DE2410945A1 - Vorrichtung zur bestimmung des wertes der blutplaettchenaggregation - Google Patents

Vorrichtung zur bestimmung des wertes der blutplaettchenaggregation

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    • G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
    • G01N33/49—Blood
    • G01N33/4905—Determining clotting time of blood

Description

PATENTANWÄLTE
DR. ING. A. VAN DERWERTH DR. FRANZ LEDERER
21 HAMBURG 9O 8 MÜNCHEN 80
WILSTORFER STR 32 TEL. (ΟΛΟΙ 77 OS 61 LUCILE-CRAHN-STR. 22 · TEL. CO89>
München, 7. März 1974 X 223
UHILEVER N.V.
Burgemeester s * Jacot>plein 1 , Rotterdam, Niederlande
Vorrichtung zur Bestimmung des Wertes der Blutplättchenaggregation
Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung zum Bestimmen des Wertes der spontanen und experimentell induzierten Blutplättchenaggregation.
Das Prinzip, auf dessen Grundlage die erfindungsgemäße Vorrichtung arbeitet, beruht auf der von der Anmelderin bereits früher entwickelten Technik, bei welcher die durch Adenosindiphosphat (ADP) in Ratten induzierte Aggregation von Blutplättchen bestimmt wird, indem die Aggregate bzw. Klumpen in einer künstlich montierten Schleife bzw· Umleitung im artiellen Kreislauf mit Hilfe eines Filters eingefangen werden, siehe die Veröffentlichung in British Journal of Haematology, Vol. 19 Nr. 3, September 1970, S. 321 - 329. Dies schien eine vorteilhafte Methode zur Abschätzung der Wirkung von Medikamenten jedoch auch von verschiedenen Arten von verspeisten Diätf ette-n auf die Aggregationsneigung bzw. Elumpungsneigung von Plättchen zu sein.
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Jedoch schien die Anwendung dieser Arbeitstechnik auf andere Tiere als Hatten und auf Menschen weniger vorteilhaft zu sein, und zwar wegen der ziemlich schweren Katherisierung einer Arterie.
Aufgabe der Erfindung war die Schaffung einer Vorrichtung,wodurch dies vermieden wird und in welcher venöses Blut durch das Filter entweder direkt aus einer Vene oder indirekt aus einer konditionierten Versorgung gezogen wird.
Die erfindungsgemäße Vorrichtung zur Messung der spontanen Aggregation zeichnet sich dadurch aus, daß sie die folgenden Bestandteile , die mittels Bohrleitungen in Serie miteinander verbunden sind, umfaßti Einrichtungen zum Einführen des zu untersuchenden Blutes, ein filter, durch welches das Blut mit Hilfe einer dahinter angeordneten Pumpe gesaugt wird, während Einrichtungen zum Messen des Druckes des Blutes vor und hinter dem Filter vorgesehen sind, und eine Aufzeichnungseinrichtung zum Aufzeichnen des Druckabfalles über das Filter und des Druckes vor dem Filter während der für die Messung beanspruchten Zeit.
Zur Bestimmung des Wertes einer experimentell induzierten Aggregation mit dieser Vorrichtung können unmittelbar hinter dem Einlaßpunkt Einrichtungen zur Zugabe einer Substanz zur Stabilisierung und/oder zur Förderung der Aggregation und/oder eines Antikoagulans wie auch Mischeinrichtungen zum innigen Vermischen der zugesetzten Substanz oder der zugesetzten Substanzen mit dem Blut angeordnet sein.
Hier können ein Teil des Rohrleitungssystems, eine Mischkammer und das Filter zu einer einfach austauschbaren Einheit miteinander vereinigt sein. Ein Element kann angebracht werden, um die Mischkammer, das Filter und die damit verbundenen Bohre auf Körpertemperatur zu halten.
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Es wurde gefunden, daß die erfindungsgemäße Vorrichtung bei Menschen angewandt werden kann, siehe "The Lancet", 26. 5. 1973» S. 1155 - 1157» sowie auch bei den meisten der üblicherweise verwendeten Labortiere einschließlich Ratten und Kaninchen.
Mit der erfindungsgemäßen Vorrichtung wurden einige Experimente an freiwilligen Versuchspersonen durchgeführt, deren Ergebnisse im folgenden angegeben sind. Alle Werte beziehen sich auf die Aggregationszeit oder Klumpungszeit, tA, wobei dies die Zeit ist, um einen Standardwert der Filterverstopfung zu erhalten. Die Zeit ist um so langer, je niedriger die Aggregationsneigung bzw· Klumpungsneigung ist« Falls nichts anderes angegeben ist, wurden alle Experimente unter Verwendung von Heparin (5 E./ml Blut) als Antikoagulans durchgeführt.
a) Einfluß des Filterdurchmessers auf das Aggregationsansprechen
Das Ansprechen auf Aggregation bei freiwilligen Versuchspersonen, gemessen mit einem Filter mit 2,3 nun 0 ist bemerkenswert höher (Pg » 0,05) (tA = kurzer) als bei der Messung mit einem Filter von 3»0 mm /ö.
Filterdurchmesser 2,3 mm: log tA « 2,2960 ± 0,0785;
tA « 198 s; η « 10 Filterdurchmesser 3,0 mm: log tA » 2,4165 ± 0,0294;
tA « 261 ε; η - 10
b) Vergleich von Heparin und Hirudin auf das Aggregationsansprechen
Bei Verwendung von Hirudin (0,1 mg/ml Blut) als Anitkoagulans ist der Wert der Aggregation nicht nennenswert von demjenigen '· verschieden, der bei mit Heparin versetztem Blut beobachtet vurde.
Heparin: log tA « 1,974 ± 0,078; tA » 94 s; η - 12
Hirudin: log tA - 1,975 * 0,092; tA « 94 s; η « 12
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c) Vergleich, von Heparin und Natriumzitrat auf das Aggregationsansprechen
^ Das Aggregationsansprechen bei der Infusion von Natriumzitrat
" (38 mg/ml Blut) ist bemerkenswert niedriger (P9-c0,05), (t. =
länger) als dasjenige bei einer Heparininfusion.
Zitrat: log 1^ » 2,227 - 0,1041; tA » 169 s; η « 7
j* Heparin:log tA - 1,899 * 0,0557; tA - 79 s; η - 7
d) Wirkung von Prostaglandin Ex. (PGE^)
Die extrakorporale PGE^-Infusion (Endkonzentration 100 ng/ml
Blut) verlängert den tA-¥ert beträchtlich (P2< 0,05) im Vergleich mit einer Salzinfusion beim gleichen Objekt.
Salzlösung: log tA - 2,193 - 0,1015; tA « I56 s; η - 7
tA « 2,324 £ 0,080; tA - 211 s; η » 7
e) Wirkung von PGE^ in mit Zitrat versetztem Blut
PGE-, exbrakorporal in mit Zitrat versetzes Blut infusiert
(Endkonzentration 100 ng/ml) setzt das Aggregationsansprechen beträchtlich im Vergleich zu Salzlösung, die in dasselbe
Objekt infusiert wird, herab (Pp<0,05).
Salzlösung: log tA - 2,219 - 0,0706; tA « 166 s; η - 13
PGE^Infusion: log tA « 2,34-3 ± 0,0512; tA - 220 s; η « 13
f) Einfluß von Aeetylsalicylsäure (ASA)
Die orale Applikation von 1 g ASA induziert ein bemerkenswert geringeres Aggregationsansprechen (Pp » 0,02) als ein Placebo Placebogruppe: log tA » 1,923 - 0,0887; tA » 84 s; η « 10
f ASA-Gruppe : log t. - 2,228 ± 0,08555 t. - 169 s; η - 10
g) Wirkung des Linolsauregehaltes der Diät
Bei der Aufnahme einer Diät während 6 Jahren, welche 12 cal%
Linolsäure enthielt, ergab sich eine bemerkenswert niedrigere
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Plättchenaggregation (Pp<0,001) als bei einer Diät, welche 4 cal^ Linolsäure enthielt.
12 cal% Linolsäure: log tA - 1,992 ± 0,040; tA - 98 s; η « 38 4 cal% Linolsäure: log tA » 1,802 ± 0,024; tA - 63 s; η - 38
Dieses Experiment ist mit mehr Einzelheiten in "The Lancet", 26. 5. 1973, S. 1155 - 1157 (Anhang 11) beschrieben.
Die erfindungsgemäße Vorrichtung wird in folgenden mit Bezug auf die schematische Zeichnung näher erläutert.
Das zu untersuchende Blut kann entweder direkt aus einer Vene mit Hilfe einer Nadel 1 herausgenommen werden oder aus einer konditionierten Versorgung eingesaugt werden. Bei 2 besteht die Möglichkeit einer Zugabe einer Substanz, welche die Aggregation bzw. das Klumpen stabilisiert und/oder fördert, oder für die Zugabe eines Antikoagulans. In einer Mischkammer 3 wird das so erhaltene Gemisch innig vermischt. Zu diesem Zweck ist ein magnetisches Misch- bzw. Bührsystem sehr geeignet. Die Mischung wird dann durch ein Filter 4 gesaugt, wobei dies mit Hilfe einer mit 5 bezeichneten Pumpe durchgeführt wird. Die Pumpe wird durch einen Motor 6 getrieben, der ebenfalls zum Dosieren der Substanzen bei 2 verwendet werden kann. Die Mischkammer 3 und das Filter 4, zusammen mit den damit verbundenen Rohren werden auf einer Temperatur von 37 0C mit Hilfe eines Heizsystems 12 gehalten. Der Druck in der Mischung vor und hinter dem Filter wird mit Hilfe von zwei Druckwandlern oder Druckmeßgrößenumformern 7 und 8 gemessen. Die erhaltenen Werte werden elektronisch voneinander subtrahiert (ΔΡ), und das Ergebnis wird auf der Aufzeichnungsapparatur aufgezeichnet, auf welcher auch der durch den Druckwandler 7 vor dem Filter aufgezeichnete Druck als Vergleichswert aufgezeichnet wird.
In dem Diagramm der Aufzeichnungsapparatur in der Zeichnung, das lediglich als Beispiel dient, ist eine Messung wiedergegeben, welche
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ι in diesem Fall wie folgt verläuft; Unmittelbar vor dem Starten f der Messung wurde Natriumzitratlösung bei 2 eingeführt, um den |. Einschluß von Luftbläschen während der Verbindung des Systems I mit der mit einer Nadel angestochenen Vene zu verhindern. Unmittelbar nach der Verbindung des Systems mit dem zu untersuchenden Blut wurde die Saugpumpe 5 angestellt, die Zitratinfusion gestoppt < und eine Infusion mit Heparin begonnen. Dieser Zeitpunkt wird ι* automatisch auf der Druckdifferenzkurve (10) markiert. In dem ι Augenblick, wo die Druckdifferenz den Wert von 5 mm Quecksilber
* erreichte, wurde die Heparininfusion gestoppt und die Zitrat-
f infusion angeschaltet. Dieser Augenblick ist ebenfalls auf der
* Kurve gekennzeichnet (11). Nachdem ausreichend Information erhal- I ten worden ist, wird die Saugpumpe abgestellt, danach wird die
■ Nadel aus der Vene entfernt. Aus dem Verlauf einer solchen und ähnlicher Kurven können Parameter in bezug auf die Aggregation und die Deaggregation berechnet werden.
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Claims (4)

  1. Pat entansprüche
    Vorrichtung zur Bestimmung des Wertes der spontanen Blutplättchenaggregat ion, dadurch gekennzeichnet, daß sie mit folgenden Bestandteilen, die mittels !Rohrleitungen in Serie miteinander verbunden sind, versehen ist: Einrichtungen zum Einführen des zu untersuchenden Blutes, ein Filter, durch welches das Blut mit Hilfe einer dahinter angeordneten Pumpe gesaugt wird, während Einrichtungen zur Messung des Druckes des Blutes vor und hinter dem Filter vorgesehen sind, und eine Aufzeichnungseinrichtung zum Aufzeichnen des Druckabfalles über das Filter und des Druckes vor dem Filter während der für die Messung beanspruchten Zeit.
  2. 2. Vorrichtung nach Anspruch 1 zur Bestimmung des Wertes der spontanen und experimentell induzierten Blutplättchenaggregation, dadurch gekennzeichnet, daß unmittelbar nach der Einlaßstelle Einrichtungen zur Zugabe einer Substanz zur Stabilisierung und/oder Förderung der Aggregation oder zur Zugabe eines Antikoagulans wie auch Mischeinrichtungen zum innigen Veraischen der zugesetzten Substanz oder der zugesetzten Substanzen mit dem Blut montiert sind.
  3. 3. Vorrichtung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß ein Teil des Rohrleitungssysteme, die Mischkammer und das Filter zu einer einfach austauschbaren Einheit miteinander vereinigt sind.
  4. 4. Vorrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß ein Element montiert ist, um die Hisehkammer, das Filter und die Druckmeßgrößenumformer und die damit verbundenen Rohre auf der gewünschten Temperatur zu halten.
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    Leerseite
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