukosastreifen der ersten Schicht in einem Winkel zu den Rändern der Submukosastreifen der zweiten Schicht stehen. Die überlappenden Submukosagewebeteile werden unter entwässernden Bedingungen komprimiert und bilden das heterolaminare Mehrschichtblatt. Diese Blätter können geschnitten werden ohne auszufasern und delaminieren nicht beim Einweichen in Wasser über einen Zeitraum (mehr als eine Stunde), welcher der zum Implantieren des Blatts in einen Wirt benötigten Zeit entspricht. Wenn das Blatt richtig implantiert ist, so daß es an allen Seiten vernäht ist, sollte nach der Implantation keine Delaminierung auftreten.
Erfindungsgemäß wird ein Gewebetransplantatkonstrukt mit pseudoisotropen Eigenschaften aus Submukosagewebestreifen gebildet. Die pseudoisotropen Gewebetransplantatkonstrukte umfassen mehrere miteinander verschmolzene Submukosagewebestreifen in einer Mehrschichtstruktur ohne Klebstoffe oder Nähte. Das pseudoisotrope Mehrschicht-Gewebetransplantat wird erfindungsgemäß aus mindestens drei Darmsubmukosagewebestreifen hergestellt, die sowohl von der Tunica muscularis als auch vom lumenalen Teil der Tunica mucosa eines warmblütigen Wirbeltiers abgeschält sind. Jeder der Darmsubmukosagewebestreifen ist durch eine Längsachse gekennzeichnet, welche der vorherrschenden Ausrichtung der Kollagenfasern in den Submukosagewebestreifen entspricht. Das Herstellungsverfahren der pseudoisotropen Transplantatkonstrukte umfaßt das Auflegen eines ersten Submukosagewebestreifens auf eine erste Oberfläche, das Auflegen von zumindest zwei weiteren Submukosagewebestreifen auf den ersten Streifen, so daß die Längsachse eines jeden einzelnen Submukosagewebestreifens einen Winkel von etwa 180°/N mit den Längsachsen von mindestens zwei anderen das he terolaminare Transplantat bildenden Submukosagewebestreifen bildet, wobei N die Gesamtzahl der Submukosagewebestreifen ist (siehe 2). Beispielsweise hat ein aus vier (4) Submukosagewebestreifen gebildetes pseudoisotropes Transplantatkonstrukt einen Winkel von 45° (180°/4 = 45°) zwischen den Mittenlängsachsen eines jeden Streifens und zwei der drei anderen das Transplantatkonstrukt bildenden Streifen (siehe 2). Das Submukosagewebe (zumindest die überlappenden Teile) wird dann zwischen der ersten und der zweiten Oberfläche komprimiert. In einer Ausführungsform wird das Gewebe unter Bedingungen komprimiert, die eine zumindest teilweise Entwässerung des Submukosagewebes zulassen, und in einer bevorzugten Ausführungsform ist mindestens eine der Oberflächen wasserdurchlässig.
Großflächige Gewebetransplantatkonstrukte mit pseudoisotropen Eigenschaften können auch aus großflächigen Submukosagewebeblättern hergestellt werden. Diese pseudoisotropen Gewebetransplantatkonstrukte umfassen mehrere Schichten großflächiger Submukosagewebeblätter, wobei diese überlappende Submukosagewebestreifen enthalten. Die überlappende Submukosagewebestreifen enthaltenden Submukosagewebeblätter können als homolaminare oder heterolaminare Gewebekonstrukte gebildet werden, wie in dieser Beschreibung oben beschrieben (siehe 3).
Ein Herstellungsverfahren für ein großflächiges Mehrschicht-Gewebetransplantatkonstrukt mit pseudoisotropen Eigenschaften umfaßt das Bilden eines ersten Submukosagewebeblatts aus mehreren Submukosagewebestreifen und das Überlagern des ersten Blatts mit mindestens zwei weiteren Blättern. Die in jedem Blatt enthaltenen einzelnen Submukosagewebestreifen haben eine Längsachse, welche der vorherrschenden Ausrichtung der Kollagenfasern in den Submukosagewebestreifen entspricht. Das erste Blatt wird auf einer ersten Oberfläche gebildet, in dem die einzelnen Submukosagewebestreifen so überlappt werden, daß jeder Streifen mit den angrenzenden Streifen fluchtet und die Längsachse aller Submukosagewebestreifens zueinander parallel sind. Daher sind die Kollagenfasern des ersten Blatts vorherrschend in einer Richtung orientiert, so daß dem Blatt eine Längsachse entsprechend der vorherrschenden Ausrichtung der Kollagenfasern zugeschrieben werden kann.
Wie oben beschrieben, können großflächige Submukosagewebeblätter aus überlappendem Submukosagewebe gebildet werden, wobei sie entweder heterolaminare oder homolaminare Submukosagewebeblätter bilden. Sowohl heterolaminare als auch homolaminare Blätter sind zur Bildung der erfindungsgemäßen großflächigen pseudoisotropen Gewebetransplantatkonstrukte geeignet.
Nach Auflegen des ersten Submukosagewebeblatts auf die erste Oberfläche werden auf dem ersten Blatt weitere Schichten von Submukosablättern auf die gleiche Weise wie das erste Blatt gebildet (d. h. jedes Submukosagewebeblatt des Multilaminats enthält überlappende Submukosagewebestreifen, wobei die Längsachsen der in jedem Blatt enthaltenen Submukosagewebestreifen im Wesentlichen zueinander parallel sind). Jedes einzelne Blatt ist auf ein anderes Blatt aufgelegt, so daß die Längsachsen der Submukosagewebestreifen des aufgelegten Blatts einen Winkel von etwa 180°/S (S = Gesamtzahl der Submukosagewebeblätter) mit den Längsachsen der Submukosagewebestreifen von mindestens zwei der anderen das Mehrschichtkonstrukt bildenden Blätter bilden. Nach Auflegen aller Blätter werden die Submukosagewebeblätter zwischen einer ersten und einer zweiten Oberfläche unter Bedingungen, welche eine zumindest teilweise Entwässerung des komprimierten Submukosagewebes zulassen, komprimiert. In einer bevorzugten Ausführungsform ist mindestens eine dieser Oberflächen wasserdurchlässig.
In einer Ausführungsform werden, nachdem mehrere Submukosagewebestreifen miteinander überlappt wurden, die überlappenden Teile zur Entfernung eingeschlossener Luft und größerer Wassermengen behandelt, bevor die Streifen zu einem einzigen Blatt verschmolzen werden. Im allgemeinen werden Luftblasen und größere Wassermengen durch Anwendung einer über die Oberfläche der überlappenden Teile bewegten Kompressionskraft herausgequetscht. Die Kompressionskraft kann die Form eines über die Oberfläche der überlappenden Teile gerollten Zylinders haben oder alternativ können die überlappenden Teile zwischen zwei oder mehreren Walzen hindurchgeführt werden, wobei der Abstand zwischen den Oberflächen gegenüberliegender Walzen geringer als die Dicke des Submukosablatts ist. Die überlappenden Teile können dann, wenn notwendig, eine weitere Zeit lang unter entwässernden Bedingungen komprimiert werden, um die mehreren Streifen erfindungsgemäß zu einem einzigen Submukosagewebeblatt zu verschmelzen.
Die überschüssigen Teile der pseudoisotropen Mehrschicht-Transplantate (d. h. jene Teile des Transplantats mit einer Anzahl Schichten kleiner als N oder S) können nach Bildung des Multilaminats entfernt werden. Ferner können die mechanischen Eigenschaften des Mehrschicht-Submukosamaterials an die Bedürfnisse der medizinischen Anwendung angepaßt werden, indem der Überlappungsprozentsatz zwischen benachbarten Submukosagewebestreifen eingestellt, der Winkel benachbarter Schichten zueinander verändert, die Wasserdurchlässigkeit und/oder die Zusammensetzung der komprimierenden Oberflächen verändert, die Form der Kompressionsflächen ausgewählt und die zur Kompression des überlappenden Submukosagewebes angewandte Kraft verändert wird.
Das erfindungsgemäße pseudoisotrope Submukosamaterial kann ferner so abgewandelt werden, daß es eine Vielzahl von Perforationen enthält. Neuere Versuche haben gezeigt, daß der Remodelling-Prozeß bei implantierten Mehrschicht-Submukosagewebe-Transplantatkonstrukten langsamer als bei Submukosagewebetransplantaten mit einer oder zwei Schichten ist. Außerdem neigen Mehrschicht-Submukosagewebe-Transplantatkonstrukte dazu, in Weichteilbereichen (wie den muskulären Körperwänden von Ratten) während der ersten 14 bis 28 Tage nach Implantation Gewebeflüssigkeit in zystenartigen Taschen zwischen benachbarten Schichten anzusammeln. Flüssigkeitstaschen stehen der Wundheilung entgegen, weil sie das Einwachsen von Bindegewebe verzögern, ein für Bakterien förderliches Umfeld darstellen und die Anbringung von natürlichem (eigenem) Körpergewebe, das Heilung und Zugfestigkeit fördert, verhindern.
Es wurde gefunden, daß das Perforieren der Mehrschicht-Transplantatkonstrukte die Remodelling-Eigenschaften des Transplantats in vivo und die Adhäsion der Gewebetransplantatschichten aneinander verbessert. Es wird angenommen, daß die Perforationen den Kontakt des Submukosagewebes mit endogenen Flüssigkeiten und Zellen fördert(durch Erhöhung des Oberfläche des implantierten Transplantats) und daß die Perforationen auch als Leitung dienen, wodurch die extrazelluläre Flüssigkeit durch das Transplantat hindurchtreten kann.
Erfindungsgemäß bezeichnet der Ausdruck "Perforation" ein Loch, das sich durch das ganze Transplantatkonstrukt erstreckt. Jedoch liegen Gewebetransplantatkonstrukte mit "Löchern", hier als Hohlraum definiert, der in das Gewebe eindringt, sich aber nicht durch das ganze Transplantat erstreckt, ebenfalls im Bereich der vorliegenden Erfindung. Abstand und Größe der Perforationen wie auch ihre Eindringtiefe in das Gewebe können je nach der gewünschten mechanischen Festigkeit, Porosität, Größe und Dicke (Anzahl der Schichten) und anderer sich auf die medizinische Anwendung des Gewebetransplantats beziehenden Faktoren verändert werden. Die Größe der Perforationen reicht von 0,5 bis 3 mm, mehr bevorzugt von 0,6 bis 2 mm. In einer Ausführungsform sind die Perforationen äquidistant mit einem Abstand von 2 bis 20, mehr bevorzugt von 3 bis 7 mm.
Typischerweise werden die Perforationen im Submukosagewebe gebildet, während das Gewebe wenigstens teilweise hydratisiert bleibt. Bei den erfindungsgemäßen pseudoisotropen Mehrschicht-Submukosagewebematerialien werden die Perforationen bevorzugt nach Bildung des Mehrschichtkonstrukts hergestellt, wenn das Gewebe auf einen Wassergehalt von etwa 10–20 Gew.-% (10–20% hydratisiert) getrocknet wurde. Die ausreichende Trocknung des Gewebes kann durch Wiegen des frischen Gewebes und Trocknen bis auf 10–20% des Frischgewichts oder durch Impedanzmessung wie oben beschrieben festgestellt werden. Nach der Perforation wird das Submukosagewebe einer Schlußsterilisation unterworfen und gelagert wie oben beschrieben.
In einer Ausführungsform können Löcher (die sich nur teilweise durch das Gewebe erstrecken) oder Perforationen auf beiden Seiten des Gewebetransplantats gebildet werden. Zusätzlich kann das Gewebe so abgewandelt werden, daß es sowohl Perforationen als auch Löcher, die sich nur teilweise durch das Gewebe erstrecken, enthält. Ferner kann das Submukosagewebe so modifiziert werden, daß es eine Vielzahl von Löchern aufweist, wobei verschiedene Untergruppen von Löchern sich im Vergleich zu anderen Löchern in unterschiedliche Tiefen in das Gewebe erstrecken. Dies kann beispielsweise erreicht werden, indem man die einzelnen Submukosagewebeschichten vor dem Überlappen zur Bildung des Mehrschichtkonstrukts perforiert. Wenn einige der Schichten nicht perforiert sind oder die Perforationen der einzelnen Schichten nicht fluchten, haben die gebildeten Mehrschichtkonstrukte Löcher, die sich zu unterschiedlicher Tiefe in das Gewebe erstrecken. Bevorzugt wird das Gewebe mit einheitlicher Verteilung über die Gewebetransplantatoberfläche perforiert, wodurch eine Reihe von Löchern gebildet wird, welche eine flüssige Verbindung zwischen einer ersten ebenen Oberfläche zu einer zweiten gegenüberliegenden ebenen Oberfläche des Transplantats ermöglicht.
In einer Ausführungsform sind die Perforationen senkrecht zur Oberfläche des Gewebetransplantatkonstrukts ausgebildet, d. h. die Längsachse der Perforation/des Lochs bildet mit der die Oberfläche des Transplantats definierenden Ebene einen Winkel von 90°. Alternativ können die Perforationen so ausgebildet werden, daß die Achse der Perforation nicht senkrecht zur Oberfläche des Transplantats steht (d. h. so daß die zu der die Perforation/das Loch begrenzenden Wand parallele Längsachse einen von 90° verschiedenen Winkel mit der Ebene des Transplantats bildet). Nach einer Ausführungsform sind die Perforationen mit einem Winkel von 45 bis 90° bezüglich der Transplantatoberfläche ausgebildet.
Mehrschicht-Gewebetransplantate können geschnitten werden ohne auszufasern und delaminieren nicht beim Einweichen in Wasser über einen Zeitraum (mehr als eine Stunde), welcher der zum Implantieren des Blatts in einen Wirt benötigten Zeit entspricht. Jedoch neigen Mehrschicht-Submukosagewebe-Transplantatkonstrukte dazu, in Weichteilbereichen (wie den muskulären Körperwänden von Ratten) während der ersten 14 bis 28 Tage nach Implantation Gewebeflüssigkeit in zystenartigen Taschen zwischen benachbarten Schichten anzusammeln. Perforationen der erfindungsgemäßen pseudoisotropen Mehrschicht-Transplantatkonstrukte vermindern die Ansammlung von Flüssigkeit zwischen den Schichten des Mehrschichtkonstrukts, indem sie eine Ableitung liefern, durch die Flüssigkeit aus dem Gewebe abfließen kann. Außerdem haben die Perforationen eine "Heftklammer"-Wirkung, welche die Adhäsion der Schichten untereinander verstärkt.
Demgemäß bietet das Anbringen von Löchern in Mehrschicht-Gewebetransplantaten über die gesamte oder über ein Teil der Dicke gegenüber nicht perforierten Mehrschichtblättern die folgenden Vorteile:

1. Erhöhter Durchtritt von Flüssigkeiten (einschließlich von Gewebeflüssigkeit) durch das Material und
2. Erhöhte Adhäsionskraft zwischen benachbarten Schichten.

Das Submukosagewebe kann mit einer Vielzahl von dem Fachmann bekannten Vorrichtungen perforiert werden. Das zum Perforieren angewandte Verfahren ist nicht kritisch, vorausgesetzt, daß die zusammengesetzte strukturelle Integrität des Submukosagewebes erhalten bleibt.
In bevorzugten Ausführungsformen führt die Perforation des Submukosagewebes nicht zur Entfernung wesentlicher Anteile des Gewebes. Beispielsweise werden die Perforationen durch Hindurchpressen eines spitzes festen Gegenstands durch das Gewebe gebildet, wobei während des Einführens des festen Gegenstands das Gewebe zur Seite gedrückt wird, im Gegensatz zum Ausbohren des Materials. Andere Mittel zum Perforieren des Gewebes umfassen die Anwendung des Schießens, von Schneidgeräten, Laserstrahlen oder enzymatischer/chemischer Behandlung.
In einer Ausführungsform wird das Submukosagewebe durch Pressen eines Stifts oder einer festen Nadel in/durch das Gewebe perforiert. Typischerweise wird zur Bildung der Perforation eine feste Nadel von 20–23 gauge (0,51–0,58 mm) verwendet. Auf diese Weise wird bei der Bildung der Perforationen keine wesentliche Menge Gewebe entfernt, sondern es wird ein Teil einer jeden Schicht zerrissen und in die benachbarte Schicht gestoßen, wodurch eine Heftklammerwirkung entsteht. Diese "Heftklammer"-Wirkung kann weiter verstärkt werden, wenn man ein Teil der Perforationen von einer Seite des Transplan tats und die restlichen Perforationen von der entgegengesetzten Seite des Transplantats erzeugt.
4 veranschaulicht eine Ausführungsform einer Vorrichtung zum Perforieren der Submukosagewebetransplantatkonstrukte. Die Vorrichtung umfaßt eine Grundplatte (1) und eine Vielzahl in der Grundplatte (1) eingebetteter Edelstahlnadeln (2), die sich durch die Oberfläche der Grundplatte nach außen erstrecken. Die Grundplatte umfaßt Teile aus Epoxy (E) und Delrin (D) und hat eine Länge von 3,2 Zoll (81 mm) eine Breite von 1,85 Zoll (47 mm) und ist 0, 5 Zoll (12,7 mm) dick. Nach dieser Ausführungsform sind die Nadeln (2) im Wesentlichen zueinander parallel und bilden mit der Oberfläche der Grundplatte einen Winkel von 90°. Die Nadeln (2) haben eine Durchmesser von 0,040 Zoll (0,10 mm) und einen gegenseitigen Abstand von 0,264 Zoll (6,7 mm) (Mitte zu Mitte benachbarter Nadeln) mit einem Abstand von 0,4 Zoll (10,2 mm) vom Rand der Vorrichtung und stehen 0,25 Zoll (6,35 mm) aus der Grundplatte hervor. So enthält die Vorrichtung insgesamt 50 Nadeln.
Beispiel 1
Aus Wirbeltierdarmgewebe wurde nach dem in der US 4,902,508 beschriebenen Verfahren Submukosagewebe hergestellt. Die Submukosagewebestreifen wurden aus einem Abschnitt von Darmgewebe eines warmblütigen Wirbeltiers hergestellt, wobei der Abschnitt die sowohl von der Tunica muscularis als auch von zumindest dem lumenalen Teil der Tunica mucosa abgeschälte Tunica submucosa dieses Darmgewebeabschnitts umfaßte. Der Darmgewebeabschnitt wurde längs der Längsachse des Abschnitts geschnitten und flach ausgelegt. Das Gewebe wurde dann weiter in eine Reihe von Streifen mit allgemein parallelen Seiten geschnitten.
Mehrere Submukosagewebestreifen wurden auf einer gelochten Edelstahlplatte von 12 mal 12 Zoll (30,5 mal 30,5 cm) angeordnet, wobei ein Teil eines Submukosagewebestreifens ein Teil des benachbarten Submukosagewebestreifens überlappte. Dann wurde eine zweite gelochte Edelstahlplatte von 12 mal 12 Zoll auf das Submukosagewebe gelegt. Die bei dieser Ausführungsform verwendeten Edelstahlplatten hatten Perforationen von 0,045 Zoll (1,14 mm), gerade mittig (straight center) mit einem Abstand von 0,066 Zoll (1,68 mm) voneinander angeordnet. Ein Gewicht von 50–100 pounds (22,7–45,3 kg) wurde auf die zweite Edelstahlplatte aufgelegt und das Gewebe wurde 24 h bei Zimmertemperatur komprimiert.
Beispiel 2
Submukosagewebestreifen wurden hergestellt wie in Beispiel 1 beschrieben. Mehrere Submukosagewebestreifen wurden zwischen zwei perforierten Edelstahlplatten ausgelegt, so daß ein Teil eines Submukosagewebestreifens ein Teil des benachbarten Submukosagewebestreifens überlappte. Die Vorrichtung aus "Platte-Submukosa-Platte" wurde auf eine flache Oberfläche gelegt und mit einem saugfähigen Material bedeckt, um das Wasser abzusaugen, und mit einer Entlüftungsfolie, um einen Luftabfluß zu ermöglichen. Die Vorrichtung wurde dann in einen Nylonbeutel eingeschweißt, der einen Vakuumanschluß hatte. Ein Vakuum (größer als 28 Zoll Hg – 950 hPa) wurde angelegt, um die Luft aus dem Vakuumbeutel zu saugen und der sich ergebende Luftdruckabfall komprimierte und entwässerte das Submukosagewebe gleichzeitig. Nach 24 h Anlegen des Vakuums war das erzeugte Blatt feucht und sehr biegsam. Es waren keine Säume der Submukosagewebeschichten sichtbar und die mit der Kugelberstprüfung bestimmte Festigkeit eines Prototypblatts von 8 Dicken war 80 pounds (36,3 kg).
Beispiel 3
Submukosagewebestreifen wurden wie in Beispiel 1 beschrieben hergestellt. Die Submukosagewebestreifen wurden auf einem Sieb angeordnet, so daß ein eines Submukosagewebestreifens ein Teil eines benachbarten Submukosagewebestreifens überlappte. Nachdem das Sieb mit einer Schicht Submukosagewebe bedeckt war, wurde eine zweite Schicht Submukosagewebe auf die erste Schicht aufgelegt, so daß die Ränder der Submukosastreifen der zweiten Schicht einen Winkel mit den Rändern der Submukosastreifen der ersten Schicht bildeten.
Nachdem alle Submukosagewebestreifen auf dem Sieb aufgelegt waren, wurde ein anderes Sieb auf die Submukosagewebeschichten aufgelegt und der "Sieb-Submukosagewebe-Sieb"-Sandwich wurde mit einem Gewicht komprimiert und getrocknet. Das Verfahren ergab ein getrocknetes großflächiges Submukosablatt, das als einheitliches Transplantatkonstrukt vom Sieb abgeschält wurde.
Beispiel 4
Sterilisation von Submukosagewebe mit Peressigsäure
Submukosagewebe wird in eine Peressigsäure/Ethanollösung 2 h bei Zimmertemperatur bei einem Verhältnis von 20:1 oder mehr (ml Peressigsäure:Gramm Submukosagewebe) eingeweicht. Die Peressigsäure/Ethanollösung enthält 4% Ethanol, 0,1% (V/V) Peressigsäure und der Rest ist Wasser. Der 1-proz. Peressigsäurebestandteil ist eine Verdünnung einer 35-proz. Peressigsäure-Vorratslösung, die im Handel erhältlich ist und in Tabelle 1 definiert ist. Bevorzugt wird das Submukosagewebe während des Einweichens in der Peressigsäurelösung auf einer Schüttelmaschine geschüttelt. Nach 2 h wird die Peressigsäurelösung abgegossen und durch die äquivalente Menge Ringer- Laktat-Lösung oder phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) ersetzt und (unter Schütteln) 15 min eingeweicht. Das Submukosagewebe wird vier weiteren Waschzyklen mit Ringer-Laktat-Lösung oder PBS unterworfen und dann weitere 15 min mit sterilem Wasser gewaschen.
Tabelle 1
Sterilisation von Submukosagewebe mit Ethylenoxid
Nach Herstellung der Mehrschichtkonstrukte unter sterilen Bedingungen wird das Material verpackt und einem zweiten Sterilisationszyklus (Schlußsterilisation) unterworfen. Das Gewebe kann in Kunststoff verpackt werden, der für Ethylenoxid durchlässig ist und nach Verfahren mit Ethylenoxid sterilisiert werden, die dem Fachmann bekannt sind. Im Wesentlichen wird das verpackte Material dem Ethylenoxid 4 h lang bei 115 °F (46 °C) ausgesetzt. Während der Sterilisation wird das Material mindestens 75 min der 4 h unter 65% relativer Feuchte gehalten. Die hohe Feuchte verstärkt die Aufnahme des Ethylenoxids durch das Gewebe. Nach 4 h werden Ethylenoxid, Ethy lenchlorhydrin und Ethylenglykol mit Stickstoff und Luft ausgespült.
Beispiel 5
Kugelberstfestigkeitsprüfung mittels Kompressionskäfig und MTS-Zugfestigkeitsprüfer
Die Festigkeit von Mehrschicht-Submukosagewebetransplantaten wird unter Anwendung des Zugfestigkeitsprüfers eines Materialprüfsystems (MTS) bestimmt. Das Mehrschicht-Gewebekonstrukt wird in einer Klammer mit vierseitigem Rahmen (Probenklammer) befestigt, um die Spannung über das Gewebekonstrukt gleichmäßig zu verteilen. Die Befestigungshöhe zu Beginn wird so eingestellt, daß das Oberste der Kugel sich unmittelbar unter der Probenebene befindet. Der Griff der Probenklammer wird in seine höchste Lage gehoben, damit die Backen der Klammer die Probe aufnehmen können. Das Submukosagewebekonstrukt wird passend zur Probenklammer geschnitten. Die Öffnung der Klammer hat einen Durchmesser von eindreiviertel Zoll (44,5 mm). Am Umfang der Probe sollte ein Materialüberschuß von einem halben Zoll (12,7 mm) vorhanden sein, damit genügend Klemmfläche gesichert ist. Das Submukosagewebe wird in die Backen der Klammer eingelegt und befestigt, wobei die Klemmkraft durch eine Einstellschraube an der oberen Backe geregelt wird.
Das eingeklemmte Submukosagewebe wird dann mit geregelter Geschwindigkeit über eine Metallkugel abwärtsgedrückt, wobei zur Regelung und Messung der auf die Probe wirkenden Kraft eine Schnittstelle mit Zugprüfungssoftware verwendet wird. Die Kraft wird bis zum Bruch der Probe gesteigert. Bruch bedeutet die Höchstbelastung, die dem ersten Erscheinen der Kugel durch sichtbare unnatürliche Diskontinuitäten in der Probenebene entspricht. Falls die höchste Lage vor dem Bruch erreicht wird, greift die Software ein und beendet den Versuch. Die auf dem Microprofiler 458.01 angezeigte Spitzenlast wird aufgezeichnet und die Probe wird entfernt.
Beispiel 6
Ein Mehrschicht-Gewebetransplantatkonstrukt wurde wie folgt hergestellt:
Aus Wirbeltierdarm wird eine reichliche Menge Submukosagewebe hergestellt, geschnitten, flach ausgelegt und wie in Beispiel 4 beschrieben mit Peressigsäure desinfiziert (für eine Vorrichtung 10 × 15 cm braucht man etwa 70 g Submukosagewebe). Nach der Sterilisation des Gewebes mit Peressigsäure sollten Gummihandschuhe, Gesichtsmaske und Haarschutz getragen werden, um die Verunreinigung mit organischem Material und Staubteilchen zu minimieren.
Submukosagewebestreifen werden auf eine erste Edelstahlplatte mit der gewünschten Ausrichtung aufgelegt. Die verwendeten Edelstahlplatten sind mit runden Perforationen von 0,045 Zoll (1,14 mm) mit gerade ausgerichteten Mittelpunkten (straight centers) gelocht, die 0,066 Zoll (1,68 mm) voneinander entfernt sind. Nach Ausbildung einer Submukosagewebeschicht wird das Submukosagewebe glattgestrichen, um Luftblasen zu entfernen. Weitere Schichten werden aufgelegt bis die Vorrichtung fertig ist. Mit einer Schere wird überschüssiges Material um die Mehrschichtstruktur entfernt. Das Gewicht des Submukosa-Multilaminats wird notiert. Auf das Mehrschichtkonstrukt wird eine zweite Edelstahlplatte (perforiert mit 0,045 Zoll (1,14 mm) runden Perforationen auf geraden Mittelpunkten, 0,066 Zoll (1,68 mm) voneinander entfernt) aufgelegt.
Das Mehrschichtkonstrukt kann ggf. "walzengequetscht" werden, um eingeschlossene Luft und Wasser zu entfernen. Zum Walzenquetschen des Materials werden die beiden das Submukosagewebe umgebenden perforierten Metallplatten zwischen zwei Polypropylenblätter (Kimberley Clark, class 100 "Crew Wipe")gelegt und die ganze Anordnung wird zwischen zwei Schichten Nylonverpackungsfolie (ZipVac, Auburn WA) gelegt, die größer als 1' × 1' (305 × 305 mm) sind. Dann wird ein belasteter Zylinder mehrmals (mindestens dreimal) über die Anordnung gerollt.
Um das mehrschichtige Submukosagewebetransplantatkonstrukt zu perforieren, wird die Anordnung teilweise auseinandergenommen, um die obere Oberfläche des Gewebetransplantats freizulegen, und unmittelbar auf die oberste Submukosagewebeschicht wird ein Stück Nylonverpackungsfolie aufgelegt. Das mehrschichtige Submukosagewebetransplantatkonstrukt wird dann umgekehrt auf eine Arbeitsfläche aus Polystyrolschaum (Styrofoam) gelegt und die erste Edelstahlplatte wird vorsichtig entfernt. Die freiliegende Submukosaoberfläche wird dann mit einem Stück Nylonverpackungsfolie bedeckt. Dann wird das Gewebetransplantatkonstrukt perforiert und danach die obere Nylonverpackungsfolie entfernt. Das mehrschichtige Submukosagewebetransplantatkonstrukt wird dann wieder umgedreht und auf die gelochte Edelstahlplatte zurückgelegt. Die Nylonverpackungsfolie wird von der oberen Submukosaoberfläche entfernt und eine zweite perforierte Edelstahlplatte auf die Oberseite des mehrschichtigen Submukosagewebetransplantatkonstrukts aufgelegt.
Das mehrschichtige Submukosagewebetransplantatkonstrukt wird dann unter entwässernden Bedingungen wie folgt komprimiert:
Eine Schicht saugfähigen Materials (NuGauze), größer als die perforierten Platten, wird auf eine Tischplatte (oder eine andere glatte Oberfläche) aufgelegt. Die Edelstahlplatten mit dem mehrschichtigen Submukosagewebetransplantatkonstrukt dazwischen wird auf das saugfähige Material gelegt. Eine weitere Schicht saugfähiges Material (etwa von derselben Größe wie die erste Schicht) wird auf die Edelstahlplatten gelegt. Eine Entlüftungsfolie (ZipVac, Auburn, WA) wird auf das saugfähige Material gelegt. Bevorzugt ist die Entlüftungsfolie etwas größer als die von ihr bedeckten Gegenstände.
Ggf. können Elektroden in Kontakt mit dem Submukosagewebe angebracht werden, um die Impedanz quer zum Gewebe zu messen. Typischerweise wird das Gewebe solange komprimiert, bis ein steifes aber flexibles Material erzeugt wird. Ausreichende Entwässerung des Materials wird durch einen Anstieg der Impedanz für den das Gewebe durchfließenden elektrischen Strom angezeigt. Wenn die Impedanz um 100–200 Ohm angestiegen ist, wurde das Gewebe hinreichend entwässert und der Druck kann aufgehoben werden.
Um die Vorrichtung und das durch Vakuum zu komprimierende Gebiet herum wird auf der Tischplatte eine Einfassung aus doppelt klebendem Band angebracht. Die Schutzfolie wird vom Band abgezogen und ein Stück Nylonverpackungsfolie, das bereits mit einem Düsenanschluß versehen ist, wird auf das vom Klebeband umfaßte Gebiet aufgelegt (siehe 3a und 3b) und am Band fixiert. Die Heizdecke, falls verwendet, und die Vakuumpumpe werden eingeschaltet. Der Beutel wird auf Falten (ggf. glattstreichen) und auf unzureichende Dichtung zwischen Klebeband und Nylonverpackungsfolie (ggf. korrigieren) untersucht. Das Vakuum wird bis zu einem Unterdruck von 25–30 psi_vac (172–207 kPa) gezogen. Nach Vakuumbehandlung zum gewünschten Feuchtegrad (etwa 24 h) wird die Dichtung des Beutels am Klebeband geöffnet, die Vakuumpumpe ausgeschaltet und das einheitliche perforierte mehrschichtige Submukosagewebetransplantatkonstrukt entnommen. Teile des Gewebetransplan tats, die nicht das gesamte Maß an Überlappung erhalten haben, können mit einer Schere abgeschnitten werden.
Beispiel 7
Das Submukosagewebetransplantatkonstrukt kann auch nach Bildung des einheitlichen Mehrschichtkonstrukts wie folgt perforiert werden. Das Mehrschichtkonstrukt wird entsprechend Beispiel 3 gebildet. Der Sandwich aus Sieb und Submukosagewebe wurde aus der Trockenvorrichtung entfernt und das Gewebe wurde perforiert. Das Transplantat wurde perforiert, indem an mehreren Stellen der Transplantatoberfläche ein Nagel zwischen die Maschen des Siebs eingeführt und durch das Gewebe gedrückt wurde. Das perforierte Mehrschicht-Submukosagewebe wurde dann quadratisch geschnitten (4 ½ × 4 ½ Zoll; 114 × 114 mm) und zur Identifizierung markiert.
Beispiel 8
Ein perforiertes pseudoisotropes Laminatkonstrukt wurde wie folgt hergestellt: Submukosagewebestreifen wurden auf einem Drahtsieb in 4 Schichten angeordnet. Die erste Schicht wurde direkt auf dem Sieb abgelegt und die restlichen drei Schichten wurden im Winkel von 45, 90 bzw. 135° relativ zur ersten Schicht daraufgelegt (siehe 2). Ein zweites Sieb wurde auf das Submukosagewebe gelegt und das Gewebe wurde zwischen die Siebe eingelegt und an das Trockengestell angeklammert. Vor dem Gestell wurde ein Ventilator aufgestellt und eingeschaltet. Unter Verwendung des Siebs als Führung wurden Löcher im Schachbrettmuster durch das Gewebe gestanzt (d. h. zum Perforieren wurden die Stellen des Siebs abwechselnd benutzt). Demgemäß erschien das Muster wie folgt:
Die Perforation des Gewebes wurde vor Fertigstellung abgebrochen, weil das Submukosagewebe zerriß. Daher wurde das Submukosagewebe 25 min bei hoher Einstellung des Ventilators getrocknet. Dann wurden die restlichen Perforationen entsprechend dem ursprünglichen Muster angebracht.
Man ließ das Blatt über Nacht trocknen, entnahm es, schnitt es in Quadrate und etikettierte es zur Identifizierung.

Claims

Gewebetransplantatkonstrukt umfassend eine nachgiebige Lage aus submucosalem Gewebe, welches aus einer Vielzahl von überlappenden Streifen aus submucosalem Gewebe gebildet ist, wobei die nachgiebige Lage aus submucosalem Gewebe einen größeren Oberflächenbereich aufweist als jeder der einzelnen zur Bildung der nachgiebigen Lage aus submucosalem Gewebe verwendeten Streifen.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 1, wobei die Streifen aus submucosalem Gewebe im Wesentlichen aus der Tunica submucosa, der Muscularis mucosa und dem Stratum compactum der Tunica Mucosa bestehen.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 1, wobei die Streifen aus submucosalem Darmgewebe konditioniert sind, eine Dehnung von nicht mehr als 20% zu haben.
Verfahren zur Bildung eines unitären homolaminaren Gewebetransplantatkonstrukts aus einer Vielzahl von Streifen aus submucosalem Gewebe, welche von sowohl der Tunica muscularis und dem luminalen Bereich der Tunica mucosa eines warmblütigen Wirbeltieres abgeschält ist, wobei das Konstrukt einen größeren Oberflächenbereich als jeder der einzelnen zur Bildung des Konstruktes verwendeten Streifen aufweist, wobei das Verfahren die Schritte umfasst: Bildung einer ersten Schicht aus submucosalem Gewebe durch Anordnung von Streifen aus submucosalem Gewebe auf einer ersten Oberfläche, wobei die Streifen aus submucosalem Gewebe der ersten Schicht einander benachbart und ohne wesentliche Überlappung untereinander in Kontakt miteinander sind; Überlappung der ersten Schicht aus submucosalem Gewebe mit einer zweiten Schicht aus Streifen aus submucosalem Gewebe, wobei die Streifen aus submucosalem Gewebe der zweiten Schicht benachbart einander und in Kontakt miteinander ohne wesentliche Überlappung untereinander sind, und wobei die Streifen aus submucosalem Gewebe der zweiten Schicht in Bezug auf die submucosalen Streifen der ersten Schicht versetzt sind, so dass wenigstens ein Bereich der kontaktierenden Kanten der individuellen Streifen aus submucosalem Gewebe der ersten Schicht durch Streifen aus submucosalem Gewebe der zweiten Schicht überbrückt sind; und Zusammendrücken der überlappenden Bereiche der Streifen aus submucosalem Gewebe zwischen der ersten Oberfläche und einer zweiten Oberfläche unter Bedingungen, die wenigstens eine teilweise Dehydratation des komprimierten submucosalen Gewebes gestatten.
Verfahren nach Anspruch 4, welches des Weiteren den Schritt der Anwendung eines Vakuums auf das submucosale Gewebe während der Kompression desselben umfasst.
Verfahren nach Anspruch 5, wobei das angewandte Vakuum mit den zwei Oberflächen zusammenwirkt, um das submucosale Gewebe zusammenzudrücken.
Verfahren nach Anspruch 4, welches des Weiteren den Schritt der Anwendung von Wärme auf das submucosale Gewebe während der Kompression desselben umfasst.
Verfahren nach Anspruch 4, wobei wenigstens eine der Ober flächen wasserdurchlässig ist.
Verfahren nach Anspruch 4, wobei die zwei Oberflächen komplementäre nicht planare Oberflächen sind, wobei eine Kompression zwischen den beiden Oberflächen ein Gewebetransplantatkonstrukt erzeugt, welches in eine Form gebracht ist, um mit diesen Oberflächen übereinzustimmen.
Mehrfach laminiertes Gewebetransplantatkonstrukt, welches im Wesentlichen aus submucosalem Darmgewebe besteht, wobei das mehrfach laminierte Konstrukt geformt ist, um pseudoisotrope Eigenschaften aufzuweisen.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 10, wobei das submucosale Darmgewebe im Wesentlichen aus der Tunica submucosa, der Muscularis mucosa und dem Stratum compactum der Tunica mucosa besteht.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 10, wobei das submucosale Gewebe konditioniert ist, um eine Dehnung von nicht mehr als 20% aufzuweisen.
Verfahren zur Herstellung eines mehrfach laminierten Gewebetransplantatkonstrukts mit pseudoisotropen Eigenschaften, wobei das Konstrukt aus wenigstens drei Streifen aus submucosalem Darmgewebe gebildet ist, die von sowohl der Tunica muscularis und dem luminalen Bereich der Tunica mucosa eines warmblütigen Wirbeltieres abgeschält ist, wobei jeder Streifen aus submucosalem Darmgewebe eine Längsachse hat, die mit der vorherrschenden Orientierung der Kollagenfasern in den submucosalen Gewebestreifen korrespondiert, wobei das Verfahren die folgenden Schritte aufweist: Übereinanderlegen des ersten Streifens mit wenigstens zwei zusätzlichen Streifen aus submucosalem Gewebe, so dass die Längsachse von jedem der einzelnen Streifen aus submucosalem Gewebe einen Winkel von ungefähr 180°/N mit den Längsachsen von wenigstens zwei anderen Streifen des darüber gelegten submucosalen Gewebes bildet, wobei N = die Gesamtanzahl von Streifen aus submucosalem Gewebe ist; Zusammendrücken von wenigstens der überlappenden Bereiche der Streifen aus submucosalem Gewebe zwischen zwei Oberflächen unter Bedingungen, die eine wenigstens teilweise Dehydratation des zusammengedrückten submucosalen Gewebes ermöglichen.
Verfahren nach Anspruch 13, wobei wenigstens eine der Oberflächen wasserdurchlässig ist.
Verfahren zur Herstellung eines mehrfach laminierten Gewebetransplantatkonstrukts mit pseudoisotropen Eigenschaften, wobei das Konstrukt aus einer Vielzahl von Lagen aus submucosalem Darmgewebe gebildet ist, wobei jede der Lagen überlappende Streifen aus submucosalem Gewebe aufweist, die von sowohl der Tunica muscularis und dem luminalen Bereich der Tunica mucosa eines warmblütigen Wirbeltieres abgeschält sind, wobei jeder der Streifen eine Längsachse aufweist, welche mit der vorherrschenden Orientierung der Kollagenfasern in den submucosalen Gewebestreifen korrespondiert, wobei die Längsachsen der Streifen aus submucosalem Gewebe von jeder Lage im Wesentlichen parallel zueinander angeordnet sind, wobei das Verfahren die folgenden Schritte aufweist: Übereinanderlegen der ersten Schicht aus submucosalem Gewebe mit wenigstens zwei zusätzlichen Lagen aus submucosalem Gewebe, so dass die Längsachsen der Streifen aus submucosalem Gewebe aus einer Lage einen Winkel von ungefähr 180°/S mit den Längsachsen der Streifen aus submucosalem Gewebe von wenigstens zwei der übereinandergelegten Lagen aus submucosalem Gewebe bilden, wobei S = die Gesamtanzahl der Lagen aus submucosalem Gewebe ist; und Zusammendrücken der Lagen aus submucosalem Gewebe zwischen zwei Oberflächen unter Bedingungen, die wenigstens eine teilweise Dehydratation des zusammengedrückten submucosalen Gewebes gestatten.
Verfahren nach Anspruch 15, welches des Weiteren den Schritt der Anwendung eines Vakuums auf das submucosale Gewebe während der Kompression desselben umfasst.
Verfahren nach Anspruch 16, wobei das angewandte Vakuum mit den zwei Oberflächen zusammenwirkt, um das submucosale Gewebe zusammenzudrücken.
Verfahren nach Anspruch 15, welches des Weiteren den Schritt der Anwendung von Wärme auf das submucosale Gewebe während der Kompression desselben umfasst.
Verfahren nach Anspruch 15, wobei wenigstens eine der Oberflächen wasserdurchlässig ist.
Verfahren nach Anspruch 15, wobei die zwei Oberflächen komplementäre nicht Planare Oberflächen sind, wobei die Kompression zwischen den beiden Oberflächen ein Gewebetransplantatkonstrukt erzeugt, welches geformt ist, um mit diesen Oberflächen übereinzustimmen.
Mehrfach laminiertes Gewebetransplantatkonstrukt mit pseudoisotropen Eigenschaften, wobei das Konstrukt aus einer Vielzahl von Lagen aus submucosalem Gewebe gebildet ist, wobei jede der Lagen überlappende Streifen aus submucosalem Gewebe aufweist, wobei jeder der Streifen eine Längsachse hat, die mit der vorherrschenden Orientierung der Kollagenfasern in den submucosalen Gewebestreifen korres pondiert, wobei die Längsachsen der Streifen aus submucosalem Gewebe jeder der jeweiligen Lagen im Wesentlichen parallel zueinander sind.
Mehrfach laminiertes Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 21, wobei die überlappenden Streifen aus submucosalem Gewebe submucosale Gewebestreifen aufweisen, von denen jeder einen Bereich aufweist, der mit einem Bereich eines benachbarten Streifens aus submucosalem Gewebe überlappt ist.
Mehrfach laminiertes Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 21, wobei die überlappenden Streifen aus submucosalem Gewebe eine erste Schicht aus submucosalen Gewebestreifen aufweisen, welche mit einer zweiten Schicht aus submucosalen Gewebestreifen überlagert ist, wobei die Streifen aus submucosalem Gewebe von jeder der jeweiligen Schichten benachbart zu und in Kontakt miteinander ohne wesentliche Überlappung zwischen den benachbarten Streifen aus submucosalem Gewebe angeordnet sind, wobei die Streifen aus submucosalem Gewebe der zweiten Schicht in Bezug auf die submucosalen Streifen der ersten Schicht versetzt sind, so dass wenigstens ein Bereich der Berührungskanten der einzelnen Streifen aus submucosalem Gewebe der ersten Schicht durch die Streifen aus submucosalem Gewebe der zweiten Schicht überbrückt sind.
Transplantat nach Anspruch 21, wobei die Streifen aus submucosalem Gewebe im Wesentlichen aus der Tunica submucosa, der Muscularis mucosa und dem Stratum compactum der Tunica mucosa bestehen.
Transplantat nach Anspruch 21, wobei die Streifen aus submucosalem Darmgewebe konditioniert sind, um eine Dehnung von nicht mehr als 20% aufzuweisen.
Gewebetransplantatmaterial nach Anspruch 21, wobei das submucosale Gewebe die Tunica submucosa und basilares Gewebe der Tunica mucosa aufweist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 1, wobei das submucosale Gewebe submucosales Darmgewebe ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 1, wobei das submucosale Gewebe von sowohl der Tunica muscularis und dem luminalen Bereich der Tunica mucosa eines warmblütigen Wirbeltieres abgeschält ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 1, wobei das Konstrukt chemisch behandelt ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 1, wobei das Konstrukt erwärmt ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 29, wobei das Konstrukt erwärmt ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 29, wobei das Konstrukt mit einem chemischen Sterilisierungsmittel behandelt ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 29, wobei das chemisch behandelte Konstrukt eine Dehnung von weniger als 20% aufweist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 1, welches für eine Hernie-Wiederherstellung, Hauttransplantation, Hirnhautbedeckung, Gastroschisis-Wiederherstellung oder einen Organgewebeersatz konfiguriert ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 34, welches zur Hernie-Wiederherstellung konfiguriert ist.
Verwendung einer Vielzahl von Streifen aus submucosalem Gewebe mit überlappenden Kanten bei der Herstellung einer unitären mehrfach laminierten nachgiebigen Lage aus submucosalem Gewebe zur Hernie-Wiederherstellung.
Verfahren nach Anspruch 4, welches des Weiteren den Schritt der chemischen Behandlung des Konstrukts umfasst.
Verfahren nach Anspruch 37, welches des Weiteren den Schritt der Erwärmung des Konstrukts umfasst.
Verfahren nach Anspruch 4, wobei das Konstrukt mit einem chemischen Sterilisierungsmittel behandelt ist.
Verfahren nach Anspruch 37, wobei das chemisch behandelte Konstrukt eine Dehnung von weniger als 20% aufweist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 10, wobei das submucosale Gewebe submucosales Darmgewebe ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 10, wobei das submucosale Gewebe von sowohl der Tunica muscularis und dem luminalen Bereich der Tunica mucosa eines warmblütigen Wirbeltieres abgeschält ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 21, wobei das submucosale Gewebe submucosales Darmgewebe ist.
Gewebetransplantatkonstrukt nach Anspruch 21, wobei das submucosale Gewebe von sowohl der Tunica muscularis und dem luminalen Bereich der Tunica mucosa eines warmblütigen Wirbeltieres abgeschält ist.