DE19813247C1 - Determining peroxide in a liquid sample - Google Patents

Determining peroxide in a liquid sample

Info

Publication number
DE19813247C1
DE19813247C1 DE1998113247 DE19813247A DE19813247C1 DE 19813247 C1 DE19813247 C1 DE 19813247C1 DE 1998113247 DE1998113247 DE 1998113247 DE 19813247 A DE19813247 A DE 19813247A DE 19813247 C1 DE19813247 C1 DE 19813247C1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
determination
peroxides
peroxides according
reaction
peroxidase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE1998113247
Other languages
German (de)
Inventor
Joerg Meyer
Uwe Dr Karst
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to DE1998113247 priority Critical patent/DE19813247C1/en
Application granted granted Critical
Publication of DE19813247C1 publication Critical patent/DE19813247C1/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N31/00—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods
    • G01N31/22—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators
    • G01N31/228—Investigating or analysing non-biological materials by the use of the chemical methods specified in the subgroup; Apparatus specially adapted for such methods using chemical indicators for peroxides
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
    • C12Q2326/50—Phenols; Naphthols; Catechols

Abstract

Determining peroxides in a liquid sample, comprises: (a) contacting the sample with a peroxidase and p-hydroxyphenyl acetic acid or p-hydroxyphenyl propionic acid; (b) adding terbium(III)-EDTA-complex and a strong alkaline solution to the reaction mixture; and (c) evaluating the reaction using fluorescence spectroscopy.

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden durch zeitverzögerte Fluoreszenz von Lanthanoidchelaten.The invention relates to a method for determining peroxides due to time-delayed fluorescence from lanthanoid chelates.

Der Bestimmung von Peroxiden kommt in der Analytischen Chemie eine große Bedeutung zu, denn Peroxide sind Bestandteil einer Vielzahl großtechnischer Verfahren, von Waschlaugen oder Desinfektionslösungen. Außerdem ist Wasserstoffperoxid das Produkt einer Reihe enzymkatalysierter Reaktionen. Somit kann durch eine H2O2-Bestimmung indirekt auch die Konzentration der entsprechenden Enzyme ermittelt werden. Desweiteren sind Hydroperoxide als atmosphärischer Bestandteil von Interesse.The determination of peroxides is of great importance in analytical chemistry, because peroxides are part of a large number of large-scale processes, such as wash liquors or disinfectant solutions. Hydrogen peroxide is also the product of a number of enzyme-catalyzed reactions. The concentration of the corresponding enzymes can thus also be determined indirectly by an H 2 O 2 determination. Hydroperoxides are also of interest as an atmospheric component.

Einige Verfahren nutzen die katalytische Wirkung des Enzyms Peroxidase für die Peroxidanalytik, in anderen dient die Peroxidase als Marker bei Immunoassays. Niedrige Nachweisgrenzen lassen sich durch Verwendung von p-Hydroxyphenylessigsäure als Substrat erzielen, dabei wird die Bildung der fluoreszierenden 2,2'- Dihydroxybiphenyl-5,5'-diessigsäure aus dem nicht fluoreszierenden Edukt ausgenutzt. Analoge Ergebnisse werden mit der verwandten p- Hydroxyphenylpropionsäure erhalten.Some processes use the catalytic effect of the enzyme Peroxidase for peroxide analysis, in others the peroxidase is used as a marker in immunoassays. Low detection limits can be by using p-hydroxyphenylacetic acid as a substrate achieve, the formation of the fluorescent 2,2'- Dihydroxybiphenyl-5,5'-diacetic acid from the non-fluorescent Educt used. Analogous results are obtained with the related p- Get hydroxyphenylpropionic acid.

Das Hauptproblem derartiger fluorimetrischer Bestimmungen liegt in der Limitierung der Nachweisgrenzen durch natürliche Hintergrundfluoreszenz und Streustrahlung. Es existieren jedoch Anwendungen, bei denen die langlebige Fluoreszenz von Seltenerdmetallchelaten dazu genutzt wird, eben diese Hintergrundstrahlung durch zeitverzögerte Aufnahme des Meßsignals deutlich zu reduzieren. Zusätzlich erfolgt eine Vergrößerung der Stokes'schen Verschiebung (Abstand zwischen Anregungs- und Emissionsmaximum) auf weit über 100 nm. Dies bedeutet eine weitere Verbesserung des Verhältnisses zwischen spezifischer und unspezifischer Fluoreszenz. Häufige Anwendung finden Europium (III)- Chelate als Markersubstanzen in Immunoassays. Nach der Immunreaktion und verschiedenen weiteren Aufarbeitungsschritten wird die Fluoreszenz des Europiums zeitverzögert detektiert (neben vielen weiteren Literaturstellen unter anderem beschrieben bei Soini, E.; Kojola, H. Clin. Chem. 29 (1983) 65, Diamandis, E. P. Clin. Biochem. 21 (1988) 139).The main problem with such fluorimetric determinations lies in the limitation of the detection limits by natural Background fluorescence and scattered radiation. However, there are Applications in which the long-lasting fluorescence of Rare earth metal chelates are used to do this Background radiation due to delayed recording of the measurement signal to reduce significantly. In addition, the Stokes' shift (distance between excitation and Emission maximum) to well over 100 nm. This means another Improve the relationship between specific and nonspecific fluorescence. Europium (III) is frequently used - Chelates as marker substances in immunoassays. After Immune reaction and various other processing steps  the fluorescence of the europium is detected with a time delay (next to described in many other references, among others Soini, E .; Kojola, H. Clin. Chem. 29 (1983) 65, Diamandis, E.P. Clin. Biochem. 21: 139 (1988).

Verfahren, die eine enzymatische Reaktion mit der Bildung eines Lanthanoidchelates aus einem der Reaktionsprodukte koppeln, sind in der Literatur unter der Bezeichnung EALL (enzyme-amplified lanthanide luminescence) beschrieben worden (Evangelista, R. A.; Pollak, A.; Gudgin Templeton, E. F. Anal. Biochem. 197 (1991) 213; Gudgin Templeton, E. F.; Wong, H. E.; Evangelista, R. A.; Granger T.; Pollak A. Clin. Chem. 37(9) (1991) 1506; Papanastasiou-Diamandi, A.; Christopoulos T. K.; Diamandis,E. P. Clin. Chem. 38(4) (1992) 545; Christopoulos T. K., Diamandis E. P. Anal. Chem. 64 (1992) 342). Keines der geschilderten Verfahren diente jedoch der Peroxidbestimmung oder nutzte Peroxidase.Process involving an enzymatic reaction with the formation of a Coupling lanthanoid chelates from one of the reaction products are in the literature under the name EALL (enzyme-amplified lanthanide luminescence) (Evangelista, R. A .; Pollak, A .; Gudgin Templeton, E.F. Anal. Biochem. 197 (1991) 213; Gudgin Templeton, E. F .; Wong, H.E .; Evangelista, R. A .; Granger T .; Pollak A. Clin. Chem. 37 (9) (1991) 1506; Papanastasiou-Diamandi, A .; Christopoulos T. K .; Diamandis, E. P. Clin. Chem. 38 (4) (1992) 545; Christopoulos T.K., Diamandis E.P. Anal. Chem. 64 (1992) 342). However, none of the described processes served the Peroxide determination or used peroxidase.

In Zheng, X.-Y.; Lu J.-Z.; Zhu, Q.-Z.; Xu, J.-G.; Li, Q.-G. Analyst 122 (1997) 455 ist die Bildung fluoreszierender Terbium(III)- Chelate aus dem unter Häminkatalyse und Wasserstoffperoxideinwirkung gebildeten Oxidationsprodukt von p- Hydroxybenzoesäure beschrieben. Daraus wurde von den Autoren eine Methode zur Bestimmung mit Hämin markierten Albumins entwickelt. Die Autoren heben hervor, daß unter den von ihnen gewählten Bedingungen p-Hydroxyphenylessigsäure oder p- Hydroxyphenylpropionsäure als Substrate ungeeignet sind.In Zheng, X.-Y .; Lu J.-Z .; Zhu, Q.-Z .; Xu, J.-G .; Li, Q.-G. Analyst 122 (1997) 455 is the formation of fluorescent terbium (III) - Chelates from under hemin catalysis and Oxidation product of p- Hydroxybenzoic acid described. The authors turned this into a Method for determining albumins marked with hemin developed. The authors emphasize that among those chosen by them Conditions p-hydroxyphenylacetic acid or p- Hydroxyphenylpropionic acid are unsuitable as substrates.

Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Verfügung zu stellen, mit dem Peroxide besonders selektiv bestimmt werden sollen. Hierzu sollen die zeitverzögerte Fluoreszenz und die große Stokes'sche Verschiebung der Lanthanoidchelate zur Peroxidanalytik eingesetzt werden.The present invention is based on the object To provide procedures with which peroxides in particular to be determined selectively. To do this, the time-delayed Fluorescence and the large Stokes shift of the Lanthanoid chelates are used for peroxide analysis.

Überraschenderweise wurde gefunden, daß Komplexe von Terbium(III) und EDTA mit den durch Peroxidasekatalyse in Gegenwart von Oxidantien wie Wasserstoffperoxid gebildeten Dimeren von p- Hydroxyphenyl-essigsäure oder p-Hydroxyphenylpropionsäure in Gegenwart von Schwerionensalzen wie CsCl und bei hohen pH-Werten ternäre Chelate bilden, welche bei Anregung des chelatisierenden Dimers durch Licht geeigneter Wellenlänge die für das Seltenerdmetall typische Fluoreszenz zeigen. Die Fluoreszenz der erhaltenen ternären Terbium(III)-Komplexe läßt sich für die Quantifizierung von Peroxiden oder indirekt auch von Peroxidase nutzen.Surprisingly, it was found that complexes of terbium (III) and EDTA with those by peroxidase catalysis in the presence of Oxidants such as hydrogen peroxide formed dimers of p-  Hydroxyphenyl acetic acid or p-hydroxyphenylpropionic acid in Presence of heavy ion salts such as CsCl and at high pH values form ternary chelates, which upon excitation of the chelating Dimers by light of suitable wavelength which for the Show rare earth metal typical fluorescence. The fluorescence of the obtained ternary terbium (III) complexes can be used for Quantification of peroxides or indirectly also of peroxidase use.

Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man eine flüssige Probe, die ein Peroxid enthält, mit einer Peroxidase und p- Hydroxyphenylessigsäure oder p-Hydroxyphenylpropionsäure in Kontakt bringt, nach erfolgter Reaktion einen Terbium(III)-EDTA-Komplex und eine stark alkalische Lösung zugibt und die Reaktion fluoreszenzspektroskopisch auswertet. Das erfindungsgemäße Verfahren kann zur Bestimmung aller Peroxide eingesetzt werden, die in Gegenwart einer Peroxidase oder Microperoxidase die genannten Hydroxyphenylcarbonsäuren zu fluoreszierenden Dimeren oxidieren.The invention relates to a method for determining Peroxides, which is characterized in that a liquid Sample containing a peroxide with a peroxidase and p- Hydroxyphenylacetic acid or p-hydroxyphenylpropionic acid in contact brings, after the reaction, a terbium (III) EDTA complex and a strong alkaline solution adds and the reaction evaluated by fluorescence spectroscopy. The invention The method can be used to determine all peroxides that in the presence of a peroxidase or microperoxidase Oxidize hydroxyphenylcarboxylic acids to fluorescent dimers.

Das Verfahren kann auch für die Auswertung von Immunoassays verwendet werden, in denen eine der Immunkomponenten mit einer Peroxidase oder einem Enzym, das bei der von ihm katalysierten Umsetzung Peroxide freizusetzen vermag, markiert ist.The method can also be used for the evaluation of immunoassays be used in which one of the immune components with a Peroxidase or an enzyme in the catalyzed by him Implementation is able to release peroxides is marked.

Das erfindungsgemäße Verfahren soll im folgenden anhand von Beispielen verdeutlicht werden:The method according to the invention is to be described below with reference to Examples are illustrated:

Beispiel 1:Example 1:

Kalibration für WasserstoffperoxidCalibration for hydrogen peroxide

Es werden zwei Reagenzlösungen angesetzt:Two reagent solutions are made up:

Lösung 1:Solution 1:

2,5 mg Peroxidase (aus Meerrettich, 116 u/mg)
8,3 mg p-Hydroxyphenylpropionsäure mit Ammonium-/Ammoniumchlorid-Puffer pH 9,5 auf 50 ml auffüllen. 2.5 mg peroxidase (from horseradish, 116 u / mg)
Fill 8.3 mg of p-hydroxyphenylpropionic acid to 50 ml with ammonium / ammonium chloride buffer pH 9.5.

Lösung 2:Solution 2:

112 mg TbCl3 112 mg TbCl 3

. 6H2 . 6H 2

O
112 mg Na2 O
112 mg Na 2

EDTA . 2H2 EDTA. 2H 2

O
3,72 g CsCl mit 0,1 M NaOH auf 10 ml auffüllen.O
Make up 3.72 g CsCl with 0.1 M NaOH to 10 ml.

Auf einer Mikrotiterplatte werden in einer Kavität 50 µl der Lösung 1 und 50 µl einer 0,05 bis 100 µol/L enthaltenden Wasserstoffperoxidlösung zusammengegeben. Nach 15 min werden 50 µl der Lösung 2 und 10 µl 1 M NaOH zugesetzt. Anschließend wird die Fluoreszenz bei 548 nm mit einer Anregungswellenlänge von 320 nm bei einer Zeitverzögerung von 100 µs und einer Integrationsdauer von 900 µs bestimmt. Die Intensität der Fluoreszenzsignals wird in Abhängigkeit von der Wasserstoffperoxidkonzentration in Form einer Kalibrationsfunktion aufgetragen. Mit Hilfe dieser Kalibrationsfunktion läßt sich der Wasserstoffperoxidgehalt unbekannter Lösungen bestimmen.50 µl of the solution are placed in a cavity on a microtiter plate 1 and 50 µl of a 0.05 to 100 µol / L containing Combined hydrogen peroxide solution. After 15 min, 50 µl 2 and 10 µl of 1 M NaOH were added to the solution. Then the Fluorescence at 548 nm with an excitation wavelength of 320 nm with a time delay of 100 µs and an integration period of 900 µs determined. The intensity of the fluorescence signal is in Dependence on the hydrogen peroxide concentration in the form of a Calibration function applied. With the help of this Calibration function can be the hydrogen peroxide content determine unknown solutions.

Beispiel 2:Example 2:

Kalibration für t-ButylhydroperoxidCalibration for t-butyl hydroperoxide

Es werden zwei Reagenzlösungen angesetzt:Two reagent solutions are made up:

Lösung 1:Solution 1:

2,5 mg Peroxidase (aus Meerrettich, 116 u/mg)
7,6 mg p-Hydroxyphenylessigsäure mit Ammonium-/Ammoniumchlorid-Puffer pH 9,5 auf 50 ml auffüllen.2.5 mg peroxidase (from horseradish, 116 u / mg)
Fill up 7.6 mg p-hydroxyphenylacetic acid with ammonium / ammonium chloride buffer pH 9.5 to 50 ml.

Lösung 2:Solution 2:

112 mg TbCl3 112 mg TbCl 3

. 6H2 . 6H 2

O
112 mg Na2 O
112 mg Na 2

EDTA . 2H2 EDTA. 2H 2

O
3,72 g CsCl mit 0,1 M NaOH auf 10 ml auffüllen. O
Make up 3.72 g CsCl with 0.1 M NaOH to 10 ml.

Auf einer Mikrotiterplatte werden in einer Kavität 50 µl der Lösung 1 und 50 µl einer 0,1 bis 100 µM enthaltenden t-Butyl­ hydroperoxidlösung zusammengegeben. Nach einer Reaktionszeit von 15 min werden 50 µl der Lösung 2 und 10 µl 1 M NaOH zugesetzt. Anschließend wird die Fluoreszenz bei 548 nm mit einer Anregungswellenlänge von 320 nm bei einer Zeitverzögerung von 100 µs und einer Integrationsdauer von 900 µs bestimmt. Die Intensität der Fluoreszenzsignals wird in Abhängigkeit von der t-Butylhydroperoxidkonzentration in Form einer Kalibrationsfunktion aufgetragen. Mit Hilfe dieser Kalibrationsfunktion läßt sich der t- Butylhydroperoxidgehalt unbekannter Lösungen bestimmen.50 µl of the solution are placed in a cavity on a microtiter plate 1 and 50 µl of a 0.1 to 100 µM containing t-butyl hydroperoxide solution combined. After a response time of 15 min 50 ul of solution 2 and 10 ul 1 M NaOH are added. Then the fluorescence at 548 nm with a Excitation wavelength of 320 nm with a time delay of 100 µs and an integration period of 900 µs determined. The intensity of the fluorescence signal is dependent on the t-Butyl hydroperoxide concentration in the form of a calibration function applied. With the help of this calibration function, the t Determine the butyl hydroperoxide content of unknown solutions.

Claims (10)

1. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden, gekennzeichnet dadurch, daß man eine flüssige Probe mit einer Peroxidase und p- Hydroxyphenylessigsäure oder p-Hydroxyphenylpropionsäure in Kontakt bringt, nach erfolgter Reaktion einen Terbium(III)-EDTA-Komplex und eine stark alkalische Lösung zugibt und die Reaktion fluoreszenzspektroskopisch auswertet.1. A method for the determination of peroxides, characterized in that a liquid sample is brought into contact with a peroxidase and p-hydroxyphenylacetic acid or p-hydroxyphenylpropionic acid, a terbium (III) EDTA complex and a strongly alkaline solution are added after the reaction and evaluates the reaction by fluorescence spectroscopy. 2. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach Anspruch 1, gekennzeichnet dadurch, daß die flüssige Probe durch Anreicherung von Analyten aus der Gasphase oder Aerosolphase in einer Absorptionslösung erhalten wird.2. A method for determining peroxides according to claim 1, characterized in that the liquid sample by enrichment of analytes from the gas phase or aerosol phase in one Absorption solution is obtained. 3. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 2, gekennzeichnet dadurch, daß die Auswertung der Reaktion unter Einsatz einer zeitverzögerten Fluoreszenzmessung erfolgt.3. Method for the determination of peroxides according to at least one of claims 1 to 2, characterized in that the evaluation the reaction using a time-delayed fluorescence measurement he follows. 4. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 3, gekennzeichnet dadurch, daß ein Schweratomsalz zugesetzt wird.4. Method for the determination of peroxides according to at least one of claims 1 to 3, characterized in that a Heavy atom salt is added. 5. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 4, gekennzeichnet dadurch, daß das Schweratomsalz Cäsiumchlorid ist.5. Method for the determination of peroxides according to at least one of claims 1 to 4, characterized in that the Heavy atom salt is cesium chloride. 6. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 5, gekennzeichnet dadurch, daß eine oberflächenaktive Substanz zugesetzt wird.6. Method for the determination of peroxides according to at least one of claims 1 to 5, characterized in that a surfactant is added. 7. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 6, gekennzeichnet dadurch, daß eine Konzentration der oberflächenaktiven Substanz oberhalb der kritischen mizellaren Konzentration eingesetzt wird. 7. Method for the determination of peroxides according to at least one of claims 1 to 6, characterized in that a Concentration of surfactant above critical micellar concentration is used.   8. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 7, gekennzeichnet dadurch, daß das Verfahren nach einer flüssigchromatographischen Trennung als Nachsäulendetektion eingesetzt wird.8. Method for the determination of peroxides according to at least one of claims 1 to 7, characterized in that the method after a liquid chromatographic separation as Post column detection is used. 9. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 8, gekennzeichnet dadurch, daß das Verfahren zur Detektion eines Immunoassays herangezogen wird, bei dem eine Peroxidase-markierte Immunkomponente eingesetzt wird.9. Method for the determination of peroxides according to at least one of claims 1 to 8, characterized in that the method is used for the detection of an immunoassay in which a Peroxidase-labeled immune component is used. 10. Verfahren zur Bestimmung von Peroxiden nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis 8, gekennzeichnet dadurch, daß das Verfahren zur Detektion eines Immunoassays herangezogen wird, bei dem eine Immunkomponente eingesetzt wird, die mit einem Enzym markiert ist, welches eine Reaktion unter Freisetzung von Wasserstoffperoxid katalysiert.10. Method for the determination of peroxides according to at least one of claims 1 to 8, characterized in that the method is used for the detection of an immunoassay in which a Immune component is used, which is labeled with an enzyme, which is a reaction releasing hydrogen peroxide catalyzed.
DE1998113247 1998-03-25 1998-03-25 Determining peroxide in a liquid sample Expired - Fee Related DE19813247C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE1998113247 DE19813247C1 (en) 1998-03-25 1998-03-25 Determining peroxide in a liquid sample

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE1998113247 DE19813247C1 (en) 1998-03-25 1998-03-25 Determining peroxide in a liquid sample

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE19813247C1 true DE19813247C1 (en) 1999-06-24

Family

ID=7862342

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE1998113247 Expired - Fee Related DE19813247C1 (en) 1998-03-25 1998-03-25 Determining peroxide in a liquid sample

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE19813247C1 (en)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10102839A1 (en) * 2001-01-22 2002-08-01 Tanja Steinkamp Determining hydrolytic enzymes, useful e.g. for detecting immunoassay labels, using fluorescence from terbium chelate of bis(pyridylmethyl)-(2-hydroxybenzyl)amine
EP1239049A2 (en) * 2001-03-09 2002-09-11 Chromeon GmbH Hydrogen peroxide determination using oxidases and lanthanoide-ligand complexes
EP2821500A1 (en) * 2013-07-02 2015-01-07 Universität Leipzig Phosphorescence-based hydrogen peroxide assay for the detection of hydrogen peroxide in human serum and water samples
WO2015000910A1 (en) * 2013-07-02 2015-01-08 Universität Leipzig Phosphorescence-based hydrogen peroxide assay for the detection of hydrogen peroxide in human serum and water samples

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LI, Qing-Ge: Study of a lanthanide fluorescence system with a coupled reaction based on hemin catalysis, Analyst (Cambridge, U.K.) (1997), 122(5), 455-458 *
LU, Jian-Zhong *
XU, Jin-Gou *
ZHENG, Xue-Ying *
ZHU, Qing-Zhi *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10102839A1 (en) * 2001-01-22 2002-08-01 Tanja Steinkamp Determining hydrolytic enzymes, useful e.g. for detecting immunoassay labels, using fluorescence from terbium chelate of bis(pyridylmethyl)-(2-hydroxybenzyl)amine
DE10102839C2 (en) * 2001-01-22 2003-02-06 Tanja Steinkamp Method for the determination of hydrolytic enzymes
EP1239049A2 (en) * 2001-03-09 2002-09-11 Chromeon GmbH Hydrogen peroxide determination using oxidases and lanthanoide-ligand complexes
EP1239049A3 (en) * 2001-03-09 2003-08-27 Chromeon GmbH Hydrogen peroxide determination using oxidases and lanthanoide-ligand complexes
US7052864B2 (en) 2001-03-09 2006-05-30 Active Motif Chromeon Gmbh Bioanalytical measuring method using oxidases and lanthanoid-ligand complexes
EP2821500A1 (en) * 2013-07-02 2015-01-07 Universität Leipzig Phosphorescence-based hydrogen peroxide assay for the detection of hydrogen peroxide in human serum and water samples
WO2015000910A1 (en) * 2013-07-02 2015-01-08 Universität Leipzig Phosphorescence-based hydrogen peroxide assay for the detection of hydrogen peroxide in human serum and water samples

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69823845T2 (en) NEW COMPOUNDS FOR GENERATING CHEMILUMINESCENCE WITH THE HELP OF A PEROXIDASE
DE69936284T2 (en) SIMPLIFIED SEQUENCING CHEMILUMINESCENCE DETECTION
DE69534856T2 (en) MEASUREMENT OF THE SPEED OF BIOMOLECULAR REACTIONS BY MEANS OF ELECTROCHEMOLUMINESCENCE
DE69827152T2 (en) CHEMILUMINESCENT COMPOSITIONS AND CORRESPONDING METHODS
DD269919A5 (en) Ion determination in fluids
EP1239049A2 (en) Hydrogen peroxide determination using oxidases and lanthanoide-ligand complexes
JPS61212762A (en) Improved emission analysis
EP0186134A1 (en) Means for improving the determination of oxidase reactions producing hydrogen peroxyde, and their use
JPH0354304B2 (en)
DE3003490A1 (en) REAGENT ON THE ANALYTICAL DETERMINATION OF HYDROGEN PEROXIDE
DE3533288A1 (en) METHOD AND REAGENT FOR SPECIFIC DETERMINATION OF HDL CHOLESTEROL IN SERUM
DE19813247C1 (en) Determining peroxide in a liquid sample
WO1994011726B1 (en) Non-azo 1,8-naphthalimide dyes for the detection and quantitation of a paramagnetic metal cation in a non-aqueous medium
Nakano et al. Flow-injection spectrophotometry of manganese by catalysis of the periodate oxidation of 2, 2′-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)
Brotea et al. Fluorometric determination of hydrogen peroxide using resorufin and peroxidase
US6136233A (en) Hydrogen peroxide based ECL
Economou et al. FIA determination of Cr III in tap water with chemiluminescence detection
Chen et al. Study on fluorometric determination of hydrogen peroxide catalyzed by iron (III)-tetrasulfonato-phthalocyanine with thiamine hydrochloride as a substrate
Kawashima et al. Flow-injection determination of copper (II) based on its catalytic effect on the oxidative coupling of 3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone with N-ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3, 5-dimethoxyaniline in a micellar medium
DE3403250A1 (en) NEW HIGHLY SENSITIVE ENZYMATIC TEST METHOD
EP0408075B1 (en) Method and reagent for the determination of antithrombin III
EP1445603B1 (en) Fluorometric Determination of Analytes with Amine-N-Oxides as Redox-Indicators
DE2910737C2 (en) Process for eliminating interfering secondary reactions in enzymatic analysis processes
DE3703081A1 (en) METHOD AND MEANS FOR DETECTING THIOLES
EP0216194B1 (en) Process and reagent to combat analyte detection interference in plasma samples

Legal Events

Date Code Title Description
8100 Publication of the examined application without publication of unexamined application
D1 Grant (no unexamined application published) patent law 81
8322 Nonbinding interest in granting licenses declared
8364 No opposition during term of opposition
8339 Ceased/non-payment of the annual fee