DE2914822A1

DE2914822A1 - Material zum heilen von wunden

Info

Publication number: DE2914822A1
Application number: DE19792914822
Authority: DE
Inventors: Ako Sugitachi; Kunihiko Takagi; Yasunori Yabushita
Original assignee: Unitika Ltd
Current assignee: Unitika Ltd
Priority date: 1978-04-12
Filing date: 1979-04-11
Publication date: 1979-10-18
Also published as: US4265233A; FR2422407B1; GB2023614A; GB2023614B; FR2422407A1; DE2914822C2

Description

PATENTANWÄLTE A. GRÜNECKER

OPt--I

H. KINKELDEY

-4-2814822

W. STOCKMAIR DR-INCL-AaEtCALTECHI

K. SCHUMANN

OR NTR Ν*Π-DtPL-MVS

P. H. JAKOB

OTL-ING.

G. BEZOLD

8 MÜNCHEN 22

MAXlMlUANSTItASSK 43

11. April 1979 P 13739-60/co

Material zum Heilen von Wunden

.Die Erfindung bezieht sich auf ein Material zum Schützen und Heilen von Wunden.

Ein Gelatineschwamm, an welchem Thrombin fixiert ist, ist als Heilmaterial bekannt, welches aufzubringen ist auf eine Wundstelle wie etwa einen Schnitt, eine Schramme usw., einen Einschnitt von einer chirurgischen Operation und einen Hohlraum, welcher nach der Zahnextraktion hinterbleibt (japanische Patentveröffentlichung 41 111/70). Das Thrombin, welches in der Gelatine enthalten ist, wirkt auf das Fibrinogen an der Wunde ein, bildet eine Fibrinmasse und stillt somit das Bluten. Das in dieser Weise gebildete Fibrin ist nicht stabilisiertes Fibrin, welches in Säuren, Harnstoff usw. löslich ist und der Zersetzung durch Plasmin zugänglich ist. Das Heilen ist somit häufig sehr langsam.

Der Blutkoagulationsfaktor XIII ist ein bekannter Blutkoagulationsfaktor, welcher die Fähigkeit besitzt, Fibrin zu stabilisieren [siehe CG. Curtis, L. Lorand, Methods in Enzymology, 177, Academic Press (1976)]. Dieser Faktor wirkt direkt auf

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TELEFON (O8O) 32 2865 TELEX OS-SSSSO TELEGRAMME MONAPAT TELEKOPIERER

nicht stabilisiertes Fibrin und nimmt an der Bildung von Isopeptidbindungen unter den Fibrinmolekülen teil. Der Blutkoagulationsfaktor XIII befindet sich in der Rezeptur im Handel erhältlicher Zubereitungen, jedoch existiert kein Fall, wo er an das Substrat eines Wundheilmaterials fixiert worden ist.

Erfindungsgemäß soll nun ein Material zum Heilen von Wunden geschaffen werden, welches das Heilen durch die Bildung stabilisierten Fibrins fördert.

Überraschenderweise wurde nunmehr gefunden, daß durch Fixieren von Blutkoagulationsfaktor XIII an einem Material, stabilisiertes Fibrin gebildet wird, welches für eine lange Zeitdauer wirksam ist.

Erfindungsgemäß wird ein Material zum Heilen von Wunden geschaffen, welches die Bildung stabilisierten Fibrins an einer Wundsteile wirksam fördern kann und für eine lange Zeitdauer wirkt. Dieses Material weist eine Struktur in solchen Formen auf wie etwa einen Einzelfaden, eine fasrige Zusammenstellung, einen Film oder einen Schwamm, woran der Blutkoagulationsfaktor XIII fixiert ist.

Die Erfindung beinhaltet ein Material zum Heilen von Wunden, an welches Blutkoagulationsfaktor XIII fixiert ist. Dieses Material fördert die Bildung stabilisierten Fibrins an einer Wundstelle und ist für lange Zeitdauer wirksam, wodurch die Wunde geschützt und ihr Heilen gefördert wird.

Der Ausdruck "Struktur" wie er hier unter Bezugnahme auf das erfindungsgemäße Wundenheilmaterial angewandt wird, bezieht sich auf alle herkömmlichen Materialien, welche beim Heilen einer Wundstelle gebraucht werden, welche verschiedene Formen aufweisen können wie etwa einzelne Fäden, fasrige Zusammenstellungen wie Baumwolle, Papier, nicht gewobenes Fasergut, gewobenes und gewirktes Gewebe, Filme, Schwämme usw. Beispielsweise liegen innerhalb der Bedeutung des Ausdruckes "Struktur", wie er hier gebraucht wird, chirurgische Nähte (Einzelfäden, gezwirnte Garne

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oder Wirkgarne), absorbierende Polster, Bandagen, Brandverbände und Packungen für Zahhhohlräume in Form von Baumwolle, Papier, nicht gewobenem Fasergut, gewobenem Fasergut, gewirktem Fasergut, Filme und Schwämme. Ferner umfaßt der Ausdruck "Struktur" absorbierbare Materialien wie Gelatine, Schwämme, wie sie nachstehend eingehender erörtert werden.

Beispiele der Materialien, welche solche Strukturen ausmachen können, sind nachstehend gezeigt:

(A) Natürliche Polymere

Zellulose, Viskosekunstseide, Kupferammoniumkunstsexde, Zelluloseacetat, Carboxymethylzellulose, Methylzellulose, Agarose, Dextran, Pullulan, Pectin, Alginsäure, Chitin, Polysaccharide wie Mucopolysaccharide, und Proteine wie ■ Volle, Seide, Kollagen, Gelatine und Kasein.

(B) Synthetische Polymere

Polymere von Olefinen wie Äthylen, Propylen, 1-Buten, 1-Penten und Isobutylen; Polymere von halogenierten Olefinen wie Vinylchlorid, Vinylidenchlorid, Trifluor— äthylen und Tetrafluoräthylen; Polymere von aromatischen Vinylverbindungen wie Styrol, Divinylbenzol, a-Me thy !styrol oder Vinylpyridin; Polymere Von Dienen wie Butadien oder Isopren; Polymere von H-Viny!verbindungen wie H-Vinylamin oder ΪΓ-Viny!pyrrolidon, Polyvinilalkohol und dessen Ester wie Polyvinylalkoholacetat; Polymere von Vinyläthern wie Vinylmethyläther und Tetramethylenglycol-divinyläther; Polymere von schwefelhaltigen Vinylverbindungen wie Vinylsulfon oder Vinylsulf oxyd; Polymere von ungesättigten Aldehyden wie Acrolein; Polymere von ungesättigten Ketonen wie Methyl-vinyl-keton; Polymere von α, ß-ungesättigt en Carbonsäuren wie Acrylsäure, Methacrylsäure, Maleinsäure oder Fumarsäure; PAymere von α, ß-unge satt igten Carbonsäureestern wie Methylacrylat, Ithylacrylat, Methyl-methacrylat, Äthylmethacrylat oder Maleinsäuremonomethylester; Polymere von α,β-ungesättigten Carbonsäurecloriden wie Acryloylchlorid oder Methacryloylchlorid; Polymere von α, ß-unge sättigt en

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Säureanhydriden wie Aerylsäureanhydrid, Methacrylsäureanhydrid und Maleinsäureanhydrid; Polymere von α,ß-ungesät"tagten Nitrilen wie Acrylnitril oder Methacrylnitril; Polymere von α,β-ungesättigten Carbonsäureamiden wie Acrylamid oder Methacrylamid; Polyalkylenimine wie Polyäthylenimin; Polyether wie Polyphenylenoxyd, Pölymethylenoxyd, Polyätbylenoxyd oder Polytetramethylenoxyd; Polypeptide wie Polyglutaminsäure, Polyalanin, Poly lysin, Polyasparaginsäure oder polyphenylalanin; Polyamide wie Nylon-3, Nylon-4, Nylon-5, Nylon-6, Nylon-7, Nylon-11, Nylon-12, Nylon-6,6, Kylon 6,1o, PoIy-(m-phenylenisophtalamid) oder Poly(p-phenylen-terephtalamid); Polyester, welche sich ableiten von mehrwertigen Carbonsäuren wie Terepbtalsäure, iBOphtalsäure, Adipinsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, oder Trimellithsäure, und mehrwertigen Alkoholen wie Ä'thylenglyeol, Propylenglycol, Butylenglycol, pentaerythrit oder Bisphenol A; Polyester, welche sich ableiten von Hydroxy -carbonsäuren wie Glycolsäure, Milchsäure, Hydroxypiyalinsäure, Siliconkautschuke wie Dirnethylpolysiloxan, Methylphenylpolysiloxan, Methylvinylpolysiloxan, Cyanoalkylmethylpolysiloxane und Fluoralkylmethylpolysiloxane; Polyurethane, welche sich ableiten von Polyisocyanaten wie Toluoldiisocyanat, Xyloldiisocyanat, Phenylendiisocyanat, Ä'thylendiisocyanat, DiphenylmethandiisocyaiBfc und Toluoltriisocyanat und Polyolen wie Polyäthylenglycoi, Polypropylenglycol, oder Polyestern, welche eine Hydroxylgruppe an beiden Enden enthalten; Pormaldehydharze wie Phenol-Pormaldehyd-Harze, Xylol-Pormaldehyd-Harze, Harnstoff-Pormaldehyd-Harze oder Melamin-Pormaldehyd-Harze; Polymere, welche einen tetrazyklischen Ring enthalten wie Polyimide, Polybenzimidazole und lÖLythiazole; Polycarbonate, welche sich ableiten vom Bisphenol A und Phosgen; Polysulfone, welche sich ableiten vom Bisphenol A und 4,4'-Dichlordiphenylsulfon»

Lineare Copolymere, vernetzte Copolymere, Pfropfcopolymere und Blockcopolymere, welche Einheiten der Monomerkomponenten der oben aufgeführten Polymeren enthalten, können ebenfalls als Materialien zur Erzeugung der Struktur des erfindungsgemäßen

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Wundheilmaterials verwendet werden.

Ein geeignetes mittleres Molekulargewicht für diese Polymeren, damit die Polymeren eine für ein Wundheilmaterial erforderliche mechanische Fest:gceit besitzen, beträgt etwa 7ooo bis 1 Million, vorzugsweise etwa 1o ooo bis 5oo ooo.

Von den vorgenannten Materialien sind bevorzugt: Zellulose, Zellulosederivate wie etwa Viskosekunstseide, Kupferammoniumkunstseide und Zelluloseacetat, solche Proteine wie Kollagen und Gelatine, Polyvinylalkohol und seine Derivate, solche Polypeptide wie PoIyglut amins äure, Polyalanin, Poly lysin und Polyasparaginsäure, solciie Polyamide wie Kylon-6 und Nylon-6,6, und solche Polyester wie Polyethylenterephthalat, Polybutylenterephthalat, und Polyglycolsäure und Polymilchsäure, und Polyurethan.

Die vorliegende Erfindung kennzeichnet sich dadurch, daß Blutkoagulationsfaktor XIII (nachstehend "Faktor XIII") an die obigen Strukturen fixiert ist. Vorzugsweise wird Thrombin zusammen mit Paktor XIII fixiert, weil es die Bildung von nicht stabilisiertem Fibrin an einer Wundstelle weiter fördert.

Der Paktor XIII, welcher bei dieser Erfindung angewandt wird, ist ein fibrinstabilisierender Paktor, welcher direkt auf nicht stabilisiertes Fibrin wirkt und zwischen den Fibrinmolekülen Isopeptidbindungen bildet. Der Faktor XIII wird erhalten aus dem Blut bzw. Plazenta des Menschen und des Rindes und steht im Handel zur Verfügung. Zur Aufbringung auf eine Wundstelle eines Menschen ist die Anwendung von Faktor XIII bevorzugt, welcher vom Menschen abgeleitet ist.

-Das erfindungsgemäß verwendete Thrombin ist eine Protease, welche Fibrinogen in Fibrin umwandeln kann. Thrombin wird vom Blut des Menschen, des Rindes, des Schweines usw. abgetrennt, doch zur Anwendung auf den Menschen ist der Gebrauch menschlichen Thrombins bevorzugt. Thrombin ist ebenfalls verfügbar.

Der Faktor XIII und Thrombin können an einer Struktur in solcher

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Form wie Einzelfaden, fasrige Zusammenstellung, Film oder Schwamm durch kovalente Bindung, ionische Bindung, Adsorption oder Einschließen fixiert werden, wobei man herkömmliche Techniken anwendet wie diejenigen, welche in 0« Zaborsky, Immobilized Enzymes, CRC Press, 1973, beschrieben sind.

Wenn die vorgenannte Struktur, welche das Wundheilmaterial bildet, eine reaktionsfähige funktionelle Gruppe enthält, die eine kovalente Bindung bilden kann (beispielsweise Carboxylgruppe, Chlortriazinylgruppe, Azidogruppe, Diazoniumgruppe, Eρoxygruppe, Formylgruppe, Säureanhydridgruppe, Bromacetylgruppe, Isocyanatgruppe oder Iminocarbonatgruppe, oder eine Ionenaustauschgruppe wie etwa Aminogruppe, Ammoniumion, Carboxylgruppe, Carboxylatgruppe, SuIf oxy !gruppe oder SuIfonatgruppe), so kann Faktor XIII und Thrombin (nachstehend bezieht sich die Beschreibung auf die Ver-•wendung von Faktor XIII und Thrombin zusammen, obgleich verstanden werden soll, daß die Verwendung von Faktor XIII ohne Thrombin eine Aus füh rungs form der Erfindung bildet) !covalent oder ionisch an die Struktur gebunden sein, indem man sie mit einer Lösung von Faktor XIII und Thrombin behandelt» Wenn die Struktur wenig oder keine funktioneilen Gruppen enthält., welche eine kovalente Bindung oder eine Ionenaustauschgruppe bilden,können, so kann Paktor XIII und Thrombin an die Struktur gebunden werden„ nachdem man eine solche Gruppe in die Struktur durch bekannte Polymerreaktionen einführt»

Einige Beispiele des Bindezis von Faktor XIII und Thrombin an verschiedene Strukturen seien nachstehend beschrÄen»

Proteine wie Seide, Kollagen₉ Kasein oder Gelatine enthalten eine Aminogruppe und eine Carboxylgruppe_r welche funktionelle Gruppen sind, die eine kovalente Bindung und gleichzeitig lonenaustauschgruppen bilden können* Strukturen aus diesen Proteinen können Faktor XIII und Thrombin ohne Vorbehandlung kovalent oder ionisch gebunden aufweisen. Im Falle der kovalenten Bindung ist es bevorzugt, ein Dehydrokondensationsmittel wie Eicyclohexyl-carbodiimid und .1-Cyclohexyl-3^ S-morpholinoäthylJ-carbodiimid-metho-p-toluol--Bulfonat zu verwenden, um eine Peptidbindung mit der Aminogruppe

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und der Carboxylgruppe im Protein zu bilden. In diesem Falle wird das Dehydrokondensationsmittel in einer Menge von etwa o,1 bis 2o Gew.^, vorzugsweise etwa 1 bis 1o Gew.$, in Wasser oder einem Gemisch von Wasser mit einem mit Wasser mischbaren Lösungsmittel wie etwa Methylalkohol, Äthylalkohol, Propylalkohol, Dioxan, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid oder Dimethylsulfoxyd. aufgelöst. Eine Struktur, welche sich aus dem obigen Protein zusammensetzt, wird mit einer gemischten Lösung der Dehydrokondensationsmittellösung und der Lösung des Paktors XIII und des Thrombins behandelt, oder zuerst mit der Dehydrokondensationsmittellösung und anschließend mit der Lösung des Paktors XIII und des Thrombins, oder umgekehrt, behandelt und zwar bei einer Temperatur von etwa 253⁰K (-2o°C) bis etwa 333°K (60⁰C), vorzugsweise 273 bis 313°K (o bis 4o°C) für etwa 1o Minuten bis etwa 72 Stunden, vorzugsweise 3o Minuten bis 24 Stunden.

Es ist aber auch möglich, zuerst die proteinartige Struktur mit einem Polyaldehyd wie etwa Dialdehydstärke, Glutaraldehyd oder Glyoxal, oder einem Polycarbonsaureanhydrid wie etwa Maleinsäureanhydrid/MethyIvinyläther-Copolymerem, MBleinsäureanhydrid/styrol-Copolymerem oder Maleinsäureanhydrid/Äthylor Copolyraereia umzusetzen, um eine Formylgruppe bzw. Säureanhydridgruppe einzuführen, und dann den Paktor XIII und das Thrombin kovalent zu fixieren (zu binden),.

Die Reaktion zwischen der proteinhaltigen Struktur und dem Polyaldehyd wird ausgeführt, indem man den Polyaldehyd in einer Konzrtration von etwa o,1 bis 5o Gew.^, vorzugsweise etwa o,5 bis 3c Gew.$, auflöst, und die proteinhaltige Struktur mit der sich e^T gebenden Polyaldehydlösung behandelt. Die geeignete Behandlungstemperatur beträgt etwa 253°K (-2o°C) bis 343°K (7o°C), vorzugsweise etwa 273 bis 323°K (o bis 5o°C), und die Reaktionszeit beträgt im allgemeinen etwa 5 Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise etwa 2o Minuten bis 8 Stunden.

Die Reaktion zwischen der proteinhaltigen Struktur und dem PoIy-

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carbonsäureanhydrid wird ausgeführt, indem man das Polycarbonsäureanhydrid in Azeton, Tetrahydrofuran, Benzol, Toluol, Dimethylformamid, Dimethylsulfoxyd oder einem Gemisch dieser Substanzen in einer Konzentration von etwa o,1 bis 3o Gew.$, vorzugsweise etwa o,5 bis 1o Gew.^, auflöst, und die proteinhaltige Struktur mit der sich ergebenden Lösung behandelt. Eine geeignete Behandlungstemperatur beträgt etwa 253 bis 333⁰K (-2o bis +60⁰C), vorzugsweise etwa 273 bis 313⁰K (o bis 4o°C), und die Behandlungszeit beträgt im allgemeinen etwa 5 Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise etwa 2o Hinuten bis 6 Stunden

Eine Struktur aus hydroxylgruppenhaltigem Polymermaterial wie Baumwolle, Viskosekunstseide, Kupferammoniumkunstseide, Zellulose und Zellulosederivate wie etwa Zelluloseacetat, oder Polyvinylalkohol, wird zuerst mit einem Polyaldehyd wie etwa Glutaraldehyd, Glyoxal oder Dialdehydstärke behandelt, um eine Pormylgruppe in die Struktur einzuführen. Dann behandelt man die formylgruppenhaltige Struktur mit Paktor XIII und Thrombin, wodurch Paktor XIII und Thrombin kovalent gebunden werden. Die Reaktion zwischen der Struktur, welche sich aus dem hydroxylgruppenhaltigen Polymermaterial und dem Polyaldehyd zusammensetzt, wird durchgeführt, indem man den Polyaldehyd in einer sauren wässrigen Lösung auflöst, welche Salzsäure, Schwefelsäure, Essigsäure oder dergl. in " einer Konzentration von etwa o,1 bis 5o Gew.5$, vorzugsweise etwa o,5 bis 2o Gew.$, enthält, und man die Struktur mit dar sich ergebenden Lösung bei einer Temperatur von etwa 253 bis 333°K (-2o bis +60⁰C), vorzugsweise etwa 273 bis 313°K (o bis 4o°C) etwa 5 Minuten bis etwa 24 Stunden, vorzugsweise 1o Minuten bis 1o Stunden, behandelt.

Es kann aber auch eine Iminocarbonatgruppe in die Struktur durch Verwenden von Bromcyan eingeführt werden; einen Bromacetylgruppe kann eingeführt werden durch Verwenden von Bromacetylbromid; eine Säureanhydridgruppe kann eingeführt werden durch Verwenden eines Polycarbonsäureanhydrids wie etwa Maleinsäureanhydrid/Methylvinyläther-Gopolymeres, Maleinsäureanhydrid/styrol-Copolymeres oder Maleinsäureanhydrid/Äthylen-Copolymeres; eine Isocyanatgruppe

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kann eingeführt werden durch Verwenden eines Polyisocyanate; und eine Chlortriazinylgruppe kann eingeführt werden durch Verwenden von Cyanurchlorid; und Faktor XIII und Thrombin werden an der modifizierten Struktur fixiert.

Die Reaktion der Struktur aus einem hydroxylgruppenhaltigen Polymermaterial mit Bromcyan kann vollzogen werden gemäß dem Verfahren. von R. Axen, J. Porath und S. Ernback, Nature, 214, 13e>2 (1967). Die Reaktion der Struktur aus hydroxylgruppenhaltigem Polyraermaterial mit Bromacetylbromid kann vollzogen werden unter Bezugnahme auf das Verfahren der israelischen Patentschrift 18 2o7 (1965).

Die Reaktion der Struktur aus hydroxylgruppenhaltigem Polymermaterial mit Polymaleinsäureanhydrid kann durchgeführt werden, indem man das Polymaleinsäureanhydrid in Azeton, Tetrahydrofuran, Benzol, Toluol, Dimethylformamid, Dimethylsulfoxyd oder einem Gemisch dieser Substanzen in einer Konzentration von etwa o,1 bis 3o Gew.%, vorzugsweise etwa o,5 bis 1o Gew.^, auflöst, man wahlweise einen Katalysator wie Salzsäure, Schwefelsäure oder Essigsäure zu der sich ergebenden Lösung in einer Konzentration von etwa o,o1 bis 1o Gew.^, vorzugsweise etwa o,o5 bis 2 Gew.^, hinzusetzt, und man die Struktur mit der Lösung bei etwa 273 bis 373⁰K (o bis 1oo°C), vorzugsweise etwa 293 bis 353⁰K (2o bis 8o°C) für etwa 1o Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise etwa 3o Minuten bis 1o Stunden, behandelt.

Die Reaktion der Struktur aus dem hydroxylgruppenhaltigen Polymermaterial mit dem Polyisocyanat wird durchgeführt, indem man das Polyisocyanat in Dimethylformamid, Methyläthylketon, Tetrahydrofuran oder einem Gemisch dieser Stoffe in einer Konzentration von etwa o,1 bis 5o Gew.$6, vorzugsweise etwa o,5 bis 2o Gew.^, auflöst, man wahlweise einen Katalysator wie N-Methylmorpholin oder Triäthylendiamin in einer Konzentration von etwa 0,001 bis 1o Gew.^, vorzugsweise etwa o,o1 bis 1 Gew.$ hinzusetzt, und man die Struktur mit der lösung bei etwa 293 bis 393°K (2o bis 12o°C), vorzugsweise etwa 313 bis 363⁰K (4o bis 9o°C), für etwa 5 Minuten

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bis 24 Stunden» vorzugsweise etwa 2o Minuten bis to Stunden, behandelt.

Die Reaktion der Struktur aus dem bydroxylgruppenhaltigen Polymermaterial mit Cyanurchlorid kann vollzogen werden unter Bezugnahme auf G. Kay, E.M. Crook, Nature, 216,514(1964)_tu.A.K. Sharp, Cr.Kay, M.J). Lilly, Biotechnology and Bioengineering, 11 _y 363 (1970).

Eine Epoxy gruppe kann in die aus dem hydroxylgruppenhaltigen Polymermaterial hergestellte Struktur eingeführt werden, indem, man die Struktur mit einem ungesättigten Säurechlorid wie etwa Crotonsäureanhydrid, Tetrahydrophthalsäureanhydrid oder To-Undecenoylchlorid umsetzt, und man das Produkt mit Chlorperbenzoesäure oder Wasserstoffperoxyd epoxydiert.

Die Struktur, in welche eine reaktionsfähige funktioneile Gruppe wie etwa eine Pormylgruppe, eine Iminocarbonatgruppe, eine Bromacetylgruppe, eine Säureanhydridgruppe, eine Isocyanatgruppe, eine Chlortriazinylgruppe oder eine Epoxygruppe eingeführt wurde, wird aminiert durch Behandlung mit einem Polyamin wie etwa PoIyäthylenimin, und wird carboxyliert durch Behandlung mit einer Amino carbonsäure wie etwa Glycin oder epsilon-Aminocapronsäure. Die Behandlung mit dem Polyamin oder der Aminocarbonsäure wird durchgeführt durch Umsetzen der eine reaktionsfähige funktioneile Gruppe enthaltenden Struktur mit einer wässrigen Lösung des Polyamine oder der Aminocarbonsäure in einer Konzentration, von etwa o,1 bis 3o Gew.$, vorzugsweise etwa o,5 bis 1o Gew.$, bei einer Temperatur von etwa 273 bis 373⁰K (o bis 1oo°C), vorzugsweise etwa 283 his 333⁰K (1o bis 60⁰C) für eine Zeitspanne von etwa 1o Minuten bis 48 Stunden, vorzugsweise etwa 3o Minuten bis 24 Stunden. Die Struktur, in welche eine Aminogruppe oder Carboxylgruppe, eine Ionenaustauschgruppe so eingeführt wurde, kann Paktor XIII und Thrombin ionisch an sich binden.

Im Falle einer Struktur, welche aus einem Polymermaterial mit endständigem Carboxyl hergestellt wurde wie etwa Polyamid oder

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Polyester, kann eine Säureanhydridgruppe in die Struktur eingeführt werden durch Behandeln der Struktur mit einem polyamin wie etwa ELyäthylenimin in Anwesenheit eines Dehydrokondensationsmittels wie etwa Dicyclohexyl-Carbodiimid, und nachfolgendes Behandeln des sich ergebenden Produktes mit einem Polycarbonsäureanhydrid wie etwa Maleinsäureanhydrid/Methylvinyläther-Copolymerem, gemäß dem Verfahren der japanischen Patentanmeldung ,(OPI) 1o 378/77. Durch Behandeln der Struktur, welche eine Säureanhydridgruppe eingeführt aufweist, mit Paktor XIII und Thrombin, kann der Faktor XIiI und das Thrombin kovalent gebunden werden. Durch Umsetzen der Struktur, welche eine Säureanhydridgruppe eingeführt aufweist, mit Wasser bei etwa 283 bis 373°K (1o bis 1oo°C), vorzugsweise etwa 293 bis 333⁰K (2o bis 6o°G) für eine Zeitdauer von etwa 1o Minuten bis 48 Stunden, vorzugsweise etwa 1 bis 24 Stunden, wird eine Carboxylgruppe (welche eine Ionenaus tauschgruppe ist) gebildet. In dieser Weise kann Faktor XIII und/oder Thrombin ionisch an die carboxylgruppenhaltige Struktur gebunden werden.

Wenn eine Struktur aus polymerem Material mit endständigem Carboxyl, etwa Polyamid oder Polyerster, zuerst mit Benzidin oder Hydrazin und dann mit salpetriger Säure nach der Methode von W.B. Hornby, H. Filippusson, Biochimica et Biophysica Acta, 22q, 343 (197o) behandelt wird, so kann eine Diazoniumgruppe oder eine Azidogruppe in die Struktur eingeführt werden. Durch Behandeln der Struktur, welche die Diazoniumgruppe oder Azidogruppe eingeführt aufweist, mit Paktor XIII und Thrombin, kann der Paktor XIII und das Thrombin kovalent gebunden werden.

Beim Einführen einer reaktionsfähigen funktioneilen Gruppe oder einer Ionenaustauschgruppe in die Struktur in der oben beschriebenen Weise ist es erforderlich, ein Lösungsmittel auszuwählen, welches die Struktur nicht auflöst. Das Fixieren des Faktors XIII an die Struktur mit einer funktionellen Gruppe oder einer IonenaustauBtauschgruppe unter kovalenter bzw. ionischer Bindung ' des Faktors XIII und des Thrombins an die Struktur, wird vollzogen, indem man die Struktur mit einer Lösung des Faktors XIII be-

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handelt. Das Fixieren von Paktor XIII und Thrombin wird durchgeführt, indem man die Struktur mit einer Lösung behandelt, welche den Paktor XIII und das Thrombin enthält, oder indem man sie zuersi mit einer Lösung des Faktors XIII und anschließend mit einer Lösung von Thrombin, oder in umgekehrter Reihenfolge, behandelt. Faktor XIII und Thrombin lösen sich in Wasser oder einem Gemisch von Wasser mit einem mit Wasser mischbaren lösungsmittel wie etwa Methanol, Äthanol, Propanol, Azeton, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylsulfoxyd oder Dimethylformamid in einer Konzentration von etwa 1 bis etwa 2 ooo Einheiten/ml, vorzugsweise etwa 5 bis 5oo Einheiten/ml, auf. Eine Einheit des Faktors XIII entspricht der Faktor Xlll-Wirksamkeit von 1 ml frischen, menschlichen Standardplasmas. Eine Einheit Thrombin entspricht der Einheit, welche definiert ist durch TJ.S. National Institute of Health (siehe Minimum Requirement for Dried Thrombin, 2. Revision, Division of Biologie Standards, National Institute of Health, Bethesda, Maryland, 1946). Eine geeignete Temperatur für die Behandlung von Faktor XIII und Thrombin beträgt etwa 253 bis 343°K (- 2o bis +7o°C), vorzugsweise etwa 273 bis 313 K (o bis 4o°C), und die geeignete Behandlungszeit beträgt etwa 1 Minute bis 48 Stunden, vorzugsweise etwa 2 Minuten bis 24 Stunden. Beim Fixieren des Faktors XIII und des Thrombins sollte der pH-Wert der Lösung auf etwa 3 bis etwa 1o, vorzugsweise 4 bis 9, eingestellt sein. Zu diesem Zwecke wird ein Puffer angewandt wie etwa ein Phosphatpuffer oder ein Azetat, eine Säure wie Salzsäure, oder ein Alkali wie Natriumhydroxyd. Nach Erfordernis wird als Stabilisator ein Protein (nicht mehr als 1o g/Liter) wie etwa Albumin oder Gelatine, oder ein Salz (nicht mehr als 2 Mol/Liter) wie etwa Natriumchlorid, hinzugesetzt.

Zur Herstellung des erfindungsgemäßen Wundheilmaterials, kann Faktor XIII und Thrombin an die Struktur in Form eines Einzelfadens, einer fasrigen Anordnung, eines Films, eines Schwammes oder dergl. durch Adsorption in der folgenden Weise fixiert werden. Faktor XIII und Thrombin werden in einem Lösungsmittel aufgelöst, welches die Struktur benetzen kann und die Struktur behandelt man mit der sich ergebenden Lösung bei einer Temperatur

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von etwa 253 bis 333°K (-2o bis +60⁰G), vorzugsweise etwa 273 bis 313⁰K (o bis 4o°C) für eine Zeitdauer von etwa 1o Minuten bis Stunden, vorzugsweise etwa 3oMinuten bis 24 Stunden, wodurch das Adsorbieren des Faktors XIII und des Thrombins an die Struktur bewirkt wird. Geeignete Lösungsmittel sind Wasser und Gemische von Wasser mit mit Wasser mischbaren Lösungsmitteln wie Methanol, Äthanol, Propanol, Azeton, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethylsulfoxyd und Dimethylformamid. Gedgnete Konzentrationen von Paktor XIII und Thrombin sind etwa 1 bis 2 000 Einheiten/ml, vorzugsweise etwa 5 bis 5oo Einheiten/ml.

Das erfindungsgemäße Wundenheilmaterial kann auch hergestellt werden, indem man Paktor XIII und Thrombin durch Einschließen fixiert. Das Einschließen beinhaltet das Einschließen von Paktor XIII und Thrombin in den feinen Gittern eines Gels oder in einem polymeren Film. Geeignete Materialien, welche bei diesem Verfahren verwendet werden, sind absorbierbare Materialien wie Kollagen, Gelatine, PoIyglycolsäure, Polymilchsäure, ein Grlycolsäure/Milchsäure-Copolymeres, PoIyglutaminsäure und Amylose. Das Einschließen von Paktor XIII und Thrombin in den Gelgittern wird bewirkt durch Auflösen, Emulgieren oder Suspendieren von Paktor XIII und Thrombin und einem absorbierbaren Material wie Kollagen oder Gelatine, und Einarbeiten der sich ergebenden Lösung, Emulsion oder Suspension in eine Struktur, welche die Gestalt eines Filmes, eines Schwammes, eines Fadens oder eines · nicht gewobenen Pasergutes besitzt, nach einer herkömmlichen Naß- oder Trockenmethode. Wenn erforderlich, kann das absorbierbare Polymere vernetzt werden durch Hinzusetzen eines Härtungsmittels wie Glyoxal, Glutaraldehyd oder Trimethylolmelamin, oder durch Anwenden von Ultraviolettstrahlung bzw. ionisierender Strahlung, um die mechanische Festigkeit des Polymeren zu steigern und um die Absorbierbarke it des Polymeren einzustellen»

Beispiele von Lösungsmitteln, welche verwandt werden können, um das absorbierbare Polymere und den Faktor XIII und das Thrombin aufzulösen, zu emulgieren oder zu suspendieren, sind Wasser, Methanol, Propanol, Azeton, Tetrahydrofuran, Dioxan, Dimethyl-

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formamid, Dimethylsulfoxyd, Methylenchlorid und Gemische dieser Substanzen. Geeignete Konzentrationen des Faktors XIII und des Thrombins liegen bei etwa 1 bis 2 ooo Einheiten/ml, vorzugsweise etwa 5 bis 5oo Einheiten/ml. Eine geeignete Konzentration des absorbierbaren Polymeren beträgt etwa o,1 bis 5o Gew.$, vorzugsweise etwa o,5 bis 3o Gew.^.

Zum Verformen der sich ergebenden Lösung nach der Trqckenmethode, sei auf die japanische Patentveröffentlichung 4t 11i/7o Bezug genommen. Die Methode der japanischen Patentveröffentlichung 41 111/ 7o besteht in dem Hinzusetzen eines Schäumungsmittels wie Myristylnatriumsulfat zu einer Lösung,, welche eine Gelatine enthält, nach dem Sterilisieren der Lösung;, Schäumen, Hinzusetzen des Glyoxals als Denaturierungsmittel in einer Menge von o,oo3 bis o_soo7 Gramm je 1 Gramm Gelatine zur Zeit des Schäumens, ram die Gelatine zu verformen und su verfestigen, und L]fophilisieren des Produktes in der Form,, Zum Verformen der Lösung iiaeh der Massmethode siehe Methods in Enzymology, Bd. 44_s So 169_S herausgegeben von Ko Mosbachj Academic Press, 1976_O

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an der Struktur sne&wmeii mit fi©s !Faktor ΣΙΙΐ tasi äem ein CaloirasioE. fixiert weräea_s weleäss-siefe ©a Ü.&T· g des Faktors XIII "beteiligt. Das Gslciumion wird gewönnlicb der Struktur als Calciumchlorid zugesetzt und zwar- in. einer Menge von o,1 uMol bis 1 mMol, vorzugsweise o,5 pMol bis 2oo pMol» Wenn erforderlieh, können bei der Herstellung des erfindungsgemäßen Wundheilmaterials, zusammen mit Paktor XIII und Thrombin, pharmazeutische Stoffe wie etwa Antiplasmine, Antibiotika, Anti

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virale, Sulfonamide und Antiinfektionsstoffe an der Struktur fixiert werden. Antiplasmin ist ein Inhibitor von plasmin, welcher ein fibrinauflösendes Enzym ist und daher die fibrinolytische Aktivität durch Hemmen von Plasmin inhibiert. Demgemäß kann ein Wundheilmaterial, an welches Antiplasmin zusammen mit Paktor XIII und Thrombin fixiert ist, die Bildung von fibrin durch. Inhibieren der fibrinolytischen Aktivität fördern. Beispiele des Antiplasmins sind Aprotinin, welches aijs den Lungen von Rindern extrahiert ist, natürliche Substanzen wie Pepstatin, Leupeptin, Antipain oder Chymostatin, abgetrennt aus den Kulturbrühen von Mikroorganismen, epsilon-AminocapronBäure, Tranexamsäure und Gabexatmesilat. Epsilon-Aminocapronsäure und Tränexamsäure sind besonders bevorzugt. Beispiele von Antibiotika sind PenicJlLin, Tetracyclin, Chlortetracyclin, Bacitracin, Streptomycin, Neomycin, Polymyxin, Gramicidin, Oxytetracyclin, Chloramphenicol, Erythromycin und dergl. Beispiele von Antiviralen sind Idoxuridin IUIf) dergl. Beispiele von. Sulfatiamid sind SuIfacetamid, Sulfametha ζυ.ί, Sulfamethazin, Su'i Ci Borazol und dergl. Beispiele von Anti- * of-i.l· fcionsstoffen sind UjL I; ro.fu ras on, ITatriurapropionat und dergl. ¹I^ ·^?ίΏ Menge an pbarmarn^.titrj.h-ir Substanz;* welche an die obige '■'· t ί'^!ιΐυΓ zusammen mit Γ-'¹.!' ^u,o^y TIJJ und Thrombin fixiert ist, ge-ι ::U» .if!_-j. hxf, (jes ρί)ηΐ»'.9"^ΐ'!;ΊπιΊι«ϊί ni;o.fi>n _T 'X^«"' gewünschten. Heiliiugf? '.!'.".üir; und der ?!i:Vfc* ■>-"\"\_li) ßnß ψ.ηηο}^Π.νν*.±^χ).Ά3. rerw^ndot ^ Xt ^ , Bereich'- rr'v^:ii;, int <:»n niob?; p.vn-Jrfcisoh, den II°ngn»>;=· -

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J)an orfindungsgeroäße V/undhei3material kann verwendet werden, um eine Wundstelle zu schützen, beispielsweise eine durch Schneiden, Schrammen UBW. verursachte Verletzung, eine Verbrennung, Geschwüre, welche auf der Körperoberfläche entstanden sind, Wundflächen "bei chirurgischen Operationen, Hohlräume, welche nach der Zahnextraktion hinterbleiben usw. Da es die Bildung stabilisierten Fibrins an der Wundstelle für lange Zeitdauer wirksam fördert, beschleunigt es auffallend ein Heilen und besitzt gleichzeitig eine Wirkung, örtliche Schmerzen zu lindern. Ein Wundheilmaterial, welches

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sowohl Faktor XIIl als auch Thrombin fixiert aufweist, besitzt eine weit größere heilungsfördernde Wirkung als solches Material, welches nur Paktor XIII fixiert aufweist, weil Thrombin die Bildung nicht stabilisierten Fibrins, einer Vorstufe des stabilisierten Fibrins, fördert.

Wenn ein abaorbierbares Material wie Kollagen, Gelatine, PoIyglycolsäure, Polymilchsäure, ein GIycolsäure/Milchsäure-Copolymeres, Poly glutaminsäure oder Amylose als Material für das er— findungsgemäße Wundheilmaterial verwendet wird, so braucht die Struktur nach vollendetem Heilen nicht entfernt zu werden. Es wird insbesondere vorzugsweise an Stellen verwendet, welche die Förderung der Bildung stabilisierten Fibrins im Körper erfordern wie etwa an anastomotischen Stellen. Hiervon sind Gelatine, Kollagen, Polyglycolsäure und Polymilchsäure besonders geeignet.

Das erfindungsgemäße Wundheilmaterial kann leicht sterilisiert werden unter Anwendung eines gasförmigen Germizids wie etwa Äthylenoxyd. Es kann aber auch sterilisiert werden durch Bestrahlung mit Röntgenstrahlen, Gammastrahlen, !Neutronen und Elektronen.

Die folgenden Beispiele veranschaulichen die Erfindung spezieller, ohne daß diese Beispiele über den Rahmen der Erfindung etwas aussagen sollen. Als Faktor XIII wird Faktor XIII-Konzentrat (ein Produkt der Behringwerke AG, welches von Plazenta abgeleitet ist) verwendet. Als Thrombin wird menschliches Plasmathrombin (ein Produkt von Midori Juji K.K.) verwendet.

Die Bildung stabilisierten Fibrins wird in folgender Weise bestätigt. Im Falle einer Struktur, welche nur Faktor XIII fixiert aufweist, wird die Struktur mit einer wässrigen Lösung behandelt, welche Thrombin (25 Einheiten/ml) und Ca⁺² (o,o25 Mol/Liter) enthält, um den Faktor XIII zu aktivieren, und ein Film aus nicht stabilisiertem Fibrin wird auf der Oberfläche der Struktur unter Verwendung von Fibrinogen und Thrombin gebildet. Die Probe läßt man 1 Stunde bei 310⁰K (37⁰C) stehen und man testet auf die BiI-

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dung stabilisierten Fibrins. Im Falle einer Struktur, welche sowohl Faktor XIII und Thrombin fixiert aufweist, behandelt man die Struktur mit einer wässrigen Lösung, welche Ca enthält, um Faktor XIII zu aktivieren, bringt in eine o,5/&ige wässrige Fibrinogenlösung, und läßt 1 Stunde bei 51O⁰K (37°C) stehen. Dann wird getestet, um zu bestimmen, ob das auf der Oberfläche der Struktur gebildete Fibrin stabilisiertes Fibrin ist. Nicht stabilisiertes Fibrin löst sich in 1 $iger Monochloressigsäure auf, stabilisiertes Fibrin hingegen nicht. Daher wird die Löslichkeit des in obiger Weise gebildeten Fibrinfilmes in 1 $iger Monochloressigsäure getestet, um die Bildung stabilisierten Fibrins zu bestimmen.

Beispiel 1

Nach dem Verfahren von G-.Kay und Mitarbeitern [G-.Kay, B.M. Crook, Nature, 216, 514 (1967)], wird eine chirurgische Gaze (aus Baumwolle, 5 cm χ 5 cm) in 2o ml einer 1-n wässrigen natriumhydroxydlösung eingetaucht. Unter Rühren setzt man eine Azetonlösung von Cyanurchlorid (gebildet durch Auflösen von 3,69 Gramm Cyanurclorid in 2o ml Azeton) hinzu. Die Reaktion vollzieht man bei 293 K (2o°C) loMinuten lang. Die Gaze, welche eine Chlortriazinylgruppe eingeführt aufweist, wird mit Azeton und dann mit Wasser gewaschen und bei 293⁰K (2o°C) 3 Minuten mit einer wässrigen Lösung von Faktor XIII (63 Einheiten/ml) behandelt, woraufhin ein Waschen mit physiologischer Salzlösung folgt.

Der Fibrinfilm, welcher auf der Oberfläche der chirurgischen Gaze mit kovalent gebundenem FaktorXHI gebildet ist, löst sich in 1 $iger Monochloressigsäure nicht auf.

Beispiel 2

Es wird eine chirurgische Gaze in der gleichen Weise behandelt wie in Beispiel 1 mit der Ausnahme, daß man an Stelle der Lösung des Faktors XIII ein Gemisch verwendet, welches aus 4 ml einer

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Lösung des Paktors XIII (125 Einheiten/ml) und 4 ml physiologischer Salzlösung von Thrombin (200 Einheiten/ml) zusammengesetzt ist.

Das auf der Oberfläche der chirurgischen Gaze mit !covalent gebundenem Faktor XIII und Thrombin gebildete Fibrin löst sich in 1 foigev Monochloressigsäure nicht aufο

Beispiel 3

Einen Polyäthylenterephthalattaft (1o cm χ 1o cm) taucht man in. ein Gemisch einer Io feigen wässrigen Lösung ύοώ. .Polyäthjlenimin und Methanol mit der fünffachen Volumenmenge der Polyäthyleniminlösungj und man läßt 3o Minuten bei Raumtemperatur stehen» Dann. setzt man eine 4 Gew_o?»ige methanol!sehe Lösung von Bicyclohexylcar-bodiimid in einer zweifachen Yolumenmenge der wässrigen PoIyäthyleniminlösung hinzu und man läßt den Taft ferner für 2 Stunden bei Baumtemperatur stehen=, Der Taft wird entnommen _ΰ mit Methanol gewaschen und getrocknet= Den mit PoXyätfaylenimin "behandelten Taft bringt man in eine AsetonlÖsirag, welche 3 Gew.jJ eines Methylvinyläther/Maleinsäureanhydrid-Gopolymeren eathält₉ läßt 2 Stunden bei Raumtemperatur stehen und wäscht dann mit Azeton. Man trocknet den sich ergebenden TaJTt₃ läßt ihn 24 Stunden bei 277°K (4°C) in einer Lösung des FaktorsXIII (63 Einheiten/ ml) stehen^ und wäscht mit physiologischer Salzlösung. Dez* auf der Oberfläche, des Taftes mit kovalent gebundenem Faktor XIII gebildete Fibrinfilm löst sich in 1 jSiger Monochloressigsäure nicht auf.

Beispiel 4

Es wird ein Polyäthylenterephthalattaft in der gleichen Weise wie in Beispiel 3 behandelt mit der Ausnahme, daß an Stelle der Lösung des Faktors XIII ein Gemisch verwendet wixd, welches aus 4 ml einer Lösung des Faktors XIII (125 Einheiten/ml) und 4 ml physiologischer Salzlösung (2oo Einheiten/ml) besteht.

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Das auf der Oberfläche des Taftes mit kovalent gebundenem Faktor · XIII und Thrombin gebildete Fibrin löst sich in 1 $iger Monoehloressigsäure nicht' auf.

Beispiel 5

Einen Gelatineschwamm (5 ca χ 2,5 cas χ o,5 cm) (Produkt der Yamanouchi Pharmaceutical Go», ltd») taucht man für 1o Minuten in 1o ml einer wässrigen Lösung des Faktors XIII (63 Einheiten) und lyophilisiert dann 2o Stunden. Das auf. der Oberfläche des Gelatine schwämme s mit ionisch gebundenes Faktor XIII gebildete Fibrin löst sich in 1 ^iger Monocfaloressigsäure nicht auf.

Beispiel 6

Den gleichen GeIa tine sch warn, wie er in Beispiel 5 verwendet wurde, taucht man in 1o ml der gemisciitsn Lösung des !Faktors- XIII und. Thrombins, welche in Beispiel 2 '/erwendet wurde, ein, und dann lyophilisiert man 2o Stunden. Bas Fibrin, welches auf der Oberfläche des GeIa t ine schwämme s mit ionisch gebundenem Faktor XIII und Thrombin gebildet wurde, löst sich in 1 ?£iger Monochloressigsäure nicht auf.

Beispiel 7

Ein im Handel erhältliches absorbierbares Nahtmaterial von Kollagen (Cut Gut, Piain Type, NESCO Suture Laboratories), ein im Handel erhältliches absorbierbares geflochtenes Nahtmaterial von Polyglycolsäure (Produkt der American Cyanamid Copany), und ein absorbierbares geflochtenes Nahtmaterial von Polymilch3äure, welches gemäß der japanischen Patentveröffentlichung 31 6°,6/7o bereitet wurde, werden je in der gleichen Weise behandelt wie in Beispiel 5. Das auf jeder der Oberflächen jedes der Nahtmaterialien mit fixiertem Faktor XIII als Ergebnis gebildete Fibrin löst

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sich in 1 ^iger Monochloressigsaure nicht auf.

Der Paktor XIII wird fixiert durch ionische Bindung im Falle des Nahtmaterials aus absorbierbarem Kollagen, und durch Adsorption im Falle der Nahtmaterialjen aus Poly glycolsäure und Polymilchsäure.

'Beispiel 8

Die drei in Beispiel 7 verwendeten Nahtmaterialxen werden in der gleichen Weise behandelt wie in Beispiel 6. Das auf der Oberfläche der Nahtmaterialien mit daran fixiertem Faktor XIII und Thrombin gebildete Fibrin löst sich in 1 $iger Monochloressigsaure nicht auf.

Faktor XIII und Thrombin werden fixiert an das nahtmaterial aus absorbierbarem Kollagen durch ionische Bindung, und an die Nahtmaterialien aus Polyglycolsäure und Polymilchsäure durch Adsorption.

Beispiel

Das gleiche im Handel erhältliche absorbierbare Nahtmaterial aus Kollagen, welches in Beispiel 7 verwendet wurde, taucht man in ein Gemisch aus 2 ml wässriger Lösung des Faktors XIII (125 Einheiten/ml), 2 ml physiologischer Salzlösung von Thrombin (2oo Einheiten/ml) und 4 ml einer wässrigen Lösung von 1 -Cyclohexyl -3-(2-morpholinoäthyl)carbodiimid-metho-p-toluoleulfonat (4o mg/ml) ein, man läßt 2o Stunden bei 343°K (7o°C) stehen und wäscht dann mit physiologischer Salzlösung.

Das auf der Oberfläche des absorbierbaren Nahtmaterials aus Kollagen mit kovalent gebundenem Faktor XIII und Thrombin gebildete Fibrin löst sich in 1 $iger Monochloressigsaure nicht auf.

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Beispiel 1o

Ein Testrohr "beschickt man mit 8 ml destilliertem Wasser, 2 Gramm Gelatine und 5o mg ITatriumlaurylsulfat und das Gemisch löst man auf, indem man es auf 3o3 bis 3o8°K (3o bis 35 C) erwärmt. Die Lösung wird stürmisch gerührt, während sie bei 3o3 bis 3o8°K gehalten wird, bis sie das Fünffache ihres ursprünglichen Volumens bildet. Zur Zeit des Schäumens setzt man o,o4 ml einer 4o folgen wässrigen Lösung von Glyoxal und 1 ml einer wässrigen Lösung von Faktor XIII (63 Einheiten/ml) hinzu. Den sich ergebenden Schaum gießt man in Blattform und lyophilisiert. Das auf der Oberfläche des Gelatineschwammes gebildete Fibrin löst sich in 1 $iger Monochloressigsäure nicht auf.

Der Faktor XIII wird auf dem Gelatine schwamm durch Einschließen und ionische Bindung fixiert.

Beispiel 11

Man bereitet einen Gelatineschwamm in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 mit der Ausnahme, daß man anstelle der wässrigen Lösung des Faktors XIII die gemischte Lösung von Faktor XIII und Thrombin verwendet, welche in Beispiel 2 verwendet wurde. Das auf der Oberfläche des Gelatineschwammes gebildete Fibrin löst sich in 1 $iger Monoqhloressigsäure nicht auf.

Faktor XIII und Thrombin werden am Gelatineschwamm fixiert durch Einschluß und ionische Bindung.

Die Erfindung ist nicht auf die hier beispielsweise wiedergegebenen Ausführungsformen allein abgestellt. Im Rahmen der Erfindung sind dem Fachmann vielmehr mannigfaltige Abänderungen ohne weiteres gegeben.

Claims

1. Material zum Heilen von Wunden* welches die Bildung stabilisierten Fibrins an einer Wunastelle über eine lange Zeitspanne hinweg wirksam fördern kann, dadurch gekennzeichnet» daß das Material eine Struktur besitzt, welche Blutkoagulationsfaktor XIII an sich fixiert aufweist.

2. Material nach.Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Struktur ein absorbierbares Material ist.

3. Material nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das absorbierbare Material Gelatine ist.

4. Material nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das absorbierbare Material Kollagen ist.

5. Material nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das absorbierbare Material Polyglycolsäure ist.

6. Material nach Anspruch 2_r dadurch gekennzeichnet, daß das absorbierbare Material Polymilchsäure ist.

telefon (aas) aaaaea

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telex οβ-aa sso

monapat

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7. Material zum Heilen von Wunden, welches die Bildung stabilisierten Fibrins an einer Wundstelle über eine lange Zeitspanne hinweg wirksam fördern kann, dadurch gekennzeichnet, daß das Material eine Struktur besitzt, welche Blutkoagulationsfaktor XIII und Thrombin an sich fixiert aufweist.

8. Material nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Struktur ein absorbierbares Material ist.

9. Material nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß das absorbierbare Material Gelatine ist.

10. Material nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß das absorbierbare Material Kollagen ist»

11. Material nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß das absorbierbare Material Polyglycolsäure ist.

12. Material nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß das absorbierbare Material Polymilchsäure ist.

13. Material nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Faktor XIII in einer Menge fixiert ist, welche ausreicht, um die Bildung stabilisierten Fibrins zu fördern.

H. Material nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß der Faktor XIII und Thrombin in Mengen fixiert sind, welche ausreichen, um die Bildung stabilisierten Fibrins zu fördern.

15. Material nach Anspruch 1 und 7, dadurch gekennzeichnet, daß Calciumion zusätzlich an der Struktur fixiert ist.

16. Material nach Anspruch 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß eine pharmazeutische Substanz zusätzlich an der Struktur fixiert ist.

17. Material nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß die pharmazeutische Substanz zu den Antiplasminen (azrfciplasmins),

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Antibiotika, Antiviral en (äntivirals )·, SuIf oiianiiden und Antiinfektionsstoffen zählt.

18. Material nach Anspruch 1 oder T, dadurch gekennzeichnet, daß die Struktur in Form eines Einzelfadens j einer fasrigen An ordnung, eines Filmes oder eines Schwammes vorliegt.

19. Material nach Anspruch 1 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß das Material eine chirurgische Naht bzw. Operationsnaht ist»

20. Material nach Anspruch 1 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß das Material ein Verband ist.

21. Material nach Anspruch 1 oder 7» dadurch gekennzeichnet, daß das Material eine Bandage ist.

22. Material nach Anspruch 1 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß das Material ein Schwamm ist.

25. Material nach Anspruch 1 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß das Material eine Füllung für den Hohlraum eines extrahierten Zahnes ist.

24. Material nach Anspruch 2 oder 8, dadurch gekennzeichnet, daß das Material ein Gelatineschwamm ist.

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