DE202008000834U1 - Composition and reagent for CTLA-4 and uses thereof - Google Patents
Composition and reagent for CTLA-4 and uses thereof Download PDFInfo
- Publication number
- DE202008000834U1 DE202008000834U1 DE202008000834U DE202008000834U DE202008000834U1 DE 202008000834 U1 DE202008000834 U1 DE 202008000834U1 DE 202008000834 U DE202008000834 U DE 202008000834U DE 202008000834 U DE202008000834 U DE 202008000834U DE 202008000834 U1 DE202008000834 U1 DE 202008000834U1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- ctla
- cells
- human
- antibody
- reagent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56966—Animal cells
- G01N33/56972—White blood cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Abstract
Reagenz, das die extrazelluläre Domäne von CTLA-4 erkennt, indem es an eine Region von CTLA-4 bindet, wobei das Reagenz die Ligandenbindung von CTLA-4 nicht blockiert, und wobei das Reagenz einen Antikörper oder ein Antigen bindendes Antikörperfragment aufweist.reagent which recognizes the extracellular domain of CTLA-4, by binding to a region of CTLA-4, the reagent containing the Ligand binding of CTLA-4 not blocked, and wherein the reagent an antibody or an antigen-binding antibody fragment.
Description
Die Erfindung betrifft die Untersuchung von humanem CTLA-4 (cytotoxisches T Lymphozyten-Antigen-4 oder CD152), das einen essentiellen Rezeptor darstellt, welcher bei der negativen Regulation der T-Zellaktivierung beteiligt ist. Insbesondere beruht sie auf der Identifizierung eines Antigens, das für das humane CTLA-4-Molekül spezifisch ist. Sie betrifft auch einen Antikörper, inklusive eines vollständig humanen monoklonalen Antikörpers, der spezifisch an dieses Antigen bindet. Die Erfindung betrifft auch verschiedene Verwendungen des Antikörpers wie die Detektion und Reagenzien zur Isolation.The The invention relates to the study of human CTLA-4 (cytotoxic T lymphocyte antigen-4 or CD152), which is an essential receptor which is involved in the negative regulation of T cell activation is involved. In particular, it is based on the identification of a Antigen, specific for the human CTLA-4 molecule is. It also affects an antibody, including one fully human monoclonal antibody, which specifically binds to this antigen. The invention relates Also, various uses of the antibody such as Detection and reagents for isolation.
Laufende
Studien über das Zusammenspiel der Wechselwirkungen zwischen
T-Zellen und Antigen präsentierenden Zellen (APCs) führten
zur Vorhersage von dramatischen Veränderungen, die in bestimmter Hinsicht
therapeutische Ziele und medizinisches Potential offenbart haben.
Es wurde beispielsweise gezeigt, dass die spezialisierte und dynamische
molekulare Maschinerie, die in der engen Verbindung gebildet wird,
die durch Wechselwirkung zwischen einer T-Zelle und einer APC entsteht,
Immunantworten reguliert (
Die
Kartierung humanen CTLA-4s ordnete ihm eine Bande q33 des Chromosoms
2 zu. Es wurde in die Gruppe von immunmodulatorischen Rezeptoren
klassifiziert, die kollektiv als CD28 Superfamilie bezeichnet werden
(
Begrifflich
stellt die Wechselwirkung von CD28 auf einer Lymphozyte mit B7-Proteinen
auf einer APC ein erforderliches costimulatorisches zweites Signal
dar, das bewirkt, dass eine T-Zelle auf ein Antigen voll antworten
kann. Die ursprünglichen Familienmitglieder in diesem Signaltransduktionsweg
bestehen aus zwei B7-Liganden, CD80 (B7-1) und CD86 (B7-2). Diese
haben Spezifitäten für die beiden Rezeptoren CD28
und CTLA-4. CD28 wird auf der Oberfläche von T-Zellen konstitutiv
exprimiert, während die Oberflächenexpression von
CTLA-4 in einem begrenzten Umfang nach der T-Zellaktivierung schnell
hochreguliert wird. Auch die Kinetiken der Expression von CD80 und
CD86 sind verschieden. CD86 wird auf ineinander greifenden Dendritenzellen,
Langerhanszellen, Dendritenzellen des peripheren Bluts, B-Gedächtniszellen
und B-Zellen des Keimzellzentrums konstitutiv exprimiert. Des Weiteren
ist CD86 auf niedrigem Niveau auf Monozyten exprimiert. Durch IFN-γ-Stimulation
wird es dort jedoch schnell hochreguliert, was zu der Hypothese
geführt hat, dass CD86 primär eine Rolle beim
Initiieren einer Immunantwort einnimmt. Andererseits kann CD80,
das später exprimiert wird, bei der Verstärkung
oder Regulation der Antwort eine Rolle spielen. Neu identifizierte
Familienmitglieder verwandter Moleküle sind zum Beispiel:
das induzierbare kostimulatorische Molekül ICOS (engl.
inducible costimulatory molecule), der PD-1 Rezeptor, also der Rezeptor
des Apoptose-induzierenden Proteins PD-1 (Programmed Death 1), das
B- und T-Lymphozyten dämpfende BTLA (engl. B and T lymphocyte attenuator),
B7-H1, B7-H2, B7-H3, B7-H4, PD-1 Ligand 1 (PD-L1) und PD-L2 (
Durch
RT-PCR-Klonierung von nichtaktivierten T-Zellen in Tieren sowie
Menschen wurde eine kürzere lösliche Form von
CTLA-4 erzeugt, der die Transmembranregion fehlt (
Dem
Fachmann ist auch bekannt, dass die Immunreaktivität durch
verschiedene Typen regulatorischer T-Zellen (Treg-Zellen)
kontrolliert wird (
Konventionelle
Techniken zur Isolierung dieser seltenen Population an Treg-Zellen beinhalten im Prinzip oft ein
zweistufiges Verfahren der Selektion mannigfaltiger Antikörper
(Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Deutschland; BD Biosciences
Pharmingen, San Jose, CA). Kurz gesagt wird zunächst ein
Cocktail monoklonaler Antikörper verwendet, der andere
CD-Antigene erkennt, die auf Erythrozyten, Plättchen, Monozyten
und peripheren Leukozyten usw. exprimiert werden. CD4+-Lymphozyten,
die nicht an diesen Cocktail binden, werden dadurch zurückbehalten.
Anschließend selektiert ein monoklonaler anti-humaner CD25
Antikörper positiv die CD25+-Zellen
aus den angereicherten CD4+-Zellen, was
CD4+CD25+-Treg-Zellen ergibt. Jedoch lässt
sich nicht vermeiden, dass während des Verfahrens eine
Exposition auf Umweltpathogene eintritt. Dadurch wird die herkömmliche
Effektor-T-Zell-Aktivierung ausgelöst und folglich auch
die Expression von CD25 auf humanen CD4+-Zellen.
Dadurch wird die Identifizierung der Population der Treg-Zellen
eine schwierige Aufgabe. Darüber hinaus wurden sogar natürliche
CD4–CD8+ Treg-Zellen von
Die
Assoziation und der potentielle Synergismus zwischen der suppressiven
Funktion von Treg-Zellen und der CTLA-4-Expression
ist ferner von Interesse. Für nichtaktivierte T-Zellen
unüblich, exprimieren Treg-Zellen
konstitutiv CTLA-4 (
Da Treg-Zellen, zusammen mit sCTLA-4, beim Verhindern der Transplantatabstoßung und der Transplantat-Wirt-Reaktion (auch Graft-versus-Host-Reaktion genannt) beteiligt sind und eine dominierende Wirkung bei der Kontrolle der Autoimmunität und dem Bewahren der peripheren Toleranz haben, können spezifische Immuntherapien, die darauf abzielen, sie zu isolieren und dann zu expandieren, den klinischen Verlauf verschiedener T-Zell-vermittelter Pathologien verbessern. Da CTLA-4 die wichtigsten hemmenden costimulatorischen Signale bereitstellt, kann vom Fachmann angenommen werden, dass diese Moleküle neue Ziele für die Immuntherapie und Diagnose darstellen.Because T reg cells, along with sCTLA-4, are involved in preventing graft rejection and graft-versus-host reaction, and have a dominant effect in controlling autoimmunity and preserving the peripheral Tolerance, specific immunotherapies that aim to isolate and then expand them may improve the clinical course of various T-cell mediated pathologies. Since CTLA-4 provides the major inhibitory costimulatory signals, it will be appreciated by those skilled in the art that these molecules are novel targets for immunotherapy and diagnosis.
Untersuchungen
der physiologischen Funktion und der praktische Einsatz von CTLA-4
wurden durch die Gewinnung von monoklonalen Antikörpern
(mAbs) möglich. Der erste beschriebene anti-humane CTLA-4 mAb
aus Maus (Klon 11D4) ließ vermuten, dass ein Blockieren
von CTLA-4-Signalwegen ein positives Signal darstellen könnte,
das mit jenem synergistisch wirkt, das durch CD28 bewirkt wird (
Monoklonale
anti-CTLA-4 Antikörper, die durch ihre Bindung die gleichzeitige
Bindung von Liganden an CTLA-4 blockieren – hier auch „blockierende"
(monoklonale) Antikörper genannt, z. B. Klon BNI3 (
Die
Erfindung basiert auf dem Befund, dass andere Bereiche als die CDR1-ähnliche
und die CDR3-ähnliche Region von humanen CTLA-4, wie etwa
die CDR2-ähnliche Sequenz um Methionin 55, keine Rolle
bei der Bindung von Liganden wie dem B7-Liganden spielen. Monoklonale
Antikörper, die eine zuvor bestimmte Region um Methionin
55 erkennen, können somit beim Nachweisen von sCTLA-4 und/oder
beim Reinigen von Treg-Zellen verwendet
werden, wo sie besonders nützlich sind. Um die Wirkung
dieser CDR2-ähnlichen Sequenzen um Methionin 55 zu untersuchen,
haben die Erfinder einen vollständig humanen monoklonalen
IgG4λ entwickelt und besitzen denselben, der gegen diesen
speziellen Bereich gerichtet ist (
Die vorliegende Erfindung betrifft in einem ersten Aspekt ein Reagenz, das die extrazelluläre Domäne von CTLA-4 erkennt, indem es an eine Region von CTLA-4 bindet, die vorzugsweise von der CDR3-ähnlichen und der CDR1-ähnlichen Region von CTLA-4 verschieden ist. Das Reagenz blockiert dabei nicht die Ligandenbindung von CTLA-4. Das Reagenz weist einen Antikörper oder ein Antigen bindendes Fragment eines solchen auf. Die Erfindung betrifft auch ein funktionelles Derivat eines solchen Reagenzes. Das Reagenz bindet in einigen Ausführungsformen an eine Sequenz, die SEQ ID NO: 1 enthält. Das Reagenz kann ein monoklonaler Antikörper oder ein polyklonaler Antikörper sein, z. B. ein humaner Antikörper. In einigen Ausführungsformen erkennt er humanes CTLA-4 mit einer KD von etwa 4 nM oder weniger. Ein solches Reagenz kann ein humaner IgG4λ-Antikörper sein. In einigen Ausführungsformen ist das Reagenz in einem Menschen nicht immunogen.The present invention in a first aspect relates to a reagent which recognizes the extracellular domain of CTLA-4 by binding to a region of CTLA-4, preferably different from the CDR3-like and CDR1-like region of CTLA-4 is. The reagent does not block the ligand binding of CTLA-4. The reagent comprises an antibody or antigen-binding fragment of one. The invention also relates to a functional derivative of such a reagent. The reagent, in some embodiments, binds to a sequence containing SEQ ID NO: 1. The reagent may be a monoclonal antibody or a polyclonal antibody, e.g. B. a human antibody. In some embodiments, it recognizes human CTLA-4 with a K D of about 4 nM or less. Such a reagent may be a human IgG4λ antibody. In some embodiments, the reagent is non-immunogenic in a human.
In einem weiteren Aspekt betrifft die Erfindung eine Zusammensetzung zum Nachweisen von humanem CTLA-4. Die Zusammensetzung weist a) einen CTLA-4-Antagonisten oder einen CTLA-4-Agonisten und b) ein wie oben definiertes Reagenz auf, das CTLA-4 nicht blockiert. Ein entsprechender Antagonist weist einen Antikörper oder ein Antigen-bindendes Fragment eines solchen auf. Ein entsprechender Antagonist weist CD80 oder ein CTLA-4-bindendes Fragment desselben auf.In In another aspect, the invention relates to a composition for detecting human CTLA-4. The composition has a) a CTLA-4 antagonist or a CTLA-4 agonist and b) a as defined above, does not block CTLA-4. One corresponding antagonist has an antibody or a An antigen-binding fragment of such on. An appropriate one Antagonist has CD80 or a CTLA-4 binding fragment thereof on.
In einem weiteren Aspekt betrifft die Erfindung die Verwendung eines wie oben definierten Reagenzes, das CTLA-4 nicht blockiert, zur Diagnose oder Behandlung einer menschlichen Krankheit, die eine Erhöhung der Aktivität von T-Zellen erfordert.In In another aspect, the invention relates to the use of a as defined above, which does not block CTLA-4 Diagnosis or treatment of a human disease that has a Increasing the activity of T cells requires.
Ebenfalls beschrieben ist eine isolierte Population regulatorischer T-Zellen (Treg). Diese Population regulatorischer T-Zellen ist unter Verwendung eines vorangehend beschriebenen Reagenzes isolierbar. Dieser Aspekt beruht auf dem Umstand, dass das oben beschriebene Reagenz bei der Isolierung von regulatorischen T-Zellen aus einer oder mehreren humanen Proben verwendet werden kann. Typischerweise wird eine solche Population regulatorischer T-Zellen unter Verwendung eines entsprechenden Reagenzes isoliert. Dabei wird eine Population von suspendierten Zellen in einer Probe mit einem wie oben definierten Reagenz, das CTLA-4 nicht blockiert, in Kontakt gebracht. Das Reagenz ist in diesem Fall in einem Menschen nicht immunogen. Es werden Zellen ausgewählt, die an das Reagenz binden, das CTLA-4 nicht blockiert. Diese Zellen sind an regulatorischen T-Zellen angereichert. Es ist möglich die Zellen aus einer humanen Probe zu gewinnen. Die Zellen dieser isolierten Population exprimieren regulatorischer T-Zellen FOXP3.Also described is an isolated population of regulatory T cells (T reg ). This population of regulatory T cells can be isolated using a previously described reagent. This aspect is due to the fact that the reagent described above can be used in the isolation of regulatory T cells from one or more human samples. Typically, such a population of regulatory T cells is isolated using an appropriate reagent. In doing so, a population of suspended cells in a sample is contacted with a reagent as defined above that does not block CTLA-4. The reagent in this case is not immunogenic in a human. Cells are selected that bind to the reagent that does not block CTLA-4. These cells are enriched in regulatory T cells. It is possible to recover the cells from a human sample. The cells of this isolated population express FOXP3 regulatory T cells.
Die angereicherte Population an regulatorischen T-Zellen kann einem Individuum per Transfusion verabreicht werden, um die Autoimmunantwort zu unterdrücken. Dabei kann die isolierte und angereicherte Zellpopulation in Zellkultur expandiert werden, bevor sie einem Subjekt verabreicht wird.The Enriched population of regulatory T cells can be one Individual be administered by transfusion to the autoimmune response to suppress. It can isolated and enriched Cell population will be expanded in cell culture before taking a Subject is administered.
Ebenfalls beschrieben ist die Verwendung einer wie oben beschriebenen isolierten Population regulatorischer T-Zellen zur Diagnose oder Behandlung eines physiologischen Zustandes, der eine Unterdrückung der Autoimmunantwort erfordert.Also described is the use of an isolated as described above Population of regulatory T cells for diagnosis or treatment a physiological condition that suppresses the Autoimmune response required.
Ebenfalls beschrieben ist eine isolierte Population an Zellen, die um regulatorische T-Zellen abgereichert ist. Eine solche Population an Zellen, die um regulatorische T-Zellen abgereichert ist, ist unter Verwendung eines im vorangehenden beschriebenen Reagenzes isolierbar. Diese um regulatorische T-Zellen abgereicherte Zellpopulation ist auf Grund der Tatsache isolierbar, dass sie an das Reagenz, das CTLA-4 nicht blockiert, nicht bindet. Diese isolierte Population an Zellen ist zumindest weitgehend frei von regulatorischen T-Zellen. Die Population an Zellen, die um regulatorische T-Zellen abgereichert ist, entspricht in diesem Fall typischerweise der negativen oder ausgeschlossenen Population an Zellen, die bei der Isolierung einer Population regulatorischer T-Zellen (s. o.) nicht ausgewählt wird, da die Zellen an das Reagenz, das CTLA-4 nicht blockiert, nicht binden. Die Zellen sind aus einer humanen Probe gewonnen worden. Die Zellen sind darüber hinaus mit einem Antigen in Kontakt gebracht worden.Also described is an isolated population of cells that are regulatory T cells is depleted. Such a population of cells that is depleted of regulatory T cells is using of a reagent described above can be isolated. These is up to regulatory T cells depleted cell population Reason for the fact that they isolate the reagent, the CTLA-4 not blocked, not binding. This isolated population of cells is at least largely free of regulatory T cells. The population to cells depleted of regulatory T cells in this case typically the negative or excluded Population of cells involved in the isolation of a population of regulatory T cells (see above) are not selected because the cells are on Do not bind the reagent that does not block CTLA-4. The cells have been obtained from a human sample. The cells are beyond been contacted with an antigen.
Ebenfalls beschrieben ist die Verwendung einer isolierten Zellpopulation, die um regulatorische T-Zellen abgereichert ist (s. o.), zur Diagnose oder Behandlung einer menschlichen Krankheit, die eine Erhöhung der Aktivität von T-Zellen erfordert.Also describes the use of an isolated cell population, which is depleted of regulatory T cells (see above), for diagnosis or treatment of a human disease that causes an increase in Requires activity of T cells.
Die hier vorgeschlagenen Verwendungen und Verfahren können zu einer erhöhten Nachweisempfindlichkeit in der sCTLA-4-Detektion führen. Es kann somit bei der Diagnose solcher Zustände eingesetzt werden, die mit einer sCTLA-4-Produktion korrelieren. Geeignete Untersuchungsverfahren sind zum Beispiel ELISA (Enzymgekoppelter Immunadsorptionstest, engl. Enzyme Linked Immunosorbent Assay), RIA (Radio Immuno Assay), FIA (Fluoreszenz-Immuno-Assay) und Durchflusscytometrie. In einer Ausführungsform wird das Reagenz aus der Gruppe ausgewählt, die aus einem Antikörper gegen die CDR2-Region von CTLA-4, einem blockierenden Antikörper gegen CTLA-4 oder einer bevorzugten Kombination aus einem Antikörper gegen die CDR2-Region von CTLA-4 und markiertem humanen CD80 besteht. Die Quantifizierung der Bindung kann durch eine Vielzahl von Verfahren, die dem Fachmann bekannt sind, durchgeführt werden. Nach einer Inkubationsperiode, die ausreicht, um ein Bindungsgleichgewicht sich einstellen zu lassen, wird der unlösliche Träger gewaschen und die verbliebene Markierung quantifiziert. Die bevorzugten Reagenzien in Kombination verstärken in Gegenwart von sCTLA-4 die Markierung und den Nachweis und setzen somit die Nachweisgrenze herab.The here proposed uses and methods can to increased detection sensitivity in sCTLA-4 detection to lead. It can thus be used in the diagnosis of such conditions which correlate with sCTLA-4 production. Suitable examination methods are, for example, ELISA (enzyme-linked Immunoadsorption test, engl. Enzyme Linked Immunosorbent Assay), RIA (radioimmunoassay), FIA (fluorescence immunoassay) and flow cytometry. In one embodiment, the reagent is selected from the group selected from an antibody against the CDR2 region of CTLA-4, a blocking antibody against CTLA-4 or a preferred combination of an antibody against the CDR2 region of CTLA-4 and labeled human CD80. Quantification of binding can be achieved by a variety of methods, which are known in the art, are performed. To an incubation period sufficient to establish a binding equilibrium to settle, the insoluble carrier is washed and the remaining mark quantified. The preferred reagents in combination amplify in the presence of sCTLA-4 the Marking and detection and thus set the detection limit down.
Die
vorliegende Erfindung kann andererseits zu einer erhöhten
Leistungsfähigkeit bei der Isolierung von Treg-Zellen
führen und sie umfasst sowohl in vitro- als auch in vivo-Verfahren
und -Verwendungen. Für Verwendungen in vitro kann eine
Zelle, die den CTLA-4-Rezeptor ohne vorangehende Aktivierung intrinsisch
besitzt, d. h. eine Treg-Zelle, aus mononuklearen
Zellen des peripheren Bluts gereinigt werden. Wirkungsvolle Reinigungsstrategien
sind dem Fachmann bekannt, inklusive Techniken der Abreicherung
und der Anreicherung. Beispielhafte Verfahren sind eine magnetische
Zelltrennung, Schwenken, auf Partikeln basierende Chromatographie
und cytometrische Sortierung von Zellen. Als ein illustratives Beispiel
kann ein monoklonaler Antikörper an einen unlöslichen
Träger gebunden werden, zum Beispiel eine Mikrotiterplatte,
magnetische Partikel oder ähnliches. Die Zelle oder Zellen
von Interesse werden dem Träger zugegeben und nicht gebundene
Bestandteile werden durch Waschen entfernt. Die T-Zelle(n) werden
abschließend gereinigt oder durch Elution isoliert. Im
Hinblick auf in vivo-Verwendungen und -Verfahren können
die Treg-Zellen in einem Säugetier
vorhanden sein, insbesondere in einem Menschen, zum Beispiel einem
Patienten, der unter einem Mangel oder einem Überschuss
an Treg-Zellen leidet und der von einer
Zunahme oder Abnahme an Treg-Zellen profitieren würde.
Zu möglichen Patienten zählen solche, die einen
niedrigen oder gar keinen Gehalt an Treg-Zellen
haben und eine Autoimmunkrankheit entwickeln, die eine Transfusion
von Treg-Zellen erforderlich macht (
In einer Ausführungsform stellt die Erfindung einen Antikörper bereit, der spezifisch an die CDR2-ähnliche Region um das Methionin 55 des humanen CTLA-4 bindet. Ein solcher Antikörper kann zum Beispiel monoklonaler Antikörper (mAb) sein. Antikörper, die in der Erfindung eingesetzt werden, sind in einigen Ausführungsformen in einem Menschen nicht immunogen. Sie binden typischerweise an ein Epitop in der extrazellulären Domäne von CTLA-4. In einer Ausführungsform ist der Antikörper ein humaner monoklonaler IgG4λ oder ein Fragment davon. Ein geeigneter Antikörper kann zum Beispiel eine Gleichgewichtskonstante (KD) von wenigstens etwa 10–6 M in Bezug auf humanes CLTA-4 haben, zum Beispiel wenigstens etwa 10–8 M. Der Antikörper kann ein IgG-Antikörper sein, wie zum Beispiel IgG4.In one embodiment, the invention provides an antibody that specifically binds to the CDR2-like region around methionine 55 of human CTLA-4. Such an antibody may be, for example, monoclonal antibody (mAb). Antibodies used in the invention are, in some embodiments, non-immunogenic in a human. They typically bind to an epitope in the extracellular domain of CTLA-4. In one embodiment, the antibody is a human monoclonal IgG4λ or a fragment thereof. For example, a suitable antibody may have an equilibrium constant (K D ) of at least about 10 -6 M with respect to human CLTA-4, for example at least about 10 -8 M. The antibody may be an IgG antibody, such as IgG4 ,
In noch einem anderen Aspekt betrifft die Erfindung CTLA-4 und eine lösliche Form dieses bestimmten Rezeptors, der die CTLA-4-Extrazellulardomäne ist. Ein monoklonaler Antikörper gegen die CDR2-ähnliche Region um das Methionin 55 kann in einigen Ausführungsformen mit Molekülen konjugiert oder an diese fusioniert sein. Diese Molekülen können z. B. die Serumhalbwertszeit desselben erhöhen. Sie können als eine pharmazeutische Zusammensetzung formuliert sein, die den monoklonalen Antikörper und einen physiologisch zulässigen Träger aufweist. Antikörper, die an die CDR2-ähnliche Region um das Methionin 55 binden, können in einigen Ausführungsformen an ein heterologes Polypeptid oder an magnetische Partikel fusioniert sein. Der Antikörper oder das entsprechende Fusionsprodukt davon können verwendet werden, um CTLA-4 zu isolieren und/oder zu reinigen.In yet another aspect, the invention relates to CTLA-4 and a soluble form of this particular receptor, which is the CTLA-4 extracellular domain. A monoclonal antibody to the CDR2-like Region around the methionine 55 may in some embodiments be conjugated to or fused to molecules. These molecules can, for. B. increase the serum half life of the same. They may be formulated as a pharmaceutical composition comprising the monoclonal antibody and a physiologically acceptable carrier. Antibodies that bind to the CDR2-like region around the methionine 55 may, in some embodiments, be fused to a heterologous polypeptide or to magnetic particles. The antibody or its corresponding fusion product can be used to isolate and / or purify CTLA-4.
In
den Abbildungen zeigt
Bei der Beschreibung der vorliegenden Erfindung werden die folgenden Begriffe verwendet, deren beabsichtigte Definitionen wie folgt sind.at The description of the present invention will be made as follows Used terms whose intended definitions are as follows.
Ein „vollständig humaner Antikörper" ist ein Antikörper, der ausschließlich humane Sequenzen enthält. Eine analoge Bedeutung haben Begriffe wie „vollständig humaner Ursprung". Ein entsprechender Antikörper kann zum Beispiel ein monoklonaler Antikörper sein.A "complete human antibody "is an antibody that is used exclusively contains human sequences. Have an analogous meaning Terms like "completely human origin" corresponding antibody may for example be a monoclonal Be antibody.
„Lösliches
CTLA-4" oder „sCTLA-4" ist ein CTLA-4-Molekül,
das weder eine Transmembrandomäne noch einen cytoplasmatischen Schwanz
enthält. Es stellt die native humane Sequenz der CTLA-4
Isoform B dar (
Ein „Agonist" ist ein Molekül, das an Zellrezeptoren binden kann wie zum Beispiel CTLA-4. Durch die Bindung kann es verschiedene biologische Wirkungen auslösen und Änderungen der Zellfunktion einleiten. Endogene Agonisten sind üblicherweise natürlich vorkommende Liganden wie zum Beispiel Neurotransmitter und, im Falle von CTLA-4, CDR80 und CDR86. Beispiele für exogene Agonisten sind Arzneimittel.An "agonist" is a molecule that can bind to cell receptors like for example, CTLA-4. By binding it can be different biological Trigger effects and changes in cell function initiate. Endogenous agonists are usually natural occurring ligands such as neurotransmitters and, in the case of CTLA-4, CDR80 and CDR86. Examples of exogenous agonists are medicines.
Ein „Antagonist" ist ein Molekül, das an Rezeptoren wie zum Beispiel CTLA-4 binden kann, aber Signaltransduktionsmechanismen nicht aktiviert. Die biologische Wirkung eines gegebenen Antagonisten beruht auf einer Verhinderung der Bindung von einem oder mehreren Agonisten und einer Verhinderung der Rezeptoraktivierung, zum Beispiel blockierende monoklonale Antikörper.An "antagonist" is a molecule that binds to receptors such as CTLA-4 can bind, but does not activate signal transduction mechanisms. The biological effect of a given antagonist is based on preventing the binding of one or more agonists and preventing receptor activation, for example, blocking monoclonal antibodies.
„Nicht immunogen in einem Menschen" bezieht sich auf den Kontakt des betreffenden Polypetids auf einem physiologisch zulässigen Träger und in einer therapeutisch wirksamen Menge mit dem entsprechenden Gewebe eines Menschen. Bei diesem Kontakt wird kein Sensitivierungszustand oder Widerstand gegen das entsprechende Polypeptid beobachtet, wenn das betreffende Polypeptid nach einer angemessenen Latenzperiode, zum Beispiel 8 oder 14 Tage, ein zweites Mal verabreicht wird. Es wird vom Fachmann verstanden, dass ein Polypeptid von vollständig humanem Ursprung typischerweise ein Polypeptid repräsentiert, das typischerweise „nicht-immunogen in einem Menschen" ist."Not immunogenic in a human "refers to the contact of the subject Polypetids on a physiologically acceptable carrier and in a therapeutically effective amount with the appropriate tissue of a human. This contact does not become a sensitized state or resistance to the corresponding polypeptide observed when the polypeptide in question after an appropriate latency period, for example, 8 or 14 days, administered a second time. It The skilled person will understand that a polypeptide of complete human origin typically represents a polypeptide, typically "non-immunogenic in a human" is.
„Behandeln", „Verbessern" oder „Lindern" einer Krankheit oder eines medizinischen Zustands bedeutet ein Reduzieren oder Vermindern der Symptome der Krankheit oder des medizinischen Zustands, oder eine Verlangsamung des Voranschreitens der Krankheit/des medizinischen Zustands. Die Verminderung ist zum Beispiel wenigstens etwa 10%, zum Beispiel etwa 20%, etwa 30%, etwa 40%, etwa 50%, etwa 60%, etwa 70%, etwa 80% oder etwa 90%."Treat", "Improve" or "alleviating" a disease or a medical condition Condition means reducing or lessening the symptoms of the condition Illness or medical condition, or a slowdown the progress of the disease / medical condition. The Reduction, for example, is at least about 10%, for example about 20%, about 30%, about 40%, about 50%, about 60%, about 70%, about 80% or about 90%.
Eine „wirksame Menge" ist eine Menge eines Reagenzes, die ausreicht, eine beabsichtigte Wirkung zu erzielen. Beispielsweise ist für einen Antikörper, der zur Behandlung oder Linderung einer Krankheit eingesetzt wird, eine wirksame Menge eine solche Menge des Antikörpers, die ausreicht, die Symptome der Krankheit zu vermindern oder zu eliminieren oder den Fortschritt der Krankheit zu verlangsamen.An "effective Amount "is an amount of a reagent that is sufficient, an intended Effect. For example, for an antibody, used to treat or alleviate a disease, an effective amount of such an amount of the antibody, sufficient to alleviate or reduce the symptoms of the disease eliminate or slow the progress of the disease.
Eine „Probe" ist ein Aliquot oder ein repräsentativer Teil einer Substanz, eines Materials oder einer Population. Eine Probe kann zum Beispiel eine Probe Wasser, Abwasser, Öl, Sand, Blut, biologisches Gewebe, Urin oder Kot sein. Eine „biologische Probe" ist eine Probe, die einem biologischen Subjekt entnommen worden ist oder darin vorhanden ist, zum Beispiel aus bzw. in einem Menschen.A sample" is an aliquot or a representative part of a substance, of a material or a population. For example, a sample can a sample of water, sewage, oil, sand, blood, biological Be tissue, urine or feces. A "biological sample" is a sample taken from a biological subject or in it, for example from or in a human.
Die Begriffe „niedrigere Nachweisgrenze" oder „gesenkte" oder „verringerte Nachweisgrenze" beziehen sich, wenn im Zusammenhang mit einem Verfahren oder einer Verwendung benutzt, auf die Möglichkeit, noch Mengen oder Konzentrationen, z. B. einer Verbindung, eines Antikörpers oder einer Zellpopulation, nachweisen zu können, die mit einem Vergleichsverfahren nicht mehr detektierbar sind. Der Begriff Nachweisgrenze ist somit im Sinne des gängigen Gebrauchs zu verstehen als die niedrigste Menge oder Konzentration, die ein entsprechendes Verfahren, in der Lage ist zu detektieren.The Terms "lower detection limit" or "lowered" or "reduced detection limit" refer, if in the Related to a method or use, on the possibility of still quantities or concentrations, z. A compound, an antibody or a cell population to be able to do that with a comparison process anymore are detectable. The term detection limit is thus in the sense to understand the common use as the lowest Quantity or concentration, which is a corresponding method in the Location is to detect.
Der
Begriff „Antikörper" wird, wenn hier verwendet,
im weitesten Sinne verstanden. Unter den Begriff „Antikörper"
fallen Immunglobuline, Fragmente davon, solange sie eine gewünschte
biologische Wirkung zeigen und proteinöse Bindungsmoleküle
mit Antikörperfunktion. Beispiele sind ein monoklonaler
oder ein polyklonale Antikörper, eine Antikörperzusammensetzung
mit polyepitoper Spezifität, ein bispezifischer Antikörper, oder
ein einkettiges Molekül. Zu Antikörperfragmenten
zählen z. B. Fab, F(ab')2 oder
Fv. Zu proteinösen Bindungsmolekülen mit Antikörperfunktion
zählen z. B. ein sogenannter Glubody, ein Diabody, ein
Triabody (
Der
Begriff „monoklonaler Antikörper (mAb)" bezieht
sich, wenn hier verwendet, auf einen Antikörper, der aus
einer Population von im Wesentlichen homogenen Antikörpern
gewonnen wird, d. h. die individuellen Antikörper der Population
sind bis auf mögliche natürlich vorkommende Mutationen,
die in kleinen Mengen vorhanden sein können, identisch.
Monoklonale Antikörper sind typischerweise Immunglobuline.
Sie sind hochspezifisch, indem sie gegen eine einzige antigene Stelle
(Epitop) gerichtet sind. Der Zusatz „monoklonal" gibt die
Karte des Antikörpers an als erhalten aus einer im Wesentlichen
homogenen Population von Antikörpern. Er ist nicht in der
Weise auszulegen, dass ein bestimmtes Herstellungsverfahren des
Antikörpers durch bestimmte Techniken erforderlich wäre.
In diesem Zusammenhang können monoklonale Antikörper
durch Verfahren gewonnen werden, mit denen der Fachmann vertraut
ist (siehe z. B.
Ein „funktionelles Derivat" eines monoklonalen Antikörpers ist eine Verbindung, die mit dem nativen monoklonalen Antikörperprotein eine qualitative biologische Eigenschaft gemein hat. Zu "funktionellen Derivaten" zählen zum Beispiel Fragmente von monoklonalen Antikörpern mit nativen Sequenzen, vorausgesetzt, dass sie eine biologische Aktivität mit dem entsprechenden monoklonalen Antikörper nativer Sequenz gemein haben. Der Begriff "Fragment" ist, wenn in Verbindung mit monoklonalen Antikörperfragmentderivaten verwendet, wie zum Beispiel Immuntoxinen, ebenso auszulegen, solange sie eine biologische Aktivität mit dem entsprechenden monoklonalen Antikörpern aktiver Sequenz gemein haben.A "functional Derivative of a monoclonal antibody is a compound, the one with the native monoclonal antibody protein qualitative biological property in common. To "functional Derivatives "include, for example, fragments of monoclonal Antibodies with native sequences, provided that they have a biological activity with the corresponding monoclonal Antibodies native sequence have in common. The term "fragment" when used in conjunction with monoclonal antibody fragment derivatives used, such as immunotoxins, interpreted as long as they have a biological activity with the corresponding monoclonal Antibodies of active sequence have in common.
Eine „magnetische Zellsortierung", „magnetische Zelltrennung" oder „magnetische Durchflusssortierung" ist eine Technik des Auswählens von Zellen, die darauf basiert, einen Gleichgewichtszustand bei der Isolation zwischen magnetischen und nichtmagnetischen Zellströmen in einer fließenden Suspension zu erreichen. Die Selektivität hängt vom Markieren der Zelle oder Zellen mit Antikörpern, die gegen Zelloberflächen-Markierungsmoleküle gerichtet sind und die mit einem magnetischen Kolloid markiert sind. Das charakteristische Merkmal des Verfahrens ist die Fähigkeit Zellen basierend auf der Expression von Oberflächenantigenen zu fraktionieren. Um diese Technik für den Zweck einer positiven Selektion, insbesondere Anreicherung, oder für den Zweck einer Anreicherung von Zellen einzusetzen, die mit humanen monoklonalem IgG4λ Antikörper (wie in Beispiel 3 beschrieben) markiert sind, können 1 × 108 PBMC in Einzelzellsuspension zunächst mit dem monoklonalen Antikörper bei 20 μg/ml Reaktionspuffer für 15 Minuten bei 4°C markiert werden. Nach dem Entfernen ungebundenen monoklonalen Antikörpers durch Waschen werden 0,2 ml von antihumanen IgG aus Maus auf Mikropartikeln (Miltenyi Biotec) zugegeben und für 15 Minuten bei 4°C inkubiert. Nach Waschungen zum Entfernen ungebundener Mikropartikel werden die resuspendierten Zellen in einem magnetischen Feld, das vom Hersteller bereitgestellt wird (VarioMACS Separator), magnetisch getrennt. Die isolierte Zellpopulation stellt Zellen dar, die intrinsisch CTLA-4 auf ihrer Oberfläche exprimieren und repräsentiert somit Treg-Zellen."Magnetic cell sorting", "magnetic cell separation" or "magnetic flow sorting" is a technique of selecting cells based on achieving equilibrium in the isolation between magnetic and non-magnetic cell currents in a flowing suspension A cell or cells having antibodies directed against cell surface marker molecules and labeled with a magnetic colloid The characteristic feature of the method is the ability to fractionate cells based on the expression of surface antigens In order to use this technique for the purpose of positive selection, in particular enrichment, or for the purpose of enrichment of cells labeled with human IgG4λ monoclonal antibody (as described in Example 3), 1 x 10 8 PBMC in single cell suspension may first be coupled with the monoclonal antibody 20 μg / ml reaction buffer for 15 minutes at 4 ° C are marked. After removing unbound monoclonal antibody by washing, 0.2 ml of mouse anti-human IgG on microparticles (Miltenyi Biotec) is added and incubated for 15 minutes at 4 ° C. After washes to remove unbound microparticles, the resuspended cells are magnetically separated in a magnetic field provided by the manufacturer (VarioMACS Separator). The isolated cell population represents cells that intrinsically express CTLA-4 on their surface and thus represents T reg cells.
Ein „Thymidinaufnahmeuntersuchungsverfahren" oder „Verfahren zur Untersuchung der Thymidinaufnahme" bestimmt die Fähigkeit von Zellen, zu expandieren. Es kann eingesetzt werden, um die Suppression der T-Zell-Proliferation als Reaktion auf ein Gedächtnisantigen, auch Recall-Antigen genannt, durch isolierte Treg-Zellen zu messen, d. h. auf ein Antigen, durch das das betreffende Immunsystem mit hoher Wahrscheinlichkeit bereits mehrmals stimuliert wurde und für das somit eine T-zelluläre Sensibilisierung sehr wahrscheinlich ist. Um dieses Untersuchungsverfahren durchzuführen, werden 5 × 105 PBMC pro Vertiefung von geimpften Spendern eingesetzt. Sie werden wie in Beispiel 3 beschrieben beispielsweise mit 5 μg/ml an Tetanustoxoid (TT) aktiviert. Während der durch TT angetriebenen Proliferation werden die Zellen in Kulturschalen mit 96 Vertiefungen ausplattiert. Diese enthalten eine Testprobe mit oder ohne isolierte Treg-Zellen (solche Testproben können optional verdünnt werden). Die Zellen werden für 3 bis 7 Tage in einem Zellkulturinkubator bei 37°C in einer Atmosphäre von 5% CO2 und Luft kultiviert. Die Proliferation kann durch die Aufnahme von 3H-Thymidin gemessen werden. während der letzten 16 Stunden des Untersuchungsverfahrens werden jeder Vertiefung 1 μCi von 3H-Thymidin für die letzten 16 Stunden zugesetzt. Die Proliferation kann mit einem Szintillationszähler gemessen werden, zum Beispiel mittels eines Packard TopCount® Microplate Scintillation Counters (PerkinElmer, Shelton, CT). Es kann erwartet werden, dass Treg-Zellen relativ zu einer Kontrolle eine statistisch signifikante Abnahme (bis zu einem P-Wert von 0,05) der 3H-Thymidinaufnahme induzieren.A "thymidine uptake assay" or "thymidine uptake assay" technique determines the ability of cells to expand. It can be used to isolate the suppression of T cell proliferation in response to a memory antigen, also called a recall antigen To measure T reg cells, ie an antigen by which the immune system in question has been stimulated with high probability several times and for which thus T cell sensitization is very likely. To perform this assay, 5 x 10 5 PBMC are used per well of vaccinated donors. They are activated as described in Example 3, for example with 5 ug / ml of tetanus toxoid (TT). During TT-driven proliferation, the cells are plated in 96-well culture dishes. These contain a test sample with or without isolated T reg cells (such test samples can be optionally diluted). The cells are cultured for 3 to 7 days in a cell culture incubator at 37 ° C in an atmosphere of 5% CO 2 and air. Proliferation can be measured by uptake of 3 H-thymidine. during the last 16 hours of the assay, 1 μCi of 3 H-thymidine is added to each well for the last 16 hours. Proliferation can be measured using a scintillation counter, for example by means of a Packard TopCount ® Microplate Scintillation Counter (PerkinElmer, Shelton, CT). It can be expected that T reg cells induce a statistically significant decrease (up to a P value of 0.05) in 3 H-thymidine uptake relative to a control.
Die vorliegende Erfindung fundiert auf der Entdeckung von humanen monoklonale IgG4λ mAbs gegen die CDR2-ähnliche Region um das Methionin 55 des CTLA-4. Das so definierte Epitop findet sich bei sowohl CTLA-4 als auch sCTLA-4. Die hier beschriebenen Experimente zeigen, dass dieser monoklonale Antikörper ein vollständig humaner monoklonaler Antikörper ist, der keine Rolle bei der Bindung von CTLA-4 an seine endogenen B7-Liganden zu spielen scheint. Es wurde insbesondere gefunden, dass dieser Antikörper unter bestimmten Bedingungen die CTLA-4-CD80-Wechselwirkung verstärkt, was darauf hindeutet, dass er in Kombination mit humanem CD80 zur Detektion von sCTLA-4 eingesetzt werden kann. Die Gegenwart von natürlichen Liganden von CTLA-4 ist in Präparationen von mononuklearen Zellen aus peripherem Blut (PBMC) verbreitet. Daher werden von der nachfolgenden Diskussion andere Verwendungen dieses monoklonalen Antikörpers, zum Beispiel einstufige Verfahren der Anreicherung humaner Treg-Zellen offensichtlich und einleuchtend werden. Es folgt eine Beschreibung, wie ein solcher monoklonaler Antikörper hergestellt werden kann.The present invention is based on the discovery of human monoclonal IgG4λ mAbs against the CDR2-like region around the methionine 55 of CTLA-4. The epitope thus defined is found in both CTLA-4 and sCTLA-4. The experiments described here demonstrate that this monoclonal antibody is a fully human monoclonal antibody that appears to play no role in the binding of CTLA-4 to its endogenous B7 ligands. In particular, it has been found that under certain conditions this antibody enhances the CTLA-4 CD80 interaction, suggesting that it can be used in combination with human CD80 for the detection of sCTLA-4. The presence of natural ligands of CTLA-4 is widespread in preparations of peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Therefore, from the discussion below, other uses of this monoclonal antibody, for example, one-step methods of enriching human T reg cells, will be apparent and obvious. The following is a description of how such a monoclonal antibody can be made.
Kulturmaterialien und Reagenzien sind dem Fachmann bekannt und kommerziell erhältlich. Das verwendete Kulturmedium ist beispielsweise RPMI-1640 (HyClone, Logan, UT), dem 1 × nichtessentielle Aminosäuren (Life Technologies, Gaithersburg, MD), 10% fötales Kälberserum (FBS; Life Technologies) und 50 μg/ml Gentamycin und Kanamycin (Sinton Chemical & Pharmaceutical, Hsinchu, Taiwan) zugesetzt werden. In einem Antigenspezifischen und Kompetitions-enzymgekoppelten Immunadsorptionstest (ELISA) werden gereinigte und biotinylierte Fusionsproteine aus humanen CTLA-4 und Ig aus Maus (rhCTLA-4-Ig aus Maus oder CD152-IG aus Maus), CD80-Ig aus Maus und CD86-Ig aus Maus (Ancell, Bayport, MN) verwendet. Sie werden zusammen mit Peroxidase markiertem Ziegenantikörpern gegen humanes IgG und IgM (Zymed Laboratories, South San Francisco, CA) oder Avidin-Meerettichperoxidase (eBioscience, San Diego, CA) als Nachweissystem eingesetzt. Der Fluorochrom-konjugierte monoklonale Antikörper aus Maus gegen humane IgGs und humanes CD3 (UCHT1; IgG1 aus Maus) und der monoklonale Antikörper aus Ratte gegen Maus-IgG2a ist von Becton Dickinson Immunocytometry Systems (San Jose, CA) bzw. Abcam (Cambridge, UK) kommerziell erhältlich. Der zur T-Zell-Aktivierung verwendete Anti-CD3 (OKT3; Maus-IgG2a) und der antagonistische Anti-CD152 (BNI3; Maus-IgG2a) können von eBioscience bzw. von Abcam bezogen werden.Culture materials and reagents are known in the art and commercially available. The culture medium used is, for example, RPMI-1640 (HyClone, Logan, UT), the 1 × nonessential amino acids (Life Technologies, Gaithersburg, MD), 10% fetal calf serum (FBS, Life Technologies) and 50 μg / ml gentamycin and kanamycin (Sinton Chemical & Pharmaceutical, Hsinchu, Taiwan). In an antigen specific and competition enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) are purified and biotinylated fusion proteins from human CTLA-4 and Ig Mouse (rhCTLA-4-Ig from mouse or mouse CD152-IG), CD80-Ig Mouse and mouse CD86-Ig (Ancell, Bayport, MN). you will be together with peroxidase-labeled goat antibodies human IgG and IgM (Zymed Laboratories, South San Francisco, CA) or avidin-horseradish peroxidase (eBioscience, San Diego, CA) as Detection system used. The fluorochrome-conjugated monoclonal Mouse antibody against human IgGs and human CD3 (UCHT1; Mouse IgG1) and rat monoclonal antibody against mouse IgG2a is from Becton Dickinson Immunocytometry Systems (San Jose, CA) and Abcam (Cambridge, UK) are commercially available. The anti-CD3 used for T-cell activation (OKT3, mouse IgG2a) and the antagonist anti-CD152 (BNI3; mouse IgG2a) from eBioscience or Abcam.
Um das spezifische Epitop von humanem CTLA-4 zu definieren, das durch den monoklonalen Antikörper erkannt wird, können Reihen (sog. „Arrays") von Peptiden verwendet werden (Genesis Biotech, Taipei, Taiwan und Fine Research Biochem, Taoyuan, Taiwan), die in-situ synthetisierte Peptide enthalten, die beispielsweise auf einer speziellen Membran immobilisiert sind. In Kürze werden 1 μg/ml eines durch Protein A (Proteus MIDI kit, ProChem, Littleton, MA) gereinigten monoklonalen Antikörpers für zwei Stunden bei Raumtemperatur unter Schütteln inkubiert. Nach Waschen kann der membrangebundene monoklonale Antikörper sichtbar gemacht werden, indem verdünnter anti-humaner IgG zugegeben wird, welcher mit Peroxidase (Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) konjugiert ist, sowie FASTTM DAB (Sigma). Die Menge des gebundenen monoklonalen Antikörpers kann auf den eingescannten Bildern berechnet werden, beispielsweise mittels der Image-Pro Plus 4.5 Software (Media Cybernetics, Silver Spring, MD).To define the specific epitope of human CTLA-4 recognized by the monoclonal antibody, arrays of peptides may be used (Genesis Biotech, Taipei, Taiwan and Fine Research Biochem, Taoyuan, Taiwan), Briefly, 1 μg / ml of a monoclonal antibody purified by Protein A (Proteus MIDI kit, ProChem, Littleton, MA) is incubated for two hours at room temperature with shaking After washing, the membrane-bound monoclonal antibody can be visualized by adding diluted anti-human IgG conjugated to peroxidase (Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) and FAST ™ DAB (Sigma) Antibody can be calculated on the scanned images, for example using the Image-Pro Plus 4.5 software (Media Cybernetics, Silver Spring, MD).
Untersuchungsverfahren zur Bestimmung der Affinität und Bindungsspezifität, inklusive Kompetitions- und Nichtkompetitions-Untersuchungsverfahren, sind dem Fachmann bekannt. Es wird beispielhaft ein nichtkompetitives Verfahren beschrieben. Die Affinität des monoklonalen Antikörpers gegenüber rhCTLA-4-Maus-Ig-Fusionsprotein kann mit einem optischen Biosensor wie IAsys® (Affinity Sensors, Cambridge, UK) gemäß den Angaben des Herstellers bestimmt werden. Kurz gesagt, werden 200 μg/ml von dialysiertem und verdünnten rhCTLA-4-Maus-Ig auf der aktivierten Oberfläche von Carboxymethyldextran-Küvetten in 10 mM Natriumacetatpuffer bei pH 3,8 immobilisiert. Nach Aufbereitung mit 10 mM HCl kann die Immobilisierung von 2 mg/ml CD152-Maus-Ig in einem Ansprechen von 1100 Bogensekunden resultieren. Dies stellt die höchste Immobilisierungsreaktion für CD152 dar und ergibt eine Ligandenbindungskapazität (Rmax) von 300 Bogensekunden. Reihenverdünnungen des monoklonalen Antikörpers in PBS, also z. B. 1,34 × 10–9 M, 6,70 × 10–9 M, 1,34 × 10–8 M, 2,68 × 10–8 M und 5,36 × 10–8 M, werden in die mit CD152 beschichteten Küvetten gegeben (Endvolumen 50 μl). Die Affinitätskonstanten (KD) können aus diesen Messungen als kdiss/kass berechnet werden, zum Beispiels mittels des FASTFIT®-Programms, das der genannte Hersteller bereitstellt.Assays for determining affinity and binding specificity, including competition and non-competition assay procedures, are known to those skilled in the art. By way of example, a noncompetitive method will be described. The affinity of the monoclonal antibody to rhCTLA-4-mouse-Ig fusion protein may be with an optical biosensor as IAsys ® (Affinity Sensors, Cambridge, UK) according to the manufacturer determined. Briefly, 200 μg / ml of dialyzed and diluted rhCTLA-4 mouse Ig are immobilized on the activated surface of carboxymethyldextran cuvettes in 10 mM sodium acetate buffer at pH 3.8. After treatment with 10 mM HCl, immobilization of 2 mg / ml CD152 mouse Ig may result in a response of 1100 arcseconds. This represents the highest immobilization reaction for CD152 and gives a ligand binding capacity (R max ) of 300 arcseconds. Serial dilutions of the monoclonal antibody in PBS, so z. B. 1.34 × 10 -9 M, 6.70 × 10 -9 M, 1.34 × 10 -8 M, 2.68 × 10 -8 M and 5.36 × 10 -8 M are in the given with CD152 coated cuvettes (final volume 50 μl). The affinity constants (K D) can be calculated as k diss / k ass from these measurements, for example by means of the FASTFIT ® program that provides the aforementioned manufacturer.
Die vorliegende Erfindung stellt ein neues Verfahren zur Messung von humanem sCTLA-4 in biologischen Proben bereit. In soweit wurde ein Immunverfahren zur Quantifikation von sCTLA-4 entwickelt. Wie Beispiel 2 zeigt, kann eine lösliche Form von CTLA-4 wenigstens mit 10-fach höherer Empfindlichkeit nachgewiesen werden als herkömmliche Verfahren, die im Fachgebiet verwendet werden. Zur Veranschaulichung wurden sog. Sandwich-ELISA-Verfahren zum Nachweis von sCTLA-4 im humanen Serum eingesetzt, also Verfahren, bei denen zwei Antikörper verwendet werden, die beide spezifisch an das nachzuweisende Antigen binden, aber an unterschiedlichen Stellen daran binden. Für diesen Zweck wurden die Vertiefungen einer Mikrotiterplatte mit 96 Vertiefungen als unlöslichem Träger mit einem blockierenden monoklonalen Anti-CTLA-Antikörper beschichtet (Klon BNI3; BD Pharmingen) oder mit einem nicht-blockierenden CTLA-4 mAb. Nach Absättigen mit Rinderserumalbumin werden in die Vertiefungen 100 μl einer 1:3-Verdünnung von Testproben gegeben. Die Platten werden für 60 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert und gewaschen, um ungebundenes Material zu entfernen. Als nächstes wird ein Nachweissystem zugegeben, das entweder biotinylierte monoklonale Anti-CTLA-4 Antikörper (Klon AS-33, Antikörperlösungen) oder biotinyliertes CD80-Maus-Ig (Ancell) enthält. Die Reaktionen werden für eine Stunde inkubiert. Die Reaktionen werden mittels eines Streptavidin-Peroxidase-Komplexes (Zymed) und eines 3,39,5,59-Tetramethyl-Benzidin-Substrats entwickelt. Die optische Dichte (OD) wird bei 450 nm bestimmt. Mit Hilfe einer Verdünnungsreihe eines kommerziell erhältlichen CTLA-4-Ig-Fusionsproteins (Ancell) kann eine Standardkurve erhalten werden. Die Bindung kann mittels einer Vielzahl an Verfahren bestimmt werden, die dem Fachmann bekannt sind. Nach einer Inkubationszeit, die ausreicht, um ein Bindungsgleichgewicht eintreten zu lassen, wird der unlösliche Träger gewaschen und die verbliebene Markierung bestimmt. Zu geeigneten Bestimmungsverfahren zählen ELISA, RIA, FIA und Durchflusscytometrie.The The present invention provides a novel method of measuring human sCTLA-4 in biological samples. In so far became one Immune method developed for the quantification of sCTLA-4. Like example 2, a soluble form of CTLA-4 may be at least be detected with 10-fold higher sensitivity as conventional methods used in the art become. For illustration, so-called sandwich ELISA methods were used used for the detection of sCTLA-4 in human serum, ie method, where two antibodies are used, both specific bind to the antigen to be detected, but at different Bind to it. For this purpose, the wells were a 96-well microtiter plate as insoluble Carrier with a blocking monoclonal anti-CTLA antibody coated (clone BNI3; BD Pharmingen) or with a non-blocking CTLA-4 mAb. After saturation with bovine serum albumin into the wells 100 μl of a 1: 3 dilution given by test samples. The plates are left for 60 minutes incubated at room temperature and washed to give unbound material to remove. Next, a detection system is added either biotinylated monoclonal anti-CTLA-4 antibody (Clone AS-33, antibody solutions) or biotinylated CD80 mouse Ig (Ancell). The reactions are for incubated for one hour. The reactions are by means of a streptavidin-peroxidase complex (Zymed) and a 3,39,5,59-tetramethylbenzidine substrate. The optical density (OD) is determined at 450 nm. With the help of a Serial dilution of a commercially available CTLA-4-Ig fusion protein (Ancell), a standard curve can be obtained. The bond can determined by a variety of methods known to those skilled in the art are known. After an incubation period that is sufficient to one Bonding equilibrium is the insoluble Carrier washed and determined the remaining mark. Suitable methods of determination include ELISA, RIA, FIA and flow cytometry.
Es wird auch ein Verfahren zur Isolierung von Treg-Zellen aus einer Probe bereitgestellt. Dieses Verfahren weist auf: in Kontaktbringen des Antikörpers oder eines funktionellen Derivates davon mit einer geeigneten Probe, so dass ein Antigen-Antikörperkomplex aus dem Antikörper und einem eventuellen CTLA-4, das auf der Oberfläche einer oder mehrerer Zellen in der Probe vorhanden ist, sowie Detektion des Vorhandenseins eines so gebildeten Komplexes. Dadurch wird das Vorhandensein von extrazellulären CTLA-4 in der Probe festgestellt. Das Isolieren von Treg-Zellen kann beispielsweise auch so durchgeführt werden, dass nur ein positiver Selektionsschritt durchgeführt wird bzw. werden muss. Dadurch werden die Zellen geschont bzw. bewahrt, die spezifisch extrazellulares CTLA-4 exprimieren. Unter minimaler in vitro-Beeinflussung und mit maximaler Lebensfähigkeit können somit Populationen von sowohl Treg-Zellen als auch Nicht-Treg-Zellen wieder gewonnen werden. Dazu veranschaulicht Beispiel 3, wie eine Einzelzell-Suspension von 1 × 108 PBMC zunächst mit dem monoklonalen Antikörper bei 20 μg/ml in Reaktionspuffer für 15 Minuten bei 4°C markiert werden kann. Nach dem Entfernen von ungebundenem monoklonalen Antikörper durch Waschen werden 0,2 ml Mikropartikel mit anti-humanem IgG aus Maus (Miltenyi Biotec) zugegeben und für 15 Minuten bei 4°C entwickelt. Nach Waschschritten zur Entfernung ungebundener Mikropartikel werden die resuspendierten Zellen in einem magnetischen Feld magnetisch aufgetrennt. Die isolierte Zellpopulation stellt somit Treg-Zellen dar, die intrinsisch auf ihrer Oberfläche CTLA-4 exprimieren. Eine negativ oder exklusiv ausgewählte Nicht-Treg-Population kann dementsprechend anschließend stimuliert werden, zum Beispiel durch ein Gedächtnisantigen (s. o.), ohne längere Selektionsschritte und somit ohne Gefährdung ihres Überlebens.There is also provided a method of isolating T reg cells from a sample. This method comprises: contacting the antibody or a functional derivative thereof with a suitable sample such that an antigen-antibody complex of the antibody and any CTLA-4 present on the surface of one or more cells in the sample, as well as Detecting the presence of a complex so formed. This detects the presence of extracellular CTLA-4 in the sample. The isolation of T reg cells can, for example, also be carried out in such a way that only a positive selection step is or must be carried out. This protects or preserves the cells that specifically express extracellular CTLA-4. Thus, with minimal in vitro interference and with maximum viability, populations of both T "reg" cells and non-T "reg" cells can be recovered. Example 3 illustrates how a single cell suspension of 1 x 10 8 PBMC can be labeled first with the monoclonal antibody at 20 μg / ml in reaction buffer for 15 minutes at 4 ° C. After removing unbound monoclonal antibody by washing, 0.2 ml mouse anti-human IgG microparticles (Miltenyi Biotec) are added and developed for 15 minutes at 4 ° C. After washing to remove unbound microparticles, the resuspended cells are magnetically separated in a magnetic field. The isolated cell population thus represents T reg cells that express intrinsically on their surface CTLA-4. Accordingly, a negatively or exclusively selected non-T reg population can subsequently be stimulated, for example by a memory antigen (see above), without prolonged selection steps and thus without jeopardizing its survival.
In Beispiel 3 wird ebenfalls ein funktionelles Derivat, d. h. ein Immuntoxin, durch Konjugation von Diphtherietoxin mit gereinigtem IgG4λ hergestellt. Gereinigter IgG4λ mAb wird mit einem sechsfachen Überschuss an N-Succinimidyl 3-(2-pyridyldithio)propionat (GE Healthcare Bio-Sciences) in PBS gemischt. Anschließend lässt man das Gemisch für 30 Minuten bei Raumtemperatur reagieren und dialysiert anschließend gegen PBS. Der modifizierte IgG4λ wird dann mit einem dreifachen Überschuss an reduziertem Diphtherietoxin (Merck Taiwan Ltd., Taipei, Taiwan) gemischt sowie mit 10-fach konzentrierter PBS (10% des Gesamtvolumens) und für 36 h bei 40°C aufbewahrt. Das Produkt wird dialysiert und mit Macrosep®-Zentrifugationsvorrichtungen (Pall Corporation, East Hills, NY) äquilibriert und mit PBS gewaschen.In Example 3, also a functional derivative, ie an immunotoxin, is prepared by conjugation of diphtheria toxin with purified IgG4λ. Purified IgG4λ mAb is mixed with a six-fold excess of N-succinimidyl 3- (2-pyridyldithio) propionate (GE Healthcare Bio-Sciences) in PBS. Subsequently, the mixture is allowed to react for 30 minutes at room temperature and then dialyzed against PBS. The modified IgG4λ is then mixed with a three-fold excess of reduced diphtheria toxin (Merck Taiwan Ltd., Taipei, Taiwan) and 10X concentrated PBS (10% of the total volume) and stored at 40 ° C for 36 hours. The product is dialyzed and equilibrated with Macrosep ® -Zentrifugationsvorrichtungen (Pall Corporation, East Hills, NY) and washed with PBS.
Zu geeigneten Proben, die für die Verfahren der CTLA-4-Detektion und Isolation von Treg-Zellen nützlich sind, zählen, ohne auf diese Beispiel beschränkt zu sein, biologische Flüssigkeiten aus einem humanen Subjekt wie zum Beispiel Blut, Nasenschleimhautsekret, Mundschleimhautsekret, Vaginalschleimhautsekret, Sperma, Eiterexudat, Analschleimhautsekret und Gelenkflüssigkeit. Zu Proben können auch Lymphoidgewebe zählen wie Milz, Lymphknoten, Thymus, Knochenmark, Rachenmandeln (Tonsillen) und die als Peyer-Plaques bezeichneten Ansammlungen von Lymphfollikeln in der Schleimhaut des Dünndarms (auch Peyer Patches genannt). In einer Ausführungsform ist der humane Antikörper mit einer immunologisch abrufbaren Markierung gekennzeichnet, d. h. typischerweise mit einem anti-humanen Ig-Antikörper, der mit magnetischen Partikeln konjugiert ist. Eine solche spezifische Bindung kann durch eine Vielzahl an bekannten Verfahren abgerufen werden, wie zum Beispiel direktes Markieren des präsentierten monoklonalen Antikörpers, Zellschwenken und Fluoreszenz-aktiviertes Zellsortieren.Suitable samples useful for the methods of CTLA-4 detection and isolation of T reg cells include, but are not limited to, biological fluids from a human subject such as blood, nasal mucous membrane secretions, oral mucosal secretions, vaginal mucosal secretions , Sperm, egg exudate, anal mucous secretions and synovial fluid. Lymphoid tissue can also be used for samples such as spleen, lymph nodes, thymus, bone marrow, tonsils and the accumulations of lymphoid follicles in the mucous membrane of the small intestine called Peyer's patches (also called Peyer's patches). In one embodiment, the human antibody is labeled with an immunologically-available label, ie, typically with an anti-human Ig antibody conjugated to magnetic particles. Such specific binding can be retrieved by a variety of known methods, such as direct labeling of the displayed monoclonal antibody, cell pivoting, and fluorescence-activated cell sorting.
Es
ist allgemein anerkannt, dass humane CD4+CD25+-Treg-Zellen FOXP3
exprimieren, während dies nicht für CD25–-T-Zellen gilt. Die Expression
von FOXP3 in CD4+-T-Zellen korreliert mit
ihrer Fähigkeit, als Treg-Zellen
zu fungieren (
Der Antikörper oder dessen funktionelles Derivat, beispielsweise ein Immunotoxin, kann gemäß jeden geeigneten Verfahrens, dass dem Fachmann bekannt ist, verabreicht werden, zum Beispiel intravaskulär, intrathekal, intravenös, intramuskulär, parenteral, subkutan, intramedullär, intraperitoneal, topisch, oral, rektal, vaginal, nasal, pulmonal und intratumoral.Of the Antibody or its functional derivative, for example an immunotoxin, may, according to any suitable method, that is known to those skilled in the art, for example intravascular, intrathecal, intravenous, intramuscular, parenteral, subcutaneous, intramedullary, intraperitoneal, topical, oral, rectal, vaginal, nasal, pulmonary and intratumoral.
Zusammensetzungencompositions
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft eine Zusammensetzung. Die Zusammensetzung weist einen vollständig humanen Antikörper auf, der gemäß der vorliegenden Erfindung hergestellt worden ist. In einigen Ausführungsformen bindet der Antikörper an sein Antigen mit hoher Affinität. Die KD kann zum Beispiel etwa 100 nM oder weniger betragen, zum Beispiel etwa 40 nM oder weniger wie etwa 10 nM oder weniger, 4 nM oder weniger oder etwa 1 nM oder weniger. Insbesondere ist der Antikörper in der Lage, mindestens zwei verwandte Antigene zu erkennen, wie zum Beispiel mikrobielle Antigene, die sich nur auf Grund einer antigenen Variation unterscheiden oder Proteine, die von Allelen des gleichen Gens kodiert werden.Another aspect of the present invention relates to a composition. The composition comprises a fully human antibody prepared according to the present invention. In some embodiments, the antibody binds to its antigen with high affinity. The K D may be, for example, about 100 nM or less, for example, about 40 nM or less, such as about 10 nM or less, 4 nM or less, or about 1 nM or less. In particular, the antibody is capable of recognizing at least two related antigens, such as microbial antigens that differ only by antigenic variation, or proteins that are encoded by alleles of the same gene.
Die nachfolgenden Beispiele dienen zur Veranschaulichung der Erfindung und sind keinesfalls in einer Weise aufzufassen, die den Umfang der vorliegenden Erfindung beschränkt.The The following examples serve to illustrate the invention and are by no means to be understood in a way that is the scope limited to the present invention.
Beispiel 1example 1
Charakterisierung eines anti-humanen CTLA-4 mAbCharacterization of an anti-human CTLA-4 mAb
a) Epitopkartierunga) epitope mapping
Um
die Art der Bindung des vollständig humanen monoklonalen
Antikörpers zu charakterisieren, wurde mittels des Western-Blot-Verfahrens
eine Epitopkartierung durchgeführt. Verwendete Reihen („Arrays")
enthielten überlappende Pendecapeptide, die CDR1-ähnliche
(die B-C-Schleife), CDR3-ähnlich (die F-G-Schleife) und
die Kernsequenz um Methionin 55 aufwiesen, die zwischen den C'-
und D-Strängen der CD152 Extrazellulärregion lokalisiert
sind.
b) Immonologische und biochemische Eigenschaften des mAbb) Immonological and biochemical properties of the mAb
Der
Isotyp des weitgehend gereinigten monoklonalen Antikörpers
und sein Subtyp wurden durch Festphasen-ELISA bestimmt. Dabei wurde
sein Reaktivität auf humanes CTLA-4 ausgenutzt. Geeignete
immobilisierte Antikörper wurden zur Bestimmung des Typs
verwendet. Die Bindung zeigt die gleichzeitige Gegenwart von γ4-
und λ-Ketten im monoklonalen Antikörpern, während
andere Ig-Ketten fehlen (
c) Geringe oder keine Kompetition mit der B7-CD152-Bindung durch den mAbc) Low or no competition with B7-CD152 binding by the mAb
Obwohl
das Epitop, das CDR2 enthält, nicht an der Bindung verwandter
endogener Liganden (CD80 und CD86) beteiligt zu sein scheint, könnte
das Epitop eine allosterische Stelle für nichtkompetitive
Hemmung sein. Um diese Möglichkeit zu untersuchen, wurden
Vertiefungen einer Platte mit rhCTLA-4-Maus-Ig beschichtet. Es wurde
entweder biotinylierter CD80-Maus-Ig oder CD86-Mäuse-Ig
als Bindungsligand in Gegenwart des monoklonalen Antikörpers
oder vom BNI3 verwendet, d. h. ein CTLA-4 blockierender monoklonaler
IgG2a Antikörper aus Maus (
Beispiel 2Example 2
Einsatz eines CDR2-spezifischen Reagenzes senkt die Nachweisgrenze des humanen CTLA-4Use of a CDR2-specific reagent lowers the detection limit of human CTLA-4
Immunologische
Untersuchungen, die auf der Verwendung von Paaren von blockierenden
Antikörpern beruhen, die auf Epitope innerhalb der B7-bindenden
Region des Moleküls reaktiv sind, werden in der Praxis in
ihrer Eignung durch sterische Hinderung begrenzt. Blockierende Antikörper
können miteinander und mit endogenem CD80 und CD86 um die
begrenzten CDR1- und CDR3-Regionen kompetitieren, was es erschwert, sie
in einem Untersuchungssystem von nativem sCTLA-4 zu unterscheiden.
Um zu bestimmen, ob der oben beschriebenen CTLA-4-Bindungssynergismus
mit den natürlichen Liganden CD80, den der monoklonale
Antikörper zeigte, zu einer erhöhten Nachweisempfindlichkeit
führt, wurde der monoklonale Antikörper mit CD80 für
die Detektion von sCTLA-4 gekoppelt. Kurz gesagt, wurde ein ELISA-System
unter Verwendung von mit IgG4λ beschichteten Platten für
die Bindung (das Fangen) und biotinylierter CD80-Maus-Ig als rekombinantes Protein
(Ancell) zum Nachweis eingesetzt. Für die Farbreaktion
wurde dann Streptavidin-Peroxidase verwendet.
Beispiel 3Example 3
Isolieren von intrinsischen CTLA-4+-Populationen führte zu einer erhöhten FOXP3-Expression und -SuppressionIsolation of intrinsic CTLA-4 + populations resulted in increased FOXP3 expression and suppression
Ein
wesentliches ungelöstes Problem auf dem Gebiet der Verwendung
von Treg-Zellen als vielversprechende Alternative
zum herkömmlichen Immunsuppressions-Behandlungsverfahren
ist die Entwicklung eines verlässlichen Verfahrens ihrer
Isolierung. Die meisten Berichte im Stand der Technik verwenden
eine negative Selektion von Nicht-CD4+-Zellen
und eine positive Selektion von CD25+-Zellen,
was eine zeitaufwändige und Erfahrung erfordernde Vorgehensweise
beim Umgang mit humanen PBMC darstellt. Nach Erkennen der Bedeutung
von CTLA-4 bei der Funktion von Treg-Zellen
(
Durch
Untersuchung der Teilmenge, die durch in vitro-Tetanus-Toxoid-Stimulation
auf die Proliferation erhalten wurde, ist die Entfernung der CTLA-4+-Population von großem Vorteil
für die Gedächtnisantwort (
LiteraturlisteBibliography
-
US Patent Nr. 4,376,110 U.S. Patent No. 4,376,110 -
US Patent Nr. 5,811,097 U.S. Patent No. 5,811,097 -
US Patent Nr. 5,855,887 U.S. Patent No. 5,855,887 -
US Patent Nr. 6,051,227 U.S. Patent No. 6,051,227 -
US Patent Nr. 6,207,156 U.S. Patent No. 6,207,156 -
US Patent Nr. 6,228,361 U.S. Patent No. 6,228,361 -
US Patent Nr. 7,229,628 U.S. Patent No. 7,229,628 -
Birebent, B, et al, 2004, „Suppressive properties of human CD4+CD25+ regulatory T cells are dependent on CTLA-4 expression", Eur. J. Immunol., 34: 3485–96 Birebent, B, et al, 2004, "Suppressive properties of human CD4 + CD25 + regulatory T cells are dependent on CTLA-4 expression", Eur. J. Immunol., 34: 3485-96 -
Brunkow, M. E., et al, 2001, „Disruption of a new forkhead/winged helix protein, scurfin, results in the fatal lymphoproliferative disorder of the scurfy mouse", Nat. Genet. 27(1): 68–73Brunkow, M.E., et al, 2001, "Disruption of a new forkhead / winged helix protein, scurfin, results in the fatal Lymphoproliferative disorder of the scurfy mouse, Nat. Genet. 27 (1): 68-73 -
Chikuma, S & Bluestone, JA, 2002, „CTLA-4: acting at the synapse", Mol. Interv., 2: 205–8 Chikuma, S & Bluestone, JA, 2002, "CTLA-4: acting at the synapse", Mol. Interv., 2: 205-8 -
Chin, LT, et al, 2007, „Site-directed in vitro immunization leads to a complete human monoclonal IgG4 lambda that binds specifically to the CDR2 region of CTLA-4 (CD152) without interfering the engagement of natural ligands", BMC Biotechnol., 7: 51 Chin, LT, et al., 2007, "Site-directed in vitro immunization leads to a complete human monoclonal IgG4 lambda that binds specifically to the CDR2 region of CTLA-4 (CD152) without interfering with the commitment of natural ligands", BMC Biotechnol. , 7:51 -
Dannull, J, et al, 2005, „Enhancement of vaccine-mediated antitumor immunity in cancer patients after depletion of regulatory T cells," J. Clin. Invest., 115: 3623–33 Dannull, J, et al, 2005, "Enhancement of vaccine-mediated antitumor immunity in cancer patients after depletion of regulatory T cells," J. Clin. Invest., 115: 3623-33 -
Davis, DM & Dustin, ML, 2004, „What is the importance of the immunological synapse?" Trends Immunol., 25: 323–7 Davis, DM & Dustin, ML, 2004, "What is the Importance of the Immunological Synapse?" Trends Immunol., 25: 323-7 -
Dustin, ML, 2002, „The immunological synapse", Arthritis Res., 4 Suppl 3: 5119–25 Dustin, ML, 2002, "The Immunological Synapse," Arthritis Res., 4 Suppl 3: 5119-25 -
Egen, JG & Allison, JP, 2002, „Cytotoxic T lymphocyte antigen-4 accumulation in the immunological synapse is regulated by TCR signal strength", Immunity, 16: 23–35 Egen, JG & Allison, JP, 2002, "Cytotoxic T lymphocyte antigen-4 accumulation in the immunological synapse is regulated by TCR signal strength", Immunity, 16: 23-35 -
Egen, JG, et al, 2002, „CTLA-4: new insights into its biological function and use in tumor immunotherapy", Nat. Immunol., 3: 611–8 Egen, JG, et al, 2002, "CTLA-4: new insights into its biological function and use in tumor immunotherapy", Nat. Immunol., 3: 611-8 -
Gill, D. S. & Damle, N. K., 2006, „Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds", Current Opinion in Biotechnology, 17, 653–658 Gill, DS & Damle, NK, 2006, "Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds", Current Opinion in Biotechnology, 17, 653-658 -
Gough, SC, et al, 2005, „CTLA4 gene polymorphism and autoimmunity," Immunol. Rev., 204: 102–15 Gough, SC, et al., 2005, "CTLA4 gene polymorphism and autoimmunity," Immunol., Rev., 204: 102-15 -
Grakoui, A, et al, 1999, „The immunological synapse: a molecular machine controlling T cell activation," Science, 285: 221–7 Grakoui, A, et al, 1999, "The immunological synapse: a molecular machine controlling cell activation," Science, 285: 221-7 -
Holt, L. J., et al., 2003, „Domain antibodies: proteins for therapy", Trends Biotechnol., 21, 11, 484–490Holt, L.J., et al., 2003, "Domain antibodies: proteins for therapy ", Trends Biotechnol., 21, 11, 484-490 -
Hori, S, et al, 2003, „Control of regulatory T cell development by the transcription factor Foxp3", Science, 299: 1057–61 Hori, S, et al, 2003, "Control of regulatory cell development by the transcription factor Foxp3," Science, 299: 1057-61 -
Iliades, P., et al., 1997, „Triabodies: single chain Fv fragments without a linker form trivalent trimers", FEBS Lett., 409, 437–441 Iliades, P., et al., 1997, "Triabodies: single chain Fv fragments without a left truncated trimer", FEBS Lett., 409, 437-441 -
Köhler, G., & Milstein, C., 1975, „Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity", Nature, 256, 5517: 495–497 Kohler, G., & Milstein, C., 1975, "Continuous cultures of fused cells secreting antibodies of predefined specificity", Nature, 256, 5517: 495-497 -
Krummel, MF & Allison, JP, 1996, „CTLA-4 engagement inhibits IL-2 accumulation and cell cycle progression upon activation of resting T cells", J. Exp. Med., 183: 2533–40 Krummel, MF & Allison, JP, 1996, "CTLA-4 engagement inhibits IL-2 accumulation and cell cycle progression upon activation of resting T cells", J. Exp. Med., 183: 2533-40 -
Kwon, Y.-U., & Kodadek, T., 2007, „Quantitative Evaluation of the Relative Cell Permeability of Peptoids and Peptides", J. Am. Chem. Soc., 129, 1508–1509 Kwon, Y.-U., & Kodadek, T., 2007, "Quantitative Evaluation of the Relative Cell Permeability of Peptoids and Peptides," J. Am. Chem. Soc., 129, 1508-1509 -
Linsley, PS, et al, 1991, „CTLA-4 is a second receptor for the B cell activation antigen B7", J. Exp. Med., 174: 561–9 Linsley, PS, et al., 1991, "CTLA-4 is a second receptor for B cell activation antigen B7", J. Exp. Med., 174: 561-9 -
Linsley, PS, et al, 1992, „Coexpression and functional cooperation of CTLA-4 and CD28 on activated T lymphocytes", J. Exp. Med., 176: 1595–604 Linsley, PS, et al., 1992, "Coexpression and functional cooperation of CTLA-4 and CD28 on activated T lymphocytes", J. Exp. Med., 176: 1595-604 -
Lopes, JE, et al, 2006, „Analysis of FOXP3 reveals multiple domains required for its function as a transcriptional repressor", J. Immunol., 177, 3133–42 Lopes, JE et al., 2006, "Analysis of FOXP3 reveals multiple domains required for its function as a transcriptional repressor", J. Immunol., 177, 3133-42 -
Magistrelli, G, et al, 1999, „A soluble form of CTLA-4 generated by alternative splicing is expressed by nonstimulated human T cells", Eur. J. Immunol., 29: 3596–602 Magistrelli, G, et al., 1999, "A soluble form of CTLA-4 generated by alternative splicing expressed by non-stimulated human T cells", Eur. J. Immunol., 29: 3596-602 -
Mosavi, L. K., et al., 2004, „The ankyrin repeat as molecular architecture for protein recognition", Protein Science, 13, 6, 1435–1448Mosavi, L.K., et al., 2004, "The ankyrin repeat as molecular architecture for protein recognition ", 13, 6, 1435-1448 -
Nistico, L, et al, 1996, „The CTLA-4 gene region of chromosome 2q33 is linked to, and associated with, type 1 diabetes. Belgian Diabetes Registry", Hum. Mol. Genet., 5: 1075–80 Nistico, L, et al, 1996, "The CTLA-4 gene region of chromosomes 2q33 is linked to, type 1 diabetes. Belgian Diabetes Registry, Hum. Mol. Genet., 5: 1075-80 -
Oaks, MK & Hallett, KM, 2000, „A soluble form of CTLA-4 in patients with autoimmune thyroid disease", J. Immunol., 164: 5015–8 Oaks, MK & Hallett, KM, 2000, "A soluble form of CTLA-4 in patients with autoimmune thyroid disease", J. Immunol., 164: 5015-8 -
Oaks, MK, et al, 2000, „A native soluble form of CTLA-4", Cell. Immunol., 201: 144–53 Oaks, MK, et al., 2000, "A native soluble form of CTLA-4", Cell. Immunol., 201: 144-53 -
Peach, RJ, et al, 1994, „Complementarity determining region 1 (CDR1)- and CDR3-analogous regions in CTLA-4 and CD28 determine the binding to B7-1", J. Exp. Med., 180: 2049–58 Peach, RJ, et al, 1994, "Complementarity determining region 1 (CDR1) and CDR3 analogous regions in CTLA-4 and CD28 determine the binding to B7-1", J. Exp. Med., 180: 2049-58 -
Pioli, C, et al, 2000, „Inhibition of IgG1 and IgE production by stimulation of the B cell CTLA-4 receptor", J. Immunol., 165: 5530–6 Pioli, C, et al, 2000, "Inhibition of IgG1 and IgE production by stimulation of the B cell CTLA-4 receptor", J. Immunol., 165: 5530-6 -
Prud'homme, GJ, 2004, „Altering immune tolerance therapeutically: the power of negative thinking", J. Leukoc. Biol., 75: 586–99 Prud'homme, GJ, 2004, "Altering Immune Tolerance Therapeutically: The Power of Negative Thinking," J. Leukoc. Biol., 75: 586-99 -
Qi, SY, et al, 2001, „Synaptic pattern formation during cellular recognition", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 98: 6548–53. Rao, A, et al, 2007, „Successful bone marrow transplantation for IPEX syndrome after reduced-intensity conditioning", Blood, 109: 383–5 Qi, SY, et al, 2001, "Synaptic Pattern Formation During Cellular Recognition," Proc Natl Acad Sci., USA, 98: 6548-53, Rao, A, et al., 2007, "Successful Bone Marrow Transplantation for IPEX syndrome after reduced-intensity conditioning ", Blood, 109: 383-5 -
Read, S, et al, 2006, „Blockade of CTLA-4 on CD4+CD25+ regulatory T cells abrogates their function in vivo", J. Immunol., 177: 4376–83 Read, S, et al, 2006, "Blockade of CTLA-4 on CD4 + CD25 + regulatory T cells abrogates their function in vivo", J. Immunol., 177: 4376-83 -
Sakaguchi, S, 2005, „Naturally arising Foxp3-expressing CD25+CD4+ regulatory T cells in immunological tolerance to self and non-self", Nat. Immunol., 6: 345–52 Sakaguchi, S, 2005, "Naturally occurring Foxp3-expressing CD25 + CD4 + regulatory T cells in immunological tolerance to self and non-self," Nat. Immunol., 6: 345-52 -
Sato, S, et al, 2004, „Serum soluble CTLA-4 levels are increased in diffuse cutaneous systemic sclerosis," Rheumatology, 43: 1261–6 Sato, S, et al, 2004, "Serum soluble CTLA-4 levels are increased in diffuse cutaneous systemic sclerosis," Rheumatology, 43: 1261-6 -
Schwartz, JC, et al, 2001, „Structural basis for co-stimulation by the human CTLA-4/B7-2 complex," Nature, 410: 604–8 Schwartz, JC, et al, 2001, "Structural basis for co-stimulation by the human CTLA-4 / B7-2 complex," Nature, 410: 604-8 -
Sharpe, AH & Freeman, GJ, 2002, „The B7-CD28 superfamily" Nat. Rev. Immunol., 2: 116–26 Sharpe, AH & Freeman, GJ, 2002, "The B7-CD28 superfamily" Nat Rev. Immunol., 2: 116-26 -
Silverman, J, et al., 2005, „Multivalent avimer proteins evolved by exon shuffling of a family of human receptor domains", Nature Biotechnology, 23, 1556–1561 Silverman, J, et al., 2005, "Multivalent avmer proteins evolved by exon shuffling of a family of human receptor domains," Nature Biotechnology, 23, 1556-1561 -
Skerra, A., 2000, „Engineered protein scaffolds for molecular recognition", J. Mol. Recognit., 13, 167–187 Skerra, A., 2000, "Engineered protein scaffolds for molecular recognition", J. Mol. Recognit., 13, 167-187 -
Stone, E., et al., 2007, „The assembly of single domain antibodies into bispecific decavalent molecules", Journal of Immunological Methods, 318, 88–94Stone, E., et al., 2007, "The assembly of single domain antibodies into bispecific decavalent molecules ", Journal of Immunological Methods, 318, 88-94 -
Stamper, CC, et al, 2001, „Crystal structure of the B7-1/CTLA-4 complex that inhibits human immune responses," Nature, 410: 608–11 Stamper, CC, et al, 2001, "Crystal structure of the B7-1 / CTLA-4 complex that inhibits human immune responses," Nature, 410: 608-11 -
Steiner, K, et al, 1999, „Enhanced expression of CTLA-4 (CD152) on CD4+ T cells in HIV infection", Clin. Exp. Immunol., 115: 451–7 Steiner, K, et al, 1999, "Enhanced expression of CTLA-4 (CD152) on CD4 + T cells in HIV infection", Clin. Exp. Immunol., 115: 451-7 -
Takahashi, T, et al, 2000, „Immunologic self-tolerance maintained by CD25(+)CD4(+) regulatory T cells constitutively expressing cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4", J. Exp. Med., 192: 303–10 Takahashi, T, et al, 2000, "Immunological self-tolerance maintained by CD25 (+) CD4 (+) regulatory T cells constitutively expressing cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4", J. Exp. Med., 192: 303-10 -
Tivol, EA, et al, 1995, „Loss of CTLA-4 leads to massive lymphoproliferation and fatal multiorgan tissue destruction, revealing a critical negative regulatory role of CTLA-4", Immunity, 3: 541–7 Tivol, EA, et al, 1995, "Loss of CTLA-4 leads to massive lymphoproliferation and fatal multiorgan tissue destruction, revealing a critical regulatory role of CTLA-4," Immunity, 3: 541-7 -
von Boehmer, H, 2005, „Mechanisms of suppression by suppressor T cells", Nat. Immunol., 6: 338–44 by Boehmer, H, 2005, Mechanisms of suppression by suppressor T cells, Nat. Immunol., 6: 338-44 -
Wang, S & Chef, L, 2004, „Tlymphocyte co-signaling pathways of the B7-CD28 family", Cell. Mol. Immunol., 1: 37–42 Wang, S & Chef, L, 2004, "Tlymphocyte co-signaling pathways of the B7-CD28 family", Cell Mol. Immunol., 1: 37-42 -
Ward, FJ & Barker, RN, 2007, „Soluble CTLA-4 responses – a novel mechanism for regulatory T cell suppression?" Immunology, 120, Suppl: 9 (meeting abstract)Ward, FJ & Barker, RN, 2007, "Soluble CTLA-4 responses - a novel mechanism for regulatory T cell suppression? "Immunology, 120, Suppl: 9 (meeting abstract) -
Wildin, RS & Freitas, A, 2005, „IPEX and FOXP3: clinical and research perspectives", J. Autoimmun., 25 Suppl: 56–62 Wildin, RS & Freitas, A, 2005, "IPEX and FOXP3: clinical and research perspectives", J. Autoimmun., 25 Suppl: 56-62 -
Wong, CK, et al, 2005, „Aberrant production of soluble costimulatory molecules CTLA-4, CD28, CD80 and CD86 in patients with systemic lupus erythematosus", Rheumatology, 44: 989–94 Wong, CK, et al, 2005, "Aberrant production of soluble costimulatory molecules CTLA-4, CD28, CD80 and CD86 in patients with systemic lupus erythematosus", Rheumatology, 44: 989-94 -
Wong, CK, et al, 2005, „Increased expression of plasma and cell surface co-stimulatory molecules CTLA-4, CD28 and CD86 in adult patients with allergic asthma", Clin. Exp. Immunol., 141: 122–9 Wong, CK, et al, 2005, "Increased expression of plasma and cell surface stimulating molecules CTLA-4, CD28 and CD86 in adult patients with allergic asthma", Clin. Exp. Immunol., 141: 122-9 -
Wu, Y, et al, 2006, „FOXP3 controls regulatory T cell function through cooperation with NFAT", Cell, 126: 375–87 Wu, Y, et al, 2006, "FOXP3 controls regulatory cell function by cooperation with NFAT," Cell, 126: 375-87 -
Xystrakis, E, et al, 2004, „Identification of a novel natural regulatory CD8 T-cell subset and analysis of its mechanism of regulation", Blood, 104: 3294–301 Xystrakis, E, et al, 2004, "CD8 T-cell subset and analysis of its mechanism of regulation," Blood, 104: 3294-301
ZITATE ENTHALTEN IN DER BESCHREIBUNGQUOTES INCLUDE IN THE DESCRIPTION
Diese Liste der vom Anmelder aufgeführten Dokumente wurde automatisiert erzeugt und ist ausschließlich zur besseren Information des Lesers aufgenommen. Die Liste ist nicht Bestandteil der deutschen Patent- bzw. Gebrauchsmusteranmeldung. Das DPMA übernimmt keinerlei Haftung für etwaige Fehler oder Auslassungen.This list The documents listed by the applicant have been automated generated and is solely for better information recorded by the reader. The list is not part of the German Patent or utility model application. The DPMA takes over no liability for any errors or omissions.
Zitierte PatentliteraturCited patent literature
- - WO 2007/117602 [0007] WO 2007/117602 [0007]
- - US 5811097 [0010, 0063] US 5811097 [0010, 0063]
- - US 5855887 [0010, 0063] US 5855887 [0010, 0063]
- - US 6051227 [0010, 0063] - US 6051227 [0010, 0063]
- - US 6207156 [0010, 0063] US 6207156 [0010, 0063]
- - US 7229628 [0010, 0063] - US 7229628 [0010, 0063]
- - WO 2001/04144 [0041] WO 2001/04144 [0041]
- - US 4376110 [0042, 0063] US 4376110 [0042, 0063]
- - US 6228361 [0063] US 6228361 [0063]
Zitierte Nicht-PatentliteraturCited non-patent literature
- - Dustin, 2002 [0002] - Dustin, 2002 [0002]
- - Grakoui et al., 1999 [0002] - Grakoui et al., 1999 [0002]
- - Qi et al., 2001 [0002] - Qi et al., 2001 [0002]
- - Davis und Dustin, 2004 [0002] Davis and Dustin, 2004 [0002]
- - Chikuma und Bluestone, 2002 [0002] - Chikuma and Bluestone, 2002 [0002]
- - Egen und Allison, 2002 [0002] - Egen and Allison, 2002 [0002]
- - Sharpe und Freeman, 2002 [0003] - Sharpe and Freeman, 2002 [0003]
- - Krummel und Allison, 1996 [0003] - Krummel and Allison, 1996 [0003]
- - Linsley et al., 1991 [0003] - Linsley et al., 1991 [0003]
- - Pioli et al., 2000 [0003] - Pioli et al., 2000 [0003]
- - Tivol et al., 1995 [0003] - Tivol et al., 1995 [0003]
- - Wang und Chen, 2004 [0004] - Wang and Chen, 2004 [0004]
- - Magistrelli et al., 1999 [0005] Magistrelli et al., 1999 [0005]
- - Oaks et al., 2000 [0005] - Oaks et al., 2000 [0005]
- - Oaks und Hallet, 2000 [0005] - Oaks and Hallet, 2000 [0005]
- - Nistico et al., 1996 [0005] - Nistico et al., 1996 [0005]
- - Sato et al., 2004 [0005] Sato et al., 2004 [0005]
- - Wong et al., 2005, Rheumatology 44: 989 [0005] Wong et al., 2005, Rheumatology 44: 989 [0005]
- - Wong et al., 2005, Clinical Experimental Immunology 141: 122 [0005] Wong et al., 2005, Clinical Experimental Immunology 141: 122 [0005]
- - Gough et al., 2005 [0005] - Gough et al., 2005 [0005]
- - Sakaguchi, 2005 [0006] - Sakaguchi, 2005 [0006]
- - Prud'homme, 2004 [0006] - Prud'homme, 2004 [0006]
- - von Boehmer, 2005 [0006] - by Boehmer, 2005 [0006]
- - Hori et al., 2003 [0006] - Hori et al., 2003 [0006]
- - Brunkow et al., 2001 [0006] - Brunkow et al., 2001 [0006]
- - Lopes et al., 2006 [0006] - Lopes et al., 2006 [0006]
- - Wu et al., 2006 [0006] - Wu et al., 2006 [0006]
- - Xystrakis et al. [0007] - Xystrakis et al. [0007]
- - (2004) Blood 104: 3294–3301 [0007] - (2004) Blood 104: 3294-3301 [0007]
- - Birebent et al., 2004 [0007] Birebent et al., 2004 [0007]
- - Takahashi et al., 2000 [0008] Takahashi et al., 2000 [0008]
- - Read et al., 2006 [0008] - Read et al., 2006 [0008]
- - Xystrakis et al., 2004 [0008] - Xystrakis et al., 2004 [0008]
- - Birebent et al., 2004 [0008] Birebent et al., 2004 [0008]
- - Ward und Barker, 2007 [0008] - Ward and Barker, 2007 [0008]
- - Linsley et al., 1992 [0010] Linsley et al., 1992 [0010]
- - Egen et al., 2002 [0010] Egen et al., 2002 [0010]
- - Steiner et al., 1999 [0011] Steiner et al., 1999 [0011]
- - Oaks und Hallet, 2000 [0011] - Oaks and Hallet, 2000 [0011]
- - (Birebent et al., 2004 [0011] - (Birebent et al., 2004 [0011]
- - Schwartz et al., 2001 [0011] - Schwartz et al., 2001 [0011]
- - Stamper et al., 2001 [0011] Stamper et al., 2001 [0011]
- - Peach et al., 1994 [0011] - Peach et al., 1994 [0011]
- - Chin et al., 2007 [0012] Chin et al., 2007 [0012]
- - Rao et al., 2007 [0022] Rao et al., 2007 [0022]
- - Wildin und Freitas, 2005 [0022] - Wildin and Freitas, 2005 [0022]
- - Dannull et al., 2005 [0022] - Dannull et al., 2005 [0022]
- - Iliades et al., 1997 [0041] - Iliades et al., 1997 [0041]
- - Stone et al., 2007 [0041] - Stone et al., 2007 [0041]
- - Holt et al., 2003 [0041] Holt et al., 2003 [0041]
- - Mosavi et al., 2004 [0041] - Mosavi et al., 2004 [0041]
- - Silverman et al., 2005 [0041] - Silverman et al., 2005 [0041]
- - Gill & Damle, 2006 [0041] - Gill & Damle, 2006 [0041]
- - Kwon & Kodadek, 2007 [0041] - Kwon & Kodadek, 2007 [0041]
- - Köhler et al., 1975 [0042] Köhler et al., 1975 [0042]
- - Sakaguchi, 2005 [0054] - Sakaguchi, 2005 [0054]
- - Steiner et al., 1999 [0060] Steiner et al., 1999 [0060]
- - Linsley et al., 1992 [0061] Linsley et al., 1992 [0061]
- - Schwartz et al., 2000 [0061] Schwartz et al., 2000 [0061]
- - Stamper et al., 2001 [0061] Stamper et al., 2001 [0061]
- - Read et al., 2006 [0062] - Read et al., 2006 [0062]
- - Ward und Barker, 2007 [0062] - Ward and Barker, 2007 [0062]
- - Birebent, B, et al, 2004, „Suppressive properties of human CD4+CD25+ regulatory T cells are dependent on CTLA-4 expression", Eur. J. Immunol., 34: 3485–96 [0063] Birebent, B, et al, 2004, "Suppressive properties of human CD4 + CD25 + regulatory T cells are dependent on CTLA-4 expression", Eur. J. Immunol., 34: 3485-96 [0063]
- - Brunkow, M. E., et al, 2001, „Disruption of a new forkhead/winged helix protein, scurfin, results in the fatal lymphoproliferative disorder of the scurfy mouse", Nat. Genet. 27(1): 68–73 [0063] - Brunkow, ME, et al, 2001, "Disruption of a novel forkhead / winged helix protein, scurfin, results in the fatal lymphoproliferative disorder of the scurfy mouse", Nat. Genet. 27 (1): 68-73 [0063]
- - Chikuma, S & Bluestone, JA, 2002, „CTLA-4: acting at the synapse", Mol. Interv., 2: 205–8 [0063] Chikuma, S & Bluestone, JA, 2002, "CTLA-4: acting at the synapse", Mol. Interv., 2: 205-8 [0063]
- - Chin, LT, et al, 2007, „Site-directed in vitro immunization leads to a complete human monoclonal IgG4 lambda that binds specifically to the CDR2 region of CTLA-4 (CD152) without interfering the engagement of natural ligands", BMC Biotechnol., 7: 51 [0063] Chin, LT, et al., 2007, "Site-directed in vitro immunization leads to a complete human monoclonal IgG4 lambda that binds specifically to the CDR2 region of CTLA-4 (CD152) without interfering with the commitment of natural ligands", BMC Biotechnol ., 7: 51 [0063]
- - Dannull, J, et al, 2005, „Enhancement of vaccine-mediated antitumor immunity in cancer patients after depletion of regulatory T cells," J. Clin. Invest., 115: 3623–33 [0063] - Dannull, J, et al., 2005, "Enhancement of vaccine-mediated antitumor immunity in cancer patients after depletion of regulatory T cells," J. Clin. Invest., 115: 3623-33 [0063]
- - Davis, DM & Dustin, ML, 2004, „What is the importance of the immunological synapse?" Trends Immunol., 25: 323–7 [0063] Davis, DM & Dustin, ML, 2004, "What is the Importance of the Immunological Synapse?" Trends Immunol., 25: 323-7 [0063]
- - Dustin, ML, 2002, „The immunological synapse", Arthritis Res., 4 Suppl 3: 5119–25 [0063] - Dustin, ML, 2002, "The Immunological Synapse", Arthritis Res., 4 Suppl 3: 5119-25 [0063]
- - Egen, JG & Allison, JP, 2002, „Cytotoxic T lymphocyte antigen-4 accumulation in the immunological synapse is regulated by TCR signal strength", Immunity, 16: 23–35 [0063] - Egen, JG & Allison, JP, 2002, "Cytotoxic T lymphocyte antigen-4 accumulation in the immunological synapse is regulated by TCR signal strength", Immunity, 16: 23-35 [0063]
- - Egen, JG, et al, 2002, „CTLA-4: new insights into its biological function and use in tumor immunotherapy", Nat. Immunol., 3: 611–8 [0063] - Egen, JG, et al, 2002, "CTLA-4: new insights into its biological function and use in tumor immunotherapy", Nat. Immunol., 3: 611-8 [0063]
- - Gill, D. S. & Damle, N. K., 2006, „Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds", Current Opinion in Biotechnology, 17, 653–658 [0063] - Gill, DS & Damle, NK, 2006, "Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds", Current Opinion in Biotechnology, 17, 653-658 [0063]
- - Gough, SC, et al, 2005, „CTLA4 gene polymorphism and autoimmunity," Immunol. Rev., 204: 102–15 [0063] Gough, SC, et al, 2005, "CTLA4 gene polymorphism and autoimmunity," Immunol., Rev., 204: 102-15 [0063]
- - Grakoui, A, et al, 1999, „The immunological synapse: a molecular machine controlling T cell activation," Science, 285: 221–7 [0063] - Grakoui, A, et al, 1999, "The immunological synapse: a molecular machine controlling cell activation," Science, 285: 221-7 [0063]
- - Holt, L. J., et al., 2003, „Domain antibodies: proteins for therapy", Trends Biotechnol., 21, 11, 484–490 [0063] Holt, LJ, et al., 2003, "Domain antibodies: proteins for therapy", Trends Biotechnol., 21, 11, 484-490 [0063]
- - Hori, S, et al, 2003, „Control of regulatory T cell development by the transcription factor Foxp3", Science, 299: 1057–61 [0063] Hori, S, et al, 2003, "Control of regulatory cell development by the transcription factor Foxp3", Science, 299: 1057-61 [0063]
- - Iliades, P., et al., 1997, „Triabodies: single chain Fv fragments without a linker form trivalent trimers", FEBS Lett., 409, 437–441 [0063] - Iliades, P., et al., 1997, "Triabodies: single chain Fv fragments without a left truncated trimer", FEBS Lett., 409, 437-441 [0063]
- - Köhler, G., & Milstein, C., 1975, „Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity", Nature, 256, 5517: 495–497 [0063] Köhler, G., & Milstein, C., 1975, "Continuous cultures of fused cells secreting antibodies of predefined specificity", Nature, 256, 5517: 495-497 [0063]
- - Krummel, MF & Allison, JP, 1996, „CTLA-4 engagement inhibits IL-2 accumulation and cell cycle progression upon activation of resting T cells", J. Exp. Med., 183: 2533–40 [0063] Krummel, MF & Allison, JP, 1996, "CTLA-4 engagement inhibits IL-2 accumulation and cell cycle progression upon activation of resting T cells", J. Exp. Med., 183: 2533-40 [0063]
- - Kwon, Y.-U., & Kodadek, T., 2007, „Quantitative Evaluation of the Relative Cell Permeability of Peptoids and Peptides", J. Am. Chem. Soc., 129, 1508–1509 [0063] Kwon, Y.-U., & Kodadek, T., 2007, "Quantitative Evaluation of the Relative Cell Permeability of Peptoids and Peptides," J. Am. Chem. Soc., 129, 1508-1509 [0063]
- - Linsley, PS, et al, 1991, „CTLA-4 is a second receptor for the B cell activation antigen B7", J. Exp. Med., 174: 561–9 [0063] Linsley, PS, et al., 1991, "CTLA-4 is a second receptor for B cell activation antigen B7", J. Exp. Med., 174: 561-9 [0063]
- - Linsley, PS, et al, 1992, „Coexpression and functional cooperation of CTLA-4 and CD28 on activated T lymphocytes", J. Exp. Med., 176: 1595–604 [0063] Linsley, PS, et al, 1992, "Coexpression and functional cooperation of CTLA-4 and CD28 on activated T lymphocytes ", J. Exp. Med., 176: 1595-604 [0063]
- - Lopes, JE, et al, 2006, „Analysis of FOXP3 reveals multiple domains required for its function as a transcriptional repressor", J. Immunol., 177, 3133–42 [0063] Lopes, JE et al., 2006, "Analysis of FOXP3 reveals multiple domains required for its function as a transcriptional repressor", J. Immunol., 177, 3133-42 [0063]
- - Magistrelli, G, et al, 1999, „A soluble form of CTLA-4 generated by alternative splicing is expressed by nonstimulated human T cells", Eur. J. Immunol., 29: 3596–602 [0063] Magistrelli, G, et al., 1999, "A soluble form of CTLA-4 generated by alternative splicing expressed by non-stimulated human T cells", Eur. J. Immunol., 29: 3596-602 [0063]
- - Mosavi, L. K., et al., 2004, „The ankyrin repeat as molecular architecture for protein recognition", Protein Science, 13, 6, 1435–1448 [0063] Mosavi, LK, et al., 2004, "The ankyrin repeat as molecular architecture for protein recognition", Protein Science, 13, 6, 1435-1448 [0063]
- - Nistico, L, et al, 1996, „The CTLA-4 gene region of chromosome 2q33 is linked to, and associated with, type 1 diabetes. Belgian Diabetes Registry", Hum. Mol. Genet., 5: 1075–80 [0063] - Nistico, L, et al, 1996, "The CTLA-4 gene region of chromosomes 2q33 is linked to, type 1 diabetes. Belgian Diabetes Registry, Hum. Mol. Genet., 5: 1075-80 [0063]
- - Oaks, MK & Hallett, KM, 2000, „A soluble form of CTLA-4 in patients with autoimmune thyroid disease", J. Immunol., 164: 5015–8 [0063] Oaks, MK & Hallett, KM, 2000, "A soluble form of CTLA-4 in patients with autoimmune thyroid disease", J. Immunol., 164: 5015-8 [0063]
- - Oaks, MK, et al, 2000, „A native soluble form of CTLA-4", Cell. Immunol., 201: 144–53 [0063] Oaks, MK, et al, 2000, "A native soluble form of CTLA-4", Cell Immunol., 201: 144-53 [0063]
- - Peach, RJ, et al, 1994, „Complementarity determining region 1 (CDR1)- and CDR3-analogous regions in CTLA-4 and CD28 determine the binding to B7-1", J. Exp. Med., 180: 2049–58 [0063] - Peach, RJ, et al, 1994, "Complementarity determining region 1 (CDR1) - and CDR3 analogous regions in CTLA-4 and CD28 determine the binding to B7-1", J. Exp. Med., 180: 2049- 58 [0063]
- - Pioli, C, et al, 2000, „Inhibition of IgG1 and IgE production by stimulation of the B cell CTLA-4 receptor", J. Immunol., 165: 5530–6 [0063] Pioli, C, et al, 2000, "Inhibition of IgG1 and IgE production by stimulation of the B cell CTLA-4 receptor", J. Immunol., 165: 5530-6 [0063]
- - Prud'homme, GJ, 2004, „Altering immune tolerance therapeutically: the power of negative thinking", J. Leukoc. Biol., 75: 586–99 [0063] Prud'homme, GJ, 2004, "Altering Immune Tolerance Therapeutically: The Power of Negative Thinking", J. Leukoc Biol., 75: 586-99 [0063]
- - Qi, SY, et al, 2001, „Synaptic pattern formation during cellular recognition", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 98: 6548–53. Rao, A, et al, 2007, „Successful bone marrow transplantation for IPEX syndrome after reduced-intensity conditioning", Blood, 109: 383–5 [0063] Qi, SY, et al, 2001, "Synaptic pattern formation during cellular recognition", Proc Natl Acad Sci USA, 98: 6548-53, Rao, A, et al, 2007, "Successful bone marrow transplantation for IPEX syndrome after reduced-intensity conditioning, Blood, 109: 383-5 [0063]
- - Read, S, et al, 2006, „Blockade of CTLA-4 on CD4+CD25+ regulatory T cells abrogates their function in vivo", J. Immunol., 177: 4376–83 [0063] - Read, S, et al, 2006, "Blockade of CTLA-4 on CD4 + CD25 + regulatory T cells abrogates their function in vivo", J. Immunol., 177: 4376-83 [0063]
- - Sakaguchi, S, 2005, „Naturally arising Foxp3-expressing CD25+CD4+ regulatory T cells in immunological tolerance to self and non-self", Nat. Immunol., 6: 345–52 [0063] Sakaguchi, S, 2005, "Naturally arising Foxp3-expressing CD25 + CD4 + regulatory T cells in immunological tolerance to self and non-self", Nat. Immunol., 6: 345-52 [0063]
- - Sato, S, et al, 2004, „Serum soluble CTLA-4 levels are increased in diffuse cutaneous systemic sclerosis," Rheumatology, 43: 1261–6 [0063] Sato, S, et al, 2004, "Serum soluble CTLA-4 levels are increased in diffuse cutaneous systemic sclerosis," Rheumatology, 43: 1261-6 [0063]
- - Schwartz, JC, et al, 2001, „Structural basis for co-stimulation by the human CTLA-4/B7-2 complex," Nature, 410: 604–8 [0063] Schwartz, JC, et al., 2001, "Structural basis for co-stimulation by the human CTLA-4 / B7-2 complex," Nature, 410: 604-8 [0063]
- - Sharpe, AH & Freeman, GJ, 2002, „The B7-CD28 superfamily" Nat. Rev. Immunol., 2: 116–26 [0063] Sharpe, AH & Freeman, GJ, 2002, The B7-CD28 superfamily Nat Rev. Immunol., 2: 116-26 [0063]
- - Silverman, J, et al., 2005, „Multivalent avimer proteins evolved by exon shuffling of a family of human receptor domains", Nature Biotechnology, 23, 1556–1561 [0063] Silverman, J, et al., 2005, "Multivalent avmer proteins evolved by exon shuffling of a family of human receptor domains", Nature Biotechnology, 23, 1556-1561 [0063]
- - Skerra, A., 2000, „Engineered protein scaffolds for molecular recognition", J. Mol. Recognit., 13, 167–187 [0063] Skerra, A., 2000, "Engineered protein scaffolds for molecular recognition", J. Mol. Recognit., 13, 167-187 [0063]
- - Stone, E., et al., 2007, „The assembly of single domain antibodies into bispecific decavalent molecules", Journal of Immunological Methods, 318, 88–94 [0063] Stone, E., et al., 2007, "The Assembly of Single Domain Applicants Into Bispecific Decavalent Molecules", Journal of Immunological Methods, 318, 88-94 [0063]
- - Stamper, CC, et al, 2001, „Crystal structure of the B7-1/CTLA-4 complex that inhibits human immune responses," Nature, 410: 608–11 [0063] Stamper, CC, et al, 2001, "Crystal structure of the B7-1 / CTLA-4 complex that inhibits human immune responses," Nature, 410: 608-11 [0063]
- - Steiner, K, et al, 1999, „Enhanced expression of CTLA-4 (CD152) on CD4+ T cells in HIV infection", Clin. Exp. Immunol., 115: 451–7 [0063] Steiner, K, et al., 1999, "Enhanced expression of CTLA-4 (CD152) on CD4 + T cells in HIV infection", Clin. Exp. Immunol., 115: 451-7 [0063]
- - Takahashi, T, et al, 2000, „Immunologic self-tolerance maintained by CD25(+)CD4(+) regulatory T cells constitutively expressing cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4", J. Exp. Med., 192: 303–10 [0063] Takahashi, T, et al, 2000, "Immunological self-tolerance maintained by CD25 (+) CD4 (+) regulatory T cells constitutively expressing cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4", J. Exp. Med., 192: 303- 10 [0063]
- - Tivol, EA, et al, 1995, „Loss of CTLA-4 leads to massive lymphoproliferation and fatal multiorgan tissue destruction, revealing a critical negative regulatory role of CTLA-4", Immunity, 3: 541–7 [0063] Tivol, EA, et al, 1995, "Loss of CTLA-4 leads to massive lymphoproliferation and fatal multiorgan tissue destruction, revealing a critical negative regulatory role of CTLA-4", Immunity, 3: 541-7 [0063]
- - von Boehmer, H, 2005, „Mechanisms of suppression by suppressor T cells", Nat. Immunol., 6: 338–44 [0063] by Boehmer, H, 2005, "Mechanisms of suppression by suppressor T cells", Nat. Immunol., 6: 338-44 [0063]
- - Wang, S & Chef, L, 2004, „Tlymphocyte co-signaling pathways of the B7-CD28 family", Cell. Mol. Immunol., 1: 37–42 [0063] Wang, S & Chef, L, 2004, "Tlymphocyte co-signaling pathways of the B7-CD28 family", Cell Mol. Immunol., 1: 37-42 [0063]
- - Ward, FJ & Barker, RN, 2007, „Soluble CTLA-4 responses – a novel mechanism for regulatory T cell suppression?" Immunology, 120, Suppl: 9 (meeting abstract) [0063] Ward, FJ & Barker, RN, 2007, "Soluble CTLA-4 responses - a novel mechanism for regulatory cell suppression?" Immunology, 120, Suppl. 9 (meeting abstract) [0063]
- - Wildin, RS & Freitas, A, 2005, „IPEX and FOXP3: clinical and research perspectives", J. Autoimmun., 25 Suppl: 56–62 [0063] Wildin, RS & Freitas, A, 2005, "IPEX and FOXP3: clinical and research perspectives", J. Autoimmun., 25 Suppl: 56-62 [0063]
- - Wong, CK, et al, 2005, „Aberrant production of soluble costimulatory molecules CTLA-4, CD28, CD80 and CD86 in patients with systemic lupus erythematosus", Rheumatology, 44: 989–94 [0063] Wong, CK, et al, 2005, "Aberrant production of soluble costimulatory molecules CTLA-4, CD28, CD80 and CD86 in patients with systemic lupus erythematosus", Rheumatology, 44: 989-94 [0063]
- - Wong, CK, et al, 2005, „Increased expression of plasma and cell surface co-stimulatory molecules CTLA-4, CD28 and CD86 in adult patients with allergic asthma", Clin. Exp. Immunol., 141: 122–9 [0063] - Wong, CK, et al, 2005, "Increased expression of plasma and cell surface co-stimulatory molecules CTLA-4, CD28 and CD86 in adult patients with allergic asthma", Clin Exp Immunol, 141: 122-9 [... 0063]
- - Wu, Y, et al, 2006, „FOXP3 controls regulatory T cell function through cooperation with NFAT", Cell, 126: 375–87 [0063] Wu, Y, et al, 2006, "FOXP3 controls regulatory cell function by cooperation with NFAT," Cell, 126: 375-87 [0063]
- - Xystrakis, E, et al, 2004, „Identification of a novel natural regulatory CD8 T-cell subset and analysis of its mechanism of regulation", Blood, 104: 3294–301 [0063] Xystrakis, E, et al, 2004, "Identification of a novel natural regulatory CD8 T-cell subset and analysis of its mechanism of regulation", Blood, 104: 3294-301 [0063]
Claims (9)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE202008000834U DE202008000834U1 (en) | 2008-01-21 | 2008-01-21 | Composition and reagent for CTLA-4 and uses thereof |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE202008000834U DE202008000834U1 (en) | 2008-01-21 | 2008-01-21 | Composition and reagent for CTLA-4 and uses thereof |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE202008000834U1 true DE202008000834U1 (en) | 2008-05-29 |
Family
ID=39466174
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE202008000834U Expired - Lifetime DE202008000834U1 (en) | 2008-01-21 | 2008-01-21 | Composition and reagent for CTLA-4 and uses thereof |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE202008000834U1 (en) |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4376110A (en) | 1980-08-04 | 1983-03-08 | Hybritech, Incorporated | Immunometric assays using monoclonal antibodies |
US5811097A (en) | 1995-07-25 | 1998-09-22 | The Regents Of The University Of California | Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling |
US5855887A (en) | 1995-07-25 | 1999-01-05 | The Regents Of The University Of California | Blockade of lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling |
US6051227A (en) | 1995-07-25 | 2000-04-18 | The Regents Of The University Of California, Office Of Technology Transfer | Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling |
WO2001004144A2 (en) | 1999-07-13 | 2001-01-18 | Scil Proteins Gmbh | Fabrication of beta-pleated sheet proteins with specific binding properties |
US6207156B1 (en) | 1997-03-21 | 2001-03-27 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | Specific antibodies and antibody fragments |
US6228361B1 (en) | 1987-11-30 | 2001-05-08 | Roger Williams General Hospital | IgG-1 human monoclonal antibody reactive with an HIV-1 antigen and methods of use |
WO2007117602A2 (en) | 2006-04-07 | 2007-10-18 | Biogen Idec Ma Inc. | Isolation and use of human regulatory t cells |
-
2008
- 2008-01-21 DE DE202008000834U patent/DE202008000834U1/en not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4376110A (en) | 1980-08-04 | 1983-03-08 | Hybritech, Incorporated | Immunometric assays using monoclonal antibodies |
US6228361B1 (en) | 1987-11-30 | 2001-05-08 | Roger Williams General Hospital | IgG-1 human monoclonal antibody reactive with an HIV-1 antigen and methods of use |
US5811097A (en) | 1995-07-25 | 1998-09-22 | The Regents Of The University Of California | Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling |
US5855887A (en) | 1995-07-25 | 1999-01-05 | The Regents Of The University Of California | Blockade of lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling |
US6051227A (en) | 1995-07-25 | 2000-04-18 | The Regents Of The University Of California, Office Of Technology Transfer | Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling |
US7229628B1 (en) | 1995-07-25 | 2007-06-12 | The Regents Of The University Of California, Office Of Technology Transfer | Blockade of T lymphocyte down-regulation associated with CTLA-4 signaling |
US6207156B1 (en) | 1997-03-21 | 2001-03-27 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | Specific antibodies and antibody fragments |
WO2001004144A2 (en) | 1999-07-13 | 2001-01-18 | Scil Proteins Gmbh | Fabrication of beta-pleated sheet proteins with specific binding properties |
WO2007117602A2 (en) | 2006-04-07 | 2007-10-18 | Biogen Idec Ma Inc. | Isolation and use of human regulatory t cells |
Non-Patent Citations (89)
Title |
---|
(2004) Blood 104: 3294-3301 |
Birebent et al., 2004 |
Birebent, B, et al, 2004, "Suppressive properties of human CD4+CD25+ regulatory T cells are dependent on CTLA-4 expression", Eur. J. Immunol., 34: 3485-96 |
Brunkow et al., 2001 |
Brunkow, M. E., et al, 2001, "Disruption of a new forkhead/winged helix protein, scurfin, results in the fatal lymphoproliferative disorder of the scurfy mouse", Nat. Genet. 27(1): 68-73 |
Chikuma und Bluestone, 2002 |
Chikuma, S & Bluestone, JA, 2002, "CTLA-4: acting at the synapse", Mol. Interv., 2: 205-8 |
Chin et al., 2007 |
Chin, LT, et al, 2007, "Site-directed in vitro immunization leads to a complete human monoclonal IgG4 lambda that binds specifically to the CDR2 region of CTLA-4 (CD152) without interfering the engagement of natural ligands", BMC Biotechnol., 7: 51 |
Dannull et al., 2005 |
Dannull, J, et al, 2005, "Enhancement of vaccine-mediated antitumor immunity in cancer patients after depletion of regulatory T cells," J. Clin. Invest., 115: 3623-33 |
Davis und Dustin, 2004 |
Davis, DM & Dustin, ML, 2004, "What is the importance of the immunological synapse?" Trends Immunol., 25: 323-7 |
Dustin, ML, 2002, "The immunological synapse", Arthritis Res., 4 Suppl 3: 5119-25 |
Egen et al., 2002 |
Egen und Allison, 2002 |
Egen, JG & Allison, JP, 2002, "Cytotoxic T lymphocyte antigen-4 accumulation in the immunological synapse is regulated by TCR signal strength", Immunity, 16: 23-35 |
Egen, JG, et al, 2002, "CTLA-4: new insights into its biological function and use in tumor immunotherapy", Nat. Immunol., 3: 611-8 |
Gill & Damle, 2006 |
Gill, D. S. & Damle, N. K., 2006, "Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds", Current Opinion in Biotechnology, 17, 653-658 |
Gough et al., 2005 |
Gough, SC, et al, 2005, "CTLA4 gene polymorphism and autoimmunity," Immunol. Rev., 204: 102-15 |
Grakoui et al., 1999 |
Grakoui, A, et al, 1999, "The immunological synapse: a molecular machine controlling T cell activation," Science, 285: 221-7 |
Holt et al., 2003 |
Holt, L. J., et al., 2003, "Domain antibodies: proteins for therapy", Trends Biotechnol., 21, 11, 484-490 |
Hori et al., 2003 |
Hori, S, et al, 2003, "Control of regulatory T cell development by the transcription factor Foxp3", Science, 299: 1057-61 |
Iliades et al., 1997 |
Iliades, P., et al., 1997, "Triabodies: single chain Fv fragments without a linker form trivalent trimers", FEBS Lett., 409, 437-441 |
Köhler et al., 1975 |
Köhler, G., & Milstein, C., 1975, "Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity", Nature, 256, 5517: 495-497 |
Krummel und Allison, 1996 |
Krummel, MF & Allison, JP, 1996, "CTLA-4 engagement inhibits IL-2 accumulation and cell cycle progression upon activation of resting T cells", J. Exp. Med., 183: 2533-40 |
Kwon & Kodadek, 2007 |
Kwon, Y.-U., & Kodadek, T., 2007, "Quantitative Evaluation of the Relative Cell Permeability of Peptoids and Peptides", J. Am. Chem. Soc., 129, 1508-1509 |
Linsley et al., 1991 |
Linsley et al., 1992 |
Linsley, PS, et al, 1991, "CTLA-4 is a second receptor for the B cell activation antigen B7", J. Exp. Med., 174: 561-9 |
Linsley, PS, et al, 1992, "Coexpression and functional cooperation of CTLA-4 and CD28 on activated T lymphocytes", J. Exp. Med., 176: 1595-604 |
Lopes et al., 2006 |
Lopes, JE, et al, 2006, "Analysis of FOXP3 reveals multiple domains required for its function as a transcriptional repressor", J. Immunol., 177, 3133-42 |
Magistrelli et al., 1999 |
Magistrelli, G, et al, 1999, "A soluble form of CTLA-4 generated by alternative splicing is expressed by nonstimulated human T cells", Eur. J. Immunol., 29: 3596-602 |
Mosavi et al., 2004 |
Mosavi, L. K., et al., 2004, "The ankyrin repeat as molecular architecture for protein recognition", Protein Science, 13, 6, 1435-1448 |
Nistico et al., 1996 |
Nistico, L, et al, 1996, "The CTLA-4 gene region of chromosome 2q33 is linked to, and associated with, type 1 diabetes. Belgian Diabetes Registry", Hum. Mol. Genet., 5: 1075-80 |
Oaks et al., 2000 |
Oaks und Hallet, 2000 |
Oaks, MK & Hallett, KM, 2000, "A soluble form of CTLA-4 in patients with autoimmune thyroid disease", J. Immunol., 164: 5015-8 |
Oaks, MK, et al, 2000, "A native soluble form of CTLA-4", Cell. Immunol., 201: 144-53 |
Peach et al., 1994 |
Peach, RJ, et al, 1994, "Complementarity determining region 1 (CDR1)- and CDR3-analogous regions in CTLA-4 and CD28 determine the binding to B7-1", J. Exp. Med., 180: 2049-58 |
Pioli et al., 2000 |
Pioli, C, et al, 2000, "Inhibition of IgG1 and IgE production by stimulation of the B cell CTLA-4 receptor", J. Immunol., 165: 5530-6 |
Prud'homme, 2004 |
Prud'homme, GJ, 2004, "Altering immune tolerance therapeutically: the power of negative thinking", J. Leukoc. Biol., 75: 586-99 |
Qi et al., 2001 |
Qi, SY, et al, 2001, "Synaptic pattern formation during cellular recognition", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 98: 6548-53. Rao, A, et al, 2007, "Successful bone marrow transplantation for IPEX syndrome after reduced-intensity conditioning", Blood, 109: 383-5 |
Rao et al., 2007 |
Read et al., 2006 |
Read, S, et al, 2006, "Blockade of CTLA-4 on CD4+CD25+ regulatory T cells abrogates their function in vivo", J. Immunol., 177: 4376-83 |
Sakaguchi, 2005 |
Sakaguchi, S, 2005, "Naturally arising Foxp3-expressing CD25+CD4+ regulatory T cells in immunological tolerance to self and non-self", Nat. Immunol., 6: 345-52 |
Sato et al., 2004 |
Sato, S, et al, 2004, "Serum soluble CTLA-4 levels are increased in diffuse cutaneous systemic sclerosis," Rheumatology, 43: 1261-6 |
Schwartz et al., 2000 |
Schwartz et al., 2001 |
Schwartz, JC, et al, 2001, "Structural basis for co-stimulation by the human CTLA-4/B7-2 complex," Nature, 410: 604-8 |
Sharpe und Freeman, 2002 |
Sharpe, AH & Freeman, GJ, 2002, "The B7-CD28 superfamily" Nat. Rev. Immunol., 2: 116-26 |
Silverman et al., 2005 |
Silverman, J, et al., 2005, "Multivalent avimer proteins evolved by exon shuffling of a family of human receptor domains", Nature Biotechnology, 23, 1556-1561 |
Skerra, A., 2000, "Engineered protein scaffolds for molecular recognition", J. Mol. Recognit., 13, 167-187 |
Stamper et al., 2001 |
Steiner et al., 1999 |
Stone et al., 2007 |
Takahashi et al., 2000 |
Tivol et al., 1995 |
von Boehmer, 2005 |
Wang und Chen, 2004 |
Ward und Barker, 2007 |
Wildin und Freitas, 2005 |
Wong et al., 2005, Clinical Experimental Immunology 141: 122 |
Wong et al., 2005, Rheumatology 44: 989 |
Wu et al., 2006 |
Xystrakis et al. |
Xystrakis et al., 2004 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11359020B2 (en) | Agents that modulate immune cell activation and methods of use thereof | |
CN106068276B (en) | Chimeric Antigen Receptor (CAR) with antigen binding domain to T cell receptor beta constant region | |
Scott et al. | Spontaneous secretion of IgG subclasses by intestinal mononuclear cells: differences between ulcerative colitis, Crohn's disease, and controls. | |
Brm̈mendorf et al. | The axonal recognition molecule F11 is a multifunctional protein: specific domains mediate interactions with Ng-CAM and restrictin | |
US5948893A (en) | Murine hybridoma and antibody binding to CD28 receptor secreted by the hybridoma and method of using the antibody | |
KR102554507B1 (en) | Method for detecting tissue-infiltrating NK cells | |
EP3255062B1 (en) | Anti-nkp46 antibody for diganosis of a non-cutaneous peripheral t-cell lymphoma (ptcl) | |
US20120009207A1 (en) | Complete human monoclonal IgG4lambda specific for CTLA-4 and uses thereof for detection of soluble CTLA-4 and isolation of regulatory cells | |
Ma et al. | Bispecific anti-CD3 x anti-B7-H3 antibody mediates T cell cytotoxic ability to human melanoma in vitro and in vivo | |
Fribourg et al. | Allospecific memory B cell responses are dependent on autophagy | |
EP2150819B1 (en) | S100a9 interaction screening method | |
TWI682940B (en) | Anti-ceacam1 antibody and use thereof | |
JP2002519669A (en) | Method for detecting T cell activation | |
Qiu et al. | Apoptosis of multiple myeloma cells induced by agonist monoclonal antibody against human CD28 | |
DE202008000834U1 (en) | Composition and reagent for CTLA-4 and uses thereof | |
US20180052162A1 (en) | Method to detect the onset and to monitor the recurrence of chronic graft versus host disease in tranplantation patients | |
KR102415341B1 (en) | Method of measuring of nk cell activity using bispecific antibody and diagnosing of nk cell activity-mediated disease | |
US20240034776A1 (en) | Use of regulator of itpripl1 in preparation of drug that regulates immune responses or fights tumors | |
US20240053360A1 (en) | Methods of selectively targeting cd6 high cells and decreasing activity of teff cells | |
WO2023272924A1 (en) | Novel fully human antibody for human b7h3, chimeric antigen receptor and uses thereof | |
KR20220030783A (en) | Biomarker for predicting efficacy of cancer immunotherapy and uses thereof | |
KR20160118691A (en) | DOCK8 protein diagnosing atopic dermatitis or level of immunity | |
CN117177771A (en) | Method for diagnosing and treating T cell lymphoma | |
CN116082502A (en) | Regulator for combining Galectin8 with LILRB4 and application thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
R207 | Utility model specification |
Effective date: 20080703 |
|
R079 | Amendment of ipc main class |
Free format text: PREVIOUS MAIN CLASS: C12N0005080000 Ipc: C12N0005071000 |
|
R150 | Utility model maintained after payment of first maintenance fee after three years |
Effective date: 20110217 |
|
R151 | Utility model maintained after payment of second maintenance fee after six years |
Effective date: 20140212 |
|
R152 | Utility model maintained after payment of third maintenance fee after eight years | ||
R071 | Expiry of right |