DE2915082A1 - Verfahren und reagenzsatz zum nachweis und zur charakterisierung von nukleinsaeuren und ihren sequenzen - Google Patents

Verfahren und reagenzsatz zum nachweis und zur charakterisierung von nukleinsaeuren und ihren sequenzen

Info

Publication number
DE2915082A1
DE2915082A1 DE19792915082 DE2915082A DE2915082A1 DE 2915082 A1 DE2915082 A1 DE 2915082A1 DE 19792915082 DE19792915082 DE 19792915082 DE 2915082 A DE2915082 A DE 2915082A DE 2915082 A1 DE2915082 A1 DE 2915082A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
indicator
enzyme
nucleic acid
dna
rna
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
DE19792915082
Other languages
English (en)
Other versions
DE2915082C2 (de
DE2915082C3 (de
Inventor
Stratis Avrameas
Geb Contamine Brigitte Cami
Jean-Luc Guesdon
Philippe Kourilsky
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institut Pasteur de Lille
Original Assignee
Institut Pasteur de Lille
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9207099&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=DE2915082(A1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Institut Pasteur de Lille filed Critical Institut Pasteur de Lille
Publication of DE2915082A1 publication Critical patent/DE2915082A1/de
Publication of DE2915082C2 publication Critical patent/DE2915082C2/de
Application granted granted Critical
Publication of DE2915082C3 publication Critical patent/DE2915082C3/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81—Packaged device or kit
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/975—Kit

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Nachweis und gegebenenfalls zur Charakterisierung einer Nukleinsäure oder einer Sequenz derselben, in einer diese möglicherweise enthaltenden Probe. Sie betrifft ferner die zur Durchführung des Verfahrens erforderlichen Reagenzien und schließlich die Verwendung eines solchen Verfahrens, beispielsweise zur raschen Diagnostizierung in vitro, ob in einer biologischen Probe menschlicher oder tierischer Herkunft bestimmte Nukleinsäurepartikel etwa infektiösen Charakters vorhanden sind oder ob ein bestimmtes Gen aus dem normalen Erbgut des Wirts unverändert ist oder nicht.
Jede biologische Probe, beispielsweise Blut, das jedem Lebewesen entnommen werden kann, enthält verschiedene Nukleinsäuren in außerordentlicher Reichhaltigkeit. . Dies trifft auch für verschiedene Sequenzen zu, beispielsweise zahlreiche Gene, die jede einzelne Nukleinsäure in diesen Proben enthalten kann. Daher kann der Genetiker auf große Schwierigkeiten beim Aufspüren oder bei der Charakterisierung von bestimmten Nukleinsäuren in einer Probe stoßen. Die Schwierigkeiten werden noch größer, wenn es darum geht, die Anwesenheit bestimmter Fragmente, beispielsweise der in diesen Nukleinsäuren enthaltenen Gene, zu charakterisieren.
Um eine einzelne Nukleinsäure oder einzelne Gene - beispielsweise im Hinblick auf Studien der Organisation genetischer Sequenzen der DNA, in der sie enthalten sind - zu charakterisieren, benötigt man zunächst eine mit dieser Nukleinsäure angereicherte,aus der untersuchten Probe erhaltene Fraktion.
Zu diesem Zweck wurden bereits Anreicherungsmethoden vorgeschlagen, die sich die Hybridisierungsreaktionen zwischen der gesuchten Nukleinsäure bzw. dem Gen und einem Indikator zunutze machen, sofern ein solcher Indikator verfügbar ist und
909844/Ö747
die erhaltenen Hybride sodann von der Probe abgetrennt werden können, beispielsweise durch differentielle Sedimentation aus einer Lösung mittels Ultrazentrifugieren..
Solche Indikatoren wurden bereits beschrieben: es handelt sich dabei im allgemeinen um Ribonukleinsäuren (RNA),beispielsweise solche, die mittels genetischer Transkription von Strukturgenen erhalten wurden. Die Strukturgene sind Bestandteile der DNA der einzelligen Zellorganismen, aus denen sie stammen. Die DNA. ist demnach ge- eignet, ihrerseits in die Proteine, für welche die Strukturgene codieren, "übersetzt" zu werden. Es ist bekannt, daß die RNA-Nukleotid-Sequenzen zu der Sequenz der DNA, von der sie abstammen, komplementär sind. Dies · . zeigt sich in der Eigenschaft der RNA, gemischte Hybride mit den entsprechenden Sequenzen der zugehörigen DNA zu bilden, die zuvor denaturiert worden ist, soweit diese anfangs doppelsträngig war, beispielsweise nach Inkubation bei hoher lonenstärke und' erhöhter Temperatur oder in basischem Milieu.
Es wurde vorgeschlagen, den Nachweis von gebildeten Hybriden mit Hilfe einer radioaktiven Markierung der Gene selbst oder der RNA-Indikatoren vorzunehmen.Die Durchführung dieser Methoden ist jedoch nicht einfach, und außerdem ist es dabei nicht immer möglich, die Gene innerhalb der DNA ausreichend zu lokalisieren.
Um die untersuchten Gene in der sie enthaltenden DNA besser
lokalisieren zu können und eine Methode zur Bildung von mit bestimmten DNA-Segmenten angereicherten Fraktionen - ausgehend von derselben DNA - zu entwickeln, haben Manning et al eine Methode zum physiko-chemischen Nachweis dieser Gene vorgeschlagen. Diese Methode besteht aus der chemischen Modifizierung des RNA-Indikators durch Anheftung von Biotingruppen, d.h. Derivaten des Cytochrom C. Diese Biotingruppen heften sich durch Brückenbildung bei der Hybridisierung an die DNA an und sind nun physikalisch im Elektronenmikroskop als Staubteilchen/die aus submikroskopischen Kügelchen von
9098-U7Ö747
einem Durchmesser von 6θ nm bestehen, insbesondere auf einem Untergrund von Polymethacrylsäureester nachweisbar.Die Kügelchen wurden zuvor chemisch modifiziert und kovälent an Avidin-Moleküle gebunden. Diese Methode ist in "A New Method of in situ Hybridization", Chromosoms, Springer Verlag (Berlin), Bd. 53 (1975), S. 107 bis 117 und in "A Method for Gene Enrichment Based on the Avidin-Biotin Interaction, Application to the Drosophila Ribosomal RNA Genes", Biochemistry, Bd. 16 (1977), Nr. 7, S. 1364 - 1369 beschrieben.
Die Inkubation der Hybride, die durch Biotin und Avidin modifiziert sind, macht es möglich, die Stelle der gesuchten Gene in der sie enthaltenden DNA zu "markieren" und sie innerhalb der globulären Struktur der DNA nachzuweisen,Diese ist ebenfalls im Elektronenmikroskop sichtbar ' infolge der sehr starken nicht kovalenten Interaktionen, die nach wie vor an den Stellen herrschen, die frei von Biotin und Avidin geblieben sind.
Diese Methode ist jedoch kaum dazu geeignet, rasch zu bestimmen, ob derartige Gene bzw. ENA in einer biologischen Probe menschlicher oder tierischer Herkunft anwesend sind oder nicht. So ist beispielsweise eine rasche Diagnose einer Infektion, von welcher der Wirt möglicherweise befallen ist, oder der Tatsache, ob ein Gen oder beispielsweise eine DNA-Sequenz in diesem Wirt unverändert geblieben ist oder nicht nach der Methode schwer möglich
Aufgabe der Erfindung ist es Nachweis- und sogar Charakterisierungsmethoden zur Verfügung zu stellen, die mit einfachen Mitteln von Laboranten ohne besondere Ausbildung angewandt werden können.
Diese Aufgabe wird durch die Erfindung gelöst.
Die Erfindung betrifft somit den in den Patentansprüchen gekenn-rzeichneten Gegenstand.
Natürlich darf die chemische Modifizierung die gegebenenfalls zusätzlich stattfindende Hybridisierung des Indikators mit der gesuchten DNA-Sequenz bzw. dem DNA-Fragment nicht behindern.
L _
9098U/G747
Für den Fachmann liegt es auf der Hand, daß mit dieser Methode die Möglichkeit gegeben ist, rasch festzustellen, ob in einer biologischen Probe das DNA-Gen bzw. DNA-Fragment, das dem verwendeten Indikator entspricht, vorhanden ist oder nicht, und dies sogar bei Anwesenheit einer großen Anzahl anderer Nukleinsäuren. Dies ist insbesondere darauf zurückzuführen, daß durch den Nachweis auf grund der enzymatischen Aktivität, wobei das Enzym durch das Substrat an das Hybrid gebunden ist, umfassende Anwendungsmoglich-1· keiten gegeben sind.
Nach einer ausreichenden Reinigung des Hybrids ist es sogar möglich, Angaben über die Konzentration der gesuchten DNA in der untersuchten biologischen Probe bzw. über die Anzahl der Kopien des gesuchten Gens in der gereinigten DNA zu erhalten, und zwar durch Bestimmung der Enzymaktivität.
Bei einer zu untersuchenden Nukleinsäureprobe kann man zunächst die Hybridisierung durchführen. Dann kann die Bindung zwischen dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem Enzym stattfinden. Man kann vor Bestimmung der Enzymaktivität den gegebenenfalls im Überschuß vorhandenen nicht hybridisierten Indikator bzw. das überschüssige mit dem Indikator nicht umgesetzte Enzym abtrennen oder abbauen.
Gemäß einer anderen Ausführungsform der Erfindung kann die Abtrennung oder der Abbau des überschüssigen nicht hybridisierten Indikators gegebenenfalls vor der Bindung zwischen dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem Enzym erfolgen.
Der spezifische Indikator kann aus RNA oder einzelsträngiger DNA bestehen. Verwendet man eine ursprünglich doppelsträngige DNA (oder RNA) als Indikator, so muß er vorher durch an sich bekannte Methoden denaturiert worden sein.
Führt man eine chemische Modifizierung des Indikators mit Biotin durch, so kann man die Methode nach Manning et al (a.a.O.)
J 909644/0747
Ι mittels des Cytoehrom C (durchschnittlich ein Molekül Biotin pro etwa 100 Nukleotide ). anwenden.
Vorzugsweise verwendet man zum Markieren des Hybrids durch
(Kupp lungsPEodukt)
das Enzym den Komplex/ tier sich nach der Methode von Avrameas (beschrieben in Immuno ehe mis try, Bd. 6 (Ι9β9), S. kj> - 52) aus Avidin und den Enzym, insbesondere der ß-Galactosidase, ergibt,
Man kann natürlich auch andere chemische Modifizierungsmethoden für den Indikator undgegebenenfalls das Enzym im Hinblick auf deren Bindung, vorzugsweise nach der Hybridisierungsreaktion, verwenden und kann die modifizierenden Mittel für Indikator und Enzym umgekehrt verwenden.
Es kommen noch andere Paare von modifizierenden Mitteln für Indikator und Enzym in Frage, für die nachstehend einige Beispiele angegeben sind. Das erste dieser Mittel wird vorzugsweise jeweils zur chemischen Modifizierung des Indikators und das zweite zur chemischen Modifizierung des Enzyms eingesetzt.
Der Indikator kann beispielsweise nach einer bekannten Methode durch Metallionen/ wie Que cks über ionen , modifiziert werden, und der Nachweis wird mittels eines Enzyms durchgeführt, das Sulfhydrylgruppen (-SH) aufweist oder an einen solche Gruppen enthaltenden Träger gebunden ist.
Man kann beispielsweise folgendermaßen vorgehen, wenn die zu untersuchende Probe nur aus wenigen Millilitern Blut besteht: Die Erythrocyten werden lysiert, und die DNA wird nach üblichen Methoden extrahiert. Sodann wird eine kleine Menge der er~~ haltenen DNA,beispielsweise 1 bis lOO^ig, mit 0,1 - 0,3 N NaOH denaturiert, die Lösung anschließend neutralisiert und auf einen pH-Wert von 7 eingestellt.
Die erhaltene Lösung wird mit dem der gesuchten DNA oder dem DNA-Fragment entsprechenden Indikator versetzt, und zwar etwa 1 ug Indikator pro 100 Ug denaturierte DNA (die Menge der gebrauchten NaOH richtet sich' nach dem Anteil der gesuchten DNA in der zu analysierenden'
L _l
909844/0747
Probe). . Die Lösung wird sodann mit Salzen versetzt, um ein hohes Ionenmilieu zu erreichen, nämlich mit mindestens 0,3 in Gegenwärt von 50 % Formamid und eines Chelatbildner in geringer Konzentration. Das Volumen soll vorzugsweise gering sein.
Die Hybridisierung kann sodann bei der hierfür üblichen Temperatur 1 bis 40 Stunden (normalerweise 16 Stunden) durchgeführt, werden. Man kann auch die Methode nach Manning (a.a.O.) oder andere Hybridisierungsmethoden anwenden, beispielsweise die Methode nach Kohne et al (Biochemistry, Bd. l6 (1977), S. 5329 - 532U), die bei der hierfür üblichen Temperatur in einer phenol halt igen Emulsion durchgeführt wird. .
Anschließend wird an ein Enzym, beispielsweise die ß-Galactosidase, gebundenes Avidin zugesetzt, und zwar unter Bedingungen, welche die Bindung des Biotins am Indikator an die freien Gruppen des Avidins des Komplexes ermöglichen.
Der nicht hybridisierte Indikator wird anschließend vom hybridisierten Indikator nach üblichen Methoden abgetrennt, beispielsweise durch Ausfällen mit Polyäthylenglykol, Gelchromatographie beispielsweise mit Sepharose, oder Ultrazentrifugieren.
Andererseits kann der nicht hybridisierte Indikator vor der Bindung des Avidins, welches das Enzym mit den an den hybridisierten Indikator gebundenen Biotingruppen trägt, an die DNA abgetrennt werden.
Man kann das gegebenenfalls fixierte Enzym und dementsprechend die gegebenenfalls stattfindende effektive. Hybridisierung des Indikators mit der untersuchten DNA nachweisen, indem man ein Enzymsubstrat, insbesondere Qrthonitrophenolgalactosid (OtJPG), mit der Lösung in Berührung bringt:.
Sobald die Versuchsbedingungen festgelegt sind, ist es natürlich möglich, eine meßbare Aktivitätsschwelle zu bestimmen, beispiels weise durch eine kolorimetrieehe oder fluorographische Methode. Oberhalb dieser Schwelle kann auf die Anwesenheit der gesuchten DNA-oder des DNA-Fragments in der behandelten Probe geschlossen
werden.
35
Das nachstehend beschriebene im Labor durchgeführte Versuchsbei-
909844/0747
spiel dient zur Erläuterung des erfindungsgemäßen "Verfahrens. Es liegt im Rahmen des handwerklichen Könnens, die Methoden im Hinblick auf die untersuchte biologische Probe und die gesuchte DNA oder das DNA-Fragment entsprechend abzuwandeln.
Versuchsbeispiel
Der Versuch dient dem Nachweis. einer Maus-DNA durch Hybridisierung dieser DNA mit ribosomaler Maus-RNA als Indikator. 100 /üg Maus-DNA pro 100 /il wäßrige Lösung werden durch Versetzen mit 10/ul 1 M NaOH denaturiert. Nach 10 Minuten wird die Lösung mit 10/Ul 1,5 M Natriumphosphorsäure (NaH2POn) versetzt und auf einen neutralen pH-Wer-t eingestellt. Die denaturierte DNA-Lösung wird sodann mit 1 ^ug. ribosomaler RNA, die mit Biotin mittels Cytochrom C (hergestellt nach der Methode von Manning et al.) markiert ist, versetzt. Das Volumen wird mit Wasser auf ΐβο/ul gebracht. Dann werden 2K)/ul einer Mineralsalzlösung in einer Konzentration von 20 χ SSC (Standard Saline Citrate) und 200/ul redestilliertes oder deionisiertes Formamid zugegeben. Die Lösung 1 χ SSC ist eine wäßrige Lösung
von 0,15 MNaCl und O,015M Natriumeitrat, bei einem pH-Wert von 7,0. Das Gemisch wird l6 Stunden bei üblicher Temperatur inkubiert, dann bei 2I-0C gegen 2 χ SSC dialysiert und anschließend 8 Stunden gegen 500 ml Pufferlösung, die 0,1 M Phosphat, 1 M NaCl und 0,01 M Äthylendiamintetraessigsaures Natrium (EDTA) enthält,
bei einem ph-wert von 7,0 dialysiert. Letztere Dialyse wird zweimal wiederholt und je 8 Stunden durchgeführt. Die erhaltene Lösung wird eine Stunde bei üblicher Temperatur mit pankreatischer Ribonuclease inkubiert. Die Ribonuclease-Konzentration beträgt 10 /ug/ml. Durch diese Behandlung kann nicht
hybridisierte RNA abgebaut werden.
Sodann werden 1 mg/ml Cytochrom C-Lösung und 1 /ul einer Lösung, die in 1 mg/ml Avidin und 2 mg/ml ß-Galactosidase enthält, zugegeben. Dabei erweist sich, daß eines von 7 Molekülen ß-Galactosidase an Avidin gebunden ist. Die Lösung wird gerührt und sodann 4 Stunden bei 4°C stehengelassen. Anschließend wird mit Phosphat-Dialysepuffer auf 10 ml verdünnt, und die erhaltene Lösung wird eine Stunde bei 55 000
909844/0747
U/Min, zentrifugiert (im Beokman Rotor SW 4l). ENA-und RNA-Hybride finden sich im Niederschlag zusammen mit den an diese BNA gebundenen Ävidin-ß-Galactosidase-Komplexen. Der Überstand enthält nicht hybridisierte und durch Ribonuclease abgebaute KNA sowie ungebundene Avidin und ß-Galactosidase.
Der Niederschlag wird abgetrennt und erneut in 10 ml Pufferlösung suspendiert und zentrifugiert. Anschließend wird der Niederschlag in 0,5 ml Puffer aufgenommen (Tube Nr. 1). Sodann wird die Aktivität der ß-Galactosidase beim Umsetzen des Substrats ONPG nach der Methode von Miller (Experiments in bacterial genetics (1972) ,Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, USA) durch Messung der optischen Dichte der Lösung bei 420 nju bestimmt, und zwar nach mindestens 30-minütiger Inkubation bei 37°C. Es werden unter genauer Einhaltung der vorgenannten Bedingungen Kontrollproben herge.stellt,wobei Jedoch beim ersten Kontrollversuch die Zugabe der ribosomalen RNA (Tube Nr. 2) und beim zweiten Kontrollversuch die Zugabe der Maus-DNA (Tube Nr. 3) weggelassen wird. Die Ergebnisse sind in der Tabelle zusammengefaßt.
Tabelle
Inhalt
Tube Nr. DNA RNA optische
9ς Dichte bei 420 rau, nach
30 Min., bei 37 C
1 + "_+'■■ 0,45
2 + - 0,14
3 - + 0,15
+ und - in der DNA- und RNA-Spalte deuten Jeweils an, ob die DNA bzw. RNA in der ursprünglichen Lösung vorhanden war oder nicht.
Aus der Tabelle ist ersichtlich, daß die in der (das Hybrid enthaltenden) Tube Nr. 1 gemessene optische Dichte signifikant höher ist als bei den Kontrollproben.
L _|
9.8-U/07
Das Versuchsbeispiel erläutert also die Bedingungen, unter denen die gegebenenfalls anwesende DNA bzw. das DNA-Fragment nachgewiesen werden kann, sofern ein komplementärer Indikator dieser DNA bzw. des DNA-Fragments verfügbar ist, und zwar durch eine einfache Methode,.die weder kompliziertes Labormaterial noch besonders große fachmännische Erfahrung erfordert.
Das erfindungsgemäße Verfahren kann bei diagnostischen in vitro-Verfahren zum Nachweis verschiedener Viren, wie Herpes, Epstein Barr, Pox-Virus, Cytomegalo, in biologischen Proben (wie Blutproben, Stuhlproben) besonders vorteilhaft angewandt werden. Es kann ferner für die Diagnose bestimmter chromosomaler Anomalien angewandt werden.
Das erfindungsgemäße Verfahren kann \%reiterhin zur Feststellung der bakteriellen Diagnose, insbesondere bei Trägern pathogener Gene, seien sie exprimiert, nicht exprimiert oder latent , angewandt werden.
Für den Fachmann liegt es auf der Hand, daß man beim Suchen einer infektiösen DNA rasch auf den Erkrankungsgrad einer erfindungsgemäß behandelten biologischen Probe im Hinblick auf die gesuchte Nukleinsäure bzw. deren Fragmente schließen kann, wenn keine Induzierung oder zumindest keine Überschreitung der Aktivitätsschwelle auf dem farbigen Substrat festgestellt wird, sei es durch Versuche sei es durch Vergleich mit den virusfreien Kontrollproben.
Umgekehrt kann die festgestellte nicht vorhandene Aktivität hinsichtlich des farbigen Substrats, insbesonder oberhalb der vorgenannten Schwelle, in einem anderen bereits angesprochenen Bereich Anwendung finden: Sie kann die Anwesenheit einer Anomalie gesuchter chromosomaler Abnormität-durch die festgestellte nicht vorhandene gesamte oder partielle Hybridisierung zwischen Indikator und untersuchter DNA anzeigen.
Beispielsweise kann man für medizinische Labors L J
909844/0747
· Reagenzsätze ("Kit") mit allen zur Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens notwendigen Reagentien zur Verfügung stellen. ,-..-. , Solche Reagenzsätze können insbesondere Muster für Indikatoren enthalten, die beispielsweise den DNA von gut erforschten pathogenen Viren oder Bakterien entsprechen, und sogar für Indikatoren, die den besonderen Genen entsprechen, die normalerweise in biologischen zu untersuchenden Proben wie Blut enthalten sind.
Wie bereits erwähnt, sollte der modifizierte Indikator vorzugsweise ein Indikator sein, an den Biotin gebunden ist und wobei das modifizierte Enzym, beispielsweise die ß-Galactosidase, selbst an das Avidin gebunden ist.
Die Erfindung betrifft weiterhin neue
Komplexe aus einem Enzym (dessen Aktivität im Hinblick auf insbesondere ein farbiges Substrat nachgewiesen werden kann) und einem Indikator (RNA oder einzelsträngige DNA), sei es die Bindung erfolgt direkt, sei es mit Hilfe eines komplexbildenden Mittels zur industriellen Verwendung. ■ Sie betrifft auch den Kanplex aus Enzym und mindestens einem chemischen Molekül, wobei der ganze" Komplex an einen gegebenenfalls modifizierten Indikator (RNA oder DNA) gebunden werden kann, der selbst mit einer DNA bzw. einem DNA-Fragment hybridisierbar ist. Solche neue industrielle Produkte sind beispielsweise die Komplexe aus Indikator (RNA oder DNA) und einem Enzym, wie die ß-Galactosidase, oder die Komplexe aus Avidin bzw. Biotin und einem solchen Enzym.
Die Erfindung kann noch in anderen Bereichen Anwendung finden, insbesondere bei der Markierung bestimmter DNA-Fragmente in bekannten genetischen Versuchen zur Bestimmung des Genotyps der in Frage stehenden DNA. Sie kann insbesondere Anwendung finden bei der Bestimmung, ob ein besonderes DNA-Fragment in genetischen Ausleseversuchen inkorporiert ist oder nicht. Bei diesen Ausleseversuchen geht es beispielsweise um Transformationen von Zellen mittels fremder DNA, die das betreffende DNA-Fragment enthält, oder aber um Transduktionsversuche, bei denen
90984470747
DNA-Fragmente, die normalerweise in der zellulären DNA enthalten sind, in die virale DNA übergehen, mit der die Zellen infiziert worden sind. Eine solche Anwendung ist natürlich nur möglich, wenn man über einen Indikator verfügt, der das komplementäre RNA- bzw. DNA-Fragment des Fragments der gesuchten Nukleinsäure ist.
Die vorliegende Erfindung erschöpft sich keineswegs in den erläuterten Anwendungs- und Durchführungsmöglichkeiten. Sie umfaßt vielmehr alle Varianten, insbesondere hinsichtlich Modifizierungen des Indikators, die eine enzymatische Dosierung des Hybrids ermöglichen, sowie die Modifizierungen hinsichtlich der Bildung und/oder Reinigung des Hybrids, der Markierung oder chemischen Modifizierung der untersuchten DNA selbst, und zwar unter den vorgenannten Bedingungen, wobei beim RNA-Indikator keine besondere Markierung vorgenommen wird. Eine Umkehrung der Reagentien kann beispielsweise im Falle einer DNA in Betracht gezogen werden, die zahlreiche repetitive Gene enthält, welche aus der gesamten DNA in Form des Hybrids mit dem Indikator isoliert werden sollen. Vorher wird die DNA durch übliche Methoden fragmentiert.
Gemäß einer anderen Ausführungsform kann man das Verfahren zum Nachweis des Hybrids aus der gesuchten DNA und dem Indikator,
mittels eines an ein Enzym, beispielsweise die ß-Galactosidase, gebundenen Antihybrid-Antikörpers anwenden.
909844/0747

Claims (1)

  1. VOSSIUS . VOSSIUS-i, WlLTl-. .TAUCHNER . HEUNEMANN
    PATENTANWÄLTE
    SIEBERTSTRASSE 4- · 8OOO MÜNCHEN 86 - PHONE: (O89) 474075 CABLE: BENZOLPATENT MÖNCHEN · TELEX 5-29 453 VOPAT D
    u.Z.: P 108 (DV/nk/ke) . 12. ^ *g
    Case: PL-0053 79 05
    Institut Pasteur
    Paris, Prankreich
    Verfahren und Reagenzsatz zum Nachweis und zur Charakterisierung
    von Nukleinsäuren und ihren Sequenzen 15
    Priorität: 13. April 1978, Prankreich, Nr. 78 10975
    P a t e η t a η s ρ r ü c h e
    IJ Verfahren zum Nachweis und zur Charakterisierung· einer ""bestimmten Nukleinsäure-Sequenz oder eines bestimmten Nukleinsäure-Fragments, insbesondere eines Gens, auch der gesamten Nukleinsäure in einer Probe eines Nukleinsäurekomplexes durch Zusammenbringen der Probe, gegebenenfalls nach vorherigen Denaturieren der untersuchten Nukleinsäure, mit einem eine komplementäre Nukleinsäure enthaltenden Indikator, der hybridisierbar mit der gesuchten Nukleinsäure oder deren Sequenz ist, dadurch gekennzeichnet, daß man als Indikator einen durch Bindung an ein Enzym vor oder nach der Hybridisierungsreaktion chemisch modfizierten Indikator verwendet wobei die gegebenenfalls anwesende Nukleinsäure oder deren Sequenz durch die Aktivität ..des so umgewandelten Hybridisierungsprodukts aus Indikator und Nukleinsäure oder deren Sequenz als Substrat für ein Enzym nachgewiesen werden kann.
    2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß
    909844/0747
    Γ 2 Π
    man das Enzym im Hinblick auf seine Fähigkeit, auf ein farbiges Substrat einzuwirken, auswählt, und daß man die Umwandlungsrate des Substrats, die dem Anteil der gesuchten Nukleinsäure oder deren Sequenz in der Ausgangsprobe korrelierbar ist, durch optische oder analoge Analyse bestimmt.
    j5. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man den Indikator durch eine chemische Gruppe modifiziert, die mit dem Enzym oder einem Molekül, das stabil mit dem Enzym verbunden ist, einen stabilen Komplex bilden kann.
    4. Verfahren nach Anspruch j5> dadurch gekennzeichnet, daß man sowohl als chemische Gruppe als auch als Molekül Biotin oder Avidin verwendet.
    5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß man als Enzym die ß-Galactosidase verwendet.
    6. Verfahren nach Anspruch 2 bis 5* dadurch gekennzeichnet, daß man zunächst die Hybridisierung, dann die Bindung zwischen
    dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem Enzym durchführt und anschließend den gegebenenfalls im Überschuß vorhandenen nicht hybridisierten Indikator abtrennt bzw. abbaut.
    25
    7. Verfahren nach Anspruch 2 bis 5> dadurch gekennzeichnet, daß man zunächst die Hybridisierung und anschließend nach Abtrennung bzw. Abbau des gegebenenfalls im Überschuß vorhandenen nicht hybridisierten Indikators die Bindung zwischen dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem Enzym durchführt.
    8. Reagenzsatz zur Durchführung des Verfahrens gemäß Ansprüche 1 bis I1 dadurch gekennzeichnet, daß er folgende Bestandteile aufweist:
    a) mindestens einen bestimmten Indikator aus einer RNA oder einer einzelsträngigen DNA, die charakteristisch ist für eine gesuchte Nukleinsäure oder deren Sequenz, wobei dieser Indikator im Hinblick auf seine Bindung mit einem
    SG98U/G747
    Γ _ 5 -
    Enzym chemisch modifiziert ist,
    b) das gegebenenfalls modifizierte Enzym, das für die Bindung mit dem Indikator verwendet wird, ·
    c) ein insbesondere farbiges Substrat, das für das Enzym spezifisch ist,
    d) Reagentien, die für die Zellyse, insbesondere bei der Untersuchung von Blut, und für die Extraktion von Nukleinsäuren erforderlich sind.
    9. Reagenzsatz nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß der Indikator aus einer RNA an Biotin gebunden ist und daß das Kupplungsproäukt aus Ävidin und einem Enzym die ß-Galactosidase als Enzym enthält.
    10. Komplex aus einem Enzym, das insbesondere durch
    seine Fähigkeit mit einem farbigen Substrat zu reagieren nachweisbar ist, und einem RNA- oder DNA-Indikator, wobei die Bindung direkt oder mittels eines komplexbildenden Mittels erfolgt.
    11. Komplex aus einem Enzym, das insbesondere durch seine Fähigkeit mit einem farbigen Substrat zu reagieren nachweisbar ist, und mindestens einem chemischen Molekül, wobei der ganze Komplex an einen gegebenenfalls modifizierten RNA- oder DNA-Indikator gebunden werden kann.
    12. Komplex nach Anspruch 11 enthaltend ß-Galactosidase als Enzym und Ävidin-oder Biotin als chemische Substanz.
    909844/0747
DE2915082A 1978-04-13 1979-04-12 Verfahren und Verwendung eines Reagenzsatzes zum Nachweis und zur Charakterisierung von Nukleinsäuren und ihren Sequenzen Expired - Lifetime DE2915082C3 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR7810975A FR2422956A1 (fr) 1978-04-13 1978-04-13 Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DE2915082A1 true DE2915082A1 (de) 1979-10-31
DE2915082C2 DE2915082C2 (de) 1989-07-13
DE2915082C3 DE2915082C3 (de) 1995-04-20

Family

ID=9207099

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE2915082A Expired - Lifetime DE2915082C3 (de) 1978-04-13 1979-04-12 Verfahren und Verwendung eines Reagenzsatzes zum Nachweis und zur Charakterisierung von Nukleinsäuren und ihren Sequenzen

Country Status (9)

Country Link
US (3) US4581333A (de)
JP (1) JPS54143297A (de)
BE (1) BE875598A (de)
CH (1) CH647870A5 (de)
DE (1) DE2915082C3 (de)
FR (1) FR2422956A1 (de)
GB (1) GB2019408B (de)
IT (1) IT1119725B (de)
NL (1) NL191541C (de)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0184701A2 (de) * 1984-12-03 1986-06-18 Hoechst Celanese Corporation Verfahren zur Bestimmung eines Liganden
DE3742706A1 (de) * 1987-12-16 1989-06-29 Erich Prof Dr Med Liebhardt Verfahren zum identifizieren unbekannten biologischen materials
WO1990010718A1 (en) * 1989-03-10 1990-09-20 Millipore Corporation Sequencing nucleic acids using chemiluminescent detection
US7064197B1 (en) 1983-01-27 2006-06-20 Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. System, array and non-porous solid support comprising fixed or immobilized nucleic acids
US7220854B1 (en) 1982-06-23 2007-05-22 Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. Sugar moiety labeled nucleotide, and an oligo- or polynucleotide, and other compositions comprising such sugar moiety labeled nucleotides

Families Citing this family (275)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5605800A (en) * 1978-04-13 1997-02-25 Institut Pasteur Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method
FR2422956A1 (fr) * 1978-04-13 1979-11-09 Pasteur Institut Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede
US6270955B1 (en) 1978-12-22 2001-08-07 Biogen, Inc. Pharmaceutical compositions and methods for producing antibodies to hepatitis b virus and kits and methods for detecting antibodies to hepatitis b virus
US6835557B1 (en) 1980-01-08 2004-12-28 Biogen, Inc. DNA sequences, recombinant DNA molecules and processes for producing human interferon-like polypeptides
US4530901A (en) * 1980-01-08 1985-07-23 Biogen N.V. Recombinant DNA molecules and their use in producing human interferon-like polypeptides
AU564690B2 (en) 1980-04-03 1987-08-20 Biogen Idec Ma Inc. Process for producing human fibroblast interferon-like polypeptides using recombinant dna
ATE48140T1 (de) * 1981-04-17 1989-12-15 Univ Yale Modifizierte nukleotide und verfahren zu ihrer herstellung und anwendung.
US4711955A (en) * 1981-04-17 1987-12-08 Yale University Modified nucleotides and methods of preparing and using same
JPS5840099A (ja) * 1981-07-17 1983-03-08 アモコ・コ−ポレ−ション 光−放射ポリヌクレオチドの交雑診断方法
CA1180647A (en) * 1981-07-17 1985-01-08 Cavit Akin Light-emitting polynucleotide hybridization diagnostic method
US4717653A (en) * 1981-09-25 1988-01-05 Webster John A Jr Method for identifying and characterizing organisms
EP0155360B1 (de) * 1981-09-25 1988-12-14 John A. Webster, Jr. Verfahren zur Identifizierung und Charakterisierung von Organismen
EP0155359B1 (de) * 1981-09-25 1988-01-07 John A. Webster, Jr. Verfahren zur Identifizierung und Charakterisierung von Organismen
US5614361A (en) * 1981-09-25 1997-03-25 Webster, Jr.; John A. Method for identifying and characterizing organisms
FI63596C (fi) * 1981-10-16 1983-07-11 Orion Yhtymae Oy Mikrobdiagnostiskt foerfarande som grundar sig pao skiktshybridisering av nukleinsyror och vid foerfarandet anvaenda kombinationer av reagenser
JPS58502165A (ja) * 1981-12-23 1983-12-15 アンステイテユ・パストウ−ル 特異抗体により認識し得る修飾核酸プローブを使用して核酸配列の存在を検出する方法
FR2518755B1 (fr) * 1981-12-23 1986-04-11 Pasteur Institut Sonde contenant un acide nucleique modifie et reconnaissable par des anticorps specifiques et utilisation de cette sonde pour detecter et caracteriser une sequence d'adn homologue
US5260433A (en) * 1982-06-23 1993-11-09 Enzo Diagnostics, Inc. Saccharide specific binding system labeled nucleotides
US5241060A (en) * 1982-06-23 1993-08-31 Enzo Diagnostics, Inc. Base moiety-labeled detectable nucleatide
CA1223831A (en) 1982-06-23 1987-07-07 Dean Engelhardt Modified nucleotides, methods of preparing and utilizing and compositions containing the same
US4556643A (en) * 1982-07-26 1985-12-03 Agracetus Assay method and probe for polynucleotide sequences
US6818393B1 (en) 1982-07-30 2004-11-16 Biomirieux Sa DNA sequences coding for the DR beta-chain locus of the human lymphocyte antigen complex and polypeptides, diagnostic typing processes and products related thereto
CA1295562C (en) * 1982-07-30 1992-02-11 Bernard Francois Mach DNA SEQUENCES CODING FOR THE DR.beta.-CHAIN LOCUS OF THE HUMAN LYMPHOCYTE ANTIGEN COMPLEX AND POLYPEPTIDES, DIAGNOSTIC TYPING PROCESSES AND PRODUCTS RELATED THERETO
US4689295A (en) * 1983-01-20 1987-08-25 Integrated Genetics, Inc. Test for Salmonella
GB8306426D0 (en) * 1983-03-09 1983-04-13 Malcolm A D B Detecting polynucleotide sequence
DE3310337A1 (de) * 1983-03-22 1984-09-27 Europäisches Laboratorium für Molekularbiologie (EMBL), 6900 Heidelberg Verfahren zur durchfuehrung von hybridisierungsreaktionen
GB8311905D0 (en) * 1983-04-29 1983-06-02 Cox R A Isolation and detection of nucleotide sequence
CA1220818A (en) * 1983-05-05 1987-04-21 Hugh A.O. Hill Assay techniques utilising specific binding agents
CA1228811A (en) 1983-05-05 1987-11-03 Robert G. Pergolizzi Assay method utilizing polynucleotide sequences
JPH0743376B2 (ja) * 1983-05-31 1995-05-15 オルジェニックス リミテッド 核酸配列の検定方法及び分子遺伝子プローブ
US5221609A (en) * 1983-05-31 1993-06-22 Orgenics Ltd. Molecular genetic probe, and method of forming same, assay technique and kit using said molecular genetic probe
US4987065A (en) * 1983-07-05 1991-01-22 Enzo Biochem, Inc. In vivo labelling of polynucleotide sequences
CA1222705A (en) * 1983-07-14 1987-06-09 Molecular Diagnostics, Inc. Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays
US4737454A (en) * 1983-07-14 1988-04-12 Molecular Diagnostics, Inc. Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays
US4959309A (en) * 1983-07-14 1990-09-25 Molecular Diagnostics, Inc. Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays
US5200313A (en) * 1983-08-05 1993-04-06 Miles Inc. Nucleic acid hybridization assay employing detectable anti-hybrid antibodies
US4626501A (en) * 1983-09-02 1986-12-02 Integrated Genetics, Inc. Labeled DNA
CA1256005A (en) * 1983-09-26 1989-06-20 W. Peter Hansen Sandwich hybridization method for nucleic acid detection
FR2552879B1 (fr) * 1983-10-03 1987-08-14 Pasteur Institut Procede et reactifs pour la detection d'une anomalie genetique dans une matiere biologique, notamment dans une preparation de leucocytes
US4743535A (en) * 1984-11-07 1988-05-10 Miles Inc. Hybridization assay employing labeled probe and anti-hybrid
EP0149339B1 (de) * 1983-12-16 1989-08-23 MediSense, Inc. Test für Nukleinsäuren
US4707440A (en) * 1984-01-30 1987-11-17 Enzo Biochem, Inc. Nucleic acid hybridization assay and detectable molecules useful in such assay
US4843122A (en) * 1984-01-30 1989-06-27 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method of preparation and use
US4849208A (en) * 1984-01-30 1989-07-18 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method of preparation and use
US4943523A (en) * 1984-01-30 1990-07-24 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method of preparation and use
US4849505A (en) * 1984-01-30 1989-07-18 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method of preparation and use
US5002885A (en) * 1984-01-30 1991-03-26 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method preparation and use
AU3844485A (en) * 1984-02-09 1985-08-15 Enzo Biochem Inc. Heterologous detection of cabeled dna
US4748111A (en) * 1984-03-12 1988-05-31 Molecular Diagnostics, Inc. Nucleic acid-protein conjugate used in immunoassay
US4617261A (en) * 1984-03-21 1986-10-14 Cetus Corporation Process for labeling nucleic acids and hybridization probes
US4582789A (en) * 1984-03-21 1986-04-15 Cetus Corporation Process for labeling nucleic acids using psoralen derivatives
US4840892A (en) * 1984-05-15 1989-06-20 Smithkline Beckman Corporation Polynucleotide hybridization probes
US4670380A (en) * 1984-05-23 1987-06-02 Molecular Diagnostics, Inc. Assays utilizing labeled nucleic acid probes
DE3431536A1 (de) * 1984-08-28 1986-03-13 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Derivatisierte nucleinsaeure-sequenz, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zum nachweis von nucleinsaeuren
US4563417A (en) * 1984-08-31 1986-01-07 Miles Laboratories, Inc. Nucleic acid hybridization assay employing antibodies to intercalation complexes
US4820630A (en) * 1984-11-23 1989-04-11 Digene Diagnostics, Incorporated Assay for nucleic acid sequences, particularly genetic lesions, using interactive labels
US4692509A (en) * 1984-11-27 1987-09-08 Molecular Diagnostics, Inc. Radioactive labeling of proteins with nucleosides or nucleotides
US4670379A (en) * 1984-12-19 1987-06-02 E. I. Du Pont De Nemours And Company Polynucleotide hydridization assays employing catalyzed luminescence
FR2578847A1 (fr) * 1985-03-13 1986-09-19 Centre Nat Rech Scient Sonde adn destinee au diagnostic antenatal de certaines anomalies chromosomiques
US6197563B1 (en) 1985-03-28 2001-03-06 Roche Molecular Systems, Inc. Kits for amplifying and detecting nucleic acid sequences
US6040166A (en) 1985-03-28 2000-03-21 Roche Molecular Systems, Inc. Kits for amplifying and detecting nucleic acid sequences, including a probe
GB8509880D0 (en) * 1985-04-17 1985-05-22 Ici Plc Testing device
IL79112A (en) * 1985-06-13 1992-01-15 Abbott Lab Method for the isolation of a nucleic acid sequence and kit for performing a hybridization assay
US5273882A (en) * 1985-06-13 1993-12-28 Amgen Method and kit for performing nucleic acid hybridization assays
US4806546A (en) * 1985-09-30 1989-02-21 Miles Inc. Immobilization of nucleic acids on derivatized nylon supports
US4806631A (en) * 1985-09-30 1989-02-21 Miles Inc. Immobilization of nucleic acids on solvolyzed nylon supports
US4789630A (en) * 1985-10-04 1988-12-06 Cetus Corporation Ionic compounds containing the cationic meriquinone of a benzidine
NZ218050A (en) * 1985-11-13 1989-05-29 Wistar Inst Test for the presence of htlv-1v
JPS63502477A (ja) * 1985-12-03 1988-09-22 エル・ギユ−リイ・エム・ラフアツト 病気診断のための方法、装置および製品
US4882269A (en) * 1985-12-13 1989-11-21 Princeton University Amplified hybridization assay
US4822731A (en) * 1986-01-09 1989-04-18 Cetus Corporation Process for labeling single-stranded nucleic acids and hybridizaiton probes
US7115709B1 (en) 1986-01-16 2006-10-03 The Regents Of The University Of California Methods of staining target chromosomal DNA employing high complexity nucleic acid probes
US6475720B1 (en) 1986-01-16 2002-11-05 The Regents Of The University Of California Chromosome-specific staining to detect genetic rearrangements associated with chromosome 3 and/or chromosome 17
US6280929B1 (en) 1986-01-16 2001-08-28 The Regents Of The University Of California Method of detecting genetic translocations identified with chromosomal abnormalities
US5756696A (en) 1986-01-16 1998-05-26 Regents Of The University Of California Compositions for chromosome-specific staining
US6872817B1 (en) 1986-01-16 2005-03-29 The Regents Of The Univ. Of California Method of staining target interphase chromosomal DNA
US5447841A (en) 1986-01-16 1995-09-05 The Regents Of The Univ. Of California Methods for chromosome-specific staining
US5721098A (en) * 1986-01-16 1998-02-24 The Regents Of The University Of California Comparative genomic hybridization
US4935357A (en) * 1986-02-05 1990-06-19 New England Biolabs, Inc. Universal restriction endonuclease
US5418133A (en) * 1986-08-12 1995-05-23 The Australian National University Sex determination in cattle, sheep and goats using y-chromosome polynucleotides
US5714380A (en) 1986-10-23 1998-02-03 Amoco Corporation Closed vessel for isolating target molecules and for performing amplification
US5660983A (en) * 1986-12-04 1997-08-26 Mycogen Plant Science, Inc. Maize cytoplasmic male sterility type T (cms-T) mitochondria DNA
AU619170B2 (en) * 1987-01-09 1992-01-23 Abbott Laboratories Diagnostic assays using nucleic acid probes
AU622104B2 (en) * 1987-03-11 1992-04-02 Sangtec Molecular Diagnostics Ab Method of assaying of nucleic acids, a reagent combination and kit therefore
EP0304934A3 (de) * 1987-08-26 1989-07-26 Hunger, Hans-Dieter Markierte molekulare Sonden, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
US5384241A (en) * 1987-09-11 1995-01-24 Enzo Diagnostics, Inc. Specific binding assay compound with inhibitive self-quenching characteristics
US6004745A (en) * 1987-09-21 1999-12-21 Gen-Probe Incorporated Hybridization protection assay
US5639604A (en) * 1987-09-21 1997-06-17 Gen-Probe Incorporated Homogeneous protection assay
JP3787352B2 (ja) * 1987-09-21 2006-06-21 ジェン−プローブ・インコーポレイテッド ハイブリダイゼーション保護検定
DE3732145A1 (de) * 1987-09-24 1989-04-06 Merck Patent Gmbh Verfahren und reagenz zur durchfuehrung von hybridisierungsreaktionen
US5354657A (en) * 1988-01-12 1994-10-11 Boehringer Mannheim Gmbh Process for the highly specific detection of nucleic acids in solid
FR2680374B1 (fr) * 1988-03-25 1993-11-12 Bioprobe Systems Sa Procede de coloration d'acides nucleiques detectes par marquage non radioactif et ensemble de reactifs pour la mise en óoeuvre de ce procede.
US6326136B1 (en) * 1988-04-01 2001-12-04 Digene Corporation Macromolecular conjugate made using unsaturated aldehydes
US5109124A (en) * 1988-06-01 1992-04-28 Biogen, Inc. Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine
US5858652A (en) * 1988-08-30 1999-01-12 Abbott Laboratories Detection and amplification of target nucleic acid sequences
US6203977B1 (en) * 1988-11-15 2001-03-20 Yale University Delineation of individual human chromosomes in metaphase and interphase cells by in situ suppression hybridization
US5489507A (en) * 1988-11-30 1996-02-06 Perkin-Elmer Corporation DNA detection by color complementation
US5237016A (en) * 1989-01-05 1993-08-17 Siska Diagnostics, Inc. End-attachment of oligonucleotides to polyacrylamide solid supports for capture and detection of nucleic acids
EP0385410B1 (de) * 1989-02-28 1996-10-02 Canon Kabushiki Kaisha Partiell doppelsträngiges Oligonukleotid und Verfahren zu seiner Bildung
DE4001154A1 (de) * 1990-01-17 1991-07-18 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur herstellung von modifizierten nukleinsaeuren
CA2031659A1 (en) * 1990-01-26 1991-07-27 John B. Findlay Water-insoluble reagent, nucleic acid probe, test kit and diagnostic and purification methods
NL9001639A (nl) * 1990-07-19 1992-02-17 Amc Amsterdam Pt-houdende verbinding, werkwijze voor de bereiding ervan, alsmede toepassing van dergelijke verbindingen.
US5714327A (en) * 1990-07-19 1998-02-03 Kreatech Diagnostics Platinum-containing compounds, methods for their preparation and applications thereof
JPH0499500A (ja) * 1990-08-17 1992-03-31 Kikkoman Corp アビジンまたはアビジン標識体の定量法およびビオチンまたはビオチン標識体の定量法
EP0557456A4 (en) * 1990-11-14 1995-11-15 Siska Diagnostics Inc Non-isotopic detection of nucleic acids using a polystyrene support-based sandwich hybridization assay and compositions useful therefor
JPH06504912A (ja) * 1991-01-14 1994-06-09 ニューヨーク・ユニバーシティ サイトカイン誘導蛋白質ｔｓｇ−６、該ｔｓｇ−６蛋白質をコードするｄｎａおよび該ｔｓｇ−６蛋白質の利用
AU1235392A (en) * 1991-01-14 1992-08-17 New York University Cytokine-induced protein, tsg-14, dna coding therefor and uses thereof
US5843667A (en) * 1991-03-22 1998-12-01 Amoco Corporation Nucleic acid probes for the detection for genital mycoplasmas
US5552279A (en) * 1991-03-22 1996-09-03 Amoco Corporation Nucleic acid probes for the detection of mycoplasma pneumoniae and mycoplasma genitalium
WO1993005184A1 (en) * 1991-09-10 1993-03-18 Love Jack D Dna/rna target and signal amplification
CA2126451A1 (en) * 1991-12-24 1993-07-08 Brett P. Monia Compositions and methods for modulating .beta.-amyloid
EP1134293A3 (de) * 1992-03-04 2004-01-07 The Regents of The University of California Vergleichende Genomhybridisierung
US5976790A (en) * 1992-03-04 1999-11-02 The Regents Of The University Of California Comparative Genomic Hybridization (CGH)
US7534567B2 (en) 1992-03-04 2009-05-19 The Regents Of The University Of California Detection of nucleic acid sequence differences by comparative genomic hybridization
WO1993020234A1 (en) * 1992-03-31 1993-10-14 E.I. Du Pont De Nemours And Company A rapid, high capacity nucleic acid based assay
WO1994014067A1 (en) * 1992-12-14 1994-06-23 T Cell Sciences, Inc. Diagnosis and therapy of sarcoidosis
ATE211770T1 (de) * 1993-08-10 2002-01-15 Fuso Pharmaceutical Ind Verfahren zur bestimmung von nukleinsäuren
US5830645A (en) 1994-12-09 1998-11-03 The Regents Of The University Of California Comparative fluorescence hybridization to nucleic acid arrays
US5922544A (en) * 1994-12-29 1999-07-13 Eiken Kagaku Kabushiki Kaish Method of cell detection
US5753787A (en) * 1995-04-10 1998-05-19 Yale University Nucleic acids encoding ancylostoma secreted protein
US5731148A (en) * 1995-06-07 1998-03-24 Gen-Probe Incorporated Adduct protection assay
US6277592B1 (en) 1996-07-31 2001-08-21 Purina Mills, Inc. Porcine leptin protein, nucleic acid sequences coding therefor and uses thereof
US6297027B1 (en) 1996-07-31 2001-10-02 Purina Mills, Inc. Bovine leptin protein, nucleic acid sequences coding therefor and uses thereof
US20020137904A1 (en) * 1998-03-27 2002-09-26 Patricia A. Billing-Medel Reagents and methods useful for detecting diseases of the gastrointestinal tract
ES2324503T3 (es) 1997-04-10 2009-08-07 Stichting Katholieke Universiteit University Medical Centre Nijmegen Pca3, genes pca3 y metodos de uso.
US20050208567A1 (en) * 1997-04-25 2005-09-22 Billing-Medel Patricia A Reagents and methods useful for detecting diseases of the prostate
US6534273B2 (en) 1997-05-02 2003-03-18 Gen-Probe Incorporated Two-step hybridization and capture of a polynucleotide
IL124275A (en) * 1997-05-02 2002-03-10 Bio Merieux Vitek Inc A method to produce sequences of nucleic acids
EP0975807B1 (de) 1997-05-02 2006-09-27 Gen-Probe Incorporated Zwei-schritt hybridisierung und einfang von einem polynukleotid
US6558901B1 (en) 1997-05-02 2003-05-06 Biomerieux Vitek Nucleic acid assays
FR2767337B1 (fr) 1997-08-14 2002-07-05 Pasteur Institut Sequences nucleiques de polypeptides exportes de mycobacteri es, vecteurs les comprenant et applications au diagnostic et a la prevention de la tuberculose
GB9722131D0 (en) 1997-10-20 1997-12-17 Medical Res Council Method
KR100769104B1 (ko) 1997-11-28 2007-10-23 세로노 제네틱스 인스티튜트 에스.에이. 클라미디아 트라코마티스 게놈 서열과 폴리펩티드, 이의단편 및 이의 용도, 특히, 감염의 진단, 예방 및 치료 용도
US20040062775A1 (en) 1997-12-05 2004-04-01 Agence Francaise De Securite Sanitaire Des Aliments Circovirus sequences associated with piglet weight loss disease (PWD)
FR2772047B1 (fr) 1997-12-05 2004-04-09 Ct Nat D Etudes Veterinaires E Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection
JP2001526244A (ja) 1997-12-19 2001-12-18 ベス イスラエル ディーコネス メディカル センター 腫瘍細胞の生長を阻害する方法および組成物
US6183957B1 (en) 1998-04-16 2001-02-06 Institut Pasteur Method for isolating a polynucleotide of interest from the genome of a mycobacterium using a BAC-based DNA library application to the detection of mycobacteria
US6322976B1 (en) 1998-05-28 2001-11-27 Medical Research Council Compositions and methods of disease diagnosis and therapy
US7537886B1 (en) 1999-06-22 2009-05-26 Life Technologies Corporation Primers and methods for the detection and discrimination of nucleic acids
US6830902B1 (en) * 1999-07-02 2004-12-14 Invitrogen Corporation Compositions and methods for enhanced sensitivity and specificity of nucleic acid synthesis
EP1422298B1 (de) 1999-07-09 2010-01-27 Gen-Probe Incorporated HIV-1 Detektion mittels Nukleinsäureamplifizierung
AU7636400A (en) * 1999-09-29 2001-04-30 Diagnocure Inc. Pca3 messenger rna species in benign and malignant prostate tissues
GB9928787D0 (en) 1999-12-03 2000-02-02 Medical Res Council Direct screening method
FR2803913B1 (fr) 2000-01-13 2002-08-16 Pasteur Sanofi Diagnostics Procede d'immobilisation de reactif(s) affin(s) sur phase solide hydrophobe
US6543535B2 (en) 2000-03-15 2003-04-08 Exxonmobil Upstream Research Company Process for stimulating microbial activity in a hydrocarbon-bearing, subterranean formation
EP1925672A1 (de) 2001-06-22 2008-05-28 Syngeta Participations AG Auf abiotischen Stress ansprechende Polynukleotide und Polypeptide
US20030165859A1 (en) * 2001-10-23 2003-09-04 Invitrogen Corporation Primers and methods for the detection and discrimination of nucleic acids
US6942972B2 (en) 2001-10-24 2005-09-13 Beckman Coulter, Inc. Efficient synthesis of protein-oligonucleotide conjugates
US6956484B2 (en) * 2001-12-21 2005-10-18 Reconnaissance International Substance testing devices with photo identification
US20030175828A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-18 Lazar James G. Signal amplification by Hybrid Capture
US7199107B2 (en) * 2002-05-23 2007-04-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of kinesin-like 1 expression
ATE519861T1 (de) 2002-06-14 2011-08-15 Gen Probe Inc Zusammensetzungen zum nachweis von hepatitis-b- virus
CA2501946C (en) 2002-10-16 2014-12-23 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting west nile virus
CA2513780C (en) * 2003-02-07 2014-12-30 Diagnocure Inc. Method to detect prostate cancer from a urine sample
AU2004303886B2 (en) 2003-12-19 2009-09-03 Gen-Probe Incorporated Compositions, methods and kits for detecting the nucleic acids of HIV-1 and HIV-2
WO2005079474A2 (en) 2004-02-17 2005-09-01 The Regents Of The University Of California Detection of nucleic acid sequence differences by comparative genomic hybridization
CA2562517A1 (en) 2004-04-16 2005-10-27 Spartan Bioscience Inc. System for rapid nucleic acid amplification and detection
CA2565980A1 (en) 2004-05-12 2005-12-01 Luca Technologies, Llc Generation of hydrogen from hydrocarbon-bearing materials
CA2838428C (en) * 2004-07-13 2015-09-29 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detection of hepatitis a virus nucleic acid
EP1794328B1 (de) 2004-09-30 2015-05-27 Gen-Probe Incorporated Verfahren zum nachweis und zur quantifizierung von hiv-1
CA2582661C (en) * 2004-11-09 2015-08-11 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting group a streptococci
US20060105348A1 (en) * 2004-11-15 2006-05-18 Lee Jun E Compositions and methods for the detection and discrimination of nucleic acids
US20060275792A1 (en) * 2004-11-15 2006-12-07 Lee Jun E Enhancement of nucleic acid amplification using double-stranded DNA binding proteins
US7472576B1 (en) 2004-11-17 2009-01-06 State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Portland State University Nanometrology device standards for scanning probe microscopes and processes for their fabrication and use
CA2491067A1 (en) 2004-12-24 2006-06-24 Stichting Katholieke Universiteit Mrna rations in urinary sediments and/or urine as a prognostic marker for prostate cancer
ATE490342T1 (de) * 2005-02-07 2010-12-15 Gen Probe Inc Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von streptokokken der gruppe b
US20060223159A1 (en) * 2005-04-05 2006-10-05 Luca Technologies, Llc Generation of materials with enhanced hydrogen content from microbial consortia including thermotoga
US20060223153A1 (en) * 2005-04-05 2006-10-05 Luca Technologies, Llc Generation of materials with enhanced hydrogen content from anaerobic microbial consortia
US20060223160A1 (en) * 2005-04-05 2006-10-05 Luca Technologies, Llc Systems and methods for the isolation and identification of microorganisms from hydrocarbon deposits
US7426960B2 (en) 2005-05-03 2008-09-23 Luca Technologies, Inc. Biogenic fuel gas generation in geologic hydrocarbon deposits
JP5187847B2 (ja) 2005-05-06 2013-04-24 ジェン−プローブ・インコーポレーテッド 核酸標的の捕獲方法
EP2471805A3 (de) 2005-05-06 2013-01-16 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und Verfahren zur spezifischen Detektion von Nukleinsäuren der Viren Influenza A oder B
JP2009511086A (ja) 2005-10-17 2009-03-19 ジェン−プローブ・インコーポレーテッド レジオネラ・ニューモフィラ核酸を検出するための組成物及び方法
US8969033B2 (en) * 2005-11-02 2015-03-03 Battelle Energy Alliance, Llc Alteration and modulation of protein activity by varying post-translational modification
US7416879B2 (en) * 2006-01-11 2008-08-26 Luca Technologies, Inc. Thermacetogenium phaeum consortium for the production of materials with enhanced hydrogen content
US7696132B2 (en) * 2006-04-05 2010-04-13 Luca Technologies, Inc. Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material
US7977282B2 (en) * 2006-04-05 2011-07-12 Luca Technologies, Inc. Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material
US20100248322A1 (en) * 2006-04-05 2010-09-30 Luca Technologies, Inc. Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material
CA2651946A1 (en) * 2006-05-12 2007-11-22 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods to detect enterococci nucleic acid
CA2658105C (en) 2006-08-01 2016-07-05 Gen-Probe Incorporated Methods of nonspecific target capture of nucleic acids
CA2673017C (en) 2006-12-21 2015-08-04 Gen-Probe Incorporated Methods and compositions for nucleic acid amplification
EP1978111B1 (de) 2007-04-02 2013-03-27 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen, Kits und zugehörige Verfahren zur Erkennung und/oder Überwachung von Pseudomonas aeruginosa
US9458451B2 (en) 2007-06-21 2016-10-04 Gen-Probe Incorporated Multi-channel optical measurement instrument
CA2715991A1 (en) * 2007-12-26 2009-07-09 Gen-Probe Incorporated Amplification oligomers and methods to detect candida albicans 26s rrna or encoding dna
US8492114B2 (en) * 2008-01-25 2013-07-23 Battelle Energy Alliance, Llc Methods of combined bioprocessing and related microorganisms, thermophilic and/or acidophilic enzymes, and nucleic acids encoding said enzymes
BRPI0906066A2 (pt) * 2008-01-25 2015-08-18 Battelle Energy Alliance Llc Beta-xilosidases térmicas e ácidos tolerantes, codificação de genes, organismos relacionados e métodos
US9732330B2 (en) 2008-01-25 2017-08-15 Battelle Energy Alliance, Llc Methods of combined bioprocessing and related microorganisms, thermophilic and/or acidophilic enzymes, and nucleic acids encoding said enzymes
US8497110B2 (en) 2008-01-31 2013-07-30 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
US8426185B2 (en) 2008-01-31 2013-04-23 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
AU2009210489A1 (en) * 2008-01-31 2009-08-13 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer- degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
US8557557B2 (en) * 2008-01-31 2013-10-15 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
WO2009137145A2 (en) 2008-02-22 2009-11-12 Battelle Energy Alliance, Llc Transcriptional control in alicyclobacillus acidocaldarius and associated genes, proteins, and methods
JP2011512802A (ja) 2008-02-26 2011-04-28 バテル エナジー アライアンス，エルエルシー アリサイクロバチルス・アシドカルダリウスおよび関連生物体由来の好熱性および好熱好酸性糖トランスポータ遺伝子および酵素、方法
MX2010008249A (es) * 2008-02-27 2010-11-12 Battelle Energy Alliance Llc Genes de glicosilacion termofilica y termoacidofilica y enzimas a partir de alicyclobacillus acidocaldarius y metodos, organismos relacionados.
EP2245143A4 (de) 2008-02-28 2013-07-31 Battelle Energy Alliance Llc Thermophile und thermoacidophile stoffwechselgene und enzyme aus alicyclobacillus acidocaldarius sowie entsprechende organismen und verfahren
JP5646455B2 (ja) 2008-04-21 2014-12-24 ジェン−プロウブ インコーポレイテッド チクングニヤウイルスを検出するための方法
EP2806037B1 (de) 2008-05-13 2016-09-21 Gen-Probe Incorporated Inaktivierbare Target-Capture-Oligomere zur Verwendung bei der selektiven Hybridisierung und beim Fangen von Zielnukleinsäuresequenzen
CA2723917A1 (en) 2008-05-30 2009-12-30 Gen-Probe Incorporated Compositions, kits and related methods for the detection and/or monitoring of salmonella
US8097412B2 (en) * 2008-07-12 2012-01-17 Biodiagnostics, Inc. DNA-based test for detection of annual and intermediate ryegrass
CA2638458A1 (en) * 2008-07-31 2010-01-31 Spartan Bioscience Inc. Thermal recycling by positioning relative to fixed-temperature source
US20100035309A1 (en) * 2008-08-06 2010-02-11 Luca Technologies, Inc. Analysis and enhancement of metabolic pathways for methanogenesis
CA2746539A1 (en) 2008-12-30 2010-07-08 Gen-Probe Incorporated Compositions, kits and related methods for the detection and/or monitoring of listeria
US8368882B2 (en) 2009-01-30 2013-02-05 Gen-Probe Incorporated Systems and methods for detecting a signal and applying thermal energy to a signal transmission element
EP3705486B1 (de) 2009-02-26 2022-11-16 Gen-Probe Incorporated Assay zum nachweisen menschlicher parvoviren-nukleinsäure
US20100248321A1 (en) * 2009-03-27 2010-09-30 Luca Technologies, Inc. Surfactant amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous materials
EP2449132B1 (de) 2009-07-01 2015-05-13 Gen-Probe Incorporated Verfahren und zusammensetzungen zur erweiterung von nukleinsäuren
US8479813B2 (en) * 2009-12-16 2013-07-09 Luca Technologies, Inc. Biogenic fuel gas generation in geologic hydrocarbon deposits
EP3604558B1 (de) 2010-02-17 2022-10-12 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von atopobium-vaginae-nukleinsäure
US9206484B2 (en) 2010-04-21 2015-12-08 Gen-Probe Incorporated Compositions, methods and kits to detect herpes simplex virus nucleic acids
US20110275135A1 (en) 2010-05-05 2011-11-10 Battelle Energy Alliance, Llc Genetic elements, proteins, and associated methods including application of additional genetic information to gram (+) thermoacidophiles
EP2588629B1 (de) 2010-06-30 2017-05-17 Gen-Probe Incorporated Methode und apparatur zur identifizierung von analyt-beinhaltenden proben unter verwendung von single-read determination des analyten und prozesskontrollsignalen
EP2593569B1 (de) 2010-07-12 2018-01-03 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und tests für den nachweis von nukleinsäuren des saisonalen h1 influenza a virus
EP3192880B1 (de) 2010-08-18 2019-10-09 Fred Hutchinson Cancer Research Center Nukleinsäure-wirkstoffe zur behandlung von fazioskapulohumeraler muskeldystrophie (fshd)
EP2611932A2 (de) 2010-08-30 2013-07-10 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen, verfahren und reaktionsmischungen für den nachweis von xenotropic murine leukemia virus-related virus (xmrv)
US9938590B2 (en) 2010-09-16 2018-04-10 Gen-Probe Incorporated Capture probes immobilizable via L-nucleotide tail
EP2625297B1 (de) 2010-10-04 2018-10-10 Gen-Probe Prodesse, Inc. Zusammensetzungen, verfahren und kits für den nachweis von adenovirus-nukleinsäuren
EP2683833B1 (de) 2011-03-10 2018-09-26 Gen-Probe Incorporated Verfahren zur auswahl und optimierung von oligonukleotid-tagsequenzen
WO2012149034A1 (en) 2011-04-25 2012-11-01 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting bv-associated bacterial nucleic acid
ES2945966T3 (es) 2011-07-15 2023-07-11 Gen Probe Inc Composiciones y procedimiento para detectar ácido nucleico del parvovirus humano y ácido nucleico del virus de la hepatitis A
EP3255155B1 (de) 2011-09-08 2019-04-24 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von bv-assoziierter bakterieller nukleinsäure
WO2013044097A1 (en) 2011-09-21 2013-03-28 Gen-Probe Incorporated Methods for amplifying nucleic acid using tag-mediated displacement
DE102011120550B4 (de) 2011-12-05 2013-11-07 Gen-Probe Prodesse, Inc. Zusammensetzungen, Verfahren und Kits zur Detektion von Adenovirusnukleinsäuren
CA2865281C (en) 2012-02-24 2021-11-23 Gen-Probe Prodesse, Inc. Detection of shiga toxin genes in bacteria
US9004162B2 (en) 2012-03-23 2015-04-14 Transworld Technologies Inc. Methods of stimulating acetoclastic methanogenesis in subterranean deposits of carbonaceous material
AU2013205110B2 (en) 2012-04-24 2016-10-13 Gen-Probe Incorporated Compositions, Methods and Kits to Detect Herpes Simplex Virus Nucleic Acids
AU2013205064B2 (en) 2012-06-04 2015-07-30 Gen-Probe Incorporated Compositions and Methods for Amplifying and Characterizing HCV Nucleic Acid
WO2014036369A1 (en) 2012-08-30 2014-03-06 Gen-Probe Incorporated Multiphase nucleic acid amplification
AU2013205122B2 (en) 2012-10-11 2016-11-10 Gen-Probe Incorporated Compositions and Methods for Detecting Human Papillomavirus Nucleic Acid
AU2013205090B2 (en) 2012-12-07 2016-07-28 Gen-Probe Incorporated Compositions and Methods for Detecting Gastrointestinal Pathogen Nucleic Acid
US20160024565A1 (en) * 2013-03-13 2016-01-28 Tufts University Fragment complementation of based assays
US10053742B2 (en) 2013-08-14 2018-08-21 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting HEV nucleic acid
JP6821429B2 (ja) 2013-09-25 2021-01-27 ゾエティス・サービシーズ・エルエルシー Ｐｃｖ２ｂ分岐ワクチン組成物及び使用方法
JP6767374B2 (ja) 2014-10-20 2020-10-14 ジェン−プローブ・インコーポレーテッド 赤血球溶解溶液
EP3242956B1 (de) 2015-01-09 2020-06-17 Gen-Probe Incorporated Verfahren und zusammensetzungen zur diagnose von bakterieller vaginose
US10550438B2 (en) 2015-03-16 2020-02-04 Gen-Probe Incorporated Methods and compositions for detecting bacterial nucleic acid
EP3387107B1 (de) 2015-12-11 2020-08-12 Spartan Bioscience Inc. Röhrchenverschlusssystem und verfahren zur nukleinsäureamplifikation
CA3010232A1 (en) 2016-01-04 2017-07-13 Gen-Probe Incorporated Methods and compositions for detecting candida species
JP7015785B2 (ja) 2016-02-05 2022-02-15 ジェン－プローブ・インコーポレーテッド 乾燥増幅組成物
DE202017007129U1 (de) 2016-04-27 2019-08-29 Gen-Probe Incorporated Lysereagenz für Blutzellen
WO2017214511A2 (en) 2016-06-10 2017-12-14 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting zika virus nucleic acid
EP3529381B1 (de) 2016-10-19 2022-07-06 Gen-Probe Incorporated Mischungen und verfahren zur detektion und quantifizierung von hepatitis c viren
EP3541959A1 (de) 2016-11-21 2019-09-25 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis oder zur quantifizierung des hepatitis-b-virus
EP4212635A1 (de) 2017-03-24 2023-07-19 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von rsv a in proben
EP3601617B3 (de) 2017-03-24 2024-03-20 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis oder zur quantifizierung des parainfluenzavirus
JP6956800B2 (ja) 2017-03-25 2021-11-02 ジェン−プローブ・インコーポレーテッド アデノウイルス、メタニューモウイルス、および／またはライノウイルス核酸を検出するための組成物、方法、およびキット
CN110662553A (zh) 2017-05-17 2020-01-07 迅雷生物科技有限公司 转基因巨噬细胞、嵌合抗原受体和相关方法
JP7292217B2 (ja) 2017-06-07 2023-06-16 ジーイーエヌ－プローブ・インコーポレーテッド 試料中のバベシア種の核酸の検出
CN111032209A (zh) 2017-07-10 2020-04-17 简·探针公司 分析系统和方法
US11859257B2 (en) 2017-08-11 2024-01-02 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting Staphylococcus aureus
US11268134B2 (en) * 2017-09-29 2022-03-08 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Sensor apparatus and method for testing a sample
CA3082909C (en) 2017-11-17 2023-07-25 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting c1orf43 nucleic acid
US20200318171A1 (en) 2017-12-15 2020-10-08 Gen-Probe Incorporated Compositions and Methods for Detecting Toxigenic Clostridium Difficile
US20210052643A1 (en) 2018-01-05 2021-02-25 Thunder Biotech, Inc. Modified macrophages and macrophage precursors and associated methods
CA3089078A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 Gen-Probe Incorporated Analytical systems and methods
CN112654721A (zh) 2018-06-13 2021-04-13 简·探针公司 用于检测b群链球菌核酸的组合物和方法
WO2020014400A1 (en) 2018-07-10 2020-01-16 Gen-Probe Incorporated Methods and systems for detecting and quantifying nucleic acids
EP3830302B1 (de) 2018-08-01 2022-10-05 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von nukleinsäuren des epstein-barr-virus
WO2020033557A1 (en) 2018-08-08 2020-02-13 Gen-Probe Incorporated Compositions, methods and kits for detecting mycoplasma genitalium
US20220074002A1 (en) 2018-08-21 2022-03-10 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for amplifying, detecting or quantifying human cytomegalovirus
AU2019324196A1 (en) 2018-08-24 2021-03-18 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting bacterial nucleic acid and diagnosing bacterial vaginosis
EP3856934A2 (de) 2018-09-27 2021-08-04 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und verfahren zur detektion von bordetella-pertussis- und bordetella-parapertussis-nukleinsäure
CA3112342A1 (en) 2018-10-01 2020-04-09 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for amplifying or detecting varicella-zoster virus
WO2020086546A1 (en) 2018-10-22 2020-04-30 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for amplifying, detecting or quantifying human polyomavirus bk virus
TW202030333A (zh) 2018-12-20 2020-08-16 美商簡 探針公司 用於檢測瘧原蟲物種核酸之組成物及方法
EP3942078A1 (de) 2019-03-22 2022-01-26 Gen-Probe Incorporated Zusammensetzungen und verfahren zur detektion von gruppe-a-streptococcus
CA3137749C (en) 2019-05-03 2023-12-05 Gen-Probe Incorporated Receptacle transport system for an analytical system
EP4047098A4 (de) 2019-08-20 2023-06-07 EGI Tech (Shen Zhen) Co., Limited Verfahren zum sequenzieren von polynukleotiden basierend auf optischer signaldynamik eines lumineszenten labels und eines sekundären lumineszenten signals
US20220298548A1 (en) 2019-08-23 2022-09-22 Gen-Probe Incorporated Compositions, methods and kits for detecting treponema pallidum
AU2020343334A1 (en) 2019-09-05 2022-04-07 Gen-Probe Incorporated Detection of Chlamydia trachomatis nucleic acid variants
JP2023516683A (ja) 2020-03-04 2023-04-20 ジェン－プローブ・インコーポレーテッド ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２核酸を検出するための組成物および方法
CN115698325A (zh) 2020-05-07 2023-02-03 盖立复诊断解决方案公司 用于检测SARS-CoV-2核酸的方法和组合物
CN116323440A (zh) 2020-10-21 2023-06-23 简·探针公司 流体容器管理系统
AU2022319876A1 (en) 2021-07-27 2024-01-18 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting gastrointestinal pathogens
WO2023175434A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Diagenode S.A. Detection of methylation status of a dna sample
WO2024054924A1 (en) 2022-09-08 2024-03-14 Gen-Probe Incorporated Method of detecting nucleic acid analytes using dual-specificity primers

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4002532A (en) * 1974-10-21 1977-01-11 Weltman Joel K Enzyme conjugates

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3654090A (en) * 1968-09-24 1972-04-04 Organon Method for the determination of antigens and antibodies
NL154598B (nl) * 1970-11-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking.
NL154599B (nl) * 1970-12-28 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen, alsmede testverpakking.
US3817837A (en) * 1971-05-14 1974-06-18 Syva Corp Enzyme amplification assay
US4067774A (en) * 1971-05-14 1978-01-10 Syva Company Compounds for enzyme amplification assay
US3880934A (en) * 1972-02-10 1975-04-29 Syntex Inc Nitrophenyloxy-butanediols
NL171930C (nl) * 1972-05-11 1983-06-01 Akzo Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van haptenen, alsmede testverpakkingen.
IN142734B (de) * 1975-04-28 1977-08-20 Miles Lab
US4016043A (en) * 1975-09-04 1977-04-05 Akzona Incorporated Enzymatic immunological method for the determination of antigens and antibodies
US4134792A (en) * 1976-12-06 1979-01-16 Miles Laboratories, Inc. Specific binding assay with an enzyme modulator as a labeling substance
US4139346A (en) * 1977-11-28 1979-02-13 Enzo Bio Chem Incorporated Nucleic acid and protein binding paper
US4318980A (en) * 1978-04-10 1982-03-09 Miles Laboratories, Inc. Heterogenous specific binding assay employing a cycling reactant as label
US5605800A (en) * 1978-04-13 1997-02-25 Institut Pasteur Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method
FR2422956A1 (fr) * 1978-04-13 1979-11-09 Pasteur Institut Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede
US4228237A (en) * 1978-09-21 1980-10-14 Calbiochem-Behring Corp. Methods for the detection and determination of ligands
DE3172879D1 (en) * 1980-05-22 1985-12-19 Pasteur Institut Coupled product between a lectin and a specific ligand, obtention and use in the biological field
US4358535A (en) * 1980-12-08 1982-11-09 Board Of Regents Of The University Of Washington Specific DNA probes in diagnostic microbiology
US4442204A (en) * 1981-04-10 1984-04-10 Miles Laboratories, Inc. Homogeneous specific binding assay device and preformed complex method
JPH0743376B2 (ja) * 1983-05-31 1995-05-15 オルジェニックス リミテッド 核酸配列の検定方法及び分子遺伝子プローブ
EP0155854B1 (de) * 1984-03-22 1990-09-26 Bresatec Limited Nichtradioaktives biologisches Testmaterial
EP0187332B1 (de) * 1985-01-10 1989-02-01 Molecular Diagnostics, Inc. Photochemisches Verfahren zum Markieren von Nucleinsäuren zum Nachweis in Hybridisationsproben
US4868105A (en) * 1985-12-11 1989-09-19 Chiron Corporation Solution phase nucleic acid sandwich assay

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4002532A (en) * 1974-10-21 1977-01-11 Weltman Joel K Enzyme conjugates

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Biochemistry (1977), 16 (7), 1364-1370 *
Clin.Chem. (1976), 22 (8), 1243-1255 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7220854B1 (en) 1982-06-23 2007-05-22 Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. Sugar moiety labeled nucleotide, and an oligo- or polynucleotide, and other compositions comprising such sugar moiety labeled nucleotides
US7064197B1 (en) 1983-01-27 2006-06-20 Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. System, array and non-porous solid support comprising fixed or immobilized nucleic acids
EP0184701A2 (de) * 1984-12-03 1986-06-18 Hoechst Celanese Corporation Verfahren zur Bestimmung eines Liganden
EP0184701A3 (en) * 1984-12-03 1987-12-16 Hoechst Celanese Corporation A method for determining a ligand
DE3742706A1 (de) * 1987-12-16 1989-06-29 Erich Prof Dr Med Liebhardt Verfahren zum identifizieren unbekannten biologischen materials
WO1990010718A1 (en) * 1989-03-10 1990-09-20 Millipore Corporation Sequencing nucleic acids using chemiluminescent detection

Also Published As

Publication number Publication date
NL191541B (nl) 1995-05-01
US5955262A (en) 1999-09-21
IT1119725B (it) 1986-03-10
CH647870A5 (fr) 1985-02-15
DE2915082C2 (de) 1989-07-13
JPH0364119B2 (de) 1991-10-03
JPS54143297A (en) 1979-11-08
FR2422956B1 (de) 1980-11-28
GB2019408B (en) 1982-08-18
NL191541C (nl) 1995-09-04
US5876928A (en) 1999-03-02
FR2422956A1 (fr) 1979-11-09
DE2915082C3 (de) 1995-04-20
GB2019408A (en) 1979-10-31
BE875598A (fr) 1979-10-15
NL7902911A (nl) 1979-10-16
US4581333A (en) 1986-04-08
IT7921838A0 (it) 1979-04-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE2915082C2 (de)
DE4216949C2 (de) Nichtenzymatisches Verfahren zur In-situ-Hybridisierung bei spezifischen Proben
DE69433816T2 (de) Die bestimmung von nukleinsäuremutationen durch analyse des sputum
DE69133574T2 (de) Verfahren zur Unterscheidung von Sequenz Varianten
DE19530132C2 (de) Verfahren zur Reinigung, Stabilisierung oder Isolierung von Nukleinsäuren aus biologischen Materialien
DE69736668T2 (de) Nukleinsaeure vervielfaeltigungsverfahren auf basis der ramifikations-extensions-amplifizierung (ram) und der in vitro transkription
DE102008061772A1 (de) Verfahren zur Untersuchung von Nukleinsäure-Populationen
DE3211311A1 (de) Verfahren zum nachweis einer verdaechtigen viralen desoxyribonukleinsaeure in einer azellulaeren biologischen fluessigkeit
DE102009033368A1 (de) Massenspektrometrische Sepsisdiagnose
CH621147A5 (en) Process for obtaining a cell culture which produces a desired polypeptide by genetic modification of microorganisms
EP0120376A1 (de) Verfahren zur Durchführung von Hybridisierungsreaktionen
DE60308017T2 (de) Amplifizierungs-hybridisierungsverfahren zum nachweis und zur typisierung des mes menschlichen papillomavirus
EP0846186B1 (de) Extraktion, amplifikation und sequentielle hybridisierung von pilzzellen-dna sowie verfahren zum nachweisen von pilzzellen in klinischem material
DE3717212A1 (de) Verfahren zur untersuchung einer azellularen biologischen fluessigkeit auf zellulare onkogen-transkripte bzw. deren fragmente
DE4236708A1 (de) Spezifische Gensonden und Verfahren zur Diagnostik von Candida albicans
WO2002095066A2 (de) Nachweis und differenzierung von mikroorganismen der spezies yersinia pestis/yersinia pseudotuberculosis
DE69735046T2 (de) Zusammensetzungen und Verfahren für den Nachweis von Mycobacterium kansasii
DE60123481T2 (de) Verfahren zur durchführung einer subtraktiven hybridisierung
DE19610255B4 (de) Verfahren zur Herstellung von Nukleinsäuresequenzen und Verfahren zum Nachweis von Translokationen zwischen Chromosomen
WO2000039581A2 (de) Testsystem zur erkennung verschiedener marker, seine herstellung sowie verwendung
DE4337295A1 (de) Oligonukleotide für den Nachweis von Enterobacteriaceae
DE10106370B4 (de) Oligonukleotidsonden zur Detektion von parodontopathogenen Bakterien mittels in situ-Hybridisierung
DE4330307C2 (de) Verwendung von Nukleinsäuregelelektrophorese zur Identifizierung von Organismenteilen und dergleichen
EP3322817B1 (de) Oligonucleotide und deren verwendung
DE19600362C2 (de) Verfahren zur Erfassung und Quantifizierung von Nucleinsäure-Molekülen

Legal Events

Date Code Title Description
8110 Request for examination paragraph 44
8128 New person/name/address of the agent

Representative=s name: VOSSIUS, V., DIPL.-CHEM. DR.RER.NAT. VOSSIUS, D.,

8128 New person/name/address of the agent

Representative=s name: VOSSIUS, V., DIPL.-CHEM. DR.RER.NAT. TAUCHNER, P.,

D2 Grant after examination
8363 Opposition against the patent
8328 Change in the person/name/address of the agent

Free format text: TAUCHNER, P., DIPL.-CHEM. DR.RER.NAT. HEUNEMANN, D., DIPL.-PHYS. DR.RER.NAT., PAT.-ANWAELTE, 8000 MUENCHEN

8366 Restricted maintained after opposition proceedings
8305 Restricted maintenance of patent after opposition
D4 Patent maintained restricted