DE2915082A1 - Verfahren und reagenzsatz zum nachweis und zur charakterisierung von nukleinsaeuren und ihren sequenzen - Google Patents
Verfahren und reagenzsatz zum nachweis und zur charakterisierung von nukleinsaeuren und ihren sequenzenInfo
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Nachweis und gegebenenfalls
zur Charakterisierung einer Nukleinsäure oder einer Sequenz derselben, in einer diese möglicherweise enthaltenden
Probe. Sie betrifft ferner die zur Durchführung des Verfahrens erforderlichen Reagenzien und schließlich die
Verwendung eines solchen Verfahrens, beispielsweise zur raschen Diagnostizierung in vitro, ob in einer biologischen
Probe menschlicher oder tierischer Herkunft bestimmte Nukleinsäurepartikel etwa infektiösen Charakters vorhanden
sind oder ob ein bestimmtes Gen aus dem normalen Erbgut des Wirts unverändert ist oder nicht.
Jede biologische Probe, beispielsweise Blut, das jedem Lebewesen entnommen werden kann, enthält verschiedene Nukleinsäuren
in außerordentlicher Reichhaltigkeit. . Dies trifft auch für verschiedene Sequenzen zu, beispielsweise zahlreiche
Gene, die jede einzelne Nukleinsäure in diesen Proben enthalten kann. Daher kann der Genetiker auf große Schwierigkeiten
beim Aufspüren oder bei der Charakterisierung von bestimmten Nukleinsäuren in einer Probe stoßen. Die Schwierigkeiten werden
noch größer, wenn es darum geht, die Anwesenheit bestimmter Fragmente, beispielsweise der in diesen Nukleinsäuren enthaltenen
Gene, zu charakterisieren.
Um eine einzelne Nukleinsäure oder einzelne Gene - beispielsweise
im Hinblick auf Studien der Organisation genetischer Sequenzen der DNA, in der sie enthalten sind - zu charakterisieren,
benötigt man zunächst eine mit dieser Nukleinsäure angereicherte,aus der untersuchten Probe erhaltene Fraktion.
Zu diesem Zweck wurden bereits Anreicherungsmethoden vorgeschlagen,
die sich die Hybridisierungsreaktionen zwischen der gesuchten Nukleinsäure bzw. dem Gen und einem Indikator zunutze
machen, sofern ein solcher Indikator verfügbar ist und
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die erhaltenen Hybride sodann von der Probe abgetrennt werden
können, beispielsweise durch differentielle Sedimentation aus einer Lösung mittels Ultrazentrifugieren..
Solche Indikatoren wurden bereits beschrieben: es handelt sich dabei im allgemeinen um Ribonukleinsäuren (RNA),beispielsweise
solche, die mittels genetischer Transkription von Strukturgenen erhalten
wurden. Die Strukturgene sind Bestandteile der DNA der einzelligen Zellorganismen, aus denen sie stammen. Die DNA. ist demnach ge-
eignet, ihrerseits in die Proteine, für welche die Strukturgene codieren, "übersetzt" zu werden. Es ist bekannt, daß die
RNA-Nukleotid-Sequenzen zu der Sequenz der DNA, von der sie
abstammen, komplementär sind. Dies · . zeigt sich in der Eigenschaft der RNA, gemischte Hybride mit den entsprechenden
Sequenzen der zugehörigen DNA zu bilden, die zuvor denaturiert worden ist, soweit diese anfangs doppelsträngig
war, beispielsweise nach Inkubation bei hoher lonenstärke und' erhöhter Temperatur oder in basischem Milieu.
Es wurde vorgeschlagen, den Nachweis von gebildeten Hybriden mit Hilfe einer radioaktiven Markierung der Gene selbst oder
der RNA-Indikatoren vorzunehmen.Die Durchführung dieser Methoden
ist jedoch nicht einfach, und außerdem ist es dabei nicht immer möglich, die Gene innerhalb der DNA ausreichend
zu lokalisieren.
Um die untersuchten Gene in der sie enthaltenden DNA besser
lokalisieren zu können und eine Methode zur Bildung von
mit bestimmten DNA-Segmenten angereicherten Fraktionen - ausgehend von derselben DNA - zu entwickeln, haben Manning et al
eine Methode zum physiko-chemischen Nachweis dieser Gene vorgeschlagen.
Diese Methode besteht aus der chemischen Modifizierung des RNA-Indikators durch Anheftung von Biotingruppen,
d.h. Derivaten des Cytochrom C. Diese Biotingruppen heften sich durch Brückenbildung bei der Hybridisierung an die DNA an
und sind nun physikalisch im Elektronenmikroskop als Staubteilchen/die aus submikroskopischen Kügelchen von
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einem Durchmesser von 6θ nm bestehen, insbesondere auf einem
Untergrund von Polymethacrylsäureester nachweisbar.Die Kügelchen wurden
zuvor chemisch modifiziert und kovälent an Avidin-Moleküle gebunden.
Diese Methode ist in "A New Method of in situ Hybridization", Chromosoms, Springer Verlag (Berlin), Bd. 53 (1975), S. 107
bis 117 und in "A Method for Gene Enrichment Based on the Avidin-Biotin Interaction, Application to the Drosophila
Ribosomal RNA Genes", Biochemistry, Bd. 16 (1977), Nr. 7, S. 1364 - 1369 beschrieben.
Die Inkubation der Hybride, die durch Biotin und Avidin modifiziert
sind, macht es möglich, die Stelle der gesuchten Gene in der sie enthaltenden DNA zu "markieren" und sie innerhalb
der globulären Struktur der DNA nachzuweisen,Diese ist ebenfalls
im Elektronenmikroskop sichtbar ' infolge der sehr starken nicht kovalenten Interaktionen, die nach wie vor an den Stellen
herrschen, die frei von Biotin und Avidin geblieben sind.
Diese Methode ist jedoch kaum dazu geeignet, rasch zu bestimmen, ob derartige Gene bzw. ENA in einer biologischen
Probe menschlicher oder tierischer Herkunft anwesend sind oder nicht. So ist beispielsweise eine rasche Diagnose einer Infektion,
von welcher der Wirt möglicherweise befallen ist, oder der Tatsache, ob ein Gen oder beispielsweise eine DNA-Sequenz
in diesem Wirt unverändert geblieben ist oder nicht nach der
Methode schwer möglich
Aufgabe der Erfindung ist es Nachweis- und sogar Charakterisierungsmethoden
zur Verfügung zu stellen, die mit einfachen Mitteln von Laboranten ohne besondere Ausbildung angewandt werden können.
Diese Aufgabe wird durch die Erfindung gelöst.
Die Erfindung betrifft somit den in den Patentansprüchen gekenn-rzeichneten
Gegenstand.
Natürlich darf die chemische Modifizierung die gegebenenfalls zusätzlich stattfindende Hybridisierung des Indikators mit der gesuchten
DNA-Sequenz bzw. dem DNA-Fragment nicht behindern.
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Für den Fachmann liegt es auf der Hand, daß mit dieser Methode
die Möglichkeit gegeben ist, rasch festzustellen, ob in einer
biologischen Probe das DNA-Gen bzw. DNA-Fragment, das dem verwendeten
Indikator entspricht, vorhanden ist oder nicht, und dies sogar bei Anwesenheit einer großen Anzahl anderer Nukleinsäuren.
Dies ist insbesondere darauf zurückzuführen, daß durch den Nachweis auf grund der enzymatischen Aktivität, wobei das Enzym
durch das Substrat an das Hybrid gebunden ist, umfassende Anwendungsmoglich-1·
keiten gegeben sind.
Nach einer ausreichenden Reinigung des Hybrids ist es sogar möglich, Angaben über die Konzentration der gesuchten DNA in
der untersuchten biologischen Probe bzw. über die Anzahl der
Kopien des gesuchten Gens in der gereinigten DNA zu erhalten, und zwar durch Bestimmung der Enzymaktivität.
Bei einer zu untersuchenden Nukleinsäureprobe kann man zunächst
die Hybridisierung durchführen. Dann kann die Bindung zwischen dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem
Enzym stattfinden. Man kann vor Bestimmung der Enzymaktivität den gegebenenfalls im Überschuß vorhandenen nicht
hybridisierten Indikator bzw. das überschüssige mit dem Indikator nicht umgesetzte Enzym abtrennen oder abbauen.
Gemäß einer anderen Ausführungsform der Erfindung kann die Abtrennung
oder der Abbau des überschüssigen nicht hybridisierten
Indikators gegebenenfalls vor der Bindung zwischen dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem
Enzym erfolgen.
Der spezifische Indikator kann aus RNA oder einzelsträngiger DNA bestehen. Verwendet man eine ursprünglich doppelsträngige
DNA (oder RNA) als Indikator, so muß er vorher durch an sich bekannte Methoden denaturiert worden sein.
Führt man eine chemische Modifizierung des Indikators mit Biotin
durch, so kann man die Methode nach Manning et al (a.a.O.)
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Ι mittels des Cytoehrom C (durchschnittlich ein Molekül
Biotin pro etwa 100 Nukleotide ). anwenden.
Vorzugsweise verwendet man zum Markieren des Hybrids durch
(Kupp lungsPEodukt)
das Enzym den Komplex/ tier sich nach der Methode von Avrameas (beschrieben in Immuno ehe mis try, Bd. 6 (Ι9β9), S. kj> - 52) aus Avidin und den Enzym, insbesondere der ß-Galactosidase, ergibt,
das Enzym den Komplex/ tier sich nach der Methode von Avrameas (beschrieben in Immuno ehe mis try, Bd. 6 (Ι9β9), S. kj> - 52) aus Avidin und den Enzym, insbesondere der ß-Galactosidase, ergibt,
Man kann natürlich auch andere chemische Modifizierungsmethoden
für den Indikator undgegebenenfalls das Enzym im Hinblick auf deren Bindung, vorzugsweise nach der Hybridisierungsreaktion, verwenden
und kann die modifizierenden Mittel für Indikator und Enzym umgekehrt verwenden.
Es kommen noch andere Paare von modifizierenden Mitteln für Indikator und Enzym in Frage, für die nachstehend einige Beispiele
angegeben sind. Das erste dieser Mittel wird vorzugsweise jeweils zur chemischen Modifizierung des Indikators und
das zweite zur chemischen Modifizierung des Enzyms eingesetzt.
Der Indikator kann beispielsweise nach einer bekannten Methode durch Metallionen/ wie Que cks über ionen , modifiziert werden,
und der Nachweis wird mittels eines Enzyms durchgeführt, das Sulfhydrylgruppen (-SH) aufweist oder an einen solche Gruppen
enthaltenden Träger gebunden ist.
Man kann beispielsweise folgendermaßen vorgehen, wenn die zu untersuchende Probe nur aus wenigen Millilitern Blut besteht:
Die Erythrocyten werden lysiert, und die DNA wird nach üblichen Methoden extrahiert. Sodann wird eine kleine Menge der er~~
haltenen DNA,beispielsweise 1 bis lOO^ig, mit 0,1 - 0,3 N NaOH denaturiert,
die Lösung anschließend neutralisiert und auf einen pH-Wert von 7 eingestellt.
Die erhaltene Lösung wird mit dem der gesuchten DNA oder dem
DNA-Fragment entsprechenden Indikator versetzt, und zwar etwa 1 ug Indikator pro 100 Ug denaturierte DNA (die Menge der gebrauchten
NaOH richtet sich' nach dem Anteil der gesuchten DNA in der zu analysierenden'
L _l
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Probe). . Die Lösung wird sodann mit Salzen versetzt, um ein
hohes Ionenmilieu zu erreichen, nämlich mit mindestens 0,3 in Gegenwärt von 50 % Formamid und eines Chelatbildner in geringer
Konzentration. Das Volumen soll vorzugsweise gering sein.
Die Hybridisierung kann sodann bei der hierfür üblichen Temperatur
1 bis 40 Stunden (normalerweise 16 Stunden) durchgeführt,
werden. Man kann auch die Methode nach Manning (a.a.O.) oder andere Hybridisierungsmethoden anwenden, beispielsweise die
Methode nach Kohne et al (Biochemistry, Bd. l6 (1977), S. 5329
- 532U), die bei der hierfür üblichen Temperatur in einer phenol
halt igen Emulsion durchgeführt wird. .
Anschließend wird an ein Enzym, beispielsweise die ß-Galactosidase,
gebundenes Avidin zugesetzt, und zwar unter Bedingungen, welche die Bindung des Biotins am Indikator an die freien Gruppen
des Avidins des Komplexes ermöglichen.
Der nicht hybridisierte Indikator wird anschließend vom hybridisierten
Indikator nach üblichen Methoden abgetrennt, beispielsweise durch Ausfällen mit Polyäthylenglykol, Gelchromatographie
beispielsweise mit Sepharose, oder Ultrazentrifugieren.
Andererseits kann der nicht hybridisierte Indikator vor der
Bindung des Avidins, welches das Enzym mit den an den hybridisierten Indikator gebundenen Biotingruppen trägt, an die DNA
abgetrennt werden.
Man kann das gegebenenfalls fixierte Enzym und dementsprechend die gegebenenfalls stattfindende effektive. Hybridisierung des Indikators mit der untersuchten DNA nachweisen, indem man ein Enzymsubstrat, insbesondere Qrthonitrophenolgalactosid (OtJPG), mit der Lösung in Berührung bringt:.
Man kann das gegebenenfalls fixierte Enzym und dementsprechend die gegebenenfalls stattfindende effektive. Hybridisierung des Indikators mit der untersuchten DNA nachweisen, indem man ein Enzymsubstrat, insbesondere Qrthonitrophenolgalactosid (OtJPG), mit der Lösung in Berührung bringt:.
Sobald die Versuchsbedingungen festgelegt sind, ist es natürlich möglich, eine meßbare Aktivitätsschwelle zu bestimmen, beispiels
weise durch eine kolorimetrieehe oder fluorographische Methode.
Oberhalb dieser Schwelle kann auf die Anwesenheit der gesuchten DNA-oder des DNA-Fragments in der behandelten Probe geschlossen
werden.
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Das nachstehend beschriebene im Labor durchgeführte Versuchsbei-
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spiel dient zur Erläuterung des erfindungsgemäßen "Verfahrens.
Es liegt im Rahmen des handwerklichen Könnens, die Methoden im Hinblick auf die untersuchte biologische Probe und die gesuchte
DNA oder das DNA-Fragment entsprechend abzuwandeln.
Der Versuch dient dem Nachweis. einer Maus-DNA durch Hybridisierung
dieser DNA mit ribosomaler Maus-RNA als Indikator. 100 /üg Maus-DNA pro 100 /il wäßrige Lösung werden durch Versetzen
mit 10/ul 1 M NaOH denaturiert. Nach 10 Minuten wird
die Lösung mit 10/Ul 1,5 M Natriumphosphorsäure (NaH2POn) versetzt
und auf einen neutralen pH-Wer-t eingestellt. Die denaturierte
DNA-Lösung wird sodann mit 1 ^ug. ribosomaler RNA, die
mit Biotin mittels Cytochrom C (hergestellt nach der Methode
von Manning et al.) markiert ist, versetzt. Das Volumen wird mit Wasser auf ΐβο/ul gebracht. Dann werden 2K)/ul einer Mineralsalzlösung
in einer Konzentration von 20 χ SSC (Standard Saline Citrate) und 200/ul redestilliertes oder deionisiertes
Formamid zugegeben. Die Lösung 1 χ SSC ist eine wäßrige Lösung
von 0,15 MNaCl und O,015M Natriumeitrat, bei einem pH-Wert von
7,0. Das Gemisch wird l6 Stunden bei üblicher Temperatur inkubiert, dann bei 2I-0C gegen 2 χ SSC dialysiert und anschließend
8 Stunden gegen 500 ml Pufferlösung, die 0,1 M Phosphat, 1 M NaCl und 0,01 M Äthylendiamintetraessigsaures Natrium (EDTA) enthält,
bei einem ph-wert von 7,0 dialysiert. Letztere Dialyse wird
zweimal wiederholt und je 8 Stunden durchgeführt. Die erhaltene
Lösung wird eine Stunde bei üblicher Temperatur mit pankreatischer
Ribonuclease inkubiert. Die Ribonuclease-Konzentration beträgt 10 /ug/ml. Durch diese Behandlung kann nicht
hybridisierte RNA abgebaut werden.
Sodann werden 1 mg/ml Cytochrom C-Lösung und 1 /ul einer Lösung,
die in 1 mg/ml Avidin und 2 mg/ml ß-Galactosidase enthält, zugegeben.
Dabei erweist sich, daß eines von 7 Molekülen ß-Galactosidase an Avidin gebunden ist. Die Lösung wird gerührt
und sodann 4 Stunden bei 4°C stehengelassen. Anschließend wird mit Phosphat-Dialysepuffer auf 10 ml verdünnt,
und die erhaltene Lösung wird eine Stunde bei 55 000
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U/Min, zentrifugiert (im Beokman Rotor SW 4l). ENA-und RNA-Hybride
finden sich im Niederschlag zusammen mit den an diese BNA gebundenen
Ävidin-ß-Galactosidase-Komplexen. Der Überstand enthält
nicht hybridisierte und durch Ribonuclease abgebaute KNA sowie ungebundene Avidin und ß-Galactosidase.
Der Niederschlag wird abgetrennt und erneut in 10 ml Pufferlösung
suspendiert und zentrifugiert. Anschließend wird der Niederschlag in 0,5 ml Puffer aufgenommen (Tube Nr. 1). Sodann wird
die Aktivität der ß-Galactosidase beim Umsetzen des Substrats ONPG nach der Methode von Miller (Experiments in bacterial genetics
(1972) ,Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, USA) durch Messung der optischen Dichte der
Lösung bei 420 nju bestimmt, und zwar nach mindestens 30-minütiger
Inkubation bei 37°C. Es werden unter genauer Einhaltung der vorgenannten Bedingungen Kontrollproben herge.stellt,wobei
Jedoch beim ersten Kontrollversuch die Zugabe der ribosomalen RNA (Tube Nr. 2) und beim zweiten Kontrollversuch die Zugabe
der Maus-DNA (Tube Nr. 3) weggelassen wird. Die Ergebnisse
sind in der Tabelle zusammengefaßt.
Inhalt
Tube Nr. DNA RNA optische
9ς Dichte bei 420 rau, nach
30 Min., bei 37 C
1 + "_+'■■ 0,45
2 + - 0,14
3 - + 0,15
+ und - in der DNA- und RNA-Spalte deuten Jeweils an, ob die
DNA bzw. RNA in der ursprünglichen Lösung vorhanden war oder
nicht.
Aus der Tabelle ist ersichtlich, daß die in der (das Hybrid enthaltenden) Tube Nr. 1 gemessene optische Dichte signifikant
höher ist als bei den Kontrollproben.
L _|
9.8-U/07
Das Versuchsbeispiel erläutert also die Bedingungen, unter denen die gegebenenfalls anwesende DNA bzw. das DNA-Fragment
nachgewiesen werden kann, sofern ein komplementärer Indikator dieser DNA bzw. des DNA-Fragments verfügbar ist, und zwar
durch eine einfache Methode,.die weder kompliziertes Labormaterial
noch besonders große fachmännische Erfahrung erfordert.
Das erfindungsgemäße Verfahren kann bei diagnostischen in vitro-Verfahren
zum Nachweis verschiedener Viren, wie Herpes, Epstein Barr, Pox-Virus, Cytomegalo, in biologischen Proben
(wie Blutproben, Stuhlproben) besonders vorteilhaft angewandt werden. Es kann ferner für die Diagnose bestimmter chromosomaler
Anomalien angewandt werden.
Das erfindungsgemäße Verfahren kann \%reiterhin zur Feststellung
der bakteriellen Diagnose, insbesondere bei Trägern pathogener Gene, seien sie exprimiert, nicht exprimiert oder latent , angewandt
werden.
Für den Fachmann liegt es auf der Hand, daß man beim Suchen einer infektiösen DNA rasch auf den Erkrankungsgrad einer erfindungsgemäß
behandelten biologischen Probe im Hinblick auf die gesuchte Nukleinsäure bzw. deren Fragmente schließen kann,
wenn keine Induzierung oder zumindest keine Überschreitung der Aktivitätsschwelle auf dem farbigen Substrat festgestellt wird,
sei es durch Versuche sei es durch Vergleich mit den virusfreien Kontrollproben.
Umgekehrt kann die festgestellte nicht vorhandene Aktivität hinsichtlich des farbigen Substrats, insbesonder oberhalb der
vorgenannten Schwelle, in einem anderen bereits angesprochenen
Bereich Anwendung finden: Sie kann die Anwesenheit einer Anomalie gesuchter chromosomaler Abnormität-durch die festgestellte
nicht vorhandene gesamte oder partielle Hybridisierung zwischen Indikator und untersuchter DNA anzeigen.
Beispielsweise kann man für medizinische Labors L J
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· Reagenzsätze ("Kit") mit allen zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens notwendigen Reagentien zur Verfügung
stellen. ,-..-. , Solche Reagenzsätze können insbesondere
Muster für Indikatoren enthalten, die beispielsweise den DNA von gut erforschten pathogenen Viren oder Bakterien entsprechen, und
sogar für Indikatoren, die den besonderen Genen entsprechen, die normalerweise in biologischen zu untersuchenden Proben wie Blut
enthalten sind.
Wie bereits erwähnt, sollte der modifizierte Indikator vorzugsweise
ein Indikator sein, an den Biotin gebunden ist und wobei das modifizierte Enzym, beispielsweise die ß-Galactosidase,
selbst an das Avidin gebunden ist.
Die Erfindung betrifft weiterhin neue
Komplexe aus einem Enzym (dessen Aktivität im Hinblick auf
insbesondere ein farbiges Substrat nachgewiesen werden kann) und einem Indikator (RNA oder einzelsträngige DNA), sei es die
Bindung erfolgt direkt, sei es mit Hilfe eines komplexbildenden Mittels
zur industriellen Verwendung. ■ Sie betrifft auch den Kanplex aus Enzym und
mindestens einem chemischen Molekül, wobei der ganze" Komplex an einen gegebenenfalls
modifizierten Indikator (RNA oder DNA) gebunden werden kann, der selbst mit einer DNA bzw. einem DNA-Fragment hybridisierbar
ist. Solche neue industrielle Produkte sind beispielsweise die Komplexe aus Indikator (RNA oder DNA) und einem
Enzym, wie die ß-Galactosidase, oder die Komplexe aus Avidin bzw. Biotin und einem solchen Enzym.
Die Erfindung kann noch in anderen Bereichen Anwendung finden,
insbesondere bei der Markierung bestimmter DNA-Fragmente in bekannten genetischen Versuchen zur Bestimmung des Genotyps
der in Frage stehenden DNA. Sie kann insbesondere Anwendung finden bei der Bestimmung, ob ein besonderes DNA-Fragment in
genetischen Ausleseversuchen inkorporiert ist oder nicht. Bei diesen Ausleseversuchen geht es beispielsweise um Transformationen
von Zellen mittels fremder DNA, die das betreffende DNA-Fragment enthält, oder aber um Transduktionsversuche, bei denen
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DNA-Fragmente, die normalerweise in der zellulären DNA enthalten
sind, in die virale DNA übergehen, mit der die Zellen infiziert worden sind. Eine solche Anwendung ist natürlich nur
möglich, wenn man über einen Indikator verfügt, der das komplementäre
RNA- bzw. DNA-Fragment des Fragments der gesuchten Nukleinsäure ist.
Die vorliegende Erfindung erschöpft sich keineswegs in den erläuterten
Anwendungs- und Durchführungsmöglichkeiten. Sie umfaßt vielmehr alle Varianten, insbesondere hinsichtlich Modifizierungen
des Indikators, die eine enzymatische Dosierung des Hybrids ermöglichen, sowie die Modifizierungen hinsichtlich
der Bildung und/oder Reinigung des Hybrids, der Markierung oder chemischen Modifizierung der untersuchten DNA selbst, und zwar
unter den vorgenannten Bedingungen, wobei beim RNA-Indikator keine besondere Markierung vorgenommen wird. Eine Umkehrung der
Reagentien kann beispielsweise im Falle einer DNA in Betracht gezogen werden, die zahlreiche repetitive Gene enthält, welche
aus der gesamten DNA in Form des Hybrids mit dem Indikator isoliert
werden sollen. Vorher wird die DNA durch übliche Methoden fragmentiert.
Gemäß einer anderen Ausführungsform kann man das Verfahren zum
Nachweis des Hybrids aus der gesuchten DNA und dem Indikator,
mittels eines an ein Enzym, beispielsweise die ß-Galactosidase,
gebundenen Antihybrid-Antikörpers anwenden.
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Claims (1)
- VOSSIUS . VOSSIUS-i, WlLTl-. .TAUCHNER . HEUNEMANNPATENTANWÄLTESIEBERTSTRASSE 4- · 8OOO MÜNCHEN 86 - PHONE: (O89) 474075 CABLE: BENZOLPATENT MÖNCHEN · TELEX 5-29 453 VOPAT Du.Z.: P 108 (DV/nk/ke) . 12. ^ *gCase: PL-0053 79 05Institut Pasteur
Paris, PrankreichVerfahren und Reagenzsatz zum Nachweis und zur Charakterisierungvon Nukleinsäuren und ihren Sequenzen 15Priorität: 13. April 1978, Prankreich, Nr. 78 10975P a t e η t a η s ρ r ü c h eIJ Verfahren zum Nachweis und zur Charakterisierung· einer ""bestimmten Nukleinsäure-Sequenz oder eines bestimmten Nukleinsäure-Fragments, insbesondere eines Gens, auch der gesamten Nukleinsäure in einer Probe eines Nukleinsäurekomplexes durch Zusammenbringen der Probe, gegebenenfalls nach vorherigen Denaturieren der untersuchten Nukleinsäure, mit einem eine komplementäre Nukleinsäure enthaltenden Indikator, der hybridisierbar mit der gesuchten Nukleinsäure oder deren Sequenz ist, dadurch gekennzeichnet, daß man als Indikator einen durch Bindung an ein Enzym vor oder nach der Hybridisierungsreaktion chemisch modfizierten Indikator verwendet wobei die gegebenenfalls anwesende Nukleinsäure oder deren Sequenz durch die Aktivität ..des so umgewandelten Hybridisierungsprodukts aus Indikator und Nukleinsäure oder deren Sequenz als Substrat für ein Enzym nachgewiesen werden kann.2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß909844/0747Γ 2 Πman das Enzym im Hinblick auf seine Fähigkeit, auf ein farbiges Substrat einzuwirken, auswählt, und daß man die Umwandlungsrate des Substrats, die dem Anteil der gesuchten Nukleinsäure oder deren Sequenz in der Ausgangsprobe korrelierbar ist, durch optische oder analoge Analyse bestimmt.j5. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man den Indikator durch eine chemische Gruppe modifiziert, die mit dem Enzym oder einem Molekül, das stabil mit dem Enzym verbunden ist, einen stabilen Komplex bilden kann.4. Verfahren nach Anspruch j5> dadurch gekennzeichnet, daß man sowohl als chemische Gruppe als auch als Molekül Biotin oder Avidin verwendet.5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man als Enzym die ß-Galactosidase verwendet.6. Verfahren nach Anspruch 2 bis 5* dadurch gekennzeichnet, daß man zunächst die Hybridisierung, dann die Bindung zwischendem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem Enzym durchführt und anschließend den gegebenenfalls im Überschuß vorhandenen nicht hybridisierten Indikator abtrennt bzw. abbaut.
257. Verfahren nach Anspruch 2 bis 5> dadurch gekennzeichnet, daß man zunächst die Hybridisierung und anschließend nach Abtrennung bzw. Abbau des gegebenenfalls im Überschuß vorhandenen nicht hybridisierten Indikators die Bindung zwischen dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem Enzym durchführt.8. Reagenzsatz zur Durchführung des Verfahrens gemäß Ansprüche 1 bis I1 dadurch gekennzeichnet, daß er folgende Bestandteile aufweist:a) mindestens einen bestimmten Indikator aus einer RNA oder einer einzelsträngigen DNA, die charakteristisch ist für eine gesuchte Nukleinsäure oder deren Sequenz, wobei dieser Indikator im Hinblick auf seine Bindung mit einemSG98U/G747Γ _ 5 -Enzym chemisch modifiziert ist,b) das gegebenenfalls modifizierte Enzym, das für die Bindung mit dem Indikator verwendet wird, ·c) ein insbesondere farbiges Substrat, das für das Enzym spezifisch ist,d) Reagentien, die für die Zellyse, insbesondere bei der Untersuchung von Blut, und für die Extraktion von Nukleinsäuren erforderlich sind.9. Reagenzsatz nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß der Indikator aus einer RNA an Biotin gebunden ist und daß das Kupplungsproäukt aus Ävidin und einem Enzym die ß-Galactosidase als Enzym enthält.10. Komplex aus einem Enzym, das insbesondere durchseine Fähigkeit mit einem farbigen Substrat zu reagieren nachweisbar ist, und einem RNA- oder DNA-Indikator, wobei die Bindung direkt oder mittels eines komplexbildenden Mittels erfolgt.11. Komplex aus einem Enzym, das insbesondere durch seine Fähigkeit mit einem farbigen Substrat zu reagieren nachweisbar ist, und mindestens einem chemischen Molekül, wobei der ganze Komplex an einen gegebenenfalls modifizierten RNA- oder DNA-Indikator gebunden werden kann.12. Komplex nach Anspruch 11 enthaltend ß-Galactosidase als Enzym und Ävidin-oder Biotin als chemische Substanz.909844/0747
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Publication Number | Publication Date |
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DE2915082C2 DE2915082C2 (de) | 1989-07-13 |
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GB (1) | GB2019408B (de) |
IT (1) | IT1119725B (de) |
NL (1) | NL191541C (de) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0184701A2 (de) * | 1984-12-03 | 1986-06-18 | Hoechst Celanese Corporation | Verfahren zur Bestimmung eines Liganden |
DE3742706A1 (de) * | 1987-12-16 | 1989-06-29 | Erich Prof Dr Med Liebhardt | Verfahren zum identifizieren unbekannten biologischen materials |
WO1990010718A1 (en) * | 1989-03-10 | 1990-09-20 | Millipore Corporation | Sequencing nucleic acids using chemiluminescent detection |
US7064197B1 (en) | 1983-01-27 | 2006-06-20 | Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. | System, array and non-porous solid support comprising fixed or immobilized nucleic acids |
US7220854B1 (en) | 1982-06-23 | 2007-05-22 | Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. | Sugar moiety labeled nucleotide, and an oligo- or polynucleotide, and other compositions comprising such sugar moiety labeled nucleotides |
Families Citing this family (275)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5605800A (en) * | 1978-04-13 | 1997-02-25 | Institut Pasteur | Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method |
FR2422956A1 (fr) * | 1978-04-13 | 1979-11-09 | Pasteur Institut | Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede |
US6270955B1 (en) | 1978-12-22 | 2001-08-07 | Biogen, Inc. | Pharmaceutical compositions and methods for producing antibodies to hepatitis b virus and kits and methods for detecting antibodies to hepatitis b virus |
US6835557B1 (en) | 1980-01-08 | 2004-12-28 | Biogen, Inc. | DNA sequences, recombinant DNA molecules and processes for producing human interferon-like polypeptides |
US4530901A (en) * | 1980-01-08 | 1985-07-23 | Biogen N.V. | Recombinant DNA molecules and their use in producing human interferon-like polypeptides |
AU564690B2 (en) | 1980-04-03 | 1987-08-20 | Biogen Idec Ma Inc. | Process for producing human fibroblast interferon-like polypeptides using recombinant dna |
ATE48140T1 (de) * | 1981-04-17 | 1989-12-15 | Univ Yale | Modifizierte nukleotide und verfahren zu ihrer herstellung und anwendung. |
US4711955A (en) * | 1981-04-17 | 1987-12-08 | Yale University | Modified nucleotides and methods of preparing and using same |
JPS5840099A (ja) * | 1981-07-17 | 1983-03-08 | アモコ・コ−ポレ−ション | 光−放射ポリヌクレオチドの交雑診断方法 |
CA1180647A (en) * | 1981-07-17 | 1985-01-08 | Cavit Akin | Light-emitting polynucleotide hybridization diagnostic method |
US4717653A (en) * | 1981-09-25 | 1988-01-05 | Webster John A Jr | Method for identifying and characterizing organisms |
EP0155360B1 (de) * | 1981-09-25 | 1988-12-14 | John A. Webster, Jr. | Verfahren zur Identifizierung und Charakterisierung von Organismen |
EP0155359B1 (de) * | 1981-09-25 | 1988-01-07 | John A. Webster, Jr. | Verfahren zur Identifizierung und Charakterisierung von Organismen |
US5614361A (en) * | 1981-09-25 | 1997-03-25 | Webster, Jr.; John A. | Method for identifying and characterizing organisms |
FI63596C (fi) * | 1981-10-16 | 1983-07-11 | Orion Yhtymae Oy | Mikrobdiagnostiskt foerfarande som grundar sig pao skiktshybridisering av nukleinsyror och vid foerfarandet anvaenda kombinationer av reagenser |
JPS58502165A (ja) * | 1981-12-23 | 1983-12-15 | アンステイテユ・パストウ−ル | 特異抗体により認識し得る修飾核酸プローブを使用して核酸配列の存在を検出する方法 |
FR2518755B1 (fr) * | 1981-12-23 | 1986-04-11 | Pasteur Institut | Sonde contenant un acide nucleique modifie et reconnaissable par des anticorps specifiques et utilisation de cette sonde pour detecter et caracteriser une sequence d'adn homologue |
US5260433A (en) * | 1982-06-23 | 1993-11-09 | Enzo Diagnostics, Inc. | Saccharide specific binding system labeled nucleotides |
US5241060A (en) * | 1982-06-23 | 1993-08-31 | Enzo Diagnostics, Inc. | Base moiety-labeled detectable nucleatide |
CA1223831A (en) | 1982-06-23 | 1987-07-07 | Dean Engelhardt | Modified nucleotides, methods of preparing and utilizing and compositions containing the same |
US4556643A (en) * | 1982-07-26 | 1985-12-03 | Agracetus | Assay method and probe for polynucleotide sequences |
US6818393B1 (en) | 1982-07-30 | 2004-11-16 | Biomirieux Sa | DNA sequences coding for the DR beta-chain locus of the human lymphocyte antigen complex and polypeptides, diagnostic typing processes and products related thereto |
CA1295562C (en) * | 1982-07-30 | 1992-02-11 | Bernard Francois Mach | DNA SEQUENCES CODING FOR THE DR.beta.-CHAIN LOCUS OF THE HUMAN LYMPHOCYTE ANTIGEN COMPLEX AND POLYPEPTIDES, DIAGNOSTIC TYPING PROCESSES AND PRODUCTS RELATED THERETO |
US4689295A (en) * | 1983-01-20 | 1987-08-25 | Integrated Genetics, Inc. | Test for Salmonella |
GB8306426D0 (en) * | 1983-03-09 | 1983-04-13 | Malcolm A D B | Detecting polynucleotide sequence |
DE3310337A1 (de) * | 1983-03-22 | 1984-09-27 | Europäisches Laboratorium für Molekularbiologie (EMBL), 6900 Heidelberg | Verfahren zur durchfuehrung von hybridisierungsreaktionen |
GB8311905D0 (en) * | 1983-04-29 | 1983-06-02 | Cox R A | Isolation and detection of nucleotide sequence |
CA1220818A (en) * | 1983-05-05 | 1987-04-21 | Hugh A.O. Hill | Assay techniques utilising specific binding agents |
CA1228811A (en) | 1983-05-05 | 1987-11-03 | Robert G. Pergolizzi | Assay method utilizing polynucleotide sequences |
JPH0743376B2 (ja) * | 1983-05-31 | 1995-05-15 | オルジェニックス リミテッド | 核酸配列の検定方法及び分子遺伝子プローブ |
US5221609A (en) * | 1983-05-31 | 1993-06-22 | Orgenics Ltd. | Molecular genetic probe, and method of forming same, assay technique and kit using said molecular genetic probe |
US4987065A (en) * | 1983-07-05 | 1991-01-22 | Enzo Biochem, Inc. | In vivo labelling of polynucleotide sequences |
CA1222705A (en) * | 1983-07-14 | 1987-06-09 | Molecular Diagnostics, Inc. | Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays |
US4737454A (en) * | 1983-07-14 | 1988-04-12 | Molecular Diagnostics, Inc. | Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays |
US4959309A (en) * | 1983-07-14 | 1990-09-25 | Molecular Diagnostics, Inc. | Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays |
US5200313A (en) * | 1983-08-05 | 1993-04-06 | Miles Inc. | Nucleic acid hybridization assay employing detectable anti-hybrid antibodies |
US4626501A (en) * | 1983-09-02 | 1986-12-02 | Integrated Genetics, Inc. | Labeled DNA |
CA1256005A (en) * | 1983-09-26 | 1989-06-20 | W. Peter Hansen | Sandwich hybridization method for nucleic acid detection |
FR2552879B1 (fr) * | 1983-10-03 | 1987-08-14 | Pasteur Institut | Procede et reactifs pour la detection d'une anomalie genetique dans une matiere biologique, notamment dans une preparation de leucocytes |
US4743535A (en) * | 1984-11-07 | 1988-05-10 | Miles Inc. | Hybridization assay employing labeled probe and anti-hybrid |
EP0149339B1 (de) * | 1983-12-16 | 1989-08-23 | MediSense, Inc. | Test für Nukleinsäuren |
US4707440A (en) * | 1984-01-30 | 1987-11-17 | Enzo Biochem, Inc. | Nucleic acid hybridization assay and detectable molecules useful in such assay |
US4843122A (en) * | 1984-01-30 | 1989-06-27 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method of preparation and use |
US4849208A (en) * | 1984-01-30 | 1989-07-18 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method of preparation and use |
US4943523A (en) * | 1984-01-30 | 1990-07-24 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method of preparation and use |
US4849505A (en) * | 1984-01-30 | 1989-07-18 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method of preparation and use |
US5002885A (en) * | 1984-01-30 | 1991-03-26 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method preparation and use |
AU3844485A (en) * | 1984-02-09 | 1985-08-15 | Enzo Biochem Inc. | Heterologous detection of cabeled dna |
US4748111A (en) * | 1984-03-12 | 1988-05-31 | Molecular Diagnostics, Inc. | Nucleic acid-protein conjugate used in immunoassay |
US4617261A (en) * | 1984-03-21 | 1986-10-14 | Cetus Corporation | Process for labeling nucleic acids and hybridization probes |
US4582789A (en) * | 1984-03-21 | 1986-04-15 | Cetus Corporation | Process for labeling nucleic acids using psoralen derivatives |
US4840892A (en) * | 1984-05-15 | 1989-06-20 | Smithkline Beckman Corporation | Polynucleotide hybridization probes |
US4670380A (en) * | 1984-05-23 | 1987-06-02 | Molecular Diagnostics, Inc. | Assays utilizing labeled nucleic acid probes |
DE3431536A1 (de) * | 1984-08-28 | 1986-03-13 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Derivatisierte nucleinsaeure-sequenz, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zum nachweis von nucleinsaeuren |
US4563417A (en) * | 1984-08-31 | 1986-01-07 | Miles Laboratories, Inc. | Nucleic acid hybridization assay employing antibodies to intercalation complexes |
US4820630A (en) * | 1984-11-23 | 1989-04-11 | Digene Diagnostics, Incorporated | Assay for nucleic acid sequences, particularly genetic lesions, using interactive labels |
US4692509A (en) * | 1984-11-27 | 1987-09-08 | Molecular Diagnostics, Inc. | Radioactive labeling of proteins with nucleosides or nucleotides |
US4670379A (en) * | 1984-12-19 | 1987-06-02 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Polynucleotide hydridization assays employing catalyzed luminescence |
FR2578847A1 (fr) * | 1985-03-13 | 1986-09-19 | Centre Nat Rech Scient | Sonde adn destinee au diagnostic antenatal de certaines anomalies chromosomiques |
US6197563B1 (en) | 1985-03-28 | 2001-03-06 | Roche Molecular Systems, Inc. | Kits for amplifying and detecting nucleic acid sequences |
US6040166A (en) | 1985-03-28 | 2000-03-21 | Roche Molecular Systems, Inc. | Kits for amplifying and detecting nucleic acid sequences, including a probe |
GB8509880D0 (en) * | 1985-04-17 | 1985-05-22 | Ici Plc | Testing device |
IL79112A (en) * | 1985-06-13 | 1992-01-15 | Abbott Lab | Method for the isolation of a nucleic acid sequence and kit for performing a hybridization assay |
US5273882A (en) * | 1985-06-13 | 1993-12-28 | Amgen | Method and kit for performing nucleic acid hybridization assays |
US4806546A (en) * | 1985-09-30 | 1989-02-21 | Miles Inc. | Immobilization of nucleic acids on derivatized nylon supports |
US4806631A (en) * | 1985-09-30 | 1989-02-21 | Miles Inc. | Immobilization of nucleic acids on solvolyzed nylon supports |
US4789630A (en) * | 1985-10-04 | 1988-12-06 | Cetus Corporation | Ionic compounds containing the cationic meriquinone of a benzidine |
NZ218050A (en) * | 1985-11-13 | 1989-05-29 | Wistar Inst | Test for the presence of htlv-1v |
JPS63502477A (ja) * | 1985-12-03 | 1988-09-22 | エル・ギユ−リイ・エム・ラフアツト | 病気診断のための方法、装置および製品 |
US4882269A (en) * | 1985-12-13 | 1989-11-21 | Princeton University | Amplified hybridization assay |
US4822731A (en) * | 1986-01-09 | 1989-04-18 | Cetus Corporation | Process for labeling single-stranded nucleic acids and hybridizaiton probes |
US7115709B1 (en) | 1986-01-16 | 2006-10-03 | The Regents Of The University Of California | Methods of staining target chromosomal DNA employing high complexity nucleic acid probes |
US6475720B1 (en) | 1986-01-16 | 2002-11-05 | The Regents Of The University Of California | Chromosome-specific staining to detect genetic rearrangements associated with chromosome 3 and/or chromosome 17 |
US6280929B1 (en) | 1986-01-16 | 2001-08-28 | The Regents Of The University Of California | Method of detecting genetic translocations identified with chromosomal abnormalities |
US5756696A (en) | 1986-01-16 | 1998-05-26 | Regents Of The University Of California | Compositions for chromosome-specific staining |
US6872817B1 (en) | 1986-01-16 | 2005-03-29 | The Regents Of The Univ. Of California | Method of staining target interphase chromosomal DNA |
US5447841A (en) | 1986-01-16 | 1995-09-05 | The Regents Of The Univ. Of California | Methods for chromosome-specific staining |
US5721098A (en) * | 1986-01-16 | 1998-02-24 | The Regents Of The University Of California | Comparative genomic hybridization |
US4935357A (en) * | 1986-02-05 | 1990-06-19 | New England Biolabs, Inc. | Universal restriction endonuclease |
US5418133A (en) * | 1986-08-12 | 1995-05-23 | The Australian National University | Sex determination in cattle, sheep and goats using y-chromosome polynucleotides |
US5714380A (en) | 1986-10-23 | 1998-02-03 | Amoco Corporation | Closed vessel for isolating target molecules and for performing amplification |
US5660983A (en) * | 1986-12-04 | 1997-08-26 | Mycogen Plant Science, Inc. | Maize cytoplasmic male sterility type T (cms-T) mitochondria DNA |
AU619170B2 (en) * | 1987-01-09 | 1992-01-23 | Abbott Laboratories | Diagnostic assays using nucleic acid probes |
AU622104B2 (en) * | 1987-03-11 | 1992-04-02 | Sangtec Molecular Diagnostics Ab | Method of assaying of nucleic acids, a reagent combination and kit therefore |
EP0304934A3 (de) * | 1987-08-26 | 1989-07-26 | Hunger, Hans-Dieter | Markierte molekulare Sonden, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung |
US5384241A (en) * | 1987-09-11 | 1995-01-24 | Enzo Diagnostics, Inc. | Specific binding assay compound with inhibitive self-quenching characteristics |
US6004745A (en) * | 1987-09-21 | 1999-12-21 | Gen-Probe Incorporated | Hybridization protection assay |
US5639604A (en) * | 1987-09-21 | 1997-06-17 | Gen-Probe Incorporated | Homogeneous protection assay |
JP3787352B2 (ja) * | 1987-09-21 | 2006-06-21 | ジェン−プローブ・インコーポレイテッド | ハイブリダイゼーション保護検定 |
DE3732145A1 (de) * | 1987-09-24 | 1989-04-06 | Merck Patent Gmbh | Verfahren und reagenz zur durchfuehrung von hybridisierungsreaktionen |
US5354657A (en) * | 1988-01-12 | 1994-10-11 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process for the highly specific detection of nucleic acids in solid |
FR2680374B1 (fr) * | 1988-03-25 | 1993-11-12 | Bioprobe Systems Sa | Procede de coloration d'acides nucleiques detectes par marquage non radioactif et ensemble de reactifs pour la mise en óoeuvre de ce procede. |
US6326136B1 (en) * | 1988-04-01 | 2001-12-04 | Digene Corporation | Macromolecular conjugate made using unsaturated aldehydes |
US5109124A (en) * | 1988-06-01 | 1992-04-28 | Biogen, Inc. | Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine |
US5858652A (en) * | 1988-08-30 | 1999-01-12 | Abbott Laboratories | Detection and amplification of target nucleic acid sequences |
US6203977B1 (en) * | 1988-11-15 | 2001-03-20 | Yale University | Delineation of individual human chromosomes in metaphase and interphase cells by in situ suppression hybridization |
US5489507A (en) * | 1988-11-30 | 1996-02-06 | Perkin-Elmer Corporation | DNA detection by color complementation |
US5237016A (en) * | 1989-01-05 | 1993-08-17 | Siska Diagnostics, Inc. | End-attachment of oligonucleotides to polyacrylamide solid supports for capture and detection of nucleic acids |
EP0385410B1 (de) * | 1989-02-28 | 1996-10-02 | Canon Kabushiki Kaisha | Partiell doppelsträngiges Oligonukleotid und Verfahren zu seiner Bildung |
DE4001154A1 (de) * | 1990-01-17 | 1991-07-18 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur herstellung von modifizierten nukleinsaeuren |
CA2031659A1 (en) * | 1990-01-26 | 1991-07-27 | John B. Findlay | Water-insoluble reagent, nucleic acid probe, test kit and diagnostic and purification methods |
NL9001639A (nl) * | 1990-07-19 | 1992-02-17 | Amc Amsterdam | Pt-houdende verbinding, werkwijze voor de bereiding ervan, alsmede toepassing van dergelijke verbindingen. |
US5714327A (en) * | 1990-07-19 | 1998-02-03 | Kreatech Diagnostics | Platinum-containing compounds, methods for their preparation and applications thereof |
JPH0499500A (ja) * | 1990-08-17 | 1992-03-31 | Kikkoman Corp | アビジンまたはアビジン標識体の定量法およびビオチンまたはビオチン標識体の定量法 |
EP0557456A4 (en) * | 1990-11-14 | 1995-11-15 | Siska Diagnostics Inc | Non-isotopic detection of nucleic acids using a polystyrene support-based sandwich hybridization assay and compositions useful therefor |
JPH06504912A (ja) * | 1991-01-14 | 1994-06-09 | ニューヨーク・ユニバーシティ | サイトカイン誘導蛋白質tsg−6、該tsg−6蛋白質をコードするdnaおよび該tsg−6蛋白質の利用 |
AU1235392A (en) * | 1991-01-14 | 1992-08-17 | New York University | Cytokine-induced protein, tsg-14, dna coding therefor and uses thereof |
US5843667A (en) * | 1991-03-22 | 1998-12-01 | Amoco Corporation | Nucleic acid probes for the detection for genital mycoplasmas |
US5552279A (en) * | 1991-03-22 | 1996-09-03 | Amoco Corporation | Nucleic acid probes for the detection of mycoplasma pneumoniae and mycoplasma genitalium |
WO1993005184A1 (en) * | 1991-09-10 | 1993-03-18 | Love Jack D | Dna/rna target and signal amplification |
CA2126451A1 (en) * | 1991-12-24 | 1993-07-08 | Brett P. Monia | Compositions and methods for modulating .beta.-amyloid |
EP1134293A3 (de) * | 1992-03-04 | 2004-01-07 | The Regents of The University of California | Vergleichende Genomhybridisierung |
US5976790A (en) * | 1992-03-04 | 1999-11-02 | The Regents Of The University Of California | Comparative Genomic Hybridization (CGH) |
US7534567B2 (en) | 1992-03-04 | 2009-05-19 | The Regents Of The University Of California | Detection of nucleic acid sequence differences by comparative genomic hybridization |
WO1993020234A1 (en) * | 1992-03-31 | 1993-10-14 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | A rapid, high capacity nucleic acid based assay |
WO1994014067A1 (en) * | 1992-12-14 | 1994-06-23 | T Cell Sciences, Inc. | Diagnosis and therapy of sarcoidosis |
ATE211770T1 (de) * | 1993-08-10 | 2002-01-15 | Fuso Pharmaceutical Ind | Verfahren zur bestimmung von nukleinsäuren |
US5830645A (en) | 1994-12-09 | 1998-11-03 | The Regents Of The University Of California | Comparative fluorescence hybridization to nucleic acid arrays |
US5922544A (en) * | 1994-12-29 | 1999-07-13 | Eiken Kagaku Kabushiki Kaish | Method of cell detection |
US5753787A (en) * | 1995-04-10 | 1998-05-19 | Yale University | Nucleic acids encoding ancylostoma secreted protein |
US5731148A (en) * | 1995-06-07 | 1998-03-24 | Gen-Probe Incorporated | Adduct protection assay |
US6277592B1 (en) | 1996-07-31 | 2001-08-21 | Purina Mills, Inc. | Porcine leptin protein, nucleic acid sequences coding therefor and uses thereof |
US6297027B1 (en) | 1996-07-31 | 2001-10-02 | Purina Mills, Inc. | Bovine leptin protein, nucleic acid sequences coding therefor and uses thereof |
US20020137904A1 (en) * | 1998-03-27 | 2002-09-26 | Patricia A. Billing-Medel | Reagents and methods useful for detecting diseases of the gastrointestinal tract |
ES2324503T3 (es) | 1997-04-10 | 2009-08-07 | Stichting Katholieke Universiteit University Medical Centre Nijmegen | Pca3, genes pca3 y metodos de uso. |
US20050208567A1 (en) * | 1997-04-25 | 2005-09-22 | Billing-Medel Patricia A | Reagents and methods useful for detecting diseases of the prostate |
US6534273B2 (en) | 1997-05-02 | 2003-03-18 | Gen-Probe Incorporated | Two-step hybridization and capture of a polynucleotide |
IL124275A (en) * | 1997-05-02 | 2002-03-10 | Bio Merieux Vitek Inc | A method to produce sequences of nucleic acids |
EP0975807B1 (de) | 1997-05-02 | 2006-09-27 | Gen-Probe Incorporated | Zwei-schritt hybridisierung und einfang von einem polynukleotid |
US6558901B1 (en) | 1997-05-02 | 2003-05-06 | Biomerieux Vitek | Nucleic acid assays |
FR2767337B1 (fr) | 1997-08-14 | 2002-07-05 | Pasteur Institut | Sequences nucleiques de polypeptides exportes de mycobacteri es, vecteurs les comprenant et applications au diagnostic et a la prevention de la tuberculose |
GB9722131D0 (en) | 1997-10-20 | 1997-12-17 | Medical Res Council | Method |
KR100769104B1 (ko) | 1997-11-28 | 2007-10-23 | 세로노 제네틱스 인스티튜트 에스.에이. | 클라미디아 트라코마티스 게놈 서열과 폴리펩티드, 이의단편 및 이의 용도, 특히, 감염의 진단, 예방 및 치료 용도 |
US20040062775A1 (en) | 1997-12-05 | 2004-04-01 | Agence Francaise De Securite Sanitaire Des Aliments | Circovirus sequences associated with piglet weight loss disease (PWD) |
FR2772047B1 (fr) | 1997-12-05 | 2004-04-09 | Ct Nat D Etudes Veterinaires E | Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection |
JP2001526244A (ja) | 1997-12-19 | 2001-12-18 | ベス イスラエル ディーコネス メディカル センター | 腫瘍細胞の生長を阻害する方法および組成物 |
US6183957B1 (en) | 1998-04-16 | 2001-02-06 | Institut Pasteur | Method for isolating a polynucleotide of interest from the genome of a mycobacterium using a BAC-based DNA library application to the detection of mycobacteria |
US6322976B1 (en) | 1998-05-28 | 2001-11-27 | Medical Research Council | Compositions and methods of disease diagnosis and therapy |
US7537886B1 (en) | 1999-06-22 | 2009-05-26 | Life Technologies Corporation | Primers and methods for the detection and discrimination of nucleic acids |
US6830902B1 (en) * | 1999-07-02 | 2004-12-14 | Invitrogen Corporation | Compositions and methods for enhanced sensitivity and specificity of nucleic acid synthesis |
EP1422298B1 (de) | 1999-07-09 | 2010-01-27 | Gen-Probe Incorporated | HIV-1 Detektion mittels Nukleinsäureamplifizierung |
AU7636400A (en) * | 1999-09-29 | 2001-04-30 | Diagnocure Inc. | Pca3 messenger rna species in benign and malignant prostate tissues |
GB9928787D0 (en) | 1999-12-03 | 2000-02-02 | Medical Res Council | Direct screening method |
FR2803913B1 (fr) | 2000-01-13 | 2002-08-16 | Pasteur Sanofi Diagnostics | Procede d'immobilisation de reactif(s) affin(s) sur phase solide hydrophobe |
US6543535B2 (en) | 2000-03-15 | 2003-04-08 | Exxonmobil Upstream Research Company | Process for stimulating microbial activity in a hydrocarbon-bearing, subterranean formation |
EP1925672A1 (de) | 2001-06-22 | 2008-05-28 | Syngeta Participations AG | Auf abiotischen Stress ansprechende Polynukleotide und Polypeptide |
US20030165859A1 (en) * | 2001-10-23 | 2003-09-04 | Invitrogen Corporation | Primers and methods for the detection and discrimination of nucleic acids |
US6942972B2 (en) | 2001-10-24 | 2005-09-13 | Beckman Coulter, Inc. | Efficient synthesis of protein-oligonucleotide conjugates |
US6956484B2 (en) * | 2001-12-21 | 2005-10-18 | Reconnaissance International | Substance testing devices with photo identification |
US20030175828A1 (en) * | 2002-03-15 | 2003-09-18 | Lazar James G. | Signal amplification by Hybrid Capture |
US7199107B2 (en) * | 2002-05-23 | 2007-04-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of kinesin-like 1 expression |
ATE519861T1 (de) | 2002-06-14 | 2011-08-15 | Gen Probe Inc | Zusammensetzungen zum nachweis von hepatitis-b- virus |
CA2501946C (en) | 2002-10-16 | 2014-12-23 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting west nile virus |
CA2513780C (en) * | 2003-02-07 | 2014-12-30 | Diagnocure Inc. | Method to detect prostate cancer from a urine sample |
AU2004303886B2 (en) | 2003-12-19 | 2009-09-03 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, methods and kits for detecting the nucleic acids of HIV-1 and HIV-2 |
WO2005079474A2 (en) | 2004-02-17 | 2005-09-01 | The Regents Of The University Of California | Detection of nucleic acid sequence differences by comparative genomic hybridization |
CA2562517A1 (en) | 2004-04-16 | 2005-10-27 | Spartan Bioscience Inc. | System for rapid nucleic acid amplification and detection |
CA2565980A1 (en) | 2004-05-12 | 2005-12-01 | Luca Technologies, Llc | Generation of hydrogen from hydrocarbon-bearing materials |
CA2838428C (en) * | 2004-07-13 | 2015-09-29 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detection of hepatitis a virus nucleic acid |
EP1794328B1 (de) | 2004-09-30 | 2015-05-27 | Gen-Probe Incorporated | Verfahren zum nachweis und zur quantifizierung von hiv-1 |
CA2582661C (en) * | 2004-11-09 | 2015-08-11 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting group a streptococci |
US20060105348A1 (en) * | 2004-11-15 | 2006-05-18 | Lee Jun E | Compositions and methods for the detection and discrimination of nucleic acids |
US20060275792A1 (en) * | 2004-11-15 | 2006-12-07 | Lee Jun E | Enhancement of nucleic acid amplification using double-stranded DNA binding proteins |
US7472576B1 (en) | 2004-11-17 | 2009-01-06 | State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Portland State University | Nanometrology device standards for scanning probe microscopes and processes for their fabrication and use |
CA2491067A1 (en) | 2004-12-24 | 2006-06-24 | Stichting Katholieke Universiteit | Mrna rations in urinary sediments and/or urine as a prognostic marker for prostate cancer |
ATE490342T1 (de) * | 2005-02-07 | 2010-12-15 | Gen Probe Inc | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von streptokokken der gruppe b |
US20060223159A1 (en) * | 2005-04-05 | 2006-10-05 | Luca Technologies, Llc | Generation of materials with enhanced hydrogen content from microbial consortia including thermotoga |
US20060223153A1 (en) * | 2005-04-05 | 2006-10-05 | Luca Technologies, Llc | Generation of materials with enhanced hydrogen content from anaerobic microbial consortia |
US20060223160A1 (en) * | 2005-04-05 | 2006-10-05 | Luca Technologies, Llc | Systems and methods for the isolation and identification of microorganisms from hydrocarbon deposits |
US7426960B2 (en) | 2005-05-03 | 2008-09-23 | Luca Technologies, Inc. | Biogenic fuel gas generation in geologic hydrocarbon deposits |
JP5187847B2 (ja) | 2005-05-06 | 2013-04-24 | ジェン−プローブ・インコーポレーテッド | 核酸標的の捕獲方法 |
EP2471805A3 (de) | 2005-05-06 | 2013-01-16 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und Verfahren zur spezifischen Detektion von Nukleinsäuren der Viren Influenza A oder B |
JP2009511086A (ja) | 2005-10-17 | 2009-03-19 | ジェン−プローブ・インコーポレーテッド | レジオネラ・ニューモフィラ核酸を検出するための組成物及び方法 |
US8969033B2 (en) * | 2005-11-02 | 2015-03-03 | Battelle Energy Alliance, Llc | Alteration and modulation of protein activity by varying post-translational modification |
US7416879B2 (en) * | 2006-01-11 | 2008-08-26 | Luca Technologies, Inc. | Thermacetogenium phaeum consortium for the production of materials with enhanced hydrogen content |
US7696132B2 (en) * | 2006-04-05 | 2010-04-13 | Luca Technologies, Inc. | Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material |
US7977282B2 (en) * | 2006-04-05 | 2011-07-12 | Luca Technologies, Inc. | Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material |
US20100248322A1 (en) * | 2006-04-05 | 2010-09-30 | Luca Technologies, Inc. | Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material |
CA2651946A1 (en) * | 2006-05-12 | 2007-11-22 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods to detect enterococci nucleic acid |
CA2658105C (en) | 2006-08-01 | 2016-07-05 | Gen-Probe Incorporated | Methods of nonspecific target capture of nucleic acids |
CA2673017C (en) | 2006-12-21 | 2015-08-04 | Gen-Probe Incorporated | Methods and compositions for nucleic acid amplification |
EP1978111B1 (de) | 2007-04-02 | 2013-03-27 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen, Kits und zugehörige Verfahren zur Erkennung und/oder Überwachung von Pseudomonas aeruginosa |
US9458451B2 (en) | 2007-06-21 | 2016-10-04 | Gen-Probe Incorporated | Multi-channel optical measurement instrument |
CA2715991A1 (en) * | 2007-12-26 | 2009-07-09 | Gen-Probe Incorporated | Amplification oligomers and methods to detect candida albicans 26s rrna or encoding dna |
US8492114B2 (en) * | 2008-01-25 | 2013-07-23 | Battelle Energy Alliance, Llc | Methods of combined bioprocessing and related microorganisms, thermophilic and/or acidophilic enzymes, and nucleic acids encoding said enzymes |
BRPI0906066A2 (pt) * | 2008-01-25 | 2015-08-18 | Battelle Energy Alliance Llc | Beta-xilosidases térmicas e ácidos tolerantes, codificação de genes, organismos relacionados e métodos |
US9732330B2 (en) | 2008-01-25 | 2017-08-15 | Battelle Energy Alliance, Llc | Methods of combined bioprocessing and related microorganisms, thermophilic and/or acidophilic enzymes, and nucleic acids encoding said enzymes |
US8497110B2 (en) | 2008-01-31 | 2013-07-30 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
US8426185B2 (en) | 2008-01-31 | 2013-04-23 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
AU2009210489A1 (en) * | 2008-01-31 | 2009-08-13 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer- degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
US8557557B2 (en) * | 2008-01-31 | 2013-10-15 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
WO2009137145A2 (en) | 2008-02-22 | 2009-11-12 | Battelle Energy Alliance, Llc | Transcriptional control in alicyclobacillus acidocaldarius and associated genes, proteins, and methods |
JP2011512802A (ja) | 2008-02-26 | 2011-04-28 | バテル エナジー アライアンス,エルエルシー | アリサイクロバチルス・アシドカルダリウスおよび関連生物体由来の好熱性および好熱好酸性糖トランスポータ遺伝子および酵素、方法 |
MX2010008249A (es) * | 2008-02-27 | 2010-11-12 | Battelle Energy Alliance Llc | Genes de glicosilacion termofilica y termoacidofilica y enzimas a partir de alicyclobacillus acidocaldarius y metodos, organismos relacionados. |
EP2245143A4 (de) | 2008-02-28 | 2013-07-31 | Battelle Energy Alliance Llc | Thermophile und thermoacidophile stoffwechselgene und enzyme aus alicyclobacillus acidocaldarius sowie entsprechende organismen und verfahren |
JP5646455B2 (ja) | 2008-04-21 | 2014-12-24 | ジェン−プロウブ インコーポレイテッド | チクングニヤウイルスを検出するための方法 |
EP2806037B1 (de) | 2008-05-13 | 2016-09-21 | Gen-Probe Incorporated | Inaktivierbare Target-Capture-Oligomere zur Verwendung bei der selektiven Hybridisierung und beim Fangen von Zielnukleinsäuresequenzen |
CA2723917A1 (en) | 2008-05-30 | 2009-12-30 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, kits and related methods for the detection and/or monitoring of salmonella |
US8097412B2 (en) * | 2008-07-12 | 2012-01-17 | Biodiagnostics, Inc. | DNA-based test for detection of annual and intermediate ryegrass |
CA2638458A1 (en) * | 2008-07-31 | 2010-01-31 | Spartan Bioscience Inc. | Thermal recycling by positioning relative to fixed-temperature source |
US20100035309A1 (en) * | 2008-08-06 | 2010-02-11 | Luca Technologies, Inc. | Analysis and enhancement of metabolic pathways for methanogenesis |
CA2746539A1 (en) | 2008-12-30 | 2010-07-08 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, kits and related methods for the detection and/or monitoring of listeria |
US8368882B2 (en) | 2009-01-30 | 2013-02-05 | Gen-Probe Incorporated | Systems and methods for detecting a signal and applying thermal energy to a signal transmission element |
EP3705486B1 (de) | 2009-02-26 | 2022-11-16 | Gen-Probe Incorporated | Assay zum nachweisen menschlicher parvoviren-nukleinsäure |
US20100248321A1 (en) * | 2009-03-27 | 2010-09-30 | Luca Technologies, Inc. | Surfactant amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous materials |
EP2449132B1 (de) | 2009-07-01 | 2015-05-13 | Gen-Probe Incorporated | Verfahren und zusammensetzungen zur erweiterung von nukleinsäuren |
US8479813B2 (en) * | 2009-12-16 | 2013-07-09 | Luca Technologies, Inc. | Biogenic fuel gas generation in geologic hydrocarbon deposits |
EP3604558B1 (de) | 2010-02-17 | 2022-10-12 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von atopobium-vaginae-nukleinsäure |
US9206484B2 (en) | 2010-04-21 | 2015-12-08 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, methods and kits to detect herpes simplex virus nucleic acids |
US20110275135A1 (en) | 2010-05-05 | 2011-11-10 | Battelle Energy Alliance, Llc | Genetic elements, proteins, and associated methods including application of additional genetic information to gram (+) thermoacidophiles |
EP2588629B1 (de) | 2010-06-30 | 2017-05-17 | Gen-Probe Incorporated | Methode und apparatur zur identifizierung von analyt-beinhaltenden proben unter verwendung von single-read determination des analyten und prozesskontrollsignalen |
EP2593569B1 (de) | 2010-07-12 | 2018-01-03 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und tests für den nachweis von nukleinsäuren des saisonalen h1 influenza a virus |
EP3192880B1 (de) | 2010-08-18 | 2019-10-09 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Nukleinsäure-wirkstoffe zur behandlung von fazioskapulohumeraler muskeldystrophie (fshd) |
EP2611932A2 (de) | 2010-08-30 | 2013-07-10 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen, verfahren und reaktionsmischungen für den nachweis von xenotropic murine leukemia virus-related virus (xmrv) |
US9938590B2 (en) | 2010-09-16 | 2018-04-10 | Gen-Probe Incorporated | Capture probes immobilizable via L-nucleotide tail |
EP2625297B1 (de) | 2010-10-04 | 2018-10-10 | Gen-Probe Prodesse, Inc. | Zusammensetzungen, verfahren und kits für den nachweis von adenovirus-nukleinsäuren |
EP2683833B1 (de) | 2011-03-10 | 2018-09-26 | Gen-Probe Incorporated | Verfahren zur auswahl und optimierung von oligonukleotid-tagsequenzen |
WO2012149034A1 (en) | 2011-04-25 | 2012-11-01 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting bv-associated bacterial nucleic acid |
ES2945966T3 (es) | 2011-07-15 | 2023-07-11 | Gen Probe Inc | Composiciones y procedimiento para detectar ácido nucleico del parvovirus humano y ácido nucleico del virus de la hepatitis A |
EP3255155B1 (de) | 2011-09-08 | 2019-04-24 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von bv-assoziierter bakterieller nukleinsäure |
WO2013044097A1 (en) | 2011-09-21 | 2013-03-28 | Gen-Probe Incorporated | Methods for amplifying nucleic acid using tag-mediated displacement |
DE102011120550B4 (de) | 2011-12-05 | 2013-11-07 | Gen-Probe Prodesse, Inc. | Zusammensetzungen, Verfahren und Kits zur Detektion von Adenovirusnukleinsäuren |
CA2865281C (en) | 2012-02-24 | 2021-11-23 | Gen-Probe Prodesse, Inc. | Detection of shiga toxin genes in bacteria |
US9004162B2 (en) | 2012-03-23 | 2015-04-14 | Transworld Technologies Inc. | Methods of stimulating acetoclastic methanogenesis in subterranean deposits of carbonaceous material |
AU2013205110B2 (en) | 2012-04-24 | 2016-10-13 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, Methods and Kits to Detect Herpes Simplex Virus Nucleic Acids |
AU2013205064B2 (en) | 2012-06-04 | 2015-07-30 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and Methods for Amplifying and Characterizing HCV Nucleic Acid |
WO2014036369A1 (en) | 2012-08-30 | 2014-03-06 | Gen-Probe Incorporated | Multiphase nucleic acid amplification |
AU2013205122B2 (en) | 2012-10-11 | 2016-11-10 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and Methods for Detecting Human Papillomavirus Nucleic Acid |
AU2013205090B2 (en) | 2012-12-07 | 2016-07-28 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and Methods for Detecting Gastrointestinal Pathogen Nucleic Acid |
US20160024565A1 (en) * | 2013-03-13 | 2016-01-28 | Tufts University | Fragment complementation of based assays |
US10053742B2 (en) | 2013-08-14 | 2018-08-21 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting HEV nucleic acid |
JP6821429B2 (ja) | 2013-09-25 | 2021-01-27 | ゾエティス・サービシーズ・エルエルシー | Pcv2b分岐ワクチン組成物及び使用方法 |
JP6767374B2 (ja) | 2014-10-20 | 2020-10-14 | ジェン−プローブ・インコーポレーテッド | 赤血球溶解溶液 |
EP3242956B1 (de) | 2015-01-09 | 2020-06-17 | Gen-Probe Incorporated | Verfahren und zusammensetzungen zur diagnose von bakterieller vaginose |
US10550438B2 (en) | 2015-03-16 | 2020-02-04 | Gen-Probe Incorporated | Methods and compositions for detecting bacterial nucleic acid |
EP3387107B1 (de) | 2015-12-11 | 2020-08-12 | Spartan Bioscience Inc. | Röhrchenverschlusssystem und verfahren zur nukleinsäureamplifikation |
CA3010232A1 (en) | 2016-01-04 | 2017-07-13 | Gen-Probe Incorporated | Methods and compositions for detecting candida species |
JP7015785B2 (ja) | 2016-02-05 | 2022-02-15 | ジェン-プローブ・インコーポレーテッド | 乾燥増幅組成物 |
DE202017007129U1 (de) | 2016-04-27 | 2019-08-29 | Gen-Probe Incorporated | Lysereagenz für Blutzellen |
WO2017214511A2 (en) | 2016-06-10 | 2017-12-14 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting zika virus nucleic acid |
EP3529381B1 (de) | 2016-10-19 | 2022-07-06 | Gen-Probe Incorporated | Mischungen und verfahren zur detektion und quantifizierung von hepatitis c viren |
EP3541959A1 (de) | 2016-11-21 | 2019-09-25 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis oder zur quantifizierung des hepatitis-b-virus |
EP4212635A1 (de) | 2017-03-24 | 2023-07-19 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von rsv a in proben |
EP3601617B3 (de) | 2017-03-24 | 2024-03-20 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis oder zur quantifizierung des parainfluenzavirus |
JP6956800B2 (ja) | 2017-03-25 | 2021-11-02 | ジェン−プローブ・インコーポレーテッド | アデノウイルス、メタニューモウイルス、および/またはライノウイルス核酸を検出するための組成物、方法、およびキット |
CN110662553A (zh) | 2017-05-17 | 2020-01-07 | 迅雷生物科技有限公司 | 转基因巨噬细胞、嵌合抗原受体和相关方法 |
JP7292217B2 (ja) | 2017-06-07 | 2023-06-16 | ジーイーエヌ-プローブ・インコーポレーテッド | 試料中のバベシア種の核酸の検出 |
CN111032209A (zh) | 2017-07-10 | 2020-04-17 | 简·探针公司 | 分析系统和方法 |
US11859257B2 (en) | 2017-08-11 | 2024-01-02 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting Staphylococcus aureus |
US11268134B2 (en) * | 2017-09-29 | 2022-03-08 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Sensor apparatus and method for testing a sample |
CA3082909C (en) | 2017-11-17 | 2023-07-25 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting c1orf43 nucleic acid |
US20200318171A1 (en) | 2017-12-15 | 2020-10-08 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and Methods for Detecting Toxigenic Clostridium Difficile |
US20210052643A1 (en) | 2018-01-05 | 2021-02-25 | Thunder Biotech, Inc. | Modified macrophages and macrophage precursors and associated methods |
CA3089078A1 (en) | 2018-01-29 | 2019-08-01 | Gen-Probe Incorporated | Analytical systems and methods |
CN112654721A (zh) | 2018-06-13 | 2021-04-13 | 简·探针公司 | 用于检测b群链球菌核酸的组合物和方法 |
WO2020014400A1 (en) | 2018-07-10 | 2020-01-16 | Gen-Probe Incorporated | Methods and systems for detecting and quantifying nucleic acids |
EP3830302B1 (de) | 2018-08-01 | 2022-10-05 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von nukleinsäuren des epstein-barr-virus |
WO2020033557A1 (en) | 2018-08-08 | 2020-02-13 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, methods and kits for detecting mycoplasma genitalium |
US20220074002A1 (en) | 2018-08-21 | 2022-03-10 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for amplifying, detecting or quantifying human cytomegalovirus |
AU2019324196A1 (en) | 2018-08-24 | 2021-03-18 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting bacterial nucleic acid and diagnosing bacterial vaginosis |
EP3856934A2 (de) | 2018-09-27 | 2021-08-04 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zur detektion von bordetella-pertussis- und bordetella-parapertussis-nukleinsäure |
CA3112342A1 (en) | 2018-10-01 | 2020-04-09 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for amplifying or detecting varicella-zoster virus |
WO2020086546A1 (en) | 2018-10-22 | 2020-04-30 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for amplifying, detecting or quantifying human polyomavirus bk virus |
TW202030333A (zh) | 2018-12-20 | 2020-08-16 | 美商簡 探針公司 | 用於檢測瘧原蟲物種核酸之組成物及方法 |
EP3942078A1 (de) | 2019-03-22 | 2022-01-26 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zur detektion von gruppe-a-streptococcus |
CA3137749C (en) | 2019-05-03 | 2023-12-05 | Gen-Probe Incorporated | Receptacle transport system for an analytical system |
EP4047098A4 (de) | 2019-08-20 | 2023-06-07 | EGI Tech (Shen Zhen) Co., Limited | Verfahren zum sequenzieren von polynukleotiden basierend auf optischer signaldynamik eines lumineszenten labels und eines sekundären lumineszenten signals |
US20220298548A1 (en) | 2019-08-23 | 2022-09-22 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, methods and kits for detecting treponema pallidum |
AU2020343334A1 (en) | 2019-09-05 | 2022-04-07 | Gen-Probe Incorporated | Detection of Chlamydia trachomatis nucleic acid variants |
JP2023516683A (ja) | 2020-03-04 | 2023-04-20 | ジェン-プローブ・インコーポレーテッド | SARS-CoV-2核酸を検出するための組成物および方法 |
CN115698325A (zh) | 2020-05-07 | 2023-02-03 | 盖立复诊断解决方案公司 | 用于检测SARS-CoV-2核酸的方法和组合物 |
CN116323440A (zh) | 2020-10-21 | 2023-06-23 | 简·探针公司 | 流体容器管理系统 |
AU2022319876A1 (en) | 2021-07-27 | 2024-01-18 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting gastrointestinal pathogens |
WO2023175434A1 (en) | 2022-03-15 | 2023-09-21 | Diagenode S.A. | Detection of methylation status of a dna sample |
WO2024054924A1 (en) | 2022-09-08 | 2024-03-14 | Gen-Probe Incorporated | Method of detecting nucleic acid analytes using dual-specificity primers |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4002532A (en) * | 1974-10-21 | 1977-01-11 | Weltman Joel K | Enzyme conjugates |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3654090A (en) * | 1968-09-24 | 1972-04-04 | Organon | Method for the determination of antigens and antibodies |
NL154598B (nl) * | 1970-11-10 | 1977-09-15 | Organon Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking. |
NL154599B (nl) * | 1970-12-28 | 1977-09-15 | Organon Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen, alsmede testverpakking. |
US3817837A (en) * | 1971-05-14 | 1974-06-18 | Syva Corp | Enzyme amplification assay |
US4067774A (en) * | 1971-05-14 | 1978-01-10 | Syva Company | Compounds for enzyme amplification assay |
US3880934A (en) * | 1972-02-10 | 1975-04-29 | Syntex Inc | Nitrophenyloxy-butanediols |
NL171930C (nl) * | 1972-05-11 | 1983-06-01 | Akzo Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van haptenen, alsmede testverpakkingen. |
IN142734B (de) * | 1975-04-28 | 1977-08-20 | Miles Lab | |
US4016043A (en) * | 1975-09-04 | 1977-04-05 | Akzona Incorporated | Enzymatic immunological method for the determination of antigens and antibodies |
US4134792A (en) * | 1976-12-06 | 1979-01-16 | Miles Laboratories, Inc. | Specific binding assay with an enzyme modulator as a labeling substance |
US4139346A (en) * | 1977-11-28 | 1979-02-13 | Enzo Bio Chem Incorporated | Nucleic acid and protein binding paper |
US4318980A (en) * | 1978-04-10 | 1982-03-09 | Miles Laboratories, Inc. | Heterogenous specific binding assay employing a cycling reactant as label |
US5605800A (en) * | 1978-04-13 | 1997-02-25 | Institut Pasteur | Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method |
FR2422956A1 (fr) * | 1978-04-13 | 1979-11-09 | Pasteur Institut | Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede |
US4228237A (en) * | 1978-09-21 | 1980-10-14 | Calbiochem-Behring Corp. | Methods for the detection and determination of ligands |
DE3172879D1 (en) * | 1980-05-22 | 1985-12-19 | Pasteur Institut | Coupled product between a lectin and a specific ligand, obtention and use in the biological field |
US4358535A (en) * | 1980-12-08 | 1982-11-09 | Board Of Regents Of The University Of Washington | Specific DNA probes in diagnostic microbiology |
US4442204A (en) * | 1981-04-10 | 1984-04-10 | Miles Laboratories, Inc. | Homogeneous specific binding assay device and preformed complex method |
JPH0743376B2 (ja) * | 1983-05-31 | 1995-05-15 | オルジェニックス リミテッド | 核酸配列の検定方法及び分子遺伝子プローブ |
EP0155854B1 (de) * | 1984-03-22 | 1990-09-26 | Bresatec Limited | Nichtradioaktives biologisches Testmaterial |
EP0187332B1 (de) * | 1985-01-10 | 1989-02-01 | Molecular Diagnostics, Inc. | Photochemisches Verfahren zum Markieren von Nucleinsäuren zum Nachweis in Hybridisationsproben |
US4868105A (en) * | 1985-12-11 | 1989-09-19 | Chiron Corporation | Solution phase nucleic acid sandwich assay |
-
1978
- 1978-04-13 FR FR7810975A patent/FR2422956A1/fr active Granted
-
1979
- 1979-04-12 GB GB7913031A patent/GB2019408B/en not_active Expired
- 1979-04-12 DE DE2915082A patent/DE2915082C3/de not_active Expired - Lifetime
- 1979-04-12 NL NL7902911A patent/NL191541C/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-04-13 IT IT21838/79A patent/IT1119725B/it active
- 1979-04-13 BE BE0/194623A patent/BE875598A/xx not_active IP Right Cessation
- 1979-04-13 CH CH3527/79A patent/CH647870A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1979-04-13 JP JP4444379A patent/JPS54143297A/ja active Granted
-
1982
- 1982-04-29 US US06/373,017 patent/US4581333A/en not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-09-08 US US07/940,750 patent/US5955262A/en not_active Expired - Fee Related
-
1995
- 1995-06-06 US US08/466,275 patent/US5876928A/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4002532A (en) * | 1974-10-21 | 1977-01-11 | Weltman Joel K | Enzyme conjugates |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Biochemistry (1977), 16 (7), 1364-1370 * |
Clin.Chem. (1976), 22 (8), 1243-1255 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7220854B1 (en) | 1982-06-23 | 2007-05-22 | Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. | Sugar moiety labeled nucleotide, and an oligo- or polynucleotide, and other compositions comprising such sugar moiety labeled nucleotides |
US7064197B1 (en) | 1983-01-27 | 2006-06-20 | Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. | System, array and non-porous solid support comprising fixed or immobilized nucleic acids |
EP0184701A2 (de) * | 1984-12-03 | 1986-06-18 | Hoechst Celanese Corporation | Verfahren zur Bestimmung eines Liganden |
EP0184701A3 (en) * | 1984-12-03 | 1987-12-16 | Hoechst Celanese Corporation | A method for determining a ligand |
DE3742706A1 (de) * | 1987-12-16 | 1989-06-29 | Erich Prof Dr Med Liebhardt | Verfahren zum identifizieren unbekannten biologischen materials |
WO1990010718A1 (en) * | 1989-03-10 | 1990-09-20 | Millipore Corporation | Sequencing nucleic acids using chemiluminescent detection |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
NL191541B (nl) | 1995-05-01 |
US5955262A (en) | 1999-09-21 |
IT1119725B (it) | 1986-03-10 |
CH647870A5 (fr) | 1985-02-15 |
DE2915082C2 (de) | 1989-07-13 |
JPH0364119B2 (de) | 1991-10-03 |
JPS54143297A (en) | 1979-11-08 |
FR2422956B1 (de) | 1980-11-28 |
GB2019408B (en) | 1982-08-18 |
NL191541C (nl) | 1995-09-04 |
US5876928A (en) | 1999-03-02 |
FR2422956A1 (fr) | 1979-11-09 |
DE2915082C3 (de) | 1995-04-20 |
GB2019408A (en) | 1979-10-31 |
BE875598A (fr) | 1979-10-15 |
NL7902911A (nl) | 1979-10-16 |
US4581333A (en) | 1986-04-08 |
IT7921838A0 (it) | 1979-04-13 |
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