DE102005048187A1 - Mechanism for the determination of paracellular and transcellular permeabilities of cell cultures, comprises filter mechanism, fluorescent marker, fluorescence photometer, level measurer, pump, impedance spectrometer and computer system - Google Patents
Mechanism for the determination of paracellular and transcellular permeabilities of cell cultures, comprises filter mechanism, fluorescent marker, fluorescence photometer, level measurer, pump, impedance spectrometer and computer system Download PDFInfo
- Publication number
- DE102005048187A1 DE102005048187A1 DE200510048187 DE102005048187A DE102005048187A1 DE 102005048187 A1 DE102005048187 A1 DE 102005048187A1 DE 200510048187 DE200510048187 DE 200510048187 DE 102005048187 A DE102005048187 A DE 102005048187A DE 102005048187 A1 DE102005048187 A1 DE 102005048187A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- cell culture
- liquid
- computer system
- marker
- volume
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/46—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of cellular or enzymatic activity or functionality, e.g. cell viability
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
Description
Die Erfindung betrifft eine Einrichtung und ein Verfahren zur Bestimmung von parazellulären und transzellulären Permeabilitäten von Zellkulturen.The The invention relates to a device and a method for determining of paracellular and transcellular permeabilities of cell cultures.
Das Gesamtphänomen des Durchtritts von Substanzen durch flächenmäßig zusammenhängende Zellen hindurch wird durch Permeabilitäten definiert. Prinzipiell können zwei Formen von Permeabilitätsänderungen unterschieden werden. Einmal der transzelluläre Transport von Substanzen oder Wasser durch eine Zelle hindurch mit Hilfe einer zellulären Maschinerie oder der parazelluläre Tranport zwischen angrenzenden Zellen hindurch.The total phenomenon the passage of substances through coalesced cells passing through permeabilities Are defined. In principle, you can two forms of permeability changes be differentiated. Once the transcellular transport of substances or water through a cell with the help of a cellular machinery or the paracellular Tranport between adjacent cells.
Endothelzellen bilden als Grenzschicht zwischen intra- und extravasalem Raum eine semipermeable Barriere, die zudem unterschiedlichen physikalischen Einflüssen – Schubspannung, Blutdruck, Dehnung – ausgesetzt ist und sowohl den Austausch von im Blut gelösten Substanzen als auch die Passage korpuskulärer Elemente (Zellen) kontrolliert. Diese prinzipiellen Verhältnisse treffen ebenso für andere Grenzflächen bildende Zellschichten, zu denen z.B. Epithelien der Lunge, des Magens, des Darms, der Niere und Mesothelien von Hohlräumen und Lymphendothelien gehören, zu.endothelial form a boundary layer between intra- and extravasal space semipermeable barrier, which also has different physical Influences - shear stress, Blood pressure, stretching - exposed is and both the exchange of substances dissolved in the blood as well as the Passage corpuscular Controls elements (cells). These basic conditions meet as well other interfaces forming cell layers, e.g. Epithelia of the lungs, of the Stomach, intestine, kidney, and mesothelia of cavities and lymph endothelia belong, to.
Als Grenzflächen können Epithelzellen und Endothelzellen Ziel unterschiedlicher Stimuli werden, die auf verschiedenen Signalwegen unterschiedlichen Wegen zu einer Permeabilitäts-Zunahme führen. Solche Störungen kommen im Rahmen zahlreicher Erkrankungen vor, wie z.B. bei akuten und chronischen Entzündungsaktionen, Autoimmunerkrankungen u.a. Die Aufklärung der Mechanismen ist von generellem Interesse um die Pathogenese und gegebenenfalls als Basis zur Konzeptionierung therapeutischer Ansätze zu verstehen.When interfaces can Epithelial cells and endothelial cells target different stimuli be different ways on different signaling paths lead to a permeability increase. Such disorders occur in many diseases, such as in acute and chronic inflammatory actions, Autoimmune diseases u.a. The explanation of the mechanisms is general Interest in the pathogenesis and possibly as a basis for conception therapeutic approaches to understand.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, eine Einrichtung und ein Verfahren zur Bestimmung von parazellulären und transzellulären Permeabilitäten von Zellkulturen (engl. paracellular-transcellular permeability analyses system) anzugeben, die derart geeignet ausgebildet sind, dass die transzelluläre (transzytotische) Permeabilität und die parazelluläre Permeabilität von Zellen mittels Marker (engl. tracer) schnell, präzise und kostengünstig ermittelt werden können. Es soll insbesondere auch ein Nachweis von geringen Konzentrationen der Marker bei einer Markierungsrate von 1% gewährleistet werden.Of the Invention is based on the object, a device and a method for the determination of paracellular and transcellular permeabilities of cell cultures (paracellular-transcellular permeability analysis system), which are designed so suitable that the transcellular (transcytotic) permeability and the paracellular permeability of cells using markers (English tracer) quickly, accurately and inexpensively determined can be. In particular, it should also be a proof of low concentrations the markers are guaranteed at a labeling rate of 1%.
Die Aufgabe wird durch die Merkmale der Patentanspruchs 1 und 22 gelöst.The The object is solved by the features of patent claims 1 and 22.
Der Einrichtung zur Bestimmung von parazellulären und transzellulären Permeabilitäten von Zellkulturen, insbesondere zur Messung von Permeabilitätsparametern von Zellkulturen gemäß Patentanspruch 1 sind folgende apparative Einrichtungs-Komponenten innerhalb eines offenen Flüssigkeitskreislaufes zugeordnet:
- – mindestens eine Filtereinrichtung, wobei vorher auf einer Filtermembran die zu untersuchenden Zellen kultiviert und als eine rasenartige Zellkultur in eine Filtereinrichtung zur Analyse von Tranzytoprozessen eingesetzt werden. Dadurch entstehen zwei Kompartimente, ein oberes und ein unteres Kompartiment, in der Filtereinrichtung. Der Zellrasen wird mit einem hydrostatischen Druck beansprucht, der über eine Flüssigkeitssäule aufgebaut wird. Die Flüssigkeit enthält mindestens einen fluoreszierenden Marker mit einer Eingangskonzentration KE und einem Eingangsvolumen VE. Mit Hilfe eines ersten Drucksensors wird die Konstanthaltung der Flüssigkeitssäule über ein Regelsystem durchgeführt.
- – mindestens ein Fluoreszenzphotometer zur Erfassung mindestens eines durch die Zellkultur hindurch tretenden fluoreszierenden Markers,
- – mindestens ein Füllstandsmesser mit einem zweiten Drucksensor zur Messung der durch den Zellrasen hindurch getretenen Volumenmenge VA,
- – mindestens eine Pumpe zur Aufrechterhaltung des Flüssigkeitskreislaufes, die mit der Filtereinrichtung in Verbindung steht, wobei die Filtereinrichtung, das Fluoreszenzphotometer, der Füllstandsmesser und die Pumpe sich im Flüssigkeitskreislauf befinden sowie
- – ein Impedanzspektrometer zur Messung des elektrischen transendothelialen Widerstandes TER der Zellkultur und
- – ein Computersystem zur Messsteuerung und Auswertung sowie zur Anzeige verschiedener Parameter, aus denen die parazellulären Permeabilitäten Pp und die transzellulären Permeabilitäten Pt als Funktionen der Größen KE, KA, TER, VE, VA berechnet werden können.
- - At least one filter device, wherein previously cultivated on a filter membrane, the cells to be examined and used as a lawn-like cell culture in a filter device for the analysis of Tranzytoprozessen. This results in two compartments, an upper and a lower compartment, in the filter device. The cell lawn is subjected to a hydrostatic pressure, which is built up via a liquid column. The liquid contains at least one fluorescent marker with an input concentration K E and an input volume V E. With the help of a first pressure sensor, the constant maintenance of the liquid column is carried out via a control system.
- At least one fluorescence photometer for detecting at least one fluorescent marker passing through the cell culture,
- At least one level gauge with a second pressure sensor for measuring the amount of volume V A passed through the cell lawn,
- - At least one pump for maintaining the liquid circuit, which is in communication with the filter device, wherein the filter device, the fluorescence photometer, the level gauge and the pump are in the liquid circuit and
- An impedance spectrometer for measuring the electrical transendothelial resistance TER of the cell culture and
- A computer system for measuring control and evaluation and for displaying various parameters from which the paracellular permeabilities P p and the transcellular permeabilities P t can be calculated as functions of the quantities K E , K A , TER, V E , V A.
Das erfindungsgemäße Verfahren zur Bestimmung von parazellulären Permeabilitäten Pp und transzellulären Permeabilitäten Pt von Zellkulturen gemäß Patentanspruch 22 mittels der vorgenannten Einrichtung ist durch folgende Schritte gekennzeichnet,
- – Vorgabe des Eingangsvolumens VE und der Eingangskonzentration KE in einer Filtereinrichtung,
- – Konstanthaltung des Eingangsvolumens VE und eines Eingangsdrucks mittels eines Füllstandsmessers,
- – Messen des transendothelialen elektrischen Widerstandes TER mittels eines Impedanzspektrometers,
- – Messung von durch den Zellrasen hindurchtretenden Substanzen (einer Ausgangskonzentration KA) mittels eines Fluoreszenzphotometers,
- – Speichern der gemessenen Größen KE, KA, TER, VE, VA im Speicher des Computersystems,
- – Berechnung der Permeabilitäten Pp, Pt als Funktionen der Messwerte der Größen KE, KA, TER, VE, VA mit Pp, Pt = f(KE, KA, TER VE, VA)
- – Darstellung der Permeabilitäten Pp, Pt in Kurvenform,
- – Vergleich der Permeabilitäts-Kurven und
- – Anwendung eines Massenbilanzierungsprogrammes.
- - Specification of the input volume V E and the input concentration K E in a filter device,
- Keeping constant the input volume V E and an inlet pressure by means of a level gauge,
- Measuring the transendothelial electrical resistance TER by means of an impedance spectrometer,
- - Measurement of passing through the cell lawn substances (a Ausgangskonzentrati on K A ) by means of a fluorescence photometer,
- Storing the measured quantities K E , K A , TER, V E , V A in the memory of the computer system,
- Calculation of the permeabilities P p , P t as functions of the measured values of the quantities K E , K A , TER, V E , V A with P p , P t = f (K E , K A , TER V E , V A )
- Representation of the permeabilities P p , P t in the form of a curve,
- - Comparison of the permeability curves and
- - Application of a mass balance program.
Dabei werden im Wesentlichen zeitgleiche Mehrfachmessungen an die Marker enthaltenden Flüssigkeiten sowohl bei mehreren unterschiedlichen Wellenlängen als auch in mehreren Durchflussküvetten, durch die Flüssigkeiten mit der zu messenden Konzentration der Marker fließen, durchgeführt und dabei störendes Streulicht minimiert.there are essentially simultaneous multiple measurements to the markers containing liquids both at several different wavelengths as well as in several flow cells, through the liquids with the concentration of markers to be measured, conducted and thereby disturbing Stray light minimized.
Mit der Einrichtung wird Messzeit eingespart, die Genauigkeit der Bestimmung der Permeabilitäten erhöht und die Parameter können quantitativ miteinander verglichen werden.With the device saves measurement time, the accuracy of the determination the permeabilities increased and the Parameters can quantitatively compared.
Weiterbildungen und weitere Ausgestaltungen der Erfindung sind in weiteren Unteransprüchen angegeben.further developments and further embodiments of the invention are specified in further subclaims.
Die Erfindung wird anhand von Ausführungsbeispielen mittels mehrerer Zeichnungen näher erläutert.The Invention is based on embodiments closer by means of several drawings explained.
Es zeigen:It demonstrate:
In
- – mindestens
eine der Zellkultur
16 enthaltende Filtereinrichtung2 zur Analyse von Transzytoseprozessen in der Zellkultur16 mittels jeweils einer Eingangskonzentration KE und eines Eingangsvolumens VE mindestens eines fluoreszierenden, der Flüssigkeit25 beigefügten Markers23 in einer, die Zellkultur16 mit einem hydrostatischen Druck belastenden Flüssigkeitssäule17 sowie mit einem ersten Drucksensor27 zur Regelung der Höhe der Flüssigkeitssäule17 , - – ein
Fluoreszenzphotometer
3 zur Erfassung einer jeweiligen Ausgangskonzentration KA des durch die Zellkultur16 diffundierenden Markers23 , - – mindestens
ein Füllstandsmesser
4 mit einem zweiten Drucksensor26 zur Regelung der Höhe einer zweiten Flüssigkeitssäule31 und zur Bestimmung eines Ausgangsvolumens VA der Flüssigkeit25 mit dem darin befindlichen Marker23 , - – eine
Pumpe
5 zur Aufrechterhaltung des Flüssigkeitskreislaufes6 , die mit der Filtereinrichtung2 in Verbindung steht, wobei die Filtereinrichtung2 , das Fluoreszenzphotometer3 , der Füllstandsmesser4 und die Pumpe5 sich im Flüssigkeitskreislauf6 befinden, sowie - – ein
Impedanzspektrometer
7 zur Messung des elektrischen transendothelialen Widerstandes TER der Zellkultur16 und - – ein
Computersystem
9 mit programmtechnischen Mitteln zur Messsteuerung und Auswertung sowie zur Anzeige der Permeabilitäten Pp, Pt als Funktionen von KE, KA, TER, VE, VA.
- - at least one of the cell culture
16 containing filter device2 for the analysis of transcytosis processes in cell culture16 in each case by means of an input concentration K E and an input volume V E of at least one fluorescent, the liquid25 attached marker23 in one, the cell culture16 with a hydrostatic pressure-polluting liquid column17 as well as with a first pressure sensor27 for regulating the height of the liquid column17 . - - a fluorescence photometer
3 for detecting a respective initial concentration K A of the cell culture16 diffusing marker23 . - - At least one level gauge
4 with a second pressure sensor26 for regulating the height of a second liquid column31 and for determining an initial volume V A of the liquid25 with the marker in it23 . - - a pump
5 to maintain the fluid circuit6 that with the filter device2 communicates with the filter device2 , the fluorescence photometer3 , the level gauge4 and the pump5 in the fluid circuit6 are located as well - - An impedance spectrometer
7 for measuring the electrical transendothelial resistance TER of the cell culture16 and - - a computer system
9 with program-technical means for measuring control and evaluation and for displaying the permeabilities P p , P t as functions of K E , K A , TER, V E , V A.
Das
Impedanzspektrometer
Das
Computersystem
Das
Computersystem
Die
Transwellfiltereinrichtung
In
In
der nach oben freien Kammer
Die
Kammer
Das
obere Kompartiment
Der
ersten Flüssigkeitssäule
In
Dafür ist in
der
Das
Fluoreszenzphotometer
- – eine Energieversorgungseinheit
36 , an die - – eine
Lichtquelle
37 , z.B. eine Leucht- oder Laserdiode angeschlossen ist, - – eine
erste Optik
38 , der - – ein
Anregungsfilter
39 nachgeordnet ist, die allesamt eine Anregungsanordnung40 bilden, - – eine
auf der Haltevorrichtung
35 angeordnete Durchflussküvette34 mit einem Küvettenzufluss41 und einem Küvettenabfluss42 , wobei sich in der Durchflussküvette34 die zugeführte Flüssigkeit25 mit mindestens einem vorgesehenen Marker23 befindet, - – eine
zweite Optik
44 , - – einen
Detektionsfilter
45 , - – eine
dritte Optik
46 sowie - – einen
Detektor
47 , - – eine
Auswerteeinrichtung
48 , die in das Computersystem9 integriert ist, wobei die zweite Optik44 , das Detektionsfilter45 , die dritte Optik46 und der Detektor47 mit Auswerteeinerichtung48 eine Detektoranordnung43 bilden.
- - a power supply unit
36 , to the - - a light source
37 , eg a light emitting diode or laser diode is connected, - - a first appearance
38 , of the - - an excitation filter
39 is subordinate, all an excitation order40 form, - - one on the holding device
35 arranged flow cell34 with a cuvette influx41 and a cuvette drain42 , being in the flow cell34 the supplied liquid25 with at least one designated marker23 is, - - a second optic
44 . - - a detection filter
45 . - - a third optics
46 such as - - a detector
47 . - - An evaluation
48 that are in the computer system9 is integrated, with the second optics44 , the detection filter45 , the third optics46 and the detector47 with evaluation device48 a detector arrangement43 form.
Anschlusskabel
Der
Küvettenzufluss
Das
Fluoreszenzphotometer
Dem
in
Die
Volumenmesskapillare
Vorzugsweise können Mehrfachvorgänge in mehreren parallel angeordneten und aufeinander abgestimmten Flüssigkeitskreisläufen durch eine entsprechende Anzahl der apparativen Einrichtungs-Komponenten durchgeführt werden. Z.B. können
- – die
Transwellfiltereinrichtung
2 mehrfach, vorzugsweise sechsfach, - – das
Fluoreszenzphotometer
3 für mehrfache, vorzugsweise sechs Detektionseinheiten, - – der
Füllstandsmesser
4 mehrfach, insbesondere sechsfach und - – die
Pumpe
5 in Form einer Mehrkanal-Rollerpumpe für mehrfache, vorzugsweise sechs Flüssigkeitskreislauf-Kanäle
während das Impedanzspektrometer
- - The transwell filter device
2 several times, preferably six times, - - the fluorescence photometer
3 for multiple, preferably six detection units, - - the level gauge
4 multiple, especially sixfold and - - the pump
5 in the form of a multi-channel roller pump for multiple, preferably six fluid circulation channels
while the impedance spectrometer
In
der
Mittels
der Trennwände
Das
Fluoreszenzphotometer
Zusätzlich können in
beiden Fluoreszenzphotometern
Als zweckmäßig erweisen sich Küvetten aus Quarzglas, mit denen das Signal-Rausch-Verhältnis wesentlich gesteigert werden kann.When prove expedient cuvettes made of quartz glass, which significantly increases the signal-to-noise ratio can be.
Auf
dem Verschiebetisch
Die
Fluoreszenzsignale bezogen auf den jeweiligen Marker
In
In
In
Auch die verwendete Zellkulturlösung – Promocell – ergibt bereits ein geringes Fluoreszenzsignal. Ab einer Konzentration von 0,41 μg/ml ist eine deutliche Zunahme der Fluoreszenzintensität zu erkennen. Nach Erreichen der höchsten Konzentration von 100 μg/ml ist die Durchflussküvette mit der Flüssigkeit 25 gespült und erneut die Fluoreszenz gemessen worden. Der Vorgang wird solange wiederholt, bis kein weiterer Abfall der Detektorsignale mehr zu beobachten ist. Zwischen den einzelnen Messungen wird die Durchflussküvette 34 aus dem Strahlengang entfernt, was am Einbruch der Detektorsignale erkennbar ist.Also the cell culture solution used - Promocell - results already a low fluorescence signal. From a concentration of 0.41 μg / ml a significant increase in fluorescence intensity can be seen. After reaching the highest Concentration of 100 μg / ml is the flow cell with the liquid 25 rinsed and again the fluorescence was measured. The process is as long as repeatedly until no further drop in detector signals is observed is. Between the individual measurements, the flow cell 34 removed from the beam path, which is due to the collapse of the detector signals is recognizable.
In
Die
Kombination von mehreren bei unterschiedlichen Wellenlängen arbeitenden
Fluoreszenzdetektionseinheiten
In
dem Verfahren zur Bestimmung von Permeabilitäten von Zellkulturen
- – Messen
des Eingangsvolumens VE und der Eingangskonzentration
KE mittels der Filtereinrichtung
2 , - – Messen
des Ausgangsvolumens VA mittels des Füllstandsmessers
4 , - – Messen
des elektrischen transendothelialen Widerstandes TER mittels des
Impedanzspektrometers
7 , - – Messung
der Ausgangskonzentration KA mittels des
Fluoreszenzphotometers
3 oder51 , - – Speichern
der gemessenen Größen KE, KA, TER, VE, VA im Speicher
des Computersystems
9 , - – Berechnung der Permeabilitäten Pp, Pt als Funktionen der Messwerte der Größen KE, KA, TER, VE, VA mit Pp, Pt = f(KE, KA, TER, VE, VA),
- – Darstellung der Permeabilitäten Pp, Pt in Kurvenform und
- – Vergleich der Permeabilitäts-Kurven.
- - Measuring the input volume V E and the input concentration K E by means of the filter device
2 . - - Measuring the output volume V A by means of the level gauge
4 . - - Measuring the electrical transendothelial resistance TER by means of the impedance spectrometer
7 . - - Measurement of the initial concentration K A by means of the fluorescence photometer
3 or51 . - - Saving the measured quantities K E , K A , TER, V E , V A in the memory of the computer system
9 . - Calculation of the permeabilities P p , P t as functions of the measured values of the quantities K E , K A , TER, V E , V A with P p , P t = f (K E , K A , TER, V E , V A )
- - Representation of the permeabilities P p , P t in waveform and
- - Comparison of the permeability curves.
Im
Folgenden wird die Funktionsweise der erfindungsgemäßen Einrichtung
Die
schichtartige Zellkultur
Über die
beiden Elektroden
Das
Fluoreszenzphotometer
Mit
der die zweite Flüssigkeitssäule
Als
Vergleichswerte für
die Permeabilitäten Pp, Pt bezogen auf
die den Marker
Die
Erfindung ermöglicht
es, dass insbesondere mit einer mehrkanaligen Einrichtung mehrere
in Molekulargewicht und Qualität
verschiedene Marker
Die
aus den apparativen Einrichtungs-Komponenten
Mit
den drei weitgehend zeitgleich aufgenommenen Messparametern – dem elektrischen transendothelialen
Widerstand TER, den Konzentrationen KE,
KA der Marker
Veränderungen,
wie z.B. Verstoffwechselung und Spaltung der Marker
Aus
der Kenntnis und Anzeige des Unterschiedes zumindest der beiden
genannten Permeabilitäten
Pt, Pp in Diagrammen
können
Schlussfolgerungen über
Transportweg und deren Störungen
in der Zellkultur
- 11
- EinrichtungFacility
- 22
- Filtereinrichtungfiltering device
- 33
- FluoreszenzphotometerFluorescence Photometer
- 44
- Füllstandsmesserlevel meter
- 55
- Pumpepump
- 66
- FlüssigkeitskreislaufLiquid circuit
- 77
- Impedanzspektrometerimpedance spectrometer
- 88th
- Erste VerbindungsleitungFirst connecting line
- 99
- Computersystemcomputer system
- 1010
- Erste LeitungenFirst cables
- 1111
- Zweite LeitungenSecond cables
- 1212
- Dritte Leitungenthird cables
- 1313
- Vierte LeitungenFourth cables
- 1414
- Kammerchamber
- 1515
- Filterinsertfilter insert
- 1616
- Zellkulturcell culture
- 1717
- Erste FlüssigkeitssäuleFirst liquid column
- 1818
- Ringelektrodering electrode
- 1919
- Elektrodenplatteelectrode plate
- 2020
- Oberes Kompartimentupper compartment
- 2121
- Unteres Kompartimentlower compartment
- 2222
- Zuführungsleitungfeed pipe
- 2323
- Markermarker
- 2424
- VolumenkapillareVolumenkapillare
- 2525
- Flüssigkeitliquid
- 2626
- Erster Drucksensorfirst pressure sensor
- 2727
- Zweiter Drucksensorsecond pressure sensor
- 2828
- Fünfte LeitungFifth lead
- 2929
- Erste Diffusions-VorgängeFirst Diffusion processes
- 3030
- Zweite Diffusions-VorgängeSecond Diffusion processes
- 3131
- Zweite FlüssigkeitssäuleSecond liquid column
- 3232
- Zweite VerbindungsleitungSecond connecting line
- 3333
- Abflussoutflow
- 3434
- DurchflussküvetteFlow Cell
- 3535
- Haltevorrichtungholder
- 351351
- Drehvorrichtungrotator
- 3636
- EnergieversorgungseinheitPower supply unit
- 3737
- Lichtquellelight source
- 3838
- erste Optikfirst optics
- 3939
- Anregungsfilterexcitation filter
- 4040
- Anregungsanordnungexcitation system
- 401401
- Anregungsanordnungexcitation system
- 402402
- Anregungsanordnungexcitation system
- 403403
- Anregungsanordnungexcitation system
- 4141
- KüvettenzuflussKüvettenzufluss
- 4242
- KüvettenabflussKüvettenabfluss
- 4343
- Detektoranordnungdetector array
- 431431
- Detektoranordnungdetector array
- 432432
- Detektoranordnungdetector array
- 433433
- Detektoranordnungdetector array
- 4444
- zweite Optiksecond optics
- 4545
- Detektionsfilterdetection filters
- 4646
- dritte Optikthird optics
- 4747
- Detektordetector
- 4848
- Auswerteeinrichtungevaluation
- 4949
- Anschlusskabelconnection cable
- 5050
- Anschlusskabelconnection cable
- 5151
- Fluoreszenzphotometer-MehrfachanordnungFluorescence Photometer multiple arrangement
- 5252
- Bodenground
- 531531
- Trennwandpartition wall
- 532532
- Trennwandpartition wall
- 533533
- Trennwandpartition wall
- 534534
- Trennwandpartition wall
- 535535
- Trennwandpartition wall
- 536536
- Trennwandpartition wall
- 5454
- DrehhalterungseinrichtungRotary support mechanism
- 5555
- Messsektormeasuring sector
- 5656
- Detektionseinheitdetection unit
- 5757
- Detektionseinheitdetection unit
- 5858
- Detektionseinheitdetection unit
- 5959
- AnregungswellenlängeExcitation wavelength
- 6666
- BeobachtungswellenlängeObservation wavelength
- 6161
- Pfeilrichtungarrow
- 6262
- Verschiebetischtranslation stage
- 6363
- Strahlengangbeam path
- 6464
- Semigermeabler SpiegelSemigermeabler mirror
- VE V E
- Eingangsvolumeninput volume
- VA V A
- Ausgangsvolumenoutput volume
- TERTER
- transendothelialer elektrischer Widerstandtransendothelial electrical resistance
- KE K E
- Eingangskonzentration des Markersinlet concentration of the marker
- KA K A
- Ausgangskonzentration des Markersinitial concentration of the marker
- Pp P p
- parazelluläre Permeabilitätparacellular permeability
- Pt P t
- transzelluläre Permeabilitättranscellular permeability
Claims (30)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE200510048187 DE102005048187B4 (en) | 2005-10-02 | 2005-10-02 | Apparatus and method for measuring parameters for determining paracellular and transcellular permeabilities of cell cultures |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE200510048187 DE102005048187B4 (en) | 2005-10-02 | 2005-10-02 | Apparatus and method for measuring parameters for determining paracellular and transcellular permeabilities of cell cultures |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE102005048187A1 true DE102005048187A1 (en) | 2007-04-12 |
DE102005048187B4 DE102005048187B4 (en) | 2010-05-20 |
Family
ID=37886995
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE200510048187 Expired - Fee Related DE102005048187B4 (en) | 2005-10-02 | 2005-10-02 | Apparatus and method for measuring parameters for determining paracellular and transcellular permeabilities of cell cultures |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
DE (1) | DE102005048187B4 (en) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102008034008A1 (en) * | 2008-07-21 | 2010-01-28 | Carl Zeiss Surgical Gmbh | Filter kit for the observation of fluorescence radiation in biological tissue |
CN108181286A (en) * | 2018-02-02 | 2018-06-19 | 浙江工业大学 | A kind of sink using three-dimensional fluorescence technology with real-time pesticide monitoring function |
CN111921224A (en) * | 2020-06-12 | 2020-11-13 | 漳州职业技术学院 | Nitrite scavenging additive production line and preparation method thereof |
-
2005
- 2005-10-02 DE DE200510048187 patent/DE102005048187B4/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
GAILLARD, P.J. & de Boer, A.G.: Relationship between permeability status of the blood-brain barrier and in vitro permeability coefficient of a drug, Eur. J. Pharm. Sci. (2000)12(2)95-102 |
GAILLARD, P.J. & de Boer, A.G.: Relationship between permeability status of the blood-brain barrier and in vitro permeability coefficient of adrug, Eur. J. Pharm. Sci. (2000)12(2)95-102 * |
GAILLARD, P.J. u.a.: Establishment and functional characterization of an in vitro model of the blood-brain barrier, comprising a co-culture of brain capillary endothelial cells and astrocytes, Eur. J. Pharm. Sci. (2001)12(3)215-22 * |
http://forschungsinfo.tu-dresden.de/recherche/s_ abschlussdetails.htm I?abschluss_id=2727&professur _id=41&suchwort=Permeabilität: Karsten Fuß: Entwicklung eines Messplatzes zur in-vitro Unter- suchung der para- und transzellulären Permeabili- tät von Endothelzellen [recherchiert am 19.06. 2006] |
http://forschungsinfo.tu-dresden.de/recherche/s_ abschlussdetails.htm I?abschluss_id=2727&professur_id=41&suchwort=Permeabilität: Karsten Fuß: Entwicklung eines Messplatzes zur in-vitro Unter- suchung der para- und transzellulären Permeabili- tät von Endothelzellen [recherchiert am 19.06. 2006] * |
ROUX, K.J. u.a.: Modulation of epithelial morphology, monolayer permeability, and cell migration by growth arrest specific 3/peripheral myelin protein 22, Mol. Biol. Cell. (März 2005)16 (3)1142-51 |
WAHL-JENSEN, V.M. u.a.: Effects of Ebola virus glycoproteins on endothelial cell activation and barrier function, J. Virol. (Aug. 2005)79(16) 10442-50 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102008034008A1 (en) * | 2008-07-21 | 2010-01-28 | Carl Zeiss Surgical Gmbh | Filter kit for the observation of fluorescence radiation in biological tissue |
DE102008034008B4 (en) * | 2008-07-21 | 2010-07-01 | Carl Zeiss Surgical Gmbh | Filter kit for the observation of fluorescence radiation in biological tissue |
US8306600B2 (en) | 2008-07-21 | 2012-11-06 | Carl Zeiss Meditec Ag | Filter set for observing fluorescence radiation in biological tissue |
CN108181286A (en) * | 2018-02-02 | 2018-06-19 | 浙江工业大学 | A kind of sink using three-dimensional fluorescence technology with real-time pesticide monitoring function |
CN111921224A (en) * | 2020-06-12 | 2020-11-13 | 漳州职业技术学院 | Nitrite scavenging additive production line and preparation method thereof |
CN111921224B (en) * | 2020-06-12 | 2021-10-29 | 漳州职业技术学院 | Nitrite scavenging additive production line and preparation method thereof |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE102005048187B4 (en) | 2010-05-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE60309476T2 (en) | OPTICAL DEVICE AND METHOD FOR MEASURING LIGHT TRANSMISSION | |
AT393326B (en) | INDICATOR SUBSTANCE FOR A MEASURING DEVICE FOR THE OPTICAL DETERMINATION OF INTERESTING PARAMETERS OF A SAMPLE AND MEASURING PROCEDURE THEREFOR | |
EP1590652A1 (en) | Multiparametric cell identification and sorting method and associated device | |
EP1308715A1 (en) | Method in the field of fluorescence microscopy for analysing samples having fluorophores | |
WO2003098313A2 (en) | Method and arrangement for analyzing samples | |
EP2446314B1 (en) | Method for evaluating fluorescence results in a microscope image | |
DE1673032A1 (en) | Method and device for measuring the gas or vapor permeability of films | |
EP0979402B1 (en) | Method for optical detection of analyte molecules in a natural biological medium | |
EP2142911A2 (en) | Biochip for carrying out a fluorescence analysis of individual transporters | |
WO2022136361A1 (en) | Method and microscope for recording trajectories of individual particles in a sample | |
DE102005048187B4 (en) | Apparatus and method for measuring parameters for determining paracellular and transcellular permeabilities of cell cultures | |
EP1461600A1 (en) | Method and/or system for identifying fluorescent, luminescent and/or absorbing substances on and/or in sample carriers | |
EP1067380A1 (en) | Process and device for analysing colloid particles in parallel by field flow fractionation | |
AT401689B (en) | METHOD AND DEVICE FOR MIXING TWO STARTING SOLUTIONS | |
DE2355148A1 (en) | CHRISTIAN EFFECT DETECTOR | |
DE2914571A1 (en) | HIGHLY SENSITIVE MEASURING CELL FOR REFRACTOMETER | |
EP2188365B1 (en) | Cell culture measuring system and method for comparative investigations on cell cultures | |
DE3736027A1 (en) | Method for determining the shape of cells which prevails at a specific instant and device for carrying out the method | |
DE2450609A1 (en) | DEVICE FOR THE AUTOMATIC DETERMINATION OF PROTEINS | |
DE10320956B4 (en) | Examination procedure for biological cells and associated examination equipment | |
DE102018126183B4 (en) | Method for determining the concentration of a fluorescent and / or fluorescence-labeled analyte and calibration method for preparing this determination | |
WO2021104579A9 (en) | Method and optrode for determining the concentration of an analyte by means of fret | |
DE102007010860B4 (en) | Method of identifying a particle with two or more monodisperse embedded fluorophores | |
WO2009071065A2 (en) | Device for measuring transport systems | |
WO2005075957A1 (en) | Microfluidic system comprising an electrode arrangement and associated control method |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
OP8 | Request for examination as to paragraph 44 patent law | ||
8364 | No opposition during term of opposition | ||
R082 | Change of representative |
Representative=s name: GOTTFRIED, HANS-PETER, DIPL.- ING., DE |
|
R081 | Change of applicant/patentee |
Owner name: ODENTHAL-SCHNITTLER, MARIA, DR., DE Free format text: FORMER OWNER: TECHNISCHE UNIVERSITAET DRESDEN, 01069 DRESDEN, DE Effective date: 20130617 |
|
R082 | Change of representative |
Representative=s name: GOTTFRIED, HANS-PETER, DIPL.- ING., DE Effective date: 20121206 |
|
R119 | Application deemed withdrawn, or ip right lapsed, due to non-payment of renewal fee |