CN1867583A - 优化的Fc变体及其产生方法 - Google Patents
优化的Fc变体及其产生方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1867583A CN1867583A CNA2004800189855A CN200480018985A CN1867583A CN 1867583 A CN1867583 A CN 1867583A CN A2004800189855 A CNA2004800189855 A CN A2004800189855A CN 200480018985 A CN200480018985 A CN 200480018985A CN 1867583 A CN1867583 A CN 1867583A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- variant
- antibody
- variant proteins
- sequence
- polypeptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 201
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 273
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 240
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 196
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 116
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 89
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 87
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 46
- -1 CA 125 Proteins 0.000 claims description 43
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 41
- 239000012636 effector Substances 0.000 claims description 39
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 38
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 38
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 38
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 claims description 29
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 claims description 28
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 claims description 22
- 108010021472 Fc gamma receptor IIB Proteins 0.000 claims description 20
- 102100029205 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Human genes 0.000 claims description 20
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 claims description 17
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 claims description 16
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims description 15
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 claims description 14
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 claims description 14
- 108010021468 Fc gamma receptor IIA Proteins 0.000 claims description 12
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 12
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 12
- 108010021470 Fc gamma receptor IIC Proteins 0.000 claims description 11
- 102100029206 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-c Human genes 0.000 claims description 11
- 230000005888 antibody-dependent cellular phagocytosis Effects 0.000 claims description 11
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 11
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 claims description 9
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 claims description 8
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 8
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 8
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 claims description 7
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 claims description 7
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 7
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 claims description 6
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 claims description 6
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 claims description 5
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 claims description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 4
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 claims description 3
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 claims description 3
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 claims description 3
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 claims description 3
- 101001133056 Homo sapiens Mucin-1 Proteins 0.000 claims description 3
- 102100034256 Mucin-1 Human genes 0.000 claims description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 3
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 claims description 2
- 102000018651 Epithelial Cell Adhesion Molecule Human genes 0.000 claims description 2
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 claims description 2
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 claims description 2
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 claims description 2
- 238000010010 raising Methods 0.000 claims 2
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 claims 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 abstract description 40
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 199
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 199
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 182
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 162
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 112
- 230000006870 function Effects 0.000 description 77
- 238000013461 design Methods 0.000 description 49
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 44
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 43
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 43
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 41
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 39
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 38
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 description 37
- 238000009415 formwork Methods 0.000 description 37
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 36
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 36
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 36
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 36
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 35
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 33
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 33
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 32
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 31
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 29
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 29
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 29
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 27
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 27
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 27
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 26
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 25
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 24
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 23
- 238000003016 alphascreen Methods 0.000 description 21
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 21
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 19
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 19
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 19
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 19
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 19
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- 230000004044 response Effects 0.000 description 18
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 17
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 17
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 17
- 230000008569 process Effects 0.000 description 17
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 16
- 238000011160 research Methods 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 15
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 15
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 15
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 15
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 15
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 15
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 15
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 14
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 14
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 14
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 13
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 13
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 13
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 13
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 13
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 13
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 12
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 12
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 12
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 11
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 11
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 10
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 10
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 10
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 10
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 10
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 description 10
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 10
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 10
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 10
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 10
- 101710153593 Albumin A Proteins 0.000 description 9
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 9
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 9
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 9
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 8
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 8
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 8
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000006035 Tryptophane Substances 0.000 description 8
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 8
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 8
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 8
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 8
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 8
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 8
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 8
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 8
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 7
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 7
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 7
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 7
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 7
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 7
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 7
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 7
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 7
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 7
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 7
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 7
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 7
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 7
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 7
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 6
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 6
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 6
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 6
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 6
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 6
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 6
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 6
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 6
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 6
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 5
- 208000035805 Aleukaemic leukaemia Diseases 0.000 description 5
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 5
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 5
- XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N N-acetyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(C)=O XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N 0.000 description 5
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 5
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 5
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 5
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 239000002585 base Substances 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 5
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 5
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 5
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 5
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 5
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 5
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 5
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- 108010022579 ATP dependent 26S protease Proteins 0.000 description 4
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 4
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 4
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 4
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 4
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 description 4
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 description 4
- 101000917824 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Proteins 0.000 description 4
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 4
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 4
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 4
- WSTYNZDAOAEEKG-UHFFFAOYSA-N Mayol Natural products CC1=C(O)C(=O)C=C2C(CCC3(C4CC(C(CC4(CCC33C)C)=O)C)C)(C)C3=CC=C21 WSTYNZDAOAEEKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WSTYNZDAOAEEKG-QSPBTJQRSA-N Maytenin Natural products CC1=C(O)C(=O)C=C2[C@@](CC[C@@]3([C@@H]4C[C@H](C(C[C@@]4(CC[C@]33C)C)=O)C)C)(C)C3=CC=C21 WSTYNZDAOAEEKG-QSPBTJQRSA-N 0.000 description 4
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 4
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 4
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 4
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 4
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 4
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000001506 fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 4
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 4
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 4
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 4
- 210000002347 langhans' cell Anatomy 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 4
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 238000007614 solvation Methods 0.000 description 4
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 4
- WSTYNZDAOAEEKG-GWJSGULQSA-N tingenone Chemical compound CC1=C(O)C(=O)C=C2[C@@](CC[C@]3([C@@H]4C[C@H](C(C[C@@]4(CC[C@@]33C)C)=O)C)C)(C)C3=CC=C21 WSTYNZDAOAEEKG-GWJSGULQSA-N 0.000 description 4
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 4
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 108010048623 Collagen Receptors Proteins 0.000 description 3
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 3
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 3
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 3
- 208000035126 Facies Diseases 0.000 description 3
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 3
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 102000000507 Integrin alpha2 Human genes 0.000 description 3
- 108010008212 Integrin alpha4beta1 Proteins 0.000 description 3
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 3
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 3
- 238000000342 Monte Carlo simulation Methods 0.000 description 3
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 3
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 108010055817 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Proteins 0.000 description 3
- 102000000447 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Human genes 0.000 description 3
- 102100036011 T-cell surface glycoprotein CD4 Human genes 0.000 description 3
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 3
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100022156 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Human genes 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 3
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 3
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 238000005421 electrostatic potential Methods 0.000 description 3
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012407 engineering method Methods 0.000 description 3
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 3
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 3
- XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N gefitinib Chemical compound C=12C=C(OCCCN3CCOCC3)C(OC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 XGALLCVXEZPNRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 3
- 230000005283 ground state Effects 0.000 description 3
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000000111 isothermal titration calorimetry Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N leuprolide acetate Chemical compound CC(O)=O.CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N 0.000 description 3
- 210000000088 lip Anatomy 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 3
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 3
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000036438 mutation frequency Effects 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Substances [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 3
- 238000002821 scintillation proximity assay Methods 0.000 description 3
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 3
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-n-[(3r,4s,5s)-1-[(2s)-2-[(1r,2r)-3-[[(1s,2r)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-n,3-dimethylbutanamide Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 WOWDZACBATWTAU-FEFUEGSOSA-N 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- ZJNLYGOUHDJHMG-UHFFFAOYSA-N 1-n,4-n-bis(5-methylhexan-2-yl)benzene-1,4-diamine Chemical compound CC(C)CCC(C)NC1=CC=C(NC(C)CCC(C)C)C=C1 ZJNLYGOUHDJHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LSBDFXRDZJMBSC-UHFFFAOYSA-N 2-phenylacetamide Chemical compound NC(=O)CC1=CC=CC=C1 LSBDFXRDZJMBSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethylchromen-6-yl)propan-1-one Chemical compound OC1=C2C=CC(C)(C)OC2=CC=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101100230376 Acetivibrio thermocellus (strain ATCC 27405 / DSM 1237 / JCM 9322 / NBRC 103400 / NCIMB 10682 / NRRL B-4536 / VPI 7372) celI gene Proteins 0.000 description 2
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N Capecitabine Chemical compound C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N 0.000 description 2
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 2
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 101100285408 Danio rerio eng2a gene Proteins 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 101150039808 Egfr gene Proteins 0.000 description 2
- 102100038132 Endogenous retrovirus group K member 6 Pro protein Human genes 0.000 description 2
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100027842 Fibroblast growth factor receptor 3 Human genes 0.000 description 2
- 101710182396 Fibroblast growth factor receptor 3 Proteins 0.000 description 2
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 102000003688 G-Protein-Coupled Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000045 G-Protein-Coupled Receptors Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 2
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 description 2
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 244000041633 Grewia tenax Species 0.000 description 2
- 235000005612 Grewia tenax Nutrition 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- 102100024025 Heparanase Human genes 0.000 description 2
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 2
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000599852 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 2
- 101100369992 Homo sapiens TNFSF10 gene Proteins 0.000 description 2
- 101000679857 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 3 Proteins 0.000 description 2
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 2
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- 102100025323 Integrin alpha-1 Human genes 0.000 description 2
- 108010041341 Integrin alpha1 Proteins 0.000 description 2
- 108010055795 Integrin alpha1beta1 Proteins 0.000 description 2
- 108010041012 Integrin alpha4 Proteins 0.000 description 2
- 108010022222 Integrin beta1 Proteins 0.000 description 2
- 102000012355 Integrin beta1 Human genes 0.000 description 2
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 2
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 2
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 2
- 102100039897 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005411 L01XE02 - Gefitinib Substances 0.000 description 2
- 241000194034 Lactococcus lactis subsp. cremoris Species 0.000 description 2
- 241000446313 Lamella Species 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 2
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 101000913072 Mus musculus Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III Proteins 0.000 description 2
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 2
- 108010020856 N-terminal nucleophile hydrolase Proteins 0.000 description 2
- 102000016978 Orphan receptors Human genes 0.000 description 2
- 108070000031 Orphan receptors Proteins 0.000 description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N Quinoline Chemical compound N1=CC=CC2=CC=CC=C21 SMWDFEZZVXVKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 2
- 235000014962 Streptococcus cremoris Nutrition 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 2
- 102000046283 TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand Human genes 0.000 description 2
- 108700012411 TNFSF10 Proteins 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000036693 Thrombopoietin Human genes 0.000 description 2
- 108010041111 Thrombopoietin Proteins 0.000 description 2
- 241000218636 Thuja Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 102100036922 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Human genes 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 description 2
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 2
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 230000003527 anti-angiogenesis Effects 0.000 description 2
- 229940124650 anti-cancer therapies Drugs 0.000 description 2
- 230000003388 anti-hormonal effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 229960004669 basiliximab Drugs 0.000 description 2
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 2
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 2
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 2
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 2
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 2
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 2
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 2
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical compound CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 2
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 2
- 201000003914 endometrial carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 2
- AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N erlotinib Chemical compound C=12C=C(OCCOC)C(OCCOC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 2
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 2
- XRECTZIEBJDKEO-UHFFFAOYSA-N flucytosine Chemical compound NC1=NC(=O)NC=C1F XRECTZIEBJDKEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 2
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 2
- CHPZKNULDCNCBW-UHFFFAOYSA-N gallium nitrate Chemical compound [Ga+3].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O CHPZKNULDCNCBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 2
- 229960002584 gefitinib Drugs 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 229960003297 gemtuzumab ozogamicin Drugs 0.000 description 2
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 108010037536 heparanase Proteins 0.000 description 2
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- 201000008298 histiocytosis Diseases 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 2
- YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N imatinib methanesulfonate Chemical compound CS(O)(=O)=O.C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 YLMAHDNUQAMNNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 2
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 2
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 2
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 2
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 229950000518 labetuzumab Drugs 0.000 description 2
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 2
- 238000002898 library design Methods 0.000 description 2
- 238000007834 ligase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 2
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 2
- ZAHQPTJLOCWVPG-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO ZAHQPTJLOCWVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 description 2
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 2
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000010 osteolytic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N oxomethyl Chemical compound O=[CH] CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000402 palivizumab Drugs 0.000 description 2
- 229960002087 pertuzumab Drugs 0.000 description 2
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000029279 positive regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 2
- 235000019633 pungent taste Nutrition 0.000 description 2
- JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N quinazoline Chemical compound N1=CN=CC2=CC=CC=C21 JWVCLYRUEFBMGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N raloxifene Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004622 raloxifene Drugs 0.000 description 2
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000013077 scoring method Methods 0.000 description 2
- 239000003352 sequestering agent Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 201000005671 spondyloarthropathy Diseases 0.000 description 2
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 2
- PVYJZLYGTZKPJE-UHFFFAOYSA-N streptonigrin Chemical compound C=1C=C2C(=O)C(OC)=C(N)C(=O)C2=NC=1C(C=1N)=NC(C(O)=O)=C(C)C=1C1=CC=C(OC)C(OC)=C1O PVYJZLYGTZKPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 2
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 2
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950000578 vatalanib Drugs 0.000 description 2
- YCOYDOIWSSHVCK-UHFFFAOYSA-N vatalanib Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1NC(C1=CC=CC=C11)=NN=C1CC1=CC=NC=C1 YCOYDOIWSSHVCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002676 xenobiotic agent Substances 0.000 description 2
- 238000002689 xenotransplantation Methods 0.000 description 2
- 238000001086 yeast two-hybrid system Methods 0.000 description 2
- 229960000641 zorubicin Drugs 0.000 description 2
- FBTUMDXHSRTGRV-ALTNURHMSA-N zorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(\C)=N\NC(=O)C=1C=CC=CC=1)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 FBTUMDXHSRTGRV-ALTNURHMSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N (-)-demecolcine Chemical compound C1=C(OC)C(=O)C=C2[C@@H](NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- MEIRRNXMZYDVDW-MQQKCMAXSA-N (2E,4E)-2,4-hexadien-1-ol Chemical compound C\C=C\C=C\CO MEIRRNXMZYDVDW-MQQKCMAXSA-N 0.000 description 1
- WOLQREOUPKZMEX-BZSNNMDCSA-N (2s)-2-[[(4s)-4-[[(4s)-4-[[4-[(2-amino-4-oxo-1h-pteridin-6-yl)methylamino]benzoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C=C1 WOLQREOUPKZMEX-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- FLWWDYNPWOSLEO-HQVZTVAUSA-N (2s)-2-[[4-[1-(2-amino-4-oxo-1h-pteridin-6-yl)ethyl-methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1C(C)N(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FLWWDYNPWOSLEO-HQVZTVAUSA-N 0.000 description 1
- JPMICTZIAZZHCD-AKGZTFGVSA-N (2s)-2-amino-4-ethylpentanedioic acid Chemical compound CCC(C(O)=O)C[C@H](N)C(O)=O JPMICTZIAZZHCD-AKGZTFGVSA-N 0.000 description 1
- RBSBTRALZZSVBA-OTUMHNDOSA-N (2s)-4-[(13r)-13-hydroxy-13-[(2r,5r)-5-[(1r)-1-hydroxytridecyl]oxolan-2-yl]tridecyl]-2-methyl-2h-furan-5-one Chemical compound O1[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCCCC)CC[C@@H]1[C@H](O)CCCCCCCCCCCCC1=C[C@H](C)OC1=O RBSBTRALZZSVBA-OTUMHNDOSA-N 0.000 description 1
- CGMTUJFWROPELF-YPAAEMCBSA-N (3E,5S)-5-[(2S)-butan-2-yl]-3-(1-hydroxyethylidene)pyrrolidine-2,4-dione Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]1NC(=O)\C(=C(/C)O)C1=O CGMTUJFWROPELF-YPAAEMCBSA-N 0.000 description 1
- XRBSKUSTLXISAB-XVVDYKMHSA-N (5r,6r,7r,8r)-8-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-5-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydrobenzo[f][1,3]benzodioxole-6-carboxylic acid Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H](O)[C@@H](CO)[C@@H]2C(O)=O)=C1 XRBSKUSTLXISAB-XVVDYKMHSA-N 0.000 description 1
- XRBSKUSTLXISAB-UHFFFAOYSA-N (7R,7'R,8R,8'R)-form-Podophyllic acid Natural products COC1=C(OC)C(OC)=CC(C2C3=CC=4OCOC=4C=C3C(O)C(CO)C2C(O)=O)=C1 XRBSKUSTLXISAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N (8S)-3-(2-deoxy-beta-D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NCC2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEXUMDBQLIVNHZ-YOUGDJEHSA-N (8s,11r,13r,14s,17s)-11-[4-(dimethylamino)phenyl]-17-hydroxy-17-(3-hydroxypropyl)-13-methyl-1,2,6,7,8,11,12,14,15,16-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-one Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1[C@@H]1C2=C3CCC(=O)C=C3CC[C@H]2[C@H](CC[C@]2(O)CCCO)[C@@]2(C)C1 IEXUMDBQLIVNHZ-YOUGDJEHSA-N 0.000 description 1
- NQBWNECTZUOWID-UHFFFAOYSA-N (E)-cinnamyl (E)-cinnamate Natural products C=1C=CC=CC=1C=CC(=O)OCC=CC1=CC=CC=C1 NQBWNECTZUOWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 1
- LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N (R)-bicalutamide Chemical compound C([C@@](O)(C)C(=O)NC=1C=C(C(C#N)=CC=1)C(F)(F)F)S(=O)(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N (R)-camphor Chemical compound C1C[C@@]2(C)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C DSSYKIVIOFKYAU-XCBNKYQSSA-N 0.000 description 1
- AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N (e)-1-[(2s)-2-amino-2-carboxyethoxy]-2-diazonioethenolate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CO\C([O-])=C\[N+]#N AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N 0.000 description 1
- BOMZMNZEXMAQQW-UHFFFAOYSA-N 2,5,11-trimethyl-6h-pyrido[4,3-b]carbazol-2-ium-9-ol;acetate Chemical compound CC([O-])=O.C[N+]1=CC=C2C(C)=C(NC=3C4=CC(O)=CC=3)C4=C(C)C2=C1 BOMZMNZEXMAQQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KAWIOCMUARENDQ-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chlorophenyl)sulfanyl-n-(4-pyridin-2-yl-1,3-thiazol-2-yl)acetamide Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1SCC(=O)NC1=NC(C=2N=CC=CC=2)=CS1 KAWIOCMUARENDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 2-[[(2s)-2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-[4-(methylcarbamoylamino)phenyl]propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound CNC(=O)NC1=CC=C(C[C@@H](CN(CC(C)N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)C=C1 RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 0.000 description 1
- FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-(4-isothiocyanatophenyl)propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C(C)CN(CC(O)=O)CC(N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC1=CC=C(N=C=S)C=C1 FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XQCZBXHVTFVIFE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-hydroxypyrimidine Chemical compound NC1=NC=CC(O)=N1 XQCZBXHVTFVIFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VNBAOSVONFJBKP-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n,n-bis(2-chloroethyl)propan-1-amine;hydrochloride Chemical compound Cl.CC(Cl)CN(CCCl)CCCl VNBAOSVONFJBKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTRPRMNBTVRDFH-UHFFFAOYSA-N 2-n-methyl-1,3,5-triazine-2,4,6-triamine Chemical class CNC1=NC(N)=NC(N)=N1 CTRPRMNBTVRDFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JIZRGGUCOQKGQD-UHFFFAOYSA-N 2-nitrothiophene Chemical group [O-][N+](=O)C1=CC=CS1 JIZRGGUCOQKGQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AOPRXJXHLWYPQR-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyacetamide Chemical compound NC(=O)COC1=CC=CC=C1 AOPRXJXHLWYPQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWMYMKOUNYTVQN-UHFFFAOYSA-N 3-(8,8-diethyl-2-aza-8-germaspiro[4.5]decan-2-yl)-n,n-dimethylpropan-1-amine Chemical compound C1C[Ge](CC)(CC)CCC11CN(CCCN(C)C)CC1 PWMYMKOUNYTVQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FQWNGSKQHPNIQG-UHFFFAOYSA-N 3-[[bis(2-chloroethyl)amino-(2-chloroethoxy)phosphoryl]amino]propan-1-ol Chemical compound OCCCNP(=O)(OCCCl)N(CCCl)CCCl FQWNGSKQHPNIQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FCPMMZBTHMRVTA-UHFFFAOYSA-N 3-amino-2-oxopentanoic acid Chemical compound CCC(N)C(=O)C(O)=O FCPMMZBTHMRVTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 3beta-hydroxyolean-12-en-28-oic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 0.000 description 1
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 description 1
- 108010082808 4-1BB Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102000002627 4-1BB Ligand Human genes 0.000 description 1
- DODQJNMQWMSYGS-QPLCGJKRSA-N 4-[(z)-1-[4-[2-(dimethylamino)ethoxy]phenyl]-1-phenylbut-1-en-2-yl]phenol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 DODQJNMQWMSYGS-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- XRYJULCDUUATMC-CYBMUJFWSA-N 4-[4-[[(1r)-1-phenylethyl]amino]-7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-6-yl]phenol Chemical compound N([C@H](C)C=1C=CC=CC=1)C(C=1C=2)=NC=NC=1NC=2C1=CC=C(O)C=C1 XRYJULCDUUATMC-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- IDPUKCWIGUEADI-UHFFFAOYSA-N 5-[bis(2-chloroethyl)amino]uracil Chemical compound ClCCN(CCCl)C1=CNC(=O)NC1=O IDPUKCWIGUEADI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 5-azacytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- KDOPAZIWBAHVJB-UHFFFAOYSA-N 5h-pyrrolo[3,2-d]pyrimidine Chemical compound C1=NC=C2NC=CC2=N1 KDOPAZIWBAHVJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MJZJYWCQPMNPRM-UHFFFAOYSA-N 6,6-dimethyl-1-[3-(2,4,5-trichlorophenoxy)propoxy]-1,6-dihydro-1,3,5-triazine-2,4-diamine Chemical compound CC1(C)N=C(N)N=C(N)N1OCCCOC1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl MJZJYWCQPMNPRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 6-azauridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=N1 WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 0.000 description 1
- YCWQAMGASJSUIP-YFKPBYRVSA-N 6-diazo-5-oxo-L-norleucine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)C=[N+]=[N-] YCWQAMGASJSUIP-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 229960005538 6-diazo-5-oxo-L-norleucine Drugs 0.000 description 1
- AOJJSUZBOXZQNB-UHFFFAOYSA-N 7-[(4-amino-5-hydroxy-6-methyl-2-oxanyl)oxy]-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxy-1-oxoethyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7H-tetracene-5,12-dione Chemical compound C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(=O)CO)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDZZVAMISRMYHH-UHFFFAOYSA-N 9beta-Ribofuranosyl-7-deazaadenin Natural products C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(O)C1O HDZZVAMISRMYHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- 108010059616 Activins Proteins 0.000 description 1
- 102000005606 Activins Human genes 0.000 description 1
- 206010000871 Acute monocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010000890 Acute myelomonocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000036762 Acute promyelocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- 208000003200 Adenoma Diseases 0.000 description 1
- 206010001233 Adenoma benign Diseases 0.000 description 1
- 102000009346 Adenosine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108050000203 Adenosine receptors Proteins 0.000 description 1
- 108060003345 Adrenergic Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000017910 Adrenergic receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102100021266 Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Human genes 0.000 description 1
- CEIZFXOZIQNICU-UHFFFAOYSA-N Alternaria alternata Crofton-weed toxin Natural products CCC(C)C1NC(=O)C(C(C)=O)=C1O CEIZFXOZIQNICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003076 Angiosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 1
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000014654 Aromatase Human genes 0.000 description 1
- 108010078554 Aromatase Proteins 0.000 description 1
- 206010053555 Arthritis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 239000000120 Artificial Saliva Substances 0.000 description 1
- 102000009133 Arylsulfatases Human genes 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 101000669426 Aspergillus restrictus Ribonuclease mitogillin Proteins 0.000 description 1
- 206010003571 Astrocytoma Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000004736 B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 102100032412 Basigin Human genes 0.000 description 1
- VGGGPCQERPFHOB-MCIONIFRSA-N Bestatin Chemical compound CC(C)C[C@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 VGGGPCQERPFHOB-MCIONIFRSA-N 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021935 C-C motif chemokine 26 Human genes 0.000 description 1
- 102000007269 CA-125 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010008629 CA-125 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010059108 CD18 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108010046080 CD27 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102000007499 CD27 Ligand Human genes 0.000 description 1
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 1
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010084313 CD58 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710158575 Cap-specific mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N Capecitabine Natural products C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1C1C(O)C(O)C(C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-NJFSPNSNSA-N Carbon-14 Chemical compound [14C] OKTJSMMVPCPJKN-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- SHHKQEUPHAENFK-UHFFFAOYSA-N Carboquone Chemical compound O=C1C(C)=C(N2CC2)C(=O)C(C(COC(N)=O)OC)=C1N1CC1 SHHKQEUPHAENFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100025473 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 6 Human genes 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- AOCCBINRVIKJHY-UHFFFAOYSA-N Carmofur Chemical compound CCCCCCNC(=O)N1C=C(F)C(=O)NC1=O AOCCBINRVIKJHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 102000004225 Cathepsin B Human genes 0.000 description 1
- 108090000712 Cathepsin B Proteins 0.000 description 1
- 102400001321 Cathepsin L Human genes 0.000 description 1
- 108090000624 Cathepsin L Proteins 0.000 description 1
- 102100023126 Cell surface glycoprotein MUC18 Human genes 0.000 description 1
- 108010082548 Chemokine CCL11 Proteins 0.000 description 1
- 102000009410 Chemokine receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050000299 Chemokine receptor Proteins 0.000 description 1
- JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N Chloditan Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C(C(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XCDXSSFOJZZGQC-UHFFFAOYSA-N Chlornaphazine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(N(CCCl)CCCl)=CC=C21 XCDXSSFOJZZGQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MKQWTWSXVILIKJ-LXGUWJNJSA-N Chlorozotocin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C=O)NC(=O)N(N=O)CCCl MKQWTWSXVILIKJ-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 102100028757 Chondroitin sulfate proteoglycan 4 Human genes 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102100023804 Coagulation factor VII Human genes 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- 108010028773 Complement C5 Proteins 0.000 description 1
- 102100031506 Complement C5 Human genes 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 108700032819 Croton tiglium crotin II Proteins 0.000 description 1
- 208000014311 Cushing syndrome Diseases 0.000 description 1
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076010 Cystathionine beta-lyase Proteins 0.000 description 1
- 206010011831 Cytomegalovirus infection Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 241001269238 Data Species 0.000 description 1
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 1
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 1
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 101100278318 Dictyostelium discoideum dohh-2 gene Proteins 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N Digoxin Natural products O([C@H]1[C@H](C)O[C@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@](C)([C@H](O)C4)[C@H](C4=CC(=O)OC4)CC5)CC3)CC2)C[C@@H]1O)[C@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 101800000585 Diphtheria toxin fragment A Proteins 0.000 description 1
- 206010013710 Drug interaction Diseases 0.000 description 1
- 102100035813 E3 ubiquitin-protein ligase CBL Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 1
- 102000010180 Endothelin receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050001739 Endothelin receptor Proteins 0.000 description 1
- SAMRUMKYXPVKPA-VFKOLLTISA-N Enocitabine Chemical compound O=C1N=C(NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SAMRUMKYXPVKPA-VFKOLLTISA-N 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 102100023688 Eotaxin Human genes 0.000 description 1
- 206010014967 Ependymoma Diseases 0.000 description 1
- JKLISIRFYWXLQG-UHFFFAOYSA-N Epioleonolsaeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4CCC3C21C JKLISIRFYWXLQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBMLHUPNRURLOK-XGRAFVIBSA-N Epitiostanol Chemical compound C1[C@@H]2S[C@@H]2C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 OBMLHUPNRURLOK-XGRAFVIBSA-N 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229930189413 Esperamicin Natural products 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KGWDUNBJIMUFAP-KVVVOXFISA-N Ethanolamine Oleate Chemical compound NCCO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O KGWDUNBJIMUFAP-KVVVOXFISA-N 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- 101710082714 Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 description 1
- 108010039471 Fas Ligand Protein Proteins 0.000 description 1
- 102000015212 Fas Ligand Protein Human genes 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000003972 Fibroblast growth factor 7 Human genes 0.000 description 1
- 108090000385 Fibroblast growth factor 7 Proteins 0.000 description 1
- 208000008961 Fibrous Dysplasia of Bone Diseases 0.000 description 1
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 240000004859 Gamochaeta purpurea Species 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108700004714 Gelonium multiflorum GEL Proteins 0.000 description 1
- 208000002966 Giant Cell Tumor of Bone Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N Goserelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](COC(C)(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NNC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N 0.000 description 1
- 108010069236 Goserelin Proteins 0.000 description 1
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101000691214 Haloarcula marismortui (strain ATCC 43049 / DSM 3752 / JCM 8966 / VKM B-1809) 50S ribosomal protein L44e Proteins 0.000 description 1
- 208000001258 Hemangiosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000000543 Histamine Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010002059 Histamine Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000819490 Homo sapiens Alpha-(1,6)-fucosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000798441 Homo sapiens Basigin Proteins 0.000 description 1
- 101000897493 Homo sapiens C-C motif chemokine 26 Proteins 0.000 description 1
- 101000914324 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000914326 Homo sapiens Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000623903 Homo sapiens Cell surface glycoprotein MUC18 Proteins 0.000 description 1
- 101000916489 Homo sapiens Chondroitin sulfate proteoglycan 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000840258 Homo sapiens Immunoglobulin J chain Proteins 0.000 description 1
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 1
- 101000935043 Homo sapiens Integrin beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000935040 Homo sapiens Integrin beta-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001034314 Homo sapiens Lactadherin Proteins 0.000 description 1
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000946889 Homo sapiens Monocyte differentiation antigen CD14 Proteins 0.000 description 1
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101500025568 Homo sapiens Saposin-D Proteins 0.000 description 1
- 101000946860 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 101100207070 Homo sapiens TNFSF8 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000830596 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Proteins 0.000 description 1
- 101000795167 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Proteins 0.000 description 1
- 101000851376 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N Hydroxyurea Chemical compound NC(=O)NO VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000037171 Hypercorticoidism Diseases 0.000 description 1
- MPBVHIBUJCELCL-UHFFFAOYSA-N Ibandronate Chemical compound CCCCCN(C)CCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O MPBVHIBUJCELCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003325 Ilex Nutrition 0.000 description 1
- 241000209035 Ilex Species 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 102100029571 Immunoglobulin J chain Human genes 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 244000283207 Indigofera tinctoria Species 0.000 description 1
- 208000004575 Infectious Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 108090000191 Inhibitor of growth protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000003781 Inhibitor of growth protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 1
- 102100025947 Insulin-like growth factor II Human genes 0.000 description 1
- 102100025306 Integrin alpha-IIb Human genes 0.000 description 1
- 101710149643 Integrin alpha-IIb Proteins 0.000 description 1
- 108010041014 Integrin alpha5 Proteins 0.000 description 1
- 108010041100 Integrin alpha6 Proteins 0.000 description 1
- 102000000426 Integrin alpha6 Human genes 0.000 description 1
- 102100025304 Integrin beta-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100025390 Integrin beta-2 Human genes 0.000 description 1
- 102000008607 Integrin beta3 Human genes 0.000 description 1
- 108010020950 Integrin beta3 Proteins 0.000 description 1
- 108010064600 Intercellular Adhesion Molecule-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100037871 Intercellular adhesion molecule 3 Human genes 0.000 description 1
- 238000012695 Interfacial polymerization Methods 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102100027268 Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102100020881 Interleukin-1 alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 1
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 1
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 108010082786 Interleukin-1alpha Proteins 0.000 description 1
- 102100030703 Interleukin-22 Human genes 0.000 description 1
- 102000013264 Interleukin-23 Human genes 0.000 description 1
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 description 1
- 102000000646 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 1
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 1
- 241000764238 Isis Species 0.000 description 1
- 208000007766 Kaposi sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 102100020880 Kit ligand Human genes 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 239000005551 L01XE03 - Erlotinib Substances 0.000 description 1
- JLERVPBPJHKRBJ-UHFFFAOYSA-N LY 117018 Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 JLERVPBPJHKRBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100039648 Lactadherin Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000282838 Lama Species 0.000 description 1
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 description 1
- 108010091221 Lymphotoxin beta Receptor Proteins 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 239000004907 Macro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032271 Malignant tumor of penis Diseases 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010087870 Mannose-Binding Lectin Proteins 0.000 description 1
- 102000009112 Mannose-Binding Lectin Human genes 0.000 description 1
- 208000025205 Mantle-Cell Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- VJRAUFKOOPNFIQ-UHFFFAOYSA-N Marcellomycin Natural products C12=C(O)C=3C(=O)C4=C(O)C=CC(O)=C4C(=O)C=3C=C2C(C(=O)OC)C(CC)(O)CC1OC(OC1C)CC(N(C)C)C1OC(OC1C)CC(O)C1OC1CC(O)C(O)C(C)O1 VJRAUFKOOPNFIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000172 Medulloblastoma Diseases 0.000 description 1
- IVDYZAAPOLNZKG-KWHRADDSSA-N Mepitiostane Chemical compound O([C@@H]1[C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)C[C@H]5S[C@H]5C[C@@H]4CC[C@H]3[C@@H]2CC1)C)C1(OC)CCCC1 IVDYZAAPOLNZKG-KWHRADDSSA-N 0.000 description 1
- 206010027406 Mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 1
- 244000302512 Momordica charantia Species 0.000 description 1
- 235000009811 Momordica charantia Nutrition 0.000 description 1
- 235000009812 Momordica cochinchinensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000018365 Momordica dioica Nutrition 0.000 description 1
- 102100035877 Monocyte differentiation antigen CD14 Human genes 0.000 description 1
- 208000035489 Monocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 101100207071 Mus musculus Tnfsf8 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 1
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000033835 Myelomonocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000007224 Myeloproliferative neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNIXRMIHFOIVBB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxyl-tryptamine Chemical compound C1=CC=C2C(CCNO)=CNC2=C1 SNIXRMIHFOIVBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002454 Nasopharyngeal Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710204212 Neocarzinostatin Proteins 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 206010052399 Neuroendocrine tumour Diseases 0.000 description 1
- 208000005890 Neuroma Diseases 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 102000004473 OX40 Ligand Human genes 0.000 description 1
- 108010042215 OX40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 241000123069 Ocyurus chrysurus Species 0.000 description 1
- YBRJHZPWOMJYKQ-UHFFFAOYSA-N Oleanolic acid Natural products CC1(C)CC2C3=CCC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CCC4(C)C3(C)CCC2(C1)C(=O)O YBRJHZPWOMJYKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MIJYXULNPSFWEK-UHFFFAOYSA-N Oleanolinsaeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4=CCC3C21C MIJYXULNPSFWEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000003840 Opioid Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000137 Opioid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101100081884 Oryza sativa subsp. japonica OSA15 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000010191 Osteitis Deformans Diseases 0.000 description 1
- 206010049088 Osteopenia Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 101150082245 PSAG gene Proteins 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 208000027868 Paget disease Diseases 0.000 description 1
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 1
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 108010073038 Penicillin Amidase Proteins 0.000 description 1
- 208000002471 Penile Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010034299 Penile cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- 108010043958 Peptoids Proteins 0.000 description 1
- 208000010886 Peripheral nerve injury Diseases 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 240000007643 Phytolacca americana Species 0.000 description 1
- 101100413173 Phytolacca americana PAP2 gene Proteins 0.000 description 1
- KMSKQZKKOZQFFG-HSUXVGOQSA-N Pirarubicin Chemical compound O([C@H]1[C@@H](N)C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1CCCCO1 KMSKQZKKOZQFFG-HSUXVGOQSA-N 0.000 description 1
- 235000016408 Podocarpus macrophyllus Nutrition 0.000 description 1
- 102100025067 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Human genes 0.000 description 1
- 101710163352 Potassium voltage-gated channel subfamily H member 4 Proteins 0.000 description 1
- HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N Prednimustine Chemical compound O=C([C@@]1(O)CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)[C@@H](O)C[C@@]21C)COC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 208000033826 Promyelocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOSMNYMQXIVWKY-UHFFFAOYSA-N Propyl levulinate Chemical compound CCCOC(=O)CCC(C)=O QOSMNYMQXIVWKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- WOLQREOUPKZMEX-UHFFFAOYSA-N Pteroyltriglutamic acid Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(=O)NC(CCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C=C1 WOLQREOUPKZMEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N Pyrimidine Chemical compound C1=CN=CN=C1 CZPWVGJYEJSRLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003743 Relaxin Human genes 0.000 description 1
- 108090000103 Relaxin Proteins 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 201000000582 Retinoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 1
- 206010061934 Salivary gland cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 208000032183 Scleromalacia Diseases 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 102000013541 Shaker Superfamily of Potassium Channels Human genes 0.000 description 1
- 108010026533 Shaker Superfamily of Potassium Channels Proteins 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- RBSBTRALZZSVBA-FXBHKIKWSA-N Solamin Natural products O=C1C(CCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@@H]2O[C@H]([C@H](O)CCCCCCCCCCCC)CC2)=C[C@H](C)O1 RBSBTRALZZSVBA-FXBHKIKWSA-N 0.000 description 1
- QUMHDXJIDPCZCB-UHFFFAOYSA-N Solamine Natural products CN(C)CCCCNCCCCN(C)C QUMHDXJIDPCZCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010017622 Somatomedin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 1
- 208000020339 Spinal injury Diseases 0.000 description 1
- 208000006045 Spondylarthropathies Diseases 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000862969 Stella Species 0.000 description 1
- 108010039445 Stem Cell Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 102100035794 T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain Human genes 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 1
- 244000162450 Taxus cuspidata Species 0.000 description 1
- 235000009065 Taxus cuspidata Nutrition 0.000 description 1
- CGMTUJFWROPELF-UHFFFAOYSA-N Tenuazonic acid Natural products CCC(C)C1NC(=O)C(=C(C)/O)C1=O CGMTUJFWROPELF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 108090001109 Thermolysin Proteins 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 208000033781 Thyroid carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100030859 Tissue factor Human genes 0.000 description 1
- IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N Tomudex Chemical compound C=1C=C2NC(C)=NC(=O)C2=CC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)S1 IVTVGDXNLFLDRM-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- IWEQQRMGNVVKQW-OQKDUQJOSA-N Toremifene citrate Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 IWEQQRMGNVVKQW-OQKDUQJOSA-N 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N Triethylene glycol diglycidyl ether Chemical compound C1OC1COCCOCCOCCOCC1CO1 UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024568 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 11 Human genes 0.000 description 1
- 102100024584 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 12 Human genes 0.000 description 1
- 101710097155 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 12 Proteins 0.000 description 1
- 102100024587 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 15 Human genes 0.000 description 1
- 102100032100 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100029675 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Human genes 0.000 description 1
- 102100029690 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Human genes 0.000 description 1
- 101710178300 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Proteins 0.000 description 1
- 102100033732 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Human genes 0.000 description 1
- 101710187743 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1A Proteins 0.000 description 1
- 102100033733 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Human genes 0.000 description 1
- 101710187830 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 1B Proteins 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100036857 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8 Human genes 0.000 description 1
- 102000018594 Tumour necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 108050007852 Tumour necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091008605 VEGF receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100033177 Vascular endothelial growth factor receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 240000001866 Vernicia fordii Species 0.000 description 1
- 229930003756 Vitamin B7 Natural products 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IFJUINDAXYAPTO-UUBSBJJBSA-N [(8r,9s,13s,14s,17s)-17-[2-[4-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]butanoyloxy]acetyl]oxy-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl] benzoate Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](C2=CC=3)CC[C@]4([C@H]1CC[C@@H]4OC(=O)COC(=O)CCCC=1C=CC(=CC=1)N(CCCl)CCCl)C)CC2=CC=3OC(=O)C1=CC=CC=C1 IFJUINDAXYAPTO-UUBSBJJBSA-N 0.000 description 1
- IHGLINDYFMDHJG-UHFFFAOYSA-N [2-(4-methoxyphenyl)-3,4-dihydronaphthalen-1-yl]-[4-(2-pyrrolidin-1-ylethoxy)phenyl]methanone Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(CCC1=CC=CC=C11)=C1C(=O)C(C=C1)=CC=C1OCCN1CCCC1 IHGLINDYFMDHJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZSRRNFBEIOBDA-CFNBKWCHSA-N [2-[(2s,4s)-4-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-2,5,12-trihydroxy-7-methoxy-6,11-dioxo-3,4-dihydro-1h-tetracen-2-yl]-2-oxoethyl] 2,2-diethoxyacetate Chemical compound O([C@H]1C[C@](CC2=C(O)C=3C(=O)C4=CC=CC(OC)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)(O)C(=O)COC(=O)C(OCC)OCC)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 XZSRRNFBEIOBDA-CFNBKWCHSA-N 0.000 description 1
- 229960000446 abciximab Drugs 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004847 absorption spectroscopy Methods 0.000 description 1
- LPQOADBMXVRBNX-UHFFFAOYSA-N ac1ldcw0 Chemical compound Cl.C1CN(C)CCN1C1=C(F)C=C2C(=O)C(C(O)=O)=CN3CCSC1=C32 LPQOADBMXVRBNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- ZOZKYEHVNDEUCO-XUTVFYLZSA-N aceglatone Chemical compound O1C(=O)[C@H](OC(C)=O)[C@@H]2OC(=O)[C@@H](OC(=O)C)[C@@H]21 ZOZKYEHVNDEUCO-XUTVFYLZSA-N 0.000 description 1
- 229950002684 aceglatone Drugs 0.000 description 1
- 102000015296 acetylcholine-gated cation-selective channel activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040006409 acetylcholine-gated cation-selective channel activity proteins Proteins 0.000 description 1
- CGIHPACLZJDCBQ-UHFFFAOYSA-N acibenzolar Chemical class SC(=O)C1=CC=CC2=C1SN=N2 CGIHPACLZJDCBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930183665 actinomycin Natural products 0.000 description 1
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 1
- 208000011912 acute myelomonocytic leukemia M4 Diseases 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 201000005255 adrenal gland hyperfunction Diseases 0.000 description 1
- JZMHCANOTJFLQJ-IEQBYLOXSA-A affinitac Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP([O-])(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP([O-])(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP([O-])(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP([O-])(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP([O-])(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP([O-])(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP([O-])(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)CO)[C@@H](OP([S-])(=O)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP([O-])(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)C1 JZMHCANOTJFLQJ-IEQBYLOXSA-A 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 108010035879 albumin-bilirubin complex Proteins 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229960002459 alefacept Drugs 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940045714 alkyl sulfonate alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N alpha-D-mannose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 1
- 229960000473 altretamine Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000329 aluminium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006229 amino acid addition Effects 0.000 description 1
- 229960003437 aminoglutethimide Drugs 0.000 description 1
- ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N aminoglutethimide Chemical compound C=1C=C(N)C=CC=1C1(CC)CCC(=O)NC1=O ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012440 amplified luminescent proximity homogeneous assay Methods 0.000 description 1
- 229960001220 amsacrine Drugs 0.000 description 1
- XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N amsacrine Chemical compound COC1=CC(NS(C)(=O)=O)=CC=C1NC1=C(C=CC=C2)C2=NC2=CC=CC=C12 XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N ancitabine Chemical compound N=C1C=CN2[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3OC2=N1 BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 229950000242 ancitabine Drugs 0.000 description 1
- 230000001466 anti-adreneric effect Effects 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003092 anti-cytokine Effects 0.000 description 1
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 description 1
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 238000011091 antibody purification Methods 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 201000011165 anus cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- NMYKBZSMOUFOJV-FJSWQEPZSA-N aprinocarsen Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)CO)[C@@H](OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=S)OC[C@@H]2[C@H](C[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)C1 NMYKBZSMOUFOJV-FJSWQEPZSA-N 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 229940120638 avastin Drugs 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 229960002756 azacitidine Drugs 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950011321 azaserine Drugs 0.000 description 1
- 150000001541 aziridines Chemical class 0.000 description 1
- DMLAVOWQYNRWNQ-UHFFFAOYSA-N azobenzene Chemical compound C1=CC=CC=C1N=NC1=CC=CC=C1 DMLAVOWQYNRWNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003270 belimumab Drugs 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 125000005605 benzo group Chemical group 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CUBCNYWQJHBXIY-UHFFFAOYSA-N benzoic acid;2-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1.OC(=O)C1=CC=CC=C1O CUBCNYWQJHBXIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010079452 beta Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 229960000997 bicalutamide Drugs 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 208000026900 bile duct neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000000225 bioluminescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 1
- 229940126587 biotherapeutics Drugs 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- VQLYBLABXAHUDN-UHFFFAOYSA-N bis(4-fluorophenyl)-methyl-(1,2,4-triazol-1-ylmethyl)silane;methyl n-(1h-benzimidazol-2-yl)carbamate Chemical compound C1=CC=C2NC(NC(=O)OC)=NC2=C1.C=1C=C(F)C=CC=1[Si](C=1C=CC(F)=CC=1)(C)CN1C=NC=N1 VQLYBLABXAHUDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008548 bisantrene Drugs 0.000 description 1
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 150000007516 brønsted-lowry acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000007528 brønsted-lowry bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001354 calcium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 1
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 1
- 238000007707 calorimetry Methods 0.000 description 1
- 229950009823 calusterone Drugs 0.000 description 1
- IVFYLRMMHVYGJH-PVPPCFLZSA-N calusterone Chemical compound C1C[C@]2(C)[C@](O)(C)CC[C@H]2[C@@H]2[C@@H](C)CC3=CC(=O)CC[C@]3(C)[C@H]21 IVFYLRMMHVYGJH-PVPPCFLZSA-N 0.000 description 1
- 229940112129 campath Drugs 0.000 description 1
- 229960000846 camphor Drugs 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 1
- 230000003327 cancerostatic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004117 capecitabine Drugs 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 229960002115 carboquone Drugs 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 229960003261 carmofur Drugs 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 238000012219 cassette mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000007248 cellular mechanism Effects 0.000 description 1
- OGEBRHQLRGFBNV-RZDIXWSQSA-N chembl2036808 Chemical compound C12=NC(NCCCC)=NC=C2C(C=2C=CC(F)=CC=2)=NN1C[C@H]1CC[C@H](N)CC1 OGEBRHQLRGFBNV-RZDIXWSQSA-N 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229950008249 chlornaphazine Drugs 0.000 description 1
- 229960001480 chlorozotocin Drugs 0.000 description 1
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000011098 chromatofocusing Methods 0.000 description 1
- ZYVSOIYQKUDENJ-WKSBCEQHSA-N chromomycin A3 Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@@H]1OC(C)=O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](OC(C)=O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@@H]1C[C@@H](O)[C@@H](OC)[C@@H](C)O1 ZYVSOIYQKUDENJ-WKSBCEQHSA-N 0.000 description 1
- NQBWNECTZUOWID-QSYVVUFSSA-N cinnamyl cinnamate Chemical compound C=1C=CC=CC=1\C=C/C(=O)OC\C=C\C1=CC=CC=C1 NQBWNECTZUOWID-QSYVVUFSSA-N 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 229950002334 clenoliximab Drugs 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 238000010205 computational analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 108010018927 conglutinin Proteins 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 229940111134 coxibs Drugs 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 1
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 1
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003255 cyclooxygenase 2 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011393 cytotoxic chemotherapy Methods 0.000 description 1
- GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N dTMP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 229950004239 defosfamide Drugs 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 239000003398 denaturant Substances 0.000 description 1
- QCUFYOBGGZSFHY-UHFFFAOYSA-N depsidomycin Chemical compound O=C1C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(NC=O)C(C)CC)C(C)OC(=O)C2CCCNN2C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C2CCCNN21 QCUFYOBGGZSFHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950003913 detorubicin Drugs 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- WVYXNIXAMZOZFK-UHFFFAOYSA-N diaziquone Chemical compound O=C1C(NC(=O)OCC)=C(N2CC2)C(=O)C(NC(=O)OCC)=C1N1CC1 WVYXNIXAMZOZFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950002389 diaziquone Drugs 0.000 description 1
- 239000012954 diazonium Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N digoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)[C@H](O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N 0.000 description 1
- 229960005156 digoxin Drugs 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N digoxine Natural products C1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(C)OC(OC2C(OC(OC3CC4C(C5C(C6(CCC(C6(C)C(O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)CC2O)C)CC1O LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005442 diisocyanate group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- ZWAOHEXOSAUJHY-ZIYNGMLESA-N doxifluridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ZWAOHEXOSAUJHY-ZIYNGMLESA-N 0.000 description 1
- 229950005454 doxifluridine Drugs 0.000 description 1
- NOTIQUSPUUHHEH-UXOVVSIBSA-N dromostanolone propionate Chemical compound C([C@@H]1CC2)C(=O)[C@H](C)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](OC(=O)CC)[C@@]2(C)CC1 NOTIQUSPUUHHEH-UXOVVSIBSA-N 0.000 description 1
- 229950004683 drostanolone propionate Drugs 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- FSIRXIHZBIXHKT-MHTVFEQDSA-N edatrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CC(CC)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FSIRXIHZBIXHKT-MHTVFEQDSA-N 0.000 description 1
- 229950006700 edatrexate Drugs 0.000 description 1
- 229960000284 efalizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 229950000549 elliptinium acetate Drugs 0.000 description 1
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 229950011487 enocitabine Drugs 0.000 description 1
- 108010028531 enomycin Proteins 0.000 description 1
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 description 1
- 229950002973 epitiostanol Drugs 0.000 description 1
- 229950009760 epratuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960001433 erlotinib Drugs 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 229950002017 esorubicin Drugs 0.000 description 1
- ITSGNOIFAJAQHJ-BMFNZSJVSA-N esorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)C[C@H](C)O1 ITSGNOIFAJAQHJ-BMFNZSJVSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- ADFOJJHRTBFFOF-RBRWEJTLSA-N estramustine phosphate Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)OP(O)(O)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 ADFOJJHRTBFFOF-RBRWEJTLSA-N 0.000 description 1
- 229960004750 estramustine phosphate Drugs 0.000 description 1
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid Chemical compound CCS(O)(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSRLNKCNOLVZIR-KRWDZBQOSA-N ethyl (2s)-2-[[2-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]acetyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound CCOC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 QSRLNKCNOLVZIR-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- HCPOCMMGKBZWSJ-UHFFFAOYSA-N ethyl 3-hydrazinyl-3-oxopropanoate Chemical compound CCOC(=O)CC(=O)NN HCPOCMMGKBZWSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229960005237 etoglucid Drugs 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- 229940012413 factor vii Drugs 0.000 description 1
- 229940043168 fareston Drugs 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 229960000961 floxuridine Drugs 0.000 description 1
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 229940064302 folacin Drugs 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 201000003444 follicular lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 229960004783 fotemustine Drugs 0.000 description 1
- YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N fotemustine Chemical compound CCOP(=O)(OCC)C(C)NC(=O)N(CCCl)N=O YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 229940044658 gallium nitrate Drugs 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-M glutaminate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960004275 glycolic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229960001743 golimumab Drugs 0.000 description 1
- 239000003163 gonadal steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229960002913 goserelin Drugs 0.000 description 1
- 210000000224 granular leucocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000009629 growth pathway Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N hexamethylmelamine Chemical compound CN(C)C1=NC(N(C)C)=NC(N(C)C)=N1 UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SYECJBOWSGTPLU-UHFFFAOYSA-N hexane-1,1-diamine Chemical compound CCCCCC(N)N SYECJBOWSGTPLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229940100689 human protein c Drugs 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 description 1
- 235000011167 hydrochloric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960001330 hydroxycarbamide Drugs 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 208000030915 hypercalcemia disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004108 hypersplenism Diseases 0.000 description 1
- 229940015872 ibandronate Drugs 0.000 description 1
- 229960001001 ibritumomab tiuxetan Drugs 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 description 1
- 229960003685 imatinib mesylate Drugs 0.000 description 1
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- DBIGHPPNXATHOF-UHFFFAOYSA-N improsulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCNCCCOS(C)(=O)=O DBIGHPPNXATHOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008097 improsulfan Drugs 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 108010021315 integrin beta7 Proteins 0.000 description 1
- 230000017730 intein-mediated protein splicing Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 102000014909 interleukin-1 receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040006732 interleukin-1 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108040006849 interleukin-2 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010074109 interleukin-22 Proteins 0.000 description 1
- 108040006858 interleukin-6 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 1
- 229940084651 iressa Drugs 0.000 description 1
- 229910052741 iridium Inorganic materials 0.000 description 1
- GKOZUEZYRPOHIO-UHFFFAOYSA-N iridium atom Chemical compound [Ir] GKOZUEZYRPOHIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N irinotecan Chemical compound C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 UWKQSNNFCGGAFS-XIFFEERXSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- 239000003394 isomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012804 iterative process Methods 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 description 1
- 231100000225 lethality Toxicity 0.000 description 1
- 206010024627 liposarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229960003538 lonidamine Drugs 0.000 description 1
- WDRYRZXSPDWGEB-UHFFFAOYSA-N lonidamine Chemical compound C12=CC=CC=C2C(C(=O)O)=NN1CC1=CC=C(Cl)C=C1Cl WDRYRZXSPDWGEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 201000005243 lung squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 208000027202 mammary Paget disease Diseases 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N mandelic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- MQXVYODZCMMZEM-ZYUZMQFOSA-N mannomustine Chemical compound ClCCNC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CNCCCl MQXVYODZCMMZEM-ZYUZMQFOSA-N 0.000 description 1
- 229950008612 mannomustine Drugs 0.000 description 1
- 201000007924 marginal zone B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000021937 marginal zone lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 1
- 229950008001 matuzumab Drugs 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 206010027191 meningioma Diseases 0.000 description 1
- 229950009246 mepitiostane Drugs 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229940100630 metacresol Drugs 0.000 description 1
- 239000002905 metal composite material Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N methanediyl Chemical compound [CH2] HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VJRAUFKOOPNFIQ-TVEKBUMESA-N methyl (1r,2r,4s)-4-[(2r,4s,5s,6s)-5-[(2s,4s,5s,6s)-5-[(2s,4s,5s,6s)-4,5-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-6-methyloxan-2-yl]oxy-2-ethyl-2,5,7,10-tetrahydroxy-6,11-dioxo-3,4-dihydro-1h-tetracene-1-carboxylat Chemical compound O([C@H]1[C@@H](O)C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1[C@H](C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1C[C@]([C@@H](C2=CC=3C(=O)C4=C(O)C=CC(O)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)C(=O)OC)(O)CC)N(C)C)[C@H]1C[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O1 VJRAUFKOOPNFIQ-TVEKBUMESA-N 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 description 1
- 229960003539 mitoguazone Drugs 0.000 description 1
- MXWHMTNPTTVWDM-NXOFHUPFSA-N mitoguazone Chemical compound NC(N)=N\N=C(/C)\C=N\N=C(N)N MXWHMTNPTTVWDM-NXOFHUPFSA-N 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-GUCUJZIJSA-N mitolactol Chemical compound BrC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 229950010913 mitolactol Drugs 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 229960000350 mitotane Drugs 0.000 description 1
- 229950003063 mitumomab Drugs 0.000 description 1
- 108010010621 modeccin Proteins 0.000 description 1
- 238000003032 molecular docking Methods 0.000 description 1
- 238000000329 molecular dynamics simulation Methods 0.000 description 1
- 238000000324 molecular mechanic Methods 0.000 description 1
- 208000008084 monostotic fibrous dysplasia Diseases 0.000 description 1
- FOYWNSCCNCUEPU-UHFFFAOYSA-N mopidamol Chemical compound C12=NC(N(CCO)CCO)=NC=C2N=C(N(CCO)CCO)N=C1N1CCCCC1 FOYWNSCCNCUEPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950010718 mopidamol Drugs 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 1
- 201000005962 mycosis fungoides Diseases 0.000 description 1
- 208000025113 myeloid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- ZKKVUIPXPPDIRD-UHFFFAOYSA-N n-(3-chlorophenyl)quinazolin-4-amine Chemical compound ClC1=CC=CC(NC=2C3=CC=CC=C3N=CN=2)=C1 ZKKVUIPXPPDIRD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFVHVURXVBHPDA-UHFFFAOYSA-N n-(dichloromethyl)-n-ethylethanamine Chemical compound CCN(CC)C(Cl)Cl UFVHVURXVBHPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NJSMWLQOCQIOPE-OCHFTUDZSA-N n-[(e)-[10-[(e)-(4,5-dihydro-1h-imidazol-2-ylhydrazinylidene)methyl]anthracen-9-yl]methylideneamino]-4,5-dihydro-1h-imidazol-2-amine Chemical compound N1CCN=C1N\N=C\C(C1=CC=CC=C11)=C(C=CC=C2)C2=C1\C=N\NC1=NCCN1 NJSMWLQOCQIOPE-OCHFTUDZSA-N 0.000 description 1
- JZZFDCXSFTVOJY-UHFFFAOYSA-N n-[4-(3-chloro-4-fluoroanilino)-7-(3-morpholin-4-ylpropoxy)quinazolin-6-yl]prop-2-enamide;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.C1=C(Cl)C(F)=CC=C1NC1=NC=NC2=CC(OCCCN3CCOCC3)=C(NC(=O)C=C)C=C12 JZZFDCXSFTVOJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- YCKACRNXVWJWBX-UHFFFAOYSA-N n-phenyl-7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amine Chemical compound N=1C=NC=2NC=CC=2C=1NC1=CC=CC=C1 YCKACRNXVWJWBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 201000011216 nasopharynx carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960005027 natalizumab Drugs 0.000 description 1
- QZGIWPZCWHMVQL-UIYAJPBUSA-N neocarzinostatin chromophore Chemical compound O1[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](NC)[C@H]1O[C@@H]1C/2=C/C#C[C@H]3O[C@@]3([C@@H]3OC(=O)OC3)C#CC\2=C[C@H]1OC(=O)C1=C(O)C=CC2=C(C)C=C(OC)C=C12 QZGIWPZCWHMVQL-UIYAJPBUSA-N 0.000 description 1
- 208000018389 neoplasm of cerebral hemisphere Diseases 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 208000007538 neurilemmoma Diseases 0.000 description 1
- 208000016065 neuroendocrine neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000011519 neuroendocrine tumor Diseases 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- XWXYUMMDTVBTOU-UHFFFAOYSA-N nilutamide Chemical compound O=C1C(C)(C)NC(=O)N1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 XWXYUMMDTVBTOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002653 nilutamide Drugs 0.000 description 1
- 229950010203 nimotuzumab Drugs 0.000 description 1
- 229960001420 nimustine Drugs 0.000 description 1
- VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N nimustine Chemical compound CC1=NC=C(CNC(=O)N(CCCl)N=O)C(N)=N1 VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- KGTDRFCXGRULNK-JYOBTZKQSA-N nogalamycin Chemical compound CO[C@@H]1[C@@](OC)(C)[C@@H](OC)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=C(O)C=C4[C@@]5(C)O[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]5O)N(C)C)O)OC4=C3C3=O)=C3C=C2[C@@H](C(=O)OC)[C@@](C)(O)C1 KGTDRFCXGRULNK-JYOBTZKQSA-N 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001293 nucleolytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N o-dicarboxybenzene Natural products OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002450 ofatumumab Drugs 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229940100243 oleanolic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- CZDBNBLGZNWKMC-MWQNXGTOSA-N olivomycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1)O[C@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](OC2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@H](O)[C@H](OC)[C@H](C)O1 CZDBNBLGZNWKMC-MWQNXGTOSA-N 0.000 description 1
- 229960000470 omalizumab Drugs 0.000 description 1
- 229950011093 onapristone Drugs 0.000 description 1
- 208000005368 osteomalacia Diseases 0.000 description 1
- 229940116315 oxalic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 229960001972 panitumumab Drugs 0.000 description 1
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 1
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- WVUNYSQLFKLYNI-AATRIKPKSA-N pelitinib Chemical compound C=12C=C(NC(=O)\C=C\CN(C)C)C(OCC)=CC2=NC=C(C#N)C=1NC1=CC=C(F)C(Cl)=C1 WVUNYSQLFKLYNI-AATRIKPKSA-N 0.000 description 1
- 229960005570 pemtumomab Drugs 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 229940056367 penicillin v Drugs 0.000 description 1
- 229960002340 pentostatin Drugs 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N pentostatin Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC[C@H]2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 230000003239 periodontal effect Effects 0.000 description 1
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 1
- 201000002628 peritoneum cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 108010076042 phenomycin Proteins 0.000 description 1
- BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N phenoxymethylpenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)COC1=CC=CC=C1 BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229960000952 pipobroman Drugs 0.000 description 1
- NJBFOOCLYDNZJN-UHFFFAOYSA-N pipobroman Chemical compound BrCCC(=O)N1CCN(C(=O)CCBr)CC1 NJBFOOCLYDNZJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NUKCGLDCWQXYOQ-UHFFFAOYSA-N piposulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCC(=O)N1CCN(C(=O)CCOS(C)(=O)=O)CC1 NUKCGLDCWQXYOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001100 piposulfan Drugs 0.000 description 1
- 229960001221 pirarubicin Drugs 0.000 description 1
- BLFWHYXWBKKRHI-JYBILGDPSA-N plap Chemical compound N([C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BLFWHYXWBKKRHI-JYBILGDPSA-N 0.000 description 1
- 208000031223 plasma cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000013326 plasmid cotransfection Methods 0.000 description 1
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 210000002729 polyribosome Anatomy 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229940069328 povidone Drugs 0.000 description 1
- 229960004694 prednimustine Drugs 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 229940095574 propionic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- HZLWUYJLOIAQFC-UHFFFAOYSA-N prosapogenin PS-A Natural products C12CC(C)(C)CCC2(C(O)=O)CCC(C2(CCC3C4(C)C)C)(C)C1=CCC2C3(C)CCC4OC1OCC(O)C(O)C1O HZLWUYJLOIAQFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000012846 protein folding Effects 0.000 description 1
- 238000001273 protein sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000001696 purinergic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 229940117820 purinethol Drugs 0.000 description 1
- BWESROVQGZSBRX-UHFFFAOYSA-N pyrido[3,2-d]pyrimidine Chemical compound C1=NC=NC2=CC=CN=C21 BWESROVQGZSBRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 229960004432 raltitrexed Drugs 0.000 description 1
- BMKDZUISNHGIBY-UHFFFAOYSA-N razoxane Chemical compound C1C(=O)NC(=O)CN1C(C)CN1CC(=O)NC(=O)C1 BMKDZUISNHGIBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000460 razoxane Drugs 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 238000009418 renovation Methods 0.000 description 1
- 229940107685 reopro Drugs 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001755 resorcinol Drugs 0.000 description 1
- 210000001995 reticulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000023135 retinal neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 102220080600 rs797046116 Human genes 0.000 description 1
- VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N rubitecan Chemical compound C1=CC([N+]([O-])=O)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 108010028349 saliva Orthana Proteins 0.000 description 1
- 201000003804 salivary gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 206010039667 schwannoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- WUWDLXZGHZSWQZ-WQLSENKSSA-N semaxanib Chemical compound N1C(C)=CC(C)=C1\C=C/1C2=CC=CC=C2NC\1=O WUWDLXZGHZSWQZ-WQLSENKSSA-N 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 201000001223 septic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 238000002922 simulated annealing Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 229950006315 spirogermanium Drugs 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 208000017572 squamous cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000007447 staining method Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 description 1
- DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-N sulfurothioic S-acid Chemical class OS(O)(=O)=S DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- 229940120982 tarceva Drugs 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960005353 testolactone Drugs 0.000 description 1
- BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N testolactone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(OC(=O)CC4)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 description 1
- 208000008732 thymoma Diseases 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013077 thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000001646 thyrotropic effect Effects 0.000 description 1
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YFTWHEBLORWGNI-UHFFFAOYSA-N tiamiprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC(N)=NC2=C1NC=N2 YFTWHEBLORWGNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N toremifene Chemical compound C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 XFCLJVABOIYOMF-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- 229960005026 toremifene Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N tretamine Chemical compound C1CN1C1=NC(N2CC2)=NC(N2CC2)=N1 IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001353 tretamine Drugs 0.000 description 1
- PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N triaziquone Chemical compound O=C1C(N2CC2)=C(N2CC2)C(=O)C=C1N1CC1 PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004560 triaziquone Drugs 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- LZAJKCZTKKKZNT-PMNGPLLRSA-N trichothecene Chemical compound C12([C@@]3(CC[C@H]2OC2C=C(CCC23C)C)C)CO1 LZAJKCZTKKKZNT-PMNGPLLRSA-N 0.000 description 1
- 229930013292 trichothecene Natural products 0.000 description 1
- KVJXBPDAXMEYOA-CXANFOAXSA-N trilostane Chemical compound OC1=C(C#N)C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@@]32O[C@@H]31 KVJXBPDAXMEYOA-CXANFOAXSA-N 0.000 description 1
- PYIHTIJNCRKDBV-UHFFFAOYSA-L trimethyl-[6-(trimethylazaniumyl)hexyl]azanium;dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].C[N+](C)(C)CCCCCC[N+](C)(C)C PYIHTIJNCRKDBV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NOYPYLRCIDNJJB-UHFFFAOYSA-N trimetrexate Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(NCC=2C(=C3C(N)=NC(N)=NC3=CC=2)C)=C1 NOYPYLRCIDNJJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001099 trimetrexate Drugs 0.000 description 1
- 229950000212 trioxifene Drugs 0.000 description 1
- YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N tripropylamine Chemical compound CCCN(CCC)CCC YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N trofosfamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)OCCCN1CCCl UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDZZVAMISRMYHH-LITAXDCLSA-N tubercidin Chemical compound C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@H]1O HDZZVAMISRMYHH-LITAXDCLSA-N 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 229950009811 ubenimex Drugs 0.000 description 1
- 238000013060 ultrafiltration and diafiltration Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 229960001055 uracil mustard Drugs 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960003824 ustekinumab Drugs 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000012991 uterine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 206010046885 vaginal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000013139 vaginal neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000006459 vascular development Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N vindesine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1N=C1[C]2C=CC=C1 UGGWPQSBPIFKDZ-KOTLKJBCSA-N 0.000 description 1
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 description 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 229950004393 visilizumab Drugs 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 235000011912 vitamin B7 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011735 vitamin B7 Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940053867 xeloda Drugs 0.000 description 1
- 229940099073 xolair Drugs 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950004899 yttrium (90y) tacatuzumab tetraxetan Drugs 0.000 description 1
- GRTBAGCGDOYUBE-OUBTZVSYSA-N yttrium-90(3+) Chemical compound [90Y+3] GRTBAGCGDOYUBE-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229940070524 zinc protein complex Drugs 0.000 description 1
- 229950009268 zinostatin Drugs 0.000 description 1
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against Fc-receptors, e.g. CD16, CD32, CD64
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39566—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against immunoglobulins, e.g. anti-idiotypic antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2875—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2887—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2893—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD52
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
- C07K16/4283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
- C07K16/4291—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig against IgE
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B15/00—ICT specially adapted for analysing two-dimensional or three-dimensional molecular structures, e.g. structural or functional relations or structure alignment
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B30/00—ICT specially adapted for sequence analysis involving nucleotides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B30/00—ICT specially adapted for sequence analysis involving nucleotides or amino acids
- G16B30/10—Sequence alignment; Homology search
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B35/00—ICT specially adapted for in silico combinatorial libraries of nucleic acids, proteins or peptides
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B5/00—ICT specially adapted for modelling or simulations in systems biology, e.g. gene-regulatory networks, protein interaction networks or metabolic networks
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16C—COMPUTATIONAL CHEMISTRY; CHEMOINFORMATICS; COMPUTATIONAL MATERIALS SCIENCE
- G16C20/00—Chemoinformatics, i.e. ICT specially adapted for the handling of physicochemical or structural data of chemical particles, elements, compounds or mixtures
- G16C20/60—In silico combinatorial chemistry
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
- C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
- C07K2317/522—CH1 domain
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
- C07K2317/524—CH2 domain
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
- C07K2317/526—CH3 domain
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/77—Internalization into the cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
-
- G—PHYSICS
- G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
- G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
- G16B15/00—ICT specially adapted for analysing two-dimensional or three-dimensional molecular structures, e.g. structural or functional relations or structure alignment
- G16B15/20—Protein or domain folding
Abstract
本发明涉及优化的Fc变体、产生它们的方法、以及包含优化的Fc变体的抗体和Fc融合体。
Description
本申请根据35U.S.C.§199(e),要求于2003年9月26日提交的USSN10/672280;2003年3月3日提交的USSN 10/379392;2003年6月12日提交的USSN 60/477,839;2003年5月2日提交的USSN 60/467,606;2002年9月27日提交的USSN 60/414,433;和2003年1月23日提交的USSN60/442,301的权益,所有它们全文内容在此明确引用作为参考。
发明领域
本发明涉及新的优化的Fc变体,产生它们的改造(engineering)方法,以及它们的应用,具体而言用于治疗目的。
发明背景
抗体是结合特异性抗原的免疫蛋白。在包括人和小鼠的大多数哺乳动物中,抗体由配对的多肽重链和多肽轻链构成。每条链由分离的免疫球蛋白(Ig)结构域组成,因此上述蛋白通称免疫球蛋白。每条链由两个不同的区组成,称为可变区及恒定区。在抗体间轻链和重链可变区显示了明显的序列多样性,并负责结合靶抗原。恒定区显示了较少的序列多样性,并负责结合许多天然蛋白以引发重要的生化反应。在人类中有五种不同类型的抗体,包括IgA(其包括亚类IgA1和IgA2)、IgD、IgE、IgG(其包括亚类IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)以及IgM。尽管在V区可能存在微小的差异,但是在这些类型的抗体间区别特征是它们的恒定区。图1显示了IgG1抗体,在此用于举例说明免疫球蛋白的大致结构特征,IgG抗体是由两条重链和两条轻链组成的四聚体蛋白。IgG重链由四个相连的免疫球蛋白结构域组成,从N-末端到C-末端依次为VH-Cγ1-Cγ2-Cγ3,分别称为重链可变区结构域、恒定区γ1结构域、恒定区γ2结构域和恒定区γ3结构域。IgG轻链由两个相连的免疫球蛋白结构域组成,从N-末端到C-末端依次为VL-CL,分别称为轻链可变区结构域和轻链恒定区结构域。
抗体的可变区含有该分子的抗原结合决定基,并因此决定了抗体对其靶抗原的特异性。因为其与同一类型中其它抗体序列差别最明显,所以命名为可变区。大多数序列可变性存在于互补决定区(CDRs)。总共有6个CDRs,每条重链和轻链各有3个,命名为VHCDR1、VHCDR2、VHCDR3、VLCDR1、VLCDR2及VLCDR3。在CDRs外的可变区称为骨架(FR)区。尽管不像CDRs一样变化众多,但是在不同抗体间FR区存在序列可变性。总的来说,抗体的结构特征提供了稳定的支架(FR区),在其上真正的抗原结合多样性(CDR)能得到研究,通过免疫系统以获得对广泛抗原的特异性。可获得多种来自不同生物体可变区片段的许多高分辨率结构,一些可变区是非结合状态的,一些与抗原形成复合物。抗体可变区的序列和结构特征得到充分鉴定(Morea等.,1997,Biophys Chem 68:9-16;Morea等.,2000,Methods 20:267-279),抗体的保守特征已用于发展许多抗体改造技术(Maynard等.,2000,Annu Rev Biomed Eng 2:339-376)。例如,可将来自一种抗体,如鼠抗体的CDRs移植入另一种抗体的骨架区,如人抗体。在本领域称为“人源化”的该过程能从非人抗体中能产生具更低免疫原性的抗体治疗剂。存在着包含可变区的片段,其缺少抗体其它区域,包括诸如包含VH-Cγ1和VH-CL的抗原结合片段(Fab)、包含VH和VL的可变区片段(Fv)、包含在同一链中连接在一起的VH和VL的单链可变区片段(scFv)以及多种其它可变区片段(Little等.,2000,Immunol Today 21:364-370)。
抗体的Fc区与许多Fc受体及配体相互作用,行使一系列重要的功能,称为效应器功能(efffector function)。如图1所示,IgG Fc区包含Ig结构域Cγ2、Cγ3和进入Cγ2的N-末端铰链。对于IgG类而言,一类重要的Fc受体家族是Fcγ受体(FcγR)。这些受体介导抗体与免疫系统的细胞臂之间的信息传递(communication)(Raghavan等.,1996,Annu Rev Cell Dev Biol 12:181-220;Ravetch等.,2001,Annu Rev Immunol 19:275-290)。在人类中,该蛋白质家族包含FcγRI(CD64),包括同种型(isoform)FcγRIa、FcγRIb和FcγRIc;FcγRII(CD32),包括同种型FcγRIIa(包含同种异型(allotype)H131和R131)、FcγRIIb(包含FcγRIIb-1和FcγRIIb-2)以及FcγRIIc;和FcγRIII(CD16),包括同种型FcγRIIIa(包含同种异型V158和F158)和FcγRIIIb(包括同种异型FcγRIIIb-NA1和FcγRIIIb-NA2)(Jefferis等,2002,Immunol Lett 82:57-65)。这些受体通常具有介导与Fc结合的胞外结构域、跨膜区和可介导某些细胞内信号事件的胞内结构域。这些受体在不同的免疫细胞中表达,包括单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞、树突细胞、嗜酸性细胞、肥大细胞、血小板、B细胞、大颗粒淋巴细胞、朗罕氏细胞,自然杀伤(NK)细胞以及γγT细胞。Fc/FcγR复合物的形成招募这些效应细胞至结合抗原的位点,通常导致细胞内信号事件以及随后重要的免疫应答发生,诸如释放炎症介质、B细胞活化、细胞内吞作用、吞噬作用及细胞毒性攻击。介导细胞毒性和吞噬细胞效应器功能的能力是抗体破坏靶细胞的一种可能机制。在细胞介导反应中表达FcγR的非特异性细胞毒性细胞识别靶细胞上的结合的抗体并随后导致靶细胞溶胞作用,称为抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)(antibody dependent cell-mediated cytotoxicity)(Raghavan等.,1996,Annu Rev Cell Dev Biol 12:181-220;Ghetie等.,2000,Annu Rev Immunol 18:739-766;Ravetch等.,2001,Annu Rev Immunol 19:275-290)。在细胞介导反应中表达FcγR的非特异性细胞毒性细胞识别靶细胞上的结合的抗体并随后导致对靶细胞的吞噬作用,称为抗体依赖性细胞介导的细胞吞噬作用(ADCP)(antibody dependent cell-mediated phagocytosis)。已解出人FcγR的胞外结构域的许多结构,包括FcγRIIa(pdb登记号1H9V)(Sondermann等.,2001,J Mol Biol 309:737-749)(pdb登记号1FCG)(Maxwell等.,1999,Nat StructBiol 6:437-442),FcγRIIb(pdb登记号2FCB)(Sondermann等.,1999,Embo J18:1095-1103);以及FcγRIIIb(pdb登记号1E4J)(Sondermann等.,2000,Nature 406:267-273.)。所有FcγR结合Fc上相同区域,位于Cγ2结构域的N-末端和前述铰链区,如图2所示。该相互作用可很容易地通过结构来鉴定(Sondermann等.,2001,J Mol Biol 309:737-749),并已解出与人FcγRIIIb胞外结构域结合的人Fc的数种结构(pdb登记号1E4K)(Sondermann等.,2000,Nature 406:267-273.)(pdb登记号1IIS和1IIX)(Radaev等.,2001,J BiolChem 276:16469-16477),也解出人IgE Fc/FceRIα复合物结构(pdb登记号1F6A)(Garman等.,2000,Nature 406:259-266)。
不同IgG亚类对FcγR具有不同亲和力,IgG1和IgG3一般较IgG2和IgG4能更充分地与受体结合(Jefferis等.,2002,Immunol Lett 82:57-65)。所有FcγR结合IgG Fc上相同的区域,亦具有不同的亲和力:高亲和力受体FcγRI对IgG具有10-8M-1的Kd,反之低亲和力受体FcγRII和FcγRIII通常分别以10-6和10-5M-1的Kd结合。FcγRIIIa与FcγRIIIb胞外结构域具有96%同一性,但是FcγRIIIb没有胞内信号域。此外,尽管FcγRI、FcγRIIa/c和FcγRIIIa是免疫复合物触发激活作用的正调节物,通过具有含有基于免疫受体酪氨酸活化基序(ITAM)的胞内结构域而得到鉴定,但是FcγRIIb含有基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(ITIM)并因此而具有抑制性。因此,前者称为激活性受体而FcγRIIb称为抑制性受体。在不同的免疫细胞中受体也具有不同的表达谱和表达水平。然而,在人蛋白质组中另一种复杂性水平是存在着许多FcγR多态性。与临床意义特别相关的多态性是V158/F158 FcγRIIIa。人IgG1与V158同种异型的结合较与F158同种异型的结合具更高亲和力。不同亲和力以及其对ADCC和/或ADCP的可能影响已显示了是抗-CD20抗体利妥昔单抗(rituximab)(Rituxan_,IDEC Pharmaceuticals Corporation的注册商标)功效的重要决定因素。具有V158同种异型的患者对利妥昔单抗治疗响应良好;然而,具有低亲和力F158同种异型的患者响应不良(Cartron等,2002,Blood 99:754-758)。大约10-20%的人是V158/V158纯合子,45%是V158/F158杂合子,以及35-45%的人是F158/F158纯合子(Lehrnbecher等.,1999,Blood 94:4220-4232;Cartron等.,2002,Blood 99:754-758)。因此80-90%的人是不良应答者,它们具有至少一个F158FcγRIIIa的等位基因。
图1显示了Fc上重叠但分离的位点,其作为与补体蛋白C1q作用的界面。同样地,Fc/FcγR结合介导了ADCC,Fc/C1q结合介导了补体依赖性细胞毒作用(CDC)。C1q与丝氨酸蛋白酶C1r形成复合物,再与C1s形成C1复合物。虽然C1q与两种IgGs的结合就足以激活补体级联,但是其能结合6种抗体。类似于Fc与FcγR的相互作用,不同IgG亚类对C1q具有不同亲和力,IgG1和IgG3一般较IgG2和IgG4能更充分地与FcγR结合(Jefferis等.,2002,Immunol Lett 82:57-65)。当前没有获得Fc/C1q复合物结构;但是,诱变研究已将人IgG上与C1q的结合位点定位于包含残基D270、K322、K326、P329和P331,以及E333的区域(Idusogie等.,2000,J Immunol 164:4178-4184;Idusogie等,2001,J Immunol 166:2571-2575)。
图1显示了Fc上Cγ2和Cγ3结构域之间的位点,其介导与新生受体FcRn的相互作用,它们的结合使胞吞的抗体从内涵体再循环回血液中(Raghavan等.,1996,Annu Rev Cell Dev Biol 12:181-220;Ghetie等.,2000,Annu Rev Immunol 18:739-766)。该过程结合由于较大尺寸的全长分子不被肾滤过,产生了有利的抗体血清半衰期,该半衰期变化范围从一周到三周。在抗体转运中Fc与FcRn的结合也扮演着关键角色。Fc上结合FcRn的结合位点也是细菌蛋白A和G的结合位点。通过在蛋白纯化过程中使用蛋白A或蛋白G亲和层析,这些蛋白质的牢固结合通常用作为纯化抗体的手段。因此,对于抗体的临床性能及其纯化而言,Fc上该区域的可信度具有重要作用。已获得的大鼠Fc/FcRn复合物结构(Martin等.,2001,Mol Cell 7:867-877),以及Fc与蛋白A和G的复合物结构(Deisenhofer,1981,Biochemistry 20:2361-2370;Sauer-Eriksson等.,1995,Structure 3:265-278;Tashiro等.,1995,Curr Opin Struct Biol 5:471-481)提供了对Fc与这些蛋白相互作用的了解。
在Fc区起关键作用的是存在于N297的保守的N-连接的糖基化,如图1所示。对于抗体而言,该糖,或有时称为寡糖的,扮演着关键的结构和功能角色,并且是使用哺乳动物表达系统产生抗体的主要原因之一。虽然不应限制于一种理论,但据信该糖结构上的用途可稳定或增溶Fc,决定Cγ3与Cγ2结构域间特定角度或柔性程度,阻止两个Cγ2结构域横越中心轴的相互聚集,或这些的组合。Fc与FcγR以及C1q的有效结合需要这种修饰,N297糖组成的改变或消除影响这些蛋白的结合(Umana等.,1999,NatBiotechnol 17:176-180;Davies等.,2001,Biotechnol Bioeng 74:288-294;Mimura等,2001,J Biol Chem 276:45539-45547.;Radaev等.,2001,J BiolChem 276:16478-16483;Shields等.,2001,J Biol Chem 276:6591-6604;Shields等.,2002,J Biol Chem 277:26733-26740;Simmons等.,2002,JImmunol Methods 263:133-147)。然而,即使与FcγR有任何特异性接触,该糖的参与也少(Radaev等.,2001,J Biol Chem 276:16469-16477),表明在介导Fc/FcγR结合中N297糖的功能角色可能是通过在决定Fc构象中其所扮演的结构角色来实现的。该结论通过所收集到的四个不同Fc糖型(glycoform)的晶体结构而得到支持,这些结构显示了寡糖影响了Cγ2构象并因此影响Fc/FcγR界面(Krapp等.,2003,J Mol Biol 325:979-989)。
上述所讨论的抗体特征-特异于靶,能介导免疫效应机制及在血清中的长半衰期-使得抗体可有效地用于治疗。单克隆抗体可用于治疗多种疾病,包括癌症、炎症和心血管病。目前已有超过10种抗体产品上市,并有数百种产品正在开发中。除抗体外,在研究和治疗中发现Fc融合体这类抗体样蛋白用途广泛(Chamow等.,1996,Trends Biotechnol 14:52-60;Ashkenazi等,1997,Curr Opin Immunol 9:195-200)。Fc融合体是一种蛋白质,其中一个或多个多肽可操作地连接Fc。Fc融合体使抗体的Fc区与受体的靶结合区、配体或一些其它蛋白或蛋白结构域结合,并因此有利于其效应器功能和药物代谢动力学。后者的角色是用于介导靶识别,并因而在功能上与抗体可变区相似。因为Fc融合体与抗体在结构和功能上重叠,所以在本发明中对于抗体的讨论可直接扩展至Fc融合体。
尽管具有这样广泛的用途,对于临床使用而言,抗体并不是优化的。抗体的两个主要缺点是它们并不理想的抗癌效力和它们过分苛求的生产必备条件。本发明解决了这些缺陷。
存在许多可能的抗体破坏肿瘤细胞机制,包括通过阻断必需的生长途径以抗增殖、导致细胞凋亡的胞内信号、增强的下调作用和/或受体的转换(turnover)、CDC、ADCC、ADCP以及启动获得性免疫应答(adaptive immuneresponse)(Cragg等.,1999,Curr Opin Immunol 11:541-547;Glennie等.,2000,Immunol Today 21:403-410)。抗肿瘤效力可基于这些机制的组合,而且在临床治疗中它们各自的重要性依肿瘤的不同而不同。尽管是抗肿瘤武器的兵工厂,但是抗体作为抗癌剂的效果却并不令人满意,具体而言是它们的高成本。患者肿瘤响应数据显示了相对于常规的单一试剂细胞毒素化学疗法而言,在治疗成功率上单克隆抗体仅提供了很少的改善。举例来说,在全部复发的低度非霍奇金淋巴瘤患者中只有一半对抗-CD20抗体利妥昔单抗响应(McLaughlin等.,1998,J Clin Oncol 16:2825-2833)。在166个临床患者中,6%显示了完全响应,42%显示了部分响应,中值响应持续时间大约为12个月。曲妥单抗(Herceptin_,Genentech的注册商标),一种用于治疗乳腺癌转移的抗-HER2/neu抗体,具有较低的疗效。对222个受试患者使用曲妥单抗的总响应率仅有15%,其中8个完全响应,26个部分响应,中值响应持续时间和存活时间为9-13个月(Cobleigh等.,1999,J Clin Oncol 17:2639-2648)。目前对于抗癌治疗而言,在死亡率上任何小的改善都意味着成功。因此,特别需要增强抗体破坏靶癌细胞的能力。
一种用于增强抗体抗肿瘤效力的有希望的方法是通过增加它们介导诸如ADCC、ADCP和CDC的细胞毒性效应器功能的能力。对于抗体抗癌活性而言,FcγR-介导的效应器功能的重要性已在小鼠中得到证实(Clynes等.,1998,Proc Natl Acad Sci USA 95:652-656;Clynes等.,2000,Nat Med 6:443-446),并在基于细胞的测定中证实了与靶细胞毒性相关的Fc与特定FcγR之间相互作用的亲和力(Shields等.,2001,J Biol Chem 276:6591-6604;Presta等.,2002,Biochem Soc Trans 30:487-490;Shields等.,2002,J Biol Chem277:26733-26740)。此外,已观察到人临床疗效与它们的同种异型-FcγRIIIa的高亲和力多态型(V158)或低亲和力多态型(F158)之间的相互关系(Cartron等.,2002,Blood 99:754-758)。综合起来,这些数据提示了对于与特定FcγR结合而言,在患者体内具有Fc区优化的抗体能更好地介导效应器功能并因此能更有效地破坏癌细胞。在激活与抑制受体之间的平衡要得到重点考虑,并应由Fc产生最佳的效应器功能,对诸如FcγRI、FcγRIIa/c以及FcγRIIIa的激活受体而言应具有增强的亲和力,还应减少对抑制性受体FcγRIIb的亲和力。此外,因为FcγR能介导通过抗原呈递细胞的抗原摄入和加工过程,所以增强Fc/FcγR亲和力也能改善抗体治疗能力以引发获得性免疫应答。
为不同目的对Fc进行诱变研究,通常对丙氨酸进行取代(称为丙氨酸扫描)或通过序列同源性取代指导进行取代(Duncan等.,1988,Nature 332:563-564;Lund等.,1991,J Immunol 147:2657-2662;Lund等.,1992,MolImmunol 29:53-59;Jefferis等,1995,Immunol Lett 44:111-117;Lund等.,1995,Faseb J 9:115-119;Jefferis等.,1996,Immunol Lett 54:101-104;Lund等,1996,J Immunol 157:4963-4969;Armour等,1999,Eur J Immunol 29:2613-2624;Shields等.,2001,J Biol Chem 276:6591-6604;Jefferis等.,2002,Immunol Lett 82:57-65)(US 5,624,821;US 5,885,573;PCT WO 00/42072;PCTWO 99/58572)。大多数取代减少或消除了与FcγR的结合。另一方面,在获得具有更高FcγR亲和力的Fc变体方面已取得了一些成功(参见例如US5,624,821和PCT WO 00/42072)。例如,Winter及其同事在小鼠IgG2b抗体的235位上用人氨基酸进行取代(谷氨酸到亮氨酸突变),该小鼠抗体与人FcγRI的结合增加了100倍(Duncan等.,1988,Nature 332:563-564)(US5,624,821)。Shields等使用丙氨酸扫描诱变来定位对FcγR结合起重要作用的Fc残基,然后通过用非丙氨酸突变对所选定的残基进行取代(Shields等.,2001,J Biol Chem 276:6591-6604;Presta等.,2002,Biochem Soc Trans 30:487-490)(PCT WO 00/42072)。该研究公开了一些突变,包括S298A、E333A和K334A,显示了与激活受体FcγRIIIa增强的结合以及减少了与抑制性受体FcγRIIb的结合。组合这些突变以获得双重和三重突变的变体,在结合方面其显示了累加的改善。在该研究中所公开的最好的变体是S298A/E333A/K334A三重突变体,其与F158FcγRIIIa的结合大约增加了1.7倍,与FcγRIIb的结合减少了5倍,且ADCC增加了2.1倍。
使用改造后的糖型(engineered glycoform)也已实现了Fc对FcγR增强的亲和力,该糖型产生自工程改造的或变异的细胞系中抗体的表达(Umana等.,1999,Nat Biotechnol 17:176-180;Davies等,2001,Biotechnol Bioeng 74:288-294;Shields等.,2002,J Biol Chem 277:26733-26740;Shinkawa等.,2003,J Biol Chem 278:3466-3473)。该方法产生了实质上增加的抗体与FcγRIIIa结合并介导ADCC的能力。尽管在实践中存在诸如在大规模生产条件下表达菌株生长效率的局限性,用于增强Fc/FcγR亲和力以及效应器功能的该方法仍然是有前途的。实际上,对于优化效应器功能来说,将这些可选的糖型技术与本发明的Fc变体结合可提供累加效应或协同效应。
尽管需要更强的效应器功能,对于某些抗体治疗剂而言,减少或消除效应器功能也许是其所需的。通常认为治疗性抗体其作用机理包括阻断或拮抗但不杀死具有靶抗原的细胞。这样的话耗尽靶细胞并不是所需的并认为存在着副作用。例如,抗CD4抗体阻断T细胞上CD4受体的能力使其能有效地抗炎,甚至它们招募FcγR受体的能力也可指导免疫系统攻击靶细胞,导致T细胞损耗(Reddy等.,2000,J Immunol 164:1925-1933)。对于称为放射缀合物的放射标记的抗体以及称为免疫毒素的缀合毒素的抗体而言,效应器功能也许是一道难题。这些药物可用于破坏癌细胞,但是通过Fc与FcγR相互作用所招募的免疫细胞使得健康的免疫细胞接近致死性的负载物(放射物或毒素),导致正常淋巴组织连同靶癌细胞一起损耗(Hutchins等.,1995,Proc Natl Acad Sci USA 92:11980-11984;White等.,2001,Annu RevMed 52:125-145)。通过使用IgG同种型有可能解决该问题,该IgG同种型无法充分地招募补体或效应细胞,例如IgG2及IgG4。可选的解决方案是开发能减少或消除结合能力的Fc变体(Alegre等.,1994,Transplantation 57:1537-1543;Hutchins等.,1995,Proc Natl Acad Sci USA 92:11980-11984;Armour等.,1999,Eur J Immunol 29:2613-2624;Reddy等.,2000,JImmunol 164:1925-1933;Xu等.,2000,Cell Immunol 200:16-26;Shields等.,2001,J Biol Chem 276:6591-6604)(US 6,194,551;US 5,885,573;PCT WO99/58572)。对于减少或消除效应器功能而言,主要的考虑是其它重要的抗体特性不被干扰。应改造Fc变体,以不仅消除与FcγR和/或C1q的结合,而且还能保持抗体的稳定性、可溶性和结构的整体性(integrity),以及能保持与诸如FcRn和蛋白A及G的其它重要Fc配体相互作用的能力。
本发明解决了抗体的另一个主要缺点,即它们过分苛求的生产必备条件(Garber,2001,Nat Biotechnol 19:184-185;Dove,2002,Nat Biotechnol 20:777-779)。抗体应当在哺乳动物细胞中表达,且目前市售抗体与其它高度需求的生物治疗药物基本上耗尽了所有可用的制造能力。有数百种生物制剂正在开发中,其中大多数是抗体,迫切需要更有效及更便宜的生产方法。不足的抗体制造能力具有三方面的下游效应。首先,对于生产者而言显著增加了产品成本,即传递给患者的成本。其次,其阻碍了批准的抗体产品的工业化生产,限制了患者高度需求的治疗剂的可用性。最后,因为临床试验需要大量还无利可图的蛋白质,所以不足的供给阻止了抗体市场化的成长过程。
已研究用于尝试解决该问题的可选的生产方法。正寻求将转基因植物和动物作为可能的更便宜及更高产的系统(Chadd等.,2001,Curr OpinBiotechnol 12:188-194)。然而,该表达系统可产生明显不同于人糖蛋白的糖基化型(glycosylation patterns)。其可导致效应器功能减少或甚至缺失,因为如上所讨论,该糖结构能显著地影响FcγR和补体的结合。非人糖型潜在的巨大问题可能是免疫原性;对于免疫系统来说,糖是抗原性的关键来源,并且非人糖型的存在具有相当大的引发抗体中和治疗的机率,或更严重地引起有害的免疫反应。因此,通过转基因植物和动物生产的抗体的疗效和安全性仍无法确定。细菌表达是另一种引人注目的解决抗体生产难题的方案。在诸如大肠杆菌的细菌中表达提供了一种用于生产蛋白质的节省成本和高效的方法。对于诸如抗体等复合物蛋白质而言,在细菌表达中存在许多障碍,包括这些复合物分子的折叠和组装、正确形成二硫键以及缺乏糖基化时的溶解性、稳定性和功能性,因为在细菌中表达的蛋白质不被糖基化。已成功地在大肠杆菌中表达出能结合抗原的全长非糖基化抗体(Simmons等.,2002,J Immunol Methods 263:133-147),因此在缺乏真核侣伴蛋白手段下,细菌性表达抗体的折叠、组装和正确形成二硫键可能发生。然而,用于治疗的细菌性表达抗体的最终功效仍为缺乏糖基化而困扰,其导致缺乏效应器功能并可导致不良的稳定性和溶解性。对于在高浓度下需要长期临床使用的剂型而言,很可能存在更多问题。
对于上述可选的生产方法而言,具有有利溶解特性(solution property)以及介导效应器功能的能力的非糖基化(aglycosylated)Fc将有效地使之成为可能。通过克服非糖基化Fc结构和功能上的缺点,抗体可在细菌中以及转基因植物和动物中生产,具有减少的免疫原性危险,以及在需要细胞毒性的临床应用诸如癌症中具有效应器功能。本发明描述了利用蛋白质工程方法来开发具有效应器功能的稳定、可溶的Fc变体。当前,在本领域中并不存在这样的Fc变体。
总之,需要具有增强的治疗特性的抗体。设计优化或增强的Fc变体是符合该需求的有前途的方法。虽然,设计具有所需特性的Fc变体的真正障碍在于预测无数可能性中的哪些氨基酸修饰可实现所需目的,和对于抗体而言效率低的生产和筛选方法。实际上,对于不完全成功的现有技术而言,其基本前提之一是使用类似于Fc设计的方法,因此更多地涉及诸如丙氨酸扫描的尝试(hit-or-miss)方法或使用不同的表达菌株来产生糖型。在这些研究中,可进行完全或部分随机的Fc修饰希望能获得具有有利特性的变体。本发明提供了多种工程方法,其中许多基于更完善和更有效的技术,可用于克服这些障碍以便开发对于所需特性优化的Fc变体。所述的工程方法提供了指导Fc修饰的设计策略、用于设计有利Fc变体的计算筛选方法、用于确定对试验研究有用的变体的文库产生方法以及用于确定具有有利特性Fc变体的一系实验生产和筛选方法。
发明概述
本发明提供了Fc变体,其许多与治疗相关的特性得到优化。这些Fc变体通常包含在变体蛋白质中,所述变体蛋白质优选包含抗体或Fc融合蛋白质。
本发明的一个目的是提供新的Fc位置,在该位置上氨基酸修饰可用于产生优化的Fc变体。所述Fc位置包括230、240、244、245、247、262、263、266、273、275、299、302、313、323、325、328和332,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。本发明描述在任一所述新的Fc位置上的任何氨基酸修饰,以便产生优化的Fc变体。
本发明的另一个目的是提供计算筛选的Fc变体。计算筛选的Fc变体是一种通过在本文中所描述的计算筛选计算所预测的变体,对于优化所需特性而言,计算筛选较随机方法具有更有效的潜力。可见,计算筛选可作为试验筛选的先用品(prelude)或替代品,因此所述的计算筛选的Fc变体被认为是新的。
本发明的另一个目的是提供使用一种或多种本文所述的实验方法鉴定的Fc变体。在一个实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,该取代所位于的位置选自:230,233,234,235,239,240,241,243,244,245,247,262,263,264,265,266,267,269,270,272,273,274,275,276,278,283,296,297,298,299,302,313,318,320,323,324,325,326,327,328,329,330,331,332,333,334,或335,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,选自:221,222,224,227,228,230,231,223,233,234,235,236,237,238,239,240,241,243,244,245,246,247,249,250,258,262,263,264,265,266,267,268,269,270,271,272,273,274,275,276,278,280,281,283,285,286,288,290,291,293,294,295,296,297,298,299,300,302,313,317,318,320,322,323,324,325,326,327,328,329,330,331,332,333,334,335,336和428,,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体包含至少一种选自下组的取代:P230A,E233D,L234D,L234E,L234N,L234Q,L234T,L234H,L234Y,L234I,L234V,L234F,L235D,L235S,L235N,L235Q,L235T,L235H,L235Y,L235I,L235V,L235F,S239D,S239E,S239N,S239Q,S239F,S239T,S239H,S239Y,V240I,V240A,V240T,V240M,F241W,F241L,F241Y,F241E,F241R,F243W,F243L,F243Y,F243R,F243Q,P244H,P245A,P247V,P247G,V262I,V262A,V262T,V262E,V263I,V263A,V263T,V263M,V264L,V264I,V264W,V264T,V264R,V264F,V264M,V264Y,V264E,D265G,D265N,D265Q,D265Y,D265F,D265V,D265I,D265L,D265H,D265T,V266I,V266A,V266T,V266M,S267Q,S267L,S267T,S267H,S267D,S267N,E269H,E269Y,E269F,E269R,E269T,E269L,E269N,D270Q,D270T,D270H,E272S,E272K,E272I,E272Y,V273I,K274T,K274E,K274R,K274L,K274Y,F275W,N276S,N276E,N276R,N276L,N276Y,Y278T,Y278E,Y278K,Y278W,E283R,Y296E,Y296Q,Y296D,Y296N,Y296S,Y296T,Y296L,Y296I,Y296H,N297S,N297D,N297E,A298H,T299I,T299L,T299A,T299S,T299V,T299H,T299F,T299E,V302I,W313F,E318R,K320T,K320D,K320I,K322T,K322H,V323I,S324T,S324D,S324R,S324I,S324V,S324L,S324Y,N325Q,N325L,N325I,N325D,N325E,N325A,N325T,N325V,N325H,K326L,K326I,K326T,A327N,A327L,A327D,A327T,L328M,L328D,L328E,L328N,L328Q,L328F,L328I,L328V,L328T,L328H,L328A,P329F,A330L,A330Y,A330V,A330I,A330F,A330R,A330H,A330S,A330W,A330M,P331V,P331H,I332D,I332E,I332N,I332Q,I332T,I332H,I332Y,I332A,E333T,E333H,E333I,E333Y,K334I,K334T,K334F,T335D,T335R和T335Y,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在最为优选的实施方案中,所述Fc变体选自:V264L,V264I,F241W,F241L,F243W,F243L,F241L/F243L/V262I/V264I,F241W/F243W,F241W/F243W/V262A/V264A,F241L/V262I,F243L/V264I,F243L/V262I/V264W,F241Y/F243Y/V262T/V264T,F241E/F243R/V262E/V264R,F241E/F243Q/V262T/V264E,F241R/F243Q/V262T/V264R,F241E/F243Y/V262T/V264R,L328M,L328E,L328F,I332E,L328M/I332E,P244H,P245A,P247V,W313F,P244H/P245A/P247V,P247G,V264I/I332E,F241E/F243R/V262E/V264R/I332E,F241E/F243Q/V262T/V264E/I332E,F241R/F243Q/V262T/V264R/I332E,F241E/F243Y/V262T/V264R/I332E,S298A/I332E,S239E/I332E,S239Q/I332E,S239E,D265G,D265N,S239E/D265G,S239E/D265N,S239E/D265Q,Y296E,Y296Q,T299I,A327N,S267Q/A327S,S267L/A327S,A327L,P329F,A330L,A330Y,I332D,N297S,N297D,N297S/I332E,N297D/I332E,N297E/I332E,D265Y/N297D/I332E,D265Y/N297D/T299L/I332E,D265F/N297E/I332E,L328I/I332E,L328Q/I332E,I332N,I332Q,V264T,V264F,V240I,V263I,V266I,T299A,T299S,T299V,N325Q,N325L,N325I,S239D,S239N,S239F,S239D/I332D,S239D/I332E,S239D/I332N,S239D/I332Q,S239E/I332D,S239E/I332N,S239E/I332Q,S239N/I332D,S239N/I332E,S239N/I332N,S239N/I332Q,S239Q/I332D,S239Q/I332N,S239Q/I332Q,Y296D,Y296N,F241Y/F243Y/V262T/V264T/N297D/I332E,A330Y/I332E,V264I/A330Y/I332E,A330L/I332E,V264I/A330L/I332E,L234D,L234E,L234N,L234Q,L234T,L234H,L234Y,L234I,L234V,L234F,L235D,L235S,L235N,L235Q,L235T,L235H,L235Y,L235I,L235V,L235F,S239T,S239H,S239Y,V240A,V240T,V240M,V263A,V263T,V263M,V264M,V264Y,V266A,V266T,V266M,E269H,E269Y,E269F,E269R,Y296S,Y296T,Y296L,Y296I,A298H,T299H,A330V,A330I,A330F,A330R,A330H,N325D,N325E,N325A,N325T,N325V,N325H,L328D/I332E,L328E/I332E,L328N/I332E,L328Q/I332E,L328V/I332E,L328T/I332E,L328H/I332E,L328I/I332E,L328A,I332T,I332H,I332Y,I332A,S239E/V264I/I332E,S239Q/V264I/I332E,S239E/V264I/A330Y/I332E,S239E/V264I/S298A/A330Y/I332E,S239D/N297D/I332E,S239E/N297D/I332E,S239D/D265V/N297D/I332E,S239D/D265I/N297D/I332E,S239D/D265L/N297D/I332E,S239D/D265F/N297D/I332E,S239D/D265Y/N297D/I332E,S239D/D265H/N297D/I332E,S239D/D265T/N297D/I332E,V264E/N297D/I332E,Y296D/N297D/I332E,Y296E/N297D/I332E,Y296N/N297D/I332E,Y296Q/N297D/I332E,Y296H/N297D/I332E,Y296T/N297D/I332E,N297D/T299V/I332E,N297D/T299I/I332E,N297D/T299L/I332E,N297D/T299F/I332E,N297D/T299H/I332E,N297D/T299E/I332E,N297D/A330Y/I332E,N297D/S298A/A330Y/I332E,S239D/A330Y/I332E,S239N/A330Y/I332E,S239D/A330L/I332E,S239N/A330L/I332E,V264I/S298A/I332E,S239D/S298A/I332E,S239N/S298A/I332E,S239D/V264I/I332E,S239D/V264I/S298A/I332E,S239D/V264I/A330L/I332E,L328N,L328H,S239D/I332E/A330I,N297D/I332E/S239D/A330L,P230A,E233D,P230A/E233D,P230A/E233D/I332E,S267T,S267H,S267D,S267N,E269T,E269L,E269N,D270Q,D270T,D270H,E272S,E272K,E272I,E272Y,V273I,K274T,K274E,K274R,K274L,K274Y,F275W,N276S,N276E,N276R,N276L,N276Y,Y278T,Y278E,Y278K,Y278W,E283R,V302I,E318R,K320T,K320D,K320I,K322T,K322H,V323I,S324T,S324D,S324R,S324I,S324V,S324L,S324Y,K326L,K326I,K326T,A327D,A327T,A330S,A330W,A330M,P331V,P331H,E333T,E333H,E333I,E333Y,K334I,K334T,K334F,T335D,T335R,T335Y,L234I/L235D,V240I/V266I,S239D/A330Y/I332E/L234I,S239D/A330Y/I332E/L235D,S239D/A330Y/I332E/V240I,S239D/A330Y/I332E/V264T,S239D/A330Y/I332E/V266I,S239D/A330Y/I332E/K326E,S239D/A330Y/I332E/K326T,S239D/N297D/I332E/A330Y,S239D/N297D/I332E/A330Y/F241S/F243H/V262T/V264T,S239D/N297D/I332E/L235D,和S239D/N297D/I332E/K326E,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。
本发明另一目的是提供Fc变体,其选自:D221K,D221Y,K222E,K222Y,T223E,T223K,H224E,H224Y,T225E,T225,T225K,T225W,P227E,P227K,P227Y,P227G,P228E,P228K,P228Y,P228G,P230E,P230Y,P230G,A231E,A231K,A231Y,A231P,A231G,P232E,P232K,P232Y,P232G,E233N,E233Q,E233K,E233R,E233S,E233T,E233H,E233A,E233V,E233L,E233I,E233F,E233M,E233Y,E233W,E233G,L234K,L234R,L234S,L234A,L234M,L234W,L234P,L234G,L235E,L235K,L235R,L235A,L235M,L235W,L235P,L235G,G236D,G236E,G236N,G236Q,G236K,G236R,G236S,G236T,G236H,G236A,G236V,G236L,G236I,G236F,G236M,G236Y,G236W,G236P,G237D,G237E,G237N,G237Q,G237K,G237R,G237S,G237T,G237H,G237V,G237L,G237I,G237F,G237M,G237Y,G237W,G237P,P238D,P238E,P238N,P238Q,P238K,P238R,P238S,P238T,P238H,P238V,P238L,P238I,P238F,P238M,P238Y,P238W,P238G,S239Q,S239K,S239R,S239V,S239L,S239I,S239M,S239W,S239P,S239G,F241D,F241E,F241Y,F243E,K246D,K246E,K246H,K246Y,D249Q,D249H,D249Y,R255E,R255Y,E258S,E258H,E258Y,T260D,T260E,T260H,T260Y,V262E,V262F,V264D,V264E,V264N,V264Q,V264K,V264R,V264S,V264H,V264W,V264P,V264G,D265Q,D265K,D265R,D265S,D265T,D265H,D265V,D265L,D265I,D265F,D265M,D265Y,D265W,D265P,S267E,S267Q,S267K,S267R,S267V,S267L,S267I,S267F,S267M,S267Y,S267W,S267P,H268D,H268E,H268Q,H268K,H268R,H268T,H268V,H268L,H268I,H268F,H268M,H268W,H268P,H268G,E269K,E269S,E269V,E269I,E269M,E269W,E269P,E269G,D270R,D270S,D270L,D270I,D270F,D270M,D270Y,D270W,D270P,D270G,P271D,P271E,P271N,P271Q,P271K,P271R,P271S,P271T,P271H,P271A,P271V,P271L,P271I,P271F,P271M,P271Y,P271W,P271G,E272D,E272R,E272T,E272H,E272V,E272L,E272F,E272M,E272W,E272P,E272G,K274D,K274N,K274S,K274H,K274V,K274I,K274F,K274M,K274W,K274P,K274G,F275L,N276D,N276T,N276H,N276V,N276I,N276F,N276M,N276W,N276P,N276G,Y278D,Y278N,Y278Q,Y278R,Y278S,Y278H,Y278V,Y278L,Y278I,Y278M,Y278P,Y278G,D280K,D280L,D280W,D280P,D280G,G281D,G281K,G281Y,G281P,V282E,V282K,V282Y,V282P,V282G,E283K,E283H,E283L,E283Y,E283P,E283G,V284E,V284N,V284T,V284L,V284Y,H285D,H285E,H285Q,H285K,H285Y,H285W,N286E,N286Y,N286P,N286G,K288D,K288E,K288Y,K290D,K290N,K290H,K290L,K290W,P291D,P291E,P291Q,P291T,P291H,P291I,P291G,R292D,R292E,R292T,R292Y,E293N,E293R,E293S,E293T,E293H,E293V,E293L,E293I,E293F,E293M,E293Y,E293W,E293P,E293G,E294K,E294R,E294S,E294T,E294H,E294V,E294L,E294I,E294F,E294M,E294Y,E294W,E294P,E294G,Q295D,Q295E,Q295N,Q295R,Q295S,Q295T,Q295H,Q295V,Q295I,Q295F,Q295M,Q295Y,Q295W,Q295P,Q295G,Y296K,Y296R,Y296A,Y296V,Y296M,Y296G,N297Q,N297K,N297R,N297T,N297H,N297V,N297L,N297I,N297F,N297M,N297Y,N297W,N297P,N297G,S298D,S298E,S298Q,S298K,S298R,S298I,S298F,S298M,S298Y,S298W,T299D,T299E,T299N,T299Q,T299K,T299R,T299L,T299F,T299M,T299Y,T299W,T299P,T299G,Y300D,Y300E,Y300N,Y300Q,Y300K,Y300R,Y300S,Y300T,Y300H,Y300A,Y300V,Y300M,Y300W,Y300P,Y300G,R301D,R301E,R301H,R301Y,V303D,V303E,V303Y,S304D,S304N,S304T,S304H,S304L,V305E,V305T,V305Y,K317E,K317Q,E318Q,E318H,E318L,E318Y,K320N,K320S,K320H,K320V,K320L,K320F,K320Y,K320W,K320P,K320G,K322D,K322S,K322V,K322I,K322F,K322Y,K322W,K322P,K322G,S324H,S324F,S324M,S324W,S324P,S324G,N325K,N325R,N325S,N325F,N325M,N325Y,N325W,N325P,N325G,K326P,A327E,A327K,A327R,A327H,A327V,A327I,A327F,A327M,A327Y,A327W,A327P,L328D,L328Q,L328K,L328R,L328S,L328T,L328V,L328I,L328Y,L328W,L328P,L328G,P329D,P329E,P329N,P329Q,P329K,P329R,P329S,P329T,P329H,P329V,P329L,P329I,P329M,P329Y,P329W,P329G,A330E,A330N,A330T,A330P,A330G,P331D,P331Q,P331R,P331T,P331L,P331I,P331F,P331M,P331Y,P331W,I332K,I332R,I332S,I332V,I332L,I332F,I332M,I332W,I332P,I332G,E333L,E333F,E333M,E333P,K334P,T335N,T335S,T335H,T335V,T335L,T335I,T335F,T335M,T335W,T335P,T335G,I336E,I336K,I336Y,S337E,S337N,和S337H,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。
本发明的另一个目的是提供与一种或多种FcγR的结合具有更强亲和力的Fc变体。在一个实施方案中,所述Fc变体较亲本Fc多肽对FcγR的亲和力增加超过1倍。在一个可选的实施方案中,所述Fc变体较亲本Fc多肽对FcγR的亲和力增加超过5倍。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体较亲本Fc多肽对FcγR的亲和力增加在5倍至300倍之间。在一个实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,该取代所位于的位置选自:230,233,234,235,239,240,243,264,266,272,274,275,276,278,302,318,324,325,326,328,330,332和335,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,选自:P230A,E233D,L234E,L234Y,L234I,L235D,L235S,L235Y,L235I,S239D,S239E,S239N,S239Q,S239T,V240I,V240M,F243L,V264I,V264T,V264Y,V266I,E272Y,K274T,K274E,K274R,K274L,K274Y,F275W,N276L,Y278T,V302I,E318R,S324D,S324I,S324V,N325T,K326I,K326T,L328M,L328I,L328Q,L328D,L328V,L328T,A330Y,A330L,A330I,I332D,I332E,I332N,I332Q,T335D,T335R,和T335Y,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个最优选的实施方案中,所述Fc变体选自:V264I,F243L/V264I,L328M,I332E,L328M/I332E,V264I/I332E,S298A/I332E,S239E/I332E,S239Q/I332E,S239E,A330Y,I332D,L328I/I332E,L328Q/I332E,V264T,V240I,V266I,S239D,S239D/I332D,S239D/I332E,S239D/I332N,S239D/I332Q,S239E/I332D,S239E/I332N,S239E/I332Q,S239N/I332D,S239N/I332E,S239Q/I332D,A330Y/I332E,V264I/A330Y/I332E,A330L/I332E,V264I/A330L/I332E,L234E,L234Y,L234I,L235D,L235S,L235Y,L235I,S239T,V240M,V264Y,A330I,N325T,L328D/I332E,L328V/I332E,L328T/I332E,L328I/I332E,S239E/V264I/I332E,S239Q/V264I/I332E,S239E/V264I/A330Y/I332E,S239D/A330Y/I332E,S239N/A330Y/I332E,S239D/A330L/I332E,S239N/A330L/I332E,V264I/S298A/I332E,S239D/S298A/I332E,S239N/S298A/I332E,S239D/V264I/I332E,S239D/V264I/S298A/I332E,S239D/V264I/A330L/I332E,S239D/I332E/A330I,P230A,P230A/E233D/I332E,E272Y,K274T,K274E,K274R,K274L,K274Y,F275W,N276L,Y278T,V302I,E318R,S324D,S324I,S324V,K326I,K326T,T335D,T335R,T335Y,V240I,V266I,S239D/A330Y/I332E/L234I,S239D/A330Y/I332E/L235D,S239D/A330Y/I332E/V240I,S239D/A330Y/I332E/V264T,S239D/A330Y/I332E/K326E,和S239D/A330Y/I332E/K326T,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。
本发明的另一个目的是提供具有FcγRIIIa-倍数:FcγRIIb-倍数比率大于1∶1的Fc变体。在一个实施方案中,所述Fc变体具有FcγRIIIa-倍数:FcγRIIb-倍数比率大于11∶1。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体具有在11∶1至86∶1之间的FcγRIIIa-倍数:FcγRIIb-倍数比率。在一个实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,该取代所位于的位置选自:234,235,239,240,264,296,330,和I332,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,选自:L234Y,L234I,L235I,S239D,S239E,S239N,S239Q,V240A,V240M,V264I,V264Y,Y296Q,A330L,A330Y,A330I,I332D,和I332E,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个最优选的实施方案中,所述Fc变体选自:I332E,V264I/I332E,S239E/I332E,S239Q/I332E,Y296Q,A330L,A330Y,I332D,S239D,S239D/I332E,A330Y/I332E,V264I/A330Y/I332E,A330L/I332E,V264I/A330L/I332E,L234Y,L234I,L235I,V240A,V240M,V264Y,A330I,S239D/A330L/I332E,S239D/S298A/I332E,S239N/S298A/I332E,S239D/V264I/I332E,S239D/V264I/S298A/I332E,和S239D/V264I/A330L/I332E,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。
本发明的另一个目的是提供在存在效应细胞条件下能更有效地介导效应器功能的Fc变体。在一个实施方案中,所述Fc变体较亲本Fc多肽更能介导ADCC。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体较亲本Fc多肽介导ADCC增加超过5倍。在一个最优选的实施方案中,所述Fc变体介导的ADCC较亲本Fc多肽介导ADCC增加5-1000倍。在一个实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,该取代所在位置选自:230,233,234,235,239,240,243,264,266,272,274,275,276,278,302,318,324,325,326,328,330,332,和335,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,选自:P230A,E233D,L234E,L234Y,L234I,L235D,L235S,L235Y,L235I,S239D,S239E,S239N,S239Q,S239T,V240I,V240M,F243L,V264I,V264T,V264Y,V266I,E272Y,K274T,K274E,K274R,K274L,K274Y,F275W,N276L,Y278T,V302I,E318R,S324D,S324I,S324V,N325T,K326I,K326T,L328M,L328I,L328Q,L328D,L328V,L328T,A330Y,A330L,A330I,I332D,I332E,I332N,I332Q,T335D,T335R,和T335Y,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个最优选的实施方案中,所述Fc变体选自:V264I,F243L/V264I,L328M,I332E,L328M/I332E,V264I/I332E,S298A/I332E,S239E/I332E,S239Q/I332E,S239E,A330Y,I332D,L328I/I332E,L328Q/I332E,V264T,V240I,V266I,S239D,S239D/I332D,S239D/I332E,S239D/I332N,S239D/I332Q,S239E/I332D,S239E/I332N,S239E/I332Q,S239N/I332D,S239N/I332E,S239Q/I332D,A330Y/I332E,V264I/A330Y/I332E,A330L/I332E,V264I/A330L/I332E,L234E,L234Y,L234I,L235D,L235S,L235Y,L235I,S239T,V240M,V264Y,A330I,N325T,L328D/I332E,L328V/I332E,L328T/I332E,L328I/I332E,S239E/V264I/I332E,S239Q/V264I/I332E,S239E/V264I/A330Y/I332E,S239D/A330Y/I332E,S239N/A330Y/I332E,S239D/A330L/I332E,S239N/A330L/I332E,V264I/S298A/I332E,S239D/S298A/I332E,S239N/S298A/I332E,S239D/V264I/I332E,S239D/V264I/S298A/I332E,S239D/V264I/A330L/I332E,S239D/I332E/A330I,P230A,P230A/E233D/I332E,E272Y,K274T,K274E,K274R,K274L,K274Y,F275W,N276L,Y278T,V302I,E318R,S324D,S324I,S324V,K326I,K326T,T335D,T335R,T335Y,V240I/V266I,S239D/A330Y/I332E/L234I,S239D/A330Y/I332E/L235D,S239D/A330Y/I332E/V240I,S239D/A330Y/I332E/V264T,S239D/A330Y/I332E/K326E,和S239D/A330Y/I332E/K326T,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。
本发明的另一个目的是提供与一种或多种FcγR的结合具有较弱亲和力的Fc变体。在一个实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,该取代所在位置选自:230,233,234,235,239,240,241,243,244,245,247,262,263,264,265,266,267,269,270,273,276,278,283,296,297,298,299,313,323,324,325,327,328,329,330,332,和333,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体包含一种氨基酸取代,所述取代所在位点选自:P230A,E233D,L234D,L234N,L234Q,L234T,L234H,L234V,L234F,L234I,L235N,L235Q,L235T,L235H,L235V,L235F,L235D,S239E,S239N,S239Q,S239F,S239H,S239Y,V240A,V240T,F241W,F241L,F241Y,F241E,F241R,F243W,F243L F243Y,F243R,F243Q,P244H,P245A,P247V,P247G,V262I,V262A,V262T,V262E,V263I,V263A,V263T,V263M,V264L,V264I,V264W,V264T,V264R,V264F,V264M,V264E,D265G,D265N,D265Q,D265Y,D265F,D265V,D265I,D265L,D265H,D265T,V266A,V266T,V266M,S267Q,S267L,E269H,E269Y,E269F,E269R,E269T,E269L,E269N,D270Q,D270T,D270H,V273I,N276S,N276E,N276R,N276Y,Y278E,Y278W,E283R,Y296E,Y296Q,Y296D,Y296N,Y296S,Y296T,Y296L,Y296I,Y296H,N297S,N297D,N297E,A298H,T299I,T299L,T299A,T299S,T299V,T299H,T299F,T299E,W313F,V323I,S324R,S324L,S324Y,N325Q,N325L,N325I,N325D,N325E,N325A,N325V,N325H,A327N,A327L,L328M,328E,L328N,L328Q,A327D,A327T,L328F,L328H,L328A,L328N,L328H,P329F,A330L,A330V,A330F,A330R,A330H,I332N,I332Q,I332T,I332H,I332Y,I332A,E333T,和E333H,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个最优选的实施方案中,所述Fc变体选自:V264L,F241W,F241L,F243W,F243L,F241L/F243L/V262I/V264I,F241W/F243W,F241W/F243W/V262A/V264A,F241L/V262I,F243L/V262I/V264W,F241Y/F243Y/V262T/V264T,F241E/F243R/V262E/V264R,F241E/F243Q/V262T/V264E,F241R/F243Q/V262T/V264R,F241E/F243Y/V262T/V264R,L328M,L328E,L328F,P244H,P245A,P247V,W313F,P244H/P245A/P247V,P247G,F241E/F243R/V262E/V264R/I332E,F241E/F243Y/V262T/V264R/I332E,D265G,D265N,S239E/D265G,S239E/D265N,S239E/D265Q,Y296E,Y296Q,T299I,A327N,S267Q/A327S,S267L/A327S,A327L,P329F,A330L,N297S,N297D,N297S/I332E,I332N,I332Q,V264F,V263I,T299A,T299S,T299V,N325Q,N325L,N325I,S239N,S239F,S239N/I332N,S239N/I332Q,S239Q/I332N,S239Q/I332Q,Y296D,Y296N,L234D,L234N,L234Q,L234T,L234H,L234V,L234F,L235N,L235Q,L235T,L235H,L235V,L235F,S239H,S239Y,V240A,V263T,V263M,V264M,V266A,V266T,V266M,E269H,E269Y,E269F,E269R,Y296S,Y296T,Y296L,Y296I,A298H,T299H,A330V,A330F,A330R,A330H,N325D,N325E,N325A,N325V,N325H,L328E/I332E,L328N/I332E,L328Q/I332E,L328H/I332E,L328A,I332T,I332H,I332Y,I332A,L328N,L328H,E233D,P230A/E233D,E269T,E269L,E269N,D270Q,D270T,D270H,V273I,N276S,N276E,N276R,N276Y,Y278E,Y278W,E283R,V323I,S324R,S324L,S324Y,A327D,A327T,E333T,E333H,和L234I/L235D,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。
本发明的另一个目的是提供在存在效应细胞条件下能更低效地介导ADCC的Fc变体。在一个实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,该取代所在位置选自:230,233,234,235,239,240,241,243,244,245,247,262,263,264,265,266,267,269,270,273,276,278,283,296,297,298,299,313,323,324,325,327,328,329,330,332,和333,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,该取代所在位置选自:P230A,E233D,L234D,L234N,L234Q,L234T,L234H,L234V,L234F,L234I,L235N,L235Q,L235T,L235H,L235V,L235F,L235D,S239E,S239N,S239Q,S239F,S239H,S239Y,V240A,V240T,F241W,F241L,F241Y,F241E,F241R,F243W,F243L F243Y,F243R,F243Q,P244H,P245A,P247V,P247G,V262I,V262A,V262T,V262E,V263I,V263A,V263T,V263M,V264L,V264I,V264W,V264T,V264R,V264F,V264M,V264E,D265G,D265N,D265Q,D265Y,D265F,D265V,D265I,D265L,D265H,D265T,V266A,V266T,V266M,S267Q,S267L,E269H,E269Y,E269F,E269R,E269T,E269L,E269N,D270Q,D270T,D270H,V273I,N276S,N276E,N276R,N276Y,Y278E,Y278W,E283R,Y296E,Y296Q,Y296D,Y296N,Y296S,Y296T,Y296L,Y296I,Y296H,N297S,N297D,N297E,A298H,T299I,T299L,T299A,T299S,T299V,T299H,T299F,T299E,W313F,V323I,S324R,S324L,S324Y,N325Q,N325L,N325I,N325D,N325E,N325A,N325V,N325H,A327N,A327L,L328M,328E,L328N,L328Q,A327D,A327T,L328F,L328H,L328A,L328N,L328H,P329F,A330L,A330V,A330F,A330R,A330H,I332N,I332Q,I332T,I332H,I332Y,I332A,E333T,和E333H,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个最优选的实施方案中,所述Fc变体选自:V264L,F241W,F241L,F243W,F243L,F241L/F243L/V262I/V264I,F241W/F243W,F241W/F243W/V262A/V264A,F241L/V262I,F243L/V262I/V264W,F241Y/F243Y/262T/V264T,F241E/F243R/V262E/V264R,F241E/F243Q/V262T/V264E,F241R/F243Q/V262T/V264R,F241E/F243Y/V262T/V264R,L328M,L328E,L328F,P244H,P245A,P247V,W313F,P244H/P245A/P247V,P247G,F241E/F243R/V262E/V264R/I332E,F241E/F243Y/V262T/V264R/I332E,D265G,D265N,S239E/D265G,S239E/D265N,S239E/D265Q,Y296E,Y296Q,T299I,A327N,S267Q/A327S,S267L/A327S,A327L,P329F,A330L,N297S,N297D,N297S/I332E,I332N,I332Q,V264F,V263I,T299A,T299S,T299V,N325Q,N325L,N325I,S239N,S239F,S239N/I332N,S239N/I332Q,S239Q/I332N,S239Q/I332Q,Y296D,Y296N,L234D,L234N,L234Q,L234T,L234H,L234V,L234F,L235N,L235Q,L235T,L235H,L235V,L235F,S239H,S239Y,V240A,V263T,V263M,V264M,V266A,V266T,V266M,E269H,E269Y,E269F,E269R,Y296S,Y296T,Y296L,Y296I,A298H,T299H,A330V,A330F,A330R,A330H,N325D,N325E,N325A,N325V,N325H,L328E/I332E,L328N/I332E,L328Q/I332E,L328H/I332E,L328A,I332T,I332H,I332Y,I332A,L328N,L328H,E233D,P230A/E233D,E269T,E269L,E269N,D270Q,D270T,D270H,V273I,N276S,N276E,N276R,N276Y,Y278E,Y278W,E283R,V323I,S324R,S324L,S324Y,A327D,A327T,E333T,E333H,和L234I/L235D,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。
本发明的另一个目的是提供相对于亲本Fc多肽的非糖型具有改良的功能和/或溶解特性的Fc变体。本文中改良的功能性包括但不限于与Fc配体的结合亲和力。本文中改良的溶解特性包括但不限于稳定性和溶解性。在一个实施方案中,所述非糖基化Fc变体较糖基化亲本Fc多肽与FcγR的结合所具有的亲和力是可比的或更大。在一个可选的实施方案中,所述Fc变体与FcγR的结合所具有的亲和力是在亲本Fc多肽糖基化型的0.4-倍范围内。在一个实施方案中,所述Fc变体包含至少一种氨基酸取代,该取代所在位置选自:239,241,243,262,264,265,296,297,330,和332,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个优选的实施方案中,所述Fc变体包含一种氨基酸取代,选自:S239D,S239E,F241Y,F243Y,V262T,V264T,V264E,D265Y,D265H,D265V,D265I,Y296N,N297D,A330Y,和I332E,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。在一个最优选的实施方案中,所述Fc变体选自:N297D/I332E,F241Y/F243Y/V262T/V264T/N297D/I332E,S239D/N297D/I332E,S239E/N297D/I332E,S239D/D265Y/N297D/I332E,S239D/D265H/N297D/I332E,V264E/N297D/I332E,Y296N/N297D/I332E,N297D/A330Y/I332E,S239D/D265V/N297D/I332E,S239D/D265I/N297D/I332E,和N297D/S298A/A330Y/I332E,其中Fc区中残基编号方式是Kabat的EU标引方式。
本发明也提供了用于设计优化的Fc变体的方法。本发明的一个目的是提供可用于指导Fc优化的设计策略。本发明的另一个目的是提供可用于设计Fc变体的计算筛选方法。本发明的另一个目的是提供产生用于实验测试文库的方法。本发明的另一个目的是提供用于获得优化的Fc变体的实验生产和筛选方法。
本发明提供了编码本文所述Fc变体的分离的核酸。本发明提供了包含所述核酸的载体,任选地,可操作地连接调控序列。本发明提供了包含该载体的宿主细胞,以及用于生产和任选地回收该Fc变体的方法。
本发明提供了包含本文所公开的Fc变体的新抗体及Fc融合体。所述新抗体及Fc融合体可在治疗产品中使用。
本发明提供了包含抗体及Fc融合体以及生理学上或药学上可接受的载体或稀释剂的组合物,所述抗体及Fc融合体包含本文所述的Fc变体。
本发明提供了包含本文所公开的Fc变体的抗体及Fc融合体的治疗与诊断用途。
附图简述
图1.抗体结构与功能。显示的是全长人IgG1抗体的模型,模型使用了来自pdb登记号1CE1(James等.,1999,J Mol Biol 289:293-301)的人源化Fab结构和来自pdb登记号1DN2(DeLano等.,2000,Science 287:1279-1283)的人IgG1 Fc结构。未显示连接Fab和Fc区的柔性铰链。IgG1是异二聚体的同二聚体,由两条轻链和两条重链组成。标记了抗体包含的Ig结构域,对于轻链而言包括VL和CL,对于重链而言包括VH、Cγ1、Cγ2和Cγ3。标记了Fc区。标记了相关蛋白的结合位点,包括可变区中的抗原结合位点,以及Fc区中FcγR、FcRn、C1q和蛋白A和G的结合位点。
图2.Fc/FcγRIIIb复合物结构1IIS。Fc显示为灰色飘带图,FcγRIIIb显示为黑色飘带图。N297糖显示为黑色棒状。
图3.阿仑单抗(alemtuzumab)(Campath_,Ilex Pharmaceuticals LP的注册商标)抗体的重链氨基酸序列,阐明了位置编号顺序(在氨基酸序列上的2行)和依照Kabat的EU标引方式的位置编号(在氨基酸序列下的2行)。Ig结构域VH1、Cγ1、铰链、Cγ2和Cγ3大致的起点也标记于上述连续编号中。已观察到许多Fc位点上的多态性,包括但不限于Kabat 270、272、312、315、356和358,因此此处显示的序列与现有技术序列之间可能存在着微小的差异。
图4.定位在Fc/FcγRIIIb复合物结构1IIS上的实验文库残基。Fc显示为灰色飘带图,FcγRIIIb显示为黑色飘带图。实验文库残基显示为黑色。N297糖显示为灰色。
图5.人IgG1 Fc序列,显示了与Fc变体实验文库设计相关的位点。该序列包括铰链区、Cγ2结构域和Cγ3结构域。残基编号依照Kabat的EU标引方式。与实验文库相关的位点加下划线。因为观察到许多Fc位点上的多态性突变,所以此处显示的序列与文献序列之间可能存在着微小的差异。
图6.293T细胞中阿仑单抗的Fc变体和野生型(WT)蛋白的表达。含有阿仑单抗重链基因(野生型或变体)的质粒与含有阿仑单抗轻链基因的质粒共转染。转染5天后收获培养液。对于每个转染的样品而言,在SDS-PAGE凝胶上加载10μl培养液进行蛋白质印迹分析(Western analysis)。用于蛋白质印迹的探针是过氧化物酶偶联的山羊抗人IgG(Jackson Immuno-Research,产品目录#109-035-088)。WT:野生型阿仑单抗;1-10:阿仑单抗变体。H和L分别表示抗体重链和轻链。
图7.使用蛋白A层析纯化阿仑单抗。在293T细胞中表达野生型阿仑单抗蛋白,转染5天后收获培养液。将培养液用PBS稀释到1∶1,并用蛋白A(Pierce,产品目录#20334)纯化。O:纯化前原始样品;FT:流出液;E:洗脱液;C:浓缩的最终样品。左图显示了单纯(Simple)蓝染色的SDS-PAGE凝胶,右图显示了使用过氧化物酶偶联的山羊抗人IgG标记的蛋白质印迹。
图8.去糖基化抗体的产生。在293T细胞中表达阿仑单抗的野生型和变体,并用蛋白A层析纯化。抗体与肽-N-糖苷酶(PNGase F)在37℃温育24小时。对于每个抗体来说,平行进行模拟处理样品(-PNGase F)的试验。WT:野生型阿仑单抗;#15、#16、#17、#18、#22:分别为阿仑单抗变体F241E/F243R/V262E/V264R、F241E/F243Q/V262T/V264E、F241R/F243Q/V262T/V264R、F241E/F243Y/V262T/V264R和I332E。相对于模拟处理的样品,PNGase F处理的样品迁移更快,代表了去糖基化重链。
图9.表达自293T细胞的阿仑单抗与其抗原的结合。融合有GST的CD52肽抗原在IPTG诱导下表达自大肠杆菌BL21(DE3)。未诱导和诱导的样品都跑SDS-PAGE凝胶,并转移到PVDF膜上。对于蛋白质印迹来说,来自Sotec(α-CD52,Sotec)的阿仑单抗(终浓度为2.5ng/ul)或经转染的293T细胞(Campath,Xencor)的培养液(阿仑单抗终浓度约为0.1-0.2ng/u1)作为一抗,过氧化物酶偶联的羊抗人IgG作为二抗。M:预染色的标记物;U:未诱导GST-CD52的样品;I:诱导GST-CD52的样品。
图10.人V158FcγRIIIa胞外区的表达和纯化。标记的FcγRIIIa转染入293T细胞中,3天后收获含有分泌的FcγRIIIa的培养液并用亲和层析纯化。1:培养液;2:流出液;3:洗涤液;4-8:连续的洗脱液。simple蓝染色的SDS-PAGE凝胶和蛋白质印迹的结果都得到显示。对于蛋白质印迹而言,膜用抗-GST抗体探针探测。
图11.使用实施例2所述的AlphaScreenTM分析法确定自实验文库选择的阿仑单抗Fc变体与人V158 FcγRIIIa的结合。在存在竞争性抗体(Fc变体或野生型阿仑单抗)情况下,当发光信号减少时观察到特征性抑制曲线。磷酸盐缓冲液(PBS)单独作为阴性对照。这些数据相对于最大和最小发光信号标准化,所述最大和最小发光信号分别提供自低和高浓度抗体的基线。曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合,所述拟合使用了非线性回归。这些拟合提供了每个抗体的IC50,野生型和S239D用点线表示。
图12.AlphaScreenTM分析法显示了选择的阿仑单抗Fc变体与人FcγRIIb的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上(upper)基线和下(lower)基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图13a和13b.AlphaScreenTM分析法显示了选择的阿仑单抗Fc变体(图13a)和曲妥单抗(trastuzumab)与人Val158FcγRIIIa的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图14a和14b.AlphaScreenTM分析法测量了在背景曲妥单抗中选择的Fc变体与人V158FcγRIIIa的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图15a和15b.AlphaScreenTM分析法测量了在背景利妥昔单抗(利妥昔单抗)(图15a)和cetuximab(图15b)中选择的Fc变体与人V158 FcγRIIIa的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图16a和16b.AlphaScreenTM分析法比较了选择的阿仑单抗Fc变体与人V158FcγRIIIa(图16a)及人FcγRIIb(图16b)的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图17.AlphaScreenTM分析法测量了在背景曲妥单抗(曲妥单抗)中选择的Fc变体与人V158FcγRIIIa的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图18.AlphaScreenTM分析法显示了选择的阿仑单抗Fc变体与人R131FcγRIIa的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。
图19a和19b.AlphaScreenTM分析法显示了选择的阿仑单抗Fc变体与人V158FcγRIIIa的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型(one site competition model)的拟合。PBS作为阴性对照。
图20.AlphaScreenTM分析法显示了非糖基化阿仑单抗Fc变体与人V158FcγRIIIa的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图21.AlphaScreenTM分析法比较了选择的阿仑单抗Fc变体糖基化型(实心符号,实线)及非糖基化型(空心符号,虚线)与人V158FcγRIIIa的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。
图22a-22b.AlphaScreenTM分析法显示了选择的阿仑单抗Fc变体与人FcγRIIIa的V158(图22a)及F158(图22b)同种异型的结合。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图23a-23d.图23a和23b显示了选择的阿仑单抗Fc变体与V158FcγRIIIa(图23a)及F158FcγRIIIa(图23b)结合的SPR Kd′s与AlphaScreenTMIC50′s之间的相关性。图23c和23d显示了对于选择的阿仑单抗Fc变体与V158 FcγRIIIa(图23c)及F158FcγRIIIa(图23d)结合而言,SPR与AlphaScreenTM测定的相对于WT提高的倍数的结果之间的相关性。结合数据列于表63中。通过数据的线代表了数据的线性拟合,r2值表示这些拟合的显著性。
图24a-24b.在背景阿仑单抗中选择的Fc变体基于细胞的ADCC测定。使用基于DELFIA_EuTDA的细胞毒性测定法(Perkin Elmer,MA)测定ADCC,描述于实施例7,使用DoHH-2淋巴靶细胞和50倍过量的人PBMCs。图24a是显示了用于指示10ng/ml阿仑单抗抗体的原始荧光数据的条形图。PBMC条显示了在缺乏抗体条件下细胞毒性的基础水平。对于指明的阿仑单抗抗体而言,图24b显示了ADCC对抗体浓度的剂量依赖性,对每条曲线的最小和最大荧光信号标准化,所述最小和最大荧光信号分别提供自低和高浓度抗体的基线。曲线代表了数据对S形剂量-响应模型的拟合,所述拟合使用了非线性回归。
图25a-25c.在背景曲妥单抗中选择的Fc变体基于细胞的ADCC测定。使用基于DELFIA_EuTDA的细胞毒性测定法(Perkin Elmer,MA)测定ADCC,描述于实施例7,使用BT474和Sk-Br-3乳腺癌靶细胞和50倍过量的人PBMCs。图25a是显示了用于指示1ng/ml曲妥抗体的原始荧光数据的条形图。PBMC条显示了在缺乏抗体条件下细胞毒性的基础水平。对于指明的曲妥单抗抗体而言,图25b-c显示了ADCC对抗体浓度的剂量依赖性,对每条曲线的最小和最大荧光信号标准化,所述最小和最大荧光信号分别提供自低和高浓度抗体的基线。曲线代表了数据对S形剂量-响应模型的拟合,所述拟合使用了非线性回归。
图26a-26c.在背景利妥昔单抗中选择的Fc变体基于细胞的ADCC测定。使用基于DELFIA_EuTDA的细胞毒性测定法(Perkin Elmer,MA)测定ADCC,描述于实施例7,使用WIL2-S淋巴瘤靶细胞和50倍过量的人PBMCs。图26a是显示了用于指示1ng/ml利妥昔单抗抗体的原始荧光数据的条形图。PBMC条显示了在缺乏抗体的条件下细胞毒性的基础水平。对于指明的利妥昔单抗抗体而言,图26b和26c显示了ADCC对抗体浓度的剂量依赖,对每条曲线的最小和最大荧光信号标准化,所述最小和最大荧光信号分别提供自低和高浓度抗体的基线。曲线代表了数据对S形剂量-响应模型的拟合,所述拟合使用了非线性回归。
图27a-27b。选择的曲妥单抗(图27a)和利妥昔单抗(图27b)Fc变体的基于细胞的ADCC测定,其显示效力和有效性增加。两项试验都利用纯合F158/F158 FcγRIIIa PBMC作为效应细胞,其相对于靶细胞过量25倍,所述靶细胞对于曲妥单抗测定为Sk-Br-3,对于利妥昔单抗测定为WIL2-S。数据根据所述测定的绝对最小裂解(其由在单独的PBMC存在下(没有抗体)靶细胞的荧光信号来提供)以及所述测定的绝对最大裂解(其由在TritonX1000存在下靶细胞的荧光信号提供)进行标准化,如实施例7所示。
图28.选择的曲妥单抗Fc变体相对于表达各种水平的Her2/neu靶抗原的不同细胞系的基于细胞的ADCC测定。ADCC测定如实施例7中所述,各种细胞系表达扩增到低水平的Her2/neu受体,所述细胞系包括Sk-Br-3(1×106拷贝),SkOV3(~1×105),OVCAR3(~1×104),和MCF-7(~3×103拷贝)。作为纯合F158/F158 FcγRIIIa同种异型的人PBMC以25倍过量于靶细胞的量使用。柱图提供了野生型和Fc变体相对于所述细胞系的ADCC数据,其相对于最小裂解(单独的PBMC)和最大裂解(Triton X1000)提供的最小和最大荧光信号标准化。
图29.利用自然杀伤(NK)细胞作为效应细胞,在背景曲妥单抗中选择的Fc变体基于细胞的ADCC测定,测定LDH释放以监测细胞裂解。作为纯合V158/F158 FcγRIIIa同种异型的NK细胞,8倍过量于Sk-Br-3乳腺癌靶细胞,并且细胞毒水平利用LDH Cytotoxicity Detection Kit根据生产商说明(Roche Diagnostics GmbH,Penzberg,Germany)测定。该图显示ADCC对抗体浓度的剂量依赖性,对每条曲线的最小和最大荧光信号标准化,所述最小和最大荧光信号分别提供自低和高浓度抗体的基线。曲线代表了数据对S形剂量-响应模型的拟合,所述拟合使用了非线性回归。
图30.选择的变体的基于细胞的ADCP测定。ADCP测定如实施例8所述进行,利用与流式细胞分析联合的共标记策略。分化的巨噬细胞用作效应细胞,Sk-Br-3细胞用作靶细胞。百分比吞噬代表共标记的细胞(巨噬细胞+Sk-Br-3)的数目相对于群体(吞噬的+非吞噬的)中Sk-Br-3的总数。
图31a-31c.选择的Fc变体介导补体结合与活化的能力。图31a显示AlphaScreenTM实验测定选择的阿仑单抗Fc变体与C1q的结合。所述结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。图31b和31c显示基于细胞的测定,其测定选择的利妥昔单抗Fc变体介导CDC的能力。CDC测定利用Alamar Blue进行以监测人血清补体(Quidel,San Diego,CA)对Fc变体和WT利妥昔单抗-调理的WIL2-S淋巴瘤细胞的裂解。显示所述利妥昔单抗抗体对补体介导的裂解的抗体浓度的剂量依赖性,对每条曲线的最小和最大荧光信号标准化,所述最小和最大荧光信号分别提供自低和高浓度抗体的基线。曲线代表了数据对S形剂量-响应模型的拟合,所述拟合使用了非线性回归。
图32.AlphaScreenTM实验测定选择的阿仑单抗Fc变体与细菌蛋白质A的结合,如实施例10所述。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图33.AlphaScreenTM实验测定选择的阿仑单抗Fc变体与人FcRn的结合,如实施例10所述。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图34a和34b.AlphaScreenTM实验测定选择的阿仑单抗(图34a)和曲妥单抗(图34b)Fc变体与小鼠FcγRIII的结合,如实施例11所述。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图35.利用PBMC作为效应细胞,在背景曲妥单抗中选择的Fc变体基于细胞的ADCC测定。使用基于DELFIA_EuTDA的细胞毒性测定法测定ADCC,使用Sk-Br-3乳腺癌靶细胞和8倍过量的小鼠PBMCs。该柱图显示了用于指示10ng/ml曲妥单抗抗体的原始荧光数据的条形图。PBMC条显示了在缺乏抗体的条件下细胞毒性的基础水平。TX显示在存在TritonX1000的条件下的完全细胞裂解。
图36.AlphaScreenTM实验测定选择的曲妥单抗Fc变体与人V158FcγRIIIa的结合,所述变体在293T和CHO细胞中表达,如实施例12所述。结合数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。
图37a-37b.Fc变体与经改造的糖型的协同作用。图37a表示AlphaScreenTM实验,显示在293T,CHO,和Lec-13CHO细胞中表达的WT和Fc变体(V209,S239/I332E/A330L)曲妥单抗与V158 FcγRIIIa的结合。所述数据相对于每种具体抗体的上基线和下基线标准化,曲线代表了数据对单位点竞争性模型的拟合。PBS作为阴性对照。图37b显示基于细胞的ADCC测定,显示239T,CHO,和Lec-13CHO表达的WT与V209曲妥单抗介导ADCC的能力。使用基于DELFIA_EuTDA的细胞毒性测定法测定ADCC,使用Sk-Br-3乳腺癌靶细胞。该数据显示ADCC对所述曲妥单抗抗体的抗体浓度的剂量依赖性,对最小和最大荧光信号标准化,所述最小和最大荧光信号分别提供自低和高浓度抗体的基线。曲线代表了数据对S形剂量-响应模型的拟合,所述拟合使用了非线性回归。
图38a-38c.显示了改良的抗-CD20抗体的序列。利要昔单抗的轻链和重链序列分别呈现于图38a和图38b中,获得自US 5,736,137的翻译的序列3。图38b中相关位置用粗体表示,包括S239、V240、V264I、E272、K274、N297、S298、K326、A330和I332。图38c显示了改良的抗-CD20抗体重链序列,具有粗体X1、X2、X3、X4、X5、X6,X7,X8,Z1和Z2所指定的可变区位置。序列下的表格提供了对于那些位置而言可能的取代。改良的抗-CD20抗体序列包含至少一种非野生型氨基酸,可能的取代选自对X1、X2、X3、X4、X5、X6,X7和X8的取代。这些改良的抗-CD20抗体序列也可包含Z1和/或Z2的取代。这些位置依照Kabat的EU标记方式编号,因此并不相应于序列中连续的顺序。
发明详述
为了能更彻底地理解发明,以下列出一些定义。上述定义意在包含语法等同成分。
本文中使用的“
ADCC”或“
抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用”意指细胞介导的反应,其中表达FcγR的非特异性细胞毒性细胞识别靶细胞上的结合抗体并随后引起对靶细胞的溶胞作用。
本文中使用的“
ADCP”或“
抗体依赖性细胞介导的细胞吞噬作用”意指细胞介导的反应,其中表达FcγR的非特异性细胞毒性细胞识别靶细胞上的结合抗体并随后引起对靶细胞的吞噬作用。
本文中的“
氨基酸修饰”意指多肽序列中氨基酸取代、插入和/或缺失。本文中优选的氨基酸修饰是取代。本文中“
氨基酸取代”或“
取代”意思是用其它氨基酸取代亲代多肽序列中的具体位置的氨基酸。例如,取代I332E指变体多肽,在这种情况下指其中位置332的异亮氨酸被谷氨酸取代的Fc变体。
本文中“
抗体”意指由基本上为公认的免疫球蛋白基因的全部或部分所编码的一种或多种多肽组成的蛋白质。所述公认的免疫球蛋白基因,例如在人中,包括kappa(κ)、lambda(λ)和重链基因座,其中包含了无数的可变区基因,以及分别编码IgM、IgD、IgG、IgE和IgA同种型的恒定区基因mu(μ)、delta(6)、gamma(γ)、epsilon(ε)、alpha(α)。本文中的抗体意指包括全长抗体和抗体片段,以及来自任意生物体的天然抗体,工程抗体,或为试验、治疗目的或其它如下所进一步规定的目的而重组产生的抗体。术语“抗体”包括抗体片段,为本领域所公知,诸如Fab、Fab′、F(ab′)2、Fv,scFv或抗体的抗原结合的其它亚序列,或通过修饰完整抗体或使用重组DNA技术重新合成的那些抗体而产生的抗体片段。具体优选的是全长抗体,其包括如本文所述的Fc变体。术语“抗体”包括单克隆以及多克隆抗体。抗体可以是拮抗剂、激动剂、中和性抗体、或抑制性抗体、或刺激性抗体。
本发明的抗体可以是非人抗体,嵌合抗体,人源化抗体或完全人抗体。对嵌合以及人源化抗体的概念的描述见Clark et a1.,2000以及本文中的对比文件(Clark,2000,Immunol Today 21:397-402)。嵌合抗体包括非人抗体的可变区,例如小鼠或大鼠来源的VH和VL结构域,其与人抗体恒定区可操作连接(见例如美国专利4,816,567)。优选实施方案中,本发明的抗体是人源化的。本文的“
人源化“抗体指包含人框架区(FR)以及一或多个来自非人(通常为小鼠或大鼠)抗体的互补决定区(CDR)。提供CDR的非人抗体称为“供体”,提供框架的人免疫球蛋白称为“受体”。人源化主要依赖于供体CDR向受体(人)VL和VH框架上的移植(Winter US 5225539)。该策略称为“CDR移植”。选择的受体框架残基向相应供体残基的“回复突变(Backmutation)”通常是恢复在初始移植的构建体中丧失的亲和力所需的(US 5530101;US5585089;US 5693761;US 5693762;US 6180370;US 5859205;US 5821337;US 6054297;US 6407213)。人源化抗体可选也将包含至少部分免疫球蛋白恒定区,通常是人免疫球蛋白恒定区,因此通常包含人Fc区。非人抗体人源化的方法是本领域已知的,基本上根据Winter及其同事(Jones et al.,1986,Nature 321:522-525;Riechmann et al.,1988,Nature 332:323-329;Verhoeyen etal.,1988,Science,239:1534-1536)的方法进行。人源化鼠单克隆抗体的其它实例也是本领域已知的,例如与人蛋白质C(O’Connor et al.,1998,ProteinEng 11:321-8),白介素2受体(Queen et al.,1989,Proc Natl Acad Sci,USA86:10029-33),人表皮生长因子受体2(Carter et al.,1992,Proc Natl Acad SciUSA 89:4285-9)结合的抗体。其它实施方案中,本发明的抗体可完全是人的,即所述抗体的序列完全或基本上是人的。本发明已知多种方法来产生完全人抗体,包括利用转基因小鼠(Bruggemann et al.,1997,Curr Opin Biotechnol8:455-458)或人抗体文库以及选择方法(Griffiths et al.,1998,Curr OpinBiotechnol 9:102-108)。
具体地包括于“抗体”定义范围内的是非糖基化抗体。本文使用的“
非糖 基化抗体”意指在Fc区297位缺少糖附着的抗体,其中编号方式依照Kabat的EU系统。非糖基化的抗体可以是去糖基化的抗体,其是一种Fc糖已去除的抗体,例如以化学或酶的方法去除。可选地,所述非糖基化抗体可以是非糖基化或未糖基化的抗体,其是一种无Fc糖表达的抗体,例如通过突变一种或多种编码糖基化型的残基或通过在不将糖附着到蛋白质上的生物体诸如细菌中表达。
具体地包括于“抗体”定义范围内的是含有Fc变体部分的全长抗体。本文中“
全长抗体”意指构成抗体的天然生物学类型的结构,包括可变区和恒定区。举例来说,在包括人和小鼠的大多数哺乳动物中,IgG类的全长抗体是一种四聚体并由相同的两对两条免疫球蛋白链组成,每对具有一条轻链和一条重链,每条轻链包含免疫球蛋白结构域VL和CL,每条重链包含免疫球蛋白结构域VH、Cγ1、Cγ2和Cγ3。在一些哺乳动物中,例如在骆驼(camel)和美洲驼(llamas)中,IgG抗体可仅由两条重链组成,每条重链包含一个附着在Fc区上的可变区。本文中使用的“
IgG”意指属于抗体类的多肽,其基本上为公认的免疫球蛋白γ基因所编码。在人中,该类包含IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。在小鼠中,该类包含IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3。
本文中使用的“
氨基酸”和“
氨基酸同一性”意指20种天然存在的氨基酸之一或任一非天然类似物,它们可位于具体规定的位置。本文中“蛋白质”意指至少两个共价连接的氨基酸,其包括蛋白质、多肽、寡肽和肽。蛋白质可由天然存在的氨基酸和肽键构成,或由合成的肽模拟物结构构成,该肽模拟物即“类似物”,特别是当将LC肽施用于患者时,如类肽(peptoid)(参见,Simon等.,1992,PNAS USA 89(20):9367)。因此本文中使用的“氨基酸”或“肽残基”意指天然存在和合成的氨基酸。举例来说,对于本发明目的而言,高苯基丙氨酸、瓜氨酸和降亮氨酸被认为是用于本发明目的的氨基酸。“氨基酸”也包括诸如脯氨酸和羟脯氨酸的亚氨基酸残基。侧链可以是(R)或(S)构型。在优选的实施方案中,氨基酸以(S)或L-构型存在。如果使用非天然存在的侧链,可使用非氨基酸取代,例如以阻止或延迟体内降解。
本文中“
计算筛选方法(computational screening method)”意指用于设计蛋白质中一种或多种突变的任何方法,其中所述方法使用了计算机来评估可能的氨基酸侧链取代相互之间和/或与蛋白质的其它部分相互作用的能量。本领域技术人员可以理解,能量评估涉及能量计算,能量计算涉及一些对一种或多种氨基酸修饰的打分方法。所述方法可涉及物理或化学能项(energy term),或可涉及基于已有知识-、统计学-、序列的能项等。所述计算由在本文中称为“
计算筛选计算(computational screening calculations)”的计算筛选方法组成。
本文中使用的“
效应器功能”意指由抗体Fc区与Fc受体或配体相互作用产生的生化反应。效应器功能包括但不限于ADCC、ADCP和CDC。本文中使用的“
效应细胞”意指表达一种或多种Fc受体并介导一种或多种效应器功能的免疫系统细胞。效应细胞包括但不限于单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞、树突细胞、嗜酸性细胞、肥大细胞、血小板、B细胞、大颗粒淋巴细胞、朗罕氏细胞,自然杀伤(NK)细胞以及γγT细胞,以及可来自任何生物体包括但不限于人、小鼠、大鼠、兔子和猴子。本文中“文库”意指任意形式的一组Fc变体,包括但不限于一列核酸或氨基酸序列,一列在可变位置的核酸或氨基酸取代,包含编码库序列的核酸的物理文库,或包含Fc变体蛋白质的物理文库,所述Fc变体蛋白质以纯化或未纯化的形式存在。
本文中使用的“
Fc”、“
Fc区”、“
Fc多肽”等意指于本文定义的抗体,其包括包含除免疫球蛋白结构域第一恒定区外的抗体恒定区的多肽。因此,Fc指IgA、IgD和IgG免疫球蛋白结构域的最后两个恒定区,IgE和IgM免疫球蛋白结构域的最后三个恒定区,和这些结构域的N-末端连接的柔性铰链。对于IgA和IgM而言,Fc可包括J链。对于IgG来说,如图1所示,Fc包含免疫球蛋白结构域Cγ2和Cγ3以及Cγ1和Cγ2之间的铰链。尽管Fc区的边界可改变,人IgG重链Fc区通常规定为在其羧基末端包含残基C226或P230,其中编号方式依照Kabat的EU标引方式。Fc可指分离的该区域,或在上下文的抗体、抗体片段或Fc融合体中的该区域。Fc可以是抗体、Fc融合体,或包含Fc的蛋白质或蛋白质结构域。具体优选的是Fc变体,其是非天然存在的Fc变体。
本文中使用的“
Fc融合体”意指其中一个或更多个多肽可操作地连接Fc区或其衍生物的蛋白质。在本文中Fc融合体与现有技术中所使用的术语“免疫粘合素”、“Ig融合体”、“Ig嵌合体”以及“受体球蛋白”(有时加破折号)(Chamow等.,1996,Trends Biotechnol 14:52-60;Ashkenazi等.,1997,CurrOpin Immunol 9:195-200)的含义是相同的。Fc融合体将免疫球蛋白Fc区与
融合伴侣(fusion partner)结合,一般而言,所述融合伴侣可以是任何蛋白质或小分子。Fc融合体的非Fc-部分即融合伴侣的作用是介导靶结合,因此其功能类似于抗体的可变区。实际上任何蛋白质或小分子均可连接于Fc以生成Fc融合体。蛋白质融合伴侣可包括,但不限于,受体的靶结合区,粘附分子,配体,酶,细胞因子,化学因子(chemokine),或一些其它蛋白质或蛋白质结构域。小分子融合伴侣可包括任何将Fc融合体导向治疗靶的治疗剂。所述靶可为任何分子,优选细胞外受体,其与疾病有关。两种作为多种认可的小分子药物的靶的表面受体家族是G-蛋白偶联的受体(GPCRs),和离子通道,包括K+,Na+,Ca+通道。目前在世界上销售的所有药物的几乎70%靶向GPCR。因此,本发明的Fc变体可融合于小分子,所述小分子靶向例如GABA受体,嘌呤(purinergic)受体,肾上腺素受体,组胺受体,鸦片受体,化学因子受体,谷氨酸盐(酯)受体,烟碱受体,5HT(5羟色胺)受体,以及雌激素受体中的一或多种。融合伴侣可为靶向治疗用靶的蛋白质的小分子模拟物。可作为Fc融合伴侣的具体药物的实例见于L.S.Goodmanet al.,Eds.,Goodman and Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics(McGraw-Hill,New York,ed.9,1996)。融合伴侣不仅包括与现有药物的已知靶结合的小分子和蛋白质,也包括目前不作为药物靶存在的孤儿受体。基因组和蛋白质组工程的完成是药物发现的驱动力,并且这些工程产生出有价值的孤儿受体。很有可能证实这些新分子作为药物靶,并开发靶向它们的蛋白质和小分子治疗剂。所述蛋白质和小分子治疗剂为Fc融合伴侣,其利用本发明的Fc变体。多种如下定义并描述的接头,可用于将Fc共价连接于融合伴侣来产生Fc融合体。
本文中使用的“
Fcγ受体”或“
FcγR”意指结合IgG抗体Fc区并且基本上为FcγR基因所编码的蛋白质家族的任何成员。在人类中,该家族包括但不限于FcγRI(CD64),包含同种型FcγRIa、FcγRIb和FcγRIc;FcγRII(CD32),包含同种型FcγRIIa(包括同种异型H131和R131)、FcγRIIb(包括FcγRIIb-1和FcγRIIb-2)和FcγRIIc;以及FcγRIII(CD16),包含同种型FcγRIIIa(包括同种异型V158和F158)和FcγRIIIb(包括同种异型FcγRIIIb-NA1和FcγRIIIb-NA2)(Jefferis等.,2002,Immunol Lett 82:57-65),也包括任何未被发现的人FcγR或FcγR同种型或同种异型。FcγR可来自任何生物体,包括但不限于人、小鼠、大鼠、兔子和猴子。小鼠FcγR包括但不限于FcγRI(CD64)、FcγRII(CD32)、FcγRIII(CD16)以及FcγRIII-2(CD16-2),也包括任何未被发现的小鼠FcγR或FcγR同种型或同种异型。
本文中使用的“
Fc配体”意指来自任何生物体的一种分子,优选一种多肽,其与抗体的Fc区结合以形成Fc-配体复合物。Fc配体包括但不限于FcγR、FcγR、FcγR、FcRn、C1q、C3、甘露聚糖结合凝集素、甘露糖受体、葡萄球菌蛋白A、葡萄球菌蛋白G以及病毒FcγR。Fc配体也包括Fc受体同源物(FcRH)。其为与FcγR同源的FC受体的家族(Davis et al,2002,Immunological Reviews 190:123-136)。Fc配体可包括未被发现的能结合Fc的分子。
本文中使用的“
IgG”意指一种属于抗体类的多肽,其基本上为公认的免疫球蛋白γ基因所编码。在人类中,该类包含IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。在小鼠中,该类包含IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3。本文中“
免疫球蛋白(Ig)”意指由基本上为免疫球蛋白基因所编码的一个或多个多肽组成的蛋白质。免疫球蛋白包括但不限于抗体。免疫球蛋白可具有许多结构型,包括但不限于全长抗体、抗体片段和单个免疫球蛋白结构域。本文中“
免疫球蛋白(Ig) 结构域”意指为蛋白质结构领域技术人员所确定的作为分离的结构实体而存在的免疫球蛋白的区域。Ig结构域通常具有特征性的β-多层(sandwich)折叠拓扑结构。抗体IgG类中已知的Ig结构域VH、Cγ1、Cγ2、Cγ3、VL以及CL。
本文中使用的“
亲本多肽”或“
前体多肽”(包括Fc亲本或前体)意指一种随后被修饰以产生变体的多肽。所述亲本多肽可以是天然存在多肽,或天然存在多肽的变体或经改造的形式。亲本多肽可指该多肽自身、包含该亲本多肽的组合物或编码其的氨基酸序列。因此,本文中使用的“
亲本Fc多肽”意指未修饰的Fc多肽,其可修饰以产生变体,在本文中使用的“
亲本抗体”意指未修饰的抗体,其可修饰以产生抗体变体。
如上所概述,Fc分子的某些位置可得到改变。本文中使用的“
位置”意指在蛋白质序列中的位置。位置可按顺序编号,或依据已确定的方式编号,例如Kabat的EU标引方式。举例来说,位置297是人抗体IgG1中的一个位置。如上所述,一般通过与其它亲本序列比对确定相应的位置。
本文中使用的“
残基”意指在蛋白质中的位置以及与之相关的氨基酸同一性。例如,天冬氨酸297(也称为Asn297,N297)是在人抗体IgG1中的一种残基。
本文中使用的“
靶抗原”意指与给定抗体可变区特异性结合的分子。靶抗原可以是蛋白质、糖类、脂质或其它化合物。
本文中使用的“
靶细胞”意指表达靶抗原的细胞。
本文中使用的“
可变区”意指包含一个或多个基本上为任一Vκ、Vλ和/或VH基因所编码的Ig结构域的免疫球蛋白区域,所述的Vκ、Vλ和/或VH基因分别构成了免疫球蛋白κ、λ和重链的基因座。
本文中使用的“
变体多肽”意指由于至少一个氨基酸修饰而不同于亲本多肽序列的多肽序列。变体多肽可指多肽自身、包含该多肽的组合物或编码其的氨基序列。优选地,与亲本多肽相比该变体多肽具有至少一个氨基酸修饰,如与亲本多肽相比约1到约10个氨基酸修饰,以及优选约1到约5个氨基酸修饰。本文中该变体多肽序列与亲本多肽序列优选具有至少约80%的同源性,最优选至少约90%的同源性,更优选至少约95%的同源性。因此,本文中使用的“
Fc变体”意指由于至少一个氨基酸修饰而不同于亲本Fc序列的Fc序列。Fc变体可以仅包含Fc区,或可存在于上下文的抗体、Fc融合体或其它基本上由Fc编码的多肽中。Fc变体可指Fc多肽自身、包含该Fc变体多肽的组合物或编码其的氨基酸序列。优选实施方案中,本发明所述包括Fc变体等的变体蛋白质等可包括具有所述Fc变体的抗体(以及相应的衍生物),或包含所述Fc变体的Fc融合蛋白质。此外,一些情况中,所述Fc与野生型Fc相比或与“亲本”变体相比是变体。
对于本发明中讨论的所有位置而言,免疫球蛋白重链的编号方式依照EU标引方式(Kabat等.,1991,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版.,United States Public Health Svice,National Institutes of Health,Bethesda)。“Kabat的EU标引方式”指人IgG1 EU抗体的残基编号方式。
本发明的Fc变体可对不同的特性进行优化。可优化的特性包括但不限于对FcγR增强或减少的亲和力。在一个优选的实施方案中,优化本发明的Fc变体对人激活的FcγR、优选FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIc、FcγRIIIa和FcγRIIIb,最优选FcγRIIIa具有增强的亲和力。在一个可选地优选的实施方案中,优化Fc变体对人抑制性受体FcγRIIb具有减少的亲和力。这些优选的实施方案预期能提供在人中具有增强治疗特性的抗体和Fc融合体,例如增强的效应器功能以及更强的抗癌效力。在一个可选的实施方案中,优化本发明的Fc变体以对人FcγR,包括但不限于FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIb、FcγRIIc、FcγRIIIa和FcγRIIIb具有减少或消除的亲和力。这些实施方案预期能提供在人中具有增强治疗特性的抗体和Fc融合体,例如减少的效应器功能以及减少的毒性。优选的实施方案包含优化结合人FcγR的Fc,另一方面,在可选的实施方案中本发明的Fc变体对于来自非人生物体的FcγR具有增强或减少的亲和力,非人生物体包括但不限于小鼠、大鼠、兔子和猴子。对与非人FcγR的结合进行优化的Fc变体可用于试验目的。举例来说,对于不同疾病而言,所获得的小鼠模型能够测试诸如有效性、毒性和药物代谢动力学的特定候选药物特性。在本领域中公知一种称为异种移植术的方法可将癌细胞移植或注射如小鼠中以模拟人癌症。对包含对一种或多种小鼠FcγR优化的Fc变体的抗体或Fc融合体进行测试可提供与该抗体或Fc融合体有效性、其作用机理等相关的有价值的信息。本发明的Fc变体也可优化以增强非糖基化型的功能性和/或溶解性。在一个优选的实施方案中,本发明的非糖基化Fc变体较亲本Fc多肽的非糖基化型对Fc配体的结合具有更大的亲和力。所述Fc配体包括但不限于FcγR、C1q、FcRn以及蛋白A和G,且可来自任何来源包括但不限于人、小鼠、大鼠、兔子或猴子,优选人。在一个可选地优选的实施方案中,该优化的Fc变体较亲本Fc多肽的非糖基化型可更稳定和/或更易溶解。得到改造或预测显示任一上述优化特性的Fc变体在本文中称为“
优化的Fc变体”。
本发明的Fc变体可来自不同来源的亲本Fc多肽。该亲本Fc多肽可基本上为一种或多种Fc基因所编码,所述Fc基因来自任意生物体,包括但不限于人、小鼠、大鼠、兔子、骆驼、美洲驼、单峰骆驼、猴子,优选哺乳动物,最优选人和小鼠。在一个优选的实施方案中,该亲本Fc多肽包含抗体,称为亲本抗体。所述亲本抗体可以是完全人抗体,例如获得自使用转基因小鼠(Bruggemann等.,1997,Curr Opin Biotechnol 8:455-458)或人抗体文库外加选择方法所产生的抗体(Griffiths等.,1998,Curr Opin Biotechnol9:102-108)。所述亲本抗体勿需天然存在。举例来说,该亲本抗体可以是工程抗体,包括但不限于嵌合抗体和人源化抗体(Clark,2000,Immunol Today 21:397-402)。所述亲本抗体可以是基本上为一种或多种天然抗体基因所编码的抗体的工程变体。在一个实施方案中,该亲本抗体已经亲和力成熟,所述技术为本领域所公知。可选地,该抗体可以用某些其它方法进行修饰,例如于2003年3月3日提交的USSN 10/339788中所描述的方法。
本发明的Fc变体可基本上为属于任一抗体类型的免疫球蛋白基因所编码。在一个优选的实施方案中,在抗体或Fc融合体中使用的本发明的Fc变体包含属于抗体IgG类型的序列,该IgG类型包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。在一个可选的实施方案中,在抗体或Fc融合体中使用的本发明的Fc变体包含属于抗体IgA(包括亚类IgA1和IgA2)、IgD、IgE、IgG或IgM类型的序列。本发明的Fc变体可包含超过一条的蛋白链。换句话说,在抗体或Fc融合体中使用的本发明的Fc变体是单体或寡聚体,包括同-或异-寡聚体。
一个优选实施方案中,本发明的抗体基于人序列,因此人序列用作“基础”序列,其它序列诸如大鼠、小鼠和猴序列与其相比较。为了确定与一级序列或结构的同源性,前体或亲代Fc多肽的氨基酸序列直接与本文所述的人Fc序列相比较。比对所述序列之后,利用本领域已知的一或多种同源性比对程序(例如利用在物种间保守的残基),允许必要的插入和缺失以保持对齐(即避免通过随机缺失和插入导致的保守残基的消除),定义等同于人Fc的一级序列中的具体氨基酸的残基。保守的残基的比对优选100%保留所述残基。然而,保守的残基大于75%或低至50%的比对对于定义等同的残基(有时也称为“对应残基”)而言是足够的。等同残基也可以通过测定其三级结构已经被测定的Fc多肽的三级结构水平的同源性来定义。等同残基定义为这样的残基,其中所述亲本或前体的具体氨基酸残基的两个或更多的主链原子的原子坐标(N对(on)N,CA对CA,C对C,O对O)在比对之后为0.13nm之内,优选为0.1nm。比对在将最佳模型定向并定位以后进行,以实现Fc多肽的非氢蛋白质原子的原子坐标的最大重叠。
本发明的Fc变体可以与其它Fc修饰结合,所述Fc修饰包括但不限于改变效应器功能或与一或多种Fc配体的相互作用的修饰。在抗体或Fc融合体中上述结合可提供附加的、协同的或新的特性。在一个实施方案中,本发明的Fc变体可以与其它已知的Fc变体结合(Duncan等,1988,Nature 332:563-564;Lund等,1991,J Immunol 147:2657-2662;Lund等.,1992,MolImmunol 29:53-59;Alegre等.,1994,Transplantation 57:1537-1543;Hutchins等.,1995,Proc Natl Acad Sci USA 92:11980-11984;Jefferis等.,1995,Immunol Lett 44:111-117;Lund等.,1995,Faseb J 9:115-119;Jefferis等.,1996,Immunol Lett 54:101-104;Lund等.,1996,J Immunol 157:4963-4969;Armour等.,1999,Eur J Immunol 29:2613-2624;Idusogie等.,2000,JImmunol 164:4178-4184;Reddy等.,J Immunol 2000,164:1925-1933;Xu等.,2000,Cell Immunol 200:16-26;Idusogie等.,2001,J Immunol 166:2571-2575;Shields等,2001,J Biol Chem 276:6591-6604;Jefferis等.,2002,Immunol Lett 82:57-65;Presta等.,2002,Biochem Soc Trans 30:487-490,Hinton等,2004,J.Biol Chem 279:6213-6216)(US 5,624,821;US 5,885,573;US6,194,551;PCT WO 00/42072;PCT WO 99/58572,US 2004/00 02587)。在一个可选的实施方案中,本发明的Fc变体掺入到包含一种或多种经改造的糖型的抗体或Fc融合体中。本文中使用的“
经改造的糖型(engineered glycoform)”意指与Fc多肽共价连接的糖组合物,其中所述糖组合物在化学特性上与亲本Fc多肽不同。经改造的糖型可用于不同用途,包括但不限于增强或减少效应器功能。可通过本领域所公知的多种方法产生经改造的糖型(Uma
a等.,1999,Nat Biotechnol 17:176-180;Davies等,2001,Biotechnol Bioeng 74:288-294;Shields等.,2002,J Biol Chem 277:26733-26740;Shinkawa等.,2003,J Biol Chem 278:3466-3473)US 6,602,684;USSN 10/277,370;USSN10/113,929;PCT WO 00/61739A1;PCT WO 01/29246A1;PCT WO02/31140A1;PCT WO 02/30954A1);(PotelligentTM技术(Biowa,INC.,Princeton,N.J.);GlycoMAbTM糖基化改造技术(GLYCART biotechnology AG,Zurich,Switzerland))。这些技术中许多是基于控制岩藻糖化的和/或二分寡糖水平,所述寡糖与Fc区共价相连,例如通过在多种生物体或细胞系中表达Fc多肽,所述生物体或细胞系可经改造等(例如Lec-13 CHO细胞或大鼠杂交瘤YB2/O细胞),或通过调节参与糖基化途径的酶(例如FUT8[α-1,6-岩藻糖基转移酶]和/或β1-4-N-乙酰葡糖胺基转移酶III[GnTIII]),或通过在所述Fc多肽表达后修饰糖。经改造的糖型通常指不同的糖或寡糖;因此Fc多肽,例如抗体或Fc融合体,可包括经改造的糖型。可选,经改造的糖型指包含不同糖或寡糖的Fc多肽。因而,本发明的Fc变体与其它Fc修饰的组合,以及与未被发现的Fc修饰的组合预期可达到产生新的具有优化特性的抗体或Fc鬲虫合体的目的。
本发明的Fc变体可供抗体使用。本文中使用的“
本发明的抗体”意指包含本发明Fc变体的抗体。实际上,本发明可供包含Fc的任何蛋白质使用,因此本发明的Fc变体的应用不限于抗体。本发明Fc变体可供Fc融合体使用。本文中使用的“
本发明的Fc融合体”指的是包含本发明Fc变体的Fc融合体。Fc融合体可包含可操作地与细胞因子、可溶性受体结构域、粘附分子、配体、酶、肽或其它蛋白质或蛋白质结构域连接的本发明Fc变体,对Fc融合体的描述包括但不限于US 5,843,725;US 6,018,026;US 6,291,212;US 6,291,646;US 6,300,099;US 6,323,323;PCT WO 00/24782;以及(Chamow等.,1996,Trends Biotechnol 14:52-60;Ashkenazi等.,1997,CurrOpin Immunol 9:195-200)。
事实上本发明的抗体和融合体可靶向于任何抗原,包括但不限于如下所列的蛋白质、属于下列蛋白质的亚基、结构域、基序和表位:CD2;CD3,CD3E,CD4,CD11,CD11a,CD14,CD16,CD18,CD19,CD20,CD22,CD23,CD25,CD28,CD29,CD30,CD32,CD33(p67蛋白),CD38,CD40,CD40L,CD52,CD54,CD56,CD80,CD147,GD3,IL-1,IL-1R,IL-2,IL-2R,IL-4,IL-5,IL-6,IL-6R,IL-8,IL-12,IL-15,IL-18,IL-23,α-干扰素、β-干扰素、γ-干扰素;TNF-α,TNFβ2,TNFc,TNFαβ,TNF-RI,TNF-RII,FasL,CD27L,CD30L,4-1BBL,TRAIL,RANKL,TWEAK,APRIL,BAFF,LIGHT,VEGI,OX40L,TRAIL受体-1,A1腺苷受体,淋巴毒素β受体,TACI,BAFF-R,EPO;LFA-3,ICAM-1,ICAM-3,EpCAM,β1-整联蛋白、β2-整联蛋白、α4/β7-整联蛋白、α2-整联蛋白、α3-整联蛋白、α4-整联蛋白、α5-整联蛋白、α6-整联蛋白、αv-整联蛋白、αVβ3-整联蛋白、FGFR-3,角质化细胞生长因子、VLA-1,VLA-4,L-选择蛋白,抗独特型抗体(anti-id),E-选择蛋白,HLA,HLA-DR,CTLA-4,T细胞受体,B7-1,B7-2,VNR整联蛋白(VNR integrin),TGF-β1,TGF-β2,嗜酸细胞活化趋化因子1,BLyS(B-淋巴细胞刺激物),补体C5,IgE,因子VII,CD64,CBL,NCA 90,EGFR(ErbB-1),Her2/neu(ErbB-2),Her3(ErbB-3),Her4(ErbB-4),组织因子,VEGF,VEGFR,内皮素受体,VLA-4,半抗原NP-加帽或NIP-加帽蛋白,T细胞受体α/β,E-选择蛋白,地高辛,胎盘碱性磷酸酶(PLAP)和睾丸类PLAP-样碱性磷酸酶,铁传递蛋白受体,癌胚抗原(CEA),CEACAM5,HMFG PEM,粘蛋白MUC1,MUC18,类肝素酶(heparanase)I,人心脏肌球蛋白,肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72),肿瘤相关抗原CA125,前列腺特异性膜抗原(PSMA),高分子量黑色素瘤相关抗原(HMW-MAA),癌相关抗原,Gcoprotein IIb/IIIa(GPIIb/IIIa),表达Lewis Y相关糖的肿瘤相关抗原(tumor-associated antigen expressing Lewis Y relatedcarbohydrate),人巨细胞病毒(HCMV)gH包膜糖蛋白,HIV gp120,HCMV,呼吸合胞病毒RSV F,RSVF Fgp,VNR整联蛋白,IL-8,细胞角蛋白肿瘤相关抗原,Hep B gp120,CMV,gpIIbIIIa,HIV IIIB gp120 V3环,呼吸合胞病毒(RSV)Fgp,单纯疱疹病毒(HSV)gD糖蛋白,HSV gB糖蛋白,HCMV gB包膜糖蛋白和产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)毒素。
本领域技术人员应当理解上述列出的靶不仅指特定的蛋白质及生物分子,而且还指包含它们的生化途径或各种途径。例如,当提及的CTLA-4作为靶抗原时,意味着配体和受体组成了T细胞共刺激途径,包括CTLA-4、B7-1、B7-2、CD28,并且任何其它未被发现的配体或受体也是靶对象。因此本文中使用的靶不仅指特定的生物分子,也指与所述靶以及所述靶所属的生化途径的成员相互作用的一组蛋白。本领域技术人员应当进一步理解任一上述的靶抗原、连接它们的配体或受体,或它们相应的生化途径的其它成员能可操作地与本发明的Fc变体连接以便产生Fc融合体。因此,举例来说,靶向EGFR的Fc融合体能通过可操作地将Fc变体与EGF、TGFα或任何其它已发现或未被发现的能结合EGFR的配体连接而得到构建。因此,本发明的Fc变体能可操作地与EGFR连接以便产生能结合EGF、TGFα或任何其它已发现或未被发现的可结合EGFR的配体的Fc融合体。因而,事实上任何多肽,无论是配体、受体或一些其它蛋白质或蛋白质结构域,包括但不限于上述靶和组成它们相应的生化途径的蛋白质,能可操作地与本发明的Fc变体连接以便开发Fc融合体。
在临床试验或在开发研制中批准使用的许多抗体和Fc融合体都可受益于本发明的Fc变体。所述抗体和Fc融合体在本文中称为“
临床产物和候选 物”。因此在一个优选的实施方案中,本发明的Fc变体可供一系列临床产物和候选物使用。例如,靶向CD20的许多抗体可受益于本发明Fc变体。例如本发明的Fc变体可供抗体使用,所述抗体基本上类似于利妥昔单抗(Rituxan_IDEC/Genentech/Roche)(参见,例如US 5,736,137),一种批准用于治疗非霍奇金淋巴瘤的嵌合抗CD20抗体;HuMax-CD20,一种目前正由Genmab开发的抗CD20抗体,一种描述于US 5,500,362的抗CD20抗体,AME-133(Applied Molecular Evolution),hA20(Immunomedics,Inc.),以及HumaLYM(Intracel)。许多抗体,其靶向表皮生长因子受体家族成员,包括EGFR(ErbB-1)、Her2/neu(ErbB-2)、Her3(ErbB-3)、Her4(ErbB-4),可受益于本发明的Fc变体。例如本发明的Fc变体可供抗体使用,所述抗体基本上类似于曲妥单抗(Herceptin_,Genentech)(参见,例如US 5,677,171),一种批准用于治疗乳腺癌的人源化抗Her2/neu抗体;目前正由Genentech开发的pertuzumab(rhuMab-2C4,OmnitargTM);一种描述于US 4,753,894的抗Her2抗体;西妥昔单抗(Erbitux_,Imclone)(US 4,943,533;PCT WO 96/40210),一种在临床试验中用于治疗多种癌症的嵌合抗EGFR抗体;目前正由Abgenix/Immunex/Amgen开发的ABX-EGF(US 6,235,883);目前正由Genmab开发的HuMax-EGFr(USSN 10/172,317);425、EMD55900、EMD62000和EMD72000(Merck KgaA)(US 5558864;Murthy等.1987,Arch BiochemBiophys.252(2):549-60;Rodeck等.,1987,J Cell Biochem.35(4):315-20;Kettleborough等.,1991,Protein Eng.4(7):773-83);ICR62(institute of CancerResearch)(PCT WO 95/20045;Modjtahedi等.,1993,J.Cell Biophys.1993,22(1-3):129-46;Modjtahedi等.,1993,Br J Cancer.1993,67(2):247-53;Modjtahedi等,1996,Br J Cancer,73(2):228-35;Modjtahedi等,2003,Iht JCancer,105(2):273-80);TheraCIM hR3(YM Biosciences,Canada and Centrode Immunologia Molecular,Cuba)(US 5,891,996;US 6,506,883;Mateo等,1997,Immunotechnology,3(1):71-81);mAb-806(Ludwig Institue for CancerResearch,Memorial Sloan-Kettering)(Jungbluth等.2003,Proc Natl Acad Sci USA.100(2):639-44);KSB-102(KS Biomedix);MRl-1(IVAX,National CancerInstitute)(PCT WO 0162931A2);以及SC100(Scancell)(PCT WO 01/88138)。在另一个优选的实施方案中,本发明的Fc变体可供阿仑单抗(Campath_,Millenium)使用,阿仑单抗是一种目前已批准用于治疗B细胞慢性淋巴细胞性白血病的人源化单克隆抗体。本发明的Fc变体可供多种抗体或Fc融合体使用,所述抗体或Fc融合体基本上类似于其它临床产物和候选物,包括但不限于莫罗单抗(muromonab)-CD3(Orthoclone OKT3_),由OrthoBiotech/Johnson & Johnson开发的抗CD3抗体,替伊莫单抗(ibritumomabtiaxetan)(Zevalin_),由IDEC/Schering AG开发的抗CD20抗体,吉姆单抗奥佐米星(gemtuzumab ozogamicin)(Mylotarg_)由Celltech/Wyeth开发的抗CD33(p67蛋白)抗体,alefacept(Amevive_),由Biogen开发的抗LFA-3 Fc融合体,由Centocor/Lilly开发的阿昔单抗(abciximab)(ReoPro_),由Novartis开发的巴利昔单抗(basiliximab)(Simulect_),由Medlmmune开发的帕利珠单抗(palivizumab)(Synagis_),英夫利昔单抗(infliximab)(Remicade_),由Centocor开发的抗TNFα抗体,阿达木单抗(adalimumab)(Humira_),由Abbott开发的抗TNFα抗体,HumicadeTM,由Celltech开发的抗TNFα抗体,依那西普(etanercept)(Enbrel_),由Immunex/Amgen开发的抗TNFαFc融合体,ABX-CBL,正由Abgenix开发的抗CD147抗体,ABX-IL8,正由Abgenix开发的抗IL8抗体,ABX-MA1,正由Abgenix开发的抗MUC18抗体,Pemtumomab(R1549,90Y-muHMFG1),正由Antisoma开发的抗MUC1抗体,Therex(R1550),正由Antisoma开发的抗MUC1抗体,正由Antisoma开发的AngioMab(AS1405),正由Antisoma开发的HuBC-1,正由Antisoma开发的Thioplatin(AS1407),Antegren_(那他珠单抗),正由Biogen开发的抗α-4-β-1(VLA-4)和α-4-β-7抗体,VLA-1单抗,正由Biogen开发中的抗VLA-1整联蛋白抗体,LTBR单抗,正由Biogen开发的抗淋巴毒素β受体(LTBR)抗体,CAT-152,正由Cambridge Antibody Technology开发的抗TGFβ2抗体,J695,正由Cambridge Antibody Technology和Abbott开发的抗IL-2抗体,CAT-192,正由Cambridge Antibody Technology和Genzyme开发的抗TGFβ1抗体,CAT-213,正由Cambridge Antibody Technology开发的抗嗜酸细胞活化趋化因子1抗体,LymphoStat-BTM,正由Cambridge Antibody Technology和Human Genome Sciences INC开发的抗Blys抗体,TRAIL-R1mAb,正由Cambridge Antibody Technology和Human Genome Sciences,INC开发的抗TRAIL-R1抗体,AvastinTM(贝伐单抗,rhuMAb-VEGF),正由Genentech开发的抗VEGF抗体,正由Genentech开发的抗HER受体家族抗体,抗组织因子(ATF),正由Genentech开发的抗组织因子抗体,XolairTM(Omalizumab),正由Genentech开发的抗IgE抗体,RaptivaTM(Efalizumab),正由Genentech和Xoma开发的抗CD11a抗体,正由Genentech和Millenium Pharmaceuticals开发的MLN-02抗体(以前称为LDP-02),HuMax CD4,正由Genmab开发的抗CD4抗体,HuMax-IL15,正由Genmab和Amgen开发的抗IL15抗体,正由Genmab和Medarex开发的HuMax-布洛芬(Inflam),HuMax-Cancer,正由Genmab和Medarex以及Oxford GcoSciences开发的抗类肝素酶I抗体,正由Genmab和Amgen开发的HuMax-Lymphoma,正由Genmab开发的HuMax-TAC,IDEC-131,正由IDEC Pharmaceuticals开发的抗CD40L抗体,IDEC-151(克立昔单抗),正由IDEC Pharmaceuticals开发的抗CD4抗体,IDEC-114,正由IDEC Pharmaceuticals开发的抗CD80抗体,IDEC-152,正由IDEC Pharmaceuticals开发的抗CD23抗体,正由IDEC Pharmaceuticals开发的抗巨噬细胞移动因子(MIF)抗体,BEC2,正由Imclone开发的抗独特型抗体,IMC-1C11,正由Imclone开发的抗KDR抗体,DC101,正由Imclone开发的抗flk-1抗体,正由Imclone开发的抗VE钙粘蛋白抗体,CEA-CideTM(labetuzumab),正由Immunomedics开发的抗癌胚抗原(CEA)抗体,LymphoCideTM(依帕珠单抗),正由Immunomedics开发的抗CD22抗体,正由Immunomedics开发的AFP-Cide,正由Immunomedics开发的MyelomaCide,正由Immunomedics开发的LkoCide,正由Immunomedics开发的ProstaCide,MDX-010,正由Medarex开发的抗CTLA4抗体,MDX-060,正由Medarex开发的抗CD30抗体,正由Medarex开发的MDX-070,正由Medarex开发的MDX-018,OsidemTM(IDM-1),正由Medarex和Immuno-Designed Molecules开发的抗Her2抗体,HuMaXTM-CD4,正由Medarex和Genmab开发的抗CD4抗体,HuMax-IL15,正由Medarex和Genmab开发的抗IL-15抗体,CNTO 148,正由Medarex和Centocor/J&J开发的抗TNFα抗体,CNTO 1275,正由Centocor/J&J开发的抗细胞因子抗体,MOR101和MOR102,正由MorphoSys开发的抗细胞间粘附因子-1(ICAM-1)(CD54)抗体,MOR201,正由MorphoSys开发的抗成纤维细胞生长因子受体3(FGFR-3)抗体,Nuvion_(visilizumab),正由Protein DesignLabs开发的抗CD3抗体,HuZAFTM,正由Protein Design Labs开发的抗γ干扰素抗体,正由Protein Design Labs开发的抗α5β1整联蛋白抗体,正由Protein Design Labs开发的抗IL-12,ING-1,正由Xoma开发的抗Ep-CAM抗体,以及MLN01,正由Xoma开发的抗β2整联蛋白抗体。
应用Fc变体于上述抗体及Fc融合体的临床产物和候选物中不应受它们明确组成所约束。本发明的Fc变体可掺入到上述临床候选物和产物中,或掺入到基本上与它们类似的抗体和Fc融合体中。本发明的Fc变体可掺入到上述临床候选物和产物的人源化的、亲和力成熟的、经改造的或以一些其它方法修饰的型式中。此外,无需使用上述临床产物和候选物的完整多肽来构建掺入本发明的Fc变体的新的抗体或Fc融合体;例如可仅使用临床产物或候选物抗体的可变区,基本上相似的可变区,或可变区的人源化的、亲和力成熟的、经改造的或修饰的型式。在另一个实施方案中,本发明的Fc变体可供抗体或Fc融合体使用,所述抗体或Fc融合体能结合上述临床产物和候选物之一的相同表位、抗原、配体或受体。
本发明的Fc变体可用于多种抗体和Fc融合体产物中。在一个实施方案中,本发明的抗体或Fc融合体是一种治疗、诊断或研究试剂,优选是一种治疗试剂。可选地,本发明的抗体和Fc融合体可用于农业或工业用途。在一个可选的实施方案中,本发明的Fc变体组成可用实验方法筛选的文库。该文库可以是一列核苷酸或氨基酸序列,或可以是编码文库序列的核酸或多肽的物理组合物。所述Fc变体可供单克隆或多克隆抗体组合物使用。本发明的抗体和Fc融合体可以是激动剂、拮抗剂、中和性抗体、抑制性抗体或刺激性抗体。在一个优选的实施方案中,本发明的抗体和Fc融合体可用于杀死具有靶抗原的靶细胞,例如癌细胞。在一个可选的实施方案中,本发明的抗体和Fc融合体用于阻断、拮抗(antagonize)或激动(agonize)靶抗原,例如用于拮抗细胞因子或细胞因子受体。在一个可选地优选的实施方案中,本发明的抗体和Fc融合体用于阻断、拮抗或激动靶抗原并杀死具有该靶抗原的靶细胞。
本发明的Fc变体可用于不同的治疗目的。在一个优选的实施方案中,施用Fc变体蛋白质于患者以治疗与抗体相关的病症。对于本发明的目的而言,“患者”包括人和其它动物,优选哺乳动物,最优选人。因此本发明的抗体和Fc融合体可用于治疗人和牲畜。在优选的实施方案中,患者是哺乳动物,在最优选的实施方案中,患者是人。本发明中术语“治疗”意指对于疾病或病症包括治疗性处理,也包括预防性或抑制性方法。因此,举例来说,在疾病发作前成功施用抗体或Fc融合体以产生疾病治疗作用。如其它实例,在疾病临床表现后成功施用优化的抗体或Fc融合体以抗疾病症状,包含了疾病的治疗。“治疗”也包含在疾病发作后施用优化的抗体或Fc融合体蛋白质以便根除疾病。在发作以及临床症状发生后成功地施用试剂,有可能消除临床症状并改善疾病,包含了治疗该疾病。那些“
需要治疗的(in need of treatment)”包括已经患有疾病或病症的哺乳动物,也包括那些易患疾病或病症的那些,包括疾病或病症要得到预防的那些。本文中“
抗体相关的病症 (antibody related disorder)”或“
抗体应答的病症(antibody responsive disorder)”或“
病症(condition)”或“
疾病(disorder)”意指通过施用包含本发明的抗体或Fc融合体的药物组合物可得到改善的病症。抗体相关的病症包括但不限于自身免疫性疾病、免疫性疾病、传染病、炎性疾病、神经系统疾病、和包括癌症的肿瘤性以及瘤形成疾病。本文中“
癌症”和“
癌性的”指的是或描述为哺乳动物中的生理状态,其一般通过未调节的细胞生长得到鉴定。癌症的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、胚细胞瘤、肉瘤(包括脂肉瘤)、神经内分泌肿瘤、间皮瘤、神经鞘瘤、脑膜瘤、腺瘤、黑素瘤以及非白血性白血病或淋巴恶性肿瘤。上述癌症更具体的实例包括鳞状细胞癌(如,鳞状上皮细胞癌)、肺癌包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺腺癌以及肺鳞状细胞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃癌包括胃肠癌、胰腺癌、恶性胶质瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、子宫内膜或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、肛门癌、阴茎癌、睾丸癌、食道癌、胆管肿瘤,也包括头癌和颈癌。此外,本发明的Fc变体可用于治疗的病症包括但不限于:充血性心力衰竭(CHF)、血管炎、红斑痤疮、痤疮、湿疹、心肌炎和其它心肌病症、系统性红斑狼疮、糖尿病、脊椎病、滑液成纤维细胞增生以及骨髓基质瘤;骨质丢失;变形性骨炎(paget’s disease)、破骨细胞瘤;多发性骨髓瘤、乳腺癌、失用型骨质减少;营养不良、牙周病、家族性脾性贫血、朗罕氏细胞组织细胞增多病、脊髓损伤、急性脓毒性关节炎、骨软化症、皮质醇增多症、单骨纤维性骨发育不良、多发性骨纤维性发育不良、牙周再建以及骨折;肉样瘤病;多发性骨髓瘤;溶骨性癌(osteolytic bone cancers)、乳腺癌、肺癌、肾癌和直肠癌;骨转移、骨痛治疗和体液恶性高钙血症、强直性脊椎炎和其它脊椎关节病;移植排斥、病毒感染、血液瘤以及类瘤形成病症例如何杰金氏淋巴瘤;非何杰金淋巴瘤(Burkitt′s淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤/慢性淋巴细胞性白血病、蕈样肉芽肿病、外套细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性巨大B细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤、毛细胞性白血病以及淋巴浆细胞性白血病)、淋巴细胞前体细胞肿瘤、包括B细胞急性成淋巴细胞性非白血性白血病/淋巴瘤和T细胞急性成淋巴细胞性非白血性白血病/淋巴瘤,胸腺瘤、成熟T和NK细胞肿瘤,包括外周T细胞非白血性白血病、成熟T细胞非白血性白血病/T细胞淋巴瘤以及大颗粒状淋巴细胞性白血病、朗罕氏细胞组织细胞增多症、诸如急性骨髓性粒细胞性白血病的骨髓瘤形成,包括成熟的急性骨髓性白血病(AML)、分化的急性骨髓性白血病、急性前髓细胞性白血病、急性骨髓单核细胞性白血病、和急性单核细胞性白血病、脊髓发育不良综合征、慢性骨髓增生病,包括慢性髓细胞性白血病、中枢神经系统肿瘤,如脑肿瘤(神经胶质瘤、成神经细胞瘤、星细胞瘤、成神经管细胞瘤、室管膜细胞瘤和视网膜成神经细胞瘤)、实体瘤(鼻咽癌、基底细胞癌、胰腺癌、胆管癌、卡波氏肉瘤、睾丸癌、子宫、阴道或宫颈癌、卵巢癌、原发性肝癌或子宫内膜癌、以及血管系统肿瘤(血管肉瘤和hemagiopericytoma)、骨质疏松症、肝炎、HIV、AIDS、脊椎关节炎、类风湿性关节炎、炎性肠疾病(IBD)、败血症和败血症性休克、节段性回肠炎、牛皮癣、硬皮病、移植物抗宿主病(GVHD)、异源胰岛移植排斥(allogenic isletgraft rejection)、血液恶性肿瘤诸如多发性骨髓瘤(MM)、骨髓增生异常综合征(MDS)和急性骨髓性白血病(AML)、肿瘤相关的炎症、周围神经损伤或脱髓鞘性病。
在一个实施方案中,将本发明的抗体或Fc融合体施用于患病的患者,所述疾病涉及蛋白质的不适当表达。在本发明范围内,其意指包括以异常蛋白质为特征的疾病和病症,例如基于改变蛋白质存在的数量、存在突变蛋白质,或两者的疾病或病症。蛋白质过量可基于任何原因,包括但不限于在分子水平上过表达、在作用部位出现持续很久或蓄积、或相对于正常增加了蛋白质活性。以蛋白质减少为特征的疾病和病症也包括在该定义内。所述减少可基于任何原因,包括但不限于在分子水平上减少的表达、在作用部位出现减小或减少、蛋白质的突变体形式、或相对于正常减少了蛋白质活性。上述相对于蛋白质正常表达、出现或活性的蛋白质过多或减少可得到测定,所述的测定在开发和/或临床试验本发明的抗体和Fc融合体中可扮演一个重要角色。
在一个实施方案中,本发明的抗体或Fc融合体仅作为治疗活性剂施用于患者。可选地,本发明的抗体或Fc融合体与一种或多种其它治疗剂联合施用,所述的其它治疗剂包括但不限于细胞毒素剂、化学治疗剂、细胞活素类、生长抑制剂、抗激素剂、激酶抑制剂、抗血管生成剂、保心药或其它治疗剂。上述分子以合适的量组合存在,以有效地用于预期目的。有经验的医师可凭经验确定合适的剂量和其它用于本文治疗剂的剂量。本发明的抗体和Fc融合体可伴随一种或多种其它治疗方案施用。举例来说,本发明的抗体或Fc融合体随同化学疗法、放射疗法或两者一起施用于患者。在一个实施方案中,本发明的抗体或Fc融合体可联合一种或多种可能包含或可能不包含本发明Fc变体的抗体或Fc融合体施用。
在一个实施方案中,本发明的抗体和Fc融合体与化学治疗剂一起施用。本文中使用的“
化学治疗剂”意指在癌症治疗中使用的化合物。化学治疗剂的实例包括但不限于诸如硫替派和环磷酰胺(cyclosphosphamide)(CYTOXANTM)的烷基化剂;诸如白消安、英丙舒凡和嗪消安的烷基磺酸盐类;诸如苯并多巴(benzodopa)、卡波醌、美妥多巴(meturedopa)和乌瑞多巴(uredopa)的氮丙啶类;乙烯亚胺类和甲基密胺类(methylamelamines)包括六甲密胺、三亚胺嗪、trietylenephosphoramide、三亚乙基硫化磷酰胺和trimethylolomelamine;氮芥类诸如苯丁酸氮芥、萘氮芥、cholophosphamide、磷雌氮芥、异磷酰胺、二氯甲基二乙胺、氧氮芥盐酸化物、苯丙氨酸氮芥、新氮芥、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、氯乙环磷酰胺、尿嘧啶氮芥;诸如卡氮芥、氯脲菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀的硝脲类;诸如aclacinomysins、放线菌素、authramycin、重氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素C、刺孢霉素、carabicin、caminomycin、嗜癌霉素、色霉素、更生霉素、柔红霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、阿霉素、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素C、霉酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、派来霉素、potfiromycin、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗比多星、链黑霉素、链唑霉素,杀结核菌素、乌苯美司、新制癌菌素、佐柔比星的抗生素;诸如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)的抗代谢物;诸如二甲叶酸、氨甲叶酸、蝶酰三谷氨酸、曲美沙特的叶酸类似物;诸如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤的嘌呤类似物;诸如盐酸环胞苷、氮杂胞苷、6-氮尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、二去氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷、5-FU的嘧啶类似物;诸如卡普睾酮、丙酸屈他雄酮、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯的雄激素;诸如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦的抗肾上腺素;诸如frolinic acid的叶酸补充剂;乙酰葡醛酸内酯;醛磷酰胺糖苷;氨基戊酮酸;安吖啶;bestrabucil;比山群;依达曲沙;地磷酰胺;秋水仙胺;地吖醌;elformithine;依利醋铵;依托格鲁;硝酸镓;羟基脲;蘑菇多糖;氯尼达明;米托胍腙;米托蒽醌;莫哌达醇;二胺硝吖啶;喷司他丁;蛋氨氮芥;吡柔比星;鬼臼酸;2-乙基酰肼(2-ethyl hydrazide);丙卡巴肼;PSK_;雷佐生;施佐非兰;锗螺胺;细格孢氮杂酸;三亚胺醌;2,2′,2″-三氯三乙胺;乌拉坦;长春地辛;达卡巴嗪;甘露莫司汀;二溴甘露醇;二溴卫矛醇;哌泊溴烷;gacytosine;阿糖胞苷(″Ara-C″);环磷酰胺;塞替派;紫杉烷类,例如紫杉醇(TAXOL_,Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)和紫杉萜(TAXOTERE_,Rhne-Poulenc Rorer,Antony,France);苯丁酸氮芥;吉西他滨;6-硫代鸟嘌呤;巯基嘌呤;甲氨蝶呤;诸如顺铂和卡铂的铂类似物;长春碱;铂;依托泊苷(VP-16);异环磷酰胺;丝裂霉素;米托蒽醌;长春新碱;长春瑞滨;诺维本;诺消灵;替尼泊苷;道诺霉素;氨基蝶呤;希罗达;伊班膦酸盐;CPT-11;拓朴异构酶抑制剂RFS 2000;二氟甲基鸟氨酸(DMFO);维甲酸;esperamicins;卡培他滨;胸腺嘧啶核苷酸合酶抑制剂(诸如拓优得);诸如celicoxib(CELBREX,MK-0966(VIOXX_)的cox-2抑制剂;以及任一上述的药学上可接受的盐、酸或衍生物。在肿瘤上产生调节或抑制激素作用的抗激素剂也包括于该定义中,诸如抗雌激素类包括例如他莫昔芬、雷洛昔芬、抑制4(5)-咪唑的芳香酶、4-羟泰米芬、曲沃昔芬、keoxifene、LY 117018、奥那司酮和托瑞米芬(法乐通);以及抗雄激素类诸如氟他胺,尼鲁米特,比卡鲁胺,醋酸亮丙瑞林和戈舍瑞林;以及任一上述的药学上可接受的盐、酸或衍生物。
化学治疗剂或其它细胞毒素剂可作为前药施用。本文中使用的“
前药”意指药学上活性物质的前体或衍生物形式,与母体药物相比其对肿瘤细胞具有较小的细胞毒性,并且可被酶活化或转化为更具活性的母体形式。参见,例如Wilman,1986,Biochemical Society Transactions,615th MeetingBelfast,14:375-382;和Stella等.,″Prodrugs:A Chemical Approach to TargetedDrug Delivery,″Directed Drug Delivery,Borchardt等.,(ed.):247-267,Humana Press,1985。可供本发明使用的前药包括但不限于含有磷酸盐前药、含有硫代硫酸盐前药、含有硫酸盐前药、含肽前药、D-氨基酸修饰的前药、糖基化前药、含有β-内酰胺前药、含有任选地取代的苯氧基乙酰胺前药或含有任选地取代的苯乙酰胺前药、5-氟胞嘧啶和其它的5-氟脲嘧啶前药,上述前药能转化为更具活性的细胞毒性游离药物。用于与本发明的抗体和Fc融合体一起使用并衍生自前药形式的细胞毒性药物的实例包括但不限于任一上述化学治疗剂。
本发明的抗体和Fc融合体可结合其它治疗方案。例如,在一个实施方案中,要用抗体或Fc融合体治疗的患者也可接受放射治疗。放射治疗可依据本领域所采用的和本领域技术员所公知的常规实验设计进行。上述治疗包括但不限于铯、铱、碘或钴辐射。该放射治疗可全身照射,或可对体内或体表上特定部位或组织局部定向照射,该特定部位或组织例如肺、膀胱或前列腺。一般而言,放射治疗每隔约1-2周时间以脉冲形式进行。然而,放射治疗可间隔更长时间进行。例如,对患有头癌和颈癌的患者进行放射治疗可间隔约6-7周。任选地,放射治疗可以单剂量或多剂量、连续剂量的形式进行。有经验的医师可凭经验确定用于本文的放射治疗的合适剂量。依照本发明的另一个实施方案,本发明的抗体或Fc融合体以及一种或多种其它抗癌疗法用于治疗离体癌细胞。应当预计到上述离体治疗可应用于骨髓移植,以及具体地应用于自体骨髓移植。举例来说,如上所述在受体患者中可用抗体或Fc融合体与一种或多种其它抗癌疗法治疗含有癌细胞的细胞或组织,以在移植前排除或基本上排除癌细胞。当然,应当预计到本发明的抗体和Fc融合体还可与诸如外科手术的其它治疗技术联合使用。
在一个可选的实施方案中,本发明的抗体和Fc融合体与细胞因子一起施用。本文中使用的“
细胞因子”意指一种细胞群所释放的对其它细胞起细胞间介质作用的蛋白质的通称。上述细胞因子的实例是淋巴因子、单核因子以及传统的多肽激素。细胞因子包括诸如人生长激素、N-甲硫氨酰基人生长激素和牛生长激素的生长激素;甲状旁腺素;甲状腺素;胰岛素;胰岛素原;松弛素;松弛素原;诸如促卵泡激素(FSH)、促甲状腺激素(TSH)和黄体生成素(LH)的糖蛋白激素;肝生长因子;成纤维细胞生长因子;催乳素;胎盘催乳素;肿瘤坏死因子-α和β;苗勒氏抑制物质;小鼠促性腺激素相关肽;抑制素;活化素;血管内皮生长因子;整联蛋白;血小板生成素(TPO);诸如NGF-β的神经生长因子;血小板生长因子;诸如NGF-α和TGF-β的转化生长因子(TGFs);胰岛素样生长因子-I和-II;促红细胞生成素(EPO);骨诱导因子;诸如α、β、γ-干扰素的干扰素;诸如巨噬细胞-CSF(M-CSF)、粒细胞巨噬细胞-CSF(CM-CSF)和粒细胞-CSF(G-CSF)的集落刺激因子(CSFs);诸如IL-1、IL-1α、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-15的白介素(ILs);诸如TNF-α或TNF-β的肿瘤坏死因子;以及其它多肽因子,包括LIF和试剂盒配体(kitligand)(KL)。当在本文中使用时,术语细胞因子包括天然来源或重组细胞培养物来源的蛋白质,以及天然序列细胞因子生物学上的活性等价物。
其它许多治疗剂可供与本发明的抗体和Fc融合体一起施用。在一个实施方案中,抗体或Fc融合体与抗血管生成剂一起施用。本文中使用的“抗血管生成剂”意指一种可阻断或以某种程度干扰血管发育的化合物。例如,抗血管生成因子可以是一种小分子或蛋白质,例如是一种抗体、Fc融合体或细胞因子,其能结合与血管发生有关的生长因子或生长因子受体。本文中优选的抗血管生成因子是能结合血管内皮生长因子(VEGF)的一种抗体。在一个可选的实施方案中,抗体或Fc融合体与能诱导或增强获得性免疫应答的治疗剂一起施用,例如一种能靶向CTLA-4的抗体。在一个可选的实施方案中,抗体或Fc融合体与酪氨酸激酶抑制剂一起施用。本文中使用的“
酪氨 酸激酶抑制剂”意指一种在某种程度上抑制酪氨酸激酶的酪氨酸激酶活性的分子。上述抑制剂的实例包括但不限于喹唑啉(quinazoline),诸如PD153035,4-(3-氯苯胺基)喹唑啉;吡啶并嘧啶;嘧啶并嘧啶;吡咯并嘧啶,诸如CGP 59326,CGP 60261和CGP 62706;吡唑并嘧啶,4-(苯基氨基)-7H-吡咯并(2,3-d)嘧啶;姜黄素(curcumin)(姜黄素,4,5-双(4-氟代苯胺基)邻苯二甲酰二胺);含有硝基噻吩部分的酪氨酸磷酸化抑制剂;PD-0183805(Warner-Lambert);反义分子(如,与ErbB编码核酸结合的那些);喹啉(US5,804,396);tryphostins(US 5,804,396);ZD6474(Astra Zeneca);PTK-787(Novartis/Schering AG);诸如C1-1033(Pfizer)的全ErbB抑制剂;Affinitac(ISIS 3521;Isis/Lilly);甲磺酸伊马替尼(STI571,Gleevec_;Novartis);PKI166(Novartis);GW2016(GLaxo SmithKline);C1-1033(Pfizer);EKB-569(Wyeth);Semaxinib(Sugen);ZD6474(AstraZeneca);PTK-787(Novartis/Schering AG);INC-1 C11(Imclone);或如在下列任一专利申请中所述的抑制剂:US 5,804,396;PCT WO 99/09016(American Cyanimid);PCTWO 98/43960(American Cyanamid);PCT WO 97/38983(Warner-Lambert);PCT WO 99/06378(Warner-Lambert);PCT WO 99/06396(Warner-Lambert);PCT WO 96/30347(Pfizer,Inc);PCT WO 96/33978(AstraZeneca);PCTW096/3397(AstraZeneca);PCT WO 96/33980(AstraZeneca),gefitinib(IRESSATM,ZD1839,AstraZeneca),和OSI-774(TarcevaTM,OSIPharmaceuticals/Genentech)。
多种接头可用于本发明以生成Fc融合体(见上述定义)。本文中“接头”、“接头序列”、“间隔物”、“连接序列”或其语法上等同的术语指连接两种分子的分子或一组分子(诸如单体或聚合物),其通常将所述两种分子置于优选的构型。多种策略可用于将分子共价连接在一起。这些包括,但不限于蛋白质和蛋白质结构域N和C末端的多肽接头,通过二硫键的连接,以及通过化学交联剂的连接。该实施方案的一个方面,所述接头是肽键,其通过重组技术或肽合成生成。选择适于具体情况的接头,其中两条多肽链根据各种参数连接,包括但不限于,所述两条多肽链的性质(例如它们是否天然寡聚化),待连接的N末端和C末端之间的距离(如果已知的话),和/或所述接头对于蛋白水解和氧化的稳定性。此外,所述接头可含有提供柔性的氨基酸残基。因此所述接头肽主要包含以下氨基酸残基:Gly,Ser,Ala,或Thr。所述接头肽应具有合适的距离,该距离适于连接两个分子使其互相而言具有正确构型以保持所需活性。为该目的的适宜长度包括至少一个以及不超过30个氨基酸残基。优选,所述接头长度为约1-30个氨基酸,优选接头长度1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19和20个氨基酸。此外,被选用于包含在所述接头肽中的氨基酸残基所显示的性质不应明显影响所述多肽的活性。因此,所述接头肽总体上不显示与所述多肽活性不一致的电荷,或不影响内部折叠,或与一或多个单体中的氨基酸残基形成键合或其它相互作用,所述单体将严重阻碍受体单体结构域的结合。有用的接头包括甘氨酸-丝氨酸聚合物(包括,例如,(GS)n,(GSGGS)n(GGGGS)n和(GGGS)n,其中n是至少为1的整数),甘氨酸-丙氨酸聚合物,丙氨酸-丝氨酸聚合物,以及其它柔性接头诸如shaker钾通道的连接序列,以及多种其他柔性接头,它们是本领域已知的。甘氨酸-丝氨酸聚合物是优选的,因为这些氨基酸相对自由(unstructured),并且可作为组分之间的中性连接序列。其次,丝氨酸是亲水的并由此可溶解可为球状甘氨酸链的物质。第三,类似的链对于将重组蛋白质的亚基诸如单链抗体相连是有效的。适宜的接头也可通过筛选桥接两条多肽链之间缺口的天然基序的已知三维结构的数据库来鉴定。优选实施方案中,所述接头在给予人患者中的情况下可不是免疫原性的。因此可选择这样的接头,使得它们具有低免疫原性或被认为具有低免疫原性。例如,可选择天然存在人中的接头。优选实施方案中,所述接头具有抗体铰链区序列,即连接抗体Fab和Fc区的序列;可选所述接头具有包含部分铰链区的序列,或与抗体铰链区基本相似的序列。另外一种获得适宜接头的方法是通过随机诱变优化简单接头,例如,(Gly4Ser)n。可选,一旦定义适宜的多肽接头,可产生其它接头多肽以选择与所连接结构域更适宜地相互作用的氨基酸。其它类型的可用于本发明的接头包括人工多肽接头和intein。其它实施方案中,设计二硫键以连接两个分子。其它实施方案中,接头是化学交联剂。例如,可使用多种双功能蛋白质偶联剂,所述偶联剂包括但不限于N-琥珀酰-3-(2-联硫基吡啶)-丙酸盐(SPDP)、琥珀酰-4-(N-马来酰亚胺甲基(maleimidomethyl))环己烷-1-羧酸盐、巯醇亚胺(IT)、亚氨酸酯的双功能衍生物(诸如二甲基己二亚酰胺化氯化氢)、活化酯类(诸如二琥珀酰辛二酸盐)、醛类(诸如戊二醛)、二叠氮基化合物(诸如二(对-叠氮基苯甲酰基)己二胺)、二重氮基衍生物(诸如二-(对-重氮基苯甲酰基)-乙二胺)、二异氰酸盐类(诸如tolyene 2,6-二异氰酸盐)以及双活化氟化合物(诸如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)。例如,可根据Vitetta等.,1971,Science 238:1098中所述方法制备蓖麻毒素免疫毒素。化学结构可使用同位素螯合。例如,碳14标记的1-异硫代氰氧基苄基-3-甲基二乙烯三胺五乙酸(MX-DTPA)是一种用于将放射性核苷酸与抗体偶联的典型的螯合剂(cheating agent)。参见PCT WO 94/11026。接头可以是便于在细胞中释放细胞毒类药物的可裂解接头。举例来说,可使用对酸敏感的接头、对肽酶敏感的接头、二甲基接头或含有二硫化物的接头(Chari等.,1992,CancerResearch 52:127-131)。可选,多种非蛋白聚合物,包括但不限于聚乙二醇(PEG),聚丙二醇,聚氧化烯,或聚乙二醇与聚丙二醇的共聚物,可用作接头,其可将本发明的Fc变体连接于融合伴侣以产生Fc融合体,或将本发明的抗体或Fc融合体与偶联物相连。
一个实施方案中,本发明的抗体或Fc融合体偶联于或可操作连接于另一治疗化合物,本文中称为
偶联物。所述偶联物可以是细胞毒药剂,化疗剂,细胞因子,抗血管生成剂,酪氨酸激酶抑制剂,毒素,放射性同位素,或其它治疗活性剂。如上所述的化疗剂,细胞因子,抗血管生成剂,酪氨酸激酶抑制剂以及其它治疗剂,以及所有这些上述的治疗剂可用作抗体或Fc融合偶联物。在可选实施方案中,所述抗体或Fc融合体偶联或可操作连接于毒素上,包括但不限于小分子毒素和细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素,包括其片段和/或变体。小分子毒素包括但不限于刺孢毒素(calicheamicin)、美登素(US 5,208,020)、trichothene和CC1065。在本发明的一个实施方案中,所述抗体或Fc融合体偶联到一种或多种美登素分子上(如,每抗体分子约1-约10个美登素分子)。例如,美登素可转化为May-SS-Me,其可还原为May-SH3并与修饰的抗体或Fc融合体反应(Chari等.,1992,Cancer Research 52:127-131)以产生美登素-抗体或美登素-Fc融合体偶联物。另一种感兴趣的偶联反应包含将抗体或Fc融合体偶联到一种或多种刺孢毒素分子上。所述刺孢毒素抗生素家族在亚皮摩尔浓度下能产生双链DNA断裂物。可使用的刺孢毒素的结构类似物包括但不限于γ1 1、α2 1、α3、N-乙酰基-γ1 1、PSAG和Θ1 1,(Hinman等.,1993,Cancer Research 53:3336-3342;Lode等.,1998,Cancer Research 58:2925-2928)(US 5,714,586;US 5,712,374;US 5,264,586;US 5,773,001)。多拉司他汀(Dolastatin)10类似物,如可供本发明Fc变体偶联使用的auristatin E(AE)和monomethylauristatin E(MMAE)(Doronina等.,2003,Nat Biotechnol 21(7):778-84;Francisco等.,2003 Blood 102(4):1458-65)。有用的酶活性毒素包括但不限于白喉毒素A链、白喉毒素非结合活性片段、外毒素A链(来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa))、蓖麻毒素A链、相思豆毒素A链、蒴莲根毒素A链、α-八叠球菌、油桐蛋白、石竹素蛋白、美国商陆蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜抑制物、麻疯树毒蛋白、巴豆毒素、sapaonaria offcinalis抑制物、白树毒素、mitogellin、局限曲菌素、酚霉素、依诺霉素以及单端孢霉烯族毒素。参见,例如,PCT WO 93/21232。本发明也涉及一种本发明的抗体或Fc融合体与具有溶核活性的化合物形成的偶联物或融合体,所述化合物例如核糖核酸酶或诸如脱氧核糖核酸酶(DNase)的DNA核酸内切酶。
在一个可选的实施方案中,本发明的抗体或Fc融合体可偶联或可操作地连接放射性同位素以形成放射性偶联物。许多放射性同位素可用于产生抗体和Fc融合体的放射性偶联物。实例包括但不限于,At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32和Lu的放射性同位素。
在另一个实施方案中,本发明的抗体或Fc融合体可偶联或可操作连接“受体”(诸如链霉抗生物素蛋白)用于肿瘤前靶(pretargeting),其中所述抗体-受体或Fc融合体-受体偶联物施用于患者,接着使用清除剂从循环系统中除去未结合的偶联物,然后施用偶联细胞毒素剂(如,放射性核苷酸)的“配体”(如,抗生物素蛋白)。在一个可选的实施方案中,所述抗体或Fc融合体偶联或可操作地连接于酶以便进行抗体依赖性酶介导前药疗法(ADEPT)。ADEPT可通过将所述抗体或Fc融合体与前药激活酶偶联或可操作地连接而进行,该前药激活酶可转化前药(如,肽酰化学治疗剂,参见PCT WO81/01145)为活化的抗癌药物。参见,例如PCT WO 88/07378和US4,975,278。用于ADEPT的免疫偶联物的酶组分包括任何能以使得前药转化为更具活性、细胞毒性形式的这样一种方式激活前药的酶。用于本发明方法中的酶包括但不限于用于将含有磷酸盐的前药转化为游离药物(free drug)的碱性磷酸酶;用于将含有硫酸盐的前药转化为游离药物的芳香基硫酸酯酶;用于将无毒5-氟胞嘧啶转化为抗癌药物(5-氟尿嘧啶)的胞嘧啶脱氨酶;诸如沙雷氏菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、羧肽酶以及组织蛋白酶(如组织蛋白酶B和L)的蛋白酶,其可用于将含肽前药转化为游离药物;D-丙氨酰基羧肽酶,用于转化含D-氨基酸取代物的前药;诸如β-半乳糖苷酶和神经氨酸酶的糖裂解酶,用于将糖基化前药转化为游离药物;β-内酰胺酶,用于将α-内酰胺衍生的药物转化为游离药物;以及青霉素酰胺酶,如青霉素V酰胺酶或青霉素G酰胺酶,用于将在其胺的氮原子处分别用苯氧基乙酰基或苯乙酰基取代衍生的药物转化为游离药物。可选地,在本领域中也已知为“抗体酶(abzymes)”的具有酶活性的抗体可用于将本发明的前药转化为活性的游离药(参见,例如Massey,1987,Nature 328:457-458)。可制备抗体-抗体酶和Fc融合体-抗体酶偶联物用于递送抗体酶至肿瘤细胞群中。
应当预料到在本文中还有本发明抗体和Fc融合体的其它修饰。例如,所述抗体或Fc融合体可连接有多种非蛋白质聚合物之一,如聚乙二醇、聚丙二醇、聚氧化烯或聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物。
涉及本发明抗体或Fc融合体与一种或多种治疗活性剂配制在一起的药物组合物。通过将所述具有所需纯度的抗体或Fc融合体与任选的药学上可接受载体、赋形剂或稳定剂混合制备用于存储的本发明的抗体和Fc融合体的剂型(Remington′s Pharmaceutical Sciences 16th edition,Osol,A.Ed.,1980),为冻干剂型或水溶液形式。可接受载体、赋形剂或稳定剂所使用的剂量或浓度对于接受者是无毒的,包括缓冲液诸如磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐和其它有机酸;抗氧化剂包括抗坏血酸和甲硫氨酸;防腐剂(诸如十八烷基二甲基苄基氯化铵、氯己双铵、氯化苯甲烃铵、氯化苄乙氧铵、苯酚、丁基orbenzyl醇、诸如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯的烷基对羟基苯甲酸酯类、儿茶酚、雷琐酚、环己醇、3-戊醇以及间甲酚);低分子量(低于约10个残基)多肽;蛋白质,诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白;诸如聚乙烯吡咯酮的亲水聚合物、诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸的氨基酸、单糖、二糖和其它糖类包括葡萄糖、甘露糖或糊精、诸如EDTA的螯合剂、诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇的糖类、甜味剂和其它调味剂、诸如微晶纤维素、乳糖、玉米及其它淀粉的充填剂、粘合剂、添加剂、着色剂、诸如钠的成盐反离子金属复合物(如锌-蛋白质复合物)和/或诸如TWEENTM、PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)的非离子表面活性剂。在一个优选的实施方案中,所述包含本发明的抗体或Fc融合体的药物组合物以水溶形式存在,诸如以药学上可接受的盐存在,其意指包括酸和碱加成盐。“药学上可接受的酸加成盐”指的是那些保持游离碱生物有效性且不是生物学或在其它方面不需要的盐类,与诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等的无机酸以及诸如乙酸、丙酸、羟乙酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、延胡索酸、酒石酸、枸橼酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等的有机酸所加成的。“药学上可接受的碱加成盐”包括那些衍生自诸如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等的无机碱类的那些。特别优选的是铵、钾、钠、钙和镁盐。衍生自药学可接受的有机无毒碱类包括伯、仲和叔胺、取代的胺包括天然存在的取代的胺、环胺以及阳离子交换树脂,诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺。用于体内给药的剂型优选无菌的。通过用无菌过滤膜过滤或其它方法可容易地达到无菌目的。
本文所公开的抗体和Fc融合体也可配制为免疫脂质体。脂质体是一种小的囊状体,包含不同类型脂质、磷脂和/或表面活性剂,用于递送治疗剂予哺乳动物。通过诸如描述于Epstein等.,1985,Proc Natl Acad Sci USA,82:3688;Hwang等.,1980,Proc Natl Acad Sci USA,77:4030;US 4,485,045;US4,544,545;和PCT WO 97/38731中的本领域公知方法可制备含有所述抗体或Fc融合体的脂质体。具有增强的循环时间的脂质体公开于US 5,013,556。脂质体的组分通常以双分子层的形式排列,类似于生物膜的脂质排列方式。可将包含卵磷脂、胆固醇和PEG衍生的磷脂酰乙醇胺(PEG-PE)的脂质组合物通过反相蒸发法制备得到特别有用的脂质体。通过具有确定孔径的过滤器将脂质体挤出以产生具有所需直径的脂质体。化学治疗剂或其它治疗活性剂可任选地包含于脂质体中(Gabizon等.,1989,J National Cancer Inst 81:1484)。
所述抗体、Fc融合体和其它治疗活性剂也可包被于微胶囊中,通过包括但不限于凝聚技术、界面聚合法(例如使用羟甲基纤维素或明胶微胶囊或聚(甲基丙烯酸酯)微胶囊)、胶体给药系统(例如,脂质体、白蛋白微球体、微乳剂、纳米颗粒和纳米胶囊)以及粗乳状液(macroemulsion)的方法制备得到。上述技术公开于Remington′s Pharmaceutical Sciences 16th edition,Osol,A.Ed.,1980。可制备持续释放制剂。持续释放制剂合适的实例包括固相疏水聚合物的半透性基质,所述基质以成型制品的形式存在,如薄膜或微胶囊。持续释放基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如聚(2-羟乙基-异丁烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(US 3,773,919)、L-谷氨酸和γ乙基-谷氨酸酯的共聚物、非降解乙烯-醋酸乙烯酯、诸如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球体)的可降解乳酸-乙醇酸共聚物、聚-D-(-)-3-羟基丁酸以及ProLease_,(可从Alkermes购得),其是一种由所需生物活性分子掺入聚-DL-丙交酯-共-乙交酯(PLG)基质组成的基于微球体的递药系统。
在制剂中本发明的治疗活性抗体或Fc融合体的浓度可从约0.1变化为100重量%。在一个优选的实施方案中,所述抗体或Fc融合体的浓度在0.003-1.0摩尔的范围内。为了治疗患者,可给予本发明的抗体或Fc融合体的治疗有效剂量。本文中“治疗有效剂量”意指对于其所施用的能产生效果的剂量。精确的剂量将依赖于治疗的目的,并可为本领域技术人员通过使用公知技术所确定。剂量范围可为0.01-100mg/kg体重或更大,例如0.1、1、10或50mg/kg体重,优选1-10mg/kg。如本领域所公知,对于抗体或Fc融合体降解、全身性或局部性递药和新蛋白酶合成速率,以及年龄、体重、大致健康状况、性别、饮食、给药时间、药物相互作用以及病症的严重程度而言,调整可以是必需的,并可由本领域那些技术人员通过常规的实验方法来确定。
包含本发明抗体或Fc融合体的药物组合物优选以无菌水溶液形式施用,可以多种方法进行,包括但不限于经口、皮下、静脉内、鼻内、耳内(intraotically)、经皮、局部(如凝胶剂、油膏剂、洗剂、霜剂等)、腹膜内、肌内、肺内(如,AERx_吸入技术,购自Aradigm,或InhanceTM肺递药系统,购自Inhale Therapeutics)、经阴道、肠胃外、经直肠或眼内施用。在一些实例中,例如对于治疗创伤、炎症等而言,所述抗体或Fc融合体可直接以溶液或喷雾剂的形式应用。如本领域所公知,可依据导入方式相应地配制所述药物组合物。
改造方法
本发明提供了可用于产生Fc变体的改造方法。阻碍先前Fc改造尝试的主要障碍在于仅有随机修饰已成为可能,部分是由于无效的改造策略及方法,以及由于抗体生产和筛选的低通量特性。本发明描述了能克服这些缺陷的改造方法。涉及多种设计策略、计算筛选方法、文库产生方法和实验生产和筛选方法。这些策略、途径、技术和方法可单独应用或以不同的组合方式应用以设计优化的Fc变体。
设计策略
产生对所需特性优化的Fc变体的最有效方法是针对目的指导改造研究计划。因此,本发明教导了可用于设计优化的Fc变体的设计策略。设计策略的使用意在指导Fc改造,但基于用于设计Fc变体的设计策略,并不意在将其限制为特定的优化特性。初一想,其可能看来像是违反直觉,然而其有效性是得自可确定蛋白质以及蛋白质-蛋白质复合物的结构、稳定性、溶解性和功能的微妙相互作用的庞大的复杂性。尽管可尽力预测对于设计目的而言重要的蛋白质位置、残基、相互作用等,但是时常地关键的某些因素却无法预测。通常无法预测对蛋白质结构、稳定性、溶解性以及功能的影响是否是有利的或不利的。然而却有无数的对蛋白质有损或有害的氨基酸修饰存在。因此通常地,最好的改造方法来自产生可通常聚焦于设计目的而不导致有害效应的蛋白质变体。因此,设计策略主要的目标在于产生特性多样性(quality diversity)。在一个过分简单化的水平(simplistic level)上,其可被认为是人们所偏爱的可能性的叠加。例如,对如下所述的Fc糖或特定的结构域-结构域夹角的微扰,对于产生优化的Fc变体而言是有效的设计策略,尽管事实上无法充分理解糖和结构域-结构域夹角如何决定Fc的特性。减少有害氨基酸数量的修饰即为筛选,即通过特性多样性筛选,这些设计策略可具有实用性。因此本发明中所教导的设计策略的真实价值在于它们能直接将改造研究计划应用于产生有价值的Fc变体。在实验后可确定任一所产生变体的特定价值。
提供了一种用于改造Fc变体的设计策略,其中在Fc与所述的Fc配体的界面上通过设计氨基酸修饰改变了Fc与一些Fc配体的相互作用。本文中Fc配体可包括但不限于FcγR、C1q、FcRn、蛋白A或G等。通过在能量方面探查位于对结合界面产生影响的Fc位置的有利取代,可设计变体,对新的界面构象采样,其中一些与Fc配体的结合可得到改善,一些与Fc配体的结合减少了,以及一些可具有其它有利特性。上述新的界面构象起因可能在于,例如,形成该界面的残基与Fc配体的直接作用,或由于诸如侧链或主链构象微扰的氨基酸修饰所引起的间接作用。可选择据信在确定界面的构象中扮演重要角色的位置为可变位置。例如,可选择这样一组残基作为可变位置,该残基与Fc配体直接接触的任意残基在一定距离范围内,例如5埃(_),优选1-10_。
提供了一种用于产生Fc变体的其它设计策略,其中在N297的Fc糖构象得到优化。在上下文中使用的优化意在包括N297糖构象和组成的改变,其产生了所需特性,例如增加或减少了对FcγR的亲和力。通过所观察到的糖结构和构象显著地影响了Fc/FcγR以及Fc/C1q结合,支持了上述策略(Umana等.,1999,Nat Biotechnol 17:176-180;Davies等.,2001,BiotechnolBioeng 74:288-294;Mimura等.,2001,J Biol Chem 276:45539-45547.;Radaev等,2001,J Biol Chem 276:16478-16483;Shields等.,2002,J BiolChem 277:26733-26740;Shinkawa等.,2003,J Biol Chem 278:3466-3473)。但是,该糖并不具体接触FcγR。通过在能量方面探查与糖相互作用的位置上的有利取代,可设计变体的特性多样性,对新的糖类构象采样,其中一些改善了与一种或多种Fc配体的结合,但另一些减少了。虽然大多数接近Fc/糖界面的突变似乎改变了糖构象,但是已显示了一些突变改变了糖基化组合物(Lund等.,1996,J Immunol 157:4963-4969;Jefferis等.,2002,ImmunolLett 82:57-65)。
提供了另一种用于产生Fc变体的设计策略,其中Cγ2和Cγ3结构域之间的夹角得到优化。在上下文中使用的优化意在描述Cγ2-Cγ3结构域夹角的构象改变,其产生了所需特性,例如增加或减少了对FcγR的亲和力。所述夹角是Fc/FcγR亲和力的重要决定因素(Radaev等.,2001,J Biol Chem276:16478-16483),且许多Fc/FcγR界面远端的突变通过调节该夹角而影响了结合的可能性(Shields等.,2001,J Biol Chem 276:6591-6604)。通过在能量方面探查在确定Cγ2-Cγ3夹角以及相对于彼此之间的结构域柔性中似乎扮演着一种关键角色的有利取代位置,可设计变体的特性多样性,对新的夹角和柔性水平采样,对于所需Fc特性而言其中一些得到了优化。
提供了另一种用于产生Fc变体的设计策略,其中再改造Fc以消除对糖基化的结构与功能依赖性。该设计策略包括在缺乏N297糖的条件下优化Fc结构、稳定性、溶解性和/或Fc功能(例如Fc对一种或多种Fc配体的亲和力)。在一种方法中,暴露于溶剂的位置在缺乏糖基化的条件下得到改造,使它们稳定、在结构上与Fc结构相容、且不具有聚集的倾向。在抗体中Cγ2仅是未配对的Ig结构域(参见图1)。因此N297糖覆盖了通常作为蛋白质-蛋白质与其它Ig结构域相互作用界面的暴露的疏水区,维持了Fc稳定性以及结构整体性,并阻止了Cγ2结构域越过中心轴的聚集。用于优化非糖基化Fc的方法可包括但不限于设计通过掺入在内部面向Cγ2-Cγ2二聚体轴的极性和/或荷电的残基以增强非糖基化Fc稳定性和/或溶解性的氨基酸修饰,以及通过设计直接增加非糖基化Fc/FcγR界面或非糖基化Fc与其它一些Fc配体的界面的氨基酸修饰。
提供了另一种用于设计Fc变体的设计策略,其中Cγ2结构域的构象得到优化。在上下文中使用的优化意在描述Cγ2结构域夹角的构象改变,其产生了所需特性,例如增加或减少了对FcγR的亲和力。通过在能量方面探查对Cγ2构象发生影响的Cγ2位置上的有利取代,可设计变体的特性多样性,对新的Cγ2构象采样,其中一些可达到设计目的。上述新的Cγ2构象起因可能在于,例如,通过对变体采样所得的可选的主链构象。可选择如任意位置的可变位置,据信在确定Cγ2结构、稳定性、溶解性、柔性、功能等的过程中其扮演着一种重要角色。例如,Cγ2疏水核心残基,其是部分或全部地与溶剂隔绝的Cγ2残基,可得到再改造。可选地,可考虑非核心(noncore)残基,或认为对决定主链结构、稳定性或柔性重要的残基。
提供了另一种用于Fc优化的设计策略,其中通过调节Fc与所述Fc配体之间的静电作用的修饰改变了与FcγR、补体或其它一些Fc配体的结合。上述修饰可认为是对Fc的整体静电特性的优化,并包括了用荷电氨基酸取代中性氨基酸、用中性氨基酸取代荷电氨基酸或用带相反电荷(即反向电荷)的氨基酸取代荷电氨基酸。上述修饰可用于影响Fc和一种或多种Fc配体之间的结合亲和力的改变,所述Fc配体例如FcγR。在一个优选的实施方案中,使用用于计算静电势的多种众所周知的方法之一来选择可影响结合的静电取代位置。在最简单的实施方案中,库仑定律用于产生作为在蛋白质中该位置功能的静电势。另外的实施方案包括了使用德拜-休克尔标度(Debye-Huckel scaling)来计算离子强度的影响,以及在更复杂的实施方案中使用诸如泊松-玻耳兹曼(Poisson-Boltzmann)计算。上述静电计算可使位置突出并暗示了可达到设计目的的特定氨基酸修饰。在某些情况下,可预计这些取代对结合不同的Fc配体具有不同的影响,例如可增强与激活性的FcγR的结合,或减少对抑制性FcγR的结合亲和力。
计算筛选
在数量庞大的可能发生的修饰中预测何种氨基酸修饰能达到所需目的的过程中,主要障碍是很难获得有价值的Fc变体。实际上,对先前已失败的产生具有重要临床价值Fc变体的Fc改造尝试而言,一个主要的原因是迄今为止Fc改造方法都与尝试(hit-or-miss)方法相关。本发明提供了使Fc变体定量和系统改造成为可能的计算筛选(computational screening)方法。这些方法通常使用原子水平打分函数、侧链旋转异构体采样(side chain rotamersampling)以及先进的优化方法以精确获取蛋白质序列、结构和功能之间的相互关系。计算筛选通过对产生的庞大多样性过滤使探查靶位置完整序列区的可能性能够实现。对于允许激活性Fc优化以达到所需目的的稳定的、合适的折叠以及功能性序列而言,计算筛选变体文库可有效地使之富集。因为重叠序列约束了蛋白质结构、稳定性、溶解性和功能,而在文库中大量候选物却占据着“无用的”序列区。举例来说,大部分序列区编码未折叠、错误折叠、不完全折叠、部分折叠或聚集的蛋白质。其对于Fc改造特别相关,因为Ig结构域是小β片层结构,已证实其的改造是非常必需的(Quinn等.,1994,Proc Natl Acad Sci USA 91:8747-8751;Richardson等.,2002,Proc NatlAcad Sci USA 99:2754-2759)。甚至看上去在β片层表面上无害的取代都能导致严重的堆积冲突,明显地破坏了折叠平衡(Smith等.,1995,Science 270:980-982);顺便提及,丙氨酸是一种最不利的β片层构成者(Minor等.,1994,Nature 371:264-267)。β片层稳定性和特异性的决定因素是处于极大数量的微妙相互作用之间的一种微妙平衡。计算筛选能够产生主要由有效序列区组成的文库,并因此增加了鉴定对设计目的优化的蛋白质的机率。事实上计算筛选产生了增加的命中率,从而减少了应用实验方法筛选的变体数量。Fc改造的另外障碍是需要有效设计具相互关系或联系的突变。例如,迄今为止所观察到的具有最大Fc/FcγR亲和力增加的是S298A/E333A/K334A,可通过将三种分别在丙氨酸扫描中得到的较好突变结合而获得之(Shields等.,2001,J Biol Chem 276:6591-6604)。计算筛选在一次试验中就能产生上述三重变体而无须进行三次单独的试验,此外还能测试在那些位置所有20种氨基酸而不仅是丙氨酸的功能性。计算筛选可通过将组合问题减少到实验上所能处理的数量以处理上述复杂性。
从广义上看,计算筛选具有四个步骤:1)选择并制备蛋白质模板结构,2)选择可变位置、在那些位置应当考虑的氨基酸和/或选择旋转异构体以模拟所考虑的氨基酸,3)计算能量,以及4)优化组合。该计算筛选更详细过程描述如下。将蛋白质三维结构作为起点(starting point)。鉴定要被优化的位置,其可以是完整蛋白序列或其子集(subset(s))。在每个位置上选择所考虑的氨基酸。在一个优选的实施方案中,每个被考虑的氨基酸可为具有称为旋转异构体的容许(allowed)构象的离散集合所代表。计算所考虑的每个氨基酸与其它所考虑的每个氨基酸之间、以及其与蛋白质的其余部分,包括与该蛋白质主链和不变残基之间相互作用能量。在一个优选的实施方案中,计算所考虑的每个氨基酸侧链旋转异构体与其它所考虑的每个氨基酸侧链旋转异构体(amino acid side chain rotamer)之间、以及其与蛋白质的其余部分,包括与该蛋白质主链和不变残基之间相互作用能量。接着用一或更多组合搜索算法来鉴定具有最低能量的序列和/或具有低能量的序列。
在一个优选的实施方案中,所用的计算筛选方法基本上类似于ProteinDesign Automation_(PDA_)技术,该技术描述于US 6,188,965;US 6,269,312;US 6,403,312;USSN 09/782,004;USSN 09/927,790;USSN 10/218,102;PCTWO 98/07254;PCT WO 01/40091和PCT WO 02/25588中。在另一个优选的实施方案中,所用的计算筛选方法基本上类似于Sequence PredictionAlgorithmTM(SPATM)技术,该技术描述于(Raha等.,2000,Protein Sci 9:1106-1119)、USSN 09/877,695和USSN 10/071,859中。在另一个优选的实施方案中,所用的计算筛选方法描述于2003年3月3日提交的,标题为“抗体优化”的USSN 10/339788中。在一些实施方案中,可使用不同计算筛选方法的组合,包括PDA_技术与SPATM技术的组合,也包括这些计算方法与其它设计工具的组合。同样地,这些计算方法可同时使用或以任一次序顺序使用。
模板结构作为计算筛选计算的输入量。本文中“
模板结构”意指要被优化的蛋白质的部分或全部结构坐标。所述模板结构可以是任何三维结构(即,一组蛋白质原子的三维坐标)已公知或可计算、估计、模拟、创造或测定的蛋白质。使用包括但不限于X-射线晶体学技术、核磁共振(NMR)技术、从头建模法以及同源建模法可测定蛋白质的三维结构。如果对于没有用实验方法解出结构的蛋白质而言优化是所需的,那么可产生一种合适的结构模型以作为计算筛选计算的模板。用于产生蛋白质同源模型的方法为本领域所公知,这些方法可供本发明使用。参见例如,Luo,等.2002,Protein Sci 11:1218-1226,Lehmann和Wyss,2001,Curr Opin Biotechnol 12(4):371-5.;Lehmann等.,2000,Biochim Biophys Acta 1543(2):408-415;Rath和Davidson,2000,Protein Sci,9(12):2457-69;Lehmann等.,2000,Protein Eng 13(1):49-57;Desjarlais和Berg,1993,Proc Natl Acad Sci USA 90(6):2256-60;Desjarlais和Berg,1992,Proteins 12(2):101-4;Henikoff和Henikoff,2000,Adv Protein Chem 54:73-97;Henikoff和Henikoff,1994,J Mol Biol 243(4):574-8;Morea等,2000,Methods 20:267-269。使用对接(docking)方法也可获得蛋白质/蛋白质复合物。可作为模板结构的合适的蛋白质结构包括但不限于,所有那些在Protein Data Base中所发现的,该Protein Data Base数据库为Research Collaboratory for Structural Bioinformatics(RCSB,原来称为Brookhaven National Lab)所编辑和维护。
所述模板结构可以是天然存在或经改造的蛋白质的。所述模板结构也可以是基本上为来自任意生物体的蛋白质所编码的蛋白质的,所述任意生物体优选人、小鼠、大鼠、兔子和猴子。所述模板结构可包含许多蛋白质结构型的任意一种。在一个优选的实施方案中,所述模板结构包含Fc区或Fc结构域或Fc片段。在一个可选地优选的实施方案中,所述模板结构包含结合有一种或多种Fc配体的Fc或Fc结构域或Fc片段,优选为Fc/FcγR复合体。模板结构中的Fc可糖基化或不糖基化。所述模板结构可包含多于一条的蛋白链。所述模板结构可额外含有非蛋白质组分,包括但不限于小分子、底物、辅因子、金属、水分子、辅基、聚合物以及糖。在一个优选的实施方案中,所述模板结构是多个或一组模板蛋白质,例如诸如获得自NMR的一组结构。可选地,所述一组模板结构可产生自一组相关的蛋白质或结构,或人工创建的结构集合。所述组合物和模板结构的来源基于工程目的。举例来说,对于增加人Fc/FcγR亲和力而言,人Fc/FcγR复合体结构或其衍生物可作为模板结构。可选地,非复合的Fc结构可作为模板结构。如果所述目的是为了增加人Fc对小鼠FcγR的亲和力,则模板结构可以是与小鼠FcγR结合的人Fc结构或模型。
在设计计算前可修饰或改变所述模板结构。用于制备模板结构的许多方法描述于US 6,188,965;US 6,269,312;US 6,403,312;USSN 09/782,004;USSN 09/927,790;USSN 09/877,695;USSN 10/071,859,USSN 10/218,102;PCT WO 98/07254;PCT WO 01/40091以及PCT WO 02/25588中。举例来说,在一个优选的实施方案中,如果其不包括在所述结构中,则可添加额外的氢原子。在一个可选的实施方案中,对结构进行能量最小化以释放张力(strain),包括基于范德华冲突(clashes)、不利键角以及不利键长的张力。可选地,所述模板结构可用其它方法改变,诸如手动地改变,包括受控或随机微扰。也可在计算筛选后的步骤中进行模板结构修饰,包括能量计算以及组合优化步骤。在一个可选的实施方案中,所述模板结构在计算筛选计算前或过程中不被修饰。
一旦获得模板结构,可变位置就被选定。本文中“可变位置”意指在计算筛选计算中氨基酸同一性允许得到改变的位置。如本领域所公知,仅在某些可变位置上允许考虑氨基酸修饰,可减少计算的复杂性并使计算筛选能更直接适应设计目的。在计算筛选计算中一种或多种残基可位于可变位置。选定作为可变位置的位置可以是有助于或推测有助于要优化的蛋白质特性的那些,所述蛋白质特性例如对FcγR的Fc亲和力、Fc稳定性、Fc溶解性等等。可变位置上的残基对特定的蛋白质特性可有利亦可不利。例如,位于Fc/FcγR界面处的残基与介导结合相关,因此该位置在设计计算中可改变旨在提高Fc/FcγR亲和力。如另一实例,具有暴露疏水侧链的残基可能是导致不利聚集的原因,因此在设计计算中该位置可改变旨在增加溶解性。可变位置可以是与作为特定蛋白质特性决定因素的相互作用直接相关的那些位置。例如,Fc的FcγR结合位点可规定为包括能接触特定FcγR的所有残基。本文中“
接触”意指在Fc残基的至少一个原子与所结合的FcγR的至少一个原子之间的某些化学相互作用,所具有的化学相互作用包括但不限于范德华相互作用、氢键相互作用、静电相互作用以及疏水相互作用。在一个可选的实施方案中,可变位置可包括与蛋白质性质间接相关的那些位置,即上述位置可邻近于已知或推测有助于Fc性质的残基。例如,Fc的FcγR结合位点可规定为包括所有位于特定距离内的Fc残基,例如4-10_与所述FcγR范德华接触内的任一Fc残基。因此在该情况下,不但可选择直接与FcγR接触的残基作为可变位置,也可选择与接触FcγR的残基接触并因此间接影响结合的那些作为可变位置。所述特定位置的选定依赖于所要采用的设计策略。
在模板结构中一个或多个不是可变的位置可以是漂浮的(floated)。本文中“
漂浮位置(floated position)“意指在计算筛选计算中于此允许改变氨基酸构象而非氨基酸同一性的位置。在一个实施方案中,所述漂浮位置可具有亲本氨基酸同一性。例如,漂浮位置可位于与可变位置残基具有极小距离内的位置,例如5A。在一个可选的实施方案中,漂浮位置可具有非亲本氨基酸同一性。举例来说,当目的是为了评估特定突变的能量或结构结果时,上述实施方案可供本发明。
既不是可变的位置也不是漂浮的位置的那些位置称为固定的(fixed)位置。本文中“
固定位置(fixed position)”意指在计算筛选计算中于此氨基酸同一性和构象保持不变的位置。可以是固定的位置包括与所要优化的性质不相关的已知或推测的残基。在该情况下,推测通过改变这些位置,几乎不会或完全不会获得所要优化的性质。固定位置也可包括已知或推测该处残基对维持固有的折叠、结构、稳定性、溶解性和/或生物学功能起重要作用的位置。例如,对于与特定Fc配体相互作用的残基或编码糖基化位点的残基而言,位置可以是固定的以便确保与Fc配体的结合及适当的糖基化各自不受微扰。同样地,如果稳定性得到优化,其可有益于使直接或间接与诸如FcγR的Fc配体相互作用的位置固定,使得结合不受微扰。固定位置也可包括结构上重要的残基,诸如参与二硫键中的半胱氨酸,对于决定主链构象而言起关键作用的残基,如脯氨酸或甘氨酸,关键的氢键结合残基以及形成有利堆积相互作用的残基。
在计算筛选中下一个步骤是在每个特定可变位置选择一组考虑认为可能的氨基酸同一性。在可变位置的该组可能的氨基酸在本文中称为“
考虑的 氨基酸(considered amino acids)”。本文中使用的“
氨基酸”指20种天然氨基酸和任何非天然或合成类似物的组。在一个实施方案中,考虑到所有20种天然氨基酸。可选地,在给定的可变位置上也考虑氨基酸的子集或甚至仅考虑一种氨基酸。本领域技术人员应当理解,在可变位置上仅考虑特定氨基酸的同一性有利于计算,因为其减少了搜寻的组合复杂性。此外,在可变位置上仅考虑特定氨基酸可适用于针对特定设计策略的计算。例如,对于优化非糖基化Fc稳定性而言,在糖不存在情况下暴露于溶剂的非极性Fc残基处仅允许考虑极性氨基酸是有利于计算的。非天然氨基酸,包括合成的氨基酸以及天然氨基酸的类似物,也可以是考虑的氨基酸。例如参见,Chin等.,2003,Science,301(5635):964-7;和Chin等.,2003,Chem Biol.10(6):511-9。
许多方法可单独或组合地使用以选择在每个位置上应当考虑的氨基酸。举例来说,可基于暴露于溶剂的程度来选择在给定可变位置处考虑的氨基酸组。疏水或非极性氨基酸通常位于蛋白质的内部或核内(core),其难以接近或几乎难以接近溶剂。因此在核内可变位置,有利之处在于可仅考虑或主要考虑非极性氨基酸,诸如丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸以及甲硫氨酸。亲水或极性氨基酸通常位于蛋白质的外部或表面,其具有显著程度的溶剂可及性。因此在可变表面位置,有利之处在于可仅考虑或主要考虑极性氨基酸,诸如丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸以及组氨酸。某些位置是部分暴露或部分埋藏的,无法明确是蛋白质核内或表面位置,在某种意义上作为位于核内与表面残基之间的边界残基。因此在上述可变边界位置,有利之处在于可同时考虑非极性和极性氨基酸,诸如丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸、组氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸以及甲硫氨酸。可通过蛋白质结构生物学领域技术人员主观评价或图像检查(visual inspection)模板结构来确定可变位置处溶剂暴露的程度,或可通过使用本领域公知的多种算法进行之。通过计算方法,诸如计算溶剂可及表面区域或使用评估相对于溶剂可及表面的Cα-Cβ向量方向的算法,可辅助或完全决定可变位置所要考虑的氨基酸类型的选择,上述计算方法概述于US 6,188,965;6,269,312;US 6,403,312;USSN 09/782,004;USSN09/927,790;USSN 10/218,102;PCT WO 98/07254;PCT WO 01/40091和PCTWO 02/25588中。在一个实施方案,每个可变位置可明确地分类为核内、表面或边界位置,或是基本上类似于核心(core)、表面或边界的分类。
在一个可选的实施方案中,允许在可变位置通过假设驱动一组氨基酸的选择。由于蛋白质结构生物学领域的技术人员通过主观评价或图像检查模板结构,所以应当考虑在可变位置所假设的氨基酸类型。例如,如果推测在可变位置氢键相互作用有利,则可考虑具有形成氢键能力的极性残基,即使该位置位于核内。同样地,如果猜测在可变位置疏水堆积相互作用有利,则可考虑具有形成有利堆积相互作用的非极性残基,即使该位置在表面上。其它通过假设驱动方法的实例可涉及主链柔性或蛋白质折叠的结果。本领域公知某些残基,例如脯氨酸、甘氨酸以及半胱氨酸在蛋白质结构与稳定性中起重要作用。较所有其它氨基酸而言,甘氨酸能加强主链柔性,脯氨酸对主链的约束超过了所有其它氨基酸,以及半胱氨酸可形成二硫键。因此,包括一种或多种这些氨基酸类型可有利于实现所需的设计目的。可选地,从所考虑的氨基酸列表中排除一种或多种这些氨基酸类型也是有利于实现所需的设计目的。
在一个可选的实施方案中,氨基酸的子集可被选择以使覆盖范围最大化。在该情况下,在可变位置可考虑具有类似于模板结构中氨基酸性质的额外氨基酸。例如,如果模板结构中可变位置的所述残基是大疏水残基。则在该位置可考虑额外的大疏水氨基酸。可选地,氨基酸的子集可被选择以使多样性最大化。在该情况下,在可变位置可考虑具有不同于模板结构中那些氨基酸性质的氨基酸。例如,如果模板结构中可变位置的所述残基是大疏水残基,则可考虑小的、极性等的氨基酸。
本领域公知在设计计算过程中,一些计算筛选方法仅需要确定所考虑氨基酸的同一性。即,不需要关于所述氨基酸侧链的构象或可能构象的信息。其它优选的方法利用了一组离散的侧链构象,称为旋转异构体,其对于每个氨基酸而言是要考虑的。因此,在每个可变和漂浮位置可考虑一组旋转异构体。旋转异构体可获得自公开的旋转异构体文库(参见例如,Lovel等.,2000,Proteins:Structure Function and Genetics 40:389-408;Dunbrack和Cohen,1997,Protein Science 6:1661-1681;DeMaeyer等.,1997,Folding andDesign 2:53-66;Tuffery等.,1991,J Biomol Struct Dyn 8:1267-1289,Ponder和Richards,1987,J Mol Biol 193:775-791)。本领域公知旋转异构体文库可以是不依赖于主链的或依赖于主链的。旋转异构体也可获得自分子力学或从头计算,以及使用其它方法。在一个优选的实施方案中,使用了一种柔性旋转异构体模型(参见Mendes等.,1999,Proteins:Structure,Function,andGenetics 37:530-543)。同样地,可使用人工产生的旋转异构体,或对于每个氨基酸和/或可变位置扩大所设置的选择。在一个实施方案中,至少一种不是能量低的构象包括于旋转异构体列中。在一个可选的实施方案中,模板结构中可变位置残基的所述旋转异构体包括于该可变位置许可的旋转异构体列中。在一个可选的实施方案中,仅提供了在可变位置所考虑的每个氨基酸的同一性,在设计计算过程中并不使用每个氨基酸的特定构象态。即,对于计算筛选而言,旋转异构体的使用不是必需的。
实验信息可用于指导可变位置的选择和/或在可变位置所考虑的氨基酸的选择。本领域公知诱变实验通常用于确定在蛋白质结构和功能中某些残基的作用,例如,哪几个蛋白质残基在决定稳定性中起作用,或哪几个残基构成了蛋白质-蛋白质相互作用的界面。获得自上述实验的数据在本发明中是有用的。例如,对于增加Fc/FcγR亲和力而言,可变位置可包括其上突变已显示能影响结合的可变的所有位置。同样地,上述实验的结果可用于指导在可变位置所容许的氨基酸类型的选择。例如,如果发现某些类型的氨基酸取代是有利的,可考虑相似类型的那些氨基酸。在一个实施方案中,在可变位置可考虑额外氨基酸,其具有类似于那些实验中发现是有利的氨基酸的性质。举例来说,如果在Fc/FcγR界面可变位置的根据实验突变为大疏水残基被认为是有利的话,那么在计算筛选中,使用者可选择在该位置包括额外的大疏水氨基酸。本领域公知展示和其它选择技术可结合随机诱变以产生一列或多列对所选定特性有利的氨基酸取代。获得自上述实验工作中的上述一列或数列氨基酸取代可供本发明使用。例如,在上述实验中所发现的不变位置在计算筛选计算中可排除作为可变位置,反之发现能更容易接受突变或能顺利响应突变的位置可选择作为可变位置。同样地,来自上述实验的结果可用于指导在可变位置所容许的氨基酸类型的选择。例如,如果某些类型的氨基酸在实验淘选中出现更频繁,可考虑那些氨基酸的相似类型。在一个实施方案中,在可变位置可考虑额外的氨基酸,其具有类似于那些实验中发现是有利的氨基酸的性质。例如,如果在位于Fc/FcγR界面的可变位置所选择的突变被发现是不荷电的极性氨基酸,使用者可选择在该位置上包括额外的不荷电的极性氨基酸,或可能荷电的极性氨基酸。
序列信息也可用于指导可变位置的选择和/或在可变位置所考虑的氨基酸的选择。本领域公知一些蛋白质具有共同的结构骨架(scaffold)以及在序列上是同源的。该信息可用于获得对蛋白质家族中特定位置的了解。本领域公知序列比对通常用于确定哪几个蛋白质残基是保守的以及哪几个是非保守的。换言之,通过蛋白质序列的比较和对比比对,可观察到位置上的可变性程度,亦可观察到位置上天然出现的氨基酸类型。获得自上述分析的数据在本发明中是有用的。使用序列信息来选择可变位置及在可变位置所考虑的氨基酸的好处具有几方面。对于可变位置的选择而言,使用序列信息主要的优点在于可获得对哪几个位置是更能容许突变以及哪几个位置是较少容许突变的了解。因此序列信息可帮助确保特性多样性,即对蛋白质结构、稳定性等无害的突变在计算上被采样。所述相同的优点适用于在可变位置使用序列信息来选择所考虑的氨基酸类型。即,出现在蛋白质序列比对中的氨基酸组可视为根据进化预筛选的,对于与蛋白质的结构、稳定性、溶解性、功能等的相容性而言,其较随机筛选的具有更高机率。因此更高的特性多样性在计算上被采样。在可变位置使用序列信息来选择所考虑的氨基酸类型的第二种好处是某些比对可提供较随机序列可具有较小免疫原性的序列。举例来说,如果在给定可变位置所考虑的氨基酸是在人蛋白质序列比对中在该位置所出现的氨基酸组,则那些氨基酸可视为根据性质(nature)预筛选的,如果所述优化的蛋白质用作为人治疗剂,则那些氨基酸用于不产生或产生低的免疫应答。
序列的来源可广泛多变,包括一种或多种已知的数据库,包括但不限于Kabat数据库(Johnson和Wu,2001,Nucleic Acids Res 29:205-206;Johnson和Wu,2000,Nucleic Acids Res 28:214-218)、IMGT数据库(IMGT theinternational ImMunoGeneTics information system_;Lefranc等.,1999,Nucleic Acids Res 27:209-212;Ruiz等.,2000 Nucleic Acids Re.28:219-221;Lefranc等.,2001,Nucleic Acids Res 29:207-209;Lefranc等.,2003,NucleicAcids Res 31:307-310)和VBASE、SwissProt、GenBank和Entrez、以及EMBL核苷酸序列数据库。蛋白质序列信息可获得自、编译自和/或产生自来自任意生物体的天然存在的蛋白质的序列比对,所述生物体包括但不限于哺乳动物。蛋白质序列信息可获得自私人编译的数据库。在本领域中公知众多基于序列的比对程序和方法,所有的这些程序和方法可供本发明使用以产生包含Fc和Fc配体的蛋白质的序列比对。
一旦进行了比对,序列信息可用于指导可变位置的选择。上述序列信息可固有地或以其它方式涉及所给定位置的可变性。本文中的可变性应区别于可变位置。可变性指在序列比对中在所给定位置出现的氨基酸类型显示出的变化程度。可变位置,再次重申,是使用者所选择的在计算筛选计算过程中以改变氨基酸同一性的位置。可变性可为生物信息学领域的技术人员所定性确定。也有为本领域所公知的定量确定可变性的方法,其可供本发明使用。最优选的实施方案测量了信息熵(Information Entropy)或香农熵(Shannon Entropy)。可变位置可基于获得自密切相关的蛋白质序列或较不密切相关的序列的序列信息以选择。
使用序列信息来选择可变位置可广泛地供本发明使用。例如,如果在模板结构中Fc/FcγR界面位置是色氨酸,且在比对中观察到在多于90%的序列中色氨酸位于该位置,可能有益于该位置的固定。反之,如果发现另一个界面位置具有较高水平的可变性,例如如果在该位置观察到五种不同的氨基酸,每种具有大约20%的频率,则该位置可被选择作为可变位置。在另一个实施方案中,对排列的蛋白质序列的图像检查可取代或有助于对蛋白质结构的图像检查。序列信息也可用于在可变位置指导所考虑的氨基酸的选择。上述序列信息可涉及在给定的位置一个氨基酸、多个氨基酸或氨基酸类型(例如极性或非极性、荷电或不荷电)固有地或以其它方式出现的频率的多少。在一个实施方案中,在可变位置所考虑的氨基酸组可包含在比对中在该位置所观察到的氨基酸组。因此,在计算筛选计算中所述位置特异性比对信息可直接用于产生在可变位置上所考虑的氨基酸列。上述策略为本领域众所周知;参见例如Lehmann和Wyss,2001,Curr Opin Biotechnol12(4):371-5;Lehmann等.,2000,Biochim Biophys Acta 1543(2):408-415;Rath和Davidson,2000,Protein Sci,9(12):2457-69;Lehmann等.,2000,Protein Eng 13(1):49-57;Desjarlais和Berg,1993,Proc Natl Acad Sci USA 90(6):2256-60;Desjarlais和Berg,1992,Proteins 12(2):101-4;Henikoff和Henikoff,2000,Adv Protein Chem 54:73-97;Henikoff和Henikoff,1994,J MolBiol 243(4):574-8。在一个可选的实施方案中,在一个或多个可变位置所考虑的氨基酸组可包含比对中最频繁观察到的氨基酸组。因此,特定标准应用于在确定是否氨基酸或氨基酸类型的频率能证明其包含于该氨基酸组中,所述氨基酸组为可变位置上所考虑的。本领域公知在比对中使用统计学方法来计算在任一位置序列多样性以及在某一位置每个氨基酸出现的频率或概率,可对序列比对进行分析,上述数据可用于确定哪几种氨基酸类型要考虑。在最简单的实施方案中,通过对一个比对位置所观察到的一种氨基酸次数的数量计数,然后除以该比对中的序列的总数而计算出这些出现频率。在其它的实施方案中,通过多种可能的机制对每个序列、位置或氨基酸对计数程序的贡献进行权重(weighted)。在一个优选的实施方案中,根据在所述比对中相对于其它序列的其多样性权重进行每个比对序列对频率统计的贡献的权重。用于实现该目的的常用策略是Henikoff和Henikoff(Henikoff和Henikoff,2000,Adv Protein Chem 54:73-97;Henikoff和Henikoff,1994,J Mol Biol 243:574-8)所推荐的序列权重系统。在一个优选的实施方案中,所述每个序列对所述统计表的贡献依赖于其对靶序列的相似性程度,即所使用的模板结构,使得对该靶序列具有更高相似性的序列得到更高的权重。相似性测量方法的实例包括,但不限于,序列同一性、BLOSUM相似性打分、PAM矩阵相似性打分和BLAST打分。在一个可选的实施方案中,所述每个序列对统计表的贡献依赖于其已知的物理或功能特性。这些特性包括但不限于热和化学稳定性、活性的贡献以及溶解性。举例来说,当优化非糖基化Fc的溶解性时,在比对中的那些序列应当是已知最能溶解的(例如参见Ewert等.,2003,J Mol Biol 325:531-553),可对所计算的频率贡献更多。
在序列比对中无论什么标准在可变位置用于选择所考虑的氨基酸组,使用序列信息来选择考虑的氨基酸可广泛地应用于本发明中。例如,通过置换暴露的非极性表面残基以优化Fc溶解性,所考虑的氨基酸可被选择作为氨基酸组,或那些符合某一标准的氨基酸的子集,就是在蛋白质序列比对中在该位置所观察到的。作为另一个实例,可主观地对源自序列比对的一列氨基酸添加或删除一个或多个氨基酸以最大化覆盖范围。例如,在可变位置可考虑具有类似于那些在序列比对中发现的氨基酸的性质的额外氨基酸。例如,如果在序列比对中观察到已知的或推测能结合FcγR的Fc位置具有不荷电的极性氨基酸,则在计算筛选计算中使用者可选择在该位置以包括额外不荷电的极性氨基酸,或荷电的极性氨基酸。
在一个实施方案中,将序列比对信息与能量计算组合,讨论如下。例如,拟能量(pseudo energies)可源自产生打分函数的序列信息。使用基于序列的打分函数可明显有助于减少计算的复杂性。然而,本领域技术人员应当理解单独使用基于序列的打分函数可能是不适当的,因为在突变之间序列信息通常显示易误解的相互关系,在实际上可导致结构上的不一致。因此,在一个优选的实施方案中,单独使用基于结构的能量计算方法或与基于序列的打分函数组合使用。即,优选的实施方案并不单独依赖于序列比对信息作为分析步骤。
能量计算涉及氨基酸修饰打分方法。通过一种或多种打分函数,相互作用的能量得到测量。多种打分函数可供本发明用于计算能量。打分函数可包括许多势(potentials),在本文中称为打分函数的能项,包括但不限于范德华势、氢键势、原子溶剂化势或其它溶剂化势、二级结构倾向势、静电势、扭角势和熵势。至少一种能项被用于对每个可变或漂浮位置打分,尽管取决于所述位置、所考虑的氨基酸以及其它需要考虑的事项,所述能项可能不同。在一个实施方案中,利用了使用一种能项的打分函数。在最优选的实施方案中,使用含有多于一种能项的打分函数计算能量,例如描述范德华、溶剂化、静电和氢键相互作用的能项,以及它们的组合。在额外的实施方案中,额外的能项包括但不限于熵项、扭角能以及基于已知的能量。
在US 6,188,965;US 6,269,312;US 6,403,312;USSN 09/782,004;USSN09/927,790;USSN 09/877,695;USSN 10/071,859,USSN 10/218,102;PCTWO 98/07254;PCT WO 01/40091以及PCT WO 02/25588中描述了多种打分函数。本领域技术人员应当理解,打分函数无需受限于物理化学能项。例如,基于所知的势可供本发明的计算筛选方法学应用。上述基于所知的势可源自蛋白质序列和/或结构统计,包括但不限于穿织(threading)势、参考能量、拟能量、基于同源性的能量以及源自序列比对的序列偏移。在一个优选的实施方案中,一种打分函数得到改良以包括用于免疫原性的模型,诸如源自肽与MHC(主要组织相容性复合体)结合数据的函数,其可用于鉴定潜在的免疫原性序列(参见例如USSN 09/903,378;USSN 10/039,170;USSN60/222,697;USSN 10/339788;PCT WO 01/21823和PCT WO 02/00165)。在一个实施方案中,序列比对信息能用于对氨基酸取代物打分。举例来说,不管所述蛋白质的来源是否是人类、猴子、小鼠或其它,蛋白质序列的比较结果在本发明的计算筛选方法学中可用于提示氨基酸突变或对氨基酸突变打分。在一个实施方案中,本领域公知在计算分析过程中一种或多种打分函数可得到优化或“训练”,接着使用优化的系统再运行分析过程。上述改变的打分函数可获得自例如,通过使用实验数据训练的打分函数。本领域技术人员应当理解,许多力场,其由一种或多种能项组成,可作为打分函数。力场包括但不限于从头(ab inito)力场或量子力场、半经验(semi-empirical)力场以及分子力场。基于已知的或使用统计学方法的打分函数可供本发明使用。这些方法可用于评估序列和三维蛋白质结构之间的匹配,并因此对于蛋白质结构的可信度而言,可用于对氨基酸取代打分。在一个实施方案中,通过分别计算突变序列打分的分子动力学计算可用于计算筛选序列。
可用多种方式来表示氨基酸以便进行有效的能量计算。在一个优选的实施方案中,所考虑的氨基酸表示为如前所述的旋转异构体,在每个可变以及漂浮位置上计算每个可能的旋转异构体与其它可变以及漂浮异构体、固定位置残基、以及主链结构和任何非蛋白质原子的相互作用的能量(或分数)。在一个优选的实施方案中,对每个可变和漂浮位置上每条侧链旋转异构体的两组相互作用能量:在旋转异构体和固定原子之间的相互作用能量(“单重”能量),以及在可变和漂浮位置旋转异构体与在每个其它可变和漂浮位置上的所有其它可能的旋转异构体之间的相互作用能量(“双重”能量)进行计算。在一个可选的实施方案中,对于固定位置以及可变和漂浮位置计算单重和双重能量。在一个可选的实施方案中,所考虑的氨基酸并不表示为旋转异构体。
计算筛选的一个重要组成部分是鉴定一种或多种具有有利分数的序列,即具有低能量的序列。从极大数量的可能性中确定一组低能量序列是非同寻常的,组合优化算法可用于解决该难题。对于组合优化算法而言,通过调查在典型的计算筛选计算中所考虑的可能性的数量来阐明其所需要的。对于所给定的设计问题而言,旋转异构体集合(rotamer sets)的离散(discrete)特性容许对可能的旋转异构体序列的数量进行简单计算。主链长度n与m(每个位置可能的旋转异构体数)组合可具有mn条可能的旋转异构体序列,具有随着序列长度而指数式增长的数量。对于特别简单计算而言,有可能去检查每条可能的序列以便鉴定最优序列和/或一种或多种有利序列。然而,对于典型的设计问题而言,可能序列的数量(高达1080或更多)是足够大的,以致很难对每条可能序列进行检查。然后,多种组合优化算法可用于鉴定优化序列和/或一种或多种有利序列。组合优化算法可分为两类:(1)如果它们收敛(converge)的话,能保证返回全局极小值能量构型的那些,和(2)并不能保证返回全局极小值能量构型,但总是能返回溶液构型的那些。第一类算法的实例包括但不限于死端消除法(Dead-End Elimination)(DEE)和分支与边界法(Branch & Bound)(B&B)(包括分支(Branch)和终止(Terminate))(Gordon和Mayo,1999,Structure Fold Des 7:1089-98)。第二类算法的实例包括但不限于蒙特卡罗法(Monte Carlo)(MC)、自洽平均场法(self-consistent mean field)(SCMF)、玻耳兹曼采样法(Boltzmannsampling)(Metropolis等.,1953,J Chem Phys 21:1087)、模拟退火法(Kirkpatrick等.,1983,Science,220:671-680)、遗传算法(GA)以及快速和精确侧链拓朴学及能量精化(FASTER)(Desmet,等.,2002,Proteins,48:31-43)。一种组合优化算法可单独使用或与其它组合优化算法共同使用。
在本发明的一个实施方案中,适用于组合优化算法的策略用于寻找全局极小值能量构型(global minimum energy configuration)。在一个可选的实施方案中,所述策略用于寻找一种或多种低能量或有利序列。在一个可选的实施方案中,所述策略用于寻找全局极小值能量构型,接着用于寻找一种或多种低能量或有利序列。例如,概述于USSN 6,269,312,优选的实施方案利用了死端消除(DEE)法和蒙特卡罗法。在其它实施方案中,在其它搜索方法中使用禁忌搜索算法(tabu search algorithms)或将其与死端消除法(DEE)和/或蒙特卡罗法组合(参见Modern Heuristic Search Methods,V.J.Rayward-Smith等编辑,1996,John WILEY & Sons Ltd.;USSN 10/218,102;和PCT WO 02/25588)。在另一个优选的实施方案中,可使用遗传算法;参见例如USSN 09/877,695和USSN 10/071,859。作为另外的实例,其更充分地描述于US 6,188,965;US 6,269,312;US 6,403,312;USSN 09/782,004;USSN 09/927,790;USSN 10/218,102;PCT WO 98/07254;PCT WO 01/40091和PCT WO 02/25588中,可达到全局(global)最优值,接着可进行进一步的计算处理,其产生了额外的优化序列。在最简单的实施方案中,设计计算无需组合。即,在单个可变位置能量计算单独用于评估氨基酸取代。对于其它计算而言,优选在多于一个的可变位置上评估氨基酸取代。在一个优选的实施方案中,在组合优化前计算所有可能的相互作用能。在一个可选地优选的实施方案中,在组合优化过程中视需要可进行能量计算。
文库产生
本发明提供了用于产生文库的方法,所述文库可随后用实验方法筛选以挑选优化的Fc变体。本文中使用的“
文库”意指一种或多种Fc变体的组。文库可指以任何形式存在的变体组。在一个实施方案中,所述文库是一列核酸或氨基酸序列,或在可变位置的一列核酸或氨基酸取代物。例如,如下用于说明本发明的实例提供了在可变位置的氨基酸取代物的文库。在一个实施方案中,文库是至少一种序列的一列(a list),所述序列是对所需特性优化的Fc变体。例如参见,Filikov等.,2002,Protein Sci 11:1452-1461和Luo等.,2002,Protein Sci 11:1218-1226。在一个可选的实施方案中,文库可确定为组合的列,意指对于每个可变位置产生一列氨基酸取代物,暗示每个取代物要与在所有其它可变位置上所有其它设计的取代物组合。在该情况下,在所有可变位置的所有可能性的组合的扩大产生了大的清楚定义的文库。文库可指多肽的物理组合物,所述多肽包含Fc区或该Fc区的一些结构域或片段。因此文库可指以纯化或未纯化形式存在的抗体或Fc融合体的物理组合物。文库可指编码该文库序列的核酸的物理组合物。所述核酸可以是编码该文库成员的基因、具有任意可操作连接的核酸的编码该文库成员的基因、或编码该文库成员的表达载体和任意其它可操作地连接的调节序列、可选标记、融合构建体和/或其它元件。例如,所述文库可以是一组编码Fc文库成员的哺乳动物表达载体,其蛋白质产物可随后通过实验方法得到表达、纯化及筛选。作为另一个实例,所述文库可以是展示文库。上述文库可以,例如,包含一组编码可操作地连接有一些融合伴侣的文库成员的表达载体,所述融合伴侣能实现噬菌体展示、核糖体展示、酵母展示、细菌表面展示等等。
可使用输出序列或来自计算筛选的序列产生所述文库。如上所讨论,计算产生的文库明显具有更多的稳定性、正确折叠以及相对于随机产生的文库更多的功能序列。因此,计算筛选增加了对所述设计目的优化的蛋白质的鉴别机率。文库中的序列组通常,但不总是,明显地不同于亲本序列,尽管在一些例子中所述文库优选含有亲本序列。本领域公知具有多种可使文库源自计算筛选计算输出的方法。例如,描述于US 6,403,312;USSN09/782,004;USSN 09/927,790;USSN 10/218,102;PCT WO 01/40091和PCTWO 02/25588中的产生文库的方法可供本发明使用。在一个实施方案中,序列分数在一定范围内的全局最优化序列(global optimum sequence)可包括于文库中。例如,所有序列都在10kcal/mol内的最低能量序列可作为文库。在一个可选的实施方案中,可以使用序列分数在一定范围内的一种或多种局部极小值序列(local minima sequence)。在一个优选的实施方案中,所述文库序列获得自过滤组(filtered set)。通过多种方法可产生上述列或组,为本领域所公知,例如使用诸如蒙特卡罗、B&B或SCMF的算法。例如,在过滤组中上限为103或上限为105的序列可包含在所述文库。可选地,通过所有突变组合所限定的序列总数可用于终止文库的评判标准。对于重组序列的总数而言,优选值范围在10-1020,特别优选值范围在100-109。可选地,当预先确定每个位置突变数达到时可强迫终止。在一些实施方案中,并不进行终止的序列包括在文库中。在一些情况下其是所需的,例如以评估产生文库的方法,以提供对照或比较,或对额外序列空间采样。例如,在文库中可包括亲本序列,即使其没有进行终止(cutoff)。
聚类算法(Clustering algorithms)可用于将来自计算筛选方法的序列分类为具有代表性的组。举例来说,描述于USSN 10/218,102和PCT WO02/25588的聚类方法及其应用可供本发明使用。例如通过相似性可定义具有代表性的组。相似性的测量包括,但不限于对序列相似性和能量相似性的测量。因此计算筛选的输出序列可在局部极小值(local minima)周围聚类,在本文中称为序列的聚类组(clastered set)。例如,封闭序列空间的序列组可与其它组区分。在一个实施方案中,通过在文库中包括了一些、大多数或所有的序列,在一聚类组或其子集范围内覆盖范围可最大化,所述序列组成一种或多种序列聚类组。例如,通过在这些组所在文库的范围内包括大多数的序列,有利于在一、二或三最低能量聚类组范围内最大化覆盖范围。在一个可选的实施方案中,通过在文库范围内仅包括在每一聚类组范围内的序列子集,可对贯穿于序列聚类组多样性采样。例如,通过在文库中包括来自每个聚类组的最低能量序列,可对所有或大多数聚类组广泛地采样。
序列信息可用于指导或过滤用于文库产生的计算筛选结果。如所讨论的,通过比较和对比蛋白质序列的比对,在位置上的可变性程度以及可自发出现在该位置的氨基酸类型可得到观察。在本发明中获得自上述分析的数据是有用的。已讨论了使用序列信息的好处,那些好处可同样地适用于指导文库产生的序列信息的使用。序列比对中出现的氨基酸组可视为通过进化预筛选的,对于与蛋白质的结构、稳定性、溶解性、功能以及免疫原性的相容性而言,其较随机的具有更高机率。已讨论了序列来源的多样性,以及用于产生序列比对的方法,其可用在以序列信息来指导文库的产生。同样地,如上所讨论,在比对中各种标准可应用于确定某些残基的重要性或权重。这些方法也可供用序列信息来指导文库的产生。使用序列信息从计算筛选结果中指导文库产生可供本发明广泛使用。在一个实施方案中,序列信息用于从计算筛选输出中过滤序列。换言之,一些取代从计算输出(computational output)中减去以产生文库。例如所产生的计算筛选计算或各种计算的结果输出可被过滤使得该文库仅包括符合某些标准的那些氨基酸,或那些氨基酸的子集,例如在序列比对中在该位置上所观察到的。在一个可选的实施方案中,序列信息用于将序列添加到计算筛选输出中。即,序列信息用于指导额外氨基酸的选择,所述氨基酸被添加到计算输出中以产生文库。例如,对于给定位置而言,来自计算筛选计算的氨基酸输出组可得到扩大以包括一种或多种氨基酸,所述氨基酸在蛋白质序列比对中在该位置被观察到。在一个可选的实施方案中,基于序列比对信息,一种或多种氨基酸可添加到计算筛选序列输出中,或从计算筛选序列输出中减去以便最大化覆盖范围或多样性。举例来说,具有类似于那些在序列比对中所发现的氨基酸的性质的额外的氨基酸可添加入文库中。例如,如果在序列比对中观察到位置上具有不荷电极性氨基酸,在该位置的额外的不荷电极性氨基酸可包括于该文库中。
可对文库处理以进一步产生随后文库。因此,来自计算筛选计算的输出可视为初级文库(primary library)。所述初级文库可与来自其它计算或其它文库的其它初级文库组合,使用随后的计算、序列信息或其它分析或实验处理以产生随后文库,在本文中称为二级文库。从所述描述中应当理解,上述讨论的使用序列信息以指导或过滤文库自身是从初级文库产生二级文库的一种方法。在文库范围内,二级文库的产生给使用者以对参数更多的控制。能使实验筛选更有效率,并可容许来自实验结果的反馈以更容易得到解释,提供了更有效的设计/实验循环。
许多方法可用于从初级文库产生二级文库。例如USSN 10/218,102和PCT WO 02/25588中所描述的用于产生二级文库的方法可供本发明使用。通常出现在初级文库中的一些选择步骤以一些方式进行处理。例如,在一个实施方案中,出现了选择步骤,在该步骤中一些组的初级序列被选择以形成二级文库。在一个可选的实施方案中,选择步骤是计算步骤,通常还包括一个选择步骤,其中一些初级文库的子集被选择并接着进行进一步的计算分析,包括进一步的计算筛选和诸如“在计算机环境中”改组或重组的技术(参见,例如US 5,830,721;US 5,811,238;US 5,605,793和US 5,837,458、易错PCR,例如使用修饰的核苷酸;包括使用多个盒式的已知诱变技术;以及DNA改组(Crameri等.,1998,Nature 391:288-291;Coco等.,2001,NatBiotechnol 19:354-9;Coco等.,2002,Nat Biotechnol,20:1246-50),异源DNA采样(US 5,939,250);ITCHY(Ostermeier等.,1999,Nat Biotechnol 17:1205-1209);StEP(Zhao等.,1998,Nat Biotechnol 16:258-261),GSSM(US6,171,820和US 5,965,408);体内同源重组,连接酶辅助基因装配,末端互补PCR,前融合(profusion)(Roberts和Szostak,1997,Proc Natl Acad Sci USA94:12297-12302);酵母/细菌表面展示(Lu等.,1995,Biotechnology 13:366-372);Seed和Aruffo,1987,Proc Natl Acad Sci USA 84(10):3365-3369;Boder和Wittrup,1997,Nat Biotechnol 15:553-557)。在一个可选的实施方案中,出现的选择步骤是一种实验步骤,例如如下的任一文库筛选步骤,其中一些初级文库的子集被选择并接着用实验方法重新组合,例如使用一种如下讨论的定向进化(directed evolution)方法,以形成二级文库。在一个优选的实施方案中,如US 6,403,312所概述的产生并处理初级文库。
二级和随后文库的产生可供本发明广泛使用。在一个实施方案中,不同的初级文库可组合产生二级或随后文库。在另一个实施方案中,二级文库可通过在高度突变或高度保守的位置对序列多样性采样而产生。可分析该初级文库以确定在模板蛋白质中哪些氨基酸位置具有高突变频率,以及哪些位置具有低突变频率。例如,在计算筛选中显示了大量突变多样性的蛋白质中的位置在后一轮设计计算中可得到固定。当在第一轮时,同样大小的过滤组在第一文库中很大程度上保守的位置上将显示多样性。可选地,二级文库可通过在具有众多突变的位置上改变氨基酸而产生,但是使突变频率不超过某水平的位置保持不变。
该讨论并不意味着约束文库的产生,即初级文库随后产生二级文库。应当理解,初级和二级文库可进一步得到处理以产生三级文库、四级文库等。可见,文库产生是一种迭代过程。例如,将多种额外步骤应用于一种或多种二级文库可构建三级文库;例如,可进行进一步计算处理,二级文库可得到重组,或不同二级文库的子集可得到组合。在一个优选的实施方案中,可通过组合二级文库产生三级文库。举例来说,分析了蛋白质不同部分的初级和/或二级文库可组合产生三级文库,该文库处理蛋白质的组合的部分。在一个可选的实施方案中,来自初级文库的变体可与来自另一个初级文库的变体组合以提供组合的三级文库,具有较创建一个极长过滤组更低的计算成本。这些组合可用于,例如,分析大的蛋白质,特别是大的多结构域的蛋白质,Fc就是一个实例。因此将对上述二级文库产生的描述应用于产生初级文库之后的任意文库,最后结果是得到最终文库,该文库可用实验方法筛选以获得对设计目的而言优化的蛋白质变体。这些实例并不意在将二级文库的产生限制于要针对任何特定应用或本发明操作理论。反而,这些实例意在举例说明二级文库,以及诸如三级文库等的随后文库的产生,其可广泛地用于计算筛选方法学中,用于产生文库。
实验生产和筛选
本发明提供了用于生产和筛选Fc变体文库的方法。所述的方法无意将本发明限制于任何特定应用或操作理论。反而,所提供的方法意在举例说明通常一种或多种Fc变体或一种或多种Fc变体文库可用实验方法产生并筛选以获得最优化的Fc变体。Fc变体可在任意背景中得到生产和筛选,无论作为本文中明确定义的Fc区、其结构域或片段,还是包含Fc的更大的多肽诸如抗体或Fc融合体。用于抗体分子生物学、表达、纯化以及筛选的常规方法描述于Antibody Engineering,Duebel和Kontermann编辑,Springer-Verlag,Heidelberg,2001;以及Hayhurst和Georgiou,2001,Curr OpinChem Biol 5:683-689;Maynard和Georgiou,2000,Annu Rev Biomed Eng 2:339-76;Antibodies:A Laboratory Manual by Harlow & Lane,New York:ColdSpring Harbor Laboratory Press,1988。
在本发明的一个实施方案中,文库序列用于创建编码序列成员的核酸,接着所述核酸可克隆入宿主细胞,如果需要的话,表达并分析。因此,编码每个成员蛋白质序列的核酸,特别是DNA可得到制备。使用众所周知的方法完成这些实验。例如,描述于Molecular Cloning-ALaboratory Manual,第3版.(Maniatis,Cold Spring Harbor Laboratory Press,New York,2001),以及Current Protocols in Molecular Biology(John Wiley & Sons)的多种方法可供本发明使用。本领域技术人员应当理解对于包含大量序列的文库而言,恰当序列的产生可能花费巨大并且耗费时间。因此,有多种技术可用于有效产生本发明的文库。可供本发明使用的上述方法描述于或引用于US6,403,312;USSN 09/782,004;USSN 09/927,790;USSN 10/218,102;PCT WO01/40091和PCT WO 02/25588中。上述方法包括但不限于基因装配方法、基于PCR的方法和使用PCR变化形式的方法、基于连接酶链式反应的方法、诸如那些用于合成改组的汇集寡核苷酸的方法(pooled oligo method)、易错扩增方法和使用具有随机突变寡聚物的方法、经典的定点诱变方法、盒式突变以及其它扩增和基因合成方法。本领域公知有多种商业上可获得的试剂盒以及用于基因装配、诱变、载体亚克隆等等的方法,上述商品可供本发明使用以产生编码文库Fc变体成员的核酸。
通过培养用核酸转化的宿主细胞,优选用含有编码Fc变体的核酸的表达载体转化,在合适条件下诱导或引发蛋白质的表达可生产本发明的Fc变体。所述适于表达的条件可随着表达载体和宿主细胞的选择而变化,并可容易地为本领域技术人员通过常规实验方法而确定。可使用许多合适的宿主细胞,包括但不限于哺乳动物细胞、细菌、昆虫细胞以及酵母。例如,多种可供本发明使用的细胞系描述于ATCC_细胞系目录,可从美国典型培养物保藏中心获得。
在一个优选的实施方案中,在哺乳动物表达系统中表达Fc变体,包括在该系统中使用诸如逆转录病毒或腺病毒的病毒将表达构建体导入哺乳动物细胞。可使用任何哺乳动物细胞,特别优选人、小鼠、大鼠、仓鼠以及灵长类动物细胞。合适的细胞也包括已知的研究细胞,包括但不限于JurkatT细胞、NIH3T3、CHO、COS和293细胞。在一个可选地优选的实施方案中,文库蛋白质可在细菌细胞中得到表达。细菌表达系统为本领域所众所周知,包括大肠杆菌(E.coli)、枯草芽孢杆菌、乳脂链球菌(Streptococcuscremoris)和锁链状球菌(Streptococcus lividans)。在可选的实施方案中,Fc变体在昆虫细胞或酵母细胞中产生。在一个可选的实施方案中,使用无细胞翻译系统在体外表达Fc变体。体外翻译系统源自原核细胞(例如,大肠杆菌)和真核细胞(如,小麦胚(wheat germ)、兔网织红细胞),所述细胞可获得并可基于表达水平以及感兴趣蛋白质的功能而得到选择。例如,本领域技术人员应当理解,体外翻译是一些展示技术所必需的,例如核糖体展示。此外,Fc变体可通过化学合成方法产生。
编码本发明Fc变体的核酸可掺入表达载体中以便表达蛋白质。许多表达载体可用于蛋白质表达。表达载体可包含染色体外自主复制载体或整合入宿主基因组的载体。应构建与宿主细胞类型相容的表达载体。因此可供本发明使用的表达载体包括但不限于能使蛋白质在哺乳动物细胞、细菌、昆虫细胞、酵母以及体外系统中表达的那些。本领域公知多种表达载体可从商业上或以其它方式获得,可供本发明用于表达Fc变体蛋白。
表达载体通常包含与控制或调节序列、可选标记、任意融合伴侣和/或额外元件可操作地连接的蛋白质。本文中“
可操作地连接”意指所述核酸与其它核酸序列以功能关系放置。一般来说,包括转录和翻译调节核酸可操作地连接于编码Fc变体的核酸的这些表达载体,其通常适于宿主细胞使用以表达蛋白质。一般而言,所述转录和翻译调节序列可包括启动子序列、核糖体结合位点、转录起始和终止序列、翻译起始和终止序列,以及增强子或激活子序列。本领域也公知,表达载体通常含有选择基因或标记以容许对含有表达载体的转化宿主细胞选择。选择基因为本领域众所周知并可随着所使用的宿主细胞而改变。
Fc变体能可操作地连接于融合伴侣,使所表达的蛋白质的靶向、纯化、筛选、展示等能够实现。融合伴侣可通过接头序列与Fc变体序列连接。所述接头序列通常包含较少数量的氨基酸,一般少于10,尽管也可使用更长的接头。一般地,所选择的接头序列应具有柔性并能抗降解。本领域技术人员应当理解,许多序列可用作为接头。例如,常用的接头序列包含氨基酸序列GGGGS。融合伴侣可为靶向序列或信号序列,其将Fc变体蛋白质与任一相关的融合伴侣送往所需的细胞位置或细胞外介质。本领域公知某些信号序列可将蛋白质靶向分泌到培养基中或位于细胞的内外膜之间的壁膜间隙。融合伴侣也可以是编码使纯化和/或筛选可能的肽或蛋白质的序列。上述融合伴侣包括但不限于多组氨酸标签(His标签)(例如H6和H10或其它用于固定化金属亲和层析(IMAC)系统(如,Ni+2亲和柱)的标签)、GST融合体、MBP融合体、Strep标签、细菌酶BirA的BSP生物素化靶序列以及靶向抗体的附加表位(例如c-myc标签、flag标签等等)。本领域技术人员应当理解上述标记可用于纯化、筛选、或两者。例如,Fc变体可通过使用His标签将其固定在Ni+2亲和柱上而得到纯化,接着在纯化后同样的His标签可用于将抗体固定在Ni+2包被的培养板上,以进行ELISA或其它结合测定(如下所述)。融合伴侣可使利用选择方法筛选Fc变体成为可能(参见如下)。能用于多种选择方法的融合伴侣为本领域众所周知,所有这些融合伴侣都可供本发明使用。举例来说,通过将Fc变体文库的成员融合到基因III蛋白质上,噬菌体展示能得到使用(Kay等.,Phage display of peptides and proteins:alaboratory manual,Academic Press,San Diego,CA,1996;Lowman等,1991,Biochemistry 30:10832-10838;Smith,1985,Science 228:1315-1317)。融合伴侣能使Fc变体得到标记。可选地,融合伴侣可结合表达载体上的特定序列,能使该融合伴侣和相关的Fc变体与编码它们的核酸共价或非共价连接。例如,USSN 09/642,574;USSN 10/080,376;USSN 09/792,630;USSN10/023,208;USSN 09/792,626;USSN 10/082,671;USSN 09/953,351;USSN10/097,100;USSN 60/366,658;PCT WO 00/22906;PCT WO 01/49058;PCTWO 02/04852;PCT WO 02/04853;PCT WO 02/08023;PCT WO 01/28702;和PCT WO 02/07466描述了这样的融合伴侣和技术,其可供本发明使用。
本领域众所周知向宿主细胞中导入外源核酸的方法,所述方法可随着所使用的宿主细胞而变化。技术包括但不限于葡聚糖介导的转染、磷酸钙沉淀、氯化钙处理、1,5-二甲基-1,5-二氮十一亚甲基聚甲溴化物介导的转染、原生质体融合、电穿孔、病毒或噬菌体感染、在脂质体中多核苷酸的胶囊化(encapsulation)、以及直接将DNA微注射入细胞核。就哺乳动物而言,转染可以是瞬时的或稳定的。
在一个优选的实施方案中,Fc变体蛋白质在表达后得到纯化或分离。以本领域技术人员公知的各种方法可分离或纯化蛋白质。标准的纯化方法包括色谱技术,包括离子交换、疏水相互作用、亲和力、大小或凝胶过滤、以及反相,在大气压或高压下使用诸如FPLC和HPLC的系统进行。纯化方法还包括电泳、免疫学技术、沉淀、透析以及色谱聚焦技术。超滤和渗滤技术与蛋白质浓缩也是有用的。本领域众所周知许多天然蛋白质结合Fc和抗体,这些蛋白质可供本发明用于纯化Fc变体。例如,细菌蛋白A和G结合Fc区。同样地,细菌蛋白L结合某些抗体的Fab区,当然抗体的靶抗原也能结合Fab区。通过特定的融合伴侣纯化通常能得到实施。例如,如果采用GST融合,则Fc变体蛋白质可使用谷胱甘肽树脂进行纯化,如果使用His标签,则可使用Ni+2亲和层析,或如果使用flag标签,则可使用固定化抗-flag抗体。关于适合的纯化技术的常规指导,参见Protein Purification:Principles and Practice,第3版.,Scopes,Springer-Verlag,NY,1994。所需的纯化程度可基于Fc变体的筛选或用途而变化。在一些情况下无需纯化。例如在一个实施方案中,如果Fc变体被分泌,可直接从培养基中筛选。本领域众所周知,一些选择方法并不包括蛋白质的纯化。因此,举例来说,如果Fc变体文库制成噬菌体展示文库,则不需要进行蛋白质纯化。
Fc变体可使用多种方法筛选,包括但不限于使用体外分析法、体内和基于细胞分析法以及选择技术的那些。在筛选程序中可利用自动化和高通量筛选技术。可使用融合伴侣或标记进行筛选。如上已讨论了融合伴侣的使用。本文中“标记的”意指本发明的Fc变体具有一种或多种附在其上使筛选中的检测成为可能的元件、同位素或化合物。一般而言,标记分成三类:a)免疫标记,可以是掺入作为融合伴侣的表位,该表位被抗体识别,b)同位素标记,可以是放射性同位素或重同位素,以及c)小分子标记,可包括荧光和比色染料,或诸如生物素的使其它标记方法运作的分子。标记可以掺入化合物中任何位置,并可在蛋白质表达过程中在体外或体内掺入。
在一个优选的实施方案中,在体外分析法中Fc变体的功能和/或生物物理特性得到筛选。对于筛选感兴趣的特性而言,体外分析法可给予广阔的动态范围。可筛选的Fc变体特性包括但不限于稳定性、溶解性和对Fc配体的亲和力,例如对FcγR的亲和力。可同时或分别筛选多种特性。取决于测定所需,蛋白质可以是纯化的或未纯化的。在一个实施方案中,所述筛选是用于Fc变体与蛋白质或非蛋白质分子的结合的定性或定量的结合测定,这些非蛋白质分子已知或视为结合Fc变体。在一个优选的实施方案中,所述筛选是用于测量抗体或Fc融合体的靶抗原结合的结合测定。在一个可选地优选的实施方案中,所述筛选是用于Fc变体与Fc配体结合的测定,Fc配体包括但不限于FcγR家族、新生受体FcRn、补体蛋白C1q、以及细菌蛋白A和G。所述Fc配体可来自任何生物体,优选人、小鼠、大鼠、兔子和猴子。可使用多种本领域公知的方法进行结合分析,包括但不限于基于FRET(荧光共振能量转移)和BRET(生物发光共振能量转移)的分析法、AlphaScreenTM(增强发光邻近均质分析法(Amplified luminescent proximityhomogeneous Assay))、闪烁邻近分析法(Scintillation proximity Assay)、ELISA(酶联免疫吸附测定)、SPR(表面胞质团共振(Surface plasmonResonance),也已知为BIACORE_)、等温滴定量热法(isothermal titrationcalorimetry)、差示扫描量热法(differential scanning calorimetry)、凝胶电泳以及包括凝胶过滤的色谱法。这些方法和其它方法可利用某些Fc变体的融合伴侣或标记。可使用多种检测方法进行测定,包括但不限于生色的、荧光的、发光的或同位素标记。
Fc变体蛋白质的生物物理特性,例如稳定性和溶解性,通过使用多种本领域已知的方法可得到筛选。蛋白质稳定性通过测量在折叠和非折叠状态之间的热力学平衡可得到确定。例如,使用化学变性剂、加热或pH方法,本发明的Fc变体蛋白质可以解折叠,该转换可使用包括但不限于圆二色谱法、荧光光谱法、吸收光谱法、NMR波谱法、热量测定法以及蛋白质水解法的方法来监测。本领域技术人员应当理解,通过使用这些技术和其它技术,折叠和解折叠转换的动力学参数也可得到监测。通过使用许多本领域公知的方法,Fc变体蛋白质的溶解性和总体结构完整性可得到定量或定性测定。可供本发明用于鉴定Fc变体蛋白质生物物理特性的方法包括凝胶电泳、诸如大小排阻层析和反相高效层析的色谱法、质谱法、紫外吸收光谱分析法、荧光光谱法、圆二色谱法、等温滴定量热法、差示扫描量热法、超速离心分析法、动态光散射法、蛋白质水解法以及交联法、浊度测量法、过滤阻滞分析法(filter retardation assays)、免疫分析法、荧光染料结合分析法、蛋白质染色法、显微镜法以及通过ELISA或其它结合分析法对聚集的检测。使用X-射线晶体学技术分析结构,也可使用NMR波谱法。在一个实施方案中,通过在规定的某一段时间后测定溶液蛋白质量,可测定稳定性和/或溶解性。在该测定中,蛋白质可以暴露于或可以不暴露于某些极端条件下,例如提高的温度、低pH或存在变性剂。因为行使功能通常需要稳定、可溶和/或适当折叠/结构的蛋白质,前述的功能和结合分析法也提供了用于执行上述测量的方法。例如,包含Fc变体的溶液可对其与靶抗原的结合能力进行测定,接着在非常高的温度下暴露一段或多段规定的时间,然后再测定与抗原的结合。因为预期解折叠和聚集的蛋白质无法结合抗原,所以保留的活性量提供了对Fc变体的稳定性和溶解性的量度。
在一个优选的实施方案中,使用一种或多种基于细胞或体内分析法对文库进行筛选。对于上述分析法,纯化的或未纯化的Fc变体蛋白质通常作为外源物添加,使得细胞暴露于属于文库的单个变体或变体库。这些分析法通常,但并不总是,基于包含Fc变体的抗体或Fc融合体的功能;即抗体或Fc融合体结合靶抗原和介导某些生化反应的能力,例如效应器功能、配体/受体结合抑制、细胞凋亡等等。上述分析法通常包括监测细胞对抗体或Fc融合体的应答,例如细胞生存、细胞死亡、细胞形态学变化或诸如天然基因或报道基因细胞表达的转录激活。例如,上述分析法可测量Fc变体引发ADCC、ADCP或CDC的能力。对于某些分析法而言,可能需要添加除靶细胞之外的额外的细胞或组分,例如血清补体或诸如外周血单个核细胞(PBMCs)、NK细胞、巨噬细胞等的效应细胞。上述额外的细胞可来自任何生物体,优选人、小鼠、大鼠、兔子和猴子。抗体和Fc融合体可引发表达了所述抗体靶抗原的某些细胞系的细胞凋亡,或它们可通过已添加到该分析中的免疫细胞介导对靶细胞的攻击。用于监测细胞死亡或生存能力的方法为本领域所公知,包括使用染料、免疫化学、细胞化学和放射性试剂。例如,半胱天冬酶染色分析法能测定细胞凋亡,摄取或释放放射性底物或诸如alamar蓝的荧光染料能监测细胞生长或激活。在一个优选的实施方案中,使用了基于EuTDA的DELFIA_细胞毒性测定法(Perkin Elmer,MA)。可选地,可通过测量一种或多种天然胞内蛋白质,例如乳酸脱氢酶的释放,以监测死亡或损伤的靶细胞。在基于细胞的测定法中转录激活也可用作为分析功能的方法。在该情况下,通过对可能被上调的天然基因或蛋白质的分析以监测应答,例如可测定某些白细胞介素的释放,或可选地通过报道物构建体读出结果。基于细胞的测定法也可包括对细胞形态学改变的测定,该形态学改变作为Fc变体存在的应答。用于上述测定法的细胞类型可以是原核或真核的,可采用本领域公知的多种细胞系。
可选地,使用已转化或转染编码所述Fc变体核酸的细胞,可进行基于细胞的筛选。即,Fc变体蛋白质并不作为外源物添加到细胞中。例如,在一个实施方案中,所述基于细胞的筛选使用了细胞表面展示。可使用融合伴侣以使Fc变体在细胞表面得到展示(Witrrup,2001,Curr Opin Biotechnol,12:395-399)。可供本发明使用的细胞表面展示方法包括但不限于在细菌(Georgiou等.,1997,Nat Biotechnol 15:29-34;Georgiou等.,1993,TrendsBiotechnol 11:6-10;Lee等.,2000,Nat Biotechnol 18:645-648;Jun等.,1998,Nat Biotechnol 16:576-80)、酵母(Boder和Wittrup,2000,Methods Enzymol328:430-44;Boder和Wittrup,1997,Nat Biotechnol 15:553-557)以及哺乳动物细胞(Whitehorn等,1995,Bio/technology 13:1215-1219)上展示。在一个可选的实施方案中,Fc变体蛋白质并不在细胞表面展示,反而在细胞内或在某些其它细胞区室中被筛选。例如,周质表达和细胞计数筛选(Chen等.,2001,Nat Biotechnol 19:537-542)、蛋白质片段互补测定(Johnsson和Varshavsky,1994,Proc Natl Acad Sci USA 91:10340-10344.;Pelletier等,1998,Proc Natl Acad Sci USA 95:12141-12146)以及酵母双杂交筛选(Fields和Song,1989,Nature 340:245-246)可供本发明使用。可选地,如果多肽包含所述Fc变体,例如抗体或Fc融合体,可赋予细胞一些可选择的生长有利条件,所述特性可用于对Fc变体筛选或选择。
本领域公知,筛选方法的子集是对文库的有利成员进行选择的那些。所述方法在本文中称为“
选择方法”,这些方法可供本发明用于筛选Fc变体文库。当使用选择方法筛选文库时,仅有那些有利的文库成员,即符合某些筛选标准,得到增殖、分离和/或观察。应当理解,因为仅有最恰当的变体得到观察,所以通过单独测定文库成员的适合度(fitness)的方法,能使大于该方法可筛选的那些的文库得到筛选。通过任何方法、技术,或共价或非共价地连接的融合伴侣、具有其基因型的Fc变体的表型(即具有编码其核酸的Fc变体的功能),能使选择得到实施。例如通过将文库成员与基因III蛋白质融合,能使噬菌体展示用作选择方法。可见,变体蛋白质的选择或分离符合某些标准,例如对FcγR的结合亲和力,也用于选择或分离编码其的核酸。一旦分离了,所述编码Fc变体的基因可接着被扩增。该分离和扩增过程,称为淘选(panning),可重复进行,容许有利的Fc变体在文库中得到富集。最后对附在其上的核酸进行测序的核酸可供基因鉴定使用。
本领域公知的多种选择方法可供本发明用于筛选Fc变体文库。这些方法包括但不限于噬菌体展示(Phage display of peptides and proteins:alaboratory manual,Kay等.,1996,Academic Press,San Diego,CA,1996;Lowman等.,1991,Biochemistry 30:10832-10838;Smith,1985,Science 228:1315-1317)和其衍生的方法,诸如选择性噬菌体感染(Malmborg等.,1997,JMol Biol 273:544-551)、选择感染性噬菌体(Krebber等.,1997,J Mol Biol268:619-630)以及延迟感染性淘选(Benhar等,2000,J Mol Biol 301:893-904)、细胞表面展示(Witrrup,2001,Curr Opin Biotechnol,12:395-399)、如在细菌(Georgiou等,1997,Nat Biotechnol 15:29-34;Georgiou等,1993,Trends Biotechnol 11:6-10;Lee等,2000,Nat Biotechnol 18:645-648;Jun等.,1998,Nat Biotechnol 16:576-80)、酵母(Boder和Wittrup,2000,MethodsEnzymol 328:430-44;Boder和Wittrup,1997,Nat Biotechnol 15:553-557)和哺乳动物细胞(Whitehorn等.,1995,Bio/technology 13:1215-1219)上展示、以及体外展示技术(Amstutz等.,2001,Curr Opin Biotechnol 12:400-405),如多核糖体展示(Mattheakis等.,1994,Proc Natl Acad Sci USA 91:9022-9026)、核糖体展示(Hanes等.,1997,Proc Natl Acad Sci USA 94:4937-4942)、mRNA展示(Roberts和Szostak,1997,Proc Natl Acad Sci USA 94:12297-12302;Nemoto等.,1997,FEBS Lett 414:405-408)和核糖体失活展示系统(Zhou等,2002,J Am Chem Soc 124,538-543)。
其它可供本发明使用的选择方法包括不依赖于展示的方法,诸如体内方法,包括但不限于周质表达和细胞计数筛选(cytometric screening)(Chen等,2001,Nat Biotechnol 19:537-542)、蛋白质片段互补测定(Johnsson和Varshavsky,1994,Proc Natl Acad Sci USA 91:10340-10344;Pelletier等,1998,Proc Natl Acad Sci USA 95:12141-12146)和在选择模式中使用的(Visintin等,1999,Proc Natl Acad Sci USA 96:11723-11728)酵母双杂交筛选(Fields和Song,1989,Nature 340:245-246)。在一个可选的实施方案中,可通过在表达载体上结合有特定序列的融合伴侣使选择能够进行,因此能使该融合伴侣和相关的Fc变体文库成员与编码它们的核酸共价或非共价连接。例如,USSN 09/642,574;USSN 10/080,376;USSN 09/792,630;USSN 10/023,208;USSN 09/792,626;USSN 10/082,671;USSN 09/953,351;USSN 10/097,100;USSN 60/366,658;PCT WO 00/22906;PCT WO 01/49058;PCT WO 02/04852;PCT WO 02/04853;PCT WO 02/08023;PCT WO 01/28702;和PCT WO02/07466中描述了上述可供本发明使用的融合伴侣和技术。在一个可选的实施方案中,如果诸如抗体或Fc融合体的包含Fc变体的多肽表达可赋予细胞一些生长、复制或生存的优点,则可进行体内选择。
称为“定向进化(directed evolution)”方法的选择方法的子集是在选择过程中包括有利序列杂交(mating)或传代(breading)的那些,有时有新突变掺入。本领域技术人员应当理解,定向进化方法能使在文库中最有利序列的鉴定更容易,并能增加所筛选的序列的多样性。许多定向进化方法为本领域所公知,并可供本发明用于筛选Fc变体文库,包括但不限于DNA改组(PCT WO 00/42561A3;PCT WO 01/70947A3)、外显子改组(US 6,365,377;Kolkman和Stemmer,2001,Nat Biotechnol 19:423-428)、家族改组(Crameri等.,1998,Nature 391:288-291;US 6,376,246)、RACHITTTM(Coco等.,2001,Nat Biotechnol 19:354-359;PCT WO 02/06469)、STEP和随机引发体外重组(Zhao等.,1998,Nat Biotechnol 16:258-261;Shao等.,1998,Nucleic AcidsRes 26:681-683)、核酸外切酶介导的基因装配(US 6,352,842;US 6,361,974)、基因位点饱和诱变(Gene Site Saturation)MutagenesisTM(US 6,358,709)、基因重装配(Gene ReassemblyTM)(US 6,358,709)、SCRATCHY(Lutz等.,2001,Proc Natl Acad Sci USA 98:11248-11253)、DNA断裂法(DNA fragmentationmethod)(Kikuchi等.,Gene 236:159-167)、单链DNA改组(Kikuchi等.,2000,Gene 243:133-137)以及AMEsystemTM定向进化蛋白质工程技术(应用分子进化)(US US 5,824,514;US 5,817,483;US 5,814,476;US 5,763,192;US5,723,323)。
在细胞、组织以及全生物体实验中,包含本发明Fc变体的抗体和Fc融合体的生物学特性可得到鉴定。本领域公知,药物常在动物中测试,包括但不限于小鼠、大鼠、兔子、狗、猫、猪和猴子,以便测定药物对疾病或疾病模型的处理的有效性,或测定药物的药物代谢动力学、毒性以及其它特性。所述动物可称为疾病模型。治疗剂通常在小鼠中测试,包括但不限于裸鼠、SCID小鼠、异种移植小鼠和转基因小鼠(包括敲进和敲除)。例如,预计作为抗癌治疗剂的本发明的抗体或Fc融合体可在小鼠癌模型中例如在异种移植小鼠中测试。在该方法中,肿瘤或肿瘤细胞系移植或注射入小鼠,随后该小鼠用治疗剂处理以测定抗体或Fc融合体减缓或抑制癌生长的能力。上述实验方法可提供有意义的数据用于确定所述抗体或Fc融合体用作为治疗剂的可能性。任何生物体,优选哺乳动物,皆可用于测试。例如因为猴子与人的遗传相似性,所以它们可以是合适的治疗模型,并因此可用于测试本发明抗体和Fc融合体的有效性、毒性、药物代谢动力学或其它特性。为了被批准作为药物,最终必需在人类中测试本发明的抗体和Fc融合体,因此当然要考虑这些实验。因此本发明的抗体和Fc融合体可在人类中测试以确定它们的疗效、毒性、药物代谢动力学和/或其它临床特性。
实施例
提供如下实施例以举例说明本发明。这些实施例无意将本发明限制于任何特定应用或操作理论。
[184]对于所有讨论于本发明中的位置而言,编号方式依照Kabat的EU标引方式(Kabat等.,1991,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版.,United States Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda)。本领域技术人员应当理解该惯例由免疫球蛋白序列的特定区域中非连续编号方式组成,能够得到免疫球蛋白家族保守位置的标准化参考。因此,通过EU标引方式规定的任何给定免疫球蛋白的位置无需与其连续序列对应。图3显示了对于阿仑单抗抗体而言的连续的和EU标引的编号方案,以便更清楚地阐明该主题。也应当指出在许多Fc位置上已观察到多态性,包括但不限于Kabat 270、272、312、315、356和358,因此在本发明序列和科学文献序列之间可能存在微小差别。
实施例1.Fc文库的计算筛选和设计
进行计算筛选计算以设计优化的Fc变体。在几次计算/实验循环中,对Fc变体进行计算筛选、构建和实验研究。对于每次连续循环而言,提供的实验数据反馈入下一组计算筛选计算和文库设计中。所有的计算筛选计算和文库设计呈现于实施例1中。对于每组计算而言,提供了列出结果和提供有关信息和参数的表格。
[186]结合FcγR胞外域的Fc的几种不同结构作为模板结构用于计算筛选计算。可公开获得的Fc/FcγR复合物结构包括pdb登记号1E4K(Sondermann等.,2000,Nature 406:267-273.),以及pdb登记号1IIS和1IIX(Radaev等.,2001,J Biol Chem 276:16469-16477)。FcγRIIIb和FcγRIIIa的胞外区具有96%同一性,因此使用Fc/FcγRIIIb结构与使用FcγRIIIa基本上等效。虽然如此,对于某些计算而言,通过在1IIS和1E4K结构中对D129G突变模建(称为D129G 1IIS和D129G 1E4K模板结构),构建更精确的Fc/FcγRIIIa模板结构。此外,使用标准方法,可获得的FcγR序列信息,前述的Fc/FcγR结构,以及未结合复合物(pdb登记号1H9V)(Sondermann等.,2001,J Mol Biol 309:737-749)(pdb登记号1FCG)(Maxwell等.,1999,NatStruct Biol 6:437-442)、FcγRIIb(pdb登记号2FCB)(Sondermann等.,1999,Embo J 18:1095-1103)和FcγRIIIb(pdb登记号1E4J)(Sondermann等.,2000,Nature 406:267-273.)的结构信息,对与人FcγR11b、人F158FcγRIIIa和小鼠FcγRIII胞外结构域结合的人Fc结构模建。
通过图像检查前述Fc/FcγR和FcγR结构,并使用溶剂可接近性信息及序列信息,可变位置和在那些位置要被考虑的氨基酸得到选择。对于确定在此处取代可提供激活性和抑制性受体之间区别的亲和力的可变位置而言,Fc和FcγR的序列信息是特别有用的。事实上,对所有的Cγ2位置都用计算方法进行筛选。Fc结构是两条重链的同型二聚体(在1IIS、1IIX和1E4K结构中标记的链A和B),每条链包括铰链和Cγ2-Cγ3结构域(显示于图2)。因为FcγR(在1IIS、1IIX和1E4K结构中标记的链C)不对称结合Fc同型二聚体,所以在设计计算中通常分别考虑每条链。对于某些计算而言,邻近可变位置残基的Fc和/或FcγR残基是漂浮的,即在蛋白质设计计算中容许氨基酸构象改变,但不容许氨基酸同一性改变,以供构象调整使用。在下表中列出了对每组计算相关的这些残基。除非另有指示,所考虑的氨基酸通常属于核内(Core)、核内XM(Core XM)、表面(Surface)、边界(Boundary)、边界XM(Boundary XM)或所有20种分类的任一种。这些分类定义如下:核内(Core)=丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸以及甲硫氨酸;核内XM(Core XM)=丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸以及色氨酸;表面(Surface)=丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸以及组氨酸;边界(Boundary)=丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸、组氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸以及甲硫氨酸;边界XM(Boundary XM)=边界(Boundary)=丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸、赖氨酸、组氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸以及色氨酸;所有20种=所有20种天然存在的氨基酸。
[188]大多数计算依照两种常规类型计算筛选方法之一进行。在一种方法中,在可变位置氨基酸的构象表示为一组不受主链约束的侧链旋转异构体,其来自Dunbrack & Cohen的旋转异构体文库(Dunbrack等.,1997,Protein Sci 6:1661-1681)。通过使用含有描述范德华、溶剂化、静电和氢键相互作用的项(term)的力场(force field),以及使用死端消除(Dead EndElimination)(DEE)算法所确定的最优(基态)序列,在所选可变位置计算所考虑的氨基酸的所有可能组合的能量。本领域技术人员应当理解,由于主要在打分函数(scoring function)中存在错误,连同蛋白质中细小的构象差异能导致明显的稳定性差异的事实,所以所预测的最低能量序列并不必然是真实的最低能量序列。但是,所预测的基态序列可能接近真实的基态,因此通过评估序列的能量(所述序列在序列空间和围绕所预测基态的能量方面是接近的),额外有利的多样性可得到探查。为实现该目的并产生文库序列多样性,蒙特卡罗(Monte Carlo)(MC)算法可用于评估在所预测基态附近的1000个相似序列的能量。在序列中可变区位置由取代占据,这样的序列在1000个序列的组中的数量值可反映该取代是如何有利。该计算筛选方法基本上类似于Protein Design Automation_(PDA_)技术,描述于US 6,188,965;US 6,269,312;US 6,403,312;USSN 09/782,004;USSN 09/927,790;USSN10/218,102;PCT WO 98/07254;PCT WO 01/40091;和PCT WO 02/25588,为便于描述,在所有实施例中称为PDA_技术。列出这些计算结果的表格提供了在所指定链上的每个可变位置(栏1)、在每个可变位置上所考虑的氨基酸(栏2)、在每个可变位置上野生型(WT)Fc氨基酸同一性(栏3)、在DEE基态(ground state)序列中每个可变位置上氨基酸同一性(栏4)、以及在蒙特卡罗输出中观察到的氨基酸组和相应的取代占据(栏5)。
其它计算方法利用了遗传算法(GA)来筛选低能量序列,对于序列被采样的那些,在每轮“进化”过程中计算能量。可变和漂浮位置(floated position)的氨基酸构象表示为一组侧链旋转异构体,所述侧链旋转异构体源自不受主链约束的旋转异构体文库,所述文库使用了柔性旋转异构体模型(Mendes等.,1999,Proteins 37:530-543)。使用含有描述范德华、溶剂化(solvation)、静电和氢键相互作用的项的力场计算能量。该计算产生了具有300个序列的列(list),预测其应具有低能量。为便于结果分析和文库产生,使用最近邻居单键分级聚类算法(nearest neighbor single linkage hierarchical clusteringalgorithm)基于相似性分数将序列分为相关的组,所述300个输出序列通过计算聚类分为10组相似序列(Diamond,1995,Acta Cryst D51:127-135)。即,所有组内序列是最相似于同组内所有其它的序列,并较少相似于其它组中的序列。来自这十个簇(cluster)的每一个中的最低能量序列用来代表每组,并作为结果呈现。该计算筛选方法基本上类似于Sequence PredictionAlgorithmTM(SpATM)技术,描述于(Raha等.,2000,Protein Sci 9:1106-1119);USSN 09/877,695;和USSN 10/071,859,为便于描述,在所有实施例中称为SPATM技术。列出这些计算结果的表格提供了所指定链上的每个可变位置(栏1)、在每个可变位置的氨基酸(栏2)、在每个可变位置的野生型Fc氨基酸同一性(栏3)、和对于来自每个聚类(cluster)组的最低能量序列的可变位置的氨基酸同一性(栏4-13)。
应用计算筛选设计能量有利的相互作用,所述相互作用位于可变位置组的Fc/FcγR界面,其介导或可能介导与FcγR的结合。因为所述结合界面包括了在两条不同链上的大量Fc残基,并因为FcγR不对称地结合Fc,所以残基分为不同的相互作用可变位置组,并设计为独立的计算组。在许多情况下,选择这些组作为将耦合的(coupled)残基组,即一种或多种残基的能量取决于与一种或多种其它残基的同一性。可使用不同的模板结构,在许多情况下,计算研究了在两条链上的取代。对于大多数可变位置组而言,使用所描述的利用了PDA_和SPATM技术的计算筛选方法进行计算。这些计算和相关的结果列于如下表1-30。相关参数以及信息见于下列每张表,包括所用计算筛选方法,所用模板结构,所述结构是否具有糖原子,以及任何可漂浮的残基。例如,表2显示PDA_计算的结果,其中链C(FcγRIIIb受体)上的残基120,132,和134是漂浮的。
此外,包括在本发明组合物范围内的是在所列位置中具有任一所列氨基酸残基的抗体,所述抗体可单独或以任意组合存在(注意优选的组合列于权利要求、说明书概述和附图中)。一个优选的组合是处于基态的所列位置中所列的氨基酸残基(有时在本文中称为“全局解(global solution)”,以区别于野生型)。此外,在表格内及表格间SPATM蛋白质之间的组合也包括在本发明范围内。应该注意,在所给出的表格中,未列出的残基是未改变的残基,并由此保持野生型。例如在表4、栏4中显示的SPATM运行结果中,其产生了在六个所列位置具有六个所列氨基酸的蛋白质(例如,栏4(代表聚类1)是具有除239E、265G、267S、269Y、270T和299S外的野生型序列的单一蛋白质)。因此,每一个这些单独的蛋白质都包括在本发明范围内。可选,残基位置以及在这些位置的具体氨基酸可在表内各栏之间或表之间进行组合。此外,尽管每张表显示了糖的存在或不存在,应注意计算筛选计算中所述原子的存在或缺失不表示所述计算设计的Fc变体应仅仅用于糖基化或非糖基化的Fc。因此,尽管表1中的计算是在模板结构中没有糖原子的情况下进行的,所得预测取代在糖基化或非糖基化抗体或Fc融合体中是有利的。
表1
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
328A | 边界 | L | L | L:330 M:302 E:111 K:62 A:45 Q:39 D:36 S:30T:28 N:10 R:7 |
332A | 表面 | I | R | R:247 K:209 Q:130 H:95 E:92 T:59 D:51 N:51S:42 A:24 |
328B | 边界 | L | L | L:321 M:237 T:166 K:73 R:72 S:55 Q:20 D:17E:13 A:12 V:10 N:4 |
332B | 表面 | I | E | E:269 Q:180 R:145 K:111 D:97 T:78 N:65 S:28A:14 H:13 |
PDA_技术,1IIS模板结构;-糖
表2
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239A | 表面 | S | K | E:349 D:203 K:196 A:95 Q:83 S:63 N:10 R:1 |
265A | 边界XM | D | D | D:616 N:113 L:110 E:104 S:25 A:23 Q:9 |
299A | 边界XM | T | I | I:669 H:196 V:135 |
327A | 边界XM | A | S | A:518 S:389 N:67 D:26 |
265B | 边界XM | D | Q | Q:314 R:247 N:118 I:115 A:63 E:55 D:34 S:22K:21 V:11 |
PDA_技术;111S模板结构;+糖;漂浮的120C,132C,134C
表3
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239A | 表面 | S | E | E:872 Q:69 D:39 K:16 A:4 |
265A | 边界XM | D | Y | Y:693 H:111 E:69 D:62 F:29 K:19 R:14 W:2 Q:1 |
267A | 边界XM | S | S | S:991 A:9 |
269A | 核内XM | E | F | F:938 E:59 Y:3 |
270A | 表面 | D | E | E:267 T:218 K:186 D:89 Q:88 R:46 S:34 N:29H:23 A:20 |
299A | 边界XM | T | H | H:486 T:245 K:130 E:40 S:39 D:27 Q:27 A:4 N:2 |
PDA_技术;111S模板结构;-糖;漂浮的120C,122C,133C,134C
表4
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239A | 表面 | S | E | Q | Q | Q | E | E | E | Q | E | E |
265A | 所有20种 | D | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
267A | 所有20种 | S | S | S | S | S | S | S | S | S | S | S |
269A | 核内 | E | Y | Y | A | A | V | Y | A | A | A | A |
270A | 表面 | D | T | S | A | S | T | T | T | A | A | A |
299A | 所有20种 | T | S | S | S | S | S | S | S | S | S | S |
SPATM技术;111S模板结构;+糖;漂浮的120C,122C,132C,133C,134C
表5
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
235A | 边界XM | L | T | T:195 V:131 L:112 W:107 K:85 F:66 Y:56 E:52Q:38 S:37 I:34 R:29 H:26 N:23 D:9 |
296A | 表面 | Y | N | N:322 D:181 R:172 K:76 Y:70 Q:59 E:48 S:40H:20T:11A:1 |
298A | 表面 | S | T | T:370 R:343 K:193 A:55 S:39 |
235B | 边界XM | L | L | L:922 I:78 |
PDA_技术;111S模板结构;-糖;漂浮的119C,128C,157C
表6
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
235A | 所有20种 | L | S | S | P | S | S | S | S | S | S | S |
296A | 表面 | Y | Q | Q | Q | E | E | Q | E | Q | Q | N |
298A | 表面 | S | S | K | K | K | K | S | S | S | K | S |
235B | 所有20种 | L | K | K | K | L | L | L | L | L | L | K |
SPATM技术;111S模板结构;+糖;漂浮的119C,128C,157C
表7
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239B | 表面 | S | E | K:402 E:282 H:116 T:67 R:47 Q:39 D:26 A:11S:7 N:3 |
265B | 边界XM | D | W | Y:341 W:283 I:236 V:77 F:36 H:9 T:7 E:4 K:4A:2 D:1 |
327B | 边界XM | A | R | R:838 K:86 H:35 E:12 T:10 Q:7 A:6 D:3 N:3 |
328B | 核内XM | L | L | L:1000 |
329B | 核内XM | P | P | P:801 A:199 |
330B | 核内XM | A | Y | Y:918 F:42 L:22 A:18 |
332B | 表面 | I | I | I:792 E:202 Q:5 K:1 |
PDA_技术;111S模板结构;-糖;漂浮的88C,90C,113C,114C,116C,160C,161C
表8
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239B | 表面 | S | D | T | E | E | E | E | E | E | E | E |
265B | 所有20种 | D | G | G | K | G | K | G | G | K | K | G |
327B | 所有20种 | A | K | M | L | L | N | L | K | L | L | L |
328B | 核内 | L | M | M | M | L | A | M | L | M | L | L |
329B | 核内 | P | P | P | P | p | P | P | P | P | P | P |
330B | 核内 | A | L | A | A | A | A | A | A | A | A | A |
332B | 表面 | I | I | Q | I | I | Q | Q | E | D | I | I |
SPATM技术;111S模板结构;+糖;漂浮的88C,90C,113C,114C,116C,160C,161C
表9
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239A | 表面 | S | Q | Q | Q | E | Q | E | Q | E | Q | Q |
265A | 所有20种 | D | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
299A | 所有20种 | T | S | S | A | S | S | S | S | S | S | S |
327A | 所有20种 | A | A | S | S | S | S | S | S | S | A | S |
265B | 所有20种 | D | N | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
SPATM技术;111S模板结构;-糖;漂浮的120C,132C,134C
表10
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
234A | 边界XM | L | K | Y:401 L:260 F:151 I:82 K:63 H:17 Q:11 W:7 R:3T:2 E:2 V:1 |
235A | 边界XM | L | L | W:777 L:200 K:12 Y:5 I:3 F:2 V:1 |
234B | 边界XM | L | W | W:427 Y:203 L:143 F:74 I:59 E:32 K:23 V:14D:10 T:7 H:4 R:4 |
235B | 边界XM | L | W | W:380 Y:380 F:135 K:38 L:26 E:15 Q:12 H:8 R:4T:2 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的113C,116C,132C,155C,157C
表11
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
234A | 所有20种 | L | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
235A | 所有20种 | L | T | L | L | L | L | L | L | L | T | L |
234B | 所有20种 | L | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
235B | 所有20种 | L | S | A | S | A | A | S | S | S | A | A |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;+糖;漂浮的113C,116C,132C,155C,157C
表12
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239A | 边界XM | S | E | E:235 S:122 D:94 Q:93 A:74 K:70 L:67 T:63N:57 R:51 I:29 V:18 W:15 H:12 |
328A | 边界XM | L | L | L:688 E:121 K:43 Q:41 A:33 D:26 S:14 T:14N:12 R:8 |
332A | 边界XM | I | W | I:155 W:95 L:82 K:79 E:74 Q:69 H:67 V:63 R:57T:57 D:45 S:43 N:42 A:35 F:19 Y:18 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的120C
表13
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239A | 所有20种 | S | L | E | E | Q | E | E | K | K | K | K |
328A | 所有20种 | L | L | Q | L | Q | K | L | L | Q | K | L |
332A | 所有20种 | I | K | K | L | Q | A | K | L | Q | A | Q |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;+糖;漂浮的120C
表14
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239B | 边界XM | S | I | R:195 I:169 L:126 V:91 K:89 E:61 H:52 T:50Q:42 N:35 S:34 D:30 A:26 |
328B | 边界XM | L | L | L:671 T:165 K:40 S:38 E:28 R:17 Q:17 V:11 A:8D:5 |
332B | 边界XM | I | I | I:387 E:157 L:151 V:78 Q:63 K:50 R:33 T:29D:25 A:12 N:8 S:6 W:1 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的90C,160C,161C
表15
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239B | 所有20种 | S | T | L | L | L | L | L | L | L | L | L |
328B | 所有20种 | L | M | R | M | D | T | M | L | Q | D | L |
332B | 所有20种 | I | I | D | Q | Q | Q | L | L | T | Q | L |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;+糖;漂浮的90C,160C,161C
表16
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239B | 边界XM | S | T | T:164 S:159 L:156 E:86 W:76 K:71 D:65 A:52R:43 H:38 Q:38 N:31 I:14 V:7 |
328B | 边界XM | L | L | L:556 E:114 T:84 K:80 S:69 Q:36 A:31 D:15R:11 N:4 |
332B | 边界XM | I | W | I:188 W:177 E:97 L:94 T:59 Q:57 V:54 K:52 F:51D:34 H:33 S:27 R:26 N:18 A:17 Y:16 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的117C
表17
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239B | 所有20种 | S | P | S | P | E | L | L | L | L | L | L |
328B | 所有20种 | L | K | K | K | K | K | L | K | K | K | L |
332B | 所有20种 | I | S | S | E | L | L | L | E | L | L | L |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;+糖;漂浮的117C
表18
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239A | 边界XM | S | L | K:196 L:171 I:146 E:88 V:76 R:75 T:50 H:45D:43 Q:39 S:30 N:22 A:19 |
328A | 边界XM | L | W | L:517 F:230 W:164 H:40 K:29 E:11 R:5 T:4 |
332A | 边界XM | I | E | I:283 L:217 E:178 Q:81 V:64 D:47 T:35 K:27W:18 R:12 A:10 Y:7 N:7 F:6 S:5 H:3 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的87C,157C,158C
表19
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239A | 所有20种 | S | F | Q | E | T | P | P | T | P | P | P |
328A | 所有20种 | L | K | R | R | K | K | M | R | K | M | R |
332A | 所有20种 | I | L | L | I | I | E | I | E | E | I | I |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;+糖;漂浮的87C,157C,158C
表20
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
240A | 核内+Thr | V | V | V:698 M:162 T:140 |
263A | 核内+Thr | V | V | V:966 T:34 |
266A | 核内+Thr | V | V | V:983 T:17 |
325A | 边界 | N | N | N:943 T:40 A:17 |
328A | 边界 | L | L | L:610 M:363 K:27 |
332A | Glu | I | E | E:1000 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的273A,275A,302A,323A,134C
表21
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
240A | 所有20种 | V | V | A | V | V | V | V | V | V | V | V |
263A | 所有20种 | V | V | V | V | V | V | V | V | V | V | V |
266A | 所有20种 | V | I | V | I | I | T | V | V | V | V | I |
325A | 所有20种 | N | A | N | N | N | Q | T | T | Q | N | T |
328A | 所有20种 | L | K | K | L | K | L | K | L | L | L | L |
332A | Glu | I | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;+糖;漂浮的273A,275A,302A,323A,134C
表22
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
240B | 核内+Thr | V | V | V:713 T:287 |
263B | 核内+Thr | V | V | V:992 T:8 |
266B | 核内+Thr | V | V | V:976 T:24 |
325B | 边界 | N | N | N:453 T:296 A:116 D:96 S:30 V:9 |
328B | 边界 | L | L | L:623 M:194 T:100 R:72 K:11 |
332B | Glu | I | E | E:1000 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的273B,275B,302B,323B,161C
表23
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
240B | 所有20种 | V | A | T | A | T | T | A | A | T | T | T |
263B | 所有20种 | V | V | A | A | T | T | V | V | T | A | T |
266B | 所有20种 | V | V | V | V | V | V | V | V | V | I | V |
325B | 所有20种 | N | N | K | K | N | K | K | N | N | N | N |
328B | 所有20种 | L | R | L | L | L | L | L | L | L | L | L |
332A | Glu | I | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;+糖;漂浮的273B,275B,302B,323B,161C
表24
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
240B | 核内+Thr | V | M | V:715 M:271 T:12 I:2 |
263B | 核内+Thr | V | V | V:992 T:8 |
266B | 核内+Thr | V | V | V:996 T:4 |
325B | 边界 | N | N | N:651 T:232 D:64 A:53 |
328B | 边界 | L | M | M:556 L:407 K:37 |
332B | Glu | I | E | E:1000 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的273B,275B,302B,323B,131C
表25
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
240B | 所有20种 | V | T | A | T | A | A | A | A | T | A | A |
263B | 所有20种 | V | T | W | T | T | A | T | T | T | L | L |
266B | 所有20种 | V | L | A | T | T | V | L | T | T | L | V |
325B | 所有20种 | N | A | N | A | A | N | A | A | A | A | A |
328B | 所有20种 | L | L | K | L | L | L | L | L | L | L | L |
332A | Glu | I | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;+糖;漂浮的273B,275B,302B,323B,131C
表26
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
240A | 核内+Thr | V | V | V:876 T:109 M:15 |
263A | 核内+Thr | V | V | V:913 T:87 |
266A | 核内+Thr | V | V | V:969 T:31 |
325A | 边界 | N | V | V:491 N:236 T:187 A:35 D:32 S:19 |
328A | 边界 | L | L | L:321 W:290 M:271 F:49 K:46 R:23 |
332A | Glu | I | E | E:1000 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的273A,275A,302A,323A,158C
表27
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
240A | 所有20种 | V | A | T | A | A | T | T | A | A | A | T |
263A | 所有20种 | V | T | T | V | V | T | V | L | L | V | T |
266A | 所有20种 | V | V | V | V | V | V | V | V | V | V | V |
325A | 所有20种 | N | Q | N | Q | Q | Q | Q | Q | Q | N | N |
328A | 所有20种 | L | K | M | K | K | K | K | K | K | K | K |
332A | Glu | I | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;+糖;漂浮的273A,275A,302A,323A,158C
针对Fc变体设计进行计算筛选计算以优化N297糖和Cγ2结构域的构象。通过在与糖相互作用的位置上探查在能量上有利的取代,,变体可得到改造,其代表(sample)新的、可能有利的糖构象。Fc残基F241、F243、V262和V264介导Fc/糖相互作用并因此作为靶位置。这些设计计算的结果列于表28中。
表28
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
241A | 核内 | F | Y | Y:172 M:162 L:144 F:140 W:110 I:97 A:91 V:84 |
243A | 核内 | F | Y | Y:211 L:204 W:199 F:160 M:141 A:85 |
262A | 核内 | V | M | M:302 I:253 V:243 A:202 |
264A | 核内 | V | F | I:159 M:152 V:142 L:140 W:136 F:120 Y:104A:47 |
PDA_技术,111S模板结构;-糖
针对Fc变体设计进行计算筛选计算以优化Cγ3和Cγ2结构域之间的夹角。位于Cγ2/Cγ3界面的残基P244、P245、P247和W313似乎在决定Cγ2-Cγ3夹角和相对于彼此的结构域柔性中扮演关键角色。通过在这些位置上开发在能量上有利的取代,可设计变体,其代表对新的、可能有利的夹角和柔性(flexiblity)水平。这些设计计算的结果列于表29中。
表29
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
244A | 边界 | P | H | K:164 H:152 R:110 M:100 S:92 N:57 A:54 D:50Q:49 T:46 E:37 V:30 L:27 W:23 F:9 |
245A | 边界 | P | A | A:491 S:378 N:131 |
247A | 边界 | P | V | V:156 T:125 K:101 E:87 Q;79 R:78 S:76 A:72D:72 H:60 M:47 N:47 |
313A | 边界 | W | W | W:359 F:255 Y:128 M:114 H:48 K:29 T:24 A:11E:10 V:10 S:9 Q:3 |
PDA_技术,111S模板结构;-糖
除了使用PDA_SPATM计算筛选方法的上述计算外,单独使用静电势的额外计算被用于计算筛选Fc变体。使用库仑定律(Coulomb’s law)和德拜-休克尔标度(Debye-Huckle scaling)的计算显示了Fc中的许多位置,对于该位置而言,氨基酸取代可对与一种或更多种FcγR的结合起有利作用,包括用荷负电氨基酸取代中性氨基酸可增强与FcγRIIIa结合的位置,以及用中性或荷负电氨基酸取代荷正电氨基酸可增强与FcγRIIIa结合的位置。这些结果列于表30中。
表30
用-残基取代+残基 | 用-残基取代中性残基 |
H268 | S239 |
K326 | Y296 |
K334 | A327 |
I332 |
库仑定律和德拜-休克尔标度;111S模板结构;+糖
进行计算筛选以计算优化非糖基化Fc,即在缺少N297糖的条件下优化Fc结构、稳定性、溶解性和Fc/FcγR亲和力。为了设计在非糖基化Fc模板结构的背景下残基297、邻近297的残基、位于Fc/FcγR界面的残基以及位于Fc/糖界面的残基的有利取代,进行设计计算。将可变位置分为相互作用型可变位置的不同的组,并在分组计算中设计,并使用了不同模板结构。对于许多可变位置组而言,使用PDA_SPATM计算筛选方法进行计算。这些计算的结果和有关信息列于下表31-53中。
表31
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
265A | 边界XM | D | Y | Y:531 F:226 W:105 H:92 K:21 D:16 E:6 T:3 |
297A | 边界XM | N | D | A:235 S:229 D:166 E:114 N:92 Y:57 F:55 Q:25H:10 T:7 K:6 L:3 R:1 |
299A | 边界XM | T | L | L:482 Y:186 F:131 T:55 S:51 K:31 H:22 A:18E:14 Q:10 |
297B | 边界XM | N | I | I:299 K:147 V:85 R:82 W:71 N:65 D:35 E:35Q:34 S:32 L:31 H:30 T:28 A:26 |
PDA_技术;111S模板结构;-糖;漂浮的122C,129C,132C,155C
表32
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
265A | 所有20种 | D | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
297A | 所有20种 | N | A | T | A | E | K | K | A | A | N | N |
299A | 所有20种 | T | S | K | S | K | F | F | F | F | F | S |
297B | 所有20种 | N | K | K | K | K | K | K | K | K | K | K |
SPATM技术;111S模板结构;-糖;漂浮的122C,129C,132C,155C
表33
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239A | 表面 | S | E | E:928 Q:65 D:7 |
265A | 边界XM | D | W | W:709 Y:248 F:43 |
296A | 表面 | Y | H | H:449 Y:146 E:137 D:89 K:64 N:32 T:30 R:25Q:23 S:5 |
297A | 表面 | N | E | E:471 H:189 D:102 T:97 K:96 R:22 Q:15 S:8 |
298A | 边界XM | S | R | R:353 T:275 K:269 A:56 S:38 E:5 Q:2 H:2 |
299A | 边界XM | T | F | Y:398 F:366 L:217 H:15 K:4 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的120C,122C,128C,132C,155C
表34
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239A | 所有20种 | S | E | Q | Q | E | Q | Q | Q | Q | Q | Q |
265A | 所有20种 | D | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
296A | 所有20种 | Y | D | Q | N | N | Q | N | N | N | Q | N |
297A | 所有20种 | N | A | A | N | A | D | D | E | N | N | E |
298A | 所有20种 | S | K | K | K | S | K | K | K | K | S | K |
299A | 所有20种 | T | S | Y | F | S | Y | F | K | F | S | K |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的120C,122C,128C,132C,155C
表35
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239B | 表面 | S | E | E:417 T:122 D:117 Q:94 R:84 S:63 K:47 H:29N:19 A:8 |
265B | 边界XM | D | W | W:865 Y:79 F:55 K:1 |
296B | 表面 | Y | Y | Y:549 H:97 D:80 S:75 N:48 E:45 K:32 R:30 Q:28A:16 |
297B | 表面 | N | R | R:265 H:224 E:157 K:154 Q:75 D:47 T:34 N:24S:13 A:7 |
298B | 边界XM | S | V | V:966 D:10 T:8 A:8 N:4 S:4 |
299B | 边界XM | T | Y | Y:667 F:330 H:3 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的117C,119C,125C,129C,152C
表36
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239B | 所有20种 | S | S | R | E | K | S | S | E | E | E | K |
265B | 所有20种 | D | A | D | K | Y | A | A | F | F | K | Y |
296B | 所有20种 | Y | A | A | A | A | A | A | A | A | A | A |
297B | 所有20种 | N | T | S | T | T | E | E | E | S | E | E |
29B B | 所有20种 | S | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
299B | 所有20种 | T | L | F | E | E | Y | F | Y | F | Y | Y |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的117C,119C,125C,129C,152C
表37
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239A | 表面 | S | E | E:868 Q:92 D:38 K:1 N:1 |
265A | 边界XM | D | W | W:575 Y:343 F:66 H:15 K:1 |
296A | 表面 | Y | H | H:489 Y:103 R:98 K:97 Q:64 D:63 T:41 N:38 E:7 |
297A | Asp | N | D | D:1000 |
298A | 边界XM | S | R | R:340 K:262 T:255 A:59 S:57 E:11 Q:10 H:6 |
299A | 边界XM | T | F | Y:375 F:323 L:260 H:24 K:18 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的120C,122C,128C,132C,155C
表38
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239A | 所有20种 | S | E | Q | E | E | E | E | E | E | Q | E |
265A | 所有20种 | D | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
296A | 所有20种 | Y | E | N | Q | E | N | Q | Q | Q | Q | N |
297A | Asp | N | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
298A | 所有20种 | S | K | S | K | S | K | K | K | S | K | K |
299A | 所有20种 | T | S | K | Y | S | F | F | F | F | F | K |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的120C,122C,128C,132C,155C
表39
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239B | 表面 | S | E | E:318 Q:123 T:109 D:108 R:93 S:89 K:69 N:40H:38 A:13 |
265B | 边界XM | D | W | W:745 Y:158 F:85 K:9 E:1 R:1 H:1 |
296B | 表面 | Y | Y | Y:390 H:127 S:83 R:81 K:78 N:65 D:55 E:49Q:44 A:26 T:2 |
297B | Asp | N | D | D:1000 |
298B | 边界XM | S | V | V:890 T:35 A:29 D:19 S:16 N:10 E:1 |
299B | 边界XM | T | Y | Y:627 F:363 H:10 |
PDA_技术;D129G 184K模板结构;-糖;漂浮的117C,119C,125C,129C,152C
表40
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239B | 所有20种 | S | K | E | E | Q | E | K | Q | E | K | Q |
265B | 所有20种 | D | F | K | K | A | K | Y | W | K | L | F |
296B | 所有20种 | Y | A | A | A | A | A | A | A | A | A | A |
297B | Asp | N | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
298B | 所有20种 | S | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
299B | 所有20种 | T | Y | Y | Y | Y | Y | Y | F | F | Y | Y |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的117C,119C,125C,129C,152C
表41
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239A | 边界XM | S | E | E:312 L:148 D:102 Q:98 K:64 I:61 S:57 A:44T:39 N:29 R:23 V:18 W:5 |
265A | 边界XM | D | W | W:363 Y:352 F:139 H:77 K:39 R:14 D:11 E:4Q:1 |
297A | Asp | N | D | D:1000 |
299A | 边界XM | T | Y | Y:309 F:224 L:212 H:96 K:92 E:28 Q:20 R:16T:2 S:1 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的120C,122C,132C,155C
表42
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239A | 所有20种 | S | E | L | L | L | E | E | E | Q | L | E |
265A | 所有20种 | D | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
297B | Asp | N | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
299A | 所有20种 | T | S | K | K | F | F | F | K | F | K | F |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的120C,122C,128C,132C,155C
表43
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239B | 边界XM | S | L | L:194 T:122 S:120 E:111 D:79 K:71 A:62 Q:57R:43 H:43 N:37 I:24 W:24 V:13 |
265B | 边界XM | D | W | Y:248 W:233 F:198 K:84 D:57 E:55 H:42 R:28Q:20 A:10 T:10 N:8 S:7 |
297B | Asp | N | D | D:1000 |
299B | 边界XM | T | Y | Y:493 F:380 H:76 T:31 E:10 D:4 A:3 S:3 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的117C,119C,129C,152C
表44
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239B | 所有20种 | S | R | E | p | L | L | F | P | P | L | L |
265B | 所有20种 | D | D | K | S | F | S | Y | A | M | A | D |
297B | Asp | N | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
299B | 所有20种 | T | Y | Y | Y | Y | E | Y | Y | Y | Y | Y |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的117C,119C,129C,152C
表45
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239A | 边界XM | S | E | E:251 L:125 D:120 Q:112 S:73 K:65 I:61 A:58T:45 N:35 R:28 V:23 W:4 |
265A | 边界XM | D | Y | Y:216 H:153 K:135 D:109 W:104 F:86 R:54 T:38E:29 Q:22 A:21 N:17 S:13 L:3 |
297A | Asp | N | D | D:1000 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的299A,120C,122C,132C,155C
表46
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239A | 所有20种 | S | S | L | E | L | Q | Q | E | Q | Q | E |
265A | 所有20种 | D | G | G | G | G | G | G | G | G | G | G |
297A | Asp | N | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的299A,120C,122C,132C,155C
表47
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
239B | 边界XM | S | L | L:158 S:137 T:125 E:115 D:86 K:75 A:62 Q:56H:43 R:39 N:35 W:30 I:24 V:15 |
265B | 边界XM | D | Y | Y:188 W:159 F:156 D:122 K:77 E:71 H:61 Q:44R:39 A:24 S:22 N:19 T:18 |
297B | Asp | N | D | D:1000 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的299B,117C,119C,129C,152C
表48
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
239B | 所有20种 | S | S | E | P | P | E | S | P | L | F | L |
265B | 所有20种 | D | A | K | A | M | K | F | Y | D | F | F |
297B | Asp | N | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的299B,117C,119C,129C,152C
表49
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
297A | Asp | N | D | D:1000 |
299A | 边界XM | T | Y | T:123 Y:64 H:64 K:64 Q:64 F:64 R:63 D:63 E:63S:63 L:63 N:62 I:57 A:54 V:52 W:17 |
PDA_技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的239A,265A,120C,122C,132C,155C
表50
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
297A | Asp | N | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
299A | 所有20种 | T | K | K | K | K | F | F | K | K | K | K |
SPATM技术;D129G 111S模板结构;-糖;漂浮的239A,265A,120C,122C,132C,155C
表51
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
297B | Asp | N | D | D:1000 |
299B | 边界XM | T | Y | T:123 F:64 Y:64 H:64 S:63 N:61 Q:61 D:61 E:60K:58 V:57 A:57 R:54 I:52 L:51 W:50 |
PDA_技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的239B,265B,117C,119C,129C,152C
表52
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
297B | Asp | N | D | D | D | D | D | D | D | D | D | D |
299B | 所有20种 | T | Y | Y | Y | Y | Y | Y | Y | Y | Y | Y |
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;-糖;漂浮的239B,265B,117C,119C,129C,152C
进行计算筛选计算以优化非糖基化Fc,在不存在糖基化的条件下通过在暴露于溶剂的残基处设计有利的取代,使它们稳定、保持Fc结构以及不具有聚集趋势。N297糖覆盖了暴露的疏水部分(hydrophobic patch),所述疏水部分通常是与其它Ig结构域蛋白质-蛋白质相互作用的界面,维持Fc的稳定性和结构完整性并阻止Cγ2结构域横越中心轴的聚集。用于设计的关键残基是F241、F243、V262和V264,在Cγ2上它们位于该糖的背面,此外还有诸如L328、I332和I336的残基,它们是暴露的非极性残基,向内面向相对的Cγ2结构域,在先前介绍的计算中考虑到了该情况。这些Cγ2残基的重要性并不是通过序列比对注意到Cγ3结构域中的相应残基介导两个Cγ3结构域之间的非极性相互作用或埋藏于Cγ3核内来支持的。这些设计计算的结果列于表53中。
表53
位置 | 考虑的氨基酸 | 野生型 | 基态 | 基态附近序列 |
241A | 表面 | F | E | E:190 R:172 K:138 H:117 T:93 Q:91 D:85 S:49N:49 A:16 |
243A | 表面 | F | R | R:190 H:164 Q:152 E:149 K:92 T:71 D:64 N:58S:42 A:18 |
262A | 表面 | V | D | D:416 E:164 N:138 Q:87 T:83 R:44 S:32 K:24A:11 H:1 |
264A | 表面 | V | H | R:368 H:196 K:147 E:108 Q:68 T:34 N:33 D:25S:15 A:6 |
PDA_技术;111S模板结构;-糖
在最后一组计算中,应用SPATM计算筛选方法评估所有20种氨基酸对所有选定可变位置的取代。确定了所有20种氨基酸的能量最低旋转异构体构象,该能量定义为在该可变位置处的该氨基酸取代的能量。因此这些计算提供了在每个可变位置处对于20种氨基酸每一种取代的能量。对于以糖基化和非糖基化Fc为目标的各种设计目的,包括Fc/FcγR亲和力的优化、Fc稳定性、Fc溶解性、糖构象以及铰链构象而言,这些数据是有用的。此外,因为这些计算提供了有利和不利取代的能量,所以它们可以指导取代,该取代可实现与活化型FcγR相对于抑制性FcγR的差异结合。使用不同的模板结构,并计算两条链上暴露的取代。这些计算结果和相关参数及信息列于下表54-60中。栏1列出了模板结构链A和B上的可变位置。栏2列出了在每个可变位置的野生型氨基酸同一性。其余20栏提供了每种天然20种氨基酸的能量(显示于顶行)。相对于能量最低取代,标准化所有取代,能量最低取代设定为0能量。例如在表54中,对于链A上L235而言,丝氨酸是能量最低取代,L235A的稳定性比L235S低,是0.9kcal/mol。对于20-50kcal/mol之间的能量,极高的能量设定为20kcal/mol,对于高于50kcal/mol的能量,设定为50kcal/mol。有利的取代可考虑应为每个位置的能量最低取代,以及与能量最低取代具有较小能量差异的取代,例如1,2,1-3,1-5,或1-10kcal/mol范围内的取代。
表54
SPATM技术;1IIS模板结构;+糖原子,无漂浮位置
表55
表55(续)
表55(续)
表55(续)
表55(续)
SPATM技术;1IIS模板结构;+糖,无漂浮位置
表56
SPATM技术;D129G 1IIS模板结构;+糖
表57
SPATM技术:D129G 1IIX模板结构;+糖
表58
SPATM技术;D129G 1E4K模板结构;+糖
表59
Pos | WT | A | C | D | E | F | G | H | I | K | L | M | N | P | Q | R | S | T | V | W | Y |
239A | S | 1.4 | 2.6 | 3.1 | 1.0 | 20 | 5.7 | 4.8 | 3.4 | 2.0 | 1.2 | 2.6 | 1.6 | 4.8 | 0 | 2.1 | 1.3 | 2.1 | 3.3 | 13.8 | 19.6 |
240A | V | 2.9 | 3.5 | 3.7 | 4.6 | 20 | 8.2 | 10.8 | 0 | 9.1 | 3.2 | 5.4 | 3.1 | 4.8 | 5.5 | 17.5 | 4.0 | 1.8 | 1.2 | 20 | 20 |
263A | V | 3.6 | 4.9 | 6.2 | 8.7 | 20 | 9.9 | 20 | 3.7 | 4.2 | 0.5 | 6.7 | 6.1 | 50 | 9.5 | 20 | 5.1 | 3.6 | 0 | 20 | 20 |
264A | V | 1.8 | 2.8 | 3.3 | 2.0 | 2.9 | 6.2 | 3.1 | 0 | 2.4 | 0.8 | 3.0 | 2.4 | 6.1 | 1.4 | 2.8 | 2.4 | 1.9 | 0.8 | 10.2 | 2.2 |
266A | V | 4.4 | 5.2 | 4.9 | 7.1 | 20 | 10.6 | 20 | 1.0 | 12.1 | 4.8 | 9.1 | 4.6 | 50 | 7.9 | 12.6 | 5.8 | 3.5 | 0 | 20 | 20 |
296A | Y | 1.2 | 2.9 | 0.7 | 1.4 | 3.1 | 3.9 | 2.7 | 2.4 | 2.3 | 1.9 | 2.2 | 0 | 1.6 | 1.4 | 3.0 | 0.9 | 1.0 | 3.5 | 6.0 | 2.6 |
299A | T | 0 | 2.6 | 6.0 | 11.5 | 20 | 5.3 | 20 | 20 | 6.0 | 20 | 4.4 | 3.0 | 50 | 14.1 | 13.2 | 0.9 | 3.8 | 15.1 | 15.0 | 20 |
325A | N | 5.2 | 7.0 | 6.6 | 6.9 | 50 | 11.3 | 20 | 1.3 | 14.3 | 13.5 | 13.9 | 0 | 5.0 | 6.0 | 20 | 6.0 | 4.6 | 3.2 | 20 | 50 |
328A | L | 4.8 | 5.5 | 7.0 | 3.2 | 20 | 10.5 | 20 | 50 | 5.1 | 0 | 8.5 | 5.5 | 50 | 3.5 | 8.2 | 5.5 | 13.4 | 50 | 20 | 50 |
330A | A | 0.9 | 1.8 | 1.1 | 0.9 | 3.5 | 4.0 | 3.0 | 2.3 | 1.2 | 1.6 | 2.8 | 0 | 14.5 | 0.9 | 1.1 | 0.1 | 0.4 | 2.0 | 6.4 | 3.2 |
332A | I | 5.3 | 6.4 | 6.7 | 4.8 | 8.2 | 9.9 | 5.2 | 3.1 | 0 | 3.6 | 5.2 | 6.8 | 20 | 3.5 | 4.6 | 5.5 | 4.8 | 4.0 | 11.2 | 7.1 |
239B | S | 0.7 | 2.3 | 2.6 | 2.0 | 5.3 | 5.1 | 3.3 | 1.7 | 0 | 0 | 2.0 | 0.8 | 15.5 | 0.9 | 0.8 | 0.7 | 0.7 | 3.3 | 8.2 | 6.0 |
240B | V | 2.3 | 3.0 | 4.1 | 7.3 | 20 | 8.1 | 20 | 5.1 | 20 | 11.8 | 10.9 | 3.8 | 2.0 | 17.0 | 20 | 3.6 | 1.3 | 0 | 20 | 20 |
263B | V | 3.2 | 4.3 | 7.3 | 8.3 | 20 | 9.6 | 20 | 13.3 | 8.5 | 0.6 | 20 | 6.0 | 50 | 8.5 | 20 | 4.6 | 4.0 | 0 | 20 | 20 |
264B | V | 2.1 | 3.2 | 3.7 | 2.7 | 17.8 | 6.6 | 11.5 | 0 | 2.0 | 0.8 | 3.5 | 3.0 | 7.8 | 2.0 | 1.5 | 2.5 | 1.3 | 1.0 | 13.9 | 20 |
266B | V | 5.0 | 5.0 | 5.2 | 16.3 | 20 | 11.2 | 20 | 2.3 | 20 | 14.3 | 7.3 | 2.5 | 50 | 11.6 | 20 | 5.4 | 3.9 | 0 | 20 | 20 |
296B | Y | 0.9 | 2.3 | 1.0 | 0.5 | 2.7 | 3.7 | 2.5 | 1.2 | 1.3 | 2.1 | 3.0 | 0 | 7.0 | 0.4 | 1.1 | 0.3 | 0.8 | 1.8 | 6.0 | 2.4 |
299B | T | 1.1 | 2.2 | 7.6 | 5.4 | 20 | 6.4 | 12.8 | 1.8 | 3.9 | 17.5 | 6.9 | 3.9 | 20 | 4.6 | 10.3 | 0.8 | 0 | 1.9 | 20 | 20 |
325B | N | 10.1 | 11.5 | 13.1 | 11.2 | 20 | 15.7 | 20 | 8.6 | 14.3 | 17.1 | 20 | 0 | 16.1 | 10.6 | 20 | 11.1 | 10.9 | 10.5 | 20 | 20 |
328B | L | 2.9 | 4.1 | 4.8 | 3.5 | 50 | 8.5 | 1.7 | 9.6 | 1.5 | 0 | 1.5 | 3.5 | 50 | 3.3 | 2.0 | 3.3 | 1.9 | 5.2 | 50 | 50 |
330B | A | 0.1 | 2.0 | 1.4 | 1.8 | 1.6 | 4.0 | 3.0 | 2.0 | 0.5 | 0.5 | 2.6 | 0 | 20 | 0.7 | 2.0 | 0.3 | 0.6 | 2.1 | 4.4 | 2.4 |
332B | I | 3.4 | 4.4 | 3.5 | 3.1 | 6.1 | 8.2 | 4.1 | 0 | 3.3 | 1.3 | 3.3 | 4.0 | 15.7 | 0.8 | 2.1 | 3.9 | 2.7 | 1.1 | 20 | 6.1 |
SPATM技术;Fc/FcγRIIb模型模板结构;-糖
表60
Pos | WT | A | C | D | E | F | G | H | I | K | L | M | N | P | Q | R | S | T | V | W | Y |
237A | G | 1.0 | 3.0 | 5.9 | 1.8 | 5.0 | 4.7 | 3.1 | 1.4 | 1.4 | 4.2 | 3.7 | 2.5 | 0.5 | 1.3 | 1.5 | 0 | 1.2 | 1.9 | 7.5 | 5.6 |
238A | P | 3.3 | 5.2 | 9.7 | 4.6 | 20 | 9.2 | 20 | 0.4 | 19.6 | 5.0 | 8.2 | 7.3 | 0 | 6.1 | 20 | 1.3 | 3.7 | 2.1 | 20 | 20 |
239A | S | 0.6 | 1.8 | 3.3 | 1.3 | 1.8 | 4.7 | 0.5 | 2.1 | 0 | 0.8 | 2.6 | 0.2 | 8.4 | 0.9 | 0.5 | 0.3 | 1.3 | 2.5 | 4.7 | 1.8 |
240A | V | 1.3 | 2.3 | 2.7 | 8.2 | 20 | 7.0 | 20 | 6.1 | 8.7 | 0 | 9.2 | 2.2 | 0.3 | 7.4 | 20 | 2.0 | 0 | 0.4 | 20 | 20 |
241A | F | 0 | 2.1 | 2.4 | 0.5 | 1.0 | 4.0 | 2.6 | 7.5 | 1.7 | 0.9 | 2.8 | 0.7 | 10 | 0.7 | 1.4 | 0 | 0.9 | 6.9 | 3.9 | 0.9 |
242A | L | 3.7 | 4.7 | 6.6 | 6.7 | 20 | 9.2 | 20 | 13.0 | 13.8 | 0 | 7.0 | 5.7 | 3.6 | 9.2 | 20 | 4.8 | 4.7 | 3.4 | 20 | 20 |
243A | F | 0.8 | 2.0 | 1.0 | 0.2 | 0.3 | 4.9 | 1.5 | 4.0 | 1.5 | 0.8 | 2.2 | 0.3 | 50 | 0 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 4.0 | 4.3 | 0.6 |
244A | P | 2.8 | 3.7 | 5.5 | 3.2 | 6.4 | 2.9 | 3.6 | 0 | 0.1 | 4.0 | 3.7 | 3.8 | 0.3 | 1.1 | 0.9 | 1.4 | 1.5 | 0.9 | 7.7 | 6.9 |
245A | P | 2.5 | 20 | 20 | 20 | 20 | 7.7 | 20 | 50 | 20 | 20 | 20 | 20 | 0 | 20 | 20 | 3.4 | 19.2 | 50 | 20 | 20 |
246A | K | 2.1 | 3.5 | 2.8 | 2.5 | 4.0 | 6.5 | 4.5 | 3.4 | 2.7 | 1.9 | 4.1 | 0 | 1.2 | 2.7 | 2.3 | 2.2 | 2.5 | 2.9 | 6.8 | 3.7 |
247A | P | 2.4 | 5.0 | 6.6 | 7.8 | 50 | 7.5 | 20 | 10 | 9.6 | 50 | 6.5 | 9.5 | 0 | 7.0 | 8.4 | 0.1 | 0.6 | 4.6 | 20 | 50 |
248A | K | 2.0 | 4.0 | 4.8 | 4.2 | 20 | 6.9 | 9.6 | 3.3 | 0 | 2.7 | 3.0 | 4.1 | 2.4 | 3.1 | 3.0 | 2.1 | 0.8 | 2.0 | 15.2 | 20 |
249A | D | 3.3 | 4.2 | 3.3 | 0.9 | 4.8 | 9.3 | 4.0 | 50 | 3.1 | 0 | 3.2 | 3.1 | 50 | 1.9 | 4.1 | 4.4 | 8.1 | 50 | 6.3 | 5.3 |
250A | T | 0.1 | 1.5 | 3.0 | 8.0 | 20 | 6.7 | 20 | 2.5 | 5.4 | 9.5 | 5.7 | 2.2 | 50 | 7.3 | 10.7 | 1.6 | 0.8 | 0 | 20 | 20 |
251A | L | 3.1 | 4.6 | 6.3 | 6.1 | 2.3 | 9.5 | 1.5 | 7.2 | 3.1 | 1.3 | 5.4 | 4.7 | 50 | 5.2 | 4.4 | 4.8 | 2.1 | 2.4 | 50 | 0 |
252A | M | 3.0 | 3.5 | 5.3 | 2.8 | 20 | 9.4 | 20 | 4.4 | 0.6 | 5.0 | 0 | 4.7 | 50 | 2.9 | 14.2 | 0.9 | 6.7 | 6.0 | 20 | 20 |
253A | I | 0.9 | 1.8 | 3.9 | 3.3 | 4.0 | 5.5 | 6.2 | 1.3 | 0 | 0.9 | 1.8 | 2.3 | 50 | 2.6 | 2.7 | 1.2 | 1.2 | 2.0 | 5.8 | 4.7 |
254A | S | 0 | 2.4 | 5.5 | 3.4 | 8.1 | 3.9 | 8.5 | 4.2 | 3.3 | 1.7 | 5.0 | 2.1 | 50 | 4.4 | 4.6 | 0.2 | 5.1 | 6.0 | 9.0 | 8.9 |
255A | R | 2.2 | 3.8 | 5.4 | 3.9 | 7.1 | 7.3 | 1.6 | 15.8 | 0 | 0.5 | 1.5 | 3.2 | 50 | 2.0 | 0.6 | 2.0 | 1.4 | 14.5 | 5.4 | 20 |
256A | T | 1.1 | 2.3 | 1.7 | 1.5 | 3.2 | 3.9 | 2.5 | 3.1 | 1.1 | 2.0 | 2.7 | 0 | 2.3 | 0.4 | 0.3 | 0.7 | 1.6 | 2.4 | 6.0 | 3.0 |
257A | P | 2.1 | 9.1 | 20 | 16.1 | 50 | 8.5 | 50 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 0 | 18.6 | 20 | 4.1 | 20 | 20 | 50 | 50 |
258A | E | 0 | 1.6 | 2.3 | 0.6 | 0.9 | 4.2 | 2.1 | 9.4 | 2.4 | 3.5 | 1.9 | 1.9 | 14.7 | 2.2 | 2.7 | 0.9 | 4.1 | 10.4 | 20 | 1.0 |
259A | V | 4.0 | 4.3 | 7.0 | 11.4 | 20 | 10.4 | 20 | 3.2 | 14.0 | 14.9 | 10.6 | 7.7 | 50 | 12.2 | 20 | 5.1 | 1.8 | 0 | 20 | 20 |
260A | T | 2.6 | 2.8 | 3.2 | 0 | 20 | 7.3 | 5.6 | 1.7 | 3.1 | 5.5 | 3.5 | 2.7 | 4.5 | 1.1 | 3.0 | 2.5 | 2.0 | 2.0 | 14.0 | 20 |
261A | C | 0 | 18.6 | 20 | 20 | 20 | 3.8 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 50 | 20 | 20 | 4.2 | 20 | 20 | 20 | 20 |
262A | V | 1.8 | 1.5 | 1.3 | 11.1 | 20 | 7.1 | 20 | 5.8 | 14.6 | 20 | 20 | 3.6 | 50 | 20 | 16.5 | 2.1 | 1.9 | 0 | 20 | 20 |
263A | V | 4.5 | 5.1 | 6.5 | 14.1 | 20 | 10.8 | 20 | 8.0 | 6.1 | 3.2 | 10.9 | 5.7 | 50 | 14.4 | 18.7 | 6.0 | 3.6 | 0 | 20 | 20 |
264A | V | 2.6 | 3.2 | 3.7 | 2.0 | 14.0 | 7.0 | 9.0 | 0 | 2.6 | 2.5 | 3.8 | 2.3 | 10.4 | 1.9 | 2.4 | 2.6 | 1.6 | 0.5 | 15.9 | 18.2 |
265A | D | 1.4 | 2.8 | 2.7 | 1.6 | 1.8 | 2.5 | 2.2 | 18.5 | 0 | 0.1 | 2.5 | 1.1 | 50 | 0.5 | 0.8 | 1.6 | 11.8 | 19.0 | 4.9 | 2.1 |
266A | V | 4.8 | 5.1 | 5.0 | 14.2 | 20 | 11.5 | 20 | 0.2 | 20 | 9.8 | 20 | 5.4 | 50 | 19.9 | 20 | 6.3 | 4.2 | 0 | 50 | 20 |
267A | S | 2.6 | 4.9 | 5.7 | 3.3 | 1.6 | 7.2 | 2.9 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 3.7 | 3.7 | 0 | 2.2 | 1.5 | 1.9 | 1.3 | 2.6 | 5.6 | 2.3 |
268A | H | 1.5 | 1.9 | 2.6 | 2.6 | 4.4 | 4.8 | 2.7 | 1.7 | 0 | 2.8 | 1.9 | 0.6 | 0.5 | 0.9 | 1.0 | 0.7 | 1.8 | 1.6 | 7.3 | 4.6 |
269A | E | 0.3 | 2.0 | 0.8 | 0.6 | 2.8 | 3.6 | 2.7 | 1.5 | 1.6 | 1.4 | 2.9 | 0 | 6.8 | 0.5 | 1.5 | 0.1 | 0.3 | 1.3 | 5.3 | 2.7 |
270A | N | 0 | 1.4 | 1.9 | 3.8 | 0.7 | 3.9 | 2.2 | 6.8 | 2.4 | 3.5 | 2.7 | 1.6 | 13.3 | 3.2 | 3.0 | 0.9 | 1.2 | 5.1 | 2.2 | 1.0 |
271A | P | 0.9 | 2.2 | 5.7 | 6.5 | 3.0 | 5.5 | 2.9 | 12.8 | 5.4 | 15.7 | 5.6 | 4.2 | 0 | 8.0 | 4.2 | 1.3 | 2.9 | 7.5 | 4.3 | 2.6 |
272A | E | 0.7 | 1.8 | 0.3 | 0.4 | 3.0 | 3.6 | 2.6 | 1.7 | 1.4 | 2.0 | 2.9 | 0.3 | 11.8 | 0.2 | 1.6 | 0 | 0.9 | 1.2 | 4.4 | 2.8 |
273A | V | 3.1 | 4.0 | 2.1 | 15.5 | 20 | 8.9 | 20 | 0.5 | 10.6 | 7.1 | 12.4 | 1.2 | 50 | 20 | 20 | 1.4 | 0 | 0.7 | 20 | 20 |
274A | K | 0.6 | 2.1 | 1.5 | 0.9 | 2.2 | 4.3 | 2.6 | 1.6 | 1.3 | 1.2 | 2.9 | 0.9 | 50 | 0 | 0.6 | 0.6 | 1.1 | 1.4 | 2.8 | 2.2 |
275A | F | 7.1 | 8.6 | 10.1 | 8.0 | 0 | 12.2 | 4.2 | 7.7 | 4.7 | 5.5 | 6.8 | 8.3 | 7.0 | 7.1 | 11.9 | 8.1 | 7.3 | 7.4 | 10.3 | 1.8 |
276A | N | 0.5 | 1.8 | 1.3 | 0 | 20 | 5.4 | 20 | 12.6 | 2.6 | 3.2 | 3.0 | 0.2 | 18.7 | 1.3 | 1.8 | 1.1 | 6.3 | 10.8 | 20 | 20 |
277A | W | 9.3 | 11.1 | 12.3 | 10.7 | 4.1 | 15.0 | 8.6 | 10.2 | 7.3 | 7.8 | 7.9 | 11.4 | 7.6 | 9.5 | 14.6 | 10.2 | 9.6 | 11.3 | 0 | 20 |
278A | Y | 0.1 | 1.9 | 6.1 | 0 | 2.7 | 5.5 | 4.5 | 16.4 | 1.3 | 16.3 | 1.5 | 3.3 | 50 | 0.3 | 2.2 | 0.5 | 0 | 10 | 8.6 | 1.0 |
279A | V | 3.2 | 4.4 | 5.1 | 3.1 | 20 | 8.2 | 19.7 | 0.3 | 0 | 1.9 | 3.1 | 3.8 | 20 | 0.5 | 3.6 | 3.8 | 2.3 | 1.6 | 20 | 20 |
280A | D | 3.6 | 3.5 | 0 | 2.7 | 12.5 | 4.0 | 9.9 | 17.6 | 3.8 | 2.8 | 3.9 | 0.5 | 50 | 3.1 | 3.5 | 3.1 | 8.9 | 13.1 | 13.7 | 13.0 |
281A | G | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 0 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 19.2 | 50 | 50 | 50 |
282A | V | 0.5 | 1.8 | 1.8 | 0.8 | 2.2 | 4.0 | 2.2 | 0.7 | 0.9 | 1.3 | 3.0 | 0.4 | 50 | 0.4 | 0.5 | 0.1 | 0.5 | 0 | 5.4 | 2.5 |
283A | E | 0.9 | 1.2 | 4.9 | 0 | 7.9 | 4.4 | 4.2 | 2.2 | 1.3 | 4.7 | 1.3 | 3.1 | 0.5 | 0.5 | 1.3 | 0.6 | 1.6 | 3.0 | 8.3 | 7.2 |
284A | V | 2.1 | 2.6 | 4.4 | 2.6 | 15.0 | 6.7 | 4.4 | 2.0 | 1.8 | 6.3 | 2.6 | 2.7 | 15.1 | 2.4 | 1.6 | 2.6 | 1.3 | 0 | 11.1 | 16.1 |
285A | H | 1.0 | 2.3 | 1.9 | 1.3 | 2.8 | 2.8 | 2.6 | 2.0 | 1.6 | 2.2 | 2.8 | 0 | 1.8 | 0.9 | 0.9 | 0.3 | 0.5 | 2.3 | 5.1 | 2.3 |
表60(续)
Pos | WT | A | C | D | E | F | G | H | I | K | L | M | N | P | Q | R | S | T | V | W | Y |
286A | N | 0.9 | 1.7 | 0.7 | 0.1 | 3.3 | 3.4 | 3.2 | 0 | 0.9 | 2.1 | 2.3 | 0.2 | 6.6 | 0.4 | 0.9 | 0.7 | 0.7 | 0.8 | 5.4 | 3.4 |
287A | A | 2.4 | 4.3 | 5.1 | 8.4 | 0 | 8.4 | 3.1 | 11.2 | 6.6 | 17.4 | 4.4 | 1.3 | 12.9 | 8.3 | 8.6 | 4.1 | 4.5 | 9.9 | 1.4 | 2.0 |
288A | K | 0.7 | 1.9 | 2.0 | 0.9 | 2.7 | 3.9 | 2.6 | 1.0 | 1.3 | 1.9 | 2.2 | 0.4 | 5.0 | 0.5 | 0.6 | 0 | 0.5 | 1.8 | 6.0 | 2.6 |
289A | T | 1.0 | 1.7 | 2.2 | 0.5 | 6.6 | 4.7 | 2.3 | 0.5 | 0.3 | 0.5 | 1.6 | 1.2 | 0.8 | 0.6 | 0.7 | 0 | 0.2 | 0.9 | 6.2 | 7.0 |
290A | K | 1.1 | 2.6 | 2.6 | 1.6 | 3.8 | 5.6 | 5.4 | 3.1 | 0.8 | 0.4 | 2.2 | 1.5 | 50 | 1.0 | 1.3 | 0.6 | 0 | 2.9 | 6.3 | 4.5 |
291A | P | 1.0 | 2.4 | 1.8 | 1.7 | 4.5 | 3.6 | 3.4 | 2.6 | 1.6 | 2.6 | 3.5 | 0 | 0.9 | 0.9 | 1.3 | 0 | 1.0 | 2.4 | 7.6 | 4.1 |
292A | R | 1.5 | 3.2 | 3.2 | 1.9 | 1.7 | 5.2 | 3.0 | 1.8 | 1.0 | 0 | 1.6 | 1.9 | 0.9 | 1.3 | 1.6 | 1.5 | 1.6 | 2.5 | 4.3 | 1.9 |
293A | E | 0.6 | 2.1 | 1.5 | 0.4 | 8.0 | 4.3 | 5.5 | 3.2 | 1.4 | 0.8 | 2.2 | 1.2 | 16.3 | 0 | 2.2 | 0.1 | 0.8 | 3.3 | 10.6 | 8.3 |
294A | E | 2.3 | 2.5 | 0.5 | 0.5 | 5.0 | 5.8 | 3.5 | 4.1 | 1.5 | 2.0 | 2.7 | 0 | 1.6 | 0.9 | 1.3 | 1.9 | 1.6 | 2.4 | 9.0 | 5.4 |
295A | Q | 3.1 | 3.2 | 3.8 | 2.8 | 17.6 | 7.8 | 12.8 | 9.7 | 1.3 | 0 | 2.3 | 3.3 | 50 | 1.6 | 3.6 | 3.8 | 7.9 | 10.1 | 20 | 20 |
296A | Y | 3.3 | 3.5 | 3.6 | 2.3 | 4.7 | 0 | 3.5 | 50 | 2.6 | 3.6 | 4.7 | 1.7 | 50 | 2.1 | 2.5 | 1.8 | 14.0 | 50 | 7.7 | 4.7 |
297A | N | 1.4 | 2.3 | 3.2 | 1.4 | 4.4 | 4.3 | 3.0 | 0.6 | 0.7 | 2.2 | 2.4 | 1.1 | 50 | 0.9 | 0 | 0.8 | 1.1 | 1.5 | 7.3 | 4.3 |
298A | S | 6.5 | 7.1 | 6.9 | 6.9 | 11.0 | 0 | 8.6 | 50 | 6.6 | 7.2 | 8.5 | 5.2 | 50 | 6.2 | 6.3 | 4.4 | 12.0 | 50 | 12.5 | 10.6 |
299A | T | 0.3 | 2.2 | 3.0 | 20 | 0.5 | 4.4 | 0.5 | 5.1 | 1.5 | 16.2 | 3.3 | 0.1 | 50 | 20 | 3.4 | 0.7 | 0 | 0.4 | 50 | 1.7 |
300A | Y | 4.1 | 4.8 | 5.1 | 5.2 | 0 | 9.8 | 2.2 | 11.9 | 3.3 | 2.6 | 3.7 | 4.4 | 50 | 5.4 | 7.9 | 5.7 | 7.2 | 12.7 | 5.8 | 0.4 |
301A | R | 1.6 | 2.4 | 1.1 | 0.6 | 20 | 6.5 | 20 | 8.6 | 0 | 3.5 | 1.7 | 0.5 | 50 | 0.3 | 0.9 | 2.5 | 3.1 | 9.8 | 20 | 20 |
302A | V | 3.2 | 4.0 | 5.0 | 4.0 | 20 | 9.0 | 5.6 | 0.3 | 1.6 | 2.3 | 2.7 | 3.6 | 10.8 | 2.9 | 3.9 | 3.6 | 2.1 | 0 | 20 | 20 |
303A | V | 0.9 | 1.0 | 2.0 | 0 | 20 | 5.9 | 20 | 3.0 | 4.4 | 12.4 | 4.6 | 2.7 | 1.6 | 4.8 | 4.9 | 1.3 | 0.7 | 1.0 | 20 | 20 |
304A | S | 1.1 | 2.3 | 4.1 | 9.2 | 20 | 7.8 | 20 | 7.6 | 6.9 | 20 | 9.3 | 2.8 | 20 | 11.2 | 9.4 | 0 | 2.5 | 4.1 | 20 | 20 |
305A | V | 1.6 | 2.1 | 1.8 | 4.1 | 20 | 6.3 | 20 | 1.0 | 3.9 | 2.9 | 3.0 | 0.6 | 12.6 | 4.5 | 3.8 | 1.8 | 1.0 | 0 | 20 | 20 |
306A | L | 5.1 | 6.8 | 6.7 | 7.0 | 1.7 | 11.5 | 4.9 | 3.8 | 3.9 | 0 | 6.3 | 6.0 | 15.0 | 7.3 | 15.4 | 5.9 | 4.2 | 5.6 | 20 | 2.5 |
307A | T | 1.5 | 3.0 | 2.6 | 1.6 | 1.1 | 5.5 | 3.0 | 0.2 | 1.7 | 1.0 | 3.0 | 1.8 | 0 | 1.6 | 2.4 | 1.6 | 1.0 | 0.8 | 9.5 | 1.4 |
308A | V | 4.0 | 4.5 | 12.8 | 7.2 | 20 | 10.2 | 20 | 0 | 17.1 | 5.0 | 20 | 10.2 | 50 | 13.4 | 20 | 4.4 | 4.4 | 1.7 | 20 | 20 |
309A | L | 1.3 | 2.8 | 1.8 | 1.7 | 3.2 | 5.5 | 3.3 | 0.8 | 1.5 | 1.0 | 3.2 | 0 | 0.3 | 1.3 | 0.4 | 1.6 | 1.3 | 0.8 | 5.8 | 3.4 |
310A | H | 1.6 | 2.2 | 2.1 | 4.0 | 18.6 | 6.3 | 4.2 | 3.5 | 3.2 | 6.7 | 3.4 | 1.1 | 0 | 3.7 | 7.5 | 0.7 | 0.5 | 3.3 | 14.8 | 18.9 |
311A | Q | 0.2 | 1.6 | 1.4 | 0.7 | 1.9 | 3.9 | 1.6 | 0.4 | 0.7 | 0.7 | 1.9 | 0 | 0.7 | 0.9 | 1.2 | 0.5 | 0 | 1.2 | 2.6 | 1.8 |
312A | D | 0 | 1.6 | 0.8 | 0.9 | 20 | 5.3 | 11.3 | 8.9 | 2.4 | 2.3 | 2.5 | 1.1 | 50 | 3.0 | 3.0 | 0.6 | 5.5 | 9.6 | 16.0 | 20 |
313A | W | 4.0 | 5.5 | 7.0 | 5.1 | 0 | 10 | 5.1 | 11.0 | 2.7 | 4.2 | 2.7 | 6.6 | 50 | 4.8 | 6.3 | 5.7 | 4.5 | 9.9 | 1.3 | 0.9 |
314A | L | 2.8 | 4.3 | 5.8 | 3.7 | 20 | 7.6 | 7.3 | 4.2 | 1.8 | 0 | 2.9 | 4.0 | 50 | 3.2 | 2.5 | 3.9 | 3.6 | 5.7 | 17.5 | 20 |
315A | N | 0 | 5.1 | 3.1 | 3.4 | 11.1 | 2.6 | 11.3 | 16.1 | 3.4 | 3.4 | 4.8 | 1.9 | 50 | 3.3 | 4.6 | 1.7 | 8.9 | 50 | 13.0 | 12.0 |
316A | G | 11.4 | 10 | 11.1 | 8.9 | 16.6 | 0 | 12.7 | 50 | 8.5 | 8.8 | 9.4 | 9.5 | 50 | 8.8 | 9.2 | 9.2 | 50 | 50 | 11.9 | 16.6 |
317A | K | 3.1 | 4.8 | 8.1 | 5.6 | 6.5 | 8.4 | 2.5 | 7.3 | 0 | 5.5 | 3.5 | 5.0 | 50 | 3.6 | 1.5 | 3.1 | 5.2 | 6.8 | 20 | 7.4 |
318A | E | 1.5 | 2.5 | 2.8 | 1.7 | 20 | 5.8 | 9.6 | 2.0 | 1.9 | 5.9 | 3.4 | 2.2 | 17.5 | 1.6 | 2.7 | 1.1 | 0 | 3.4 | 20 | 20 |
319A | Y | 7.0 | 7.9 | 9.4 | 9.9 | 0 | 12.8 | 4.6 | 3.2 | 6.0 | 6.6 | 7.1 | 8.2 | 20 | 8.9 | 12.7 | 7.7 | 5.8 | 3.8 | 8.7 | 0.9 |
320A | K | 1.8 | 2.9 | 6.7 | 1.8 | 20 | 7.1 | 20 | 1.1 | 0 | 8.1 | 2.2 | 4.2 | 8.4 | 1.7 | 1.4 | 1.5 | 0.6 | 1.0 | 20 | 20 |
321A | C | 0 | 3.9 | 20 | 20 | 20 | 6.1 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 2.2 | 8.6 | 18.8 | 20 | 20 |
322A | K | 2.4 | 3.3 | 6.1 | 3.0 | 20 | 8.0 | 20 | 1.1 | 0.4 | 16.9 | 2.5 | 4.1 | 50 | 2.8 | 3.0 | 3.1 | 1.6 | 0 | 20 | 20 |
323A | V | 3.5 | 4.3 | 8.0 | 9.0 | 20 | 9.9 | 20 | 4.7 | 10.2 | 20 | 5.7 | 8.7 | 50 | 9.3 | 20 | 4.9 | 2.5 | 0 | 20 | 20 |
324A | S | 0.4 | 2.0 | 0.9 | 0 | 0.2 | 5.0 | 2.5 | 1.3 | 1.3 | 0 | 2.4 | 0.4 | 50 | 1.0 | 2.6 | 0.7 | 1.3 | 1.3 | 8.7 | 0.3 |
325A | N | 4.9 | 5.9 | 6.3 | 6.0 | 20 | 10.4 | 20 | 1.7 | 14.0 | 11.3 | 20 | 0 | 13.3 | 6.3 | 20 | 5.1 | 3.7 | 3.4 | 20 | 20 |
326A | K | 1.6 | 3.6 | 2.4 | 2.4 | 3.8 | 4.9 | 3.0 | 10.6 | 1.4 | 2.9 | 4.2 | 1.1 | 0 | 1.7 | 2.1 | 1.5 | 4.5 | 9.4 | 5.1 | 3.3 |
327A | A | 2.7 | 3.8 | 5.5 | 2.8 | 11.6 | 7.1 | 9.5 | 3.2 | 1.2 | 3.7 | 4.3 | 3.8 | 20 | 3.2 | 2.8 | 1.8 | 0 | 3.3 | 18.3 | 12.6 |
328A | L | 2.5 | 3.7 | 4.6 | 1.7 | 50 | 7.4 | 20 | 5.7 | 1.8 | 0 | 10.4 | 4.3 | 50 | 1.7 | 6.0 | 2.9 | 8.3 | 5.9 | 50 | 50 |
329A | P | 0.8 | 2.2 | 1.2 | 1.2 | 4.0 | 3.3 | 3.3 | 2.9 | 1.6 | 2.5 | 3.5 | 0.1 | 0.3 | 0.6 | 1.4 | 0 | 1.1 | 2.2 | 6.6 | 3.7 |
330A | A | 0.3 | 1.6 | 2.0 | 1.3 | 3.4 | 3.2 | 2.3 | 2.4 | 1.3 | 2.5 | 3.0 | 0.3 | 20 | 0.5 | 1.1 | 0 | 0.1 | 2.2 | 6.0 | 3.4 |
331A | P | 1.5 | 3.5 | 8.0 | 10.4 | 6.6 | 6.3 | 5.0 | 9.3 | 8.1 | 12.6 | 6.4 | 6.1 | 0 | 8.0 | 7.9 | 1.4 | 6.4 | 4.6 | 6.5 | 6.8 |
332A | I | 2.4 | 3.5 | 2.6 | 2.2 | 7.9 | 7.2 | 4.0 | 1.3 | 2.3 | 0.7 | 2.9 | 2.8 | 50 | 0 | 3.7 | 2.8 | 1.8 | 1.3 | 12.6 | 9.4 |
333A | E | 2.0 | 2.7 | 2.6 | 0 | 8.0 | 6.3 | 7.6 | 3.1 | 3.5 | 5.9 | 3.0 | 2.9 | 3.6 | 1.1 | 2.9 | 1.7 | 1.2 | 4.8 | 8.0 | 8.4 |
表60(续)
Pos | WT | A | C | D | E | F | G | H | I | K | L | M | N | P | Q | R | S | T | V | W | Y |
334A | K | 2.1 | 3.4 | 3.5 | 2.0 | 7.1 | 7.1 | 3.5 | 2.0 | 2.2 | 3.0 | 3.0 | 2.5 | 2.8 | 1.5 | 0 | 2.8 | 1.6 | 1.5 | 4.1 | 7.9 |
335A | T | 0.5 | 1.0 | 2.1 | 0.3 | 4.6 | 4.6 | 4.1 | 0.6 | 0.2 | 4.0 | 2.1 | 1.2 | 2.1 | 1.0 | 0.2 | 0.8 | 0 | 0.9 | 5.1 | 4.8 |
336 | I | 0.4 | 1.4 | 2.2 | 0.9 | 13. | 4.8 | 4.7 | 0 | 1.3 | 4.3 | 1.6 | 1.3 | 20 | 0.1 | 2.6 | 1.1 | 0.4 | 0.3 | 12. | 13. |
A | 9 | 3 | 9 | ||||||||||||||||||
337A | S | 0.3 | 0.8 | 4.0 | 13.5 | 20 | 3.1 | 20 | 50 | 9.9 | 9.3 | 5.6 | 5.0 | 12.7 | 6.7 | 7.3 | 0 | 10.5 | 50 | 20 | 20 |
338A | K | 4.7 | 8.3 | 7.1 | 7.6 | 20 | 9.8 | 20 | 5.5 | 0 | 2.3 | 5.9 | 5.5 | 5.8 | 6.4 | 4.6 | 5.8 | 6.8 | 6.9 | 20 | 20 |
339A | A | 1.4 | 2.7 | 3.1 | 2.2 | 2.3 | 5.5 | 3.3 | 0 | 0.5 | 0.2 | 2.7 | 1.5 | 1.0 | 0.8 | 0.4 | 1.3 | 1.2 | 0.4 | 6.6 | 2.4 |
340A | K | .2 | 3.0 | 2.0 | 1.5 | 1.9 | 3.9 | 2.5 | 2.6 | 0.2 | 2.2 | 2.1 | 1.0 | 1.0 | 0 | 1.1 | 0.6 | 1.2 | 3.1 | 7.8 | 2.2 |
237B | G | 0.6 | 2.2 | 1.7 | 0.5 | 5.0 | 4.2 | 2.5 | 0.3 | 0.3 | 4.1 | 1.7 | 0.5 | 0.3 | 0 | 0.3 | 0.4 | 0.3 | 1.0 | 7.3 | 5.4 |
238B | P | 3.0 | 5.3 | 8.9 | 5.4 | 20 | 9.1 | 20 | 1.1 | 14.4 | 3.6 | 11.6 | 7.3 | 0 | 7.8 | 20 | 1.9 | 4.7 | 2.7 | 20 | 20 |
239B | S | 0.7 | 2.0 | 2.9 | 1.1 | 2.2 | 4.8 | 0.5 | 2.9 | 0 | 0.8 | 2.5 | 0.2 | 9.3 | 0.8 | 0.3 | 0.4 | 1.7 | 2.7 | 4.8 | 2.1 |
240B | V | 2.0 | 3.0 | 3.4 | 5.3 | 20 | 7.7 | 20 | 6.4 | 11.3 | 0 | 10.2 | 2.7 | 1.3 | 9.7 | 20 | 2.8 | 0.6 | 0.7 | 20 | 20 |
241B | F | 0.3 | 2.0 | 2.7 | 0.2 | 1.5 | 4.3 | 3.2 | 5.7 | 1.3 | 1.2 | 2.4 | 1.5 | 8.5 | 1.2 | 1.9 | 0 | 1.3 | 5.3 | 4.3 | 1.3 |
242B | L | 4.0 | 5.1 | 7.0 | 6.5 | 20 | 9.5 | 20 | 12.9 | 13.6 | 0 | 8.7 | 5.9 | 3.9 | 10.6 | 19.9 | 5.0 | 5.6 | 4.2 | 20 | 20 |
243B | F | 0.7 | 1.8 | 1.2 | 0 | 0.2 | 4.9 | 1.5 | 4.8 | 1.4 | 0.8 | 2.3 | 0.4 | 50 | 0 | 0.5 | 0.3 | 0.6 | 4.5 | 4.3 | 0.7 |
244B | P | 2.1 | 3.1 | 5.4 | 2.8 | 7.0 | 3.5 | 3.7 | 0.7 | 0 | 3.6 | 3.3 | 3.5 | 0.3 | 1.0 | 1.2 | 1.2 | 1.4 | 0.5 | 7.3 | 7.2 |
245B | P | 2.1 | 20 | 20 | 20 | 20 | 7.3 | 20 | 50 | 20 | 20 | 20 | 20 | 0 | 20 | 20 | 3.0 | 19.4 | 20 | 20 | 20 |
246B | K | 1.4 | 2.8 | 1.8 | 2.0 | 3.4 | 5.8 | 3.9 | 2.3 | 1.8 | 1.2 | 3.2 | 0 | 0.3 | 2.1 | 1.5 | 1.5 | 1.7 | 1.9 | 6.0 | 3.1 |
247B | P | 2.4 | 5.0 | 8.4 | 7.4 | 20 | 7.5 | 18.5 | 8.7 | 9.4 | 20 | 7.9 | 12.4 | 0 | 6.3 | 9.1 | 0.9 | 0.8 | 3.0 | 20 | 20 |
248B | K | 2.0 | 4.1 | 4.6 | 3.7 | 20 | 6.8 | 9.1 | 3.7 | 0 | 2.2 | 2.9 | 3.8 | 2.1 | 2.7 | 2.5 | 2.3 | 1.2 | 2.1 | 20 | 20 |
249B | D | 3.2 | 4.2 | 3.1 | 1.2 | 3.2 | 9.1 | 4.0 | 50 | 2.9 | 0 | 3.3 | 3.8 | 50 | 1.6 | 4.1 | 4.4 | 8.4 | 50 | 6.6 | 4.6 |
250B | T | 0.1 | 1.4 | 3.1 | 7.4 | 20 | 6.7 | 20 | 2.9 | 5.9 | 8.9 | 6.1 | 2.2 | 50 | 6.7 | 6.1 | 1.3 | 0.6 | 0 | 20 | 20 |
251B | L | 4.0 | 5.6 | 6.9 | 7.9 | 3.5 | 10.4 | 1.9 | 4.9 | 5.0 | 2.1 | 3.3 | 5.3 | 50 | 9.3 | 5.4 | 5.9 | 3.3 | 4.5 | 50 | 0 |
252B | M | 3.0 | 3.6 | 5.6 | 2.9 | 20 | 9.2 | 20 | 6.0 | 1.0 | 4.9 | 0 | 4.2 | 50 | 2.4 | 14.0 | 1.5 | 6.9 | 7.7 | 20 | 20 |
253B | I | 1.5 | 2.3 | 4.6 | 3.5 | 4.6 | 6.1 | 6.8 | 1.7 | 0 | 1.6 | 2.2 | 3.0 | 50 | 3.3 | 2.4 | 1.6 | 1.5 | 2.3 | 6.5 | 5.3 |
254B | S | 0 | 2.8 | 6.1 | 3.4 | 8.5 | 4.1 | 9.9 | 4.5 | 4.2 | 1.5 | 3.9 | 3.1 | 50 | 3.4 | 5.1 | 0.3 | 5.6 | 6.6 | 10 | 8.7 |
255B | R | 1.8 | 3.7 | 5.0 | 3.7 | 3.5 | 6.8 | 0.8 | 14.1 | 0.1 | 0 | 1.5 | 2.6 | 50 | 1.6 | 0 | 1.7 | 1.0 | 13.6 | 4.8 | 20 |
256B | T | 1.0 | 2.3 | 1.6 | 1.4 | 3.1 | 3.7 | 2.3 | 3.5 | 1.2 | 1.9 | 2.6 | 0 | 2.4 | 0.5 | 0.2 | 0.7 | 1.5 | 2.8 | 5.9 | 2.9 |
257B | P | 2.0 | 10.4 | 20 | 20 | 50 | 8.4 | 50 | 20 | 20 | 17.3 | 20 | 20 | 0 | 16.5 | 20 | 4.2 | 20 | 20 | 50 | 50 |
258B | E | 0 | 1.6 | 2.7 | 0.8 | 0.8 | 3.9 | 2.0 | 12.0 | 2.4 | 4.0 | 1.8 | 2.1 | 16.2 | 2.9 | 3.0 | 0.7 | 4.5 | 11.7 | 20 | 1.6 |
259B | V | 4.1 | 4.5 | 7.0 | 9.1 | 20 | 10.5 | 20 | 1.5 | 12.2 | 14.4 | 15.5 | 7.5 | 50 | 8.8 | 20 | 5.3 | 2.0 | 0 | 20 | 20 |
260B | T | 2.4 | 2.7 | 3.0 | 0 | 20 | 7.2 | 7.2 | 1.6 | 3.0 | 5.3 | 3.5 | 2.7 | 4.1 | 0.3 | 1.3 | 2.5 | 2.0 | 1.6 | 15.9 | 20 |
261B | C | 0 | 18.0 | 20 | 20 | 20 | 4.0 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 50 | 20 | 20 | 3.5 | 20 | 20 | 20 | 20 |
262B | V | 1.6 | 1.5 | 0.8 | 20 | 20 | 7.0 | 20 | 8.4 | 16.8 | 20 | 20 | 3.5 | 50 | 14.9 | 19.5 | 1.9 | 1.6 | 0 | 20 | 20 |
263B | V | 4.5 | 5.2 | 5.5 | 18.4 | 20 | 10.9 | 20 | 10.9 | 4.6 | 3.5 | 8.9 | 4.7 | 50 | 15.3 | 19.2 | 5.7 | 3.1 | 0 | 20 | 20 |
264B | V | 2.6 | 3.0 | 3.7 | 1.6 | 12.8 | 7.1 | 12.2 | 0 | 2.3 | 3.1 | 4.0 | 2.5 | 5.0 | 1.5 | 3.1 | 2.4 | 1.6 | 0.4 | 20 | 20 |
265B | D | 1.4 | 2.7 | 2.4 | 1.3 | 2.0 | 2.3 | 2.3 | 50 | 1.0 | 0 | 2.4 | 0.9 | 50 | 0.3 | 0.7 | 1.6 | 11.4 | 18.0 | 5.0 | 2.2 |
266B | V | 4.9 | 5.4 | 7.0 | 15.9 | 20 | 11.6 | 20 | 2.7 | 20 | 20 | 19.7 | 6.2 | 50 | 17.2 | 20 | 5.8 | 4.1 | 0 | 50 | 50 |
267B | S | 2.4 | 4.6 | 4.3 | 4.3 | 1.3 | 7.1 | 2.8 | 1.3 | 0.9 | 1.7 | 3.6 | 2.7 | 0 | 1.4 | 1.9 | 2.3 | 1.8 | 3.2 | 5.2 | 2.5 |
268B | H | 2.1 | 2.9 | 3.8 | 2.4 | 6.9 | 5.5 | 2.0 | 1.7 | 0 | 4.9 | 2.7 | 1.8 | 3.2 | 0.9 | 1.1 | 1.4 | 1.2 | 2.8 | 8.4 | 6.4 |
269B | E | 0.8 | 2.5 | 0.9 | 1.2 | 3.3 | 4.0 | 2.9 | 1.2 | 2.0 | 2.2 | 3.2 | 0 | 5.3 | 0.8 | 1.6 | 0.8 | 1.0 | 1.8 | 5.6 | 3.1 |
270B | N | 0 | 1.3 | 0.9 | 3.9 | 2.9 | 3.8 | 4.8 | 5.7 | 3.5 | 1.2 | 3.8 | 2.9 | 15.5 | 4.0 | 3.5 | 1.0 | 1.4 | 7.0 | 6.6 | 3.1 |
271B | P | 0.8 | 2.5 | 6.0 | 7.8 | 3.1 | 5.6 | 4.2 | 16.4 | 5.7 | 16.9 | 6.0 | 4.0 | 0 | 7.6 | 5.3 | 1.3 | 2.9 | 6.2 | 5.0 | 3.6 |
272B | E | 0.7 | 1.7 | 0.1 | 0 | 3.0 | 3.7 | 2.8 | 1.0 | 1.9 | 1.8 | 3.1 | 0.6 | 17.4 | 0.1 | 1.0 | 0.3 | 1.0 | 0.6 | 3.7 | 3.0 |
273B | V | 4.8 | 5.5 | 5.1 | 16.6 | 20 | 10.8 | 20 | 3.1 | 9.6 | 7.2 | 9.8 | 4.2 | 50 | 20 | 20 | 1.5 | 0 | 2.5 | 20 | 20 |
274B | K | 0.8 | 2.4 | 1.6 | 1.0 | 2.3 | 4.5 | 2.7 | 1.5 | 1.5 | 1.4 | 3.1 | 0.6 | 50 | 0 | 0.5 | 0.9 | 1.3 | 1.1 | 2.8 | 2.4 |
275B | F | 6.9 | 8.5 | 9.9 | 8.0 | 0 | 12.1 | 3.7 | 8.2 | 4.8 | 5.5 | 6.8 | 8.0 | 7.1 | 7.2 | 13.0 | 8.2 | 7.1 | 7.4 | 13.0 | 2.0 |
276B | N | 0.4 | 1.6 | 1.2 | 0 | 20 | 5.3 | 20 | 9.1 | 2.7 | 3.1 | 2.7 | 0.1 | 19.6 | 1.1 | 1.7 | 0.5 | 5.9 | 8.8 | 20 | 20 |
277B | W | 8.9 | 10.9 | 11.6 | 10.6 | 4.8 | 14.6 | 7.8 | 10.1 | 6.3 | 7.6 | 7.5 | 10.9 | 6.8 | 9.3 | 14.0 | 10 | 9.5 | 11.0 | 0 | 20 |
278B | Y | 0.8 | 2.1 | 5.6 | 0 | 1.4 | 6.3 | 3.9 | 18.3 | 1.3 | 12.7 | 1.7 | 3.0 | 18.1 | 0.3 | 2.4 | 1.2 | 0.3 | 10.3 | 7.5 | 0.3 |
279B | V | 3.8 | 4.9 | 5.9 | 3.8 | 20 | 8.8 | 16.0 | 1.0 | 0 | 2.8 | 3.6 | 4.5 | 20 | 1.0 | 4.1 | 4.5 | 2.9 | 2.0 | 20 | 20 |
280B | D | 3.5 | 3.4 | 0 | 1.8 | 12.4 | 3.9 | 9.8 | 17.0 | 3.6 | 2.3 | 4.0 | 0.2 | 50 | 3.1 | 3.6 | 3.0 | 8.8 | 12.1 | 13.9 | 12.7 |
表60(续)
Pos | WT | A | C | D | E | F | G | H | I | K | L | M | N | P | Q | R | S | T | V | W | Y |
281B | G | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 0 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 | 50 |
282B | V | 0.4 | 1.8 | 1.7 | 0.8 | 2.2 | 3.9 | 2.1 | 0.8 | 0.9 | 1.3 | 2.9 | 0.2 | 50 | 0.3 | 0.3 | 0 | 0.3 | 0 | 5.6 | 2.4 |
283B | E | 0.9 | 1.2 | 4.9 | 0 | 7.8 | 4.7 | 4.3 | 1.7 | 1.5 | 4.7 | 2.0 | 3.2 | 0.4 | 0.7 | 0.8 | 0.6 | 1.5 | 2.7 | 8.3 | 7.5 |
284B | V | 2.3 | 2.7 | 5.0 | 2.6 | 16.4 | 7.0 | 5.5 | 3.1 | 2.0 | 7.0 | 2.9 | 3.2 | 50 | 2.6 | 2.2 | 2.7 | 1.4 | 0 | 13.3 | 20 |
285B | H | 0.6 | 2.0 | 1.8 | 1.0 | 2.4 | 2.5 | 2.3 | 2.0 | 1.4 | 1.9 | 2.9 | 0 | 1.6 | 0.5 | 0.7 | 0 | 0.2 | 2.2 | 4.8 | 1.9 |
286B | N | 1.0 | 1.8 | 0.9 | 0.2 | 3.4 | 3.5 | 3.1 | 0 | 1.4 | 2.2 | 2.4 | 0.2 | 8.3 | 0.4 | 1.0 | 0.7 | 0.8 | 1.0 | 5.4 | 3.4 |
287B | A | 2.5 | 4.3 | 5.5 | 8.5 | 0 | 8.4 | 3.2 | 13.3 | 6.7 | 17.7 | 4.6 | 1.1 | 14.1 | 8.2 | 9.1 | 3.5 | 3.2 | 10.7 | 1.1 | 1.4 |
288B | K | 0.6 | 1.7 | 1.6 | 0.8 | 2.5 | 3.7 | 2.5 | 1.0 | 1.4 | 1.7 | 2.0 | 0.3 | 5.7 | 0.6 | 0.4 | 0 | 0.5 | 1.7 | 5.8 | 2.3 |
289B | T | 0.9 | 1.5 | 2.1 | 0.5 | 5.4 | 4.6 | 2.3 | 0 | 0.2 | 0.2 | 1.3 | 1.1 | 0.7 | 0.5 | 0.2 | 0.2 | 0.2 | 0.4 | 6.7 | 5.4 |
290B | K | 0.7 | 2.4 | 2.5 | 1.2 | 3.2 | 5.2 | 5.2 | 2.4 | 0.2 | 0.1 | 1.8 | 1.3 | 50 | 0.6 | 1.2 | 0.7 | 0 | 2.4 | 5.7 | 4.3 |
291B | P | 1.0 | 2.5 | 2.0 | 1.7 | 4.5 | 3.6 | 3.4 | 2.5 | 1.6 | 2.6 | 3.4 | 0.2 | 0.8 | 0.7 | 1.2 | 0 | 0.8 | 2.6 | 7.6 | 3.9 |
292B | R | 1.8 | 3.5 | 3.5 | 2.2 | 1.6 | 5.5 | 2.8 | 2.2 | 1.1 | 0 | 1.8 | 2.4 | 1.3 | 1.6 | 1.5 | 1.8 | 2.0 | 2.6 | 4.5 | 2.0 |
293B | E | 0.7 | 2.2 | 1.6 | 0.6 | 8.6 | 4.5 | 4.7 | 2.8 | 1.5 | 0.9 | 2.4 | 1.1 | 15.9 | 0 | 2.3 | 0.2 | 0.9 | 2.8 | 9.3 | 8.6 |
294B | E | 2.1 | 2.2 | 0.5 | 0.4 | 5.2 | 5.7 | 3.3 | 2.8 | 1.3 | 3.0 | 2.4 | 0 | 1.3 | 0.9 | 1.3 | 1.5 | 1.3 | 2.2 | 8.4 | 6.2 |
295B | Q | 3.3 | 3.1 | 4.0 | 3.1 | 18.8 | 7.6 | 13.1 | 8.3 | 1.2 | 0 | 2.4 | 3.4 | 50 | 1.8 | 3.8 | 3.6 | 7.2 | 8.7 | 20 | 18.4 |
296B | Y | 4.2 | 4.4 | 4.5 | 3.6 | 5.6 | 0 | 4.4 | 50 | 3.4 | 4.4 | 5.5 | 2.5 | 50 | 2.9 | 3.3 | 2.6 | 11.3 | 50 | 8.5 | 5.4 |
297B | N | 1.3 | 2.1 | 3.1 | 1.4 | 4.0 | 4.2 | 2.7 | 0.3 | 1.3 | 2.1 | 2.3 | 0.9 | 50 | 1.0 | 0 | 0.8 | 0.8 | 1.3 | 7.0 | 4.1 |
298B | S | 5.5 | 6.0 | 6.3 | 5.7 | 9.7 | 0 | 7.5 | 50 | 5.7 | 6.3 | 7.8 | 4.5 | 50 | 5.5 | 5.4 | 3.3 | 9.6 | 50 | 11.9 | 9.6 |
299B | T | 1.1 | 3.1 | 3.5 | 15.2 | 0.9 | 5.9 | 0 | 6.3 | 1.4 | 10.9 | 2.3 | 0.9 | 50 | 15.0 | 1.8 | 1.8 | 1.1 | 2.3 | 20 | 1.6 |
300B | Y | 3.1 | 3.7 | 4.0 | 3.8 | 2.9 | 8.8 | 2.3 | 10.5 | 2.0 | 1.5 | 2.8 | 3.2 | 50 | 4.3 | 5.9 | 4.6 | 3.1 | 10.9 | 5.7 | 0 |
301B | R | 1.5 | 2.3 | 1.4 | 0.3 | 20 | 6.4 | 20 | 6.8 | 0.1 | 3.8 | 1.7 | 0.7 | 50 | 0 | 0.6 | 2.4 | 2.7 | 7.1 | 20 | 20 |
302B | V | 3.4 | 4.0 | 5.8 | 3.9 | 20 | 9.3 | 7.0 | 0.2 | 1.8 | 3.4 | 2.9 | 4.8 | 20 | 2.8 | 5.0 | 3.7 | 2.1 | 0 | 20 | 20 |
303B | V | 0.2 | 0.2 | 1.2 | 1.2 | 20 | 5.3 | 20 | 5.8 | 3.9 | 11.4 | 4.9 | 2.3 | 0.9 | 5.3 | 6.4 | 0.4 | 0 | 0.2 | 20 | 20 |
304B | S | 1.0 | 1.9 | 4.1 | 10.8 | 20 | 7.8 | 20 | 8.3 | 7.4 | 20 | 12.1 | 2.6 | 16.4 | 14.1 | 12.0 | 0 | 1.7 | 3.6 | 20 | 20 |
305B | V | 1.5 | 1.8 | 1.7 | 3.9 | 20 | 6.2 | 20 | 0.7 | 3.2 | 4.2 | 2.9 | 0.7 | 14.7 | 4.2 | 3.3 | 1.7 | 0.9 | 0 | 20 | 20 |
306B | L | 5.2 | 7.1 | 6.7 | 7.3 | 1.5 | 11.6 | 4.9 | 3.7 | 5.1 | 0 | 6.0 | 6.0 | 12.2 | 6.9 | 14.6 | 6.2 | 4.5 | 5.5 | 20 | 1.9 |
307B | T | 1.6 | 3.0 | 2.5 | 1.9 | 1.1 | 5.5 | 3.0 | 0.2 | 1.6 | 1.2 | 3.0 | 2.1 | 0 | 1.7 | 2.3 | 1.7 | 1.1 | 0.8 | 9.7 | 1.5 |
308B | V | 5.1 | 5.8 | 12.7 | 7.4 | 20 | 11.3 | 20 | 0 | 19.1 | 6.1 | 20 | 11.7 | 50 | 10.8 | 20 | 5.6 | 4.5 | 2.5 | 20 | 20 |
309B | L | 1.3 | 2.8 | 1.9 | 1.7 | 3.2 | 5.4 | 3.3 | 0.9 | 1.5 | 1.0 | 3.2 | 0 | 0.2 | 1.2 | 0.4 | 1.6 | 1.3 | 0.8 | 5.8 | 3.3 |
310B | H | 1.7 | 2.4 | 2.5 | 3.8 | 13.1 | 6.4 | 5.5 | 3.6 | 3.6 | 7.5 | 3.7 | 1.2 | 0 | 4.1 | 10.5 | 1.2 | 0.6 | 4.6 | 11.6 | 13.6 |
311B | Q | 0 | 1.6 | 1.1 | 0.5 | 0.9 | 3.7 | 1.6 | 0.4 | 0.6 | 0.6 | 1.8 | 0 | 1.7 | 0.8 | 1.0 | 0.4 | 0 | 1.4 | 2.3 | 1.0 |
312B | D | 0 | 1.7 | 0.8 | 4.6 | 20 | 5.3 | 20 | 11.0 | 3.1 | 2.9 | 2.7 | 1.5 | 50 | 6.8 | 4.0 | 0.5 | 7.1 | 9.7 | 20 | 20 |
313B | W | 4.4 | 5.9 | 7.2 | 5.7 | 0 | 10.3 | 5.3 | 9.3 | 3.0 | 4.3 | 2.9 | 7.7 | 50 | 5.1 | 7.1 | 6.0 | 4.8 | 7.2 | 1.6 | 1.4 |
314B | L | 2.8 | 4.4 | 5.7 | 3.7 | 20 | 7.6 | 8.3 | 4.5 | 1.6 | 0 | 3.0 | 4.0 | 50 | 3.4 | 4.0 | 3.9 | 3.6 | 5.9 | 17.5 | 20 |
315B | N | 0 | 7.4 | 3.9 | 5.2 | 12.9 | 2.1 | 12.0 | 14.7 | 4.5 | 3.3 | 5.6 | 2.5 | 50 | 5.8 | 5.9 | 2.0 | 11.4 | 18.0 | 13.7 | 11.8 |
316B | G | 8.9 | 7.7 | 9.2 | 6.9 | 13.3 | 0 | 10.8 | 50 | 6.7 | 6.8 | 7.0 | 7.5 | 50 | 6.8 | 7.7 | 6.9 | 50 | 50 | 10 | 13.8 |
317B | K | 2.6 | 4.3 | 7.6 | 5.9 | 6.7 | 7.4 | 2.3 | 7.5 | 0 | 4.8 | 3.4 | 4.4 | 50 | 3.2 | 1.3 | 2.2 | 6.6 | 6.4 | 20 | 7.6 |
318B | E | 1.7 | 2.6 | 2.9 | 1.6 | 20 | 6.0 | 9.6 | 1.8 | 2.2 | 6.1 | 3.7 | 2.4 | 13.4 | 1.7 | 3.0 | 1.1 | 0 | 3.4 | 19.3 | 20 |
319B | Y | 6.9 | 7.8 | 9.3 | 10.1 | 0 | 12.7 | 4.7 | 3.1 | 6.2 | 7.1 | 6.9 | 8.0 | 50 | 9.5 | 13.1 | 7.4 | 5.5 | 3.6 | 10.4 | 0.8 |
320B | K | 1.7 | 2.9 | 6.7 | 1.9 | 20 | 7.0 | 20 | 0.6 | 0 | 8.9 | 2.0 | 3.9 | 12.6 | 1.8 | 1.2 | 1.6 | 0.7 | 1.1 | 20 | 20 |
321B | C | 0 | 4.5 | 20 | 20 | 20 | 6.2 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 2.3 | 9.1 | 19.2 | 20 | 20 |
322B | K | 2.8 | 3.8 | 6.2 | 3.3 | 20 | 8.4 | 20 | 1.8 | 0.8 | 16.3 | 3.0 | 4.6 | 50 | 2.7 | 2.7 | 3.5 | 2.0 | 0 | 20 | 20 |
323B | V | 3.5 | 4.4 | 8.8 | 7.6 | 20 | 9.8 | 20 | 5.4 | 9.2 | 20 | 6.0 | 9.2 | 50 | 9.8 | 19.4 | 4.8 | 2.7 | 0 | 20 | 20 |
324B | S | 0.5 | 2.5 | 1.4 | 0.6 | 0.4 | 5.2 | 2.7 | 3.5 | 0 | 0.2 | 2.4 | 1.3 | 11.1 | 1.0 | 2.7 | 0.9 | 1.2 | 3.4 | 2.5 | 1.2 |
325B | N | 4.1 | 5.5 | 6.9 | 5.7 | 20 | 9.6 | 20 | 1.0 | 10.5 | 11.2 | 17.0 | 0.4 | 11.5 | 5.5 | 16.5 | 3.1 | 0 | 2.1 | 20 | 50 |
326B | K | 0.9 | 2.8 | 1.8 | 1.8 | 2.6 | 4.4 | 2.5 | 4.2 | 1.3 | 2.9 | 3.5 | 0.1 | 0 | 1.2 | 1.3 | 0.7 | 2.4 | 3.4 | 6.4 | 2.4 |
327B | A | 3.1 | 4.4 | 6.1 | 3.2 | 10.3 | 7.4 | 4.0 | 7.0 | 2.8 | 2.5 | 4.5 | 3.9 | 20 | 3.5 | 3.7 | 1.4 | 0 | 2.8 | 10.3 | 12.2 |
328B | L | 4.7 | 5.4 | 6.6 | 3.3 | 20 | 9.8 | 20 | 50 | 4.1 | 0 | 15.1 | 6.0 | 50 | 3.7 | 6.2 | 5.5 | 18.4 | 50 | 20 | 50 |
329B | P | 0.6 | 2.1 | 0.9 | 1.0 | 3.8 | 3.2 | 2.8 | 2.2 | 1.3 | 2.4 | 3.2 | 0 | 0.4 | 0.3 | 0.9 | 0 | 0.6 | 1.6 | 6.4 | 3.7 |
330B | A | 0.4 | 1.8 | 1.5 | 1.2 | 3.4 | 3.3 | 2.7 | 2.1 | 1.3 | 1.9 | 3.0 | 0 | 20 | 0.6 | 1.3 | 0.1 | 0.3 | 1.8 | 6.0 | 3.7 |
表60(续)
Pos | WT | A | C | D | E | F | G | H | I | K | L | M | N | P | Q | R | S | T | V | W | Y |
331B | P | 1.6 | 3.6 | 7.8 | 10.6 | 7.3 | 6.5 | 4.6 | 8.9 | 7.7 | 13.6 | 6.3 | 5.7 | 0 | 8.3 | 7.7 | 1.7 | 5.3 | 5.2 | 6.5 | 8.0 |
332B | I | 2.0 | 3.0 | 2.6 | 0.9 | 5.8 | 6.9 | 2.6 | 0 | 2.1 | 0.1 | 2.5 | 2.6 | 50 | 0 | 2.4 | 2.3 | 1.3 | 0.9 | 15.3 | 6.6 |
333B | E | 2.2 | 2.8 | 2.7 | 0 | 8.1 | 6.4 | 7.8 | 3.4 | 3.6 | 6.1 | 3.3 | 2.6 | 3.6 | 1.2 | 3.0 | 2.4 | 1.4 | 4.9 | 8.4 | 8.8 |
334B | K | 2.2 | 3.4 | 4.2 | 2.1 | 10.4 | 7.2 | 4.1 | 1.7 | 1.8 | 3.1 | 2.9 | 2.6 | 2.8 | 1.5 | 0 | 2.7 | 1.6 | 1.4 | 5.5 | 10.8 |
335B | T | 0.5 | 1.1 | 1.9 | 0.8 | 4.8 | 4.6 | 4.4 | 0.5 | 0.3 | 3.7 | 2.2 | 0.8 | 1.7 | 1.7 | 0.6 | 0.6 | 0 | 0.8 | 5.2 | 5.1 |
336B | I | 0.7 | 1.5 | 2.5 | 1.0 | 18.4 | 5.0 | 5.4 | 0.1 | 1.9 | 4.6 | 1.9 | 1.5 | 20 | 0 | 3.0 | 1.5 | 0.5 | 0.4 | 14.2 | 19.6 |
337B | S | 0.4 | 1.1 | 4.9 | 10.6 | 20 | 3.4 | 20 | 50 | 7.9 | 11.0 | 5.1 | 3.6 | 12.8 | 6.2 | 7.0 | 0 | 4.6 | 50 | 20 | 20 |
338B | K | 4.5 | 8.2 | 7.4 | 8.0 | 20 | 9.6 | 20 | 5.3 | 0 | 2.0 | 5.7 | 6.0 | 5.8 | 6.8 | 4.9 | 5.4 | 6.4 | 6.7 | 20 | 20 |
339B | A | 1.5 | 2.8 | 3.0 | 2.1 | 2.4 | 5.5 | 3.3 | 0 | 0.4 | 0.2 | 2.8 | 1.4 | 1.5 | 0.9 | 0.7 | 1.5 | 1.1 | 0.5 | 6.6 | 2.6 |
340B | K | 1.0 | 2.7 | 1.7 | 1.3 | 1.7 | 3.7 | 2.1 | 2.4 | 0 | 2.1 | 1.9 | 0.6 | 1.0 | 0 | 1.0 | 0.2 | 1.0 | 2.3 | 7.0 | 1.8 |
SPATM技术;1DN2模板结构;+糖
用上表1-60中所列的设计计算结果来构建一系列的Fc变体文库用于实验性生产和筛选。在逐轮计算和实验筛选中实验文库得到设计。后继Fc文库的设计受益于在前文库的反馈,因此通常包含了在先前筛选中显示有利性质的Fc变体的组合。构建并通过实验测试的Fc变体的全部组示于表61中。在该表中,第1行列出了可变位置,下面的各行显示了对于野生型氨基酸和Fc变体而言在那些可变位置的氨基酸。例如,变体18具有如下四种突变:F241E、F243Y、V262T和V264R。组成该组Fc变体的可变位置残基在结构上阐明于图4中,并表示为图5中人IgG1背景下的Fc序列。
表61
变体 | 取代 | 变体 | 取代 |
1 | V264A | 50 | Y296Q |
2 | V264L | 51 | S298T |
3 | V264I | 52 | S298N |
4 | F241W | 53 | T299I |
5 | F241L | 54 | A327S |
6 | F243W | 55 | A327N |
7 | F243L | 56 | S267Q/A327S |
8 | F241L/F243L/V262I/V264I | 57 | S267L/A327S |
9 | F241W/F243W | 58 | A327L |
10 | F241W/F243W/V262A/V264A | 59 | P329F |
11 | F241L/V262I | 60 | A330L |
12 | F243L/V264I | 61 | A330Y |
13 | F243L/V262I/V264W | 62 | I332D |
14 | F241Y/F243Y/V262T/V264T | 63 | N297S |
15 | F241E/F243R/V262E/V264R | 64 | N297D |
16 | F241E/F243Q/V262T/V264E | 65 | N297S/I332E |
17 | F241R/F243Q/V262T/V264R | 66 | N297D/I332E |
18 | F241E/F243Y/V262T/V264R | 67 | N297E/I332E |
19 | L328M | 68 | D265Y/N297D/I332E |
20 | L328E | 69 | D265Y/N297D/T299L/I332E |
21 | L328F | 70 | D265F/N297E/I332E |
22 | I332E | 71 | L328L/I332E |
23 | L328M/I332E | 72 | L328Q/I332E |
24 | P244H | 73 | I332N |
25 | P245A | 74 | I332Q |
26 | P247V | 75 | V264T |
27 | W313F | 76 | V264F |
28 | P244H/P245A/P247V | 77 | V240I |
29 | P247G | 78 | V263I |
30 | V264I/I332E | 79 | V266I |
31 | F241E/F243R/V262E/V264R/I332E | 80 | T299A |
32 | F241E/F243Q/V262T/V264E/I332E | 81 | T299S |
33 | F241R/F243Q/V262T/V264R/I332E | 82 | T299V |
34 | F241E/F243Y/V262T/V264R/I332E | 83 | N325Q |
35 | S298A | 84 | N325L |
36 | S298A/I332E | 85 | N325I |
37 | S298A/E333A/K334A | 86 | S239D |
41 | S239E/I332E | 87 | S239N |
42 | S239Q/I332E | 88 | S239F |
43 | S239E | 89 | S239D/I332D |
44 | D265G | 90 | S239D/I332E |
45 | D265N | 91 | S239D/I332N |
46 | S239E/D265G | 92 | S239D/I332Q |
47 | S239E/D265N | 93 | S239E/I332D |
48 | S239E/D265Q | 94 | S239E/I332N |
49 | Y296E | 95 | S239E/I332Q |
Table 61(续)
变体 | 取代 | 变体 | 取代 |
96 | S239N/I332D | 141 | V264Y |
97 | S239N/I332E | 142 | V266A |
98 | S239N/I332N | 143 | V266T |
99 | S239N/I332Q | 144 | V266M |
100 | S239Q/I332D | 145 | E269H |
101 | S239Q/I332N | 146 | E269Y |
102 | S239Q/I332Q | 147 | E269F |
103 | K326E | 148 | E269R |
104 | Y296D | 149 | Y296S |
105 | Y296N | 150 | Y296T |
106 | N297D/I332E/F241Y/F243Y/V262T/V264T | 151 | Y296L |
107 | I332E/A330Y | 152 | Y296I |
108 | I332E/V264I/A330Y | 153 | S298H |
109 | I332E/A330L | 154 | T299H |
110 | I332E/V264I/A330L | 155 | A330V |
111 | L234D | 156 | A330I |
112 | L234E | 157 | A330F |
113 | L234N | 158 | A330R |
114 | L234Q | 159 | A330H |
115 | L234T | 160 | N325D |
116 | L234H | 161 | N325E |
117 | L234Y | 162 | N325A |
118 | L234I | 163 | N325T |
119 | L234V | 164 | N325V |
120 | L234F | 165 | N325H |
121 | L235D | 166 | L328D/I332E |
122 | L235S | 167 | L328E/I332E |
123 | L235N | 168 | L328N/I332E |
124 | L235Q | 169 | L328Q/I332E |
125 | L235T | 170 | L328V/I332E |
126 | L235H | 171 | L328T/I332E |
127 | L235Y | 172 | L328H/I332E |
128 | L235I | 173 | L328I/I332E |
129 | L235V | 174 | L328A |
130 | L235F | 175 | I332T |
131 | S239T | 176 | I332H |
132 | S239H | 177 | I332Y |
133 | S239Y | 178 | I332A |
134 | V240A | 179 | V264I/I332E/S239E |
135 | V240T | 180 | V264I/I332E/S239Q |
136 | V240M | 181 | V264I/I332E/S239E/A330Y |
137 | V263A | 182 | V264I/I332E/S239E/A330Y/S298A |
138 | V263T | 183 | N297D/I332E/S239D |
139 | V263M | 184 | N297D/I332E/S239E |
140 | V264M | 185 | N297D/I332E/S239D/D265V |
表61(续)
变体 | 取代 | 变体 | 取代 |
186187188189190191192193194195196197198199200201202203204205206207208209210211212213 | N297D/I332E/S239D/D265IN297D/I332E/S239D/D265LN297D/I332E/S239D/D265FN297D/I332E/S239D/D265YN297D/I332E/S239D/D265HN297D/I332E/S239D/D265TN297D/I332E/V264EN297D/I332E/Y296DN297D/I332E/Y296EN297D/I332E/Y296NN297D/I332E/Y296QN297D/I332E/Y296HN297D/I332E/Y296TN297D/I332E/T299VN297D/I332E/T299IN297D/I332E/T299LN297D/I332E/T299FN297D/I332E/T299HN297D/I332E/T299EN297D/I332E/A330YN297D/I332E/S298A/A330YS239D/I332E/A330YS239N/I332E/A330YS239D/I332E/A330LS239N/I332E/A330LI332E/V264I/S298AI332E/S239D/S298AI332E/S239N/S298A | 231232233234235236237238239240241242243244245246247248249250251252253254255256257258 | E269ND270QD270TD270HE272SE272KE272IE272YV273IK274TK274EK274RK274LK274YF275WN276SN276EN276RN276LN276YY278TY278EY278KY278WE283RV302IE318RK320T |
214215216217218219220221222223224225226227228229230 | S239D/I332E/V264IS239D/I332E/V264I/S298AS239D/I332E/V264I/A330LL328NL328HS239D/I332E/A330IN297D/I332E/S239D/A330LP230AE233DP230A/E233DP230A/E233D/I332ES267TS267HS267DS267NE269TE269L | 259260261262263264265266267268269270271272273274275 | K320DK320IK322TK322HV323IS324TS324DS324RS324IS324VS324LS324YK326LK326IK326TA327DA327T |
表61(续)
变体 | 取代 | 变体 | 取代 |
276 | A330S | 290 | T335Y |
277 | A330W | 291 | L234I/L235D |
278 | A330M | 292 | V240I/V266I |
279 | P331V | 293 | S239D/A330Y/I332E/L234I |
280 | P331H | 294 | S239D/A330Y/I332E/L235D |
281 | E333T | 295 | S239D/A330Y/I332E/V240I |
282 | E333H | 296 | S239D/A330Y/I332E/V264T |
283 | E333I | 297 | S239D/A330Y/I332E/V266I |
284 | E333Y | 298 | S239D/A330Y/I332E/K326E |
285 | K334I | 299 | S239D/A330Y/I332E/K326T |
286 | K334T | 300 | S239D/N297D/I332E/A330Y |
287 | K334F | 301 | S239D/N297D/I332E/A330Y/F241S/F243H/V262T/V264T |
288 | T335D | 302 | S239D/N297D/I332E/L235D |
289 | T335R | 303 | S239D/N297D/I332E/K326E |
实施例2:Fc文库的实验制备和筛选
涉及Fc变体的大多数实验在抗癌抗体阿仑单抗(Campath_,IlexPharmaceuticals LP的注册商标)中进行。阿仑单抗结合其靶抗原CD52中的短线性表位(Hale等.,1990,Tissue Antigens 35:118-127;Hale,1995,Immuntochnology 1:175-187)。已选定阿仑单抗作为初级改造模板结构,是因为其效力是部分基于其募集效应细胞的能力(Dyer等.,1989,Blood73:1431-1439;Fridend等.,1991,Transplant Proc 23:2253-2254;Hale等.,1998,Blood 92:4581-4590;Glennie等.,2000,Immunol Today 21:403-410),并因为在结合测定中制备并使用其抗原是相对直观的。为了在其它抗体背景下评估本发明优化的Fc变体,在抗-CD20抗体利妥昔单抗(Rituxan_,IDECPharmaceutica1s Corporation的注册商标)和抗-Her2抗体曲妥单抗(Herceptin_,Genentech的注册商标)中评估所选择的Fc变体。对于筛选目的而言,使用阿仑单抗、利妥昔单抗和曲妥单抗并不意在将本发明限制为任何特定抗体。
构建阿仑单抗、利妥昔单抗和曲妥单抗的IgG1全长轻链(VL-CL)和重链(VH-Cγ1-Cγ2-Cγ3)抗体基因,该构建过程利用了合适的末端限制性位点以便于亚克隆。将该基因连接入哺乳动物表达载体pcDNA3.1Zeo(Invitrogen)中。pcDNA3.1Zeo中的VH-Cγ1-Cγ2-Cγ3克隆作为Fc区诱变的模板。使用基于PCR的诱变技术将突变导入该克隆中。对Fc变体测序以证实该序列的可信度。将含有重链基因(VH-Cγ1-Cγ2-Cγ3)(野生型或变体)的质粒与含有轻链基因(VL-CL)的质粒共转染入293T细胞中。转染5天后收获培养基。使用过氧化物酶偶联的山羊抗人IgG(Jackson Immuno Research,目录#109-305-088),通过Western印迹筛选转染瘤(transfectomas)的培养上清液以监测免疫球蛋白表达。图6显示了野生型阿仑单抗和变体1-10在293T细胞中的表达。使用蛋白A亲和层析(Pierce,目录#20334)从上清液中纯化抗体。图7显示了野生型阿仑单抗蛋白纯化的结果。抗体Fc变体显示了类似于野生型的表达和纯化结果。对一些Fc变体去糖基化以便在无糖存在的条件下测定它们的溶解和功能特性。为获得去糖基化抗体,纯化的阿仑单抗抗体与肽-N-糖苷酶(PNGase F)在37℃温育24小时。图8显示的SDS PAGE凝胶证实了几个Fc变体和野生型阿仑单抗的去糖基化结果。
为了证实在这些条件下生产的阿仑单抗的功能可信度,抗原CD52肽融合至GST,在IPTG诱导下在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。未诱导和诱导的样品跑SDS PAGE凝胶。并转移到PVDF膜上。为了进行Western印迹,将来自Sotec(终浓度2.5ng/ul)的阿仑单抗或转染的293T细胞的培养基(阿仑单抗终浓度约为0.1-0.2ng/ul)作为一抗,将过氧化物酶偶联的羊抗人IgG作为二抗。图9显示了这些结果。结合靶抗原的能力证实了所表达的阿仑单抗的结构和功能可信度。预计与野生型阿仑单抗具有相同可变区的Fc变体对抗原能保持相当的结合亲和力。
为了对Fc/FcγR结合进行筛选,表达并纯化人V158FcγRIIIa、人F158FcγRIIIa、人FcγRIIb、人FcγRIIa和小鼠FcγRIII的胞外区。图10呈现的SDS PAGE凝胶显示了人V158FcγRIIIa表达和纯化的结果。通过对获得自哺乳动物基因库(Mammalian Gene Collection)(MGC:22630)的克隆进行PCR得到该受体的胞外区。将该受体与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合以便筛选。将带标签的FcγRIIIa转染入293T细胞,3天后收获并纯化含有分泌FcγRIIIa的培养基。为了进行蛋白质印迹,用抗-GST抗体作为探针探查膜。
使用AlphaScreenTM分析法(增强发光邻近均质分析法(ALPHA),PerkinElmer,Wellesley,MA),一种基于珠的非放射性发光邻近分析法,对所有设计的Fc变体测量其与FcγRIIIa和FcγRIIb的结合亲和力。激光激发供体珠以激发氧,如果供体珠足够接近受体珠,则产生化学发光反应级联,最终导致520-620nm处的荧光发射。AlphaScreenTM分析法作为一种竞争性分析法应用于筛选Fc变体。通过标准方法生物素化的野生型阿仑单抗抗体用于附着在链霉抗生物素蛋白供体珠上,带GST标签的FcγR结合在谷胱甘肽螯合的受体珠上。在缺少竞争性Fc变体条件下,野生型抗体和FcγR相互作用并在520-620nm产生信号。不带标签的Fc变体的添加与野生型竞争Fc/FcγR相互作用,减少了荧光量从而实现相对结合亲和力的测定。对所有Fc变体使用AlphaScreenTM分析法筛选能结合V158 FcγRIIIa的变体。Fc变体在阿仑单抗或曲妥单抗的背景中筛选,选出的Fc变体也在利妥昔单抗与cetuximab的背景中筛选。随后筛选能结合FcγRIIb以及其它FcγR和Fc配体的的变体。
图11显示了所选择的Fc变体与人V158 FcγRIIIa结合的AlphaScreenTM数据。结合数据对每条具体曲线的最大和最小发光信号标准化,该最大和最小发光信号分别提供自低和高浓度竞争性抗体的基线。数据使用非线性回归对单位点竞争模型(one site competition model)拟合,这些拟合在该图中通过曲线表现。对于每种抗体这些拟合提供了50%抑制浓度(IC50)(即达到50%抑制所需要的浓度),通过图11中点线说明,因此使得Fc变体的相对结合亲和力能够定量测定。于此,野生型阿仑单抗具有(4.63×10-9)×(2)=9.2nM的IC50,而S239D具有(3.98×10-10)×(2)=0.8nM的IC50。因此S239D阿仑单抗较野生型阿仑单抗对人V158 FcγRIIIa具有9.2nM/0.8nM=11.64倍的更紧密的结合。对于所有Fc变体与人V158 FcγRIIIa的结合进行类似的计算。也筛选所选择的Fc变体与人FcγRIIb的结合,这些AlphaScreenTM结合数据的实例示于图12中。表61呈现了通过AlphaScreenTM分析法所测定的Fc变体与人V158 FcγRIIIa(栏3)及人FcγRIIb(栏4)的结合相对于亲本抗体增加的倍数或减少的倍数。对于这些数据来说,相对于野生型Fc,倍数大于1表示结合亲和力增加,倍数小于1表示结合亲和力减少。1-206h217-218的数据获自阿仑单抗的背景中,除标有星号(*)的那些外(其在曲妥单抗(曲妥单抗)中测试)。对于207-216以及219-230的所有数据均获得自在曲妥单抗背景中。
表62
变体 | 取代 | FcγRIIIa倍 | FcγRIIb倍 | FcγIIIa-倍:FcγIIb-倍 |
123456789101112131415161718192021 | V264AV264LV264IF241WF241LF243WF243LF241L/F243L/V262I/V264IF241W/F243WF241W/F243W/V262A/V264AF241L/V262IF243L/V264IF243L/V262I/V264WF241Y/F243Y/V262T/V264TF241E/F243R/V262E/V264RF241E/F243Q/V262T/V264EF241R/F243Q/V262T/V264RF241E/F243Y/V262T/V264RL328ML328EL328F | 0.530.561.430.290.260.510.510.090.070.040.061.230.020.050.050.070.020.050.210.120.24 |
2223242526272829303132333435363741424344454647484950 | I332EL328M/I332EP244HP245AP247VW313FP244H/P245A/P247VP247GV264I/I332EF241E/F243R/V262E/V264R/I332EF241E/F243Q/V262T/V264E/I332EF241R/F243Q/V262T/V264R/I332EF241E/F243Y/V262T/V264R/I332ES298AS298A/I332ES298A/E333A/K334AS239E/I332ES239Q/I332ES239ED265GD265NS239E/D265GS239E/D265NS239E/D265QY296EY296Q | 6.722.600.830.250.530.880.930.5412.490.190.102.2121.732.565.806.6010.16<0.02<0.02<0.020.020.050.730.52 | 3.931.57*3.494.681.110.43 | 1.717.961.661.410.661.21 |
表62(续)
变体 | 取代 | FcγRIIIa倍 | FcγRIIb倍 | FcγIIIa-倍:FcγIIb-倍 |
515253545556575859606162636465666768697071727374757677 | S298TS298NT299IA327SA327NS267Q/A327SS267L/A327SA327LP329FA330LA330YI332DN297SN297DN297S/I332EN297D/I332EN297E/I332ED265Y/N297D/I332ED265Y/N297D/T299L/I332ED265F/N297E/I332EL328I/I332EL328Q/I332EI332NI332QV264TV264FV240I | 0.940.41<0.020.230.190.03<0.020.05<0.020.731.6417.80<0.02<0.02<0.020.08<0.02<0.02<0.02<0.027.031.540.390.372.730.163.25 | <0.02<0.020.391.150.380.753.34<0.02 | 0.590.171.922.195.33 |
787980818283848586878889909192939495969798 | V263IV266IT299AT299ST299VN325QN325LN325IS239DS239NS239FS239D/I332DS239D/I332ES239D/I332NS239D/I332QS239E/I332DS239E/I332NS239E/I332QS239N/I332DS239N/I332ES239N/I332N | 0.101.860.030.15<0.02<0.02<0.02<0.0211.64<0.020.2214.1056.107.199.289.3311.933.803.0814.210.43 | 4.47*<0.0219.71* | 2.602.85 |
表62(续)
变体 | 取代 | FcγRIIIa倍 | FcγRIIb倍 | FcγIIIa-倍:FcγIIb-倍 |
99100101102103 | S239N/I332QS239Q/I332DS239Q/I332NS239Q/I332QK326E | 0.565.050.390.593.85 |
104105106107108109110111112113114115116117118119120121122123124125126127128129130131132 | Y296DY296NF241Y/F243Y/V262T/V264T/N297D/I332EA330Y/I332EV264I/A330Y/I332EA330L/I332EV264I/A330L/I332EL234DL234EL234NL234QL234TL234HL234YL234IL234VL234FL235DL235SL235NL235QL235TL235HL235YL235IL235VL235FS239TS239H | 0.620.290.1512.0212.0010.3411.150.211.340.560.370.350.331.421.550.380.301.661.250.400.510.520.411.191.100.480.731.340.20 | 4.403.542.031.792.211.391.081.143.6310.150.943.53 | 2.733.395.096.230.610.401.311.360.460.121.170.21 |
133134135136137138139140141142143144145146 | S239YV240AV240TV240MV263AV263TV263MV264MV264YV266AV266TV266ME269HE269Y | 0.210.702.060.430.050.261.02<0.020.450.62<0.020.12 | 0.141.380.27 | 5.001.493.78 |
表62(续)
变体 | 取代 | FcγRIIIa倍 | FcγRIIb倍 | FcγIIIa-倍:FcγIIb-倍 |
147148149150151152153154155156157158159 | E269FE269RY296SY296TY296LY296IA298HT299HA330VA330IA330FA330RA330H | 0.160.050.12<0.020.220.090.27<0.020.431.710.60<0.020.52 | 0.02 | 85.5 |
160161162163164165166167168169170171172173174175176177178179180181182183184185186187188189 | N325DN325EN325AN325TN325VN325HL328D/I332EL328E/I332EL328N/I332EL328Q/I332EL328V/I332EL328T/I332EL328H/I332EL328I/I332EL328AI332TI332HI332YI332AS239E/V264I/I332ES239Q/V264I/I332ES239E/V264I/A330Y/I332ES239E/V264I/S298A/A330Y/I332ES239D/N297D/I332ES239E/N297D/I332ES239D/D265V/N297D/I332ES239D/D265I/N297D/I332ES239D/D265L/N297D/I332ES239D/D265F/N297D/I332ES239D/D265Y/N297D/I332E | 0.41<0.020.111.100.480.731.340.20<0.020.702.061.10<0.023.490.200.720.460.760.8915.462.148.530.280.060.030.01<0.02<0.020.02 |
190191192193194 | S239D/D265H/N297D/I332ES239D/D265T/N297D/I332EV264E/N297D/I332EY296D/N297D/I332EY296E/N297D/I332E | 0.04<0.020.05<0.02 |
表62(续)
变体 | 取代 | FcγRIIIa倍 | FcγRIIb倍 | FcγIIIa-倍:FcγIIb-倍 |
195196197198199200201202203204205206207208209210211212213214215 | Y296N/N297D/I332EY296Q/N297D/I332EY296H/N297D/I332EY296T/N297D/I332EN297D/T299V/I332EN297D/T299I/I332EN297D/T299L/I332EN297D/T299F/I332EN297D/T299H/I332EN297D/T299E/I332EN297D/A330Y/I332EN297D/S298A/A330Y/I332ES239D/A330Y/I332ES239N/A330Y/I332ES239D/A330L/I332ES239N/A330L/I332EV264I/S298A/I332ES239D/S298A/I332ES239N/S298A/I332ES239D/V264I/I332ES239D/V264I/S298A/I332E | 0.04<0.02<0.02<0.02<0.02<0.02<0.02<0.02<0.02<0.020.430.16129.5814.22138.6312.9516.50295.1632.1436.58 | 7.506.165.1514.39 | 18.4847.926.242.54 |
216217218219220221222223224225226227228229230231232233234235236237238239240241242243244245 | S239D/V264I/A330L/I332EL328NL328HS239D/I332E/A330IN297D/I332E/S239D/A330LP230AE233DP230A/E233DP230A/E233D/I332ES267TS267HS267DS267NE269TE269LE269ND270QD270TD270HE272SE272KE272IE272YV273IK274TK274EK274RK274LK274YF275W | 0.59<0.0259.11.090.850.921.87<0.02<0.02<0.02<0.02<0.02<0.028.700.791.416.111.411.091.061.11 |
表62(续)
变体 | 取代 | FcγRIIIa倍 | FcγRIIb倍 | FcγIIIa-倍:FcγIIb-倍 |
246247248249250251252253254255256257258259260261262263264265266267268269270271272 | N276SN276EN276RN276LN276YY278TY278EY278KY278WE283RV302IE318RK320TK320DK320IK322TK322HV323IS324TS324DS324RS324IS324VS324LS324YK326LK326I | 0.410.870.661.070.561.870.900.410.671.011.060.831.070.711.151.17<0.020.981.43 |
273274275276277278279280281282283284285286287288289290291292293294295296297298299300301 | K326TA327DA327TA330SA330WA330MP331VP331HE333TE333HE333IE333YK334IK334TK334FT335DT335RT335YL234I/L235DV240I/V266IS239D/A330Y/I332E/L234IS239D/A330Y/I332E/L235DS239D/A330Y/I332E/V240IS239D/A330Y/I332E/V264TS239D/A330Y/I332E/V266IS239D/A330Y/I332E/K326ES239D/A330Y/I332E/K326TS239D/N297D/I332E/A330YS239D/N297D/I332E/A330Y/F241S/F243H/V262T/V264T | 1.88<0.02<0.020.780.752.792.581.560.071.7222.397.0427.9717.7264.1459.03<0.02<0.02 |
302303 | S239D/N297D/I332E/L235DS239D/N297D/I332E/K326E |
实施例3:对FcγR选择性增强的结合
许多具有优化特性的有价值Fc变体获得自FcγRIIIa及FcγRIIb筛选。表62提供了对FcγRIIIa结合更紧密的Fc变体,并因此作为候选物用于改良抗体和Fc融合体的效应器功能。这些候选物包括了许多变体,所述变体包含了在239、264、272,274,330和332位的取代。图13a和13b显示了一些候选Fc变体的AlphaScreenTM结合数据。这些Fc变体中大多数提供了超过S298A/E333A/K334的基本上更高的FcγRIIIa结合增加。
选择的Fc变体在多种抗体的背景下筛选以研究其适用性的广泛度。在曲妥单抗,利妥昔单抗和cetuximab的背景中,选择的Fc变体与人V158FcγRIIIa结合的AlphaScreenTM数据分别显示于图14a,14b,15a和15b中。结合图13中阿仑抗体的数据,所述结果表明与抗体背景无关的增强,由此本发明的Fc变体可广泛用于抗体以及Fc融合体。
已获得Fc变体,其显示与FcγRIIIa结合较与FcγRIIb不同的增加。如所讨论的,最优的效应器功能由Fc变体产生,其中对激活FcγR的亲和力大于对抑制型FcγRIIb的亲和力。AlphaScreenTM数据直接比较了与FcγRIIIa及FcγR11b的结合,对于两种Fc变体而言,图16a和16b中显示了特异性曲线图。在本文中称为FcγRIIIa倍数:FcγRIIIb倍数比率的概念,其在数量上定义为活化的FcγR的增加的倍数或减少的倍数(表62,栏3)除以抑制型FcγR增加的倍数或减少的倍数(表62,栏4)。该值提供于表62栏5。表62显示了提供该特异性曲线图的Fc变体具有高达86:1的FcγRIIIa倍数:FcγRIIb倍数比率。
用于增强效应器功能的本发明最有前景的一些Fc变体能大幅度增加对FcγRIIIa的亲和力及有利的FcγRIIIa倍数:FcγRIIb倍数比率。这些变体包括,例如,S239D/1332E(FcγRIIIa倍数=56,FcγRIIIa倍数:FcγRIIb倍数=3)、S239D/A330Y/1332E(FcγRIIIa倍数=130)、S239D/A330L/1332E(FcγRIIIa倍数=139,FcγRIIIa倍数:FcγRIIb倍数=18)以及S239D/S298A/1332E(FcγRIIIa倍数=295,FcγRIIIa倍数:FcγRIIb倍数=48)。图17显示了这些变体和其它Fc变体与人V158 FcγRγIIIa的AlphaScreenTM结合数据。
因为许多FcγR有助于效应器功能,所以另外筛选抗其它受体的Fc变体可值得进行。图18显示了选择的Fc变体与人R131 FcγRIIa结合的AlphaScreenTM数据。可以看到,那些具有有利的结合增强作用和特征曲线的前述变体也显示了与该活化型受体的结合增强。使用FcγRIIIa、FcγRIIb和FcγIIc并不意在将实验测试限制为这些特定的FcγR;预计可用于筛选的其它FcγR,包括但不限于如前所述的来自人、小鼠、大鼠、猴子等的FcγRI、FcγRII和FcγRIII的无数同种型和同种异型。
总的来说,对于改良抗体和Fc融合体的效应器功能而言,图11-18和表62所提供的FcγR结合数据表明了在位置234,235,239,240,243,264,266,272,274,278,325,328,330和332上的许多取代是有价值的候选物。因为其中一些取代物的组合通常能导致叠加的或协同的结合改良,应当预计到,迄今为止未探查过的表62中的Fc变体的组合也能提供有利的结果。因此表62中所有的Fc变体的组合应当考虑。同样地,表62中任何Fc变体与其它公开的或未公开的Fc变体的组合也能提供有利特性,且这些组合也应当考虑。此外,从这些结果中应当预计到,在位置234,235,239,240,243,264,266,325,328,330和332上的其它取代也可提供有利的结合增强作用和特异性,因此在这些位置上不同于那些列于表62中的取代应当考虑。
实施例4:对FcγR减少的结合
如所讨论的,尽管需要更强的效应器功能,但是对于某些抗体治疗剂,所需的是减少或消除效应器功能。表62中的几个Fc变体基本上减少或消除了与FcγR的结合,因此可供其中不需要效应器功能的抗体和Fc融合体使用。上述变体的某些实例的AlphaScreenTM结合数据显示于图19a和19b中。这些Fc变体以及它们在组合中的使用,可供在所需时用于消除效应器功能,例如在作用机理涉及抑制或拮抗而不是杀死携带靶抗原的细胞的抗体和Fc融合体中。
实施例5:非糖基化Fc变体
如所讨论的,当前实验的一个目的是为获得优化的非糖基化Fc变体。对于该目的而言,一些Fc变体提供了朝这一目标的显著的进展。因为N297是糖基化位点,在N297的取代产生了非糖基化的Fc。尽管所有其它包含N297取代的Fc变体完全消除了与FcγR的结合,但N297D/I332E对FcγRIIIa仍具有显著的结合亲和力,显示于表62并阐明于图20中。由于缺少该变体的高分辨率结构,因此该结果的确切原因尚不明了,尽管计算筛选预测暗示其可能是由于新的有利的Fc/FcγR相互作用与有利的静电特性的组合。实际上,其它静电学取代可预想用于非糖基化Fc的进一步优化。表62显示了其它非糖基化Fc变体,例如提供了结合增强作用的S239D/N297D/I332E和N297D/A330Y/I332E,其对FcγRllla的亲和力分别为糖基化野生型阿仑单抗的0.28倍和0.43倍。应当考虑这些变体与能增强与FcγR结合的其它Fc变体的组合,该组合目的在于获得能结合一种或多种FcγR的非糖基化Fc变体,该变体所具有亲和力大约相当于或甚至更好于糖基化的亲本Fc。在缺少糖的条件下,额外一组有价值的Fc变体提供了增强的稳定性和溶解性。包含在位置241、243、262和264取代的Fc变体消除了与FR的结合,所述位置并不介导与FR的结合但决定糖和Fc之间的界面,推测是由于它们干扰了糖的构象。但是,在去糖基化型中,Fc变体F241E/F243R/V262E/V264R,F241E/F243Q/V262T/V264E,F241R/F243QV262T/V264R,和F241E/F243Y/V262T/V264R较糖基化型显示了与FcγRIIIa的较强结合,通过图21中的AlphaScreenTM数据显示了该结果。该结果表明对于非糖基化Fc的结构、稳定性、溶解性及功能而言,这些位置是关键位置。这些结果共同暗示了蛋白质工程可用于在无糖的情况下恢复抗体和Fc融合体的有利功能和溶解特性,并为产生具有有利溶解特性和完整功能的包含在这些和其它Fc位置取代的非糖基化抗体和Fc融合体开辟了一条途径。
实施例6:Fc变体对FcγRIIIa多态型的亲和力
如上所讨论,Fc介导的效应器功能的一个重要参数是Fc对FcγRIIIa的V158和F158多态型的亲和力。AlphaScreenTM数据比较了选择的变体对两种同种异型受体的结合,结果显示于图22a(V158FcγRIIIa)和图22b(F158FcγRIIIa)中。可以看到,所有变体都改良了与两种FcγRIIIa同种异型的结合。这些数据表明本发明那些具有增强效应器功能的Fc变体可广泛地应用于全部患者群体中,对于最需要其的低应答患者群体而言,临床疗效可潜在地最大增强。
使用表面胞质共振技术(SPR)(Biacore,Uppsala,Sweden)进一步研究这些Fc变体的FcγR结合亲和力。SPR是一种非常灵敏的定量方法,可用于蛋白质-蛋白质相互作用结合亲和力的测量,并已有效地用于测量Fc/FcγR的结合(Radaev等,2001,J Biol Chem 276:16478-16483)。因此对A1phaScreenTM分析法而言,SPR提供了一种极好的互补结合分析法。带有His标签的V158FcγRIIIa固定在SPR芯片上,接着一定浓度范围的野生型和Fc变体阿仑单抗抗体流过该芯片。使用标准曲线拟合方法拟合数据获得结合常数。表63呈现了使用SPR获得的、所选的Fc变体与V158 FcγRllla及F158 FcγRIIIa结合的解离常数(Kd),接着与自AlphaScreenTM分析法获得的IC50比较。用每个变体的Kd和IC50除以野生型阿仑单抗的Kd和IC50,获得较野生型(倍数)提高的倍数。
表63
SPRV158FcγRIIIa | SPRF158FcγRIIIa | AlphaScreenTMV158 FcγRIIIa | AlphaScreenTMF158 FcγRIIIa | |||||
Kd(nM) | 倍 | Kd(nM) | 倍 | IC50(nM) | 倍 | IC50(nM) | 倍 | |
WT | 68 | 730 | 6.4 | 17.2 | ||||
V264I | 64 | 1.1 | 550 | 1.3 | 4.5 | 1.4 | 11.5 | 1.5 |
I332E | 31 | 2.2 | 72 | 10.1 | 1.0 | 6.4 | 2.5 | 6.9 |
V264I/I332E | 17 | 4.0 | 52 | 14.0 | 0.5 | 12.8 | 1.1 | 15.6 |
S298A | 52 | 1.3 | 285 | 2.6 | 2.9 | 2.2 | 12.0 | 1.4 |
S298A/E333A/K334A | 39 | 1.7 | 156 | 4.7 | 2.5 | 2.6 | 7.5 | 2.3 |
SPR数据支持了通过AlphaScreenTM分析法所观察到的对FcγRllla亲和力的提高。表63进一步描述了V264I/I332E和I332E较S298A及S298A/E333A/K334A的优越性;而S298A/E333A/K334A分别使Fc与V158及F158FcγRIIIa的结合提高了1.7倍和4.7倍,I332E显示了上述结合分别增加了2.2倍和10.1倍,以及V264I/I332E显示了4.0倍和14倍的结合增强。也值得注意的是V264I/1332E对F158 FcγRIIIa的亲和力(52nM)优于野生型对V158同种异型的亲合力(68nM),暗示该Fc变体以及那些对结合甚至具有更多提高的变体,可使抗体对低应答患者群体的临床疗效能够达到当前高应答者所可能的水平。SPR和AlphaScreenTM结合测量法之间的相关性显示于图23a-23d中。对于与V158FcγRIIIa及F158FcγRIIIa结合而言,图23a和23b分别显示了Kd-IC50相关性,图23c和23d分别显示了对于给合V158FcγRIIIa和F158FcγRIIIa的改良倍数(fold-improvement)的相关性。这些数据令人满意地拟合为直线(r2=0.9,r2=0.84,r2=0.98以及r2=0.90)证明了AlphaScreenTM测量法的精确性,并确认其能用于测定Fc变体的相对FcγR结合亲和力。
还获得了选择的曲妥单抗Fc变体与人V158 FcγRIIIa,F158 FcγRIIIa,和FcγRIIb结合的SPR数据。所述数据显示于表64。受试Fc变体显示与活化型受体FcγRIIIa的结合的实质上的增强,其强度超过观察到的S239D/I332E/S298A与F158FcγRIIIa的相互作用100倍。此外,对于最好的FcγRIIIa结合物,观察了3-4的F158FcγRIIIa/FcγRIIb比值。
表64
SPRV158 FcγRIIIa | SPRF158 FcγRIIIa | SPRFcγRIIb | ||||
Kd(nM) | 倍 | Kd(nM) | 倍 | IC50(nM) | 倍 | |
WT | 363.5 | 503 | 769 | |||
V264I/I332E | 76.9 | 4.7 | 252 | 2.0 | 756 | 1.0 |
V264I/I332E/A330L | 113.0 | 3.2 | 88 | 5.7 | 353 | 2.2 |
S239D/I332E/A330L | 8.2 | 44.3 | 8.9 | 56.5 | 46 | 16.7 |
S239D/I332E/S298A | 8.7 | 41.8 | 4.9 | 102.7 | 32 | 24.0 |
S239D/I332E/V264I/A330L | 12.7 | 28.6 | 6.3 | 79.8 | 35 | 22.0 |
实施例7.Fc变体的ADCC
为了测定对效应器功能的影响,对选择的Fc变体进行基于细胞的ADCC分析法。使用基于DELFIA_EuTDA的细胞毒性分析法(Perkin Elmer,MA)测定ADCC,纯化的人外周血单个核细胞(PBMC)作为效应细胞。在以1×106细胞/毫升向靶细胞中加入BATDA,洗涤4次并接种入96孔培养板,密度为10,000细胞/毫升。接着使用Fc变体或野生型抗体在指示的终浓度下调理靶细胞。人PBMCs以所指示的靶细胞过量倍数添加,并在37℃温育培养板4小时。共培养的细胞在500xg离心,上清液转移至单独的培养板上并与Eu溶液温育,使用Packard Fusion阅读仪(Packard Biosciences,IL)测定相对荧光单位。样品以平行三份测定以提供误差估计(n=3,+/-S.D.)。对于V158或F158 FcγRIIIa同种异型而言,使用PCR证实PBMCs是同种异型的。
使用DoHH-2淋巴瘤靶细胞对Fc变体及野生型阿仑单抗进行ADCC分析法。图24a是条形图,显示了这些蛋白质在10ng/ml抗体浓度的ADCC。结果显示了与野生型阿仑单抗相比,阿仑单抗Fc变体I332E,V264I和I332E/V264I具有实质上增强的ADCC,ADCC的增强与它们同FcγRIIIa的结合的增强成正比,所述的结合增强如AlphaScreenTM分析法和SPR所描述的。ADCC对抗体浓度的剂量依赖显示于图24b中。结合数据对每条具体曲线的最大和最小发光信号标准化,该最大和最小发光信号分别提供自低和高浓度抗体的基线。数据使用非线性回归对S形剂量-反应模型拟合,在图中表示为曲线。该拟合使半数有效浓度(EC50)(即50%有效性需要的浓度)能够测定,提供了每种Fc变体的ADCC相对增加量。对于这些结合数据而言,EC50s类似于获得自AlphaScreenTM竞争数据的IC50,因此由这些数值所引出的结果类似于实施例2和图11中所述的。在图24b中,获得自对数据的拟合的log(EC50),对于野生型、V264I/I332E以及S239D/I332E阿仑单抗而言,分别为0.99、0.60和0.49,因此它们各自的EC50s为9.9、4.0和3.0。因此,通过使用表达杂合的V158/F158 FcγRIIIa的PBMC,V264I/I332E和S239E/I332E较野生型阿仑单抗分别提供了2.5倍和3.3倍的ADCC增加。这些数据总结于下表65中。
表65
log(EC50) | EC50(ng/ml) | 相对于野生型的增强倍数 | |
WT | 0.99 | 9.9 | |
V264I/I332E | 0.60 | 4.0 | 2.5 |
S239D/I332E | 0.49 | 3.0 | 3.3 |
为了确定这些ADCC增强作用是否能广泛地应用于抗体中,在利妥昔单抗和曲妥单抗背景中评估选择的Fc变体。使用两种乳腺癌靶细胞系BT474和Sk-Br-3对Fc变体和野生型曲妥单抗进行ADCC分析。图25a所呈现的条形图显示了在1ng/ml抗体浓度的ADCC。结果表明相对于野生型利妥昔单抗,V264I和V264I/I332E曲妥单抗提供了实质上增强的ADCC,相对ADCC增强与它们与FcγRIIIa结合的增强成比例,如AlphaScreenTM分析法和SPR所示。图25b和25c显示了对于所选Fc变体,ADCC对抗体浓度的剂量依赖。获得自这些数据拟合结果的EC50以及相对的ADCC倍数提高提供于下表66中。当与A330L以及A330Y组合时,对于I332E曲妥单抗观察到明显的ADCC增强。此外,S239D/A330L/I332E提供了实质上的ADCC增强,相对于WT曲妥单抗和S298A/E333A/K334A而言,超过表达纯合F158/F158FcγRIIIa的PBMC的300倍,与通过AlphaScreenTM测定和SPR观察到的FcγR结合数据一致。
表66
log(EC50) | EC50(ng/ml) | 相对于野生型的增强倍数 | |
图25b | |||
WT | 1.1 | 11.5 | |
I332E | 0.34 | 2.2 | 5.2 |
A330Y/I332E | -0.04 | 0.9 | 12.8 |
A330L/I332E | 0.04 | 1.1 | 10.5 |
图25d | |||
WT | -0.15 | 0.71 |
S298A/E333A/K334A | -0.72 | 0.20 | 3.6 |
S239D/A330L/I332E | -2.65 | 0.0022 | 323 |
使用WIL2-S淋巴瘤靶细胞对V264I/I332E,WT,和S298A/D333A/K334A利妥昔单抗进行ADCC分析。图26a显示的条形图说明了这些蛋白在1ng/ml抗体浓度时的ADCC。结果表明与野生型曲妥单抗比较,V264I/I332E利妥昔单抗提供了实质上增强的ADCC,以及优于S298A/D333A/K334A的ADCC,与AlphaScreenTM分析法和SPR观察到的与FcγRIIIa的结合增强一致。图26b和26C显示对于所选Fc变体,ADCC对抗体浓度的剂量依赖性。获得自这些数据拟合结果的EC50和ADCC的相对倍数提高提供于下表67中。如所见,对于表达纯合F158/F158FcγRIIIa的PBMC,S239D/I332E/A330L利妥昔单抗提供超过WT900倍的EC50增强。对阿仑单抗,曲妥单抗和利妥昔单抗观察到的ADCC增强的差异很可能是由于使用不同PBMC,不同抗体以及不同靶细胞系。
表67
log(EC50) | EC50(ng/ml) | 相对于野生型的增强倍数 | |
图26b | |||
WT | 0.23 | 1.7 | |
S298A/E333A/K334A | -0.44 | 0.37 | 4.6 |
V264I/I332E | -0.83 | 0.15 | 11.3 |
图26c | |||
WT | 0.77 | 5.9 | |
S239D/I332E/A330L | -2.20 | 0.0063 | 937 |
对ADCC数据进行标准化,使得每种Fc多肽的上下基线设定为该具体Fc多肽的最小和最大荧光信号,通常是分别为最低和最高抗体浓度的荧光信号。尽管以这种方式给出数据使得能直观比较不同抗体的EC50(是以这种方式给出数据的原因),关于每种Fc多肽实现的效应物功能的绝对水平的重要信息丢失。图27a和27b分别给出曲妥单抗和利妥昔单抗的基于细胞的ADCC数据,其根据该试验的绝对最小溶解以及该试验的绝对最大裂解而标准化,前者由单独的PBMC(没有抗体)存在的条件下靶细胞的荧光信号提供,后者由Triton X1000存在下靶细胞的荧光信号提供。所述图显示不仅抗体EC50(反映抗体相对效力)不同,其在抗体饱和浓度时ADCC最大水平(反映它们的相对有效性)也不同。两个术语效力和有效性,宽泛地指所需的临床性质。但是在目前的临床背景下,它们被解释为特异性性质,并由此在本文清楚地解释。本试验中所用的“效力”指抗体或Fc融合体的EC50。本试验中所用的“有效性”指抗体或Fc融合体在饱和水平的最大可能效应物功能。除了本文所述效力的实质提高,图27a和27b显示本发明的Fc变体提供超过WT曲妥单抗和利妥昔单抗的100%的增加。
控制抗癌抗体临床效力的重要参数是靶抗原在肿瘤细胞表面的表达水平。因此,增强ADCC的Fc变体的主要临床优点可能是其使得能够靶向表达低水平抗原的肿瘤。为检验该假设,检测WT和Fc变体曲妥单抗抗体介导针对表达不同Her2/neu靶抗原水平的不同细胞系的ADCC的能力。利用DELFIA EuTDA Cytotoxicity试剂盒(PerkinElmer,Boston,MA),对用表达扩增到低水平的Her2/neu受体的各种细胞系进行ADCC分析,所述细胞系包括Sk-Br-3(1×106拷贝),SkOV3(~1×105),OVCAR3(~1×104),和MCF-7(~3×103拷贝)。靶细胞成批负载BATDA持续25分钟,利用培养基多次洗涤,并以10,000细胞每孔接种在96孔板中。用各种浓度的抗体(在_log步骤中,终浓度范围100ng/ml-.0316ng/ml,不包括处理对照)调理靶细胞15分钟。随后将分离自淡黄色-外壳(buffy-coat)并作为纯合F158/F158FcγRIIIa的同种异型的人PBMC加入以过量25-倍的经调理的细胞,并在37℃共培养4hrs。随后,离心所述板,去除上清并用Eu3+溶液处理,利用Packard FusionTMα-FP HT读数仪(PerkinElmer,Boston,MA)测定相对荧光单位(与细胞裂解水平相关)。该试验一式三份进行。图28显示比较WT和Fc变体曲妥单抗对四种不同Her2/neu+细胞系的ADCC数据。在高、中、低靶抗原表达水平下,S239D/I332E和S239D/I332E/A330L变体提供超过WT曲妥单抗的ADCC增强。该结果提示本发明的Fc变体可扩大抗癌抗体的治疗窗。
自然杀伤(NK)细胞是存在PBMC中的细胞亚群,认为其在ADCC中起重要作用。选择的Fc变体在基于细胞的ADCC测定中检测,其中自然杀伤(NK)细胞而不是PBMC用作效应细胞。在该实验中,用内源型乳糖脱氢酶(LDH)而不是EuTDA的释放来监测细胞裂解。图29显示,当NK细胞用作效应细胞时,Fc变体显示实质的ADCC增强。此外,结合以前的试验,所述结果表明本发明的Fc变体显示实质上的ADCC增强而与所用效应细胞或检测方法无关。
实施例8.Fc变体的ADCP
另一种重要的FcγR-介导的效应物功能是ADCP。靶癌细胞的吞噬不仅导致靶细胞被立即破坏,而且由于吞噬是抗原呈递细胞对抗原吸收和加工的可能机制,增强的ADCP还可改善抗体或Fc融合体继发获得性免疫反应的能力。本发明Fc变体介导ADCP的能力由此得以研究。单核细胞利用Percoll梯度分离自杂合V158/F158 FcγRIIIa PBMC。在存在0.1ng/ml的条件下培养一周后,分化的巨噬细胞用EDTA/PBS解离并用亲脂荧光团PKH26根据生产商的方案(Sigma,St Louis,Mo)进行标记。Sk-Br-3靶细胞用PKH67(Sigma,St Louis,Mo)标记,以20,000细胞每孔接种于96孔板中,并用所述终浓度的WT或Fc变体曲妥单抗处理。PKH26-标记的巨噬细胞随后以20,000细胞每孔加入经调理的,标记的1Sk-Br-3细胞,所述细胞共培养18小时然后加工所述细胞用于双重标记流式细胞分析。百分比吞噬测定为10,000次计数后,用PKH76和PKH26共标记的细胞数目(巨噬细胞+Sk-Br-3)相对于群体(吞噬的+非吞噬的)中Sk-Br-3总数的值。图30显示比较各种抗体浓度的WT与Fc变体曲妥单抗的数据。该结果表明S239D/I332E/A330L变体明显提供超过WT曲妥单抗的ADCP增强。
实施例9.Fc变体的补体结合以及活化
补体蛋白C1q与Fc上邻近FcγR结合位点的位点结合,由此谨慎测定Fc受体是否保持了募集和活化补体的能力。利用AlphaScreenTM实验测定选择的Fc变体与补体蛋白C1q的结合。所述试验利用生物素化的WT阿仑单抗抗体和直接偶联于受体珠的C1q进行,所述抗体附着于链霉抗生物素供体珠,如实施例2所述。图31a所示V264I,I332E,S239E,和V264I/I332E利妥昔单抗的结合数据表明C1q结合未受影响。也对选择的Fc受体进行基于细胞的CDC测定以研究Fc受体是否保持活化补体的能力。用Alamar Blue监测人血清补体(Quidel,San Diego,CA)对Fc变体和WT利妥昔单抗-调理的WIL2-S淋巴瘤细胞的裂解。图31b所示数据显示,对于Fc变体S239E,V264I,和V264I/I332E利妥昔单抗而言,CDC没有受到影响。反之,图31c显示Fc变体S239D/I332E/A330L的CDC被完全消除,而S239D/I332E变体介导与WT利妥昔单抗相当的CDC。这些结果表明,蛋白质改造可用于区分不同效应功能。所述控制不仅能够使得产生具有经改造适于所需临床结果的性质的抗体和Fc融合体,也提供了独特的系列试剂,其可用于实验中研究效应功能生物学。
实施例10.Fc变体的蛋白质A和FcRn结合
如所述,细菌蛋白质A和G以及新生儿Fc受体FcRn结合Cγ2与Cγ3结构域之间的Fc区。蛋白质A通常用于抗体纯化,FcRn在抗体药物动力学和转运中起重要作用。其因此对于研究本发明的Fc变体结合蛋白质A和FcRn的能力而言是重要的。AlphaScreenTM实验用于利用实施例2所述附着于链霉抗生物素供体珠的生物素化WT阿仑单抗以及与受体珠直接偶联的蛋白质A和FcRn,来测定选择的Fc变体与蛋白质A和人FcRn的结合。图32中显示蛋白质A的结合数据以及图33显示FcRn的结合数据。结果表明Cγ2-Cγ3铰链区不受Fc取代影响,且重要的是,所述Fc变体与蛋白质A和FcRn结合的能力不受影响。
实施例11.Fc变体与小鼠FcγR结合的能力
相对于非人FcγR优化Fc可用于在动物模型中试验性检测Fc变体。例如,当在小鼠(例如裸小鼠,SCID小鼠,异种移植小鼠,和/或转基因小鼠)中检测时,包含Fc变体的抗体和Fc融合体可提供有关临床有效性,作用机制等的有价值的信息,所述Fc变体为一或多种FcγR而优化。为了评估本发明的Fc变体是否可用于所述实验中,所选Fc变体对小鼠FcγRIII的亲和性利用AlphaScreenTM试验测定。AlphaScreenTM实验利用实施例2所述附着于链霉抗生物素供体珠的生物素化WT阿仑单抗以及连接于谷胱甘肽鳌合物受体珠的GST-标记的小鼠FcγRIII进行,后者如实施例2所述表达并纯化。阿仑单抗和曲妥单抗背景下的这些结合数据分别显示于图34a和34b。结果显示,一些增强与人FcγRIIIa的结合的Fc受体也可增强与小鼠FcγRIII的结合。Fc变体对小鼠效应物功能的增强通过利用小鼠而非人PBMC前述基于细胞的ADCC试验来研究。图35显示S239D/I332E/A330L曲妥单抗变体在小鼠免疫细胞存在下,提供超过WT的ADCC增强。该结果表明本发明的Fc变体,或其它对于非人FcγR优化的Fc变体可用于利用动物模型的实验中。
实施例12.证实CHO细胞中表达的Fc变体
虽然为筛选目的本发明的Fc变体在293T细胞中表达,大规模抗体制备通常通过在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系中表达来进行。为评估CHO-表达的Fc变体的性质,选择的Fc变体和WT阿仑单抗在CHO细胞中表达并如实施例2所述纯化。图36显示AlphaScreenTM数据,其比较CHO-和293T-表达的Fc变体和WT阿仑单抗与人V158 FcγRIIIa的结合。所述结果表明本发明的Fc变体在293T或CHO中表达时显示可比的FcγR结合。
实施例13.岩藻糖阴性株(Fucose Minus Strain)中的Fc变体
涉及本发明Fc变体与其它Fc修饰的组合,其目的在于生成具有最优化性质的新抗体或Fc融合体。将本发明的Fc变体与其它Fc修饰组合可有利,所述修饰包括改变效应物功能或改变与一或多种Fc配体的相互作用的修饰。所述组合可为抗体或Fc融合体提供另外、协同或新的性质。例如,存在多种方法来改造效应功能的不同糖型。经改造的糖型可通过本领域已知的多种方法生成,这些技术中许多基于对共价附着于Fc区的岩藻糖化和/或二分(bisecting)寡糖水平的控制。改造Fc糖型的一种方法是在产生改变的糖型的细胞系中表达Fc多肽,所述细胞系例如Lec-13 CHO细胞。为研究结合改造的糖型的Fc变体的性质,WT和V209(S239D/I332E/A330L)曲妥单抗在Lec-13 CHO细胞中表达并如上述进行纯化。图37a显示AlphaScreenTM结合数据,其比较293T,CHO,和Lec-13细胞中表达的WT和V209曲妥单抗与人V158 FcγRIIIa的结合。所述结果显示,在该细胞系产生的经改造的糖型与本发明的Fc变体之间存在实质上的协同作用。如图37b所示,基于细胞的ADCC测定支持此结果。这些数据在一起表明,其它Fc修饰,具体是经改造的糖型,可与本发明的Fc变体联合以产生具有优化效应功能的抗体和Fc融合体。
实施例14.Fc变体的治疗应用
本发明所述多种Fc变体具有显著的改善抗癌抗体治疗有效性的能力。为说明,本发明的多种Fc变体被掺入抗体利妥昔单抗的序列中。WT利妥昔单抗轻链和重链,如US 5,736,137所述,显示于图38a和38b。改良的抗-CD20抗体序列显示于图38c。改良的抗-CD20抗体序列包含至少非WT氨基酸,其选自X1,X2,X3,X4,X5,X6,X7,和X8组成的组。这些改良的抗-CD20抗体序列也可包含取代Z1和/或Z2。本文中利妥昔单抗的利用完全意在举例,而不是限制该抗体或任何其它具体抗体的Fc变体或Fc融合体。
实施例15.完全结构/功能分析Fc/Fc配体特异性
从这些试验的结果明显可见,蛋白质改造是发掘明显改变蛋白质生物功能以及特异性的Fc取代的强大工具。由于抗体和Fc融合体的重要临床价值,提示本发明的蛋白质改造方法可用于协调这些重要生物治疗的临床性质。但所述能力需要对Fc和Fc配体结构和功能之间关系更为完善的了解。此外,缺乏关于Fc/Fc配体特异性决定因素的可用信息表明不可能主动设计具有所有所需性质的Fc变体作为靶目标。因此,很有可能尽管本发明所述的积极试验努力,还有没有发现的治疗有用的Fc变体,以及仍待发现的Fc变体的生化性质。与获得用于生物治疗的新Fc变体同等重要的是改善设计方法的预测性的能力,由此允许将被鉴定的变体更为有效。为这些目标,对Fc/Fc配体生物学进行更为详细的表征。这包括:1)初次筛选的扩大,以包括所有相关Fc配体,和2)Fc变体数量的增加以研究位于所有相关Fc位置的较大系列的取代。与该广泛化的方法结合使得可对有用的Fc变体进行更为彻底的发掘,提供对Fc/Fc配体特异性和生物学的更多了解,以及提供更大的数据组以使得能够对设计方法的预测性进行严格的定量评估。
初次筛选的扩大
为更好定性Fc特异性的结构和功能决定因素,扩大初次筛选以包括所有相关Fc配体。因此,平行检测所有Fc变体与FcγRI,FcγRIIa,FcγRIIb,FcγRIIc,FcγRIIIa(Vall58同种异型),FcRn,和C1q的结合。如上进行AlphaScreenTM实验。所有Fc变体在阿仑单抗或曲妥单抗背景下根据表62进行筛选。表68显示平行筛选Fc位置234和235的一组取代的实例。在该表中,浅灰色表明Fc变体/Fc配体亲和力为WT的0.5-倍或更低,中等灰色表明Fc变体/Fc配体亲和力为WT的0.5-2.0,深灰色表明Fc变体/Fc配体亲和力增加2-倍或更高,白色表明Fc变体/Fc配体相互作用没有被测定或这数据不允许精确测定亲和力。因此,Fc变体分成使得与给定的Fc配体的结合明显降低,基本不变,明显增加的各组。如此观察数据提供了Fc的结构/功能图谱,使得能够直接解释每个位置的结果,从而有效鉴定有用和感兴趣的变体,并以实际的方式评估设计方法的预测性。
表68
在位置234和235的多种取代显示与各种Fc配体结合的特异性不同。尽管这些情况中的差异微小,结果表明确实可能改造Fc对不同Fc配体的特异性,甚至在多个高度同源的受体结合于同一位点的FcγR界面也如此。其它提供更为明确的亲和力差异的Fc变体见表69。
表69
这些数据甚至证实,可能协调Fc对Fc配体的特异性,通常通过利用微小突变差异。例如,A330Y/I332E变体促进与所有FcγR,尤其是FcγRIIIa的结合,同时保持与C1q的结合。然而,A300L/I332E变体显示与FcγRI和FcγRIIIa的结合增强,但对FcγRII的亲和力与WT相同。相反,L328的突变使得FcγRII对FcγRI的亲和力增强超过对FcγRIIIa的亲和力增强。在L328E/I332E变体的情况下,对所有FcγRII的亲和力增加,然而L328T/I332E提供FcγRIIc>FcγRIIb>FcγRIIa的明显的特异性增强图谱。相反,L328A明显增强与FcγRIIa的结合,但对所有其它FcγR包括FcγRIIb和FcγRIIcWT的亲和力与WT的相同。从这些结果明显可见,非常微小的突变差异可提供特异性的实质性差异。因此,诸如这些的Fc变体集合不仅使得能够产生具有经改变以产生所需结果的抗体和Fc融合体,而且还提供了独特的试剂组,利用它们可试验性研究并表征效应功能生物学。
扩大Fc变体组
由于关于Fc/Fc配体相互作用的结构和功能决定因素的信息不完整,不可能主动改造Fc而实现所有期望的优化目标。在表68和69中观察到的对不同FcγR的明显特异性差异更多是由于本发明的主动筛选方法造成的;这些Fc变体不是被主动被设计成以它们的具体性质作为靶目标的,这是由于缺乏Fc与不同FcγR结合的结构信息,以及缺乏对于铰链区的结构和柔性如何影响FcγR结合的理解。实际上,研究位于位置234和235的大量和多种取代的决定是基于这样的认识,即它们靠近Fc/FcγR结合位点,这些位置的突变影响FcγR结合,以及根据计算筛选计算,在这些位置大量和各种取代是容许的。总之,缺乏关于Fc/FcγR特异性决定因素的结构信息,缺乏Fc/C1q复合体的高分辨率结构信息,以及不能说明取代对Fc/Fc配体结合的间接影响,综合在一起使得可以肯定不能利用目前的改造方法研究所有感兴趣的和潜在有用的Fc变体。为了充分发掘有用的Fc变体,以及获得对Fc/Fc配体的结构和功能决定因素的相互作用更为完全的图谱,Fc变体组被扩大以研究更广泛的突变。在FcγR和C1q结合位点上或其附近的所有Fc位置被饱和使得所有取代被构建成以前没有被检测过,所述Fc位置通过目测可得结构以及利用以前的Fc变体筛选结果提供的信息选出。在极度远离FcγR和C1q结合位点的Fc位置,所选取代的亚组基于以前描述的计算筛选计算中所述的预测的能量,以及基于可得自现存Fc变体的数据来设计。该新的Fc组(共576个)见表70。
表70
位置 | WT | 取代(s) | 变体 |
221222223224225227228230231232233234235236237238239241243246 | DKTHTPPPAPELLGGPSFFK | K YE YE KE YE K WE K Y GE K Y GE Y GE K Y P GE K Y GN Q K R S T H A V L I F M Y W GK R S A M W P GE K R A M W P GD E N Q K R S T H A V L I F M Y W PD E N Q K R S T H V L I F M Y W PD E N Q K R S T H V L I F M Y W GQ K R V L I M W P GD E YED E H Y | 801-802513-514803-804805-806807-809705-708709-712609-611612-616321-324617-632417-424425-432713-730731-747748-764325-334335-337515810-813 |
249255258260262264265267268269270271272274275276278280281282283284285286288290 | DRETVVDSHEDPEKFNYDGVEVHNKK | Q H YE YS H YD E H YE FD E N Q K R S H W P GQ K R S T H V L I F M Y W PE Q K R V L I F M Y W PD E Q K R T V L I F M W P GK S V I M W P GR S L I F M Y W P GD E N Q K R S T H A V L I F M Y W GD R T H V L F M W P GD N S H V I F M W P GLD T H V I F M W P GD N Q R S H V L I M P GK L W P GD K Y PE K Y P GK H L Y P GE N T L YD E Q K Y WE Y P GD E YD N H L W | 814-816817-818819-821822-825826-827433-443444-457338-349350-363765-772516-525526-543633-643644-654828655-664665-676544-548829-832833-837838-843844-848773-778779-782783-785549-553 |
表70(续)
位置 | WT | 取代 | 变体 |
291292293294295296297*298299300301303304305317318320322324325326327328329330331332333334 | PREEQYNSTYRVSVKEKKSNKALPAPIEK | D E Q T H I GD E T YN R S T H V L I F M Y W P GK R S T H V L I F M Y W P GD E N R S T H V I F M Y W P GK R A V M GQ K R T H V L I F M Y W P GD E Q K R I F M Y WD E N Q K R L F M Y W P GD E N Q K R S T H A V M W P GD E H YD E YD N T H LE T YE QQ H L YN S H V L F Y W P GD S V I F Y W P GH F M W P GK R S F M Y W P GPE K R H V I F M Y W PD Q K R S T V I Y W P GD E N Q K R S T H V L I M Y W GE N T P GD Q R T L I F M Y WK R S V L F M W P GL F M PP | 849-855786-789554-567568-581582-596597-602856-869364-373374-386387-401870-873874-876877-881882-884885-886887-890677-686687-695603-608696-704458459-469470-481482-497402-406498-507407-416508-511512 |
335336337 | TIS | N S H V L I F M W P GE K YE N H | 790-800891-893894-896 |
*297的取代在S239D/I332E背景中进行。
本文中所有的参考文献明确地引入作为参考。
尽管如上已描述了用于例证目的的本发明的特定实施方案,本领域技术人员应当理解可得到细节的无数变化而不背离如所附权利要求所描述的本发明。
Claims (37)
1.变体蛋白质,包含野生型Fc多肽的Fc变体,所述Fc变体包含位于所述野生型Fc多肽的Fc区中的至少一种氨基酸修饰,其中所述变体多肽与FcγR的结合与野生型Fc多肽相比有所改变。
2.权利要求1的变体蛋白质,其中所述Fc变体包含至少一种位于以下位置的取代,所述位置对应选自下组的Fc位置:230,240,244,245,247,262,263,266,273,275,299,302,313,323,325,328,或332。
3.权利要求1的变体蛋白质,其中所述改变的结合为所述Fc变体与所述FcγR的亲和力增加。
4.权利要求3的变体蛋白质,其中所述Fc变体以更高的亲和力与小鼠FcγR结合。
5.权利要求3的变体蛋白质,其中所述FcγR是人Fc受体,其选自FcγRI,FcγRIIa,FcγRIIb,FcγRIIc,和FcγRIIIa组成的组。
6.权利要求3的变体蛋白质,其中所述Fc变体以更高的亲和力与人FcγRI以及FcγRIIIa结合,但是与选自下组的人受体的亲和力不变:FcγRIIa,FcγRIIb,或FcγRIIc。
7.权利要求6的变体蛋白质,其中所述Fc变体与FcγRIIa,FcγRIIb,以及FcγRIIc的亲和力不变。
8.权利要求3的变体蛋白质,其中与一或多种人FcγRII结合的亲和力增加高于与人FcγRI以及FRIIIa结合的亲和力增加。
9.权利要求3的变体蛋白质,其中亲和力增加对于FcγRIIa,FcγRIIb,以及FcγRIIc的结合而言相同。
10.权利要求9的变体蛋白质,其中与FcγRIIc结合的亲和力增加大于与FcγRIIb结合的亲和力增加。
11.权利要求3的变体蛋白质,其中所述Fc变体与人FcγRIIa的结合亲和力较高,但是与选自下组的人受体的亲和力不变:FcγRI,FcγRIIb,FcγRIIc,或FcγRIIIa。
12.权利要求11的变体蛋白质,其中所述Fc变体与FcγRI,FcγRIIb,FcγRIIc,以及FcγRIIIa的亲和力不变。
13.权利要求1-12之一的变体蛋白质,其中所述Fc变体与FcRn结合的亲和力较高。
14.权利要求1-12之一的变体蛋白质,其中所述Fc变体与FcRn结合的亲和力不变。
15.权利要求1-12之一的变体蛋白质,其中所述Fc变体与FcRn结合的亲和力降低。
16.权利要求1-12之一的变体蛋白质,其中所述Fc变体与Clq结合的亲和力增加。
17.权利要求1-12之一的变体蛋白质,其中所述Fc变体与Clq结合的亲和力不变。
18.权利要求1的变体蛋白质,其中所述Fc变体还包括经改造的糖型。
19.权利要求18的变体蛋白质,其中所述经改造的糖型与亲代Fc多肽相比包含改变的岩藻糖基化寡糖或二等分寡糖水平。
20.权利要求18的变体蛋白质,其中所述经改造的糖型改进效应物功能。
21.变体蛋白质,其包含野生型Fc多肽的Fc变体,所述Fc变体包含至少一种位于所述野生型Fc多肽的Fc区中的氨基酸修饰,其中所述Fc变体与亲代Fc多肽相比调节效应物功能。
22.权利要求21的变体蛋白质,其中所述效应物功能是ADCC。
23.权利要求22的变体蛋白质,其中所述Fc变体与野生型Fc多肽相比在人效应细胞存在下增强ADCC。
24.权利要求2的变体蛋白质,其中所述ADCC的增强是效力的提高,使得所述Fc变体的EC50比所述亲本Fc多肽的情况高大约5倍。
25.权利要求23的变体蛋白质,其中所述ADCC增强是效力的提高,使得所述Fc变体的EC50比所述亲本Fc多肽的情况高大约5-1000倍。
26.权利要求23的变体蛋白质,其中所述ADCC增强是有效性提高使得最大ADCC比所述亲本Fc多肽的情况高大约2倍。
27.权利要求26的变体蛋白质,其中所述Fc变体与所述野生型Fc多肽相比,在小鼠效应细胞存在下增强ADCC。
28.权利要求21的变体蛋白质,其中所述效应物功能是ADCP。
29.权利要求28的变体蛋白质,其中所述Fc变体与所述野生型Fc多肽相比增强ADCP。
30.权利要求25或29的变体蛋白质,其中CDC不受影响。
31.权利要求25或29的变体蛋白质,其中CDC被消除。
32.权利要求1的变体蛋白质,其对靶抗原具有特异性,所述靶抗原选自CD20,CD22,CD33,CD52,Her2/neu,EGFR,EpCAM,MUC1,GD3,CEA,CA 125,HLA-DR,TNFalpha,和VEGF组成的组。
33.权利要求1或21的变体蛋白质,包括选自以下修饰组成的组的修饰:239D,239E,239N,239Q,239T,240I,240M,264I,264T,264Y,297D,330I,330L,330Y,332D,332E,332N,332Q,A231E,A231G,A231K,A231P,A231Y,A298H,A327D,A327E,A327F,A327H,A327I,A327K,A327L,A327M,A327N,A327P,A327R,A327T,A327T,A327V,A327W,A327Y,A330E,A330F,A330F,A330G,A330H,A330I,A330L,A330L/I332E,A330M,A330N,A330P,A330R,A330S,A330T,A330V,A330W,A330Y,A330Y,A330Y/I332E,D221K,D221Y,D249H,D249Q,D249Y,D265F,D265F/N297E/I332E,D265G,D265H,D265I,D265K,D265L,D265M,D265N,D265P,D265Q,D265R,D265S,D265T,D265V,D265W,D265Y,D265Y/N297D/I332E,D265Y/N297D/T299L/I332E,D270F,D270G,D270H,D270I,D270L,D270M,D270P,D270Q,D270R,D270S,D270T,D270W,D270Y,D280G,D280H,D280K,D280L,D280P,D280Q,D280W,D280Y,E233A,E233D,E233F,E233G,E233H,E233I,E233K,E233L,E233M,E233N,E233Q,E233R,E233S,E233T,E233V,E233W,E233Y,E258H,E258S,E258Y,E269F,E269G,E269H,E269I,E269K,E269L,E269M,E269N,E269P,E269R,E269S,E269T,E269V,E269W,E269Y,E272D,E272F,E272G,E272H,E272I,E272K,E272L,E272M,E272P,E272R,E272S,E272T,E272V,E272W,E272Y,E283G,E283H,E283K,E283L,E283P,E283R,E283Y,E293F,E293G,E293H,E293I,E293L,E293M,E293N,E293P,E293R,E293S,E293T,E293V,E293W,E293Y,E294F,E294G,E294H,E294I,E294K,E294L,E294M,E294N,E294P,E294R,E294S,E294T,E294V,E294W,E294Y,E318H,E318L,E318Q,E318R,E318Y,E333A,E333F,E333H,E333I,E333L,E333M,E333P,E333S,E333T,E333Y,E333Y,F241D,F241E,F241E/F243Q/V262T/V264E,F241E/F243Q/V262T/V264E/I332E,F241E/F243R/V262E/V264R,F241E/F243R/V262E/V264R/I332E,F241E/F243Y/V262T/V264R,F241E/F243Y/V262T/V264R/I332E,F241L,F241L/F243L/V262I/V264I,F241L/V262I,F241R,F241R/F243Q/V262T/V264R,F241R/F243Q/V262T/V264R/I332E,F241W,F241W/F243W,F241W/F243W/V262A/V264A,F241Y,F241Y/F243Y/V262T/V264T,F241Y/F243Y/V262T/V264T/N297D/I332E,F243E,F243L,F243L/V262I/V264W,F243L/V264I,F243Q,F243R,F243W,F243W,F243Y,F275L,F275W,F275W,G236A,G236D,G236E,G236F,G236H,G236I,G236K,G236L,G236M,G236N,G236P,G236Q,G236R,G236S,G236T,G236V,G236W,G236Y,G237D,G237E,G237F,G237H,G237I,G237K,G237L,G237M,G237N,G237P,G237Q,G237R,G237S,G237T,G237V,G237W,G237Y,G281D,G281K,G281P,G281Y,H224E,H224Y,H268D,H268E,H268F,H268G,H268I,H268K,H268L,H268M,H268P,H268Q,H268R,H268T,H268V,H268W,H285D,H285E,H285K,H285Q,H285W,H285Y,I332A,I332D,I332E,I332F,I332G,I332H,I332K,I332L,I332M,I332N,I332N,I332P,I332Q,I332R,I332S,I332T,I332V,I332W,I332Y,I332Y,I336E,I336K,I336Y,K222E,K222Y,K246D,K246E,K246H,K246Y,K274D,K274E,K274F,K274G,K274H,K274I,K274L,K274M,K274N,K274P,K274R,K274S,K274T,K274V,K274W,K274Y,K288D,K288E,K288Y,K290D,K290G,K290H,K290L,K290N,K290S,K290T,K290W,K290Y,K317E,K317Q,K320D,K320F,K320G,K320H,K320I,K320L,K320N,K320P,K320S,K320T,K320T,K320V,K320W,K320Y,K322D,K322F,K322G,K322H,K322I,K322P,K322S,K322T,K322V,K322W,K322Y,K325E,K326A,K326D,K326I,K326I,K326L,K326N,K326P,K326Q,K326S,K326T,K326T,K326W,K326Y,K334A,K334E,K334F,K334I,K334P,K334T,L234A,L234D,L234E,L234F,L234G,L234H,L234I,L234I,L234I/L235D,L234K,L234M,L234N,L234P,L234Q,L234R,L234S,L234T,L234V,L234W,L234Y,L235A,L235D,L235E,L235F,L235F,L235G,L235H,L235I,L235K,L235M,L235N,L235P,L235Q,L235R,L235S,L235T,L235V,L235W,L235Y,L328A,L328D,L328D/I332E,L328E,L328E/I332E,L328F,L328G,L328H,L328H/I332E,L328I,L328I/I332E,L328K,L328M,L328M/I332E,L328N,L328N/I332E,L328P,L328Q,L328Q,L328Q/I332E,L328R,L328S,L328T,L328T/I332E,L328V,L328V/I332E,L328W,L328Y,M428F M428L,N276D,N276E,N276F,N276G,N276H,N276I,N276L,N276M,N276P,N276R,N276S,N276T,N276V,N276W,N276Y,N276Y,N286E,N286G,N286P,N286Y,N297D,N297D/A330Y/I332E,N297D/I332E,N297D/I332E/S239D/A330L,N297D/S298A/A330Y/I332E,N297D/T299E/I332E,N297D/T299F/I332E,N297D/T299H/I332E,N297D/T299I/I332E,N297D/T299L/I332E,N297D/T299V/I332E,N297E,N297E/I332E,N297F,N297G,N297H,N297I,N297K,N297L,N297M,N297P,N297Q,N297R,N297S,N297S,N297S/I332E,N297T,N297V,N297W,N297Y,N325A,N325D,N325E,N325F,N325G,N325H,N325I,N325K,N325L,N325M,N325P,N325Q,N325Q,N325R,N325S,N325T,N325V,N325W,N325Y,P227E,P227G,P227K,P227Y,P228E,P228G,P228K,P228Y,P230A,P230A/E233D,P230A/E233D/I332E,P230E,P230G,P230Y,P232E,P232G,P232K,P232Y,P238D,P238E,P238F,P238G,P238H,P238I,P238K,P238L,P238M,P238N,P238Q,P238R,P238S,P238T,P238V,P238W,P238Y,P244H,P244H/P245A/P247V,P245A,P247G,P247V,P271A,P271D,P271E,P271F,P271G,P271H,P271I,P271K,P271L,P271M,P271N,P271Q,P271R,P271S,P271T,P271V,P271W,P271Y,P291D,P291E,P291G,P291H,P291I,P291Q,P291T,P329D,P329E,P329F,P329F,P329G,P329H,P329I,P329K,P329L,P329M,P329N,P329Q,P329R,P329S,P329T,P329V,P329W,P329Y,P331D,P331F,P331H,P331H,P331I,P331L,P331M,P331Q,P331R,P331T,P331V,P331W,P331Y,Q295D,Q295E,Q295F,Q295G,Q295H,Q295I,Q295K,Q295M,Q295N,Q295P,Q295R,Q295S,Q295T,Q295V,Q295W,Q295Y,R255E,R255Y,R292D,R292E,R292T,R292Y,R301D,R301E,R301H,R301Y,S239D,S239D/A330L/I332E,S239D/A330Y/I332E,S239D/A330Y/I332E/K326E,S239D/A330Y/I332E/K326T,S239D/A330Y/I332E/L234I,S239D/A330Y/I332E/L235D,S239D/A330Y/I332E/V240I,S239D/A330Y/I332E/V264T,S239D/A330Y/I332E/V266I,S239D/D265F/N297D/I332E,S239D/D265H/N297D/I332E,S239D/D265I/N297D/I332E,S239D/D265L/N297D/I332E,S239D/D265T/N297D/I332E,S239D/D265V/N297D/I332E,S239D/D265Y/N297D/I332E,S239D/I332D,S239D/I332E,S239D/I332E/A330I,S239D/I332N,S239D/I332Q,S239D/N297D/I332E,S239D/N297D/I332E/A330Y,S239D/N297D/I332E/A330Y/F241S/F243H/V262T/V264T,S239D/N297D/I332E/K326E,S239D/N297D/I332E/L235D,S239D/S298A/I332E,S239D/V264I/A330L/I332E,S239D/V264I/I332E,S239D/V264I/S298A/I332E,S239E,S239E/D265G,S239E/D265N,S239E/D265Q,S239E/I332D,S239E/I332E,S239E/I332N,S239E/I332Q,S239E/N297D/I332E,S239E/V264I/A330Y/I332E,S239E/V264I/I332E,S239E/V264I/S298A/A330Y/I332E,S239F,S239G,S239H,S239I,S239K,S239L,S239M,S239N,S239N/A330L/I332E,S239N/A330Y/I332E,S239N/I332D,S239N/I332E,S239N/I332N,S239N/I332Q,S239N/S298A/I332E,S239P,S239Q,S239Q/I332D,S239Q/I332E,S239Q/I332N,S239Q/I332Q,S239Q/V264I/I332E,S239R,S239T,S239V,S239W,S239Y,S267D,S267E,S267F,S267H,S267I,S267K,S267L,S267L/A327S,S267M,S267N,S267P,S267Q,S267Q/A327S,S267R,S267T,S267V,S267W,S267Y,S298A,S298A/I332E,S298D,S298E,S298F,S298I,S298K,S298M,S298N,S298Q,S298R,S298V,S298W,S298Y,S304D,S304H,S304L,S304N,S304T,S324D,S324F,S324G,S324H,S324I,S324L,S324M,S324P,S324R,S324T,S324V,S324W,S324Y,S337E,S337H.S337N,T223E,T223K,T225,T225E,T225K,T225W,T250E,T250Q,T260D,T260E,T260H,T260Y,T299A,T299D,T299E,T299F,T299G,T299H,T299I,T299K,T299L,T299L,T299M,T299N,T299P,T299Q,T299R,T299S,T299V,T299W,T299Y,T335D,T335F,T335G,T335H,T335I,T335L,T335M,T335N,T335P,T335R,T335S,T335V,T335W,T335Y,V240A,V240I,V240I/V266I,V240M,V240T,V262A,V262E,V262F,V262I,V262T,V263A,V263I,V263M,V263T,V264D,V264E,V264E/N297D/I332E,V264F,V264G,V264H,V264I,V264I/A330L/I332E,V264I/A330Y/I332E,V264I/I332E,V264I/S298A/I332E,V264K,V264L,V264M,V264N,V264P,V264Q,V264R,V264S,V264T,V264W,V264Y,V266A,V266I,V266M,V266T,V266T,V273I,V273I,V282E,V282G,V282K,V282P,V282Y,V284E,V284L,V284N,V284T,V284Y,V302I,V302I,V303D,V303E,V303Y,V305E,V305T,V305Y,V323I,V323I,W313F,Y278D,Y278E,Y278G,Y278H,Y278I,Y278K,Y278L,Y278M,Y278N,Y278P,Y278Q,Y278R,Y278S,Y278T,Y278V,Y278W,Y296A,Y296D,Y296D/N297D/I332E,Y296E,Y296E/N297D/I332E,Y296G,Y296H,Y296H/N297D/I332E,Y296I,Y296K,Y296L,Y296M,Y296N,Y296N/N297D/I332E,Y296Q,Y296Q/N297D/I332E,Y296R,Y296S,Y296T,Y296T/N297D/I332E,Y296V,Y300A,Y300D,Y300E,Y300G,Y300H,Y300I,Y300K,Y300L,Y300M,Y300N,Y300P,Y300Q,Y300R,Y300S,Y300T,Y300V,和Y300W。
34.权利要求1或21的变体蛋白质,其中所述变体蛋白质是包含所述Fc变体的抗体。
35.权利要求1或21的变体蛋白质,其中所述变体蛋白质是包含所述Fc变体的Fc融合蛋白质。
36.药物组合物,其包含权利要求1的变体蛋白质以及可药用的载体。
37.治疗需要所述治疗的哺乳动物的方法,包括给药权利要求1的变体蛋白质。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510039848.XA CN104788565A (zh) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | 优化的Fc变体及其产生方法 |
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US46760603P | 2003-05-02 | 2003-05-02 | |
US60/467,606 | 2003-05-02 | ||
US47783903P | 2003-06-12 | 2003-06-12 | |
US60/477,839 | 2003-06-12 | ||
US10/672,280 US20040132101A1 (en) | 2002-09-27 | 2003-09-26 | Optimized Fc variants and methods for their generation |
US10/672,280 | 2003-09-26 | ||
PCT/US2004/009298 WO2004099249A2 (en) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | Optimized fc variants and methods for their generation |
Related Child Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510039848.XA Division CN104788565A (zh) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | 优化的Fc变体及其产生方法 |
CN201210057793.1A Division CN102633880B (zh) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | 优化的Fc变体及其产生方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1867583A true CN1867583A (zh) | 2006-11-22 |
CN1867583B CN1867583B (zh) | 2012-05-23 |
Family
ID=33437072
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510039848.XA Pending CN104788565A (zh) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | 优化的Fc变体及其产生方法 |
CN201210057793.1A Expired - Lifetime CN102633880B (zh) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | 优化的Fc变体及其产生方法 |
CN2004800189855A Expired - Lifetime CN1867583B (zh) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | 优化的Fc变体及其产生方法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510039848.XA Pending CN104788565A (zh) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | 优化的Fc变体及其产生方法 |
CN201210057793.1A Expired - Lifetime CN102633880B (zh) | 2003-05-02 | 2004-03-26 | 优化的Fc变体及其产生方法 |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (12) | US20040132101A1 (zh) |
EP (4) | EP3101030B1 (zh) |
JP (1) | JP4578467B2 (zh) |
KR (2) | KR100890586B1 (zh) |
CN (3) | CN104788565A (zh) |
AU (2) | AU2004236160B2 (zh) |
BR (2) | BRPI0410031A (zh) |
CA (2) | CA2524399C (zh) |
DK (1) | DK2368911T3 (zh) |
ES (1) | ES2638568T3 (zh) |
HU (1) | HUE034268T2 (zh) |
IL (3) | IL171723A (zh) |
PL (1) | PL2368911T3 (zh) |
SI (1) | SI2368911T1 (zh) |
WO (1) | WO2004099249A2 (zh) |
Cited By (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103080130A (zh) * | 2010-05-27 | 2013-05-01 | 默沙东公司 | 制备具有改进特性的抗体的方法 |
CN104204204A (zh) * | 2012-02-09 | 2014-12-10 | 中外制药株式会社 | 抗体的Fc区变异体 |
CN104220093A (zh) * | 2011-07-06 | 2014-12-17 | 根马布私人有限公司 | 抗体变体及其用途 |
CN104797601A (zh) * | 2012-09-12 | 2015-07-22 | 建新公司 | 具有改变的糖基化和降低的效应物功能的包含fc的多肽 |
CN104918955A (zh) * | 2012-10-30 | 2015-09-16 | 苏伯利莫尔公司 | Fcγ受体IIB变体 |
CN104961830A (zh) * | 2008-09-17 | 2015-10-07 | Xencor公司 | 用于治疗ige介导的疾患的新组合物和方法 |
CN105121470A (zh) * | 2013-03-15 | 2015-12-02 | 艾伯维生物技术有限公司 | 抗cd25抗体及其用途 |
CN105143257A (zh) * | 2013-03-15 | 2015-12-09 | 艾伯维生物医疗股份有限公司 | Fc变体 |
CN105358570A (zh) * | 2013-03-14 | 2016-02-24 | 美国安进公司 | 含有非糖基化Fc的多肽 |
CN105377892A (zh) * | 2013-03-15 | 2016-03-02 | 艾伯维生物技术有限公司 | 抗cd25抗体及其用途 |
CN105949313A (zh) * | 2011-03-29 | 2016-09-21 | 罗切格利卡特公司 | 抗体Fc变体 |
CN106831996A (zh) * | 2017-03-31 | 2017-06-13 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 新型双特异性抗体及其用途 |
CN107207608A (zh) * | 2015-10-30 | 2017-09-26 | 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 | 双特异性抗体、其制备方法和用途 |
CN107540742A (zh) * | 2012-05-11 | 2018-01-05 | 米迪缪尼有限公司 | Ctla‑4变体 |
CN107636015A (zh) * | 2015-03-06 | 2018-01-26 | 德国癌症研究中心 | 包含结合蛋白和对IL‑15Rα具有降低亲和力的白介素‑15多肽的融合蛋白及其治疗用途 |
CN109321549A (zh) * | 2018-09-18 | 2019-02-12 | 天津科技大学 | 一种比酶活提高的肝素酶i的定向改造酶及分子改造方法和表达工程菌 |
CN110546162A (zh) * | 2017-03-28 | 2019-12-06 | 礼进生物医药控股有限公司 | 用于增强肿瘤微环境中免疫应答的治疗剂和方法 |
CN110964119A (zh) * | 2019-12-05 | 2020-04-07 | 沣潮医药科技(上海)有限公司 | 抗疟二聚体免疫粘附素、药物组合物和用途 |
WO2021110110A1 (zh) * | 2019-12-03 | 2021-06-10 | 上海交通大学医学院 | FcγRIIB亲和力增强的抗体Fc区 |
US11186638B2 (en) | 2011-09-12 | 2021-11-30 | Genzyme Corporation | Anti-αβTCR antibody |
CN113980952A (zh) * | 2011-03-30 | 2022-01-28 | 中外制药株式会社 | 改变抗原结合分子的血浆中滞留性和免疫原性的方法 |
WO2023109928A1 (zh) * | 2021-12-16 | 2023-06-22 | 上海宝济药业有限公司 | 抗免疫球蛋白降解酶酶切的Fc变体 |
US11697690B2 (en) | 2014-03-19 | 2023-07-11 | Genzyme Corporation | Site-specific glycoengineering of targeting moieties |
US11807690B2 (en) | 2013-03-11 | 2023-11-07 | Genzyme Corporation | Hyperglycosylated binding polypeptides |
Families Citing this family (636)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NZ539776A (en) | 1999-01-15 | 2006-12-22 | Genentech Inc | Polypeptide variants with altered effector function |
US6737056B1 (en) | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
US7183387B1 (en) | 1999-01-15 | 2007-02-27 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
EP2360169B1 (en) * | 2001-10-23 | 2015-10-14 | Psma Development Company, L.L.C. | PSMA antibodies |
US20050215472A1 (en) * | 2001-10-23 | 2005-09-29 | Psma Development Company, Llc | PSMA formulations and uses thereof |
HUP0600342A3 (en) * | 2001-10-25 | 2011-03-28 | Genentech Inc | Glycoprotein compositions |
US7662925B2 (en) * | 2002-03-01 | 2010-02-16 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants and methods for their generation |
US7657380B2 (en) * | 2003-12-04 | 2010-02-02 | Xencor, Inc. | Methods of generating variant antibodies with increased host string content |
US20100311954A1 (en) * | 2002-03-01 | 2010-12-09 | Xencor, Inc. | Optimized Proteins that Target Ep-CAM |
US7317091B2 (en) * | 2002-03-01 | 2008-01-08 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
US20040132101A1 (en) | 2002-09-27 | 2004-07-08 | Xencor | Optimized Fc variants and methods for their generation |
US20080260731A1 (en) * | 2002-03-01 | 2008-10-23 | Bernett Matthew J | Optimized antibodies that target cd19 |
US8188231B2 (en) * | 2002-09-27 | 2012-05-29 | Xencor, Inc. | Optimized FC variants |
US20090042291A1 (en) * | 2002-03-01 | 2009-02-12 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
WO2005056606A2 (en) * | 2003-12-03 | 2005-06-23 | Xencor, Inc | Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor |
US8044180B2 (en) * | 2002-08-14 | 2011-10-25 | Macrogenics, Inc. | FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof |
US8193318B2 (en) * | 2002-08-14 | 2012-06-05 | Macrogenics, Inc. | FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof |
US8530627B2 (en) * | 2002-08-14 | 2013-09-10 | Macrogenics, Inc. | FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof |
US8968730B2 (en) | 2002-08-14 | 2015-03-03 | Macrogenics Inc. | FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof |
US8946387B2 (en) * | 2002-08-14 | 2015-02-03 | Macrogenics, Inc. | FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof |
US8187593B2 (en) * | 2002-08-14 | 2012-05-29 | Macrogenics, Inc. | FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof |
ES2562177T3 (es) * | 2002-09-27 | 2016-03-02 | Xencor Inc. | Variantes de Fc optimizadas y métodos para su generación |
US20060235208A1 (en) * | 2002-09-27 | 2006-10-19 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized properties |
US20040175359A1 (en) * | 2002-11-12 | 2004-09-09 | Desjarlais John Rudolph | Novel proteins with antiviral, antineoplastic, and/or immunomodulatory activity |
WO2004063963A2 (en) * | 2003-01-08 | 2004-07-29 | Xencor, Inc. | Novel proteins with altered immunogenicity |
US7960512B2 (en) * | 2003-01-09 | 2011-06-14 | Macrogenics, Inc. | Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same |
AU2004204494B2 (en) * | 2003-01-09 | 2011-09-29 | Macrogenics, Inc. | Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same |
US20090010920A1 (en) * | 2003-03-03 | 2009-01-08 | Xencor, Inc. | Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb |
US8388955B2 (en) * | 2003-03-03 | 2013-03-05 | Xencor, Inc. | Fc variants |
US9051373B2 (en) | 2003-05-02 | 2015-06-09 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
TWI353991B (en) | 2003-05-06 | 2011-12-11 | Syntonix Pharmaceuticals Inc | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
US7709610B2 (en) | 2003-05-08 | 2010-05-04 | Facet Biotech Corporation | Therapeutic use of anti-CS1 antibodies |
EP1626993B1 (en) * | 2003-05-09 | 2015-03-11 | Duke University | Cd20-specific antibodies and methods of employing same |
CA2529945A1 (en) | 2003-06-27 | 2005-01-06 | Biogen Idec Ma Inc. | Use of hydrophobic-interaction-chromatography or hinge-region modifications for the production of homogeneous antibody-solutions |
CA2536408A1 (en) * | 2003-08-22 | 2005-03-03 | Biogen Idec Ma Inc. | Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same |
US9714282B2 (en) | 2003-09-26 | 2017-07-25 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants and methods for their generation |
US8399618B2 (en) | 2004-10-21 | 2013-03-19 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin insertions, deletions, and substitutions |
US8101720B2 (en) | 2004-10-21 | 2012-01-24 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions |
US20060134105A1 (en) * | 2004-10-21 | 2006-06-22 | Xencor, Inc. | IgG immunoglobulin variants with optimized effector function |
US8883147B2 (en) | 2004-10-21 | 2014-11-11 | Xencor, Inc. | Immunoglobulins insertions, deletions, and substitutions |
US20150071948A1 (en) * | 2003-09-26 | 2015-03-12 | Gregory Alan Lazar | Novel immunoglobulin variants |
GB0324368D0 (en) * | 2003-10-17 | 2003-11-19 | Univ Cambridge Tech | Polypeptides including modified constant regions |
ES2346978T3 (es) | 2003-11-04 | 2010-10-22 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Uso de anticuerpos monoclonantes anti-cd40 antagonistas para el tratamiento del mieloma multiple. |
CA2544852A1 (en) | 2003-11-04 | 2005-05-19 | Chiron Corporation | Methods of therapy for solid tumors expressing the cd40 cell-surface antigen |
PT1682177E (pt) | 2003-11-04 | 2010-11-29 | Xoma Technology Lt | Utilização de anticorpos antagonistas anti-cd40 para o tratamento da leucemia linfocítica crónica |
ATE516819T1 (de) | 2003-11-04 | 2011-08-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Verfahren zur behandlung von b-zell-bedingtem krebs |
PL2149585T3 (pl) | 2003-11-04 | 2014-01-31 | Novartis Vaccines & Diagnostics Inc | Zastosowanie antagonistycznych przeciwciał monoklonalnych anty-CD40 |
PL1692182T3 (pl) | 2003-11-05 | 2010-09-30 | Roche Glycart Ag | Przeciwciała CD20 o zwiększonym powinowactwie wiązania z receptorem Fc oraz zwiększonej funkcji efektorowej |
JP2008504002A (ja) | 2003-11-12 | 2008-02-14 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | 新生児Fcレセプター(FcRn)結合ポリペプチド改変体、ダイマーFc結合タンパク質、およびそれらに関連する方法 |
WO2005063815A2 (en) * | 2003-11-12 | 2005-07-14 | Biogen Idec Ma Inc. | Fcϝ receptor-binding polypeptide variants and methods related thereto |
US20050249723A1 (en) * | 2003-12-22 | 2005-11-10 | Xencor, Inc. | Fc polypeptides with novel Fc ligand binding sites |
EP3476861A1 (en) | 2004-01-07 | 2019-05-01 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | M-csf-specific monoclonal antibody and uses thereof |
JP4762156B2 (ja) * | 2004-01-12 | 2011-08-31 | アプライド モレキュラー エボリューション,インコーポレイテッド | Fc領域変異体 |
US8263746B2 (en) * | 2004-02-06 | 2012-09-11 | Morphosys Ag | Anti-CD38 human antibodies and uses thereof |
WO2005092925A2 (en) * | 2004-03-24 | 2005-10-06 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin variants outside the fc region |
US20170166655A1 (en) * | 2004-03-26 | 2017-06-15 | Xencor, Inc. | Novel immunoglobulin variants |
US7521542B2 (en) | 2004-05-10 | 2009-04-21 | Macrogenics, Inc. | Humanized FcγRIIB-specific antibodies and methods of use thereof |
WO2006085967A2 (en) * | 2004-07-09 | 2006-08-17 | Xencor, Inc. | OPTIMIZED ANTI-CD20 MONOCONAL ANTIBODIES HAVING Fc VARIANTS |
PL1674111T3 (pl) | 2004-07-09 | 2011-04-29 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Przeciwciała anty-glipikan 3 |
EP2471813B1 (en) * | 2004-07-15 | 2014-12-31 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
US20150010550A1 (en) | 2004-07-15 | 2015-01-08 | Xencor, Inc. | OPTIMIZED Fc VARIANTS |
US8647625B2 (en) | 2004-07-26 | 2014-02-11 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-CD154 antibodies |
ES2426817T3 (es) * | 2004-08-04 | 2013-10-25 | Mentrik Biotech, Llc | Regiones Fc variantes |
AU2005277567A1 (en) * | 2004-08-16 | 2006-03-02 | Medimmune, Llc | Integrin antagonists with enhanced antibody dependent cell-mediated cytotoxicity activity |
JP4733042B2 (ja) | 2004-08-24 | 2011-07-27 | 中外製薬株式会社 | 抗グリピカン3抗体を用いたアジュバント療法 |
CN101068836B (zh) * | 2004-10-26 | 2013-08-14 | 中外制药株式会社 | 糖链改变的抗磷脂酰肌醇聚糖3抗体 |
AU2005335714B2 (en) | 2004-11-10 | 2012-07-26 | Macrogenics, Inc. | Engineering Fc antibody regions to confer effector function |
EP2325207B1 (en) * | 2004-11-12 | 2017-03-15 | Xencor, Inc. | FC variants with altered binding to FCRN |
US8367805B2 (en) | 2004-11-12 | 2013-02-05 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
US8802820B2 (en) | 2004-11-12 | 2014-08-12 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
US8546543B2 (en) | 2004-11-12 | 2013-10-01 | Xencor, Inc. | Fc variants that extend antibody half-life |
US8329186B2 (en) * | 2004-12-20 | 2012-12-11 | Isu Abxis Co., Ltd | Treatment of inflammation using BST2 inhibitor |
EP1674479A1 (en) * | 2004-12-22 | 2006-06-28 | Memorial Sloan-Kettering Cancer Center | Modulation of Fc Gamma receptors for optimizing immunotherapy |
JP4937138B2 (ja) | 2005-01-05 | 2012-05-23 | エフ−シュタール・ビオテヒノロギシェ・フォルシュングス−ウント・エントヴィックルングスゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | 相補性決定領域とは異なる分子の領域に設計された結合性を持つ合成免疫グロブリンドメイン |
US20060275282A1 (en) * | 2005-01-12 | 2006-12-07 | Xencor, Inc. | Antibodies and Fc fusion proteins with altered immunogenicity |
US7722867B2 (en) * | 2005-02-07 | 2010-05-25 | Glycart Biotechnology Ag | Antigen binding molecules that bind EGFR, vectors encoding same, and uses thereof |
JP5651285B2 (ja) | 2005-02-15 | 2015-01-07 | デューク ユニバーシティ | 抗cd19抗体および腫瘍学における使用 |
US20060182744A1 (en) * | 2005-02-15 | 2006-08-17 | Strome Scott E | Anti-CD137 antibody as an agent in the treatment of cancer and glycosylation variants thereof |
US20080019905A9 (en) * | 2005-02-18 | 2008-01-24 | Strome Scott E | Method of using an anti-CD137 antibody as an agent for radioimmunotherapy or radioimmunodetection |
TW200714289A (en) * | 2005-02-28 | 2007-04-16 | Genentech Inc | Treatment of bone disorders |
WO2006100582A1 (en) * | 2005-03-25 | 2006-09-28 | Glycart Biotechnology Ag | Antigen binding molecules directed to mcsp and having increased fc receptor binding affinity and effector function |
US20110123440A1 (en) * | 2005-03-29 | 2011-05-26 | Genevieve Hansen | Altered Antibody FC Regions and Uses Thereof |
CA2602663A1 (en) * | 2005-03-31 | 2006-10-05 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized properties |
JP2008537941A (ja) * | 2005-03-31 | 2008-10-02 | ゼンコー・インコーポレイテッド | 最適化特性を有するFc変異体 |
ES2707152T3 (es) | 2005-04-15 | 2019-04-02 | Macrogenics Inc | Diacuerpos covalentes y usos de los mismos |
US11254748B2 (en) | 2005-04-15 | 2022-02-22 | Macrogenics, Inc. | Covalent diabodies and uses thereof |
US9963510B2 (en) | 2005-04-15 | 2018-05-08 | Macrogenics, Inc. | Covalent diabodies and uses thereof |
US9284375B2 (en) * | 2005-04-15 | 2016-03-15 | Macrogenics, Inc. | Covalent diabodies and uses thereof |
EP1877441A2 (en) * | 2005-04-26 | 2008-01-16 | Bioren, Inc. | Method of producing human igg antibodies with enhanced effector functions |
AU2006239851B2 (en) | 2005-04-26 | 2011-06-16 | Medimmune, Llc | Modulation of antibody effector function by hinge domain engineering |
AU2006244445B2 (en) | 2005-05-05 | 2013-04-18 | Duke University | Anti-CD19 antibody therapy for autoimmune disease |
EP1888649A2 (en) * | 2005-05-09 | 2008-02-20 | GlycArt Biotechnology AG | Antigen binding molecules having modified fc regions and altered binding to fc receptors |
PT1889065E (pt) | 2005-05-18 | 2013-09-27 | Novartis Ag | Métodos para o diagnóstico e tratamento de doenças tendo uma componente autoimune e/ou inflamatória |
KR20140084242A (ko) * | 2005-06-20 | 2014-07-04 | 피에스엠에이 디벨롭먼트 캄파니, 엘엘씨 | Psma 항체-약물 접합체 |
JP2009500344A (ja) * | 2005-07-01 | 2009-01-08 | メディミューン,エルエルシー | マルチドメインタンパク質治療薬を製造するための統合的手法 |
WO2007008943A2 (en) * | 2005-07-08 | 2007-01-18 | Xencor, Inc. | Optimized anti-ep-cam antibodies |
ES2530265T3 (es) | 2005-07-21 | 2015-02-27 | Genmab A/S | Ensayos de potencia de unión de una sustancia medicamentosa de anticuerpo a un receptor FC |
EP2277916A3 (en) * | 2005-07-28 | 2011-04-27 | Novartis AG | Use of antibody to M-CSF |
WO2007016285A2 (en) * | 2005-07-28 | 2007-02-08 | Novartis Ag | M-csf specific monoclonal antibody and uses thereof |
DK2573114T3 (en) * | 2005-08-10 | 2016-07-04 | Macrogenics Inc | The identification and production of antibodies with variant Fc regions, and methods of using same |
US8008453B2 (en) * | 2005-08-12 | 2011-08-30 | Amgen Inc. | Modified Fc molecules |
EP2395024B1 (en) | 2005-08-26 | 2018-12-19 | Roche Glycart AG | Modified antigen binding molecules with altered cell signaling activity |
CN101313216A (zh) * | 2005-09-22 | 2008-11-26 | 普洛茨股份有限公司 | 酵母突变体中产生的糖基化多肽及其使用方法 |
JP5389442B2 (ja) * | 2005-09-29 | 2014-01-15 | メディミューン,エルエルシー | 膜Ig特異的抗体を同定する方法および免疫グロブリンを生成する前駆体細胞を標的化するための使用 |
DK1931709T3 (en) * | 2005-10-03 | 2017-03-13 | Xencor Inc | FC VARIETIES WITH OPTIMIZED FC RECEPTOR BINDING PROPERTIES |
JP5362359B2 (ja) | 2005-10-12 | 2013-12-11 | モルフォシス アーゲー | ヒトCD38に特異的な完全ヒトHuCALGOLD由来の治療抗体の生成とプロファイリング |
JP2009511067A (ja) | 2005-10-14 | 2009-03-19 | メディミューン,エルエルシー | 抗体ライブラリーの細胞提示 |
US20070087005A1 (en) | 2005-10-14 | 2007-04-19 | Lazar Gregory A | Anti-glypican-3 antibody |
DK1945666T3 (da) * | 2005-10-21 | 2013-07-01 | Genzyme Corp | Antistoffer med forøget antistofafhængig cellulær cytotoksicitetsaktivitet, fremgangsmåder til fremstilling af disse og anvendelse heraf |
EP2455100A3 (en) | 2005-11-07 | 2012-11-07 | The Rockefeller University | Reagents, methods and systems for selecting a cytotoxic antibody or variant thereof |
JP5179374B2 (ja) * | 2005-12-20 | 2013-04-10 | セファロン・オーストラリア・ピーティーワイ・リミテッド | 抗炎症ドメイン抗体(dAb) |
CA2640661A1 (en) | 2006-02-01 | 2007-08-09 | Arana Therapeutics Limited | Domain antibody construct |
WO2007092772A2 (en) * | 2006-02-03 | 2007-08-16 | Medimmune, Inc. | Protein formulations |
US8389688B2 (en) | 2006-03-06 | 2013-03-05 | Aeres Biomedical, Ltd. | Humanized anti-CD22 antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease |
CA2644903A1 (en) * | 2006-03-10 | 2007-09-20 | Macrogenics, Inc. | Identification and engineering of antibodies with variant heavy chains and methods of using same |
EP4342995A2 (en) | 2006-03-31 | 2024-03-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies |
MEP39508A (en) | 2006-04-21 | 2011-02-10 | Novartis Ag | Antagonist anti-cd40 antibody pharmaceutical compositions |
EP2021029B1 (en) * | 2006-05-26 | 2014-06-11 | MacroGenics, Inc. | Humanized fc gamma riib-specific antibodies and methods of use thereof |
JP2009539841A (ja) * | 2006-06-06 | 2009-11-19 | トラークス,インコーポレイテッド | 自己免疫疾患の治療における抗cd3抗体の投与 |
EP2032159B1 (en) | 2006-06-26 | 2015-01-07 | MacroGenics, Inc. | Combination of fcgammariib antibodies and cd20-specific antibodies and methods of use thereof |
ES2599319T3 (es) | 2006-06-26 | 2017-02-01 | Macrogenics, Inc. | Anticuerpos específicos de Fc RIIB y métodos de uso de éstos |
AT503889B1 (de) | 2006-07-05 | 2011-12-15 | Star Biotechnologische Forschungs Und Entwicklungsges M B H F | Multivalente immunglobuline |
KR101528939B1 (ko) | 2006-07-18 | 2015-06-15 | 사노피 | 암 치료를 위한 epha2에 대한 길항제 항체 |
GB0615266D0 (en) * | 2006-08-01 | 2006-09-06 | Immunobiology Ltd | Composition and method for mediating an immune response |
JP5406027B2 (ja) | 2006-08-04 | 2014-02-05 | ノバルティス アーゲー | EphB3特異的抗体およびその使用 |
AR062223A1 (es) | 2006-08-09 | 2008-10-22 | Glycart Biotechnology Ag | Moleculas de adhesion al antigeno que se adhieren a egfr, vectores que los codifican, y sus usos de estas |
ME01786B (me) | 2006-08-14 | 2014-09-20 | Xencor Inc | Optimizovana antitela usmerena na cd19 |
AR062435A1 (es) | 2006-08-18 | 2008-11-05 | Xoma Technology Ltd | Anticuerpo especifico prlr (receptor de prolactina) y sus usos |
PL2066349T3 (pl) | 2006-09-08 | 2012-09-28 | Medimmune Llc | Humanizowane przeciwciała anty-CD19 i ich zastosowanie w leczeniu nowotworów, transplantacjach i leczeniu chorób autoimmunologicznych |
WO2008030564A2 (en) * | 2006-09-08 | 2008-03-13 | Verenium Corporation | Aglycosylated antibodies and methods of making and using those antibodies |
JPWO2008032833A1 (ja) | 2006-09-14 | 2010-01-28 | 株式会社医学生物学研究所 | Adcc活性を増強させた抗体及びその製造方法 |
US20080112961A1 (en) * | 2006-10-09 | 2008-05-15 | Macrogenics, Inc. | Identification and Engineering of Antibodies with Variant Fc Regions and Methods of Using Same |
EP1914242A1 (en) | 2006-10-19 | 2008-04-23 | Sanofi-Aventis | Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer |
CL2007003411A1 (es) | 2006-11-28 | 2008-07-04 | Centelion | Proteina fusion que consiste en una region fc de una inmunoglobulina con un fragmento o dominio soluble de un receptor para fgf; polinucleotido que la codifica y vector y celula que lo comprenden; composicion farmaceutica que comprende la proteina fu |
EP2102239B1 (en) | 2006-11-30 | 2012-04-25 | Research Development Foundation | Improved immunoglobulin libraries |
PT2099823E (pt) | 2006-12-01 | 2014-12-22 | Seattle Genetics Inc | Agentes de ligação ao alvo variantes e suas utilizações |
MX2009006034A (es) | 2006-12-07 | 2009-10-12 | Novartis Ag | Anticuerpos antagonistas contra ephb3. |
WO2008140603A2 (en) | 2006-12-08 | 2008-11-20 | Macrogenics, Inc. | METHODS FOR THE TREATMENT OF DISEASE USING IMMUNOGLOBULINS HAVING FC REGIONS WITH ALTERED AFFINITIES FOR FCγR ACTIVATING AND FCγR INHIBITING |
WO2008090960A1 (ja) | 2007-01-24 | 2008-07-31 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | ガングリオシドgm2に特異的に結合する遺伝子組換え抗体組成物 |
KR101578940B1 (ko) | 2007-01-24 | 2015-12-18 | 교와 핫꼬 기린 가부시키가이샤 | 이펙터 활성이 증강된 유전자 재조합 항체 조성물 |
DK2125894T3 (en) | 2007-03-22 | 2019-03-18 | Biogen Ma Inc | BINDING PROTEINS, INCLUDING ANTIBODIES, ANTIBODY DERIVATIVES AND ANTIBODY FRAGMENTS, SPECIFICALLY BINDING CD154 AND APPLICATIONS THEREOF |
US20100015139A1 (en) * | 2008-07-10 | 2010-01-21 | Rekha Bansal | METHOD OF INHIBITING COMPLEMENT ACTIVATION WITH FACTOR Ba SPECIFIC ANTIBODIES AND USE THEREOF |
DK2155789T3 (da) * | 2007-05-01 | 2013-10-21 | Res Dev Foundation | Immunoglobulin-Fc-biblioteker |
KR20100017514A (ko) | 2007-05-07 | 2010-02-16 | 메디뮨 엘엘씨 | 항 icos 항체, 및 종양, 이식 및 자가면역성 질환 치료에서의 이의 용도 |
WO2009101479A2 (en) * | 2007-05-14 | 2009-08-20 | Novimmune Sa | Fc receptor-binding polypeptides with modified effector functions |
EP2176298B1 (en) * | 2007-05-30 | 2017-11-15 | Xencor, Inc. | Methods and compositions for inhibiting cd32b expressing cells |
EP2164869A2 (en) | 2007-05-31 | 2010-03-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Antigen-binding proteins targeting s. aureus orf0657n |
WO2009000006A1 (en) | 2007-06-26 | 2008-12-31 | F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges.M.B.H. | Display of binding agents |
US20110077383A1 (en) * | 2007-07-03 | 2011-03-31 | Medimmune, Llc | Hinge domain engineering |
EP2069401A4 (en) | 2007-07-31 | 2011-02-23 | Medimmune Llc | MULTISPECIENT EPITOP BINDING PROTEINS AND THEIR USE |
PE20120259A1 (es) | 2007-08-09 | 2012-04-04 | Boehringer Ingelheim Int | Anticuerpos anti-cd37 |
EP3127921A1 (en) | 2007-09-26 | 2017-02-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substition in cdr |
EP2230300A4 (en) * | 2007-10-24 | 2012-08-08 | Otsuka Chemical Holdings Co Ltd | POLYPEPTIDE WITH IMPROVED EFFECTOR FUNCTION |
CA2705509A1 (en) | 2007-11-14 | 2009-05-22 | Forerunner Pharma Research Co., Ltd. | Diagnosis and treatment of cancer using anti-gpr49 antibody |
JP5580205B2 (ja) | 2007-11-19 | 2014-08-27 | セレラ コーポレーション | 肺癌マーカーとその使用 |
SI3002298T1 (sl) | 2007-11-21 | 2019-12-31 | Oregon Health & Science University | Monoklonska protitelesa proti faktorju XI in postopki njihove uporabe |
US8795667B2 (en) * | 2007-12-19 | 2014-08-05 | Macrogenics, Inc. | Compositions for the prevention and treatment of smallpox |
US8092804B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-01-10 | Medimmune Limited | Binding members for interleukin-4 receptor alpha (IL-4Rα)-173 |
EP3211010A1 (en) | 2007-12-21 | 2017-08-30 | Medimmune Limited | Binding members for interleukin-4 receptor alpha (il-4r) - 173 |
HUE024903T2 (en) | 2007-12-26 | 2016-02-29 | Xencor Inc | FC variants with modified binding to FCRN |
KR20100116179A (ko) * | 2008-01-11 | 2010-10-29 | 고쿠리츠다이가쿠호우진 도쿄다이가쿠 | 항-cldn6 항체 |
WO2009092011A1 (en) | 2008-01-18 | 2009-07-23 | Medimmune, Llc | Cysteine engineered antibodies for site-specific conjugation |
EP2650017A3 (en) * | 2008-02-05 | 2014-01-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Alpha 5 - beta 1 antibodies and their uses |
KR101666229B1 (ko) * | 2008-02-08 | 2016-10-14 | 메디뮨 엘엘씨 | Fc 리간드 친화성이 감소된 항-IFNAR1 항체 |
US8802093B2 (en) | 2008-04-02 | 2014-08-12 | Macrogenics, Inc. | HER2/neu-specific antibodies and methods of using same |
EP3045475B1 (en) * | 2008-04-02 | 2017-10-04 | MacroGenics, Inc. | Bcr-complex-specific antibodies and methods of using same |
KR102269708B1 (ko) | 2008-04-11 | 2021-06-25 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 복수 분자의 항원에 반복 결합하는 항원 결합 분자 |
WO2009129538A2 (en) * | 2008-04-18 | 2009-10-22 | Xencor, Inc. | Human equivalent monoclonal antibodies engineered from nonhuman variable regions |
US20110229460A1 (en) * | 2008-05-01 | 2011-09-22 | Gtc Biotherapeutics, Inc. | anti-cd137 antibody as an agent in the treatment of inflammatory conditions |
EP2113255A1 (en) | 2008-05-02 | 2009-11-04 | f-star Biotechnologische Forschungs- und Entwicklungsges.m.b.H. | Cytotoxic immunoglobulin |
CA2726845C (en) * | 2008-06-04 | 2017-09-26 | Macrogenics, Inc. | Antibodies with altered binding to fcrn and methods of using same |
ES2669591T3 (es) | 2008-06-20 | 2018-05-28 | Novartis Ag | Inmunoglobulinas con agregación reducida |
KR20110057244A (ko) | 2008-09-19 | 2011-05-31 | 메디뮨 엘엘씨 | Dll4에 대한 항체 및 이의 용도 |
US8298533B2 (en) | 2008-11-07 | 2012-10-30 | Medimmune Limited | Antibodies to IL-1R1 |
US20110293605A1 (en) | 2008-11-12 | 2011-12-01 | Hasige Sathish | Antibody formulation |
US8950583B2 (en) * | 2008-12-06 | 2015-02-10 | Ermes Medical Company Limited | Method to remove heavy metals from a mammal |
WO2010072740A2 (en) | 2008-12-23 | 2010-07-01 | Astrazeneca Ab | TARGETED BINDING AGENTS DIRECTED TO α5β1 AND USES THEREOF |
WO2010078526A1 (en) | 2008-12-31 | 2010-07-08 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-lymphotoxin antibodies |
WO2010096394A2 (en) | 2009-02-17 | 2010-08-26 | Redwood Biosciences, Inc. | Aldehyde-tagged protein-based drug carriers and methods of use |
UA108349C2 (uk) | 2009-03-16 | 2015-04-27 | Сефалон Острейліа Пті Лтд | Гуманізоване антитіло з протипухлинною активністю |
WO2010112413A1 (en) | 2009-03-31 | 2010-10-07 | Roche Glycart Ag | Treatment of cancer with a humanized anti-egfr igg1 antibody and irinotecan |
KR101754433B1 (ko) | 2009-05-08 | 2017-07-05 | 백시넥스 인코포레이티드 | 항-cd100 항체 및 이의 사용 방법 |
US20120070432A1 (en) * | 2009-05-28 | 2012-03-22 | Amgen Inc. | Treatment of pancreatic cancer using a dr5 agonist in combination with gemcitabine |
US20120213705A1 (en) | 2009-06-22 | 2012-08-23 | Medimmune, Llc | ENGINEERED Fc REGIONS FOR SITE-SPECIFIC CONJUGATION |
AU2010273763B2 (en) * | 2009-06-30 | 2013-11-21 | Research Development Foundation | Immunoglobulin Fc polypeptides |
WO2011011797A2 (en) | 2009-07-24 | 2011-01-27 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Cytokine compositions and methods of use thereof |
AU2010290077C1 (en) | 2009-08-24 | 2015-12-03 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Coagulation factor IX compositions and methods of making and using same |
CN102741293B (zh) | 2009-08-31 | 2015-04-01 | 罗切格利卡特公司 | 亲和力成熟的人源化抗cea单克隆抗体 |
WO2011028952A1 (en) | 2009-09-02 | 2011-03-10 | Xencor, Inc. | Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens |
JP5885664B2 (ja) | 2009-09-25 | 2016-03-15 | ゾーマ テクノロジー リミテッド | スクリーニング法 |
US8926976B2 (en) | 2009-09-25 | 2015-01-06 | Xoma Technology Ltd. | Modulators |
IN2012DN02586A (zh) * | 2009-09-28 | 2015-08-28 | Univ Kentucky Res Found | |
US8575218B2 (en) * | 2009-09-28 | 2013-11-05 | The University Of Kentucky Research Foundation | Thiol-containing compounds for the removal of elements from tissues and formulations therefor |
UY32914A (es) | 2009-10-02 | 2011-04-29 | Sanofi Aventis | Anticuerpos que se usan específicamente al receptor epha2 |
JP5898082B2 (ja) | 2009-10-07 | 2016-04-06 | マクロジェニクス,インコーポレーテッド | フコシル化程度の変更により改良されたエフェクター機能を示すFc領域含有ポリペプチドおよびその使用法 |
EP2485763A4 (en) | 2009-10-10 | 2013-10-30 | Univ Leland Stanford Junior | IL-17 FAMILY CYTOKINE COMPOSITIONS AND USES THEREOF |
JP2013013327A (ja) * | 2009-10-29 | 2013-01-24 | Actgen Inc | Mansc1蛋白質に結合し、抗癌活性を有する抗体 |
PT3202898T (pt) | 2009-11-02 | 2018-12-28 | Univ Washington | Composições de nucleases terapêuticas e métodos |
JP5822841B2 (ja) | 2009-11-05 | 2015-11-24 | テバ・ファーマシューティカルズ・オーストラリア・ピーティワイ・リミテッド | 変異型のkrasまたはbraf遺伝子を含むがんの治療 |
HUE037159T2 (hu) | 2009-11-24 | 2018-08-28 | Medimmune Ltd | Targetált kötõdõ ágensek B7-H1 ellen |
TR201808011T4 (tr) * | 2009-12-21 | 2018-06-21 | Regeneron Pharma | Hümanize fc gama r fareleri. |
HUE028629T2 (en) | 2009-12-23 | 2016-12-28 | Synimmune Gmbh | Anti-FLT3 antibodies and ways of their use |
US8362210B2 (en) | 2010-01-19 | 2013-01-29 | Xencor, Inc. | Antibody variants with enhanced complement activity |
US20110189178A1 (en) * | 2010-02-04 | 2011-08-04 | Xencor, Inc. | Immunoprotection of Therapeutic Moieties Using Enhanced Fc Regions |
JP5841072B2 (ja) | 2010-02-10 | 2016-01-06 | イミュノジェン・インコーポレーテッド | Cd20抗体およびその使用 |
WO2011108502A1 (ja) | 2010-03-02 | 2011-09-09 | 協和発酵キリン株式会社 | 改変抗体組成物 |
US8802091B2 (en) | 2010-03-04 | 2014-08-12 | Macrogenics, Inc. | Antibodies reactive with B7-H3 and uses thereof |
PE20130479A1 (es) | 2010-03-04 | 2013-05-12 | Macrogenics Inc | Anticuerpos reactivos con b7-h3, fragmentos inmulogicamente activos de los mismos y usos de los mismos |
US8426368B2 (en) * | 2010-03-25 | 2013-04-23 | The University Of Kentucky Research Foundation | Method of ameliorating oxidative stress and supplementing the diet |
US20110237776A1 (en) * | 2010-03-25 | 2011-09-29 | Haley Boyd E | Aromatic compounds with sulfur containing ligands |
US20150231215A1 (en) | 2012-06-22 | 2015-08-20 | Randolph J. Noelle | VISTA Antagonist and Methods of Use |
CA2794708C (en) | 2010-03-29 | 2021-11-16 | Zymeworks Inc. | Antibodies with enhanced or suppressed effector function |
US20110245469A1 (en) * | 2010-04-02 | 2011-10-06 | Athena Discovery, Inc. | Intermediates formed in biosynthesis of relaxin-fusion proteins with extended in vivo half-lives |
JP2013528599A (ja) * | 2010-05-14 | 2013-07-11 | アムジェン インコーポレイテッド | 増強デスレセプター・アゴニスト |
EA201291482A1 (ru) | 2010-07-09 | 2013-10-30 | Байоджен Айдек Хемофилия Инк. | Химерные факторы коагуляции |
CN103154025B (zh) | 2010-08-02 | 2015-07-01 | 宏观基因有限公司 | 共价双抗体及其用途 |
JP5841149B2 (ja) | 2010-08-13 | 2016-01-13 | ロシュ グリクアート アーゲー | 抗テネイシンca2抗体及び使用の方法 |
MY175341A (en) | 2010-08-13 | 2020-06-19 | Roche Glycart Ag | Anti-fap antibodies and methods of use |
WO2012022734A2 (en) | 2010-08-16 | 2012-02-23 | Medimmune Limited | Anti-icam-1 antibodies and methods of use |
AU2011295902B2 (en) | 2010-09-02 | 2014-12-04 | Vaccinex, Inc. | Anti-CXCL13 antibodies and methods of using the same |
TW201302793A (zh) | 2010-09-03 | 2013-01-16 | Glaxo Group Ltd | 新穎之抗原結合蛋白 |
RU2013115927A (ru) | 2010-09-10 | 2014-10-20 | Апексиджен, Инк. | АНТИТЕЛА ПРОТИВ ИЛ-1β И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ |
UA112062C2 (uk) | 2010-10-04 | 2016-07-25 | Бьорінгер Інгельхайм Інтернаціональ Гмбх | Cd33-зв'язувальний агент |
WO2012075111A1 (en) | 2010-11-30 | 2012-06-07 | Novartis Ag | Uses of anti-cd40 antibodies in combination therapy for b cell-related cancers |
AU2011337704B2 (en) | 2010-11-30 | 2017-06-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly |
EP2663647A4 (en) | 2011-01-14 | 2015-08-19 | Redwood Bioscience Inc | POLYPEPTIDE IMMUNOGLOBULINS WITH ALDEHYDIC MARKING AND THEIR USE METHOD |
WO2012109133A1 (en) | 2011-02-07 | 2012-08-16 | Research Development Foundation | Engineered immunoglobulin fc polypeptides |
CA2824252A1 (en) | 2011-02-10 | 2012-08-16 | Roche Glycart Ag | Improved immunotherapy |
KR102147548B1 (ko) | 2011-02-25 | 2020-08-24 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | FcγRIIb 특이적 Fc 항체 |
WO2012132067A1 (ja) | 2011-03-30 | 2012-10-04 | 中外製薬株式会社 | 抗原結合分子の血漿中滞留性と免疫原性を改変する方法 |
EA029300B1 (ru) | 2011-03-02 | 2018-03-30 | Роше Гликарт Аг | Антитело к связанному с мембраной человеческому карциноэмбриональному антигену, его получение и применение |
EP2681243B1 (en) | 2011-03-03 | 2018-09-05 | Apexigen, Inc. | Anti-il-6 receptor antibodies and methods of use |
AU2012225246B2 (en) | 2011-03-10 | 2016-01-21 | Omeros Corporation | Generation of anti-FN14 monoclonal antibodies by ex-vivo accelerated antibody evolution |
JP5972915B2 (ja) * | 2011-03-16 | 2016-08-17 | アムジエン・インコーポレーテツド | Fc変異体 |
EP3825325A3 (en) | 2011-03-30 | 2021-10-13 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Retention of antigen-binding molecules in blood plasma and method for modifying immunogenicity |
CA2832281C (en) * | 2011-04-04 | 2019-11-05 | Trustees Of Dartmouth College | Anti-cd154 antibodies having impaired fcr binding and/or complement binding properties and the use thereof in immune therapies |
US9321833B2 (en) | 2011-04-04 | 2016-04-26 | The Trustees Of Dartmouth College | Methods of therapy with anti-CD154 antibodies having impaired FcR binding and/or complement binding properties |
US9028826B2 (en) | 2011-04-04 | 2015-05-12 | The Trustees Of Dartmouth College | Methods of immune therapy with anti-CD154 antibodies having impaired FcR binding and/or complement binding properties |
PT2697257T (pt) | 2011-04-13 | 2016-12-28 | Bristol Myers Squibb Co | Proteínas de fusão fc compreendendo novos ligantes ou arranjos |
KR20140059168A (ko) | 2011-04-21 | 2014-05-15 | 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 콜로라도, 어 바디 코포레이트 | 시신경 척수염 치료용 조성물 및 치료 방법 |
WO2012149356A2 (en) | 2011-04-29 | 2012-11-01 | Apexigen, Inc. | Anti-cd40 antibodies and methods of use |
CA2834626A1 (en) * | 2011-04-29 | 2012-11-01 | University Of Washington | Therapeutic nuclease compositions and methods |
MX347818B (es) | 2011-05-21 | 2017-05-15 | Macrogenics Inc | Dominios que enlazan suero desinmunizados y su uso para prolongar la vida media en suero. |
ES2704038T3 (es) | 2011-05-24 | 2019-03-13 | Zyngenia Inc | Complejos multiespecíficos multivalentes y monovalentes y sus usos |
JP2014517846A (ja) * | 2011-05-25 | 2014-07-24 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション | 改善された特性を有するFc含有ポリペプチドの製造方法 |
SI2714735T1 (sl) | 2011-06-03 | 2021-12-31 | Xoma Technology Ltd. | Protitelesa, specifična za TGF-beta |
US9486507B2 (en) | 2011-06-10 | 2016-11-08 | Biogen Ma Inc. | Pro-coagulant compounds and methods of use thereof |
CN103827300A (zh) | 2011-06-30 | 2014-05-28 | 中外制药株式会社 | 异源二聚化多肽 |
US9738707B2 (en) | 2011-07-15 | 2017-08-22 | Biogen Ma Inc. | Heterodimeric Fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto |
WO2013025446A2 (en) | 2011-08-12 | 2013-02-21 | Omeros Corporation | Anti-fzd10 monoclonal antibodies and methods for their use |
US20130108641A1 (en) | 2011-09-14 | 2013-05-02 | Sanofi | Anti-gitr antibodies |
KR102017070B1 (ko) | 2011-09-30 | 2019-09-02 | 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. | 치료 펩티드 |
TW201817744A (zh) | 2011-09-30 | 2018-05-16 | 日商中外製藥股份有限公司 | 具有促進抗原清除之FcRn結合域的治療性抗原結合分子 |
TWI681970B (zh) | 2011-09-30 | 2020-01-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 包含依離子濃度之條件對抗原之結合活性會改變之抗原結合分域、及於pH中性之條件下對FcRn有結合活性之FcRn結合分域、且誘導對標的抗原的免疫反應之抗原結合分子 |
CN108144058A (zh) | 2011-09-30 | 2018-06-12 | 中外制药株式会社 | 促进抗原消除的抗原结合分子 |
EP3939996A1 (en) | 2011-09-30 | 2022-01-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule promoting disappearance of antigens having plurality of biological activities |
DK2766093T3 (en) | 2011-10-11 | 2018-06-06 | Vaccinex Inc | USE OF SEMAPHORIN-4D BINDING MOLECULES FOR MODULATING THE PERMEABILITY OF THE BLOOD-BRAIN BARRIER |
JP6184965B2 (ja) | 2011-10-28 | 2017-08-23 | テバ・ファーマシューティカルズ・オーストラリア・ピーティワイ・リミテッド | ポリペプチド構築物およびその使用 |
KR102398736B1 (ko) | 2011-10-31 | 2022-05-16 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 중쇄와 경쇄의 회합이 제어된 항원 결합 분자 |
JP6117225B2 (ja) | 2011-11-02 | 2017-04-19 | アペクシジェン, インコーポレイテッド | 抗kdr抗体およびその使用方法 |
CN113416256A (zh) | 2011-11-30 | 2021-09-21 | 中外制药株式会社 | 包含进入细胞内以形成免疫复合体的搬运体(载体)的药物 |
AU2012347972B2 (en) | 2011-12-05 | 2018-05-10 | X-Body, Inc. | PDGF receptor beta binding polypeptides |
EP2793944A4 (en) | 2011-12-23 | 2015-09-02 | Nicholas B Lydon | IMMUNOGLOBULINS AND VARIANTS DIRECTED AGAINST PATHOGENIC MICROBES |
US11147852B2 (en) | 2011-12-23 | 2021-10-19 | Pfizer Inc. | Engineered antibody constant regions for site-specific conjugation and methods and uses therefor |
US9988439B2 (en) | 2011-12-23 | 2018-06-05 | Nicholas B. Lydon | Immunoglobulins and variants directed against pathogenic microbes |
TWI593705B (zh) | 2011-12-28 | 2017-08-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Humanized anti-epiregulin antibody and cancer therapeutic agent containing the antibody as an active ingredient |
KR102041412B1 (ko) * | 2011-12-30 | 2019-11-11 | 한미사이언스 주식회사 | 면역글로불린 Fc 단편 유도체 |
BR112014017165B1 (pt) | 2012-01-12 | 2023-05-02 | Bioverativ Therapeutics Inc | Proteína quimérica compreendendo uma proteína de fator viii, composição farmacêutica, e seus usos |
CA2864126A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Biogen Idec Ma Inc. | Recombinant factor viii proteins |
WO2013122617A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Amunix Operating Inc. | Factor viii compositions and methods of making and using same |
CA2865928C (en) | 2012-03-02 | 2021-02-16 | Vaccinex, Inc. | Cxcl13 antagonist for the treatment of sjogren's syndrome |
TWI605060B (zh) | 2012-03-28 | 2017-11-11 | 賽諾菲公司 | 抗緩激肽b1受體配位體之抗體 |
JP6280031B2 (ja) | 2012-03-29 | 2018-02-14 | 中外製薬株式会社 | 抗lamp5抗体およびその利用 |
WO2013163297A1 (en) | 2012-04-25 | 2013-10-31 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Modified glycoproteins |
WO2013166290A1 (en) | 2012-05-04 | 2013-11-07 | Abbvie Biotherapeutics Inc. | P21 biomarker assay |
CA2872856A1 (en) | 2012-05-07 | 2013-11-14 | Sanofi | Methods for preventing biofilm formation |
WO2013175276A1 (en) | 2012-05-23 | 2013-11-28 | Argen-X B.V | Il-6 binding molecules |
WO2013177386A1 (en) | 2012-05-24 | 2013-11-28 | Abbvie Biotherapeutics Inc. | Biomarkers for predicting response to tweak receptor (tweakr) agonist therapy |
US20150353630A1 (en) | 2012-05-30 | 2015-12-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antigen-binding molecule for eliminating aggregated antigens |
MX2014014678A (es) | 2012-05-30 | 2015-02-10 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molecula de union al antigeno especifico para el tejido objetivo. |
CA2875247A1 (en) | 2012-06-08 | 2013-12-12 | Biogen Idec Ma Inc. | Chimeric clotting factors |
JP2015521589A (ja) | 2012-06-08 | 2015-07-30 | バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッドBiogen MA Inc. | プロコアグラント化合物 |
WO2013187495A1 (ja) | 2012-06-14 | 2013-12-19 | 中外製薬株式会社 | 改変されたFc領域を含む抗原結合分子 |
WO2014008480A2 (en) | 2012-07-06 | 2014-01-09 | Biogen Idec Ma Inc. | Cell line expressing single chain factor viii polypeptides and uses thereof |
EP4269431A1 (en) | 2012-07-11 | 2023-11-01 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Factor viii complex with xten and von willebrand factor protein, and uses thereof |
HRP20211641T1 (hr) | 2012-07-13 | 2022-02-04 | Roche Glycart Ag | Bispecifična protutijela anti-vegf/anti-ang-2 i njihova primjena u liječenju vaskularnih očnih bolesti |
KR20150036606A (ko) * | 2012-07-13 | 2015-04-07 | 자임워크스 인코포레이티드 | 항-cd3 구조체를 포함하는 이중특이적 비대칭 이형이합체 |
EP4063391A1 (en) | 2012-07-25 | 2022-09-28 | Celldex Therapeutics, Inc. | Anti-kit antibodies and uses thereof |
CN104662045B (zh) | 2012-08-07 | 2019-04-05 | 罗切格利卡特公司 | 包含两种工程化改造成具有降低的和升高的效应器功能的抗体的组合物改进的免疫疗法 |
US11236168B2 (en) | 2012-08-24 | 2022-02-01 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Mouse FcγammaRII-specific Fc antibody |
TWI717591B (zh) | 2012-08-24 | 2021-02-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | FcγRIIb特異性Fc區域變異體 |
JP6368308B2 (ja) | 2012-09-07 | 2018-08-01 | トラスティーズ・オブ・ダートマス・カレッジ | 癌の診断および治療のためのvista調節剤 |
US9790268B2 (en) | 2012-09-12 | 2017-10-17 | Genzyme Corporation | Fc containing polypeptides with altered glycosylation and reduced effector function |
US9714291B2 (en) | 2012-10-05 | 2017-07-25 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd | Heterodimer protein composition |
CN110066335B (zh) | 2012-10-30 | 2024-04-05 | 埃派斯进有限公司 | 抗-cd40抗体及其使用方法 |
BR112015010722A2 (pt) | 2012-11-09 | 2017-08-22 | Pfizer | Anticorpos específicos de fator de crescimento derivado de plaquetas de isoforma b e composições e usos dos mesmos |
EA034757B1 (ru) | 2012-12-10 | 2020-03-17 | Байоджен Ма Инк. | Антитела против антигена 2 дендритных клеток крови и их применение |
TWI693073B (zh) | 2012-12-21 | 2020-05-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 對gpc3標的治療劑療法為有效之患者投與的gpc3標的治療劑 |
EP3557260B1 (en) | 2012-12-21 | 2022-05-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Gpc3-targeting drug which is administered to patient responsive to gpc3-targeting drug therapy |
JP6433297B2 (ja) * | 2012-12-27 | 2018-12-05 | 中外製薬株式会社 | ヘテロ二量化ポリペプチド |
TWI682941B (zh) | 2013-02-01 | 2020-01-21 | 美商再生元醫藥公司 | 含嵌合恆定區之抗體 |
EP3299378B1 (en) | 2013-02-12 | 2019-07-31 | Bristol-Myers Squibb Company | High ph protein refolding methods |
EP3744728A1 (en) | 2013-02-12 | 2020-12-02 | Bristol-Myers Squibb Company | Tangential flow filtration based protein refolding methods |
EP2956480B1 (en) | 2013-02-13 | 2019-09-04 | Laboratoire Français du Fractionnement et des Biotechnologies | Highly galactosylated anti-tnf-alpha antibodies and uses thereof |
BR112015019348A2 (pt) | 2013-02-13 | 2017-08-22 | Lab Francais Du Fractionnement | Métodos para produção de proteína com glicosilação modificada e com sialilação aumentada, para aumentar a atividade de sialil transferase na glândula mamária e para produzir sialil transferase, proteína com glicosilação modificada ou proteína com sialilação aumentada, composição, sialil transferase, mamífero transgênico, e, célula epitelial mamária |
EP2956482B1 (en) | 2013-02-14 | 2017-06-28 | Innate Pharma | Treatment of peripheral t cell lymphoma |
PL3889173T3 (pl) | 2013-02-15 | 2023-12-11 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Zoptymalizowany gen czynnika viii |
CA2899241C (en) | 2013-02-20 | 2023-03-28 | Innate Pharma | A compound that specifically binds to kir3dl2 for use in the treatment of peripheral t cell lymphoma |
US9184589B2 (en) * | 2013-02-27 | 2015-11-10 | Mitsubishi Electric Research Laboratories, Inc. | Method for optimizing power flows in electric power networks |
US9487587B2 (en) | 2013-03-05 | 2016-11-08 | Macrogenics, Inc. | Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof |
WO2014137355A1 (en) | 2013-03-08 | 2014-09-12 | Vaccinex, Inc. | Anti-cxcl13 antibodies and associated epitope sequences |
US10344060B2 (en) | 2013-03-12 | 2019-07-09 | Amgen Inc. | Potent and selective inhibitors of Nav1.7 |
US9636418B2 (en) | 2013-03-12 | 2017-05-02 | Amgen Inc. | Potent and selective inhibitors of NAV1.7 |
US9908938B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-03-06 | Macrogenics, Inc. | Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells that express an activating receptor and an antigen expressed by a cell infected by a virus and uses thereof |
CN105142668B (zh) | 2013-03-15 | 2018-04-27 | 达纳-法伯癌症研究院公司 | 治疗性肽 |
US10035859B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-07-31 | Biogen Ma Inc. | Anti-alpha V beta 6 antibodies and uses thereof |
US20140294812A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-10-02 | Xencor, Inc. | Fc variants that improve fcrn binding and/or increase antibody half-life |
WO2014143739A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof |
CN105392801A (zh) | 2013-03-15 | 2016-03-09 | 比奥根Ma公司 | 使用抗αvβ5抗体治疗和预防急性肾损伤 |
CA2899089C (en) | 2013-03-15 | 2021-10-26 | Biogen Ma Inc. | Factor ix polypeptide formulations |
BR112015023752B1 (pt) | 2013-03-15 | 2023-11-14 | Zyngenia, Inc. | Domínio de reconhecimento modular (mrd), complexo compreendendo mrd e cetuximabe, usos do complexo para inibir a angiogênese e tratar câncer e composição farmacêutica compreendendo o dito complexo |
WO2014144632A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Amgen Inc. | Human pac1 antibodies |
KR20210130260A (ko) | 2013-04-02 | 2021-10-29 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | Fc영역 개변체 |
UY35517A (es) * | 2013-04-04 | 2014-10-31 | Mabxience S A | Un procedimiento para aumentar la formación de ácido piroglutamico de una proteína |
US11117975B2 (en) | 2013-04-29 | 2021-09-14 | Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd | Anti-CD38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2B |
AU2013388126B2 (en) | 2013-04-29 | 2019-03-07 | Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd. | Anti-CD38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2b |
JP6567506B2 (ja) | 2013-05-31 | 2019-08-28 | ザイムワークス,インコーポレイテッド | 低下した又はサイレント化したエフェクター機能を持つヘテロ多量体 |
MX2015017852A (es) | 2013-06-24 | 2016-08-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Agente terapeutico que comprende el anticuerpo anti-epirregulina humanizado con ingrediente activo contra el carcinoma de pulmon de celulas no pequeñas excluyendo el adenocarcinoma. |
DK3013350T3 (da) | 2013-06-25 | 2020-04-14 | Vaccinex Inc | Anvendelse af semaphorin-4D-hæmmende molekyler i kombination med en immunmodulerende terapi for at hæmme tumorvækst og metastaser |
RS58719B1 (sr) * | 2013-08-01 | 2019-06-28 | Five Prime Therapeutics Inc | Nefukozilisana anti-fgfr2iiib antitela |
WO2015021423A2 (en) | 2013-08-08 | 2015-02-12 | Biogen Idec Ma Inc. | Purification of chimeric fviii molecules |
US11384149B2 (en) | 2013-08-09 | 2022-07-12 | Macrogenics, Inc. | Bi-specific monovalent Fc diabodies that are capable of binding CD32B and CD79b and uses thereof |
UA116479C2 (uk) | 2013-08-09 | 2018-03-26 | Макродженікс, Інк. | БІСПЕЦИФІЧНЕ МОНОВАЛЕНТНЕ Fc-ДІАТІЛО, ЯКЕ ОДНОЧАСНО ЗВ'ЯЗУЄ CD32B I CD79b, ТА ЙОГО ЗАСТОСУВАННЯ |
CN112142845A (zh) | 2013-08-13 | 2020-12-29 | 赛诺菲 | 纤溶酶原激活剂抑制剂-1(pai-1)的抗体及其用途 |
TWI592426B (zh) | 2013-08-13 | 2017-07-21 | 賽諾菲公司 | 胞漿素原活化素抑制劑-1(pai-1)之抗體及其用途 |
US10548953B2 (en) | 2013-08-14 | 2020-02-04 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Factor VIII-XTEN fusions and uses thereof |
EP2840091A1 (en) | 2013-08-23 | 2015-02-25 | MacroGenics, Inc. | Bi-specific diabodies that are capable of binding gpA33 and CD3 and uses thereof |
EP2839842A1 (en) | 2013-08-23 | 2015-02-25 | MacroGenics, Inc. | Bi-specific monovalent diabodies that are capable of binding CD123 and CD3 and uses thereof |
WO2015035044A2 (en) * | 2013-09-04 | 2015-03-12 | Abbvie Biotherapeutics Inc. | Fc VARIANTS WITH IMPROVED ANTIBODY-DEPENDENT CELL-MEDIATED CYTOTOXICITY |
US10611794B2 (en) | 2013-09-25 | 2020-04-07 | Bioverativ Therapeutics Inc. | On-column viral inactivation methods |
WO2015050959A1 (en) | 2013-10-01 | 2015-04-09 | Yale University | Anti-kit antibodies and methods of use thereof |
US10494419B2 (en) | 2013-10-02 | 2019-12-03 | Medimmune, Llc | Neutralizing anti-influenza A antibodies and uses thereof |
NZ630881A (en) | 2013-10-10 | 2016-03-31 | Vaccinex Inc | Use of semaphorin-4d binding molecules for treatment of atherosclerosis |
WO2015057939A1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-23 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-s1p4 antibodies and uses thereof |
NZ630892A (en) | 2013-10-21 | 2016-03-31 | Vaccinex Inc | Use of semaphorin-4d binding molecules for treating neurodegenerative disorders |
PL3063275T3 (pl) | 2013-10-31 | 2020-03-31 | Resolve Therapeutics, Llc | Terapeutyczne fuzje nukleaza-albumina i sposoby |
EP3065769A4 (en) | 2013-11-08 | 2017-05-31 | Biogen MA Inc. | Procoagulant fusion compound |
KR102366076B1 (ko) | 2013-11-13 | 2022-02-21 | 화이자 인코포레이티드 | 종양 괴사 인자-유사 리간드 1a 특이적 항체 및 그의 조성물 및 용도 |
US10087260B2 (en) * | 2013-11-19 | 2018-10-02 | Remegen, Ltd. | Anti-HER2 antibody and conjugate thereof |
KR20220142539A (ko) | 2013-12-04 | 2022-10-21 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 화합물의 농도에 따라 항원 결합능이 변화되는 항원 결합 분자 및 그의 라이브러리 |
MX371187B (es) | 2013-12-06 | 2020-01-22 | Dana Farber Cancer Inst Inc | Péptidos terapéuticos. |
US8980273B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-17 | Kymab Limited | Method of treating atopic dermatitis or asthma using antibody to IL4RA |
US8986691B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-24 | Kymab Limited | Method of treating atopic dermatitis or asthma using antibody to IL4RA |
JP6554473B2 (ja) | 2013-12-24 | 2019-07-31 | アルゲン−エックス ビーブイビーエー | FcRnアンタゴニスト及び使用方法 |
BR112016015512B1 (pt) | 2014-01-10 | 2023-12-19 | Bioverativ Therapeutics Inc | Proteína quimérica, composição farmacêutica e seus usos |
WO2015109212A1 (en) | 2014-01-17 | 2015-07-23 | Pfizer Inc. | Anti-il-2 antibodies and compositions and uses thereof |
MX2016010951A (es) | 2014-03-05 | 2016-11-29 | Ucb Biopharma Sprl | Proteinas de fc multimericas. |
EP3925973A1 (en) | 2014-03-14 | 2021-12-22 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Vaccine compositions and methods for restoring nkg2d pathway function against cancers |
SG11201606789SA (en) | 2014-03-14 | 2016-09-29 | Innate Pharma | Humanized antibodies with increased stability |
TWI701042B (zh) | 2014-03-19 | 2020-08-11 | 美商再生元醫藥公司 | 用於腫瘤治療之方法及抗體組成物 |
ES2800674T3 (es) | 2014-03-21 | 2021-01-04 | X Body Inc | Polipéptidos biespecíficos de unión a antígeno |
CA2943943C (en) | 2014-04-07 | 2023-01-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Immunoactivating antigen-binding molecule |
UA119352C2 (uk) | 2014-05-01 | 2019-06-10 | Тева Фармасьютикалз Острейліа Пті Лтд | Комбінація леналідоміду або помалідоміду і конструкції анти-cd38 антитіло-атенуйований інтерферон альфа-2b та спосіб лікування суб'єкта, який має cd38-експресуючу пухлину |
US11760807B2 (en) | 2014-05-08 | 2023-09-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | GPC3-targeting drug which is administered to patient responsive to GPC3-targeting drug therapy |
MX2016014434A (es) | 2014-05-13 | 2017-02-23 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molecula de union a antigeno redirigida a celulas t para celulas que tienen funcion de inmunosupresion. |
MX2016014824A (es) | 2014-05-13 | 2017-03-23 | Bioatla Llc | Proteinas biologicas condicionalmente activas. |
WO2015187835A2 (en) | 2014-06-06 | 2015-12-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof |
GB2527286A (en) * | 2014-06-11 | 2015-12-23 | Rsr Ltd | Glycoprotein hormone receptor mutations |
WO2015197593A1 (en) | 2014-06-27 | 2015-12-30 | Innate Pharma | MULTISPECIFIC NKp46 BINDING PROTEINS |
CA2952532A1 (en) | 2014-06-27 | 2015-12-30 | Innate Pharma | Multispecific antigen binding proteins |
EP3160478A4 (en) | 2014-06-30 | 2018-05-16 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Optimized factor ix gene |
MX2017000595A (es) | 2014-07-15 | 2017-10-12 | Medimmune Llc | Anticuerpos anti-influenza b neutralizantes y usos de los mismos. |
WO2016030488A1 (en) | 2014-08-27 | 2016-03-03 | Innate Pharma | Treatment of celiac disease |
WO2016044224A1 (en) | 2014-09-15 | 2016-03-24 | Amgen Inc. | Bi-specific anti-cgrp receptor/pac1 receptor antigen binding proteins and uses thereof |
RU2017113134A (ru) | 2014-09-19 | 2018-10-19 | Регенерон Фармасьютикалз, Инк. | Химерные антигенные рецепторы |
CA2962486A1 (en) | 2014-09-26 | 2016-03-31 | Bayer Pharma Aktiengesellschaft | Stabilized adrenomedullin derivatives and use thereof |
MA40764A (fr) | 2014-09-26 | 2017-08-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Agent thérapeutique induisant une cytotoxicité |
SG11201702544WA (en) | 2014-09-29 | 2017-04-27 | Univ Duke | Bispecific molecules comprising an hiv-1 envelope targeting arm |
AU2015330869B2 (en) | 2014-10-09 | 2021-07-08 | Genzyme Corporation | Glycoengineered antibody drug conjugates |
JP6625627B2 (ja) | 2014-10-14 | 2019-12-25 | ハロザイム インコーポレイテッド | アデノシンデアミナーゼ−2(ada2)、その変異体の組成物およびそれを使用する方法 |
US10329348B2 (en) | 2014-10-23 | 2019-06-25 | Innate Pharma | Treatment of cancers using anti-NKG2A agents |
EP3212216A4 (en) | 2014-10-29 | 2018-04-18 | Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd | Interferon alpha2b variants |
CA2967820A1 (en) | 2014-11-17 | 2016-05-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for tumor treatment using cd3xcd20 bispecific antibody |
MY189836A (en) | 2014-11-21 | 2022-03-11 | Bristol Myers Squibb Co | Antibodies against cd73 and uses thereof |
CA2968382A1 (en) | 2014-11-21 | 2016-05-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies comprising modified heavy constant regions |
MA41294A (fr) | 2014-12-19 | 2017-11-08 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticorps anti-myostatine, polypeptides contenant des variants de régions fc, et procédés d'utilisation |
KR102644115B1 (ko) | 2014-12-23 | 2024-03-05 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | Tigit에 대한 항체 |
CN114773470A (zh) | 2015-02-05 | 2022-07-22 | 中外制药株式会社 | 包含离子浓度依赖性的抗原结合结构域的抗体,fc区变体,il-8-结合抗体及其应用 |
CA2976236A1 (en) * | 2015-02-09 | 2016-08-18 | Research Development Foundation | Engineered immunoglobulin fc polypeptides displaying improved complement activation |
CA2978253A1 (en) | 2015-03-09 | 2016-09-15 | Argenx Bvba | Methods of reducing serum levels of fc-containing agents using fcrn antagonists |
CA2981312C (en) | 2015-03-30 | 2023-09-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Heavy chain constant regions with reduced binding to fc gamma receptors |
PL3277717T3 (pl) | 2015-03-31 | 2021-05-31 | Medimmune Limited | Nowa postać il33, zmutowane postaci il33, przeciwciała, oznaczenia i sposoby ich zastosowania |
EP3277716B1 (en) | 2015-04-03 | 2020-06-24 | XOMA Technology Ltd. | Treatment of cancer using inhibitors of tgf-beta and pd-1 |
AR104368A1 (es) | 2015-04-03 | 2017-07-19 | Lilly Co Eli | Anticuerpos biespecíficos anti-cd20- / anti-baff |
UA126270C2 (uk) | 2015-04-10 | 2022-09-14 | Емджен Інк. | Мутеїни інтерлейкіну-2 для росту регуляторних t-клітин |
JOP20200116A1 (ar) | 2015-04-24 | 2017-06-16 | Amgen Inc | طرق لعلاج أو الوقاية من الصداع النصفي |
US10259882B2 (en) | 2015-05-07 | 2019-04-16 | Agenus Inc. | Anti-OX40 antibodies |
JP6797137B2 (ja) | 2015-05-29 | 2020-12-09 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーBristol−Myers Squibb Company | Ox40に対する抗体およびその使用 |
PL3303394T3 (pl) | 2015-05-29 | 2020-11-16 | Agenus Inc. | Przeciwciała anty-ctla-4 i sposoby ich zastosowania |
AU2016284866B2 (en) | 2015-06-23 | 2022-09-29 | Innate Pharma | Multispecific antigen binding proteins |
CA2990518A1 (en) | 2015-06-23 | 2016-12-29 | Innate Pharma | Multispecific nk engager proteins |
WO2017002934A1 (ja) | 2015-07-01 | 2017-01-05 | 中外製薬株式会社 | Gpc3標的治療剤が有効である患者に投与されるgpc3標的治療剤 |
WO2017015619A1 (en) | 2015-07-23 | 2017-01-26 | The Regents Of The University Of California | Antibodies to coagulation factor xia and uses thereof |
CN108472337B (zh) | 2015-08-03 | 2022-11-25 | 比奥贝拉蒂治疗公司 | 因子ix融合蛋白以及其制备和使用方法 |
US20190022092A1 (en) | 2015-09-15 | 2019-01-24 | Acerta Pharma B.V. | Therapeutic Combinations of a BTK Inhibitor and a GITR Binding Molecule, a 4-1BB Agonist, or an OX40 Agonist |
TWI703158B (zh) | 2015-09-18 | 2020-09-01 | 美商希佛隆公司 | 特異性結合tl1a之抗體 |
MX2018003005A (es) | 2015-09-18 | 2018-04-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos que se unen a interleucina 8 (il-8) y sus usos. |
CN108472364B (zh) | 2015-10-12 | 2022-03-04 | 阿普洛根医药株式会社 | 抗cd43抗体及其在癌症治疗中的应用 |
US10138298B2 (en) | 2015-10-23 | 2018-11-27 | The Regents Of The University Of California | Anti-IL-2 antibodies and compositions and uses thereof |
WO2017086367A1 (ja) | 2015-11-18 | 2017-05-26 | 中外製薬株式会社 | 免疫抑制機能を有する細胞に対するt細胞リダイレクト抗原結合分子を用いた併用療法 |
EP3378488A4 (en) | 2015-11-18 | 2019-10-30 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | METHOD FOR ENHANCING THE HUMORAL IMMUNE RESPONSE |
EA201891121A1 (ru) | 2015-11-19 | 2018-12-28 | Бристол-Майерс Сквибб Компани | Антитела к глюкокортикоид-индуцированному рецептору фактора некроза опухоли (gitr) и их применения |
KR20180085740A (ko) | 2015-12-09 | 2018-07-27 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 항-약물 항체의 형성을 감소시키기 위한 ii형 항-cd20 항체 |
EP3178848A1 (en) | 2015-12-09 | 2017-06-14 | F. Hoffmann-La Roche AG | Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies |
CN114848812A (zh) | 2015-12-15 | 2022-08-05 | 吉利德科学公司 | 人免疫缺陷病毒中和抗体 |
EP3390447A1 (en) | 2015-12-15 | 2018-10-24 | Amgen Inc. | Pacap antibodies and uses thereof |
JP7141336B2 (ja) | 2015-12-25 | 2022-09-22 | 中外製薬株式会社 | 抗ミオスタチン抗体および使用方法 |
SG11201803989WA (en) | 2015-12-28 | 2018-06-28 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Method for promoting efficiency of purification of fc region-containing polypeptide |
EP3192810A1 (en) | 2016-01-14 | 2017-07-19 | Deutsches Krebsforschungszentrum | Psma binding antibody and uses thereof |
SG10201913278PA (en) | 2016-02-01 | 2020-02-27 | Bioverativ Therapeutics Inc | Optimized factor viii genes |
WO2017148880A1 (en) | 2016-03-01 | 2017-09-08 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Obinutuzumab variants having altered cell death induction |
IL295230A (en) | 2016-03-04 | 2022-10-01 | Bristol Myers Squibb Co | Combination therapy with anti-cd73 antibodies |
KR102632796B1 (ko) | 2016-03-10 | 2024-02-02 | 비엘라 바이오, 인크. | Ilt7 결합 분자 및 이의 사용 방법 |
US11072666B2 (en) | 2016-03-14 | 2021-07-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cell injury inducing therapeutic drug for use in cancer therapy |
BR112018067923A2 (pt) | 2016-03-15 | 2019-02-05 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | métodos de tratamento de cânceres usando antagonistas de ligação de eixo pd-1 e anticorpos anti-gpc3 |
EP3430047A1 (en) | 2016-03-15 | 2019-01-23 | Innate Pharma | Anti-mica antibodies |
EP3430034A1 (en) | 2016-03-16 | 2019-01-23 | Merrimack Pharmaceuticals, Inc. | Engineered trail for cancer therapy |
CA3020848A1 (en) | 2016-04-15 | 2017-10-19 | Janssen Pharmaceuticals, Inc. | Anti-human vista antibodies and use thereof |
IL262396B2 (en) | 2016-04-15 | 2023-09-01 | Macrogenics Inc | New b7-h3 binding molecules, drug-antibody conjugates and their uses |
JP2019515677A (ja) | 2016-04-26 | 2019-06-13 | アール.ピー.シェーラー テクノロジーズ エルエルシー | 抗体複合体ならびにそれを作製および使用する方法 |
CN109476742B (zh) | 2016-05-09 | 2023-04-14 | 百时美施贵宝公司 | Tl1a抗体及其用途 |
EP3455252B1 (en) | 2016-05-11 | 2022-02-23 | F. Hoffmann-La Roche AG | Modified anti-tenascin antibodies and methods of use |
BR112018073739A2 (pt) | 2016-05-20 | 2019-02-26 | Harpoon Therapeutics, Inc. | proteína de ligação de albumina sérica de domínio único |
US11623958B2 (en) | 2016-05-20 | 2023-04-11 | Harpoon Therapeutics, Inc. | Single chain variable fragment CD3 binding proteins |
EP3252078A1 (en) | 2016-06-02 | 2017-12-06 | F. Hoffmann-La Roche AG | Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer |
TW201902512A (zh) | 2016-06-02 | 2019-01-16 | 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 | 治療方法 |
RU2753585C2 (ru) | 2016-06-03 | 2021-08-18 | Регенерон Фармасьютикалз, Инк. | Животные, не являющиеся человеком, экспрессирующие экзогенную терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу |
CA3019904A1 (en) | 2016-06-17 | 2017-12-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-myostatin antibodies and methods of use |
JP7308034B2 (ja) | 2016-07-01 | 2023-07-13 | リゾルブ セラピューティクス, エルエルシー | 最適化二重ヌクレアーゼ融合物および方法 |
SG11201900026TA (en) | 2016-07-14 | 2019-01-30 | Bristol Myers Squibb Co | Antibodies against tim3 and uses thereof |
CN110087673A (zh) | 2016-07-19 | 2019-08-02 | 梯瓦制药澳大利亚股份有限公司 | 抗cd47联合治疗 |
MA45715A (fr) | 2016-07-25 | 2019-05-29 | Biogen Ma Inc | Anticorps anti-hspa5 (grp78) et leurs utilisations |
JP7148493B2 (ja) | 2016-08-01 | 2022-10-05 | ゾーマ (ユーエス) リミテッド ライアビリティ カンパニー | 副甲状腺ホルモン受容体1(pth1r)抗体およびその使用 |
CN110072887A (zh) * | 2016-08-02 | 2019-07-30 | 威特拉公司 | 工程化多肽及其应用 |
EA201990222A1 (ru) | 2016-08-05 | 2019-07-31 | МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи | Антитела к o2 и пути их применения |
CN116271014A (zh) | 2016-08-05 | 2023-06-23 | 中外制药株式会社 | 用于预防或治疗il-8相关疾病的组合物 |
CN116478166A (zh) | 2016-08-16 | 2023-07-25 | 百济神州(苏州)生物科技有限公司 | 一种化合物的晶型、其制备和用途 |
US10981976B2 (en) | 2016-08-31 | 2021-04-20 | University Of Rochester | Human monoclonal antibodies to human endogenous retrovirus K envelope (HERV-K) and use thereof |
AU2017321973A1 (en) | 2016-09-02 | 2019-03-07 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Composition and methods of treating B cell disorders |
SG10201607778XA (en) | 2016-09-16 | 2018-04-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use |
US10858428B2 (en) | 2016-09-28 | 2020-12-08 | Xoma (Us) Llc | Antibodies that bind interleukin-2 and uses thereof |
KR20190064636A (ko) | 2016-10-19 | 2019-06-10 | 메디뮨 엘엘씨 | 항-o1 항체 및 이의 용도 |
CA3037851A1 (en) | 2016-10-21 | 2018-04-26 | Innate Pharma | Treatment with anti-kir3dl2 agents |
TWI788307B (zh) | 2016-10-31 | 2023-01-01 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞 |
WO2018098363A2 (en) | 2016-11-23 | 2018-05-31 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Bispecific antibodies binding to coagulation factor ix and coagulation factor x |
BR112019011115A2 (pt) | 2016-12-02 | 2019-10-01 | Bioverativ Therapeutics Inc | métodos para tratar artropatia hemofílica usando fatores de coagulação quiméricos |
KR20190091292A (ko) | 2016-12-02 | 2019-08-05 | 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. | 응고 인자에 대한 면역 내성 유도 방법 |
CA3046082A1 (en) | 2016-12-07 | 2018-06-14 | Agenus Inc. | Antibodies and methods of use thereof |
JP6992068B2 (ja) | 2016-12-07 | 2022-02-03 | アジェナス インコーポレイテッド | 抗ctla-4抗体およびそれらの使用方法 |
CA3046387A1 (en) | 2016-12-21 | 2018-06-28 | David Jose Simon LAINE | Antibodies that specifically bind to human il-15 and uses thereof |
US20190322767A1 (en) | 2016-12-23 | 2019-10-24 | Innate Pharma | Heterodimeric antigen binding proteins |
WO2018129029A1 (en) | 2017-01-04 | 2018-07-12 | Immunogen, Inc. | Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof |
KR20190104048A (ko) | 2017-01-06 | 2019-09-05 | 이오반스 바이오테라퓨틱스, 인크. | 종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 (tnfrsf) 효능제를 사용한 종양 침윤 림프구 (til)의 확장 및 til과 tnfrsf 효능제의 치료 조합물 |
JP2020503351A (ja) | 2017-01-06 | 2020-01-30 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | カリウムチャネルアゴニストによる腫瘍浸潤リンパ球の増殖及びその治療的使用 |
MX2019009117A (es) | 2017-02-17 | 2019-09-13 | Bristol Myers Squibb Co | Anticuerpos anti alfa-sinucleina y usos de los mismos. |
EP3589662A4 (en) | 2017-02-28 | 2020-12-30 | Harpoon Therapeutics, Inc. | INDUCTIBLE MONOVALENT ANTIGBINDING PROTEIN |
NZ756323A (en) | 2017-02-28 | 2022-07-01 | Seagen Inc | Cysteine mutated antibodies for conjugation |
PL3600419T3 (pl) | 2017-03-20 | 2024-02-19 | Vaccinex, Inc. | Leczenie raka przeciwciałem wiążącym semaforynę-4d w kombinacji ze środkiem epigenetycznie modulującym |
EP3618865A4 (en) | 2017-05-05 | 2021-05-05 | Vaccinex, Inc. | 4D ANTI-SEMAPHORIN HUMAN ANTIBODY |
WO2019103857A1 (en) | 2017-11-22 | 2019-05-31 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of peripheral blood lymphocytes (pbls) from peripheral blood |
MX2019013202A (es) | 2017-05-10 | 2020-01-21 | Iovance Biotherapeutics Inc | Expansion de linfocitos de infiltracion de tumor a partir de tumores liquidos y usos terapeuticos de los mismos. |
US10543271B2 (en) | 2017-05-12 | 2020-01-28 | Harpoon Therapeutics, Inc. | Mesothelin binding proteins |
CN111094335B (zh) | 2017-05-15 | 2022-08-23 | 罗切斯特大学 | 广泛中和的抗流感单克隆抗体及其用途 |
CN116333129A (zh) | 2017-05-25 | 2023-06-27 | 百时美施贵宝公司 | 包含经修饰的重链恒定区的抗体 |
ES2923143T3 (es) | 2017-05-25 | 2022-09-23 | Bristol Myers Squibb Co | Anticuerpos monoclonales antagonistas contra CD40 y sus usos |
US20200148779A1 (en) * | 2017-05-25 | 2020-05-14 | Bristol-Myers Squibb Company | MODIFIED IgG1 Fc DOMAINS AND ANTI-CD40 DOMAIN ANTIBODY FUSIONS THEREWITH |
WO2018237148A1 (en) | 2017-06-21 | 2018-12-27 | Gilead Sciences, Inc. | MULTISPECIFIC ANTIBODIES TARGETING HIV GP120 AND CD3 |
WO2019011918A1 (en) | 2017-07-10 | 2019-01-17 | International - Drug - Development - Biotech | TREATMENT OF LYMPHOCYTE B MALIGNANCIES USING AFUCOSYLATED PRO-APOPTOTIC ANTI-CD19 ANTIBODIES IN COMBINATION WITH ANTI-CD20 ANTIBODIES OR CHEMOTHERAPEUTIC AGENTS |
EP3665289A1 (en) | 2017-08-09 | 2020-06-17 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Nucleic acid molecules and uses thereof |
JP2020531002A (ja) * | 2017-08-15 | 2020-11-05 | キンドレッド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド | 獣医学用igg fc変異体 |
SG11202001311VA (en) | 2017-08-22 | 2020-03-30 | Sanabio Llc | Soluble interferon receptors and uses thereof |
US20200216542A1 (en) | 2017-09-20 | 2020-07-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Dosage regimen for combination therapy using pd-1 axis binding antagonists and gpc3 targeting agent |
WO2019075090A1 (en) | 2017-10-10 | 2019-04-18 | Tilos Therapeutics, Inc. | ANTI-LAP ANTIBODIES AND USES THEREOF |
CN111712518A (zh) | 2017-11-17 | 2020-09-25 | 默沙东公司 | 对免疫球蛋白样转录物3(ilt3)具有特异性的抗体及其用途 |
EP3713959A1 (en) | 2017-11-21 | 2020-09-30 | Innate Pharma | Multispecific antigen binding proteins |
WO2019110823A1 (en) | 2017-12-08 | 2019-06-13 | Argenx Bvba | Use of fcrn antagonists for treatment of generalized myasthenia gravis |
CA3085765A1 (en) | 2017-12-15 | 2019-06-20 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Systems and methods for determining the beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof and beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof |
US11773171B2 (en) | 2017-12-19 | 2023-10-03 | Surrozen Operating, Inc. | WNT surrogate molecules and uses thereof |
US11746150B2 (en) | 2017-12-19 | 2023-09-05 | Surrozen Operating, Inc. | Anti-LRP5/6 antibodies and methods of use |
US11802154B2 (en) | 2017-12-20 | 2023-10-31 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Humanized anti-CD200 antibodies and uses thereof |
WO2019126133A1 (en) | 2017-12-20 | 2019-06-27 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Liquid formulations of anti-cd200 antibodies |
CN108218998A (zh) * | 2017-12-31 | 2018-06-29 | 武汉班科生物技术股份有限公司 | 一种突变型人源IgG的Fc片段及其制备方法与应用 |
BR112020013621A2 (pt) | 2018-01-12 | 2020-12-01 | Amgen Inc. | anticorpos contra pac1 e usos dos mesmos |
WO2019140229A1 (en) | 2018-01-12 | 2019-07-18 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against tim3 and uses thereof |
EP3740509A4 (en) | 2018-01-17 | 2022-06-22 | Apexigen, Inc. | ANTI-PD-L1 ANTIBODIES AND METHODS OF USE |
MX2020008152A (es) | 2018-02-01 | 2020-11-24 | Bioverativ Therapeutics Inc | Uso de vectores lentivirales que expresan el factor viii. |
WO2019160829A1 (en) | 2018-02-13 | 2019-08-22 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with adenosine a2a receptor antagonists and therapeutic combinations of tils and adenosine a2a receptor antagonists |
MX2020009296A (es) | 2018-03-15 | 2020-11-13 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos anti-virus del dengue que tienen reactividad cruzada con el virus zika y metodos de uso. |
CA3092589A1 (en) | 2018-03-21 | 2019-09-26 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Antibodies binding to vista at acidic ph |
WO2019183551A1 (en) | 2018-03-23 | 2019-09-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against mica and/or micb and uses thereof |
AU2019242586A1 (en) | 2018-03-26 | 2020-10-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Humanized rodents for testing therapeutic agents |
PE20210313A1 (es) | 2018-03-28 | 2021-02-12 | Bristol Myers Squibb Co | Proteinas de fusion interleucina-2/receptor alfa de interleucina-2 y metodos de uso |
US11155618B2 (en) | 2018-04-02 | 2021-10-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Anti-TREM-1 antibodies and uses thereof |
EA202092335A1 (ru) | 2018-04-02 | 2021-01-22 | Эмджен Инк. | Композиции на основе эренумаба и пути их применения |
CA3098374A1 (en) | 2018-04-25 | 2019-10-31 | Prometheus Biosciences, Inc. | Optimized anti-tl1a antibodies |
CA3096703A1 (en) | 2018-05-03 | 2019-11-07 | University Of Rochester | Anti-influenza neuraminidase monoclonal antibodies and uses thereof |
EP3793588A1 (en) | 2018-05-18 | 2021-03-24 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Methods of treating hemophilia a |
CN112566938A (zh) | 2018-06-03 | 2021-03-26 | 拉姆卡普生物测试有限公司 | 针对ceacam5和cd47的双特异性抗体 |
JP7457661B2 (ja) | 2018-06-04 | 2024-03-28 | バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッド | 低減したエフェクター機能を有する抗vla-4抗体 |
MA52783A (fr) * | 2018-06-05 | 2021-04-14 | Amgen Inc | Modulation de la phagocytose cellulaire dépendant de l'anticorps |
TW202019473A (zh) | 2018-07-02 | 2020-06-01 | 美商安進公司 | 抗steap1抗原結合蛋白 |
US11168130B2 (en) | 2018-07-03 | 2021-11-09 | Gilead Sciences, Inc. | Antibodies that target HIV GP120 and methods of use |
SG11202013240RA (en) | 2018-07-03 | 2021-01-28 | Bristol Myers Squibb Co | Fgf21 formulations |
WO2020007368A1 (zh) * | 2018-07-06 | 2020-01-09 | 北京天成新脉生物技术有限公司 | 低adcc/cdc功能性单抗及其制备方法与应用 |
EP3820904A2 (en) | 2018-07-09 | 2021-05-19 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Antibodies binding to ilt4 |
WO2020014306A1 (en) | 2018-07-10 | 2020-01-16 | Immunogen, Inc. | Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof |
KR20210031722A (ko) | 2018-07-11 | 2021-03-22 | 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. | 산성 pH에서 VISTA에 결합하는 항체 |
CN112703000A (zh) | 2018-07-23 | 2021-04-23 | 特雷维治疗股份有限公司 | 慢性咳嗽、呼吸急促和呼吸困难的治疗 |
CA3108799A1 (en) | 2018-08-09 | 2020-02-13 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Nucleic acid molecules and uses thereof for non-viral gene therapy |
MX2021002190A (es) | 2018-08-31 | 2021-05-14 | Regeneron Pharma | Estrategia de dosificacion que mitiga el sindrome de liberacion de citoquinas para los anticuerpos biespecificos cd3/cd20. |
TW202031273A (zh) | 2018-08-31 | 2020-09-01 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 抗pd-1抗體難治療性之非小細胞肺癌(nsclc)病患的治療 |
EP3623383A1 (en) | 2018-09-11 | 2020-03-18 | Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts | Improved bispecific flt3xcd3 antigen binding proteins |
EP3850010A1 (en) | 2018-09-11 | 2021-07-21 | Deutsches Krebsforschungszentrum, Stiftung des öffentlichen Rechts | Improved anti-flt3 antigen binding proteins |
JP7425049B2 (ja) | 2018-09-25 | 2024-01-30 | ハープーン セラピューティクス,インク. | Dll3結合タンパク質および使用方法 |
CN113164780A (zh) | 2018-10-10 | 2021-07-23 | 泰洛斯治疗公司 | 抗lap抗体变体及其用途 |
KR20210091212A (ko) | 2018-11-05 | 2021-07-21 | 이오반스 바이오테라퓨틱스, 인크. | 항-pd-1 항체에 불응성인 nsclc 환자의 치료 |
AR117091A1 (es) | 2018-11-19 | 2021-07-07 | Bristol Myers Squibb Co | Anticuerpos monoclonales antagonistas contra cd40 y sus usos |
WO2020112781A1 (en) | 2018-11-28 | 2020-06-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies comprising modified heavy constant regions |
CA3120793A1 (en) | 2018-11-30 | 2020-06-04 | Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. | Anti-cd40 antibody, antigen binding fragment and pharmaceutical use thereof |
US20220041719A1 (en) | 2018-12-05 | 2022-02-10 | Morphosys Ag | Multispecific antigen-binding molecules |
US20220098310A1 (en) | 2018-12-06 | 2022-03-31 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Anti-alk2 antibodies and uses thereof |
US20220064263A1 (en) * | 2018-12-27 | 2022-03-03 | Kindred Biosciences, Inc. | IGG FC Variants for Veterinary Use |
JP2022516635A (ja) | 2019-01-04 | 2022-03-01 | リゾルブ セラピューティクス, エルエルシー | ヌクレアーゼ融合タンパク質によるシェーグレン病の処置 |
CN113396162A (zh) | 2019-01-22 | 2021-09-14 | 百时美施贵宝公司 | 抗IL-7Rα亚基的抗体及其用途 |
WO2020152081A1 (en) | 2019-01-22 | 2020-07-30 | Innate Pharma | Treatment of t cell lymphoma |
CN110205296B (zh) * | 2019-01-29 | 2021-08-24 | 上海鑫湾生物科技有限公司 | 具有Fc突变体的抗体与效应细胞的组合、用途和制法 |
EP3917564A4 (en) | 2019-02-01 | 2022-12-21 | NovaRock Biotherapeutics, Ltd. | ANTI-CLAUDINE 18 ANTIBODIES AND THEIR METHODS OF USE |
EP3931310A1 (en) | 2019-03-01 | 2022-01-05 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof |
EP3943108A4 (en) | 2019-03-19 | 2023-01-04 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | ANTIGEN-BINDING MOLECULE CONTAINING AN ANTIGEN-BINDING DOMAIN WHOSE ANTIGEN-BINDING ACTIVITY IS ALTERED DEPENDING ON THE MTA, AND BANK FOR OBTAINING SUCH ANTIGEN-BINDING DOMAIN |
WO2020206063A1 (en) | 2019-04-03 | 2020-10-08 | Genzyme Corporation | Anti-alpha beta tcr binding polypeptides with reduced fragmentation |
MX2021012160A (es) | 2019-04-08 | 2022-01-06 | Biogen Ma Inc | Anticuerpos antiintegrina y usos de los mismos. |
GB2589049C (en) | 2019-04-11 | 2024-02-21 | argenx BV | Anti-IgE antibodies |
CN111909268B (zh) * | 2019-05-07 | 2022-04-19 | 北京天成新脉生物技术有限公司 | 低免疫原性低ADCC/CDC功能抗TNF-α人源化单克隆抗体TCX060及其应用 |
TW202231277A (zh) | 2019-05-21 | 2022-08-16 | 美商基利科學股份有限公司 | 鑑別對使用gp120 v3聚醣導向之抗體的治療敏感之hiv病患的方法 |
MA56102A (fr) | 2019-06-07 | 2022-04-13 | Argenx Bvba | Formulations pharmaceutique d'inhibiteurs de fcrn appropriées pour une administration par voie sous-cutanée |
EP3986918A1 (en) | 2019-06-18 | 2022-04-27 | Bayer Aktiengesellschaft | Adrenomedullin-analogues for long-term stabilization and their use |
BR112021026410A2 (pt) | 2019-07-01 | 2022-02-08 | Tonix Pharma Ltd | Anticorpos anti-cd154 e usos dos mesmos |
WO2021011678A1 (en) | 2019-07-15 | 2021-01-21 | Bristol-Myers Squibb Company | Anti-trem-1 antibodies and uses thereof |
EP3999541A1 (en) | 2019-07-15 | 2022-05-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against human trem-1 and uses thereof |
AU2020322474A1 (en) | 2019-08-01 | 2022-03-10 | Vaccinex,Inc. | Combined inhibition of semaphorin-4D and TGFβ and compositions therefor |
US20230192860A1 (en) | 2019-09-19 | 2023-06-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies Binding to Vista at Acidic pH |
EP4038182A1 (en) | 2019-09-30 | 2022-08-10 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Lentiviral vector formulations |
KR20220085796A (ko) | 2019-10-18 | 2022-06-22 | 포티 세븐, 인코포레이티드 | 골수이형성 증후군 및 급성 골수성 백혈병을 치료하기 위한 조합 치료 |
CA3158638A1 (en) | 2019-10-24 | 2021-04-29 | Prometheus Biosciences, Inc. | Humanized antibodies to tnf-like ligand 1a (tl1a) and uses thereof |
AU2020374947A1 (en) | 2019-10-31 | 2022-03-31 | Forty Seven, Inc. | Anti-CD47 and anti-CD20 based treatment of blood cancer |
CA3162748A1 (en) * | 2019-11-25 | 2021-06-03 | Akeso Biopharma, Inc. | Anti-pd-1-anti-vegfa bispecific antibody, pharmaceutical composition and use thereof |
EP3831849A1 (en) | 2019-12-02 | 2021-06-09 | LamKap Bio beta AG | Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47 |
CA3164129A1 (en) | 2019-12-20 | 2021-06-24 | Amgen Inc. | Mesothelin-targeted cd40 agonistic multispecific antibody constructs for the treatment of solid tumors |
AU2020412875A1 (en) | 2019-12-24 | 2022-06-23 | Carna Biosciences, Inc. | Diacylglycerol kinase modulating compounds |
CN111150841B (zh) * | 2019-12-31 | 2023-08-15 | 优锐生物医药科技(深圳)有限公司 | 一种主动免疫调控微粒及其制备方法和应用 |
CN111150842B (zh) * | 2019-12-31 | 2023-09-05 | 优锐生物医药科技(深圳)有限公司 | 一种用于中和胃泌素的主动免疫调控微粒及其制备方法和应用 |
EP4087875A1 (en) | 2020-01-08 | 2022-11-16 | Argenx BV | Methods for treating pemphigus disorders |
TW202140553A (zh) | 2020-01-13 | 2021-11-01 | 美商威特拉公司 | C5ar1抗體分子及其用途 |
CN113214406B (zh) * | 2020-01-21 | 2022-08-02 | 苏州普乐康医药科技有限公司 | 一种结合gpc3融合蛋白的制备方法及应用 |
JP2023514152A (ja) | 2020-02-06 | 2023-04-05 | ブリストル-マイヤーズ スクイブ カンパニー | Il-10およびその使用 |
JP2023516952A (ja) | 2020-02-28 | 2023-04-21 | ジェンザイム・コーポレーション | 最適化された薬物コンジュゲーションのための改変された結合ポリペプチド |
WO2021202235A1 (en) | 2020-04-01 | 2021-10-07 | University Of Rochester | Monoclonal antibodies against the hemagglutinin (ha) and neuraminidase (na) of influenza h3n2 viruses |
KR20220161337A (ko) | 2020-04-01 | 2022-12-06 | 쿄와 기린 가부시키가이샤 | 항체 조성물 |
WO2021207449A1 (en) | 2020-04-09 | 2021-10-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof |
SG11202112792WA (en) | 2020-04-28 | 2021-12-30 | Univ Rockefeller | Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies and methods of use thereof |
WO2021231732A1 (en) | 2020-05-15 | 2021-11-18 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies to garp |
CN111626425B (zh) * | 2020-05-21 | 2024-01-19 | 宿迁学院 | 面向二维近邻量子计算架构的量子寄存器分配方法和系统 |
AU2021297152A1 (en) | 2020-06-25 | 2023-02-02 | The Sydney Children's Hospitals Network | Use of semaphorin-4D binding molecules for the treatment of Rett syndrome |
WO2022006153A1 (en) | 2020-06-29 | 2022-01-06 | Resolve Therapeutics, Llc | Treatment of sjogren's syndrome with nuclease fusion proteins |
MX2023002001A (es) | 2020-08-18 | 2023-03-21 | Cephalon Llc | Anticuerpos anti-par-2 y metodos de uso de los mismos. |
JP2023546359A (ja) | 2020-10-06 | 2023-11-02 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | 腫瘍浸潤リンパ球療法によるnsclc患者の治療 |
WO2022076606A1 (en) | 2020-10-06 | 2022-04-14 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
KR20230113312A (ko) * | 2020-11-01 | 2023-07-28 | 프로벤션 바이오, 인코포레이티드 | 루푸스 치료 방법 및 조성물 |
US11919945B2 (en) | 2020-11-04 | 2024-03-05 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-SARS-CoV-2 antibodies |
US20220144923A1 (en) | 2020-11-11 | 2022-05-12 | Gilead Sciences, Inc. | METHODS OF IDENTIFYING HIV PATIENTS SENSITIVE TO THERAPY WITH gp120 CD4 BINDING SITE-DIRECTED ANTIBODIES |
WO2022125941A1 (en) | 2020-12-11 | 2022-06-16 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with braf inhibitors and/or mek inhibitors |
JP2024500403A (ja) | 2020-12-17 | 2024-01-09 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | 腫瘍浸潤リンパ球によるがんの治療 |
AU2021401302A1 (en) | 2020-12-17 | 2023-07-06 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with ctla-4 and pd-1 inhibitors |
JP2024501809A (ja) | 2020-12-18 | 2024-01-16 | ランカプ バイオ ベータ リミテッド | Ceacam5およびcd47に対する二重特異性抗体 |
TW202242085A (zh) | 2020-12-31 | 2022-11-01 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 供自動生產腫瘤浸潤淋巴球的裝置和方法 |
CN116963750A (zh) | 2021-01-06 | 2023-10-27 | 通尼克斯制药有限公司 | 用经修饰的抗-cd154抗体诱导免疫耐受的方法 |
EP4277931A1 (en) * | 2021-01-13 | 2023-11-22 | Visterra, Inc. | Humanized complement 5a receptor 1 antibodies and methods of use thereof |
EP4277926A1 (en) | 2021-01-15 | 2023-11-22 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies |
CA3206549A1 (en) | 2021-01-29 | 2022-08-04 | Frederick G. Vogt | Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy |
JP2024509184A (ja) | 2021-03-05 | 2024-02-29 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | 腫瘍保存及び細胞培養組成物 |
EP4308691A1 (en) | 2021-03-19 | 2024-01-24 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods for tumor infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd69 selection and gene knockout in tils |
AR125199A1 (es) | 2021-03-23 | 2023-06-21 | Iovance Biotherapeutics Inc | Edición génica cish de linfocitos infiltrantes de tumores y usos de los mismos en inmunoterapia |
EP4314253A2 (en) | 2021-03-25 | 2024-02-07 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods and compositions for t-cell coculture potency assays and use with cell therapy products |
AU2022246048A1 (en) | 2021-03-26 | 2023-08-31 | Innate Pharma | Multispecific proteins comprising an nkp46-binding site, a cancer antgienge binding site fused to a cytokine for nk cell engaging |
WO2022212876A1 (en) | 2021-04-02 | 2022-10-06 | The Regents Of The University Of California | Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof |
WO2022225981A2 (en) | 2021-04-19 | 2022-10-27 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies |
EP4326271A1 (en) | 2021-04-23 | 2024-02-28 | F. Hoffmann-La Roche AG | Prevention or mitigation of nk cell engaging agent-related adverse effects |
EP4334343A2 (en) | 2021-05-06 | 2024-03-13 | The Rockefeller University | Neutralizing anti-sars- cov-2 antibodies and methods of use thereof |
EP4335868A1 (en) | 2021-05-07 | 2024-03-13 | Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. | Fc mutant with altered binding to fc receptor |
WO2022245754A1 (en) | 2021-05-17 | 2022-11-24 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Pd-1 gene-edited tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy |
CN117529504A (zh) | 2021-06-09 | 2024-02-06 | 先天制药公司 | 结合至cd20、nkp46、cd16并缀合至il-2的多特异性抗体 |
WO2022258678A1 (en) | 2021-06-09 | 2022-12-15 | Innate Pharma | Multispecific proteins binding to nkp30, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a |
AU2022288123A1 (en) | 2021-06-09 | 2023-11-30 | Innate Pharma | Multispecific proteins binding to nkp46, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a |
WO2022258691A1 (en) | 2021-06-09 | 2022-12-15 | Innate Pharma | Multispecific proteins binding to nkg2d, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a |
EP4351588A1 (en) | 2021-06-11 | 2024-04-17 | Sage Therapeutics, Inc. | Neuroactive steroid for the treatment of alzheimer's disease |
CN117396478A (zh) | 2021-06-23 | 2024-01-12 | 吉利德科学公司 | 二酰基甘油激酶调节化合物 |
EP4359411A1 (en) | 2021-06-23 | 2024-05-01 | Gilead Sciences, Inc. | Diacylglyercol kinase modulating compounds |
IL309378A (en) | 2021-06-23 | 2024-02-01 | Gilead Sciences Inc | DIACYLGLYERCOL KINASE MODULATING COMPOUNDS |
WO2022271684A1 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-29 | Gilead Sciences, Inc. | Diacylglyercol kinase modulating compounds |
WO2023004074A2 (en) | 2021-07-22 | 2023-01-26 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Method for cryopreservation of solid tumor fragments |
CA3226942A1 (en) | 2021-07-28 | 2023-02-02 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with kras inhibitors |
US20230181671A1 (en) | 2021-09-02 | 2023-06-15 | Djs Antibodies Ltd | Polypeptides |
TW202328439A (zh) | 2021-09-09 | 2023-07-16 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 使用pd-1 talen基因減弱生成til產物之方法 |
KR20230041211A (ko) * | 2021-09-17 | 2023-03-24 | 고려대학교 산학협력단 | 다양한 Fc 감마 수용체들과의 결합력이 증대된 Fc 변이체 |
WO2023049862A1 (en) | 2021-09-24 | 2023-03-30 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion processes and agents for tumor infiltrating lymphocytes |
WO2023048726A1 (en) | 2021-09-27 | 2023-03-30 | Vaccinex, Inc. | Predictive outcome profiling for use of an anti-semaphorin-4d binding molecule to treat neurodegenerative disorders |
TW202331735A (zh) | 2021-10-27 | 2023-08-01 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 協調用於患者特異性免疫療法之細胞之製造的系統及方法 |
WO2023072159A1 (en) | 2021-10-27 | 2023-05-04 | Virtuoso Binco, Inc. | Multispecific antibodies for treating cd47-associated diseases |
WO2023086803A1 (en) | 2021-11-10 | 2023-05-19 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes |
WO2023139107A1 (en) | 2022-01-18 | 2023-07-27 | argenx BV | Galectin-10 antibodies |
WO2023147399A1 (en) | 2022-01-27 | 2023-08-03 | The Rockefeller University | Broadly neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies targeting the n-terminal domain of the spike protein and methods of use thereof |
WO2023147486A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Tumor infiltrating lymphocytes engineered to express payloads |
WO2023147488A1 (en) | 2022-01-28 | 2023-08-03 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods |
CN114702593B (zh) * | 2022-03-11 | 2023-12-08 | 苏州思萃免疫技术研究所有限公司 | 一种抗folr1/vegf的全人双特异性抗体及其筛选方法和应用 |
WO2023196877A1 (en) | 2022-04-06 | 2023-10-12 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
WO2023201369A1 (en) | 2022-04-15 | 2023-10-19 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Til expansion processes using specific cytokine combinations and/or akti treatment |
WO2023220608A1 (en) | 2022-05-10 | 2023-11-16 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with an il-15r agonist |
WO2023242372A1 (en) | 2022-06-15 | 2023-12-21 | argenx BV | Fcrn/hsa binding molecules and methods of use |
WO2023242351A1 (en) | 2022-06-16 | 2023-12-21 | Lamkap Bio Beta Ag | Combination therapy of bispecific antibodies against ceacam5 and cd47 and bispecific antibodies against ceacam5 and cd3 |
KR20240003757A (ko) * | 2022-06-29 | 2024-01-09 | 고려대학교 산학협력단 | FcγRIIa 결합 선택성이 향상된 인간 Fc 변이체 |
WO2024011114A1 (en) | 2022-07-06 | 2024-01-11 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Devices and processes for automated production of tumor infiltrating lymphocytes |
WO2024020579A1 (en) | 2022-07-22 | 2024-01-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies binding to human pad4 and uses thereof |
WO2024026395A1 (en) | 2022-07-27 | 2024-02-01 | Cephalon Llc | Anti-tl1a antibodies for the treatment of ulcerative colitis and crohn's disease |
WO2024026386A1 (en) | 2022-07-27 | 2024-02-01 | Cephalon Llc | Anti-tl1a antibody formulations |
WO2024030758A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies |
WO2024062074A1 (en) | 2022-09-21 | 2024-03-28 | Sanofi Biotechnology | Humanized anti-il-1r3 antibody and methods of use |
Family Cites Families (251)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2320801A (en) | 1940-10-03 | 1943-06-01 | Simons Leon | Method of coating metal |
US2320804A (en) | 1942-11-19 | 1943-06-01 | Ralph F Smart | Shade roller bracket |
US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
US3917002A (en) | 1971-10-15 | 1975-11-04 | Massey Ferguson Inc | Draft control linkage for a tractor |
CU22545A1 (es) | 1994-11-18 | 1999-03-31 | Centro Inmunologia Molecular | Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico |
WO1981001145A1 (en) | 1979-10-18 | 1981-04-30 | Univ Illinois | Hydrolytic enzyme-activatible pro-drugs |
US4485045A (en) | 1981-07-06 | 1984-11-27 | Research Corporation | Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes |
GB8308235D0 (en) * | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4544545A (en) | 1983-06-20 | 1985-10-01 | Trustees University Of Massachusetts | Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting |
US4753894A (en) | 1984-02-08 | 1988-06-28 | Cetus Corporation | Monoclonal anti-human breast cancer antibodies |
US4943533A (en) | 1984-03-01 | 1990-07-24 | The Regents Of The University Of California | Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
GB2183661B (en) | 1985-03-30 | 1989-06-28 | Marc Ballivet | Method for obtaining dna, rna, peptides, polypeptides or proteins by means of a dna recombinant technique |
US6492107B1 (en) | 1986-11-20 | 2002-12-10 | Stuart Kauffman | Process for obtaining DNA, RNA, peptides, polypeptides, or protein, by recombinant DNA technique |
US6548640B1 (en) * | 1986-03-27 | 2003-04-15 | Btg International Limited | Altered antibodies |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
EP0268636B1 (en) | 1986-05-29 | 1997-01-08 | Ilexus Pty Ltd | Polynucleotide sequences encoding the human FC RECEPTOR FOR IMMUNOGLOBULIN |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
GB8705477D0 (en) | 1987-03-09 | 1987-04-15 | Carlton Med Prod | Drug delivery systems |
WO1988007089A1 (en) | 1987-03-18 | 1988-09-22 | Medical Research Council | Altered antibodies |
US4975278A (en) | 1988-02-26 | 1990-12-04 | Bristol-Myers Company | Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells |
PT88641B (pt) | 1987-10-02 | 1993-04-30 | Genentech Inc | Metodo para a preparacao de uma variante de adesao |
WO1989006692A1 (en) | 1988-01-12 | 1989-07-27 | Genentech, Inc. | Method of treating tumor cells by inhibiting growth factor receptor function |
US5567584A (en) | 1988-01-22 | 1996-10-22 | Zymogenetics, Inc. | Methods of using biologically active dimerized polypeptide fusions to detect PDGF |
US6018026A (en) | 1988-01-22 | 2000-01-25 | Zymogenetics, Inc. | Biologically active dimerized and multimerized polypeptide fusions |
US5576184A (en) | 1988-09-06 | 1996-11-19 | Xoma Corporation | Production of chimeric mouse-human antibodies with specificity to human tumor antigens |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US20030229208A1 (en) | 1988-12-28 | 2003-12-11 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
JP3051411B2 (ja) * | 1989-03-14 | 2000-06-12 | 持田製薬株式会社 | 新規dnaならびにそれを含有する発現プラスミド |
US5266491A (en) | 1989-03-14 | 1993-11-30 | Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. | DNA fragment and expression plasmid containing the DNA fragment |
US5013556A (en) | 1989-10-20 | 1991-05-07 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US5208020A (en) | 1989-10-25 | 1993-05-04 | Immunogen Inc. | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
AU648056B2 (en) | 1989-11-07 | 1994-04-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Oligomeric immunoglobulins |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
WO1991019515A1 (en) | 1990-06-21 | 1991-12-26 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Oligomeric immunoglobulin constant domain mutant with enhanced complement-mediated cytolytic activity |
US5198342A (en) * | 1990-07-05 | 1993-03-30 | Immunex Corporation | DNA encoding IgA Fc receptors |
CA2090317A1 (en) | 1990-08-31 | 1992-03-01 | Edith A. Wolff | Homoconjugated immunoglobulins |
GB9022545D0 (en) * | 1990-10-17 | 1990-11-28 | Wellcome Found | Culture medium |
EP1362868A3 (en) | 1991-03-06 | 2004-02-11 | MERCK PATENT GmbH | Humanized and chimeric monoclonal antibodies that bind epidermal growth factor receptor (EGF-R) |
GB9105245D0 (en) | 1991-03-12 | 1991-04-24 | Lynxvale Ltd | Binding molecules |
US6797492B2 (en) * | 1991-05-17 | 2004-09-28 | Merck & Co., Inc. | Method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains |
WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
DE122004000008I1 (de) * | 1991-06-14 | 2005-06-09 | Genentech Inc | Humanisierter Heregulin Antikörper. |
JPH07503124A (ja) | 1991-06-14 | 1995-04-06 | ゾーマ・コーポレーション | 微生物によって生産される抗体断片とそれらの複合体 |
US5264586A (en) | 1991-07-17 | 1993-11-23 | The Scripps Research Institute | Analogs of calicheamicin gamma1I, method of making and using the same |
JP3951062B2 (ja) * | 1991-09-19 | 2007-08-01 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 少なくとも遊離のチオールとして存在するシステインを有する抗体フラグメントの大腸菌での発現、2官能性F(ab’)2抗体の産生のための使用 |
US5623053A (en) * | 1992-01-10 | 1997-04-22 | California Institute Of Technology | Soluble mammal-derived Fc receptor which binds at a pH ranging from about 5.5 to 6.5 and releases at a pH ranging from about 7.5 to 8.5 |
US5714350A (en) * | 1992-03-09 | 1998-02-03 | Protein Design Labs, Inc. | Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region |
ZA932522B (en) | 1992-04-10 | 1993-12-20 | Res Dev Foundation | Immunotoxins directed against c-erbB-2(HER/neu) related surface antigens |
CA2118508A1 (en) | 1992-04-24 | 1993-11-11 | Elizabeth S. Ward | Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells |
US5736137A (en) | 1992-11-13 | 1998-04-07 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma |
PT752248E (pt) | 1992-11-13 | 2001-01-31 | Idec Pharma Corp | Aplicacao terapeutica de anticorpos quimericos e marcados radioactivamente contra antigenios de diferenciacao restrita de linfocitos b humanos para o tratamento do linfoma de celulas b |
US5885573A (en) * | 1993-06-01 | 1999-03-23 | Arch Development Corporation | Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies |
US20030108548A1 (en) * | 1993-06-01 | 2003-06-12 | Bluestone Jeffrey A. | Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies |
CA2163345A1 (en) * | 1993-06-16 | 1994-12-22 | Susan Adrienne Morgan | Antibodies |
GB9316989D0 (en) | 1993-08-16 | 1993-09-29 | Lynxvale Ltd | Binding molecules |
GB9401182D0 (en) | 1994-01-21 | 1994-03-16 | Inst Of Cancer The Research | Antibodies to EGF receptor and their antitumour effect |
US5605793A (en) | 1994-02-17 | 1997-02-25 | Affymax Technologies N.V. | Methods for in vitro recombination |
US5837458A (en) | 1994-02-17 | 1998-11-17 | Maxygen, Inc. | Methods and compositions for cellular and metabolic engineering |
ATE240395T1 (de) | 1994-03-29 | 2003-05-15 | Celltech Therapeutics Ltd | Antikörper gegen e-selektin |
US5773001A (en) | 1994-06-03 | 1998-06-30 | American Cyanamid Company | Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis |
JP3794701B2 (ja) | 1994-07-21 | 2006-07-12 | アクゾ ノーベル ナムローゼ フェンノートシャップ | 環状ケトン過酸化物処方 |
US5541087A (en) * | 1994-09-14 | 1996-07-30 | Fuji Immunopharmaceuticals Corporation | Expression and export technology of proteins as immunofusins |
US5804396A (en) | 1994-10-12 | 1998-09-08 | Sugen, Inc. | Assay for agents active in proliferative disorders |
US6214388B1 (en) | 1994-11-09 | 2001-04-10 | The Regents Of The University Of California | Immunoliposomes that optimize internalization into target cells |
ATE238668T1 (de) | 1995-01-17 | 2003-05-15 | Brigham & Womens Hospital | Rezeptorspezifischer transepithelialer transport von immunogenen |
US6086875A (en) * | 1995-01-17 | 2000-07-11 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Receptor specific transepithelial transport of immunogens |
US6485726B1 (en) | 1995-01-17 | 2002-11-26 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Receptor specific transepithelial transport of therapeutics |
US6030613A (en) * | 1995-01-17 | 2000-02-29 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Receptor specific transepithelial transport of therapeutics |
US5731168A (en) * | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
WO1996030347A1 (en) | 1995-03-30 | 1996-10-03 | Pfizer Inc. | Quinazoline derivatives |
US6121022A (en) * | 1995-04-14 | 2000-09-19 | Genentech, Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
GB9508565D0 (en) | 1995-04-27 | 1995-06-14 | Zeneca Ltd | Quiazoline derivative |
GB9508538D0 (en) | 1995-04-27 | 1995-06-14 | Zeneca Ltd | Quinazoline derivatives |
US6444789B1 (en) * | 1995-05-03 | 2002-09-03 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | CD16-II variants |
US5712374A (en) | 1995-06-07 | 1998-01-27 | American Cyanamid Company | Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
US6365161B1 (en) * | 1995-06-07 | 2002-04-02 | Medarex, Inc. | Therapeutic compounds comprised of anti-FC receptor binding agents |
AU6267896A (en) | 1995-06-07 | 1996-12-30 | Imclone Systems Incorporated | Antibody and antibody fragments for inhibiting the growth oftumors |
US5714586A (en) | 1995-06-07 | 1998-02-03 | American Cyanamid Company | Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
US6171820B1 (en) | 1995-12-07 | 2001-01-09 | Diversa Corporation | Saturation mutagenesis in directed evolution |
US6361974B1 (en) | 1995-12-07 | 2002-03-26 | Diversa Corporation | Exonuclease-mediated nucleic acid reassembly in directed evolution |
US6352842B1 (en) | 1995-12-07 | 2002-03-05 | Diversa Corporation | Exonucease-mediated gene assembly in directed evolution |
US5939250A (en) | 1995-12-07 | 1999-08-17 | Diversa Corporation | Production of enzymes having desired activities by mutagenesis |
US6358709B1 (en) | 1995-12-07 | 2002-03-19 | Diversa Corporation | End selection in directed evolution |
US5965408A (en) | 1996-07-09 | 1999-10-12 | Diversa Corporation | Method of DNA reassembly by interrupting synthesis |
US6750334B1 (en) | 1996-02-02 | 2004-06-15 | Repligen Corporation | CTLA4-immunoglobulin fusion proteins having modified effector functions and uses therefor |
CA2249195A1 (en) | 1996-03-18 | 1997-09-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobin-like domains with increased half lives |
ATE267610T1 (de) | 1996-03-20 | 2004-06-15 | Immunomedics Inc | Glykosylierte igg antikörper |
BR9708640B1 (pt) | 1996-04-12 | 2013-06-11 | inibidores irreversÍveis de tirosina-cinases e composiÇço farmacÊutica compreendendo os mesmo. | |
US5834597A (en) | 1996-05-20 | 1998-11-10 | Protein Design Labs, Inc. | Mutated nonactivating IgG2 domains and anti CD3 antibodies incorporating the same |
WO1998002462A1 (en) | 1996-07-16 | 1998-01-22 | Morphosys Gesellschaft Für Proteinoptimierung Mbh | Immunoglobulin superfamily domains and fragments with increased solubility |
ES2300113T3 (es) | 1996-08-02 | 2008-06-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Un procedimiento para inhibir toxicidad inducida por inmunoglobulinas que resulta del uso de inmunoglobulinas en terapia y diagnostico in vivo. |
GB9616737D0 (en) | 1996-08-09 | 1996-09-25 | Univ Dundee | Security in a network environment |
WO1998023289A1 (en) | 1996-11-27 | 1998-06-04 | The General Hospital Corporation | MODULATION OF IgG BINDING TO FcRn |
WO1998031806A2 (en) | 1997-01-21 | 1998-07-23 | Human Genome Sciences, Inc. | Fc RECEPTORS AND POLYPEPTIDES |
US6277375B1 (en) * | 1997-03-03 | 2001-08-21 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Immunoglobulin-like domains with increased half-lives |
UA73073C2 (uk) | 1997-04-03 | 2005-06-15 | Уайт Холдінгз Корпорейшн | Заміщені 3-ціанохіноліни, спосіб їх одержання та фармацевтична композиція |
US6188965B1 (en) * | 1997-04-11 | 2001-02-13 | California Institute Of Technology | Apparatus and method for automated protein design |
EP1255209A3 (en) | 1997-04-11 | 2009-02-11 | California Institute Of Technology | Apparatus and method for automated protein design |
US20020062010A1 (en) * | 1997-05-02 | 2002-05-23 | Genentech, Inc. | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
US6235883B1 (en) | 1997-05-05 | 2001-05-22 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
US20040191256A1 (en) * | 1997-06-24 | 2004-09-30 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for galactosylated glycoproteins |
ZA986732B (en) | 1997-07-29 | 1999-02-02 | Warner Lambert Co | Irreversible inhibitiors of tyrosine kinases |
ZA986729B (en) | 1997-07-29 | 1999-02-02 | Warner Lambert Co | Irreversible inhibitors of tyrosine kinases |
TW436485B (en) | 1997-08-01 | 2001-05-28 | American Cyanamid Co | Substituted quinazoline derivatives |
US20030105294A1 (en) * | 1998-02-25 | 2003-06-05 | Stephen Gillies | Enhancing the circulating half life of antibody-based fusion proteins |
US6528624B1 (en) * | 1998-04-02 | 2003-03-04 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants |
CA2323757C (en) | 1998-04-02 | 2011-08-02 | Genentech, Inc. | Antibody variants and fragments thereof |
US6194551B1 (en) * | 1998-04-02 | 2001-02-27 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants |
US6242195B1 (en) * | 1998-04-02 | 2001-06-05 | Genentech, Inc. | Methods for determining binding of an analyte to a receptor |
US6284536B1 (en) * | 1998-04-20 | 2001-09-04 | The Regents Of The University Of California | Modified immunoglobin molecules and methods for use thereof |
EP2261229A3 (en) | 1998-04-20 | 2011-03-23 | GlycArt Biotechnology AG | Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity |
WO1999056777A1 (en) * | 1998-05-06 | 1999-11-11 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | REVERSAL OF PROINFLAMMATORY RESPONSE BY LIGATING THE MACROPHAGE FcηRI RECEPTOR |
GB9809951D0 (en) | 1998-05-08 | 1998-07-08 | Univ Cambridge Tech | Binding molecules |
US20020142374A1 (en) * | 1998-08-17 | 2002-10-03 | Michael Gallo | Generation of modified molecules with increased serum half-lives |
US6306926B1 (en) * | 1998-10-07 | 2001-10-23 | 3M Innovative Properties Company | Radiopaque cationically polymerizable compositions comprising a radiopacifying filler, and method for polymerizing same |
US6403312B1 (en) * | 1998-10-16 | 2002-06-11 | Xencor | Protein design automatic for protein libraries |
US7315786B2 (en) * | 1998-10-16 | 2008-01-01 | Xencor | Protein design automation for protein libraries |
US20030049654A1 (en) * | 1998-10-16 | 2003-03-13 | Xencor | Protein design automation for protein libraries |
CA2347214A1 (en) | 1998-10-16 | 2000-04-27 | Klaus M. Fiebig | Protein design automation for protein libraries |
US20020048772A1 (en) * | 2000-02-10 | 2002-04-25 | Dahiyat Bassil I. | Protein design automation for protein libraries |
US6660843B1 (en) | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
US6737056B1 (en) * | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
NZ539776A (en) | 1999-01-15 | 2006-12-22 | Genentech Inc | Polypeptide variants with altered effector function |
US6376246B1 (en) | 1999-02-05 | 2002-04-23 | Maxygen, Inc. | Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination |
EP1072010B1 (en) | 1999-01-19 | 2010-04-21 | Maxygen, Inc. | Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination |
CA2364997A1 (en) | 1999-03-05 | 2000-09-08 | Maxygen, Inc. | Encryption of traits using split gene sequences |
EP2270148A3 (en) | 1999-04-09 | 2011-06-08 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Method for controlling the activity of immunologically functional molecule |
US6638515B2 (en) | 1999-09-07 | 2003-10-28 | Walter Schubert | Method of blocking cytotoxic activity in patients with amyotrophic lateral sclerosis using protein V |
GB9922283D0 (en) | 1999-09-22 | 1999-11-17 | Kennedy Rheumatology Inst | Adenoviral vectors |
AU7950400A (en) | 1999-10-19 | 2001-04-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. | Process for producing polypeptide |
AU8008100A (en) | 1999-10-19 | 2001-04-30 | Minergy Corp. | Processing of contaminated river sediment in a glass melting furnace |
ES2568625T3 (es) | 1999-11-29 | 2016-05-03 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Aislamiento de cinco genes novedosos que codifican nuevos melanomas de tipo receptor de Fc implicados en la patogénesis del linfoma/melanoma |
DE19958134C2 (de) | 1999-12-02 | 2003-05-15 | Koenig & Bauer Ag | Saugwalze |
AU1663000A (en) | 1999-12-10 | 2000-05-08 | Wcl Wireless Commerce Ltd Oy | Method and system for performing electronic auctions |
EP1458211A1 (en) | 1999-12-27 | 2004-09-15 | Mitsubishi Denki Kabushiki Kaisha | Radio communication device |
NZ520472A (en) | 2000-02-03 | 2004-03-26 | Lennart Hammarstrom | Ruminant MHC class I-like Fc receptors |
JP2003521933A (ja) | 2000-02-10 | 2003-07-22 | ゼンコー | タンパク質ライブラリーに関するタンパク質設計オートメーション |
YU63302A (sh) | 2000-02-25 | 2005-09-19 | The Government Of The Un.Stat. | Anti-egfrv iii scfvs sa pojačanom citotoksičnošću i povećanim prinosom, imunotoksini na bazi istog i metodi za upotrebu na bazi istog |
WO2001070947A2 (en) | 2000-03-20 | 2001-09-27 | Maxygen, Inc. | Method for generating recombinant dna molecules in complex mixtures |
ES2637801T3 (es) * | 2000-04-11 | 2017-10-17 | Genentech, Inc. | Anticuerpos multivalentes y usos de los mismos |
US7416726B2 (en) | 2000-04-13 | 2008-08-26 | The Rockefeller University | Enhancement of antibody-mediated immune responses |
BR0110927A (pt) | 2000-05-19 | 2003-03-11 | Scancell Ltd | Anticorpo, ácido nucléico, vetor, célula, método de fabricar um anticorpo, composição farmacêutica, uso de um anticorpo ou de um ácido nucleico, e, método para o tratamento ou profilaxia do câncer |
US6358733B1 (en) * | 2000-05-19 | 2002-03-19 | Apolife, Inc. | Expression of heterologous multi-domain proteins in yeast |
AU6625701A (en) | 2000-06-28 | 2002-01-08 | Bakulesh, Mafatlal Khamar | Agent for reversal of drug resistance in mycobacterium tuberculosis |
WO2002004853A1 (fr) | 2000-07-07 | 2002-01-17 | Sugimoto, Motoichi | Dispositif de production d'energie infinie |
FR2811735B1 (fr) | 2000-07-11 | 2002-09-20 | Asco Joucomatic | Vanne commande pneumatique |
WO2002006469A2 (en) | 2000-07-18 | 2002-01-24 | Enchira Biotechnology Corporation | Methods of ligation mediated chimeragenesis utilizing populations of scaffold and donor nucleic acids |
AU2001281714A1 (en) | 2000-07-19 | 2002-01-30 | Siemens Aktiengesellschaft | Method for providing software in radio-based cellular communications networks, and a communications network for implementing said method |
US6724920B1 (en) | 2000-07-21 | 2004-04-20 | Trw Inc. | Application of human facial features recognition to automobile safety |
AU2001291175A1 (en) | 2000-09-21 | 2002-04-02 | Md Online Inc. | Medical image processing systems |
CA2424977C (en) | 2000-10-06 | 2008-03-18 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for purifying antibody |
ES2639222T5 (es) | 2000-10-06 | 2023-11-24 | Kyowa Kirin Co Ltd | Células que producen unas composiciones de anticuerpo |
US7064191B2 (en) | 2000-10-06 | 2006-06-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for purifying antibody |
US6946292B2 (en) * | 2000-10-06 | 2005-09-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity |
US7465790B2 (en) | 2000-10-09 | 2008-12-16 | Isis Innovation, Inc. | Therapeutic antibodies |
WO2002034790A1 (en) | 2000-10-20 | 2002-05-02 | Idec Pharmaceuticals Corporation | Variant igg3 rituxan r and therapeutic use thereof |
US6992234B2 (en) * | 2000-11-06 | 2006-01-31 | The Jackson Laboratory | FcRn-based therapeutics for the treatment of auto-immune disorders |
US7235643B2 (en) | 2000-11-07 | 2007-06-26 | Morphotek, Inc. | Antibodies and methods for generating genetically altered antibodies with high affinity |
GB0029407D0 (en) | 2000-12-01 | 2001-01-17 | Affitech As | Product |
US20040253242A1 (en) | 2000-12-05 | 2004-12-16 | Bowdish Katherine S. | Rationally designed antibodies |
EP2354149B1 (en) | 2000-12-12 | 2017-08-30 | MedImmune, LLC | Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof |
CA2430182C (en) | 2000-12-14 | 2011-01-25 | Genentech, Inc. | Prokaryotically produced antibodies and uses thereof |
US6979556B2 (en) * | 2000-12-14 | 2005-12-27 | Genentech, Inc. | Separate-cistron contructs for secretion of aglycosylated antibodies from prokaryotes |
US20030133939A1 (en) * | 2001-01-17 | 2003-07-17 | Genecraft, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
US7754208B2 (en) * | 2001-01-17 | 2010-07-13 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
WO2002061093A1 (en) | 2001-01-30 | 2002-08-08 | Degussa Ag | Nucleotide sequences which code for the otsa gene of c. glutamicum |
MXPA03007323A (es) | 2001-02-19 | 2003-12-12 | Merck Patent Gmbh | Proteinas artificiales con inmunogenicidad reducida. |
WO2002079415A2 (en) | 2001-03-30 | 2002-10-10 | Lexigen Pharmaceuticals Corp. | Reducing the immunogenicity of fusion proteins |
GB0118662D0 (en) * | 2001-07-31 | 2001-09-19 | Univ Southampton | Binding agents |
CN1555411A (zh) * | 2001-08-03 | 2004-12-15 | ���迨�����\���ɷݹ�˾ | 抗体-依赖性细胞毒性增大的抗体糖基化变体 |
EP1432980A4 (en) * | 2001-08-10 | 2006-04-12 | Xencor Inc | AUTOMATED PROTEIN CONSTRUCTION FOR PROTEIN LIBRARIES |
US7255858B2 (en) | 2001-08-10 | 2007-08-14 | University Of Virginia Patent Foundation | Enhancing the efficacy of immunotherapies by supplementing with complement |
HUP0600342A3 (en) * | 2001-10-25 | 2011-03-28 | Genentech Inc | Glycoprotein compositions |
US6911321B2 (en) * | 2001-12-19 | 2005-06-28 | Genentech, Inc. | Non-human primate Fc receptors and methods of use |
US20040093621A1 (en) * | 2001-12-25 | 2004-05-13 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd | Antibody composition which specifically binds to CD20 |
KR100668538B1 (ko) | 2002-01-09 | 2007-01-16 | 메다렉스, 인코포레이티드 | Cd30에 대한 인간 모노클로날 항체 |
AU2003216250A1 (en) | 2002-02-11 | 2003-09-04 | Genentech, Inc. | Antibody variants with faster antigen association rates |
US20040002587A1 (en) * | 2002-02-20 | 2004-01-01 | Watkins Jeffry D. | Fc region variants |
US8188231B2 (en) | 2002-09-27 | 2012-05-29 | Xencor, Inc. | Optimized FC variants |
AU2003217912A1 (en) * | 2002-03-01 | 2003-09-16 | Xencor | Antibody optimization |
US7662925B2 (en) * | 2002-03-01 | 2010-02-16 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants and methods for their generation |
US7317091B2 (en) | 2002-03-01 | 2008-01-08 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
US20040132101A1 (en) * | 2002-09-27 | 2004-07-08 | Xencor | Optimized Fc variants and methods for their generation |
US7657380B2 (en) | 2003-12-04 | 2010-02-02 | Xencor, Inc. | Methods of generating variant antibodies with increased host string content |
CN101143221A (zh) | 2002-03-15 | 2008-03-19 | 布赖汉姆妇女医院 | 适合治疗剂全身性递送的中央气道给药 |
US7317087B2 (en) | 2002-03-25 | 2008-01-08 | The Uab Research Foundation | Members of the FC receptor homolog gene family (FCRH1-3, 6), related reagents, and uses thereof |
CA2481658A1 (en) | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Method of enhancing of binding activity of antibody composition to fcy receptor iiia |
WO2005056606A2 (en) | 2003-12-03 | 2005-06-23 | Xencor, Inc | Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor |
FI115134B (fi) | 2002-06-28 | 2005-03-15 | Liekki Oy | Menetelmä seostetun lasimateriaalin valmistamiseksi |
WO2004004798A2 (en) | 2002-07-03 | 2004-01-15 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Central airway administration for systemic delivery of therapeutics |
JP2006500009A (ja) * | 2002-07-09 | 2006-01-05 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 腫瘍の診断と治療のための組成物と方法 |
CA2495251C (en) * | 2002-08-14 | 2018-03-06 | Macrogenics, Inc. | Fc.gamma.riib-specific antibodies and methods of use thereof |
WO2004022717A2 (en) | 2002-09-05 | 2004-03-18 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Minimally immunogenic variants of humanized col-1 antibody against carcinoembryonic antigen |
CA2499075A1 (en) | 2002-09-16 | 2004-03-25 | Elusys Therapeutics, Inc. | Production of bispecific molecules using polyethylene glycol linkers |
US20060235208A1 (en) * | 2002-09-27 | 2006-10-19 | Xencor, Inc. | Fc variants with optimized properties |
ES2562177T3 (es) * | 2002-09-27 | 2016-03-02 | Xencor Inc. | Variantes de Fc optimizadas y métodos para su generación |
CA2502904C (en) | 2002-10-15 | 2013-05-28 | Protein Design Labs, Inc. | Alteration of fcrn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
US7217797B2 (en) | 2002-10-15 | 2007-05-15 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
US7361740B2 (en) * | 2002-10-15 | 2008-04-22 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
US7365168B2 (en) | 2002-10-15 | 2008-04-29 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
DE10254063A1 (de) | 2002-11-19 | 2004-06-03 | InnoTec Ges. zur Entwicklung innovativer Technologien Uwe Emig, Prof. Reinhold Geilsdörfer, Markus Gramlich GbR | Alpinski |
EP1944320A1 (en) | 2002-12-16 | 2008-07-16 | Genentech, Inc. | Immunoglobulin variants and uses thereof |
WO2004063963A2 (en) | 2003-01-08 | 2004-07-29 | Xencor, Inc. | Novel proteins with altered immunogenicity |
US7960512B2 (en) * | 2003-01-09 | 2011-06-14 | Macrogenics, Inc. | Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same |
AU2004204494B2 (en) * | 2003-01-09 | 2011-09-29 | Macrogenics, Inc. | Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same |
US8388955B2 (en) * | 2003-03-03 | 2013-03-05 | Xencor, Inc. | Fc variants |
US8084582B2 (en) | 2003-03-03 | 2011-12-27 | Xencor, Inc. | Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants |
US7185902B1 (en) | 2003-03-14 | 2007-03-06 | Altair Engineering, Inc. | Strut suspension with pivoting rocker arm |
TWI353991B (en) | 2003-05-06 | 2011-12-11 | Syntonix Pharmaceuticals Inc | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
AR044388A1 (es) | 2003-05-20 | 2005-09-07 | Applied Molecular Evolution | Moleculas de union a cd20 |
AU2004257142A1 (en) | 2003-05-30 | 2005-01-27 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Antibodies and fusion proteins that include engineered constant regions |
WO2004110472A2 (en) | 2003-06-12 | 2004-12-23 | Eli Lilly And Company | Fusion proteins |
CA2529945A1 (en) | 2003-06-27 | 2005-01-06 | Biogen Idec Ma Inc. | Use of hydrophobic-interaction-chromatography or hinge-region modifications for the production of homogeneous antibody-solutions |
EP1644416A4 (en) * | 2003-06-30 | 2007-08-29 | Centocor Inc | ANTI-TARGET AND GENETICALLY MODIFIED IMMUNOGLOBULIN-DERIVED PROTEINS, COMPOSITIONS, METHODS AND USES |
KR101299599B1 (ko) * | 2003-07-24 | 2013-08-23 | 위니베르시따 데글리 스뚜디 디 뻬루지아 | Nk 세포 강화 화합물을 사용하여 치료용 항체의 효율을 높이는 방법 및 조성물 |
WO2005011376A2 (en) | 2003-07-26 | 2005-02-10 | Biogen Idec Ma Inc | Altered antibodies having improved antigen-binding affinity |
US20080050357A1 (en) | 2003-08-01 | 2008-02-28 | Claes Gustafsson | Systems and Methods for Antibody Engineering |
CA2536408A1 (en) | 2003-08-22 | 2005-03-03 | Biogen Idec Ma Inc. | Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same |
CA2534959A1 (en) | 2003-09-05 | 2005-03-31 | Genentech, Inc. | Antibodies with altered effector functions |
WO2005023866A2 (en) | 2003-09-10 | 2005-03-17 | Baxter International Inc. | Peptides that inhibit complement activation |
US8101720B2 (en) | 2004-10-21 | 2012-01-24 | Xencor, Inc. | Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions |
WO2005037867A1 (en) | 2003-10-15 | 2005-04-28 | Pdl Biopharma, Inc. | ALTERATION OF Fc-FUSION PROTEIN SERUM HALF-LIVES BY MUTAGENESIS OF POSITIONS 250, 314 AND/OR 428 OF THE HEAVY CHAIN CONSTANT REGION OF IG |
GB0324368D0 (en) | 2003-10-17 | 2003-11-19 | Univ Cambridge Tech | Polypeptides including modified constant regions |
WO2005063815A2 (en) | 2003-11-12 | 2005-07-14 | Biogen Idec Ma Inc. | Fcϝ receptor-binding polypeptide variants and methods related thereto |
JP2008504002A (ja) | 2003-11-12 | 2008-02-14 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | 新生児Fcレセプター(FcRn)結合ポリペプチド改変体、ダイマーFc結合タンパク質、およびそれらに関連する方法 |
JP4762156B2 (ja) | 2004-01-12 | 2011-08-31 | アプライド モレキュラー エボリューション,インコーポレイテッド | Fc領域変異体 |
WO2005123780A2 (en) | 2004-04-09 | 2005-12-29 | Protein Design Labs, Inc. | Alteration of fcrn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
KR100545720B1 (ko) | 2004-05-31 | 2006-01-24 | 메덱스젠 주식회사 | 당화된 면역글로불린 및 이를 포함하는 면역접합체 |
EP2471813B1 (en) * | 2004-07-15 | 2014-12-31 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
AU2005267020B2 (en) | 2004-07-23 | 2011-08-11 | Genentech, Inc. | Crystallization of antibodies or fragments thereof |
ES2426817T3 (es) | 2004-08-04 | 2013-10-25 | Mentrik Biotech, Llc | Regiones Fc variantes |
US8367805B2 (en) | 2004-11-12 | 2013-02-05 | Xencor, Inc. | Fc variants with altered binding to FcRn |
US8546543B2 (en) | 2004-11-12 | 2013-10-01 | Xencor, Inc. | Fc variants that extend antibody half-life |
DK2573114T3 (en) | 2005-08-10 | 2016-07-04 | Macrogenics Inc | The identification and production of antibodies with variant Fc regions, and methods of using same |
DK1931709T3 (en) * | 2005-10-03 | 2017-03-13 | Xencor Inc | FC VARIETIES WITH OPTIMIZED FC RECEPTOR BINDING PROPERTIES |
US7973136B2 (en) | 2005-10-06 | 2011-07-05 | Xencor, Inc. | Optimized anti-CD30 antibodies |
US20070087005A1 (en) | 2005-10-14 | 2007-04-19 | Lazar Gregory A | Anti-glypican-3 antibody |
WO2007092772A2 (en) * | 2006-02-03 | 2007-08-16 | Medimmune, Inc. | Protein formulations |
EP2407548A1 (en) | 2006-10-16 | 2012-01-18 | MedImmune, LLC | Molecules with reduced half-lives, compositions and uses thereof |
GB0620934D0 (en) | 2006-10-20 | 2006-11-29 | Cambridge Antibody Tech | Protein variants |
KR101383476B1 (ko) | 2007-11-01 | 2014-04-11 | 아스테라스 세이야쿠 가부시키가이샤 | 면역억제 폴리펩티드 및 핵산 |
JP5220435B2 (ja) | 2008-02-20 | 2013-06-26 | オリンパスメディカルシステムズ株式会社 | 洗浄チューブ、及び内視鏡洗浄消毒装置 |
US8037602B2 (en) | 2009-03-27 | 2011-10-18 | Eneron, Inc. | Methods of making energy efficient cookware |
DK3029066T3 (da) | 2010-07-29 | 2019-05-20 | Xencor Inc | Antistoffer med modificerede isoelektriske punkter |
MX336740B (es) | 2011-03-29 | 2016-01-29 | Roche Glycart Ag | Variantes de fragmento cristalizable (fc) de los anticuerpos. |
US10672280B1 (en) | 2011-09-29 | 2020-06-02 | Rockwell Collins, Inc. | Bimodal user interface system, device, and method for streamlining a user's interface with an aircraft display unit |
US9642574B2 (en) | 2014-10-17 | 2017-05-09 | Guardhat, Inc. | Biometric sensors assembly for a hard hat |
US9710002B2 (en) | 2015-05-27 | 2017-07-18 | Texas Instruments Incorporated | Dynamic biasing circuits for low drop out (LDO) regulators |
JP6824666B2 (ja) | 2016-08-31 | 2021-02-03 | 株式会社ジャパンディスプレイ | 表示装置 |
US11392902B2 (en) | 2017-06-06 | 2022-07-19 | United Parcel Service Of America, Inc. | Systems, methods, apparatuses and computer program products for providing notification of items for pickup and delivery |
-
2003
- 2003-09-26 US US10/672,280 patent/US20040132101A1/en not_active Abandoned
-
2004
- 2004-03-26 CN CN201510039848.XA patent/CN104788565A/zh active Pending
- 2004-03-26 CA CA2524399A patent/CA2524399C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-26 KR KR1020057020865A patent/KR100890586B1/ko active IP Right Review Request
- 2004-03-26 ES ES11158851.3T patent/ES2638568T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-26 PL PL11158851T patent/PL2368911T3/pl unknown
- 2004-03-26 AU AU2004236160A patent/AU2004236160B2/en not_active Expired
- 2004-03-26 CN CN201210057793.1A patent/CN102633880B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-26 BR BRPI0410031-0A patent/BRPI0410031A/pt not_active Application Discontinuation
- 2004-03-26 EP EP16180152.7A patent/EP3101030B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-26 KR KR1020077025218A patent/KR100956110B1/ko active IP Right Review Request
- 2004-03-26 HU HUE11158851A patent/HUE034268T2/en unknown
- 2004-03-26 CN CN2004800189855A patent/CN1867583B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-26 EP EP04760504A patent/EP1620467A2/en not_active Withdrawn
- 2004-03-26 SI SI200432404T patent/SI2368911T1/sl unknown
- 2004-03-26 CA CA2916863A patent/CA2916863C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-26 WO PCT/US2004/009298 patent/WO2004099249A2/en active Application Filing
- 2004-03-26 EP EP11158851.3A patent/EP2368911B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-26 JP JP2006509342A patent/JP4578467B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-26 DK DK11158851.3T patent/DK2368911T3/en active
- 2004-03-26 BR BR122018016045A patent/BR122018016045B8/pt active IP Right Grant
- 2004-03-26 EP EP20208507.2A patent/EP3838920A1/en not_active Withdrawn
-
2005
- 2005-11-01 IL IL171723A patent/IL171723A/en active IP Right Grant
-
2007
- 2007-10-31 US US11/981,822 patent/US8093359B2/en active Active
- 2007-10-31 US US11/981,596 patent/US20090081208A1/en not_active Abandoned
- 2007-10-31 US US11/981,823 patent/US8039592B2/en active Active
-
2008
- 2008-12-18 AU AU2008261120A patent/AU2008261120B2/en not_active Expired
-
2012
- 2012-01-09 US US13/346,604 patent/US8383109B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2013
- 2013-02-21 US US13/773,485 patent/US9353187B2/en active Active
- 2013-02-21 US US13/773,473 patent/US8858937B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2013-05-20 US US13/898,386 patent/US8809503B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2014
- 2014-11-21 US US14/550,561 patent/US9193798B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2016
- 2016-05-06 US US15/149,047 patent/US10183999B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2016-05-27 US US15/167,832 patent/US10184000B2/en active Active
- 2016-05-27 US US15/167,822 patent/US20160347837A1/en not_active Abandoned
- 2016-09-01 IL IL247597A patent/IL247597A0/en active IP Right Grant
-
2019
- 2019-03-21 IL IL265538A patent/IL265538B/en active IP Right Grant
Cited By (39)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104961830A (zh) * | 2008-09-17 | 2015-10-07 | Xencor公司 | 用于治疗ige介导的疾患的新组合物和方法 |
CN104961830B (zh) * | 2008-09-17 | 2018-09-07 | Xencor公司 | 用于治疗ige介导的疾患的新组合物和方法 |
US10858686B2 (en) | 2010-05-27 | 2020-12-08 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Method for preparing antibodies having improved properties |
CN103080130B (zh) * | 2010-05-27 | 2016-08-17 | 默沙东公司 | 制备具有改进特性的抗体的方法 |
CN103080130A (zh) * | 2010-05-27 | 2013-05-01 | 默沙东公司 | 制备具有改进特性的抗体的方法 |
US11959118B2 (en) | 2010-05-27 | 2024-04-16 | Merck Sharp & Dohme Llc | Fc-containing polypeptides having improved properties and comprising mutations at positions 243 and 264 of the Fc-region |
CN105949313B (zh) * | 2011-03-29 | 2021-06-15 | 罗切格利卡特公司 | 抗体Fc变体 |
CN105949313A (zh) * | 2011-03-29 | 2016-09-21 | 罗切格利卡特公司 | 抗体Fc变体 |
CN113980952A (zh) * | 2011-03-30 | 2022-01-28 | 中外制药株式会社 | 改变抗原结合分子的血浆中滞留性和免疫原性的方法 |
CN104220093A (zh) * | 2011-07-06 | 2014-12-17 | 根马布私人有限公司 | 抗体变体及其用途 |
US11186638B2 (en) | 2011-09-12 | 2021-11-30 | Genzyme Corporation | Anti-αβTCR antibody |
CN113527469A (zh) * | 2012-02-09 | 2021-10-22 | 中外制药株式会社 | 抗体的Fc区变异体 |
CN104204204A (zh) * | 2012-02-09 | 2014-12-10 | 中外制药株式会社 | 抗体的Fc区变异体 |
CN107540742B (zh) * | 2012-05-11 | 2021-06-29 | 米迪缪尼有限公司 | Ctla-4变体 |
CN107540742A (zh) * | 2012-05-11 | 2018-01-05 | 米迪缪尼有限公司 | Ctla‑4变体 |
CN104797601A (zh) * | 2012-09-12 | 2015-07-22 | 建新公司 | 具有改变的糖基化和降低的效应物功能的包含fc的多肽 |
CN104797601B (zh) * | 2012-09-12 | 2019-08-30 | 建新公司 | 具有改变的糖基化和降低的效应物功能的包含fc的多肽 |
CN104918955B (zh) * | 2012-10-30 | 2018-10-09 | 苏伯利莫尔公司 | Fcγ受体IIB变体 |
CN104918955A (zh) * | 2012-10-30 | 2015-09-16 | 苏伯利莫尔公司 | Fcγ受体IIB变体 |
US11807690B2 (en) | 2013-03-11 | 2023-11-07 | Genzyme Corporation | Hyperglycosylated binding polypeptides |
CN105358570A (zh) * | 2013-03-14 | 2016-02-24 | 美国安进公司 | 含有非糖基化Fc的多肽 |
CN105121470A (zh) * | 2013-03-15 | 2015-12-02 | 艾伯维生物技术有限公司 | 抗cd25抗体及其用途 |
CN105143257B (zh) * | 2013-03-15 | 2020-10-27 | 艾伯维生物医疗股份有限公司 | Fc变体 |
CN105377892A (zh) * | 2013-03-15 | 2016-03-02 | 艾伯维生物技术有限公司 | 抗cd25抗体及其用途 |
CN105143257A (zh) * | 2013-03-15 | 2015-12-09 | 艾伯维生物医疗股份有限公司 | Fc变体 |
US11697690B2 (en) | 2014-03-19 | 2023-07-11 | Genzyme Corporation | Site-specific glycoengineering of targeting moieties |
US10906952B2 (en) | 2015-03-06 | 2021-02-02 | Deutsches Krebsforschungszentrum | Fusion proteins comprising a binding protein and an interleukin-15 polypeptide having a reduced affinity for IL15Ra and therapeutic uses thereof |
CN107636015A (zh) * | 2015-03-06 | 2018-01-26 | 德国癌症研究中心 | 包含结合蛋白和对IL‑15Rα具有降低亲和力的白介素‑15多肽的融合蛋白及其治疗用途 |
CN107207608B (zh) * | 2015-10-30 | 2021-05-11 | 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 | 双特异性抗体、其制备方法和用途 |
CN107207608A (zh) * | 2015-10-30 | 2017-09-26 | 江苏众红生物工程创药研究院有限公司 | 双特异性抗体、其制备方法和用途 |
CN110546162A (zh) * | 2017-03-28 | 2019-12-06 | 礼进生物医药控股有限公司 | 用于增强肿瘤微环境中免疫应答的治疗剂和方法 |
CN106831996B (zh) * | 2017-03-31 | 2020-05-19 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 具有cd3e和/或her2靶向功能的双特异性抗体及其用途 |
CN106831996A (zh) * | 2017-03-31 | 2017-06-13 | 北京智仁美博生物科技有限公司 | 新型双特异性抗体及其用途 |
CN109321549A (zh) * | 2018-09-18 | 2019-02-12 | 天津科技大学 | 一种比酶活提高的肝素酶i的定向改造酶及分子改造方法和表达工程菌 |
CN109321549B (zh) * | 2018-09-18 | 2021-09-17 | 天津科技大学 | 一种比酶活提高的肝素酶i的定向改造酶及分子改造方法和表达工程菌 |
WO2021110110A1 (zh) * | 2019-12-03 | 2021-06-10 | 上海交通大学医学院 | FcγRIIB亲和力增强的抗体Fc区 |
EP4071167A4 (en) * | 2019-12-03 | 2024-03-06 | Shanghai Jiao Tong Univ School Of Medicine | FC REGION OF ANTIBODIES WITH ENHANCED AFFINITY TO FC?RIIB |
CN110964119A (zh) * | 2019-12-05 | 2020-04-07 | 沣潮医药科技(上海)有限公司 | 抗疟二聚体免疫粘附素、药物组合物和用途 |
WO2023109928A1 (zh) * | 2021-12-16 | 2023-06-22 | 上海宝济药业有限公司 | 抗免疫球蛋白降解酶酶切的Fc变体 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1705491B (zh) | 优化的Fc变体及其产生方法 | |
CN102633880B (zh) | 优化的Fc变体及其产生方法 | |
US8093357B2 (en) | Optimized Fc variants and methods for their generation | |
JP5226613B2 (ja) | 最適化Fc変異体およびそれらの生成方法 | |
US7317091B2 (en) | Optimized Fc variants | |
US9714282B2 (en) | Optimized Fc variants and methods for their generation | |
US20140370021A1 (en) | OPTIMIZED Fc VARIANTS AND METHODS FOR THEIR GENERATION |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CX01 | Expiry of patent term |
Granted publication date: 20120523 |